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第40 讲 动物细胞工程
目录
01 课标达标练
【题型一】动物细胞培养
【题型二】动物细胞融合技术与单克隆抗体
【题型三】动物体细胞核移植技术
02 能力突破练(新角度+新情境+新考法)
03 高考溯源练(含2025 年高考真题)
题型一 动物细胞培养
1.细胞复苏是动物细胞培养中的重要环节,CO2培养箱是不可或缺的关键设备。下列关于CO2培养箱为细
胞生长提供条件的叙述,错误的是( )
A.适宜的温度
B.适宜的湿度
C.5%CO2和95%O2的气体
D.无菌、无毒的空间
2.将人眼睑成纤维细胞传代培养后形成支架,在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞,并培养形成上皮细
胞片层,分离得到的片层可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及( )
A.制备细胞悬液
B.置于CO2培养箱在适宜条件下培养
C.定期更换培养液
D.用胰蛋白酶处理后分离获得上皮细胞片层
3.某动物细胞培养过程中,细胞贴壁生长至接触抑制时,需分装培养,实验操作过程如图。下列叙述错
误的是( )
A.图中所示过程为原代培养
B.①中消化液不可以替换成胃蛋白酶
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C.②中培养液需加入血清,有利于促进细胞增殖
D.若细胞不再出现接触抑制,细胞可能发生了癌变
4.动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( )
A.动物细胞培养的原理是细胞的全能性
B.正常细胞体外培养都具有贴壁生长的特点
C.动物细胞培养基中添加的动物血清需过滤除菌
D.传代培养的动物细胞都会获得不死性,可无限增殖
5.饲养细胞是指一些在体外培养中不分裂,但仍然保持代谢活性的细胞。在体外进行特定的动物细胞培
养前,会先在培养基铺上一层饲养细胞,这些细胞能够分泌生长因子和其他必要的营养物质,支持目的细
胞的生长。一旦培养基中目的细胞达到一定数量,饲养细胞便会逐渐死亡。下列说法正确的是(
)
A.动物细胞培养基中除了合成成分,还需要加入动物血液等天然成分
B.动物细胞培养过程中加入的CO2是为了抑制呼吸作用,减少有机物消耗
C.饲养细胞可能经过了分裂抑制剂的处理
D.传代培养时,需要去除饲养细胞,否则将干扰目的细胞分离
题型二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
6.下列关于单克隆抗体制备的叙述中,错误的是( )
A.用特定抗原免疫小鼠后,可从小鼠脾脏中获取能产生相应抗体的B 淋巴细胞
B.B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后,需在特定的选择培养基中筛选杂交瘤细胞
C.杂交瘤细胞经过克隆化培养和抗体检测,可获得产生所需抗体的细胞株
D.最终分离筛选出的每一种杂交瘤细胞都可以产生针对多种病原体的抗体
7.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,常作为女性是否怀孕的
检测指标。某科研人员将小鼠B 细胞和骨髓瘤细胞融合后,经过筛选获得能稳定分泌抗HCG 单克隆抗体的
杂交瘤细胞。下列相关分析正确的是( )
A.从注射过HCG 的小鼠脾脏中获取能大量增殖的B 淋巴细胞
B.该过程涉及到的技术利用的原理有细胞膜的流动性和细胞增殖等
C.B 细胞与骨髓瘤细胞融合后经一次筛选即可得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞
D.将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养或在体外条件下大规模培养
8.下图是制备抗白细胞介素-6(IL-6)单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是( )
A.步骤①给小鼠注射IL-6 后,应从脾中分离筛选T 淋巴细胞
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B.步骤②能分离出大量产生相同抗体的单一淋巴细胞
C.步骤③加入灭活病毒或PEG 诱导细胞融合,体现了细胞膜的流动性
D.步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
9.酶联免疫吸附技术是临床上常用的快速检测病原体感染的技术,可用于测定抗原、抗体。该技术测定
抗原的工作原理如下图所示,有关叙述错误的是( )
A.该技术中用到的固相抗体和酶标抗体均可来自杂交瘤细胞
