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2025 年高考押题预测卷02
生物·全解全析
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号等填写在答题卡和试卷指定位置上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用
橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回
一、选择题：本题共16 小题，每小题3 分，共48 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要
求。
1．草履虫、衣藻、乳酸菌和眼虫都是单细胞生物，其中眼虫有叶绿体、无细胞壁、有鞭毛。尽管它们的
大小和形状各不相同，但它们都有相似的结构。下列相关叙述正确的是（ ）
A．草履虫的细胞骨架与物质运输密切相关，其与细胞膜的基本支架均可被蛋白酶水解
B．衣藻与乳酸菌共有的细胞结构都是由蛋白质和DNA 构成的
C．乳酸菌能连续分裂与细胞中的端粒酶活性高有关
D．眼虫可能是与植物、动物的共同祖先很接近的生物
【答案】D
【分析】草履虫是低等单细胞动物，衣藻是低等的单细胞植物，草履虫、衣藻和眼虫均属于真核生物，具
有的细胞结构有细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核，眼虫具有叶绿体，能进行光合作用；细菌是原核生物,
由原核细胞构成，结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核。
【详解】A.草履虫的细胞骨架主要由微管、微丝和中间丝组成，这些结构与物质运输有关，细胞膜的基本
支架是磷脂双分子层，磷脂分子不会被蛋白酶水解，A 错误；
B.衣藻是真核生物，乳酸菌是原核生物，真核生物和原核生物都含有DNA 和蛋白质，但它们的细胞结构有
所不同，二者的细胞结构不仅由DNA 和蛋白质构成，还含有RNA、磷脂等物质，B 错误；
C.乳酸菌属于原核生物，原核生物不含有染色体，端粒酶作用于端粒，故端粒是位于染色体末端的一段特
殊序列，C 错误；
D.眼虫是一种单细胞生物，具有叶绿体，可以进行光合作用，同时没有细胞壁，有鞭毛，可以运动。这些
特征表明眼虫具有植物和动物的一些共同特征，因此它可能是与植物、动物的共同祖先很接近的生物，D
正确。
故选D。
2．纤维素合酶（CesA）定位于质膜上，催化纤维素的合成。通过实验发现，改变CesA 的第540 位天冬氨
1
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酸、第742 位天冬氨酸、第784 位色氨酸会导致CesA 活性明显降低，影响棉花的产量。下列叙述错误的是
（ ）
A．由葡萄糖组成的纤维素是植物细胞壁的组成成分
B．氨基酸分子在核糖体上脱水缩合，形成CesA 的肽链结构
C．第540、742、784 位氨基酸改变不会影响CesA 的空间结构
D．可通过蛋白质工程提高CesA 的活性，提高棉花纤维的品质
【答案】C
【分析】植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶。纤维素的基本组成单位是葡萄糖。
【详解】A、纤维素由葡萄糖组成，是植物细胞壁的组成成分，A 正确；
B、纤维素合酶（CesA）由氨基酸组成，氨基酸分子在核糖体上脱水缩合，形成CesA 的肽链结构，B 正确；
C、改变CesA 的第540 位天冬氨酸、第742 位天冬氨酸、第784 位色氨酸会导致CesA 的活性明显降低，说
明第540、742、784 位氨基酸改变会影响CesA 的空间结构，C 错误；
D、对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的，可通过蛋白质工程提高CesA 活性，提高棉花
纤维的品质，D 正确。
故选C。
3．正常重力环境中，成骨细胞分泌的前列腺素E2（PGE2）与感觉神经元上的受体EP4 结合，将信号传入
下丘脑抑制某类交感神经活动，调节成骨细胞的增殖，促进骨生成以维持骨量稳定。长时间航天飞行会使
宇航员骨量下降。下列有关分析正确的是（ ）
A．PGE2 与EP4 的合成过程均发生在内环境中
B．PGE2 与EP4 的结合会抑制成骨细胞的增殖
C．长时间航天飞行会使宇航员成骨细胞分泌PGE2 增加
D．使用抑制该类交感神经活动的药物有利于宇航员骨量恢复
【答案】D
【分析】自主神经系统包括交感神经和副交感神经。交感神经和副交感神经是调节人体内脏功能的神经装
置，所以也叫内脏神经系统，因为其功能不完全受人类的意识支配，所以又叫自主神经系统，也可称为植
物性神经系统。
【详解】A、PGE2 是细胞分泌的神经递质，EP4 是神经上的受体，这两个物质的合成场所都是在细胞内完
成的，不属于内环境，A 错误；
B、PGE2 与EP4 结合后传入下丘脑抑制某类交感神经活动，促进骨生成以维持骨量稳定，因此可知PGE2 与
EP4 的结合会促进成骨细胞的增殖，B 错误；
