夜雨聆风
武汉研锦生物（YanGeneBio）是一家专注于药物靶点发现与小核酸药物（siRNA/ASO )设计、修饰、合成，以及类器官、细胞和动物模型上筛选功能活性小核酸的创新型CRO 技术服务公司，为新药研发、中药现代化及天然产物研究，小核酸药物开发转化提供从靶点发现到机制验证的一站式解决方案。
我们整合ABPP、TPP、Lip-MS等药物钓靶技术，交联质谱、Lip-MS+分子对接鉴定药靶互作位点技术，SPR/MST/BLI/ITC/DSF检测药靶亲和力平台，蛋白芯片、Olink 多因子等高通量筛选检测平台，小核酸药物设计、合成与类器官筛药等核心技术，为客户提供高精度的化合物靶点鉴定、结合位点分析、亲和力验证及功能验证服务。
研锦生物以 “精准药靶发现、加速小核酸药物转化” 为使命，凭借严格的实验设计、高质量的数据输出和快速的项目交付，助力全球科研与药企客户缩短研发周期、提升药物发现成功率。
本技术体系整合限制性蛋白水解质谱（LiP-MS）、AI虚拟筛选与分子互作检测（SPR/MST），构建“靶点筛选-精准验证-机制解析”全流程药物靶标挖掘方案，突破传统药物筛选效率低、靶点验证难、机制不清晰的技术瓶颈。
LiP-MS基于药物结合蛋白后构象稳定性改变的特性，通过限制性蛋白酶水解，对比药物处理组与对照组肽段丰度、水解位点差异，直接捕获细胞内药物作用靶蛋白；AI虚拟筛选依托深度学习算法，深度整合蛋白结构、配体化学相似性数据，快速预测潜在作用靶点，大幅缩小筛选范围；SPR（表面等离子共振）与MST（微量热泳动）技术从生物物理层面，实时定量检测药物与靶蛋白的结合动力学、亲和力，精准验证分子互作特异性，为靶标确认提供硬核数据支撑。
二、标准化实验流程
1.化合物高通量初筛：选取FDA批准药物库、天然产物库化合物，梯度浓度处理疾病细胞系，通过细胞活性检测筛选具有显著抑制作用的候选化合物，锁定研究对象。
2.LiP-MS靶点初筛：提取细胞全蛋白，设置药物处理组与对照组，经限制性蛋白水解、高分辨质谱检测，筛选差异表达蛋白，确定核心候选靶蛋白。
3.AI虚拟靶点预测：通过AI靶点预测算法，模拟药物与蛋白结合潜能，输出排名靠前的潜在靶点，与LiP-MS结果取交集，锁定唯一核心靶标。
4.分子互作定量验证：采用SPR技术将靶蛋白固定于芯片表面，检测药物浓度梯度与蛋白的结合解离信号；同步通过MST技术标记靶蛋白，分析药物-蛋白结合热泳动变化，双向验证结合亲和力。
5.分子机制解析：借助分子对接、分子动力学模拟，预测药物与蛋白结合位点；通过点突变实验、体内IHC验证，明确关键作用位点及体内生物学效应。
三、实验结果与数据分析
本研究以口腔鳞状细胞癌（OSCC）天然产物药物筛选为模型，依托上述技术体系完成全流程验证，核心数据如下：
1.化合物筛选：从3682种化合物中筛选出336种候选化合物，10µM浓度处理下，血根碱（Sang）是唯一能同时显著抑制CAL27、SCC9两种OSCC细胞系增殖的天然产物，细胞汇合度下降均超35%，优于多柔比星等对照药物。
2.靶点联合筛选：LiP-MS筛选出6个跨浓度组核心差异蛋白，AI虚拟筛选预测前10位靶点，PKM2为唯一交集靶标，实现靶点精准锁定，较单一筛选方法效率提升60%以上。
3.分子互作验证：SPR检测显示Sang与PKM2结合呈剂量依赖性，平衡解离常数KD=7.31×10⁻⁶M；MST检测KD=2.63±0.31µM，两组数据高度吻合，证实两者具备强效、高亲和力直接结合。
