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2025 年高考生物第一次模拟考试
生物·全解全析
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号等填写在答题卡和试卷指定位置上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用
橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回
一、选择题：本题共16 小题，每小题3 分，共48 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要
求。
1．LRRK2 是一种内质网膜上的蛋白质。LRRK2 基因在人成纤维细胞中被敲除后，导致细胞内蛋白P 在内
质网腔大量积聚，而培养液中的蛋白P 含量较对照组显著降低。下列相关叙述错误的是（ ）
A．蛋白P 以边合成边转运的方式由核糖体进入内质网腔
B．线粒体参与了蛋白P 在细胞内的合成
C．LRRK2 蛋白的主要功能是促进细胞通过胞吐释放蛋白P
D．积累在内质网腔的蛋白P 与培养液中的蛋白P 结构不同
【答案】C
【分析】分泌蛋白的合成与分泌过程：核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡
→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜，整个过程还需要线粒体
提供能量。
【详解】A、分泌蛋白的合成与分泌过程：在游离的核糖体中以氨基酸为原料合成多肽链→肽链与核糖体
一起转移到粗面内质网上继续其合成过程→边合成边转移到内质网腔内，进一步加工、折叠→内质网“出
芽”形成囊泡→高尔基体进一步修饰加工→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜胞吐释放到胞外，所以蛋
白P 以边合成边转运的方式由核糖体进入内质网腔，A 正确；
B、线粒体是真核细胞进行有氧呼吸的主要场所，可以为细胞内的需能反应提供能量，蛋白P 的合成是一
个耗能过程，需要线粒体的参与，B 正确；
C、LRRK2 基因被敲除后，蛋白P 在内质网腔大量积聚，培养液中的蛋白P 含量显著降低→蛋白P 为分泌
蛋白，没有LRRK2 蛋白的参与，蛋白P 无法运出内质网→LRRK2 蛋白的主要功能是维持蛋白P 在粗面内
质网的合成、加工及转运的正常进行，而不是促进细胞胞吐释放蛋白P，C 错误；
D、积累在内质网腔的蛋白P 是未成熟的蛋白质，培养液中的蛋白P 是成熟的分泌蛋白，二者的结构不同，
D 正确。
1
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故选C。
2．某种含丁香酚的脐贴可通过透皮给药法（在肚脐处皮肤贴敷12 小时）辅助治疗小儿腹泻和腹痛等。丁
香酚通过血液循环作用于肠胃系统，其部分原理如图所示，其中“+”表示促进作用。下列叙述错误的是（
）
A．H+-K+-ATP 酶同时具有催化和运输两种功能
B．H+、K+通过H+-K+-ATP 酶的运输方式分别是协助扩散、主动运输
C．丁香酚能够促进胃蛋白酶和胃酸的分泌，从而促进机体对食物的消化
D．可通过抑制H+-K+-ATP 酶的作用来缓解胃酸分泌过多的症状
【答案】B
【分析】题图分析，丁香酚顺浓度梯度进入胃壁细胞，促进胃蛋白酶的分泌，并且通过H+-K+-ATP 酶把
K+转运进胃壁细胞，同时把H+转运出胃壁细胞，促进胃酸的分泌，具有促进消化的作用。
【详解】A、结合图示可知，H+-K+-ATP 酶转运钾离子和H+的同时，还要催化ATP 的水解过程，因而说明
该物质同时具有催化和运输两种功能，A 正确；
B、由图可知，H+、K+通过H+-K+-ATP 酶的运输方式需要消耗能量，因而均为主动运输，B 错误；
C、结合图示可知，丁香酚进入胃壁细胞后能够促进胃蛋白酶和胃酸的分泌，因而能促进机体对食物的消
化，C 正确；
D、结合图示可知，H+-K+-ATP 酶能使H+运出胃壁细胞，进入到胃腔中，因此，可通过抑制H+-K+-ATP 酶
的作用来缓解胃酸分泌过多的症状，D 正确。
故选B。
3．为响应心肌损伤，巨噬细胞迁移到心脏促进坏死组织的清除，并在清除过程中产生转化生长因子-β，促
进成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化，随后该巨噬细胞线粒体中NAD⁺的浓度降低，生成NADH 的速率
降低。下列说法错误的是（ ）
2
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A．巨噬细胞吞噬、清除死亡细胞的过程需要消耗能量，并与膜上的蛋白质有关
B．成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化实质是基因的选择性表达
C．损伤的心肌细胞被巨噬细胞清除属于细胞凋亡
D．该巨噬细胞清除死亡细胞后，有氧呼吸产生CO2的速率升高
【答案】D
【分析】由题意可知，心肌损伤诱导某种巨噬细胞吞噬、清除死亡的细胞，随后该巨噬细胞线粒体中
NAD+浓度降低，生成NADH 的速率减小，说明有氧呼吸减弱。
【详解】A、巨噬细胞吞噬、清除死亡细胞的过程为胞吞，该过程需要细胞呼吸提供能量，并与膜上的蛋
白质有关，A 正确；
B、成纤维细胞变成肌成纤维细胞，属于转分化（即细胞分化），细胞分化的实质是基因的选择性表达，B
正确；
C、损伤的心肌细胞被巨噬细胞清除属于细胞凋亡，C 正确；
D、由题意可知，心肌损伤诱导巨噬细胞吞噬、清除死亡的细胞，随后该巨噬细胞线粒体中NAD＋的浓度
降低，生成NADH 的速率降低，说明有氧呼吸减弱，即该巨噬细胞清除死亡细胞后，有氧呼吸产生CO2的
速率降低，D 错误。
故选D。
4．羟胺是一种化学诱变剂，可使胞嘧啶转化为羟化胞嘧啶而与腺嘌呤配对。某二倍体动物的一个精原细
胞中，某个E 基因中的一个胞嘧啶碱基发生了羟化（含羟化胞嘧啶的E 基因为E'基因）。下列叙述正确的