C、长时间航天飞行会导致宇航员骨量下降，而不是通过增加PGE2 的分泌来尝试维持骨量，C 错误；
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D、根据题意，交感神经活动的抑制有助于促进骨生成以维持骨量稳定，抑制交感神经活动的药物可能有
助于宇航员在长时间航天飞行后恢复骨量，D 正确。
故选D。
4．盐胁迫下，根细胞膜的磷脂分子PA 迅速聚集并与蛋白激酶SOS2 结合，促使SOS2 与钠氢转运蛋白SOS1
结合并将其激活，同时使钙结合蛋白SCaBP8 磷酸化，最终维持植物体内Na+/K+平衡从而抵御盐胁迫，其
调节机制如图。下列叙述正确的是（ ）
A．K+进入根细胞需要与AKT1 的特定部位结合
B．PA 是细胞膜的组成成分，不能作为信号分子起调节作用
C．磷酸化的SCaBP8 导致细胞中K+浓度增大
D．SOS1 激活后降低了膜两侧的Na+浓度差
【答案】C
【分析】1、自由扩散的特点是顺浓度梯度，与膜内外物质浓度梯度有关，不需要载体蛋白协助，不消耗
能量。
2、协助扩散的特点是顺浓度梯度，与膜内外物质浓度梯度有关，还需要膜上的转运蛋白的协助，不消耗
能量。
3、主动运输的特点是逆浓度梯度，需要载体蛋白协助，需要消耗能量。
【详解】A、AKT1 为通道蛋白，通道蛋白运输物质时，不需要与所运输的物质结合，A 错误；
B、盐胁迫时，磷脂分子PA 迅速聚集并与蛋白激酶SOS2 结合，促使SOS2 激活钠氢转运蛋白SOS1，该过程
中PA 作为信号分子起调节作用，B 错误；
C、SCaBP8 抑制AKT1 对K+的运输，SCaBP8 的磷酸化导致其结构改变，解除了对AKT1 的抑制作用，AKT1
将K+从膜外运输到膜内，导致细胞内K+浓度增大，C 正确；
D、SOS1 逆浓度梯度运输Na+增大了膜两侧Na+的浓度差，D 错误。
故选C。
3
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5．研究发现，玉米是由墨西哥蜀黍驯化形成的，两者可以杂交，且后代全部可育。经基因分析发现，两
者表型的显著差异是由少量基因不同导致。下列叙述正确的是（ ）
A．玉米比墨西哥蜀黍更适应自然环境
B．驯化导致墨西哥蜀黍发生定向突变
C．玉米和墨西哥蜀黍没有出现生殖隔离D．玉米和墨西哥蜀黍的基因库完全不同
【答案】C
【分析】基因突变产生的等位基因，通过有性生殖过程中的基因重组，可形成多种多样的基因型，从而使
种群出现大量的可遗传变异，在自然选择的作用下，具有有利变异的个体有更多的机会产生后代，种群中
相应基因的频率会不断提高；相反，具有不利变异的个体留下后代的机会少，种群中相应基因的频率会下
降。因此，在自然选择的作用下，种群的基因频率会发生定向改变，导致生物朝着一定的方向不断进化。
【详解】A、虽然玉米是由墨西哥蜀黍驯化而来，但不能就此得出玉米比墨西哥蜀黍更适应自然环境。因
为驯化是在人类干预下进行的，其适应的是人类创造的种植等环境，而不是自然环境，在自然环境中墨西
哥蜀黍可能有其自身的适应性优势，A 错误；
B、突变是不定向的，驯化只是对具有人类需要性状的个体进行选择，而不是导致墨西哥蜀黍发生定向突
变，B 错误；
C、生殖隔离是指不同物种之间不能相互交配，或者即使交配成功，也不能产生可育的后代。 已知玉米和
墨西哥蜀黍可以杂交，且后代全部可育，这就说明它们没有出现生殖隔离，C 正确；
D、玉米是由墨西哥蜀黍驯化形成的，两者表型的显著差异只是由少量基因不同导致，说明它们有大量相
同的基因，基因库并不是完全不同，D 错误。
故选C。
6．猫唾液中的F 蛋白是一种常见的吸入性过敏原，由四条肽链组成，可刺激机体产生两类不同的抗体。F
蛋白的单克隆抗体有助于诊断F 蛋白引起的过敏反应。下列关于F 蛋白单克隆抗体制备过程的叙述，错误
的是（ ）
A．用F 蛋白对小鼠进行免疫，从该小鼠的脾中得到能产生F 蛋白抗体的B 淋巴细胞
B．将获得的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞用PEG 诱导融合后，经筛选能获得杂交瘤细胞
C．将筛选出的杂交瘤细胞混合培养，才可能筛选出产生F 蛋白抗体的杂交瘤细胞
D．成功筛选出的两类杂交瘤细胞在小鼠体内培养，产生的抗体均可与F 蛋白结合
【答案】C
【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B 细胞，将效应B 细
胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培
养），最后获取单克隆抗体。
【详解】A、用F 蛋白作为抗原对小鼠进行免疫，小鼠的免疫系统会识别F 蛋白，B 淋巴细胞受抗原刺激后
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会增殖分化，其中部分B 淋巴细胞能产生针对F 蛋白的抗体。从免疫后的小鼠脾中可以得到能产生F 蛋白
抗体的B 淋巴细胞，因为脾脏是免疫器官，是B 淋巴细胞集中分布和发挥免疫作用的场所之一，A 正确；
