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2025 年上海学业水平等级考试第三次模拟卷
生物
(考试时间:60min 满分:100 分)
考生注意:
1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息
2.请将答案正确填写在答题卡上
一、羊乳asl-酪蛋白单克隆抗体检测(14 分)
羊乳因其营养成分最接近人乳,且不含牛乳中的某些可致过敏的异性蛋白质而受到消费者的青睐,
但市场上存在着用牛乳冒充羊乳欺骗消费者的现象。对此,研究人员开发制备了羊乳asl-酪蛋白单克隆
抗体检测试剂盒。下图为制备asl-酪蛋白单克隆抗体的示意图,1~6 代表相关过程,a~e 代表相关细
胞。
【分析】分析题图,1 代表用asl-酪蛋白抗原对小鼠进行免疫,2 代表细胞融合,3 指经过克隆化培养和
专一抗体检测,筛选特定的杂交瘤细胞,4 代表体外培养杂交瘤细胞,5 代表体内培养杂交瘤细胞,6
代表对抗体进行提取和检测。a 是小鼠的B 淋巴细胞,b 是小鼠的骨髓瘤细胞,c 是细胞融合后的杂交
细胞,d 为杂交瘤细胞,e 为产生asl-酪蛋白抗体的杂交瘤细胞。
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1.过程1 是指将 (填“asl-酪蛋白抗原”或“asl-酪蛋白抗体”)注入小鼠体内,一段时间后,
取小鼠的脾脏组织剪碎后用 酶处理使其分散成单个细胞,以获得相应的细胞﹔图中细胞b
一般选用 细胞。
【答案】asl-酪蛋白抗原 胰蛋白(或胶原蛋白) 骨髓瘤
【分析】要制备as1-酪蛋白单克隆抗体,因而过程1 要将asl-酪蛋白抗原注入小鼠体内;将小鼠的脾脏
组织分散成单个细胞,可以用胰蛋白酶、胶原蛋白酶进行处理;图中细胞b 要具有无限增殖的能力,
因而可以用小鼠的骨髓瘤细胞。
2.对于图中的细胞d,需用HAT 选择培养基筛选出 ;过程3 再对其进行 ,经多
次筛选,就可获得足够数量的细胞e,该种细胞的特点是 。
【答案】杂交瘤细胞 克隆化培养和抗体检测 既能大量增殖,又能产生asl-酪蛋白抗体
【分析】对于图中的细胞d,需要用特定的选择培养基(HAT 选择培养基)筛选,在该培养基上,未融
合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长;过程3 再对上
述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选 ,就可获得足够数量的能分泌所
需抗体的细胞e,该种细胞的特点是既能大量增殖,又能产生asl-酪蛋白抗体。
在细胞内DNA 合成一般有两条途径。主要途径(途径一)是由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成
DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径,另一辅助途径(途径二)是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情
况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA 合成没有此辅助途径。
3.根据这样的原理,向经诱导后的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤 (填
“能”或“不能”)筛选杂交瘤细胞,原因是 。
【答案】能 杂交瘤细胞能通过途径一和途径二合成DNA,而骨髓瘤细胞只能通过途径一合成
DNA,而B 淋巴细胞不能无限增殖,所以加入氨基嘌呤阻断途径一后,只有杂交瘤细胞能利用途径二
进行增殖
【分析】由题干信息知,B 淋巴细胞的DNA 合成途径有两条(途径一和途径二),骨髓瘤细胞中的DNA