B.固相抗体和酶标抗体会竞争性结合抗原
C.若要检测患者是否产生了相应抗体,需将抗原固定在载体上
D.反应后,检测到的有色产物越多,说明患者感染情况越严重
10.某病毒S 蛋白含有多种抗原决定簇。科研人员利用该病毒康复者血清中的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融
合,获得了能分泌抗S 蛋白抗体的杂交瘤细胞,用于制备抗S 蛋白的单克隆抗体。下列说法错误的是(
)
A.康复者血清中的B 淋巴细胞在体外培养条件下不能大量增殖
B.可用灭活的病毒诱导B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
C.体外培养杂交瘤细胞时通入5%CO2的主要作用是维持培养液pH
D.经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接大规模培养生产目标抗体
题型三 动物体细胞核移植技术
11.引起人对猫过敏的主要过敏原是猫唾液中的Feld1 蛋白。某公司通过基因编辑敲除猫成纤维细胞的
Feld1 基因,再经体细胞核移植等技术培育低过敏宠物猫,过程如下图所示。此过程中不涉及的操作是(
)
A.筛选敲除Feld1 基因的成纤维细胞
B.卵母细胞的采集、培养和去核处理
C.使用物理或化学方法激活重构胚
D.移植前对供受体母猫进行配型检测
12.克隆猴“中中”和“华华”的诞生过程如图所示,下列说法错误的是( )
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A.它们的诞生应用的是克隆技术
B.它们的形态应与A 猴相同
C.它们是由受精卵发育来的
D.该实验说明细胞核是细胞的控制中心
13.核移植技术除了研究生物学的基本问题外,在药物生产、优良种畜的培育和繁殖、拯救濒危动物、治
疗性克隆等方面,具有重要的实际应用价值。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述,错误的是
( )
A.细胞核移植技术可用于优良种畜的培育
B.细胞核移植技术的原理是动物细胞具有全能性
C.核移植技术与干细胞诱导技术结合,可用于修补人体损伤的器官
D.核移植技术可用于转基因动物的克隆,以保持转基因动物的性状
14.2017 年,某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请,其培育过程可选用如下技术
路线。下列叙述错误的是( )
A.由图可知,三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、动物细胞培养等技术
B.母亲携带的红绿色盲基因不会遗传给“三亲婴儿”
C.采集的精子必须经过获能处理后,才能用于体外受精
D.“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
15.治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图为治疗性克隆的过程,有关叙述错误的是
( )
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A.细胞A 常采用去核的卵母细胞
B.动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体
C.胚胎干细胞分化为不同细胞的过程中发生了基因的选择性表达
D.该治疗过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术
1.
(2025·云南·二模)微生物菌种的高通量筛选使用含有多个小孔的微孔板为载体,结合灵
敏、快速的检测仪器,实现了在同一时间对成千上万份菌株样品进行筛选。下列叙述错误的是(
)
A.微孔板中加入特定的选择培养基可用来筛选能否产生抗体的杂交瘤细胞
B.若用微孔板培养杂交瘤细胞,需先进行稀释处理,才能用于筛选目的杂交瘤细胞
C.筛选对象可以是从自然界分离、诱变产生或通过生物技术改造的菌株
D.除了微生物菌种的高通量筛选,高通量筛选还可以用于微生物药物的筛选
2.(2025·云南·二模)某科研团队利用动物细胞工程技术构建肝脏类器官,用于药物毒性检测,其流
程为:诱导小鼠多能干细胞(iPS 细胞)分化为多种类型肝细胞→三维培养构建出具有生理功能的肝脏类
器官→置于不同浓度的待测药物中,检测细胞活力、肝细胞内相关酶活性等指标。下列相关叙述正确的是
( )
A.iPS 细胞分裂能力强,体外培养时会细胞贴壁且不发生接触抑制
B.三维培养获得肝脏类器官所使用的气体环境通常为95%空气和5%CO2
C.应增设“肝脏类器官+不含待测药物的生理盐水”组,排除无关变量干扰
D.若培养液中谷丙转氨酶活性显著升高,则说明该药物对肝脏毒性较弱
3.