4.机制验证：分子动力学模拟锁定PKM2蛋白F26为关键结合残基；F26A点突变后，Sang对PKM2酶活性抑制率下降超80%；体内IHC实验证实，Sang通过靶向PKM2 F26位点抑制肿瘤细胞自噬，显著阻断OSCC进展。
四、技术核心优势
1.筛选精准高效：LiP-MS与AI虚拟筛选双向互补，大幅降低假阳性，快速锁定核心靶标，避免传统方法盲目筛选，缩短靶点挖掘周期50%。
2.验证数据权威：SPR+MST双向分子互作检测，从动力学、亲和力多维度定量验证，数据可重复性强，符合高水平科研论文数据要求。
3.机制解析深入：从蛋白靶点、结合位点、体内外效应全链条解析药物作用机制，实现“药物-靶标-通路-疾病”完整论证。
4.应用场景广泛：适配老药新用、天然产物活性筛选、抗肿瘤/抗炎药物研发等多领域，兼容细胞、动物、临床样本多类型检测。
五、典型应用案例
以本研究为例，依托LiP-MS+AI虚拟筛选+分子互作技术体系，成功从天然产物中挖掘出血根碱抗OSCC的全新靶标PKM2，相关研究成果发表于《Phytomedicine》（一区，IF=8.3），为OSCC靶向治疗提供全新候选药物与作用靶点，同时验证了该技术体系在天然产物药物研发、老药新用领域的实用性。
该技术已成功应用于多种疾病药物研发：在肿瘤靶向药筛选中，快速挖掘出3种已上市药物的全新作用靶点；在天然产物活性研究中，完成10余种天然小分子的靶标鉴定与机制解析，助力多项科研成果发表于高分SCI期刊。
综上，LiP-MS+AI虚拟筛选+分子互作技术体系，凭借高效、精准、严谨的优势，成为药物靶标筛选、老药新用、天然产物机制研究的核心技术方案，为药物研发与基础科研提供强有力的技术支撑。
Yangenebio对于中药及小分子药物研究，建立了一套完整的技术服务体系：
武汉研锦生物科技有限公司（YanGeneBio）提供产品：
1,天然产物、中药、代谢物等化合物靶点发现及SPR亲和力验证解决方案：
1）中药／复方的有效成分高精度鉴定，网络药理学分析及SPR验证互作；
2）化合物钓靶（标记法）:ABPP钓靶（特异性强，重复性高，细胞水平钓靶）；
3）化合物钓靶（非标记法）:Lip-MS/PELSA/CETSA（细胞、组织裂解液水平钓靶）；
4)生物素标记法Spider药物钓靶(细胞、组织裂解液水平钓靶)5)SPR/MST/BLI/ITC/DSF等策略检测分子间亲和力；
6）药﹣靶结合位点分析（Lip-MS+分子对接鉴定纯蛋白与化合物互作位点）；
7）蛋白-蛋白结合位点分析（交联质谱+分子对接鉴定2个纯蛋白间互作位点）；
8）ABPP-WB/CETSA-WB 在细胞水平鉴定药物与靶点蛋白互作分析；
9）提供真核蛋白表达纯化服务、原核蛋白表达纯化服务；
10）提供定制化基因敲除细胞模型验证药物活性；
11）基于分子对接等策略提供化合物高通量虚拟筛选技术服务；
12）提供蛋白芯片筛选服务、抗体芯片筛选服务：磷酸化抗体芯片，炎症因子蛋白芯片等检测服务；
13）提供Olink多因子蛋白组学检测服务。
14）ASO等核酸修饰合成，siRNA核酸合成，类器官筛药服务。
2,提供重组活性细胞因子产品：应用类器官培养、完全培养基添加剂、干细胞培养、细胞治疗等领域。
3,提供分子互作仪、细胞电转仪、蛋白纯化仪、核酸合成仪及纯化仪等设备。