合成途径只有一条(途径一),而B 淋巴细胞不能无限增殖。向经诱导后的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合
培养液中添加氨基嘌呤,杂交瘤细胞中的DNA 合成途径一被阻断,可通过辅助途径二合成DNA,故
向经诱导后的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤能筛选杂交瘤细胞。
二、骨关节炎(20 分)
骨关节炎是因软骨细胞中物质的合成代谢缺乏能量和还原剂导致关节软骨损伤退变。我国研究团
队将菠菜类囊体投送至小鼠损伤退变的软骨细胞内,使关节健康状况得到改善,研究过程如图1 所示。
2
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【分析】题意分析,类囊体在软骨细胞中发挥的作用相当于光反应发挥的作用,其可为软骨细胞提供
能量(ATP),同时还产生NADPH。结合图2 可知,经IL-1β 处理过的小鼠软骨细胞内线粒体形态和
功能部分退化,而年龄、骨关节炎症和是否内置了菠菜类囊体属于无关变量,应保持相同且适宜。
4.(多选)下列哪些特点使类囊体成为光合作用光反应的理想场所_____。
A.捕光色素
B.ATP 合酶
C.内膜有嵴
D.多种蛋白
【答案】ABD
【分析】A、捕光色素是类囊体薄膜上光合色素的特征,因而类囊体薄膜能成为光合作用光反应的理想
场所,A 正确;
B、ATP 合酶能催化ATP 的合成过程,光反应过程中有ATP 的合成,因此类囊体膜上有ATP 合酶是该
结构成为光合作用光反应的理想场所的原因之一,B 正确;
C、内膜向内凹陷成为嵴是线粒体的特点,不是类囊体的特点,C 错误;
D、蛋白质是生命活动的主要承担者,类囊体薄膜上有多种蛋白是光反应顺利进行的原因之一,D 正确。
故选ABD。
5.小鼠软骨细胞内置的类囊体在光刺激下可为软骨细胞提供ATP,同时还产生 。
【答案】NADPH、O2
【分析】小鼠软骨细胞内置的类囊体在光的作用下可为软骨细胞提供ATP,说明其上发生了光合作用
的光反应过程,该过程中同时还产生的物质有NADPH 和O2。
6.(多选)在内置类囊体的软骨细胞内,能提供ATP 的生理过程包括_____。
A.碳反应
B.电子传递
C.糖酵解
D.三羧酸循环
【答案】BCD
【分析】在内置类囊体的软骨细胞内,能提供ATP 的生理过程是通过类囊体中发生的电子传递、糖酵
解和 三羧酸循环循环过程,即BCD 正确。
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故选BCD。
7.研究人员创新性地采用软骨细胞质膜包裹NTU,其目的是 。(编号选填)
①防止溶酶体降解 ②便于胞吞进细胞
③防止巨噬细胞吞噬 ④排除膜组成差异的影响
【答案】①③④
【分析】采用软骨细胞膜包裹NTU 可防止溶酶体降解、防止巨噬细胞吞噬、排除膜类囊体膜和细胞膜
组成差异的影响便于融合,即①③④正确。
故选①③④。
科研人员将CM-NTU 递送到小鼠损伤退变的软骨细胞后,研究了光照对其的影响,结果如图2 所
示。其中,对照组为正常小鼠,IL-1β 组为用白介素-1β 处理过的小鼠(处理后的小鼠软骨细胞线粒体
形态和功能退化)。
8.实验组小鼠与经IL-1β 处理过的小鼠之间,区别在于_____。
A.年龄是否存在差异
B.是否表现为骨关节炎症
C.软骨细胞内线粒体是否部分退化
D.软骨细胞是否内置了菠菜类囊体
【答案】D
【分析】题意显示,本实验的目的是将CM-NTU 递送到小鼠损伤退变的软骨细胞后,研究了光照对其
的影响,因此实验的自变量为是否在损伤退变的软骨细胞中植入菠菜类囊体,经IL-1β 处理过的小鼠软
骨细胞内线粒体形态和功能部分退化,且年龄、骨关节炎症均属于无关变量,应保持相同且适宜,因
此,实验组和与经IL-1β 处理过的小鼠之间,区别在于软骨细胞是否内置了菠菜类囊体,D 正确。
故选D。
9.(多选)为进一步提高CM-NTU 在骨关节中效率,还可选择_____。