B、将获得的能产生抗体的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞用PEG（聚乙二醇）诱导融合。PEG 可以促进细胞融合，
形成多种融合细胞以及未融合的细胞。经过筛选（如用特定的选择培养基筛选），可以去除未融合的细胞
（B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞）以及同种细胞融合的细胞（如B 淋巴细胞-B 淋巴细胞融合细胞、骨髓瘤细胞-
骨髓瘤细胞融合细胞），从而获得杂交瘤细胞（B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞），B 正确；
D、因为不同的杂交瘤细胞可能产生不同的抗体，将筛选出的杂交瘤细胞并不是混合培养，而是要进行单
个细胞培养（克隆化培养），并对每个孔中的细胞进行抗体检测，才能筛选出产生F 蛋白抗体的杂交瘤细
胞，C 错误；
D、已知F 蛋白可刺激机体产生两类不同的抗体，成功筛选出的两类杂交瘤细胞在小鼠体内培养，产生的
抗体都是针对F 蛋白的，所以这两类抗体均可与F 蛋白结合，D 正确。
故选C。
7．江西广昌是“中国白莲之乡”。为了促进养殖结构的科学化，当地部分养殖户摸索出“莲鳖种养”的
模式：莲田里套养甲鱼，甲鱼喜阴，可以吃掉危害白莲的斜纹夜蛾和福寿螺等，甲鱼的粪便又成了白莲生
长的优质有机肥。下列叙述正确的是（ ）
A．莲田中的白莲和甲鱼等生物和阳光等非生物的物质与能量构成莲田生态系统的结构
B．白莲的数量受到温度、降水和福寿螺的捕食等非密度制约因素的影响
C．甲鱼粪便中的能量属于福寿螺等的同化量，流向白莲后有利于其增产
D．“莲鳖种养”模式利用了群落的空间结构，使白莲的能量更多地流向人类
【答案】D
【分析】生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构，组成成分又包括生产者、消费者、分解者
和非生物的物质和能量，营养结构包括食物链和食物网。生态农业是一个农业生态经济复合系统，将农业
生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益。建立该人工生态系统的目的是
实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染。
【详解】A、田中的白莲和甲鱼等生物和阳光等非生物的物质与能量，属于生态系统的组成成分，生态系
统的结构除了组成成分外，还包括营养结构，A 错误；
B、福寿螺对白莲的捕食属于密度制约因素，B 错误；
C、甲鱼粪便会被分解者分解，甲鱼粪便中的能量不会流向白莲，C 错误；
D、“莲鳖种养”模式属于立体农业，利用了群落的空间结构，能使白莲的能量更多地流向人类，D 正确。
故选D。
8．某农业科研团队在研究温室大棚番茄种植时发现，白天适度升温至32℃、夜间降温至10℃的条件下，
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番茄产量显著高于昼夜恒温25℃。下列分析正确的是（ ）
A．白天高温使气孔关闭，但参与CO2 固定的酶活性升高，CO2 固定速率不变
B．夜间低温导致细胞呼吸中丙酮酸转化为酒精的速率加快
C．昼夜温差增大导致叶片细胞中淀粉积累，反馈抑制光合作用
D．夜间低温减少了细胞呼吸消耗，同时促进光合产物向果实转运
【答案】D
【分析】光合作用，通常是指绿色植物（包括藻类）吸收光能，把二氧化碳和水合成富能有机物，同时释
放氧气的过程。光合作用分为光反应阶段和暗反应阶段。呼吸作用一般指机体将来自环境的或细胞自己储
存的有机营养物的分子（如糖类、脂类、蛋白质等），通过一步步反应降解成较小的、简单的终产物（如
二氧化碳、乳酸、乙醇等）的过程。光合与呼吸的差值可用净光合速率来表示，具体指标可以是单位时间
单位叶面积的氧气释放量、二氧化碳吸收量、有机物积累量等
【详解】A、白天高温可能导致气孔部分关闭（减少CO2 吸收），而 Rubisco 酶活性升高虽有利于暗反应，
但CO2 供应不足会成为限制因素，实际CO2 固定速率可能下降，A 错误；
B、番茄进行有氧呼吸，丙酮酸会进入线粒体彻底氧化分解，而非转化为酒精。酒精发酵仅在缺氧条件下
发生，题干未提及无氧环境，B 错误；
C、昼夜温差增大时，白天光合作用合成的有机物通过韧皮部更多转运至果实（库器官)，减少叶片淀粉积
累，从而避免对光合作用的反馈抑制，C 错误；
D、夜间低温降低呼吸酶活性，减少有机物消耗;同时低温可能增强细胞中蔗糖转运蛋白的活性，促进光合
产物向果实运输，D 正确。
故选D。
9．急性酒精性肝损伤是指在短期内大量饮酒造成体内产生大量活性氧，从而造成肝脏氧化损伤，而肝细
胞内光面内质网上有氧化酒精的酶。为探究某药食同源组合物对急性酒精性肝损伤的保护作用，某研究小
组将正常小鼠随机均分为空白对照组、模型组、给药组（低、高剂量），其中给药组是正常小鼠预防给药
一周后，再进行白酒灌胃。实验后检测结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
注：MDA（丙二醛），是机体内活性氧攻击生物膜后形成的脂质过氧化物；SOD（超氧化物歧化酶），能
