实验室常用培养基配方合集
(可直接保存转发,生物/微生物实验通用版)
一、细菌通用培养基
1. LB 培养基(大肠杆菌最常用)
液体 LB
• 胰蛋白胨:10 g/L
• 酵母提取物:5 g/L
• NaCl:10 g/L
• 用去离子水定容至 1 L
• pH 调至 6.8–7.2
• 灭菌:121℃,15–20 min
LB 固体(平板)
• 在上述液体配方基础上加 琼脂粉 15 g/L
2. 2×YT 培养基(菌体密度更高,提质粒/蛋白常用)
• 胰蛋白胨:16 g/L
• 酵母提取物:10 g/L
• NaCl:5 g/L
• 定容 1 L,pH 6.8–7.2
• 灭菌:121℃,15–20 min
3. SOC 培养基(感受态细胞复苏专用)
• 胰蛋白胨:20 g/L
• 酵母提取物:5 g/L
• NaCl:0.5 g/L
• 1 M KCl:2.5 mL
• 定容后调 pH 7.0
• 灭菌后冷却至 60℃ 以下加入:
◦ 2 M MgCl₂:5 mL
◦ 1 M 葡萄糖:20 mL
二、筛选与抗性培养基(通用添加量)
以下均为灭菌后冷却加入,不可高温灭菌:
• 氨苄青霉素 Amp:100 μg/mL
• 卡那霉素 Kan:50 μg/mL
• 氯霉素 Cm:25–34 μg/mL
• 四环素 Tet:10–15 μg/mL
• IPTG(诱导):0.1–1 mM
• X-gal(蓝白斑):20–40 μg/mL
三、酵母培养基
YPD 培养基(酿酒酵母通用)
液体 YPD
• 酵母提取物:10 g/L
• 蛋白胨:20 g/L
• 葡萄糖:20 g/L
• 定容 1 L,自然 pH 约 5–6,一般不调
• 灭菌:115℃,15–20 min(防糖焦化)
YPD 固体
• 加琼脂粉 20 g/L
YNB 基础培养基(营养缺陷型筛选用)
• YNB 粉末:6.7 g/L
• 葡萄糖:20 g/L
• 定容 1 L,过滤除菌或 115℃ 灭菌
• 根据菌株需求添加相应氨基酸/营养缺陷混合物
四、真菌/霉菌培养基
PDA 马铃薯葡萄糖琼脂(霉菌、真菌通用)
• 马铃薯(去皮):200 g
◦ 切片煮沸 20–30 min,纱布过滤取汁
• 葡萄糖:20 g/L
• 琼脂:15–20 g/L
• 定容 1 L,自然 pH 约 5–6
• 灭菌:115–121℃,15–20 min
五、放线菌培养基
高氏一号培养基
• 可溶性淀粉:20 g/L
• KNO₃:1 g/L
• K₂HPO₄:0.5 g/L
• MgSO₄·7H₂O:0.5 g/L
• NaCl:0.5 g/L
• FeSO₄·7H₂O:0.01 g/L
• 琼脂:15–20 g/L
• pH 调至 7.2–7.4
• 灭菌:121℃,15–20 min
六、基础无机盐 / 缓冲液(实验必用)
1. PBS 缓冲液(pH 7.4)1 L
• NaCl:8 g
• KCl:0.2 g
• Na₂HPO₄:1.44 g
• KH₂PO₄:0.24 g
• 定容 1 L,pH 7.4
2. 1 M Tris-HCl(pH 8.0)
• Tris 碱:121.1 g
• 溶于 800 mL 水
• 浓 HCl 调 pH 至 8.0
• 定容 1 L
七、配培养基避坑要点
1. pH 偏差 0.3 以上,菌大概率不长或长不好
2. 含糖培养基尽量 115℃ 灭菌,防止焦化抑制生长
3. 抗生素、IPTG、葡萄糖必须灭菌冷却后加
4. 倒平板温度 50–60℃ 最合适,太烫杀抗性,太凉结块
5. 液体摇瓶装液量不超过 1/2,保证溶氧
夜雨聆风