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A.延长光照时间
B.提高环境温度
C.改善光质
D.增加二氧化碳浓度
【答案】AC
【分析】该小鼠中类囊体可进行光反应,影响光反应的因素除了光照强度外,还有光照时间、光质,
温度虽然通过影响酶活性影响光反应,但人体温度是相对稳定的,无法进行调整,且二氧化碳浓度直
接影响暗反应,所以还可选择延长光照时间、改善光质提高CM-NTU 在骨关节中效率,AC 正确。
故选AC。
研究发现过高光强会造成类囊体表面与光合作用有关的关键蛋白D1 的降解,导致相关反应下降。
10.(多选)为保证治疗效果,科研人员选用离体叶绿体,研究外源物质对D1 蛋白的影响,结果见图3。
据图和所学知识判断,下列合理的是_____。
A.叶绿体可自主表达部分基因
B.使用水杨酸前需确定浓度范围
C.链霉素可抑制ATP 和NADPH 的合成
D.Ca2+与水杨酸对提高光合速率的效应是拮抗的
【答案】ABC
【分析】A、叶绿体属于半自主细胞器,可自主表达部分基因,A 正确;
B、水杨酸属于植物激素,为了提高作用效果,使用水杨酸前需确定浓度范围,B 正确;
C、链霉素可抑制PsbA 基因的表达,从而抑制D1 蛋白的合成,该蛋白含量下降,导致反应能力下降,
所以其可能抑制了ATP 和NADPH 的合成,C 正确;
D、Ca2+与水杨酸对提高光合速率的效应均表现为促进,是协同的,D 错误。
故选ABC。
11.在将此技术应用于临床之前,还应关注的问题包括 。(编号选填)
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①NTU 的使用寿命
②人和鼠生理特征存在差异
③光反应和碳反应的高效连结
④CM-NTU 对软骨细胞物质代谢的副作用
【答案】①②④
【分析】①由图1 可知,该实验中发挥作用的主要是NTU,所以应关注其使用寿命,①正确;
②人和鼠之间是有差异的,所以应考虑人和鼠生理特征存在差异,②正确;
③该实验不涉及碳反应,只涉及光反应,③错误;
④CM-NTU 对软骨细胞物质代谢可能产生副作用,应加以考虑,④正确。
故选①②④。
三、治理公园的生态环境(16 分)
上海市虹口区精武体育公园,昔日以“曲阳公园”之名著称。在20 世纪80 年代,曲阳公园因其
显著的人流量、常年开放的钓鱼项目、中心湖与周边湖泊的隔离状态以及湖畔密集的落叶植物等特点,
一度遭遇了严重的中心湖水体富营养化问题。这一问题源于水中N、P 含量过高,最终导致蓝藻大量
滋生,严重影响了公园的生态系统。近年来,通过构建图1 所示的“沉水生态系统”,中心湖的生态
系统逐渐恢复。
【分析】氮、磷等营养物质大量排入湖泊,会造成水体富营养化,严重时可引起蓝藻迅速繁殖,发生
水华。
12.据图1 及相关信息推测,中心湖生态系统稳态被破坏的进程依次是 。(编号排序)
① 中心湖的生态系统中食物网被严重破坏
② 水体富营养化导致蓝藻爆发,消耗水体溶解氧
③ 残饵、垃圾、落叶等沉积水底,释放氮、磷营养物质
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【答案】③②①
【分析】根据题意可知,在20 世纪80 年代,曲阳公园因其显著的人流量、常年开放的钓鱼项目、中
心湖与周边湖泊的隔离状态以及湖畔密集的落叶植物等特点,一度遭遇了严重的中心湖水体富营养化
问题。说明垂钓中的残饵、人类活动的垃圾、植被的落叶等沉积水底,在分解者的作用下释放氮、磷
营养物质,造成水体中氮、磷营养物质大量增加,导致蓝藻爆发,水体中的动物和微生物因食物来源
增加也迅速增加,于是大量消耗水体溶解氧,导致鱼虾等因缺氧而大量死亡,造成生态系统中食物网
被严重破坏,因此中心湖生态系统稳态被破坏的进程依次是③②①。
13.1985~1995 年间中心湖水污染严重,生态系统随之发生了很大变化,但还能维持一定的功能,这反映了