够清除体内的超氧阴离子自由基；GSH-PX（谷胱甘肽过氧化物酶），分解过氧化物，保护细胞膜不受过氧
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化物的干扰及损害。
A．酒精可通过肝脏进行代谢的原因是肝细胞内光面内质网上有氧化酒精的酶
B．模型组需要对小鼠用白酒灌胃使其患急性酒精性肝损伤
C．MDA 的含量越高，肝细胞膜的损伤程度越严重
D．实验结果显示高剂量的药食同源组合物可用于治疗急性酒精性肝损伤
【答案】D
【分析】实验设计的一般步骤：分组编号→设置对照实验（给与不同的处理）→观察并记录实验结果（注
意保证无关变量的一致性）→得出结论。
【详解】A、肝细胞内光面内质网上有氧化酒精的酶，因此酒精可通过肝脏进行代谢，A 正确；
B、模型组的MDA 含量最高，SOD 和GSH-PX 的活性最低，说明其肝脏损伤最严重，该组小鼠应是用白酒灌
胃构建的急性酒精性肝损伤模型，B 正确；
C、由题干信息可知，MDA 是机体内活性氧攻击生物膜后形成的脂质过氧化物，故MDA 的含量越高，肝细
胞膜的损伤程度越严重，C 正确；
D、该实验的给药组小鼠是先给药预防，再制造急性酒精性肝损伤模型，实验结果只能证明药食同源组合
物对急性酒精性肝损伤具有较好的预防作用，D 错误。
故选D。
10．板栗树是一种深根性喜光树种，茶树是一种浅根性耐阴树种。某林场在板栗林里种植茶树，两种植物
的根系深浅搭配，板、茶两旺，提高了经济效益。下列相关叙述错误的是（ ）
A．茶树的地上部分通过遮阴能有效降低地表水分蒸发，减少土壤水分散失
B．板栗树和茶树的根系深浅不同，提高了对土壤水分和无机盐的利用率
C．与常规的单一种植模式相比，板栗—茶树模式的群落空间结构更复杂
D．板栗树和茶树生长在同一林场，两者的生态位相同
【答案】D
【分析】1、群落垂直结构：在垂直方向上，大多数群落具有明显的分层现象;植物主要受阳光的影响，动
物主要受食物和栖息空间的影响。
2、群落水平结构：由于地形的变化、土壤湿度和盐碱度的差异、光照强度的不同等因素，不同地段往往
分布着不同的种群，同一地段上种群密度也有差异。
【详解】A、遮荫能有效降低茶树地表水分蒸发，减少土壤水分散失，A 正确；
B、植物通过根系吸收土壤中的水分和无机盐，板栗树和茶树的根系深浅不同，提高了对土壤水分和无机
盐的利用率，B 正确；
C、群落的空间结构包括垂直结构和水平结构，与常规的单一种植模式相比，板栗—茶树模式的群落空间
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结构更复杂，C 正确；
D、板栗树和茶树生长在同一林场，但两者根系深浅不同，对土壤资源的利用存在差异，两者的生态位不
完全相同，D 错误。
故选D。
11．二倍体生物中，体细胞中某对同源染色体缺失一条的个体称为单体，体细胞中某对同源染色体多一条
的个体称为三体，单体和三体都可以用于基因定位。某大豆突变株表现为矮茎（aa），为确定A/a 基因是
否位于2 号染色体上，将该突变株作为父本，分别与单体（2 号染色体缺失一条）、三体（2 号染色体多一
条）纯合高茎大豆植株杂交得F1。单体和三体产生的配子均可育，而一对同源染色体均缺失的个体致死。
下列叙述错误的是（ ）
A．通过突变株与单体杂交的结果即可进行基因定位，而与三体杂交的结果则不能
B．若A、a 基因位于2 号染色体上，则该突变株与三体杂交得F1，F1 自交所得F2，的表型比例为6 5∶
C．若该突变株与单体杂交得F1，F1 随机交配所得F2 中高茎∶矮茎＝7 8∶，则A、a 基因位于2 号染色体上
D．若a 基因不位于2 号染色体上，两种杂交形式下的F1 连续自交n 代，则矮茎的比例均为1/2－1/2n+1
【答案】B
【分析】根据题意分析可知：体细胞中某对同源染色体缺失一条的植株，称为单体(2n-1)，三体(2n+1)指体
细胞中某对同源染色体多一条的个体，若所研究基因在单体上，则基因型中只含有单个基因Y 或y，若所
研究基因在三体上，则基因型中含有三个相同或等位基因。
【详解】A、分析该突变株与单体杂交 突变株的基因型为aa，若A/a 基因位于2 号染色体上，单体纯
合高茎大豆植株的基因型为AO（O 表示染色体缺失），二者杂交子代中Aa aO
∶
＝1 1∶，表现为高茎和矮茎；
若A/a 基因不位于2 号染色体上，单体纯合高茎大豆植株的基因型为AA，二者杂交子代均为Aa，表现为高
茎。该突变株与三体杂交，若A/a 基因位于2 号染色体上，三体纯合高茎大豆植株的基因型为AAA，AAA
产生的配子为AA 或A，因此二者杂交子代为AAa 或Aa，均为高茎；若A/a 基因不位于2 号染色体上，三体
纯合高茎大豆植株的基因型为AA，二者杂交子代均为Aa，表现为高茎，因此通过突变株与单体杂交的结
果即可进行基因定位，而与三体杂交的结果则不能，A 正确；
B、若A、a 基因位于2 号染色体上，aa 与AAA 杂交，F1 基因型为AAa Aa
∶
＝1 1∶，其中AAa 产生的配子为
AA Aa A a
∶
∶∶＝1 2 2 1
∶∶∶，F1 中AAa 自交后代中矮茎所占的比例为1/6×1/6＝1/36，而Aa 自交后代中矮茎所占的