是（ ）
A．与E 基因相比，E'基因中嘧啶数和氢键数均减少
B．E'基因在DNA 复制过程中不遵循碱基互补配对原则
C．若该精原细胞进行减数分裂，则减数分裂Ⅱ的中期细胞均含1 个E'基因
D．若该精原细胞进行三次有丝分裂，则E 基因中C/G 被A/T 替换的子细胞占3/8
【答案】D
【分析】1、DNA 分子复制方式为半保留复制。
2、减数分裂过程：（1）减数第一次分裂前的间期：染色体的复制。（2）减数第一次分裂：①前期：联
会，同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换；②中期：同源染色体成对的排列在赤道板上；③后期：同
源染色体分离，非同源染色体自由组合；④末期：细胞质分裂。（3）减数第二次分裂：①前期：核膜、
核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；②中期：染色体形态固定、数目清晰；③后期：着丝点（粒）
分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；④末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消
失。
3
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【详解】A、与E 基因相比，E'基因中胞嘧啶转化为羟化胞嘧啶，嘧啶数不变，其与腺嘌呤配对，氢键有
三个变为两个，氢键减少，A 错误；
B、E'基因在DNA 复制过程中遵循碱基互补配对原则，即A 对T、G 对C、羟化胞嘧啶与腺嘌呤配对，B
错误；
C、根据碱基互补配对原则可知，若该精原细胞进行减数分裂，则减数分裂Ⅱ的中期细胞只有1 个细胞含1
个E'基因，其余细胞正常，C 错误；
D、若该精原细胞进行三次有丝分裂，得到8 个子细胞，根据碱基互补配对原则可知，其中有3 个子细胞
的E 基因中C/G 被A/T 替换，即E 基因中C/G 被A/T 替换的子细胞占3/8，D 正确。
故选D。
5．果蝇的眼睛是复眼，红眼（A）对白眼（a）为显性，且等位基因A/a 位于X 染色体上。某杂合红眼雌
果蝇的A 基因转移到4 号常染色体上的异染色质区后，由于异染色质结构的高度螺旋，某些细胞中的A 基
因不能正常表达，表现出部分小眼为红色，部分小眼为白色，这种表型称为花斑型眼。下图表示花斑型眼
雌果蝇的基因所在染色体上的位置。下列说法错误的是（ ）
A．A 基因转移到4 号常染色体的异染色质区属于染色体变异
B．花斑型眼果蝇产生的初级卵母细胞中可以观察到4 个四分体
C．位于异染色质区的DNA 片段因为解旋困难而直接影响转录过程
D．若减数分裂时图中4 条染色体随机两两分离，则该雌果蝇可能生出正常子代
【答案】B
【分析】染色体变异包括染色体结构变异和染色体数目变异。分析题意，A，a 基因位于X 染色体上，某
杂合红眼果蝇的A 基因转移到4 号常染色体上，该过程发生在非同源染色体之间，因此图示异常表示染色
体易位。
【详解】A、A 基因由X 染色体转移到4 号常染色体上，该过程发生在非同源染色体之间，属于染色体结
构变异中的易位即染色体变异，A 正确；
B、果蝇有8 条染色体，正常情况下在减数分裂Ⅰ前期可以产生4 个四分体，但是花斑型眼雌果蝇中X 染
色体与4 号常染色体联会时会形成“十字型”结构而不能形成四分体，因此观察不到4 个四分体，B 错误；
C、转移到4 号异染色质区的基因由于异染色质结构的高度螺旋，DNA 无法解旋，不能正常转录而不能正
4
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常表达，，因此位于异染色质区的DNA 片段因为解旋困难而直接影响转录过程，C 正确；
D、若减数分裂时图中4 条染色体随机两两分离，若正常4 号染色体与正常X 染色体共同进入一极，则会
成形正常卵细胞，则该雌果蝇可能生出正常子代，D 正确。
故选B。
6．遗传漂变是指种群中基因频率在代际发生随机改变的一种现象。漂变的发生是由于偶然性对基因从亲
代向下一代传递时的影响；不是所有个体都交配，也不是所有个体产生的配子都能贡献于繁殖，从而导致
亲子代之间基因频率出现变化。下列关于遗传漂变的叙述。正确的是（ ）
A．遗传漂变会使种群的基因频率朝一定方向变化
B．遗传漂变对基因频率的影响与种群的大小无关
C．遗传漂变的发生对种群的遗传多样性没有影响
D．遗传漂变可能会导致种群中纯合子的比例增加
【答案】D
【分析】遗传漂变是小的群体中，由于不同基因型个体生育的子代个体数有所变动而导致基因频率的随机
波动称为遗传漂变。群体中，不同基因型个体所生子女数目不尽相同，致使子代的等位基因数发生改变，
在处于相对隔离状态的小群体中会产生基因频率的随机波动。
【详解】A、遗传漂变导致种群中基因频率随机改变，自然选择才会使种群的基因频率朝一定方向变化，
决定生物进化的方向，A 错误；
B、遗传漂变是基因频率的随机变化，种群越大，遗传漂变对基因频率改变的影响越小，种群越小，遗传
漂变对基因频率改变的影响越大，故遗传漂变对基因频率的影响与种群的大小有关，B 错误；
C、遗传漂变导致种群中基因频率随机改变，会导致亲子代之间基因频率出现变化，因此，遗传漂变的发
生对种群的遗传多样性有影响，C 错误；
D、通过“漂变的发生是由于偶然性对基因从亲代向下一代传递时的影响；不是所有个体都交配，也不是
所有个体产生的配子都能贡献于繁殖，从而导致亲子代之间基因频率出现变化”可知，遗传漂变可能会导
致种群中纯合子的比例增加，D 正确。
故选D。
7．实验人员研究干旱条件下，拟南芥产生的脱落酸调控气孔关闭机制的过程如图所示。下列叙述正确的
是（ ）
A．在拟南芥体内，脱落酸主要由内分泌腺合成和分泌
5
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B．干旱条件下，脱落酸能够催化拟南芥细胞内蛋白P 的合成
C．干旱条件下，与正常拟南芥相比，蛋白P 基因缺失突变体拟南芥失水更少