该生态系统具有______。
A.较强的抵抗力稳定性
B.较弱的抵抗力稳定性
C.较强的恢复力稳定性
D.较弱的恢复力稳定性
【答案】A
【分析】1985~1995 年间中心湖水污染严重,生态系统随之发生了很大变化,但还能维持一定的功能,
说明该生态系统具有较强的能抵抗干扰,维持原状的抵抗力稳定性,A 正确,BCD 错误。
14.(多选)据图1 及已学知识推测,建构“沉水生态系统”能有效改善中心湖水体富营养化现象的原因包
括______。
A.拦污帘拦截水生动物的尸体避免污染物排放
B.水生植物吸收水体中的N、P 等营养物质用于生长
C.吸附在生物栅栏上的固氮菌吸收并固定水体中的N
D.水生动物通过食物网降低水体中的N、P 等营养物质
【答案】ABD
【分析】A、拦污帘拦截水生动物的尸体避免污染物排放,可减少水体中有机物,从而减少N 和P 的
释放,能有效改善中心湖水体富营养化现象,A 正确;
B、水生植物吸收水体中的N、P 等营养物质用于生长,可减少水体中的N、P 物质,B 正确;
C、据图可知,固氮菌分布在拦污帘的右侧,而生物栅栏上主要吸附的是分解有机物的分解者,C 错
误;
D、水生动物通过食物网直接或间接捕食藻类,可使藻类吸收的N 和P 进入动物体内,加速了藻类对
N 和P 的吸收,因此也可降低水体中的N、P 等营养物质,D 正确。
故选ABD。
研究人员测定了常见挺水植物“菰”的部分生理指标,如图2 所示。
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15. (多选)据图2 推测,在中心湖深水区域种植“菰”的优点包括______。
A.吸收水体中更多的营养物质
B.为水生微生物附着提供空间
C.避免因过度繁殖成为优势种
D.为好氧细菌分解有机物供氧
【答案】ABCD
【分析】A、挺水植物“菰”在深水区种植时,根系长度大于浅水区,有利于根系吸收水体中N 和
P,A 正确;
B、挺水植物“菰”在深水区种植时,根系长度大于浅水区,可为水生微生物附着提供空间,有利于
水生微生物对N 和P 的利用,B 正确;
C、“菰”在深水区种植时,生长速率比浅水区小,这可避免因过度繁殖成为优势种,从而避免生物
多样性的降低,使生态系统保持较高的抵抗力稳定性,C 正确;
D、挺水植物“菰”能通过光合作用产生氧气,增加水体中溶氧量,可为好氧细菌分解有机物供氧,
D 正确。
故选ABCD。
研究人员利用生态瓶探究水生动植物治理水污染的效果,相关内容如表所示。
生态瓶的成分
沉水植物
30 株伊乐藻(6~10 月生长旺盛、9 月初人工捕捞)
浮叶植物
1 株睡莲(5~9 月生长旺盛、10 月下旬进入休眠期)
水生动物
2 条鲤鱼(6~7 月食量大、8 月后食量下降)
含氨氮量高的污水
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16.(多选)据表及相关信息分析,下列关于水体氨氮去除率的推理合理的是______。
A.6~7 月水生植物生长快,加速营养物质的吸收,氨氮去除率提高
B.6~7 月鲤鱼摆尾强烈,促进水生植物吸收营养物质,氨氮去除率提高
C.8 月鲤鱼活动力差,睡莲与伊乐藻种间竞争激烈,氨氮去除率下降
D.9 月人工捕捞鲤鱼,导致对睡莲和伊乐藻的捕食率降低,氨氮去除率提高
【答案】ABC
【分析】A、根据题意,6~7 月伊乐藻和睡莲都处于生长旺盛期,由于植物生长快,加速营养物质的
吸收,氨氮去除率提高,A 正确;
B、6~7 月鲤鱼食量大,捕食过程中摆尾强烈,促进水生植物吸收营养物质,氨氮去除率提高,B 正确;
C、8 月鲤鱼活动力差,水中溶氧量降低,睡莲与伊乐藻通过主动运输吸收氨氮等无机盐减少,且由于
前期睡莲与伊乐藻快速繁殖,导致二者种间竞争激烈,处于竞争劣势的生长受到抑制,因此水体中氨
氮去除率下降,C 正确;
D、9 月人工捕捞鲤鱼,导致对睡莲和伊乐藻的捕食率降低,睡莲和伊乐藻生长减慢,会导致氨氮去