比例为1/2×1/2＝1/4，则F2 中矮茎所占的比例为1/2×1/36+1/2×1/4＝10/72，高茎所占的比例为1－10/72
＝62/72，即高茎∶矮茎＝31 5∶，B 错误；
C、若A、a 基因位于2 号染色体上，突变株（aa）与单体（AO）杂交，F1 基因型为Aa aO
∶
＝1 1∶，产生配子
为A a O
∶∶＝1 2 1
∶∶，其随机交配后代中高茎所占比例为1/4×1/4（AA）+1/4×2/4×2（Aa）+1/4×1/4×2（AO）＝
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7/16，矮茎所占比例为2/4×2/4（aa）+1/4×2/4×2（aO）＝8/16，则F2 中高茎∶矮茎＝7 8∶，C 正确；
D、若a 基因不位于2 号染色体上，F1 的基因型都为Aa，F1 连续自交n 代，杂合子的比例为1/2n，矮茎的
比例为（1－1/2n）/2＝1/2－1/2n+1，D 正确。
故选B。
12．50%以上的肿瘤患者存在着TP53 基因（编码P53 蛋白）突变，该类患者体内的P53 蛋白数量减少或结
构异常。当DNA 轻度损伤时，P53 蛋白阻滞细胞中DNA 的复制，促进DNA 修复；当DNA 损伤严重时，P53
蛋白则启动细胞凋亡程序。下列叙述正确的是（ ）
A．TP53 基因是细胞正常生长和增殖所必需的原癌基因
B．P53 蛋白的积累和活动会导致细胞癌变和细胞凋亡
C．机体内癌细胞的清除利用了免疫系统的免疫监视功能
D．由细胞正常代谢活动受损引起的细胞死亡都属于细胞凋亡
【答案】C
【分析】原癌基因和抑癌基因发生基因突变，其中原癌基因负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的过
程，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增殖。
【详解】A、据题“当DNA 轻度损伤时，P53 蛋白阻滞细胞中DNA 的复制，促进DNA 修复；当DNA 损伤严
重时，P53 蛋白则启动细胞凋亡程序”，故可推测TP53 基因属于抑癌基因，A 错误；
B、由题可知，P53 蛋白能够抑制损伤DNA 的复制，促进细胞凋亡，其积累和活动不会导致细胞癌变，B 错
误；
C、机体内癌细胞的清除利用了免疫系统的免疫监视功能，C 正确；
D、在种种不利因素下，由细胞正常代谢活动受损或中断引起的细胞死亡属于细胞坏死，D 错误。
故选C。
13．科学家研究发现，人群中存在某种由常染色体上的显性基因E 控制的遗传病，含基因E 的个体患病率
为75%，基因型为ee 的个体表现正常。图1 是某家庭关于该遗传病的遗传系谱图，图2 表示图1 中的4 个
成员相关基因的电泳分离结果。下列有关分析正确的是（ ）
A．若Ⅰ1 的检测结果为①，则Ⅰ2 的检测结果可能是②
B．若Ⅰ1、Ⅰ2 的检测结果分别为③、④，则条带a 表示基因E
C．若Ⅰ1、Ⅰ2 的检测结果分别为③、①，则条带b 表示基因e
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D．若Ⅰ1、Ⅰ2 的检测结果分别为③、④，则Ⅰ1、Ⅰ2 再生一个孩子患病的概率为9/16
【答案】D
【分析】分析题意和题图，已知含基因E 的个体发病率为75%，即患病个体一定含有基因E，不患病个体
的基因型不能确定，故患病个体基因型为EE 和Ee，不患病个体基因型为EE、Ee 和ee。
【详解】A、已知含基因E 的个体发病率为75%，即患病个体一定含有基因E，不患病个体的基因型不能确
定，故患病个体基因型为EE 和Ee，不患病个体基因型为EE、Ee 和ee。根据图1 可知，Ⅰ2、Ⅱ4，一定含
基因E。根据图2 可知，③、④均有条带a、条带b，即两者均为杂合子，均含有两种基因，基因型为Ee，
①、②基因型相同，且均为纯合子，不考虑突变，①②生出的孩子基因型不可能杂合，故亲本Ⅰ1、Ⅰ2
的检测结果不可能分别为①、②，A 错误；
B、若Ⅰ1、Ⅰ2 的检测结果分别为③、④，则①、②为Ⅱ3、Ⅱ4 的检测结果，均为纯合子且基因型相同，
而Ⅱ4 为患者，应该含基因E，则条带b 表示基因E，条带a 表示基因e，B 错误；
C、若Ⅰ1、Ⅰ2 的检测结果分别为③、①，则Ⅰ1、Ⅰ2 的基因型分别为Ee、EE，即条带b 为E，C 错误；
D、若Ⅰ1、Ⅰ2 的检测结果分别为③、④，则其基因型均为Ee，再生一个患病孩子的概率为
3/4×75%=9/16，D 正确。
故选D。
14．科研人员分离出微塑料降解菌并对其降解能力进行了测定。将等量各菌株分别接种到含有等量聚乙烯
微塑料的培养基中，30 天后检测，结果见下表。下列叙述正确的是（ ）
菌株编号
I
Ⅱ
III
IV
V
微塑料剩余量与微塑料添加量的比值（%）
98.4
92.3
98.7
99.0
98.2
A．用平板划线法接种菌液可统计每毫升样品中的活菌数
B．菌株Ⅳ降解微塑料的能力最强，相关酶活性最高
C．能在该培养基中生长、繁殖的微生物都能分解聚乙烯微塑料
D．还需设置一组培养条件相同、加入等量聚乙烯微塑料但不接种菌液的实验
【答案】D