D．脱落酸调控气孔关闭的机制有利于拟南芥在干旱条件下生存
【答案】D
【分析】脱落酸是一种抑制生长的植物激素，因能促使叶子脱落而得名。可能广泛分布于高等植物。除促
使叶子脱落外尚有其他作用，如使芽进入休眠状态、促使马铃薯形成块茎等，对细胞的伸长也有抑制作用，
素有“逆境激素”之称。
【详解】A、拟南芥细胞中没有内分泌腺，A 错误；
B、脱落酸是激素，只起调节作用，不起催化作用，B 错误；
C、据图可知，正常拟南芥蛋白P 会导致保卫细胞液泡的溶质转运到胞外，进而导致气孔关闭，减少拟南
芥失水，与之相比，蛋白P 基因缺失突变体的保卫细胞液泡的溶质不能及时地被转运到胞外，气孔处于开
放状态，拟南芥失水更多，C 错误；
D、据图可知，干旱条件下，通过相关基因的表达，使脱落酸含量升高，进而调控气孔关闭，利于减少水
分的散失，利于拟南芥在干旱条件下生存，D 正确。
故选D。
8．应激反应是应激源引起的包括交感神经兴奋、肾上腺皮质激素分泌增多、心率和呼吸加速等系列反应。
应激反应的发生还与个体对应激源的认识、处理应激事件的经验等有关。肾上腺素和糖皮质激素（GC）都
是机体的应激激素，其中GC 是临床上使用广泛而有效的抗炎和免疫抑制剂，图示是其分泌调节的示意图。
下列叙述错误的是（ ）
A．长期使用GC 类药物会影响肾上腺皮质的正常功能
B．肾上腺素的分泌不受下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴的调控
C．长期应激状态下，机体出现低血糖症的风险增加
D．不同人对相同应激源产生的应激反应可能不同
【答案】C
【分析】糖皮质激素（GC）调节过程：下丘脑分泌激素CRH，促使垂体分泌激素ACTH；ACTH 随血液
运输到肾上腺皮质，促使肾上腺皮质增加糖皮质激素（GC）的合成和分泌；血液中糖皮质激素（GC）含
量增加到一定程度时，又反过来抑制下丘脑和垂体分泌相关激素，进而使糖皮质激素（GC）分泌减少。
【详解】A、长期使用GC 类药物会抑制CRH 和ACTH 的分泌，ACTH 分泌减少会使肾上腺皮质萎缩和机
6
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能减退，A 正确；
B、肾上腺素是由肾上腺髓质分泌的，不受下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴调控，B 正确；
C、机体应激反应下产生的肾上腺素和糖皮质激素会升高血糖，故长期应激状态下，机体出现高血糖症的
风险增加，C 错误；
D、应激反应与个体对应激源的认识、处理应激事件的经验等有关，不同人对相同的应激源可能会产生不
同的应激反应，D 正确。
故选C。
9．秋冬季为支原体肺炎高发期，支原体可通过呼吸道侵入人体细胞内引发肺炎，多发于儿童和青少年，
临床症状表现为高热、咳嗽等。头孢类和青霉素类药物的作用机理主要是抑制细胞壁的形成导致细胞破裂
死亡。下列叙述正确的是（ ）
A．部分支原体会被人鼻腔中的黏膜阻挡在体外，体现了免疫系统的监视功能
B．支原体侵入人体后由树突状细胞、B 细胞、T 细胞等淋巴细胞参加免疫反应
C．头孢类和青霉素类药物能抑制细菌生长繁殖，但不能抑制支原体生长繁殖
D．支原体侵入人体细胞后只能引发机体产生细胞免疫，不引发体液免疫
【答案】C
【分析】细胞免疫：被病原体感染的宿主细胞膜表面的某些分子发生变化，细胞毒性T 细胞识别变化的信
号；细胞毒性T 细胞分裂并分化，形成新的细胞毒性T 细胞和记忆T 细胞，细胞因子能加速这一过程；新
形成的细胞毒性T 细胞在体液中循环，它们可以识别并接触、裂解被同样病原体感染的靶细胞；靶细胞裂
解、死亡后，病原体暴露出来，抗体可以与之结合；或被其他细胞吞噬掉。
【详解】A、部分支原体会被人鼻腔中的黏膜阻挡在体外，体现了免疫系统的免疫防御功能，A 错误；
B、B 细胞、T 细胞属于淋巴细胞，树突状细胞是吞噬细胞的一种，不属于淋巴细胞，B 错误；
C、头孢类和青霉素类药物的作用机理主要是抑制细胞壁的形成导致细胞破裂死亡，但支原体没有细胞壁，
因而不能抑制支原体生长繁殖，C 正确；
D、支原体侵入人体细胞后不仅能引发机体产生细胞免疫，还会引发体液免疫，D 错误。
故选C。
10．来贵州要来“黄小西吃晚饭”。旅游名片中“吃”指赤水丹霞，其中有许多裸露的红色岩石，岩石表
面生活着地衣、苔藓，随时间推移，形成丹霞地貌、桫椤、原始森林等为特色的赤水丹霞。下列叙述正确
的是（ ）
A．群落演替一般是向群落结构复杂的方向进行，最终都能演替成森林群落
B．赤水丹霞地貌形成过程中地衣先于苔藓出现，加速了岩石风化形成土壤
C．赤水丹霞地貌中的生物群落的景观特征随季节变化的现象属于次生演替
7
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D．赤水丹霞地貌的原始森林中桫椤分布有高有矮，构成了群落的垂直结构
【答案】B
【分析】1、群落的垂直结构指群落在垂直方面的配置状态，其最显著的特征是成层现象，即在垂直方向
分成许多层次的现象。群落的水平结构指群落的水平配置状况或水平格局，其主要表现特征是镶嵌性。
2、初生演替是指一个从来没有被植物覆盖的地面，或者是原来存在过植被，但是被彻底消灭了的地方发
生的演替；次生演替原来有的植被虽然已经不存在，但是原来有的土壤基本保留，甚至还保留有植物的种
子和其他繁殖体的地方发生的演替。
【详解】A、演替最终形成的群落类型取决于当地的土壤和气候（年平均温度和降雨量），因此群落演替
最终不一定能形成森林群落，A 错误；
B、光裸岩地上的群落演替过程中，最先出现的是地衣，地衣分泌有机酸加速岩石风化形成土壤，并积累
有机物，这为其他生物的生长提供了条件，而后苔藓出现，B 正确；
C、赤水丹霞地貌中的生物群落的景观特征随季节变化的现象属于群落的时间结构（季相即季节性），C
错误；
D、群落的垂直结构指群落中不同物种在垂直方向上的配置状态，桫椤分布有高有矮，描述的同一物种不
同个体之间的高低关系，不属于群落的垂直结构，D 错误。
故选B。
11．某农户仅用池塘里的鱼就可做出几十种美味佳肴，这成了其“农家乐”的经营特色。几家农户联合起