除率下降,而图中9 月氨氮去除率提高,是由于9 月初人工捕捞沉水植物,带走了水体中的氨氮,D
错误。
故选ABC。
17.曲阳公园中心湖“沉水生态系统”利用食物链(蓝藻→浮游动物→滤食性鱼类→肉食性鱼类)来净化水
质。据题干信息及已学知识分析,投放肉食性鱼类净化水质的优势及风险
。
【答案】优势:由于能量流动逐级递减,因此投放肉食性鱼类可需要更多的蓝藻为该食物链提供食物,
从而促进蓝藻大量增殖,吸收水体中更多N 和P。
风险:由于肉食性鱼类个体大,需要的食物资源多,因此投放的数量一旦控制不好,会导致生物多样
性降低
【分析】投放肉食性鱼类净化水质存在一定的优势及风险,优势:由于能量流动逐级递减,因此投放
肉食性鱼类可需要更多的蓝藻为该食物链提供食物,从而促进蓝藻大量增殖,吸收水体中更多N 和
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P。
风险:由于肉食性鱼类个体大,需要的食物资源多,因此投放的数量一旦控制不好,会导致生物多样
性降低
四、人乳头瘤病毒 (18 分)
人乳头瘤病毒(HPV)是一类DNA 病毒,持续感染高危型HPV 可能引发宫颈癌。感染HPV 后,
人体内发生的部分生理过程如图所示,其中,I~Ⅳ表示免疫细胞;L1 为HPV 病毒表面抗原,E6 和
E7 皆为HPV 病毒内部蛋白:p53 蛋白和pRb 蛋白皆为抑癌蛋白。
注射HPV 疫苗是预防宫颈癌的有效手段。制备预防型HPV 疫苗的部分流程如图2 所示,其中,
I~V 表示过程;kb 表示1000 碱基对;AbA,为真菌类抗生素(AbA)的抗性基因;α-半乳糖苷酶基因
表达的酶蛋白可将一种无色化合物(X-gal)水解成蓝色产物;pMD 上仅在α-半乳糖苷酶基因的两端
存在BamHI 和Xhol 的酶切位点。
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【分析】分析图1,HPV 病毒入侵机体后,可侵入宫颈上皮细胞与树突状细胞,若被树突状细胞摄取,
树突状细胞会把抗原信息呈递给辅助性T 细胞,辅助性T 细胞进而激活细胞毒性T 细胞(Ⅱ)与B 细
胞(Ⅲ),进而激发细胞免疫与体液免疫。细胞Ⅳ为浆细胞。
18.(多选)人体感染HPV 后,图1 中细胞Ⅱ的功能是______。
A.分泌免疫活性物质 B.清除被病毒入侵的细胞I
C.清除被病毒入侵的上皮细胞 D.识别靶细胞抗原肽-MHC 分子复合体
【答案】ABCD
【分析】图1 中细胞Ⅱ为被激活的细胞毒性T 细胞,在发挥细胞免疫作用的过程中,可通过特异性识
别靶细胞抗原肽-MHC 分子复合体,识别并亲密接触被病毒侵染的细胞Ⅰ和被病毒侵染的宫颈上皮细
胞,通过释放穿孔素、颗粒酶等免疫活性物质,诱导靶细胞裂解凋亡,ABCD 符合题意。
故选ABCD
19.(多选)图1 中细胞Ⅲ参与的免疫应答属于______。
A.非特异性免疫 B.特异性免疫 C.体液免疫 D.细胞免疫
【答案】BC
【分析】由图1 可知,细胞Ⅲ增殖分化形成了细胞Ⅳ,细胞Ⅳ能产生抗体,则细胞Ⅳ为浆细胞,细胞
Ⅲ为B 细胞。B 细胞参与的免疫反应属于特异性免疫中的体液免疫,BC 符合题意,AD 不符合题意。
故选BC。
20.(多选)据图1 分析,长期感染高危型HPV 诱发宫颈癌的原因可能是HPV 的______。
A.E7 蛋白降解pRb 蛋白,促进上皮细胞DNA 的复制
B.E7 蛋白与pRb 蛋白结合,促进上皮细胞由G1 期进入S 期
C.E6 蛋白与p53 蛋白结合,抑制上皮细胞DNA 聚合酶的合成
D.E6 蛋白激活p53 蛋白,促进上皮细胞纺锤体相关蛋白的合成
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【答案】BD
【分析】由图1 可知,长期感染高危型HPV 后,通过病毒的E6 蛋白激活p53 蛋白,使p53 蛋白降解,
解除了宫颈上皮细胞周期中S 期进入G2 期的抑制作用,使细胞进行G2 期的代谢活动,合成分裂过程
