夜雨聆风
【2026年南方台江苏专用教辅电子版生物多选培优word讲义第11单元第58讲DNA相关的两个重要实验
【课标要求】 1.实验：DNA的提取与鉴定； 2.实验：利用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定或运用软件进行虚拟PCR实验。
实验17 DNA的粗提取与鉴定
实 验 回 归
1. 实验思路、原理
(1)提取的基本思路：DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异，利用这些差异，对DNA进行提取。
(2)相关原理
2. 材料选择
(1)依据：选用DNA含量高的组织，成功的可能性更大。
(2)常用材料：新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花、鸡血和猪肝等(方法可能稍有不同)。
3. 实验过程
解 疑 释 惑
(1)研磨液的成分和作用
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研磨液成分 |
作用 |
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SDS |
使蛋白质变性 |
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EDTA |
抑制DNA酶 |
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Tris－HCl缓冲液 |
稳定DNA |
(2)研磨的目的：破碎细胞，使核物质容易溶解在研磨液中。
(3)低温放置几分钟(或酒精预冷)的作用：①可抑制核酸水解酶的活性，进而抑制DNA降解；②抑制DNA分子运动，使DNA易形成沉淀析出；③低温有利于增加DNA的柔韧性，减少其断裂。
(4)搅拌时应轻缓、并沿一个方向的目的：减少DNA断裂，以便获得较完整的DNA分子。
(5)思考：教材为什么将DNA粗提取实验安排在基因工程部分？
提示：PCR需要的模板就是从细胞中提取的。(科研人员提取DNA的技术更高，无论实验室操作还是科研人员操作，都要尽可能提纯并保证DNA的完整性。)
实 验 延 伸
用鸡血细胞作为实验材料的操作流程(苏教版)
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步骤 |
材料/方法 |
说明 |
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制备 鸡血 细胞液 |
新鲜鸡血 |
哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核(或不含有DNA)，故不选用哺乳动物的血液作为高中DNA提取的材料 |
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提取 血细胞 核物质 |
加入一定量的蒸馏水，破碎细胞，并用玻璃棒搅拌，过滤，获取含有DNA的滤液 |
细胞吸水涨破，玻璃棒搅拌加速细胞破裂 |
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析出 DNA |
①取滤液加入物质的量浓度为2 mol·L－1的NaCl溶液； ②缓缓加入一定量的蒸馏水，调节物质的量浓度至0.14 mol·L－1，析出DNA，丝状物不再增加时停止加蒸馏水； ③用玻璃棒挑起丝状物，获得含一定杂质的DNA |
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 |
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向滤液中加入等体积的、冷却的体积分数为95%的酒精，静置2～3 min，并用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起白色丝状物DNA |
酒精能够减少DNA的降解，同时也能够溶解杂质 |
一、实验基本理论——实验变量与原则
取两支20 mL的试管，各加入2 mol·L－1的NaCl溶液5 mL。将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中。然后，向两支试管中各加入4 mL 的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min。待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
1. 上述实验中，自变量是丝状物或沉淀物的有无，因变量是溶液颜色，无关变量是2_mol·L－1的NaCl溶液、二苯胺试剂和沸水及加热5_min等。
2. 实验遵循的原则：两支20 mL的试管说明实验需要分组,2 mol·L－1的NaCl溶液5 mL、4 mL的二苯胺试剂和沸水中加热5 min中的数字则说明实验要遵循等量原则，“将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中”则说明实验需遵循单一变量原则。
二、试剂的选择和使用
1. 使用鸡血提取DNA时，需在鸡血中加入柠檬酸钠，目的是防止血液凝固；在鸡血细胞溶液中加入蒸馏水，目的是使鸡血细胞破裂。
2. 使用洋葱提取DNA时，需要加入研磨液，研磨液能够防止DNA被水解，另外有利于蛋白质与DNA发生分离。
3. DNA在物质的量浓度为0.14mol·L－1的NaCl溶液中溶解度最低。使用体积分数为95%的冷却酒精可使DNA析出(填“析出”或“溶解”)。
4. 此实验中二苯胺试剂的作用是鉴定DNA，需要现配现用。
题 组 运 用
1. (2024·安徽卷)下列关于“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是(D)
A．实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低
B．利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA
C．DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，该原理可用于纯化DNA粗提物
D．将溶解的DNA粗提物与二苯胺试剂反应，可检测溶液中是否含有蛋白质杂质
【解析】研磨液有利于DNA的溶解，换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低，A正确；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可据此分离DNA，B正确；DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl浓度的变化而改变，因此可用不同浓度的NaCl溶液对DNA粗提物进行纯化，C正确；在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺试剂会产生蓝色，二苯胺试剂用于鉴定DNA，不能检测溶液中是否含有蛋白质杂质，D错误。
2. (2024·山东卷)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是(A)
A．整个提取过程中可以不使用离心机
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