来，重点经营人工鱼塘，同时进行种桑、养蚕、养禽、养菇和制酒等，形成了新型的桑基鱼塘模式。下列
说法正确的是（ ）
A．该生态系统的能量和生物量金字塔都不会倒置
B．桑基鱼塘模式实现了物质的循环利用，不需要外界提供肥料
C．通过合理布设生物种类实现结构与功能的协调，主要体现了自生原理
D．鱼以蚕粪为食，则能量在蚕和鱼之间的传递效率高于10%
【答案】C
【分析】桑基鱼塘是典型的生态工程的实例，生态工程是指应用生态系统中物质循环原理，结合系统工程
的最优化方法设计的分层多级利用物质的系统，其目的是将生物群落内不同物种共生、物质与能量多级利
用、环境自净和物质循环再生等原理与系统工程的优化方法相结合，达到资源多层次和循环利用的目的。
【详解】A、人工鱼塘会有饵料投入，故鱼所在营养级的生物量可能较多，使生物量金字塔倒置，A 错误；
B、该生态系统是人工生态系统，生物种类并不多，主要依赖人的作用，故需要外界提供肥料，B 错误；
C、通过合理布设生物种类，这些生物之间通过各种相互作用（特别是种间关系）进行自组织，实现系统
结构与功能的协调，形成有序的整体，这主要体现了自生原理，C 正确；
8
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D、蚕粪便中的能量不属于蚕，属于上一营养级，D 错误。
故选C。
12．因人类活动和互花米草入侵，广东省淇澳岛红树林面积锐减，后来从南亚引入了速生红树乔木植物
（无瓣海桑）控制了互花米草蔓延，红树林面积逐步恢复。下列叙述错误的是（ ）
A．互花米草与无瓣海桑的种间关系属于种间竞争
B．无瓣海桑能控制互花米草蔓延的主要原因是能竞争更多阳光
C．红树林群落的垂直分层为多种动物创造了栖息空间和食物条件
D．红树林的生态调节作用和观赏性体现了红树林生态系统的直接价值
【答案】D
【分析】生物多样性的价值：(1)直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、
科学研究和文学艺术创作等非实用意义的。(2)间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值(生态功能)。
(3)潜在价值：目前人类不清楚的价值。
【详解】A、互花米草与无瓣海桑均属于生产者，种间关系属于种间竞争，A 正确；
B、无瓣海桑为乔木，长得高大，能获得更多阳光，在竞争中具有优势地位，B 正确；
C、植物的垂直分层为动物创造了栖息空间和食物条件，C 正确；
D、红树林的海岸防护作用体现了间接价值，观赏性体现了直接价值，D 错误。
故选D。
13．研究人员用紫外线照射耐盐性强的中间偃麦草甲的原生质体，使其染色体断裂。再诱导其与普通小麦
乙原生质体融合，经培养、筛选获得了耐盐小麦新品种丙（染色体数目与乙相同）。下列有关叙述错误的
是（ ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理甲、乙体细胞可获得原生质体
B．植物体细胞杂交过程中常用灭活病毒诱导原生质体融合
C．培育过程中适当提高培养基中生长素比例有利于根的分化
D．据题意推测，丙染色体上可能整合了甲染色体的染色体片段
【答案】B
【分析】植物原生质体融合前需要去除植物的细胞壁，再用化学法或物理法诱导原生质体融合，常用的诱
导剂是聚乙二醇。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，可用纤维素酶和果胶酶处理甲、乙体细胞可获得原
生质体，A 正确；
B、诱导植物原生质体融合的方法有物理法和化学法，但灭活病毒用来诱导动物细胞融合，B 错误；
C、培育过程中适当提高培养基中生长素比例有利于根的分化，提高培养基中细胞分裂素比例有利于芽的
9
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分化，C 正确；
D、中间偃麦草甲具有耐盐性强的特性，普通小麦乙不具有该特性，用紫外线照射耐盐性强的中间偃麦草
甲的原生质体，使其染色体断裂，再诱导其与普通小麦乙原生质体融合，获得新品种丙，且丙具有耐盐特
性，且染色体数目与乙相同，说明丙染色体上可能整合了甲染色体的染色体片段，D 正确。
故选B。
14．生物兴趣小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸
秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后(清水淋洗时菌T 不会流失)，在装
有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵。下列说法正确的是（ ）
A．菌T 可产生分解纤维素的酶，其分解产物是酵母菌的碳源
B．为了不破坏淋洗液中的营养物质，对淋洗液进行巴氏消毒
C．为提高发酵的乙醇产量，需始终保持发酵瓶处于密闭状态
D．发酵后，产生的乙醇使麝香草酚蓝溶液由蓝变绿再变黄
【答案】A
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌
无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性
重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【详解】A、酵母菌不能直接利用纤维素，但菌T 能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡
萄糖为酵母菌提供碳源，A 正确；
B、淋洗液需要高压蒸汽灭菌，B 错误；
C、为提高发酵的乙醇产量，发酵瓶应先通气后密闭，通气时酵母菌大量繁殖，密闭时酵母菌无氧发酵产
生乙醇，C 错误；
D、溴麝香草酚蓝溶液能检测CO2，但不能检测酒精（乙醇），检测酒精的是酸性重铬酸钾，D 错误。
故选A。
10
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15．科学家利用雌性小鼠的体细胞获得iPS 细胞，随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，