中必须的蛋白质,比如与纺锤体相关的蛋白质;同时,病毒的E7 蛋白与pRb 蛋白结合,解除了对宫
颈上皮细胞周期中G1 期进入S 期的抑制,促进上皮细胞由G1 期进入S 期,开启DNA 复制过程。BD
符合题意,AC 不符合题意。
故选BD。
21.据图2 判断,基因工程生产预防型HPV 疫苗所需要的工具酶有 。(编号选填)
①BamHI ②Mbol ③Xhol ④DNA 连接酶 ⑤DNA 聚合酶
【答案】①②③④
【分析】由图可知,目的基因左端的限制酶识别序列为5'-GATC-3',可被限制酶MboⅠ识别。右端的
限制酶识别序列为5'-TCGAG-3',可被限制酶XhoⅠ识别。根据题干信息,载体pMD 上仅在α-半乳糖
苷酶基因的两端存在BamHI 和XhoI 的酶切位点,虽然目的基因两端的限制酶种类与载体的种类有差
异,但限制酶MboⅠ与BamHI 可切割出相同的黏性末端,因此可选用MboⅠ与XhoⅠ切割目的基因,用
BamHI 和XhoI 切割载体,得到相同的黏性末端后使用DNA 连接酶连接形成重组DNA 分子,
①②③④正确,⑤错误。
22.据图1、2 推断,基因工程制备预防型HPV 疫苗的目的基因是______。
A.LI 基因
B.E6 基因
C.E7 基因
D.MHC
【答案】A
【分析】据图1 可知,HPV 病毒的表面抗原是L1 蛋白,刺激机体产生特异性免疫反应的蛋白质是
L1,因此制作疫苗的过程中,应用L1 基因作为目的基因,A 正确,BCD 错误。
故选A。
23.图2 中过程Ⅳ所用的选择培养基需在通用液体培养基的基础上添加 。(编号选填) ①琼脂
②生长因子 ③水 ④AbA ⑤X-gal ⑥无机盐
【答案】①④⑤
【分析】在通用液体培养基的基础上,过程Ⅳ需要对工程菌进行筛选和分离,因此需要固体培养基,
应添加凝固剂琼脂;因将目的基因导入受体细胞的成功率并非100%,此步骤之后的酵母菌可能有普
通酵母菌和导入成功的酵母菌。又因基因表达载体的构建成功率并非100%,导入受体细胞的可能为
普通质粒和含有目的基因的重组质粒。综合以上分析,培养的酵母菌具有以下类型:导入不成功的酵
母菌,不具AbA 抗性;导入普通质粒的酵母菌,具有AbA 抗性,且能表达α-半乳糖苷酶蛋白,能使
无色化合物(X-gal)水解成蓝色产物;导入含有目的基因的重组质粒,具有AbA 抗性,不能表达α-
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半乳糖苷酶蛋白,不能使无色化合物(X-gal)水解成蓝色产物。因此未筛选出成功导入含有目的基因
的重组质粒的酵母菌,还需添加AbA 和X-gal。选项中无机盐、水在通用培养基中含有,受体细胞为
酵母菌,在通用培养基的基础上不需要特别添加生长因子,①④⑤正确,②③⑥错误。
故选①④⑤。
24.据图2 判断,将 (蓝色/白色)菌落中的pMD-HPV 分子用过程Ⅱ中的限制性内切核酸酶完全酶切
后,理论上凝胶电泳上出现的条带的长度为 kb。
【答案】白色 1.6 和2.7
【分析】具(6)题分析可知,白色的菌落可能为成功导入基因表达载体的酵母菌,因此应选白色菌
落中的pMD-HPV 分子,用过程Ⅱ中的限制性内切核酸酶完全酶切,用酶MboI 切目的基因和用酶
BamHI 切质粒后获取了相同的黏性末端,用DNA 连接酶连接后的序列不能再被酶BamHI 识别并切割,
但因酶MboI 的识别序列只有四对碱基对,切割位点鸟嘌呤脱氧核苷酸的5'端不限定脱氧核苷酸种类,
因此重组质粒能被酶XhoI 和酶MboI 分别切割一次,一个环状重组质粒被切割为两个链状DNA 片段,
变为原有的目的基因以及酶切后的质粒,目的基因长度为1.6kb,则另一个DNA 片段为2.7kb。
五、转基因表达系统(REDMAP 系统) (21 分)
植物中的光敏蛋白Р 可以感受红光和远红光,在活化状态下可以与核输入蛋白(F)结合形成复合体,
并被转运到细胞核中起作用;在失活状态下则与F 蛋白分离。研究人员利用光敏蛋白的性质设计了转
