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实验室常用培养基配方合集

实验室常用培养基配方合集

(可直接保存转发,生物/微生物实验通用版)

一、细菌通用培养基

1. LB 培养基(大肠杆菌最常用)

液体 LB

• 胰蛋白胨:10 g/L

• 酵母提取物:5 g/L

• NaCl:10 g/L

• 用去离子水定容至 1 L

• pH 调至 6.8–7.2

• 灭菌:121℃,15–20 min

LB 固体(平板)

• 在上述液体配方基础上加 琼脂粉 15 g/L

2. 2×YT 培养基(菌体密度更高,提质粒/蛋白常用)

• 胰蛋白胨:16 g/L

• 酵母提取物:10 g/L

• NaCl:5 g/L

• 定容 1 L,pH 6.8–7.2

• 灭菌:121℃,15–20 min

3. SOC 培养基(感受态细胞复苏专用)

• 胰蛋白胨:20 g/L

• 酵母提取物:5 g/L

• NaCl:0.5 g/L

• 1 M KCl:2.5 mL

• 定容后调 pH 7.0

• 灭菌后冷却至 60℃ 以下加入:

◦ 2 M MgCl₂:5 mL

◦ 1 M 葡萄糖:20 mL
二、筛选与抗性培养基(通用添加量)

以下均为灭菌后冷却加入,不可高温灭菌:

• 氨苄青霉素 Amp:100 μg/mL

• 卡那霉素 Kan:50 μg/mL

• 氯霉素 Cm:25–34 μg/mL

• 四环素 Tet:10–15 μg/mL

• IPTG(诱导):0.1–1 mM

• X-gal(蓝白斑):20–40 μg/mL
三、酵母培养基

YPD 培养基(酿酒酵母通用)

液体 YPD

• 酵母提取物:10 g/L

• 蛋白胨:20 g/L

• 葡萄糖:20 g/L

• 定容 1 L,自然 pH 约 5–6,一般不调

• 灭菌:115℃,15–20 min(防糖焦化)

YPD 固体

• 加琼脂粉 20 g/L

YNB 基础培养基(营养缺陷型筛选用)

• YNB 粉末:6.7 g/L

• 葡萄糖:20 g/L

• 定容 1 L,过滤除菌或 115℃ 灭菌

• 根据菌株需求添加相应氨基酸/营养缺陷混合物
四、真菌/霉菌培养基

PDA 马铃薯葡萄糖琼脂(霉菌、真菌通用)

• 马铃薯(去皮):200 g

◦ 切片煮沸 20–30 min,纱布过滤取汁

• 葡萄糖:20 g/L

• 琼脂:15–20 g/L

• 定容 1 L,自然 pH 约 5–6

• 灭菌:115–121℃,15–20 min
五、放线菌培养基

高氏一号培养基

• 可溶性淀粉:20 g/L

• KNO₃:1 g/L

• K₂HPO₄:0.5 g/L

• MgSO₄·7H₂O:0.5 g/L

• NaCl:0.5 g/L

• FeSO₄·7H₂O:0.01 g/L

• 琼脂:15–20 g/L

• pH 调至 7.2–7.4

• 灭菌:121℃,15–20 min
六、基础无机盐 / 缓冲液(实验必用)

1. PBS 缓冲液(pH 7.4)1 L

• NaCl:8 g

• KCl:0.2 g

• Na₂HPO₄:1.44 g

• KH₂PO₄:0.24 g

• 定容 1 L,pH 7.4

2. 1 M Tris-HCl(pH 8.0)

• Tris 碱:121.1 g

• 溶于 800 mL 水

• 浓 HCl 调 pH 至 8.0

• 定容 1 L
七、配培养基避坑要点

1. pH 偏差 0.3 以上,菌大概率不长或长不好

2. 含糖培养基尽量 115℃ 灭菌,防止焦化抑制生长

3. 抗生素、IPTG、葡萄糖必须灭菌冷却后加

4. 倒平板温度 50–60℃ 最合适,太烫杀抗性,太凉结块

5. 液体摇瓶装液量不超过 1/2,保证溶氧

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