进而使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是（ ）
A．可以将特定基因或蛋白质导入雌性小鼠体细胞获得iPS 细胞
B．鉴别iPS 细胞时可以将其特征与胚胎干细胞进行类比
C．该过程需要动物细胞培养、体外受精、胚胎移植等技术
D．iPS 细胞即诱导全能干细胞，应用前景优于胚胎干细胞
【答案】D
【分析】iPS 细胞是人类诱导某些已分化的体细胞，成为诱导多能干细胞。
【详解】A、制备iPS 细胞时，可以借助载体将特定基因导入雌性小鼠体细胞而获得，也可以直接将特定
蛋白导入雌性小鼠体细胞中获得，A 正确；
B、iPS 细胞是诱导多能干细胞，具有癌细胞的特征，鉴别iPS 细胞时可以将其特征与胚胎干细胞进行类比，
B 正确；
C、将体细胞诱导成多能干细胞进而诱导成原始生殖细胞样细胞，需要细胞培养技术，使其完成减数分裂
形成卵细胞，进行体外受精，需要体外受精技术，最后生育健康小鼠，需要胚胎移植技术，C 正确；
D、iPS 细胞是人类诱导某些已分化的体细胞，是诱导多能干细胞，D 错误。
故选D。
16．乙醇脱氢酶（ADH）和乳酸脱氢酶（LDH）是植物细胞中无氧呼吸的关键酶，其催化的代谢途径如图
1 所示。为探究Ca2+对淹水处理的植物根细胞呼吸作用的影响，研究人员将辣椒幼苗均分为3 组：甲组
（未淹水）、乙组（淹水）和丙组（淹水+Ca2+），在其它条件相同且适宜的条件下进行实验，结果如图2
所示。下列叙述正确的是（ ）
A．图1 中LDH 和酶E 分别在细胞质基质、线粒体基质中发挥作用
B．丙酮酸生成乳酸或乙醇时产生的ATP 量相同，且均有NADH 积累
C．淹水胁迫时，辣椒幼苗根细胞产生乙醇的速率大于产生乳酸的速率
D．淹水胁迫时，添加Ca2+可减少酒精和乳酸积累，减缓对根细胞的伤害
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【答案】D
【分析】无氧呼吸分为两个阶段，第一阶段与有氧呼吸完全相同，第二阶段发生于细胞质基质，丙酮酸分
解为酒精和二氧化碳或产生乳酸，不产生ATP。
【详解】A、LDH、酶E 均是无氧呼吸的酶，则分布在细胞质基质中，催化丙酮酸的还原，A 错误；
B、丙酮酸生成乳酸或酒精的过程是无氧呼吸第二阶段，该阶段不产生ATP，且NADH 不积累，B 错误；
C、甲为对照组，是正常生长的幼苗，乙为实验组，为淹水条件，乙醇脱氢酶（ADH）、乳酸脱氢酶
（LDH）活性升高，且LDH 酶活性更高，据此可推测淹水条件下乳酸产生的速率高于乙醇产生速率，C 错
误；
D、据图分析，丙组是实验组，ADH 含量较高，LDH 含量较低，说明水淹条件下，适当施用Ca2+可减少根
细胞厌氧呼吸产物乳酸和乙醛的积累，从而减轻其对根细胞的伤害，D 正确。
故选D。
二、非选择题（共5 题，共52 分）。
17．水稻是我国重要的粮食作物之一，开展水稻高产攻关是促进粮食高产优产、筑牢粮食安全根基的关键
举措。为获得优质的水稻品种，科学家开展了多项研究。分析回答下列问题。
(1)水稻将H2O 分解为NADPH 和氧气的场所是叶绿体的 ，发生的能量转换是
。科
研人员将水稻植株置于透明且密闭的容器内，给予适宜强度的光照，并通入一定比例的
18O2和CO2，结果
在光合作用产生的有机物中检测到了
18O，请写出该过程中氧元素的转移途径：
。
(2)为研究水稻对弱光和强光的适应性，科研人员对水稻叶片照光1h 后，通过观察发现弱光照射的细胞中
叶绿体集中分布在细胞的受光面，生理意义是
。
(3)在强光条件下，叶肉细胞气孔关闭使CO2吸收受阻，此时过高的O2会在R 酶的作用下氧化C5，生成
CO2，被称为光呼吸，研究人员通过研究光呼吸拟通过在植物体内构建人工代谢途径进一步提高植物的固
碳能力。光呼吸与光合作用相伴发生，其过程如图所示：
①已知R 酶具有双重催化功能，既可催化CO2与C5结合，生成C3；又能催化O2与C5结合，生成C3和乙醇
酸（C2）。实际生产中，可以通过适当升高CO2浓度达到增产的目的，请从光合作用原理和R 酶的作用特
点两个方面解释其原理：
。
②研究人员利用水稻自身的基因成功构建了一条新的光呼吸支路，简称GOC 支路，并成功将支路导入水
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稻叶绿体，该支路的作用是使光呼吸的中间产物C2直接在叶绿体内代谢释放CO2，请分析该支路能显著提
高水稻产量的原因：
。
【答案】
(1)类囊体薄膜 光能转化为ATP 和NADPH 中的化学能
18O2→H2
18O→C18O2→（CH2
18O）
(2)最大程度吸收光能，以适应弱光环境
(3) 二氧化碳是光合作用暗反应过程的原料，CO2浓度升高可促进光合作用暗反应的进行，进而提高光合
作用强度；同时还可促进 R 酶催化更多的C5与CO2结合，减少C5与O2的结合，从而降低光呼吸 光
呼吸使一部分碳以 CO2的形式散失，GOC 支路使光呼吸产生的CO2直接在叶绿体内释放，提高了CO2的
利用率
【分析】
1、光合作用的光反应阶段（场所是叶绿体的类囊体膜上）：水的光解产生NADPH 与氧气，以及ATP 的
形成。光合作用的暗反应阶段（场所是叶绿体的基质中）：CO2被C5固定形成C3，C3在光反应提供的ATP
和NADPH 的作用下还原生成有机物。
2、光呼吸是所有进行光合作用的细胞在光照和高氧低二氧化碳情况下发生的一个生化过程。它是光合作
用一个损耗能量的副反应。光呼吸可消除多余的NADPH 和ATP，减少细胞受损的可能，有其正面意义。
【详解】
（1）将H2O 分解为NADPH 和氧气是光反应阶段，发生在叶绿体的类囊体薄膜上，其发生的能量转换是
光能转化为ATP 和NADPH 中的化学能。当通入一定量的
18O2时，首先氧气中的氧元素会进入线粒体中参
与有氧呼吸的第三阶段，转移至H2
18O 中；产生的H2
18O 会参与有氧呼吸的第二阶段，与丙酮酸结合后可转
移至C18O2中；从线粒体中释放出的C18O2会进入叶绿体中参与光合作用的暗反应阶段，生成糖类