基因表达系统(REDMAP 系统)。
25.REDMAP 系统中使用了诱导型启动子UAS。当转录激活因子Ga14 蛋白与VP64 蛋白同时作用时,UAS
才能被 酶识别并激活UAS 下游基因的转录,因此研究人员构建P-Ga14 融合基因和
基因以保证目的基因的顺利表达。
【答案】RNA 聚合 F-VP64 融合基因
【分析】启动子是RNA 聚合酶识别和结合的位点,从而驱动转录。因为当转录激活因子Ga14 蛋白与
VP64 蛋白同时作用时,启动子才能驱动转录,因此研究人员构建P-Ga14 融合基因和F-VP64 融合基
因以保证自的基因的顺利表达。
26.图1 为P-Ga14 融合基因构建的示意图。Ga14 基因和P 基因的序列可以通过检索GenBank 等 获
得。PCR 扩增时,引物P2 和P3 不能在同一反应体系中使用,原因是 。使用的引物P1 和P4
还需要在5'端添加 ,以保证融合基因能与表达载体连接成重组表达载体。
【答案】基因数据库 引物2 和引物3 可发生部分碱基互补配对 限制酶的识别序列
【分析】可通过检索基因数据库(如GenBank 等)获得基因序列。由图1 可知,引物2 和引物3 可发
生部分碱基互补配对,会影响扩增,因此PCR 扩增时,引物P2 和P3 不能在同一反应体系中使用。需
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要在引物的5'端添加限制酶的识别序列,使限制酶可以切割,以保证融合基因能与表达载体连接成重
组表达载体。
糖尿病是一种常见的代谢类疾病,主要通过注射胰岛素进行治疗。研究人员利用图2 所示的
REDMAP 系统治疗糖尿病小鼠。
27.当使用 (选填“红光”或“远红光”)照射时,启动子UAS 激活并顺利表达胰岛素基因。这种
治疗方式的优势在于 。
【答案】红光 通过光照定时定点表达胰岛素,减少注射给药带来的不适
【分析】根据图2,当使用红光照射时,Ga14 -VP64 结合到启动子UAS 上,启动子UAS 激活并顺利表
达基因,因此当使用红光照射时,启动子UAS 激活并顺利表达胰岛素基因。这种治疗方式的优势在于
可以通过光照定时定点表达胰岛素,减少注射给药带来的不适,避免了传统注射胰岛素的不便和可能
的副作用。
28.研究人员用腺相关病毒(AAV)作为基因载体将该REDMAP 系统导入糖尿病小鼠体内。使用前需要对
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AAV 中编码病毒蛋白的部分进行 ,以减少感染时机体的 ,使其能在体内长期存在;
同时基因载体上必须保留 ,使外源基因在细胞内能自主复制。
【答案】基因敲除 免疫应答/特异性免疫 复制起点/复制原点
【分析】使用前需要对AAV 中编码病毒蛋白的部分进行基因敲除,这样不会编码出病毒蛋白,可以
减少感染时机体的免疫应答/特异性免疫,使其能在体内长期存在。复制起点/复制原点对于外源基因
在细胞内能否自主复制至关重要,因此基因载体上必须保留复制起点/复制原点,使外源基因在细胞内
能自主复制。
29.为检验REDMAP 系统治疗糖尿病的效果,研究人员使用链脲佐菌素(诱导糖尿病的物质)注射正常小鼠,
观察到小鼠出现 症状后,均分成三组在适宜条件下进行不同的实验处理。实验结果如图3 所
示, A、B、C 三组的处理分别为注射空载病毒AVV 溶液、 、 。实验结果显示,
REDMAP 系统 。
【答案】尿糖 注射携带REDMAP 系统的AVV 溶液并黑暗处理 注射携带REDMAP 系统的
AVV 溶液并定时红光照射 在黑暗下不起作用,在红光照射下激活并稳定表达胰岛素
【分析】链脲佐菌素可诱导小鼠产生糖尿病,因此研究人员使用链脲佐菌素(诱导糖尿病的物质)注
射正常小鼠,观察到小鼠出现尿糖症状。利用REDMAP 系统治疗糖尿病小鼠时,红光照射可激活胰
岛素基因的表达,因此为检验REDMAP 系统治疗糖尿病的效果,A、B、C 三组的处理分别为注射空