【分析】接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少
许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随
着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平
板表面得到单菌落。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁
殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的
系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细
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胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。
【详解】A、平板划线法的主要目的是分离单菌落，而不是用于统计每毫升样品中的活菌数，统计活菌数
常用稀释涂布平板法，A 错误；
B、从表格数据来看，微塑料剩余量与微塑料添加量的比值越小，说明该菌株降解微塑料的能力越强。在
这些菌株中，菌株II 的该比值最小，即菌株II 降解微塑料的能力最强，B 错误；
C、虽然这些菌株能在含有聚乙烯微塑料的培养基中生长、繁殖，但不能就此推断所有能在该培养基中生
长、繁殖的微生物都能分解聚乙烯微塑料，有可能存在其他利用培养基中其他营养物质生长，C 错误；
D、设置一组培养条件相同、加入等量聚乙烯微塑料但不接种菌液的实验，作为空白对照，可以排除非生
物因素（如环境因素等）对聚乙烯微塑料含量变化的影响，从而更准确地判断菌株对微塑料的降解作用，
D 正确。
故选D。
15．光敏色素互作因子PIFs 参与光敏色素信号途径，从而调控种子萌发。黑暗条件下，PIFs 在细胞核中积
累并发挥作用，从而抑制赤霉素的合成，促进脱落酸的合成。红光照射会促使种子萌发。下列分析正确的
是（ ）
A．光敏色素可将光刺激信号直接传递到细胞核内
B．PIFs 通过影响翻译过程来调控植物激素的合成
C．红光照射可能会引起PIFs 在细胞核内的积累增加
D．有光时种子萌发，是种子对生存环境的一种适应
【答案】D
【分析】光敏色素是一类蛋白质（色素—蛋白复合体），分布在植物的各个部位，其中在分生组织的细胞
内比较丰富。在受到光照射时，光敏色素的结构会发生变化，这一变化的信息会经过信息传递系统传导到
细胞核内，影响特定基因的表达，从而表现出生物学效应。
【详解】A、题干中仅表明光敏色素参与光信号途径调控种子萌发，以及PIFs 在细胞核中发挥作用，但并
没有提及光敏色素将光刺激信号直接传递到细胞核内。实际上，光敏色素接受光信号后，可能通过一系列
的信号转导分子和过程来传递信息，并非直接传递到细胞核，A 错误；
B、题干明确说明“PIFs 在细胞核中积累并发挥作用，从而抑制赤霉素的合成，促进脱落酸的合成”，这表
明PIFs 是在细胞核内通过影响基因表达等过程来调控植物激素的合成，而非翻译过程（翻译是在细胞质中
的核糖体上进行的，以mRNA 为模板合成蛋白质），B 错误；
C、已知“黑暗条件下，PIFs 在细胞核中积累并发挥作用，抑制种子萌发；红光照射会促使种子萌发”，说
明红光照射会抑制PIFs 的作用，那么红光照射可能会引起PIFs 在细胞核内的积累减少，C 错误；
D、有光时往往意味着环境中可能有适宜的温度、水分等条件有利于植物生长，种子在有光时萌发，有利
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于幼苗出土后进行光合作用等生命活动，是种子对生存环境的一种适应，D 正确。
故选D。
二、非选择题（共5 题，共55 分）。
16．（9 分）玉米是C4植物，其参与CO2固定的酶有PEP 羧化酶和RuBP 羧化酶两种，其中PEP 羧化酶对
CO2的亲和力显著高于RuBP 羧化酶，可以把大气中含量很低的CO2以C4的形式固定下来，如图所示，回答
下列问题：
(1)维管束鞘细胞叶绿体中C3的还原过程需要光反应的产物 提供能量。据图推测，维管束鞘细胞中
CO2浓度 （填“高于”或“低于”）叶肉细胞中的CO2浓度；显微镜下观察C4植物玉米的叶片发
现，叶肉细胞包围在维管束鞘细胞四周，形成花环状结构，这种结构可从
两个方面提高植物吸收CO2的效率，有利于其适应低浓度CO2环境。
(2)灌浆期是农作物的一个重要生长时期，即光合作用产物输出并储存在籽粒中的阶段，光合作用产物主要
以蔗糖的形式输出到籽粒中。实验小组检测了灌浆期给玉米喷施油菜素内酯（BR）对相关酶活性的影响，
实验结果如下表所示。
PEP 羧化
酶/（μmolCO2·h-1·mg-1）
RuBP 羧化
酶/（μmolCO2·h-1·mg-1）
蔗糖合成
酶/（Ug-1·min-1FW）
对照
组
48.5
1.68
2.62
外施
BR 组
63.2
2.85
3.89
分析表格数据，试从两个方面阐述灌浆期喷施BR 能提高玉米产量的原因：①
；
②
。