（CH2
18O），故该过程中氧元素的转移途径为：
18O2→H2
18O→C18O2→（CH2
18O）。
（2）对水稻叶片照光1h 后，给予弱光照射的细胞中叶绿体集中分布在受光面，生理意义是最大程度吸收
光能，以适应弱光环境。
（3）①二氧化碳是光合作用暗反应过程的原料，CO2浓度升高可促进光合作用暗反应的进行，进而提高光
合作用强度；同时还可促进 R 酶催化更多的C5与CO2结合，减少C5与O2的结合，从而降低光呼吸，故生
产实际中，可以通过适当升高CO2浓度达到增产的目的。
②结合题意可知，GOC 支路的作用是使光呼吸的中间产物 C2直接在叶绿体内代谢释放CO2，光呼吸使一
部分碳以 CO2的形式散失，GOC 支路使光呼吸产生的CO2直接在叶绿体内释放，提高了CO2的利用率，
故显著提高了水稻的光合速率和产量。
18．许多女性在怀孕时会发生妊娠期恶心和呕吐（NVP）。相关证据表明，NVP 与一种作用于脑干的激素
GDF15 有关。回答下列问题：
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(1)肠道受到刺激后引发人体呕吐的部分调节过程如下图所示。据图分析，迷走神经在此处按功能分类属于
神经，肠嗜铬细胞与迷走神经之间
（选填“有”或者“没有”）形成突触。5-HT
（五羟色胺）是肠嗜铬细胞中合成的信号分子，当敲除肠嗜铬细胞中5-HT 合成的关键酶基因后，呕吐反
应
。
(2)在非妊娠状态下，GDF15 是细胞应激时广泛表达的一种多肽分子，其能激活位于于脑干细胞的
（填细胞结构）的受体，引发恶心和呕吐反应。最新研究表明，妊娠状态下孕妇的胎盘组织大量合成
GDF15，可通过测定胎盘细胞中的
含量来间接证明，同时发生NVP 的孕妇的血浆中GDF15 浓
度明显增大。
(3)CDF15 有H 型和D 型两类，它们的区别只在于第202 号氨基酸不同，这表明控制H 型合成和控制D 型
合成的基因之间的关系是
。研究人员指出，NVP 孕妇的血浆中的
GDF15 绝大部分来自于胎盘。已知小鼠体内也存在CDF15 基因，现提供纯种HH 型（体内只含有H 型
CDF15）、纯种DD 型（体内只含有D 型CDF15）、杂合HD 型（体内含有等量的H 型和D 型CDF15）的
成年、生育能力正常的雌雄小鼠若干，设计实验验证研究人员的说法。
实验材料用具：小鼠、采血针、质谱分析仪（通过质谱分析可以区分不同大小和结构的分子）等。
I、实验思路：
①选择
型小鼠
，等待母鼠怀孕。
②母鼠怀孕一段时间以后，抽取母鼠血液加入抗凝剂，然后
得到血浆，分离纯化
后，得到GDF15 蛋白。
③
。
Ⅱ、预期实验结果：
。
【答案】
(1) 传入 没有 大大减轻（减弱、消失）
(2) 细胞膜上 GDF15mRNA
(3) 互为等位基因 HH 型雄鼠和DD 型雌鼠（或者HH 型雌鼠和DD 型雄鼠） 杂交 沉淀、离
心 用质谱分析仪进行质谱分析 母鼠血液中H 型GDF15 含量略低于总量的50%，D 型GDF1S 含
量略高于50%（父母本对调则反过来）
【分析】神经调节的基本方式是反射，反射活动的结构基础是反射弧，反射弧包括感受器、传入神经、神
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经中枢、传出神经和效应器，人体在完成一项反射活动时，必须保持反射弧结构的完整，任何一个环节出
现障碍，反射活动就不能正常进行。
【详解】（1）据图分析，迷走神经可将刺激传导至脑干，迷走神经在此处按功能分类属于传入神经；肠
嗜铬细胞是一类肠道内分泌细胞，与迷走神经之间没有形成突触；5-HT（五羟色胺）是肠嗜铬细胞中合成
的信号分子，当敲除肠嗜铬细胞中5-HT 合成的关键酶基因后，信号分子的作用减弱，呕吐反应大大减轻
（减弱、消失）；下丘脑是水盐平衡调节中枢，能感受渗透压变化，故NVP 通常还伴随着体重减轻、电解
质紊乱等现象，表明位于下丘脑的渗透压调节中枢功能障碍。
（2）GDF15 是细胞应激时广泛表达的一种多肽分子，其受体位于细胞膜上；GDF15 通过转录可形成对应
的mRNA，故妊娠状态下孕妇的胎盘组织大量合成GDF15，可通过测定胎盘细胞中的GDF15mRNA 含量
来间接证明。
（3）等位基因是位于同源染色体相同位置控制相对性状的基因，CDF15 有H 型和D 型两类，它们的区别
只在于第202 号氨基酸不同，这表明控制H 型合成和控制D 型合成的基因之间的关系是互为等位基因；本
实验目的是验证NVP 孕妇的血浆中的GDF15 绝大部分来自于胎盘，则应通过选择不同基因型的父本和母
本杂交来验证，据所给实验材料可知，实验步骤如下：
①选择HH 型雄鼠和DD 型雌鼠（或者HH 型雌鼠和DD 型雄鼠）型小鼠杂交，等待母鼠怀孕。
②母鼠怀孕一段时间以后，抽取母鼠血液加入抗凝剂，然后沉淀离心得到血浆，分离纯化后，得到GDF15
蛋白。
③用质谱分析仪进行质谱分析。
由于本实验是验证实验，实验结果应与假设一致，故预期结果为：母鼠血液中H 型GDF15 含量略低于总
量的50%，D 型GDF1S 含量略高于50%（父母本对调则反过来）。
19．科研人员通过建立污水处理系统（含多种微生物）、引种植物等措施，将污染严重的某湿地建设成城
市湿地景观公园。下图1 表示湿地对城市污水的净化；图2 表示该湿地生态系统的局部能量流动过程，其
中D 表示同化量，图中字母代表相应能量。回答下列问题：
(1)图1 中甲、乙、丙代表该湿地生态系统中的三种组成成分，甲指的是
，碳元素在图1 的
甲、乙、丙之间以
的形式进行传递。
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(2)图1 中输入人工湿地生态系统的能量是
；分析图2 可知，第二营养级用于自身
生长、发育和繁殖的能量是
（用图中字母表示），第一营养级和第二营养级之间的
传递效率为
（用图中字母表示）。
(3)信息传递对生态系统和农业生产都有重要作用，孔雀开屏是一种
（填“物理”或“化
学”或“行为”） 信息，使用黑光灯诱捕趋光性昆虫属于
防治。