载病毒AVV 溶液、注射携带REDMAP 系统的AVV 溶液并黑暗处理、注射携带REDMAP 系统的AVV
溶液并定时红光照射。根据图3 可知,B 组的胰岛素浓度与A 组接近,C 组的胰岛素浓度高于A 组,
因此实验结果显示REDMAP 系统在黑暗下不起作用,在红光照射下激活并稳定表达胰岛素。
六、间歇性禁食(11 分)
为了研究间歇性禁食是否能改善AD 患者的认知水平,研究人员利用AD 模型克隆小鼠开展如图
1(a)所示的间歇性禁食实验,IF 组每隔一天禁食,AL 组自由喂食。野生型小鼠自由喂食作为对照
WT。
在水中放置平台如图1(b),训练小鼠记忆平台位置,隐去平台后观察各组小鼠在水中运动,检
测小鼠的学习和记忆能力。水迷宫实验结果如图2 所示。
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【分析】AD 是一种严重的中枢神经系统退行性疾病,研究表明,AD 患者的神经细胞外β 淀粉样蛋白
(Aβ)沉积,这种物质的沉积会损坏周围神经细胞膜和线粒体膜,导致神经细胞的损伤。病变个体中
Aβ 的沉积使突触小体中线粒体损伤,引起乙酰胆碱(一种神经递质)的合成和释放量减少,兴奋在
神经细胞之间的传递速率减慢,患者表现出记忆障碍。
30.根据图1 分析,下列各组小鼠运动轨迹最有可能是AL 组的是 (编号选填)。
【答案】①
【分析】由图2(a)曲线可以看出,AL 组小鼠运动轨迹距平台的距离最大,即AL 组小鼠的运动轨
迹远离相应平台位置,所以各组小鼠运动轨迹最有可能是AL 组的是①。
31. 据图2 分析,间歇性禁食是否改善了AD 模型小鼠的认知水平?请说明理由
。
【答案】IF 改善了AD 模型小鼠的认知水平。由图2 可知,经过训练后,IF 组AD 模型小鼠与平台距
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离、进入目标区域次数和在平台所在象限停留时长均与野生小鼠没有显著差异,且显著或极显著优于
AL 组的AD 模型小鼠,说明IF 组小鼠的认知水平显著提高
【分析】由图2 可知,经过训练后,IF 组AD 模型小鼠与平台距离、进入目标区域次数和在平台所在
象限停留时长均与野生小鼠没有显著差异,且显著或极显著优于AL 组的AD 模型小鼠,说明IF 组小
鼠的认知水平显著提高,因此间歇性禁食改善了AD 模型小鼠的认知水平。
32.有人认为间歇性禁食对AD 模型小鼠认知水平的影响是因为重构了肠道菌群的组成和代谢,进而影响了
小鼠“ 肠微生物-肠道-脑” 轴的动态关系。请写出大致的实验思路,验证这一观点
。
【答案】分别收集IF 组、WT 组及AL 组小鼠在间歇性禁食前后的粪便样本,进行微生物培养、计数,
鉴定其中微生物种类和数量,将IF 组结果与WT 组、AL 组结果进行比较
【分析】可收集IF 组小鼠在间歇性禁食前后的粪便样本,进行微生物培养、计数或测序,鉴定其中微
生物种类和数量,并与WT 组和AL 组结果进行比较。若实验处理前IF 组肠道菌群组成与AL 组相近,
但处理后与WT 组相近,则说明间歇性禁食通过重构了肠道菌群组成来影响小鼠的认知水平;同样收
集和比较实验处理前后IF 组小鼠肠道内、血浆和脑组织中的氨基酸、脂肪酸等标志性代谢物质与WT
组和AL 组小鼠的差异。将差异较明显的标志性代谢物质注射到普通AD 模型小鼠的脑组织中,观察其
是否能改善了小鼠脑部Aβ 蛋白沉积情况或走迷宫认知水平。若AD 模型小鼠的认知水平或病理指标有
改善,则说明间歇性禁食重构了肠道菌群的代谢,通过关联的代谢产物影响了“肠微生物-肠道-脑”轴
的关系;此外,还可对IF 组小鼠施加大剂量的抗生素除去其肠道微生物,设置为阴性对照,理论上其
间歇性禁食处理后的认知水平、脑病理指标应与AL 组小鼠相近,并未得到改善。
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