(3)光合色素溶液的浓度与其光吸收值成正比，适当波长的光可用于色素含量的测定。若要检测喷施BR 能
否提高玉米灌浆期叶肉细胞中叶绿素的含量，则应测定喷施BR 前后叶片叶绿体色素提取液对
吸收值的变化。
【答案】
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(1) ATP 和NADPH 高于 促进植物吸收CO2、防止吸收的CO2 逸散
(2) 喷施BR 能提高PEP 羧化酶和RuBP 羧化酶的活性，促进CO2 的固定，提高光合作用强度，增加光合产
物的生成量 喷施BR 能提高蔗糖合成酶的活性，促进蔗糖的合成，有利于光合产物更多地输出并储存
在籽粒中
(3)红光
【分析】光合作用过程包括光反应和暗反应：（1）光反应：场所在叶绿体类囊体薄膜，完成水的光解产
生NADPH 和氧气，以及ATP 的合成；（2）暗反应：场所在叶绿体基质中，包括二氧化碳的固定和C3 的还
原两个阶段。光反应为暗反应C3 的还原阶段提供NADPH 和ATP。
【详解】（1）光反应为暗反应中C3 的还原提供ATP 和NADPH，二者都可为该过程提供能量。PEP 羧化酶
对CO2 的亲和力显著高于RuBP 羧化酶，可以把大气中含量很低的CO2 以C4 的形式固定下来，然后运输到
维管束鞘细胞释放出CO2，所以维管束鞘细胞中CO2 浓度高于叶肉细胞中的CO2 浓度；据题可知，维管束
鞘细胞四周包围着一圈辐射排列的叶肉细胞，形成花环状结构，这种结构有利于四周的叶肉细胞利用PEP
羧化酶吸收低浓度的CO2，从而促进C4 植物对CO2 的吸收，同时可将维管束鞘细胞释放出来的CO2 通过
叶肉细胞中的PEP 羧化酶再“压”回维管束鞘细胞，减少了CO2 的逸散，从而提高了C4 植物吸收CO2 的
效率，有利于其适应低浓度CO2 环境。
（2）从表格数据可以看出，喷施BR 后，PEP 羧化酶和RuBP 羧化酶的活性升高，这两种酶参与CO2 的固定
过程，酶活性升高可促进CO2 的固定，提高光合作用强度，增加光合产物的生成量；同时，蔗糖合成酶活
性也升高，蔗糖合成酶能促进蔗糖的合成，有利于光合产物更多地以蔗糖的形式输出到籽粒中并进行储存，
进而提高玉米产量。
（3）叶绿素主要吸收蓝紫光和红光，但是选择蓝紫光无法排除类胡萝卜素的干扰，所以为了检测喷施BR
能否提高玉米灌浆期叶肉细胞中叶绿素的含量，应测定喷施BR 前后叶片的叶绿体色素提取液对红光吸收
值的变化。
17．（11 分）湿地是一种独特的生态系统，被誉为地球的“肾”。如图表示某人工湿地生态系统中各营养
级间的能量流动过程，图中数值用有机物干物质的质量表示（单位：kg·m-2·a-1）。回答下列相关问题。
(1)湿地中的动植物物种丰富，从岸边到中央区域，生物分布出现明显差异，这体现了群落的
结构。
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湿地具有蓄洪防旱、调节区域气候，同时也为人们提供休闲娱乐的环境功能，这体现了生态系统生物多样
性的
价值。与自然湿地生态系统相比，人工湿地生态系统的抵抗力稳定性
。
(2)若该人工湿地在相同环境及养殖条件下，鱼虾总投放量不变，增加食鱼性鱼类的投放比例，则小型鱼虾
类的产量将
（填“升高”、“不变”或“降低”）。小型鱼虾类的能量只有1.2%传递给食鱼性
鱼类，此数值不在10%～20%范围，最可能的原因是
。由此
说明，人们对生态系统的利用的原则是
。
(3)湿地生态系统中存在两类食物链，一种是通过生物间捕食关系形成的捕食食物链，还有一种是以死亡生
物或有机碎屑为起点的腐生食物链，使能量有效地被人们利用。植物直接流入浮游动物的能量仅占浮游动
物总能量的
%（保留小数点后一位），这说明
食物链在湿地生态系统能量流动中
起更重要的作用，生态系统能量流动的特点是
。
【答案】
(1) 水平 间接价值和直接 较低
(2) 降低 小型鱼虾类中的能量流向还包括人类的捕捞活动 对生态系统的利用要合理适度，不能
超过其自我调节能力范围
(3) 13．3 腐生 单向流动、逐级递减
【分析】一个营养级所同化的能量=呼吸散失的能量+被下一营养级同化的能量十分解者释放的能量。但对
于最高营养级的情况有所不同，它所同化的能量=呼吸散失的能量+分解者分解释放的能量。
【详解】（1）从岸边到中央区域，生物分布出现明显差异，这体现了群落的水平结构；湿地具有蓄洪防
旱、调节区域气候，同时也为人们提供休闲娱乐的环境功能，这体现了生态系统生物多样性的间接价值
（生态方面的价值）和直接价值（对人类有食用、药用和工业原料等使用意义以及有旅游观赏、科学研究
和文学艺术创作等非实用意义的价值）；与自然湿地生态系统相比，人工湿地生态系统的生物较少，营养
结构简单，抵抗力稳定性较低。
（2）若鱼虾总投放量不变，增加食鱼性鱼类的投放比例，则小型鱼虾类的产量将降低；小型鱼虾类中能
量流向还包括人类的捕捞活动，因此被食鱼性鱼类捕食的小型鱼虾类就减少，小型鱼虾类传递给食鱼性鱼
类的能量也就不在10%～20%这一范围；人们对生态系统的利用的原则是对生态系统的利用要合理适度，
不能超过其自我调节能力范围。