(2025·湖南永州·一模)伤寒沙门氏菌的致病毒素是其细胞壁外的脂多糖(LPS)。研发
LPS 疫苗时常用多肽模拟LPS,两者相似程度越高,多肽与LPS 竞争抗体的能力越强。科研人员用抗LPS 单
克隆抗体分别鉴定了多肽A、B 与LPS 抗原的相似程度,部分实验步骤如图a,结果如图b。下列叙述正确
的是( )
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A.抗LPS 单克隆抗体的制备应从小鼠的血液中获得骨髓瘤细胞
B.与多肽结合的抗体在过程Ⅲ中会被洗脱下来
C.据图分析可知,用多肽B 模拟LPS 的效果较好
D.将筛选出的多肽注射到小鼠体内可激发细胞免疫和体液免疫
4.(2025·湖南永州·一模)分离患者自身的树突状细胞(DC 细胞)及杀伤细胞(CIK),二者经诱导、
培养及肿瘤抗原活化后回输患者体内。处理后,成熟DC 细胞能有效激活细胞毒性T 细胞,成熟CIK 可直接
识别并杀伤肿瘤细胞。下列叙述正确的是( )
A.体外培养细胞时,培养基需要置于含95%O2和5%CO2的气体环境
B.DC 细胞和B 细胞都具有摄取和加工处理抗原的能力
C.不同的CIK 回输患者体内可以识别多种肿瘤细胞,但会引起免疫排斥反应
D.活化的细胞毒性T 细胞清除肿瘤细胞体现了免疫系统的防御功能
5.(2025·宁夏·二模)动物细胞培养是动物细胞工程的基础,培养过程中,动物组织经处理后的初次
培养称为原代培养,分瓶之后的培养称为传代培养。下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是( )
A.无论原代培养还是传代培养,大多数细胞是悬浮在培养液中生长增殖的
B.进行分瓶培养的原因之一是贴壁细胞发生接触抑制
C.动物细胞培养液中可添加抗生素防止杂菌生长
D.进行动物细胞培养需将培养液的pH 调至7.2-7.4
6.
(2025·河北·三模)甲型H1N1 流感病毒表面的神经氨酸酶有4 个抗原决定簇,一种抗原
决定簇只能刺激机体产生一种抗体(Ab)。由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体。如图
为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图,下列叙述正确的是( )
A.诱导B 细胞和骨髓瘤细胞融合不能使用灭活病毒诱导法
B.①②可用相同的选择培养基培养,用相同的方法筛选
C.多克隆抗体的产生需要多种B 细胞参与
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D.甲型H1N1 流感病毒部分抗原结构改变后,会出现多抗失效而单抗有效的情况
7.(2025·宁夏吴忠·一模)饲养细胞是指一些在体外培养中不分裂,但仍然保持代谢活性的细胞。在
体外进行特定的动物细胞培养前,会先在培养基铺上一层饲养细胞,这些细胞能够分泌生长因子和其他必
要的营养物质,支持目的细胞的生长。一旦培养基中目的细胞达到一定数量,饲养细胞便会逐渐死亡。下
列说法正确的是( )
A.动物细胞培养基中除了合成成分,还需要加入动物血液等天然成分
B.动物细胞培养过程中加入的CO2是为了抑制呼吸作用,减少有机物消耗
C.饲养细胞可能经过了分裂抑制剂的处理
D.传代培养时,需要去除饲养细胞,否则将干扰目的细胞分离
8.
(以3,4-DCQA 为情境)随着咖啡消费水平的不断提高,咖啡内含物的生物活性功能越来越
备受关注。二咖啡酰奎宁酸(3,4-DCQA)是咖啡的主要活性成分。有研究表明,3,4-DCQA 能够抑制心肌
细胞凋亡。某研究小组进一步进行了3,4-DCQA 对心肌细胞凋亡影响的探究实验(其中TBHP 能够诱导心肌
细胞凋亡),部分实验数据如图所示。下列有关说法错误的是( )
A.进行心肌细胞培养时,可用胰蛋白酶处理心肌组织
B.Caspase-3、Bax 基因高表达可能有利于抑制细胞增殖、促进细胞凋亡
C.当3,4-DCQA 的浓度为10μM 时,对TBHP 诱导后细胞能起到一定的抗凋亡效果
D.3,4-DCQA 最优给药浓度为160μM 左右,当给药浓度超过160μM 时抗凋亡能力下降,可能与大剂量
使用产生的细胞毒性有关
9.