(4)生态系统自我调节能力的基础是
；一般情况下，食物网越复杂，生态系统的
（填“抵抗力”或“恢复力”） 稳定性就越高；处于生态平衡的生态系统具有以下特征：结构平衡、功
能平衡、
平衡。
【答案】
(1) 分解者 （含碳）有机物
(2) 生产者固定的太阳能和污水中有机物的能量 F+E+G 或D-H D/A 或（E+F+G+H）/A
(3) 行为 生物
(4) 负反馈调节 抵抗力 收支
【分析】碳循环：①碳（C）在生物圈（生物群落和无机环境之间）中以CO2的形式进行循环。②碳（C）
在生物群落中以有机物的形式进行传递。③大气中的CO2被生产者固定的方式除了光合作用（这是主要
的），还包括化能合成作用等。④微生物的分解作用包括细胞外分解（通过分泌胞外酶分解周围环境中的
物质）和细胞呼吸两个过程。
【详解】（1）据图1 分析可知，乙可从大气中吸收CO2说明乙是生产者，乙和丙的碳都可以流向甲，说明
甲是分解者，则丙是消费者，因此甲、乙、丙分别是分解者、生产者、消费者；碳（C）在生物群落（甲、
乙、丙）中以有机物的形式进行传递。
（2）流经该生态湿地的总能量包括该生态系统生产者固定的太阳能和污水中有机物的化学能。同化的能
量减去呼吸消耗的能量，即用于自身生长、发育和繁殖的能量，此部分能量包括传给下一营养级、传递到
分解者和未被利用的，故第二营养级用于自身生长、发育和繁殖的能量可表示为F+G+E(或D-H)。第一营
养级同化的总能量为A，第一营养级和第二营养级之间的传递效率为相邻营养级同化量的比值，即D/
A×100%或(E+F+G+H)/A×100%。
（3）孔雀开屏是一种行为信息，黑光灯诱捕趋光性昆虫是利用昆虫的趋光性，属于生物防治。
（4）生态系统具有一定的自我调节能力，生态系统自我调节能力的基础是负反馈调节，一般情况下，食
物网越复杂，生态系统的抵抗力稳定性就越高，恢复力稳定性越弱，处于生态平衡的生态系统具有以下特
征：结构平衡（各组分保持相对稳定）、功能平衡（保证物质总在循环，能量不断流动，生物个体持续发
展和更新）、收支平衡（生态系统中植物在一定时间内制造的可供其他生物利用的有机物的量，处于比较
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稳定的状态）。
20．果蝇 （2n=8）被誉为遗传界的小明星，果蝇部分隐性基因及其在染色体上的位置如图所示，其中 lz
基因位于 XY 染色体的非同源区段，回答下列问题：
(1)要对果蝇基因组进行测序需要测定
条染色体。
(2)菱形眼与粗糙眼
（填“是”或“否”）一对相对性状。若痕翅与非痕翅为一对相对性状，
要判断r 基因是否位于 XY 染色体的同源区段，可以选取表型为
的亲本杂交。
(3)Ra、ra 与E、e 这两对等位基因在遗传时
（填“遵循”或“不遵循”）基因的自由组合定
律，基因型为RaraEe 的雌果蝇，减数分裂可能产生
种基因型的配子。
(4)野生型雌雄果蝇均为无色翅。研究发现只有G 基因存在时，绿色荧光基因M 才会表达从而表现出绿色
翅。研究人员利用基因工程在雄果蝇的一条3 号染色体上插入G 基因，雌果蝇的某条染色体上插入基因
M。请利用上述雌雄果蝇设计杂交实验对雌果蝇中基因M 插入的位置进行判断，写出实验思路并预测结果。
实验思路：
，观察并统计后代的表型和比例。
实验结果：①若
，则基因M 插入3 号染色体上；②若
，
则基因M 插入3 号以外的其他染色体上；③若
，则基因M 插入X 染色体上。
【答案】
(1)5/五
(2) 否 痕翅雌蝇与纯合显性雄蝇（或痕翅雌蝇与纯合非痕翅雄蝇）
(3) 不遵循 2 或4
(4)将上述雌雄果蝇杂交得到F1，让F1中绿色翅雌雄果蝇随机交配， F2中绿色翅∶无色翅=1∶1
F2中绿色翅∶无色翅=9∶7 F2中绿色翅雌蝇∶无色翅雌蝇∶绿色翅雄蝇∶无色翅雄蝇=6∶2∶3∶5
【分析】基因的自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；
在减数分裂的过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
【详解】（1）要对果蝇基因组进行测序需要测定3 条常染色体和2 条性条染色体，共5 条染色体。
（2）菱形眼的基因位于X 染色体上，粗糙眼的基因位于3 号染色体上，而控制相对性状的基因必须位于
一对同源染色体上，因此它们不是一对相对性状。若要判断r 基因是否位于XY 染色体的同源区段，可以
选取表型为痕翅雌蝇与纯合显性雄蝇（或痕翅雌蝇与纯合非痕翅雄蝇）的亲本杂交，若后代均为非痕翅，
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则该基因位于XY 染色体的同源区段，若后代出现痕翅，则该基因只位于X 染色体上。
（3）Ra、ra 与E、e 这两对等位基因位于同一对同源染色体上，在遗传时不遵循基因的自由组合定律。基
因型为RaraEe 的果蝇的一个精原细胞，若减数分裂时四分体中的非姐妹染色单体不发生互换，则产生2 种
基因型的配子，若减数分裂时四分体中的非姐妹染色单体发生互换，则产生4 种基因型的配子。
（4）若要利用上述雌雄果蝇设计杂交实验对雌果蝇中基因M 插入的位置进行判断，实验思路如下:将上述
雌雄果蝇杂交得到F1，让F1中绿色翅雌雄果蝇随机交配，观察并统计F2个体表型和比例。
①若基因M 插入3 号染色体上，则亲本的雄、雌果蝇基因型可分别记为Ggmm（G 和m 连锁）、ggMm（g
和M 连锁），F1中绿色翅雌雄果蝇基因型可记为GgMm，其产生的配子Gm:gM=1:1，F1 中绿色翅雌雄果
蝇随机交配后产生的F2中GGmm:GgMm:ggMM=1:2:1，只有G 基因存在时，绿色荧光基因M 才会表达从
而表现出绿色翅，故绿色翅:无色翅=1:1；
②若基因M 插入3 号以外的其他染色体上，则亲本的雄、雌果蝇基因型可分别记为Ggmm、ggMm，F1中
绿色翅雌雄果蝇基因型可记为GgMm（G/g 和M/m 位于非同源染色体上），因两对等位基因可以自由组合，
其产生的配子有GM:Gm:gM:gm=1:1:1:1，F1中绿色翅雌雄果蝇随机交配后产生的F2中