(以ADC 为情境)为降低乳腺癌化疗副作用,科研人员在单克隆抗体技术基础上构建抗体-
药物偶联物(ADC),ADC 通常由单克隆抗体、接头和药物组成,制备和治疗过程如图1 和2。已知细胞合
成DNA 有D 和S 两条途径,其中D 途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠淋巴细胞中有这两种途径,但一般不分裂,
而骨髓瘤细胞中没有S 途径,却能分裂。下列叙述错误的是( )
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A.图1 过程对小鼠进行免疫处理后,应该从该小鼠的脾脏中获取B 淋巴细胞
B.若①是在含氨基蝶呤试管中促融,只考虑两两融合,则管中能增殖的细胞只有2 种
C.图1 中a 和b 分别是单克隆抗体和药物,两部分通过接头结合在一起,从而获得ADC
D.图2 中ADC 进入癌细胞后,细胞中的溶酶体可将其水解,释放出药物最终作用于细胞核
10.(2025·河北保定·三模)随着再生医学的发展,科学家尝试利用细胞工程技术培育人造器官用于器
官移植。下图是人造肝脏培育的部分过程,相关叙述错误的是( )
A.从患者肝脏组织中获取肝脏干细胞时,需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块,使细胞分散
B.培养肝脏干细胞时,加入的细胞因子和生长因子只能促进细胞的增殖,不能诱导细胞分化
C.培养肝脏干细胞的培养液中需添加血清等天然成分,主要为细胞提供一些未知的营养成分
D.该技术为解决器官移植供体短缺问题提供了新的途径和希望
1.(2025·江西·高考真题)诱导多能干细胞(ips 细胞)在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利
用多种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞,成功获得ips 细胞。下列叙述错误的是( )
A.小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B.小鼠胎儿成纤维细胞形成ips 细胞的过程属于细胞分化
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C.利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D.培养小鼠胎儿成纤维细胞和ips 细胞时需提供一定浓度的CO2
2.(2025·广西·高考真题)科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因(GT)的NDV 病毒靶向感染人体内癌
细胞,从而强烈激活免疫系统,起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是( )
A.培养体外实验使用的癌细胞时,通常需添加血清
B.感染NDV-GT 的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬
C.经NDV-GT 方法治愈的患者,体内不存在能识别GT 蛋白的免疫细胞
D.人体正常细胞若被感染并表达了GT,不会被免疫系统识别为“非己”成分
3.(2025·贵州·高考真题)下图为PML 蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是( )
A.应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间
B.W 细胞是先提取B 淋巴细胞再用PML 蛋白免疫而获得
C.步骤2 的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞
D.应选择孔2 中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体
4.(2025·甘肃·高考真题)肿瘤坏死因子α(TNF-α)是一种细胞因子,高浓度时可以引发疾病。研
究者利用细胞工程技术制备了TNF-α 的单克隆抗体,用于治疗由TNF-α 引发的疾病,制备流程如下图。
下列叙述正确的是( )
A.①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞
B.②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞
C.③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞
D.④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测
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5.(2025·广东·高考真题)将人眼睑成纤维细胞传代培养后,再培养形成支架,在该支架上接种人口
腔黏膜上皮细胞,培养一段时间后分离获得上皮细胞片层,可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及(
)
A.制备细胞悬液
B.置于
等适宜条件下培养
C.离心收集细胞
D.用胰蛋白酶消化支架后分离片层
6.(2025·湖北·高考真题)利用犬肾细胞MDCK 扩增流感病毒,生产流感疫苗,具有标准化、产量高等
优点。但MDCK 细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大,严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选,
成功获得一种无成瘤性的(多代培养不会癌变)、可悬浮培养的MDCK 细胞——XF06.下列叙述错误的是(
)
A.XF06 悬浮培养可提高细胞密度,进而提升生产效率
B.细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致
C.可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D.采用无成瘤性细胞生产疫苗,是为了避免疫苗中有致瘤DNA 的污染
7.(2025·北京·高考真题)动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时,调控pH 的CO2耗尽,培养基
转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是( )
A.必需氨基酸
B.抗生素
C.酸碱指示剂
D.血清
8.(2024·福建·高考真题)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒,
该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是( )
A.该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术
B.该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合
C.该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤
D.该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测
9.(2024·海南·高考真题)海南龙血树具有药用和观赏价值,可利用植物组织培养技术产生愈伤组织,
进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B 淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞,
进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述,正确的是( )
A.利用的原理均是细胞的全能性
B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清
C.培养时的温度和pH 均相同
D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
10.(2024·江苏·高考真题)我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞,再用小分子TH34 成功诱导衍
生成胰岛B 细胞。下列相关叙述错误的是( )
A.基因选择性表达被诱导改变后,可使体细胞去分化成多能干细胞
B.在小分子TH34 诱导下,多能干细胞发生基因突变,获得胰岛素基因
C.衍生的胰岛B 细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素,才可用于移植治疗糖尿病
D.若衍生的胰岛B 细胞中凋亡基因能正常表达,细胞会发生程序性死亡
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