G_M_:G_mm:ggM_:ggmm=9:3:3:1，绿色翅∶无色翅=9:7；
③若基因M 插入X 染色体上，则亲本的雄、雌果蝇基因型可分别记为GgXmY、ggXMXm，F1中绿色翅雌雄
果蝇基因型可记为GgXMXm和GgXMY，因两对等位基因可以自由组合，其产生的雌配子有
GXM:GXm:gXM:gXm=1:1:1:1，雄配子有GXM:GY:gXM:gY=1:1:1:1，F1中绿色翅雌雄果蝇随机交配后产生的F2
中G_XMXM: G_XMXm: ggXMXM: ggXMXm: G_XMY: G_XmY: ggXMY: ggXmY=3:3:1:1:3:3:1:1，绿色翅雌蝇∶无色
翅雌蝇∶绿色翅雄蝇∶无色翅雄蝇=6:2:3:5。
21．胶原蛋白在维持器官、组织、细胞等方面发挥着关键性作用。科学家将合成胶原蛋白的基因 kit 导入
大肠杆菌构建基因工程菌，过程如下图所示。请据图回答下列问题：
(1)若导入到原核生物大肠杆菌中，但由于原核细胞中缺少
（细胞器），影响表达产物进一步
加工，可能会影响蛋白质的功能。
(2)已知 kit 基因的部分序列如下图，采用PCR 技术进行扩增时，选用的引物为
（填字母）。
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为使基因与质粒成功连接，需要在引物的
端添加
两种限制酶识别序列。
A．5'-GCCCTAGGT-3' B．5'—CGGAATTCT-3'
C． 5'-CGGGATCCA-3' D．5'—GCCTTAAGA-3'
(3)酶切 kit 基因, 并与质粒中长度为170bp 片段进行置换, 构建重组质粒pET-28a（+）- kit，用 Hind Ⅲ酶
分别酶切pET-28a（+）和pET-28a （+）- kit，获得如下表所示片段,
质粒类型
pET—28a（+）
pET—28a（+）—kit
HindIII 酶切片段
1000bp、2550bp
1000bp、2000bp、700bp
则 kit 基因长度为
，由此判定 kit 基因上有
个 HindⅢ酶切位点。
(4)菌液PCR 是直接以菌体热解后的DNA 为模板、以目的基因两端序列为引物进行扩增的方法，PCR 产
物需要用
法进行鉴定，若结果出现大量杂带，其原因可能有
。（答出两点）
【答案】
(1)内质网、高尔基体
(2) BC 5' BamHⅠ和EcoRⅠ
(3) 320bp 2
(4) 琼脂糖凝胶电泳 模板受到污染；引物的特异性不强；复性温度偏低。
【分析】限制酶能够识别双链DNA 分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断
开。选择合适的限制酶对目的基因和质粒进行切割的原则：①不能破坏目的基因；②不能破坏所有的抗性
基因（至少保留一个）；③最好选择两种限制酶分别切割质粒和目的基因，防止目的基因和质粒反向连接，
同时要防止目的基因自身环化和质粒的自身环化。
【详解】（1）若导入到原核生物大肠杆菌中，由于原核细胞中缺少内质网、高尔基体等细胞器，这些细
胞器在真核细胞中负责蛋白质的进一步加工和修饰，因此原核细胞表达的蛋白质可能会缺少某些加工步骤，
从而影响蛋白质的功能。
（2）在PCR 中，引物与模板链的3'端碱基互补配对，并且引物的方向与模板链走向相反，因此与图中kit
基因上面一条链结合的引物，其序列应为5'-CGGAATTCT-3'，与kit 基因下面一条链结合的引物其序列应
为5' -CGGGATCCA-3'，综上所述，AD 错误，BC 正确；由于ori 复制原点中含有限制酶HindⅢ的识别序
列，因此不能用限制酶HindⅢ来切割质粒，否则会破坏复制原点，只能用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ对质粒
pET-28a(+)进行双酶切，这样可以防止目的基因与质粒的自身环化以及任意连接；同时要在 kit 基因两端
也连上限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列，由于DNA 聚合酶只能从引物的3'端连接脱氧核苷酸延伸子链，
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因此必须将限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列连接至引物的5'端。
（3）观察质粒 pET-28a(+) 图可知，在该质粒上有两个HindⅢ的识别序列，一个在启动子和终止子之间，
一个在复制原点ori 中，因此用HindⅢ切割质粒 pET-28a(+)后，可得到两个片段，通过表格可知，这两个
片段长度分别为1000bp 和2550bp，说明质粒pET-28a(+) 总长度是1000bp+2550bp=3550bp；利用双酶切法
将 kit 基因与质粒 pET-28a(+) 长度为170bp 片段进行置换后，形成的重组质粒 pET-28a（+）-kit 能被
HindⅢ切割成三个片段，长度分别是1000bp、2000bp、700bp，说明置换后的kit 基因上含有两个HindⅢ
的识别序列，再加上复制原点ori 中的一个HindⅢ的识别序列，共三个HindⅢ的识别序列，经HindⅢ酶
切后才能将重组质粒pET-28a（+）-kit 切成3 段。利用这三段的长度可计算出重组质粒 pET-28a（+）-kit
的总长度为1000bp+2000bp+700bp=3700bp，由于kit 基因与长度为170bp 片段进行置换，设kit 基因长度
为n，可列出等式：3550+n-170=3700bp，故可计算出kit 基因长度为n=320bp。
（4）PCR 的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。若结果出现大量杂带即获得的产物有非目的DNA 序列，
原因可能是：模板受到污染，里面混有其他DNA；引物的特异性不强，与非目的序列结合；复性温度偏低，
导致引物特异性降低；Mg2+浓度过高，导致PCR 特异性不强等。
20