（3）植物直接流入浮游动物的能量仅占浮游动物总能量的2200÷（2200+14300）×100%=13.3%，这说明腐
生食物链在湿地生态系统能量流动中起更重要的作用；生态系统能量流动具有单向流动、逐级递减的特点。
18．（11 分）光是一切生命产生的源动力，也是生命体最重要的感知觉输入。大量公共卫生调查显示，长
期夜间过多光照会显著增加患糖尿病、肥胖的风险。哺乳动物感光主要依赖视网膜上的视锥细胞、视杆细
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胞和ipRGC 细胞三类感光细胞，其中ipRGC 对下丘脑发出密集的神经纤维。回答下列问题。
(1)已知视网膜上的感光细胞ipRGC 对蓝光敏感，但对红光不敏感。“敏感”是指ipRGC 能将光刺激转化成
，据此分析，视网膜上的感光细胞ipRGC 属于反射弧中的
。
(2)研究发现黑暗中人视杆细胞的静息电位约是-40mV，已知黑暗中视杆细胞膜对Na+、K+都有较高的通透性，
视杆细胞静息电位绝对值小于神经细胞的原因是
。
(3)为研究光调节葡萄糖代谢的机制，我国科学家开展了如下实验。
实验一：实验鼠饥饿2 小时后，注射一定量葡萄糖溶液，分别在黑暗和光照条件下检测2 小时内血糖浓度
变化，结果如图1 所示。
实验二：对三种小鼠：①全盲、②ipRGC 细胞不感光、③视锥细胞和视杆细胞不感光，在黑暗和光照条件
下分别进行葡萄糖代谢能力检测，结果如图2 所示（AUC 为血糖含量曲线与横坐标时间轴围成的面积）。
实验三：分别损毁感光正常小鼠下丘脑的SCN 区和SON 区，在黑暗和光照条件下进行葡萄糖代谢能力检测，
结果如图3 所示。
上述实验表明光 （填“增强”或“减弱”）了小鼠的血糖代谢能力。光调节糖代谢的信号传导途
径是：光→ 细胞→传入神经→ 区域。
(4)该神经通路也与脂肪细胞的代谢有关，如图所示（“+”表示促进）
进一步实验发现，蓝光照射后并不会影响小鼠体内与血糖平衡有关的激素含量以及营养物质的变化，但会
减弱棕色脂肪组织的产热。据此推断，“蓝光暴露”引发血糖上升水平程度高于对照小鼠的原因是______。
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A．小鼠体内胰高血糖素水平上升
B．支配脂肪组织的交感神经受抑制
C．交感神经兴奋促进了肝糖原分解
D．棕色脂肪细胞对葡萄糖摄取量降低
(5)若要通过实验验证光影响了上图所示的棕色组织脂肪的产热调节途径，请写出针对实验组小鼠可采取的
处理措施：
。（答出2 点即可）
【答案】
(1) 电信号 感受器
(2)静息状态下神经细胞只对K+都有较高的通透性，视杆细胞对Na+、K+都有较高的通透性，导致膜内外电
位差较小
(3) 减弱 ipRGC 下丘脑SON
(4)BD
(5)切断脂肪组织的交感神经；抑制神经递质的合成与分泌；抑制脂肪细胞相关基因的表达；破坏棕色脂肪
组织的神经递质受体
【分析】据题意可知：光调节葡萄糖代谢的机制：光可通过神经调节的方式影向糖代谢，其信号传导途径
是：光→视网膜ipRGC 细胞→传入神经→下丘脑SON 区。光调节棕色脂肪组织代谢的机制是光照可使交感
神经兴奋，释放去甲肾上腺素，抑制棕色脂肪组织葡萄糖分解，减少产热。
【详解】（1） ipRGC 在蓝光的刺激下可作用于小鼠脑中相关神经通路，说明ipRGC 细胞能将光刺激转化
为电信号，沿传入神经传至神经中枢。此时，ipRGC 细胞充当感受器。
（2）视杆细胞静息电位绝对值小于神经细胞，是因为视杆细胞在黑暗中对钠离子和钾离子都有较高的通
透性。这使得钠离子和钾离子在细胞膜两侧的流动相对平衡，导致静息电位绝对值较小。这种特性使视杆
细胞能够快速响应光线变化，是视觉系统对光线敏感的重要机制。
（3）图1 中，实验小鼠饥饿2 小时后，分别在光照以及黑暗条件下进行血糖浓度检测，刚开始时即时间为
0，血糖浓度相等，但随着时间的推移，可以明显看到，在光照条件下的血糖浓度比黑暗条件下的血糖浓
度高，光减弱了小鼠的血糖代谢能力。图2 中，在黑暗条件下，三种小鼠AUC 相等，而在光照条件下，只
有ipRGC 细胞感光的那组小鼠AUC 明显偏高，可以判断∶光影响糖代谢功能是由ipRGC 介导的；图3 中损
伤了SCN 的小鼠在光照条件下AUC 明显高于损伤了SON 的小鼠AUC，结合题干信息ipRGC 对下丘脑发出密
集的神经纤维，可判断：ipRGC 介导的光影响糖代谢功能与下丘脑的SON 区有关，综上，实验表明光可通
过神经调节的方式影响糖代谢，其信号传导途径是：光→视网膜ipRGC 细胞→传入神经→下丘脑SON 区。
（4）A、据题可知，蓝光照射后，不会影响小鼠体内与血糖平衡有关的激素含量以及营养物质的变化，所
以蓝光照射后，小鼠体内胰高血糖素水平不变，A 错误；
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B、蓝光照射会减弱棕色脂肪组织的产热，因此支配脂肪组织的交感神经可能受抑制，B 正确；
C、蓝光照射后并不会影响小鼠体内与血糖平衡有关的激素含量以及营养物质的变化，引起血糖上升应当
是神经调节的结果且不存在肝糖原分解和脂肪分解，C 错误；
D、棕色脂肪细胞对葡萄糖摄取量降低，产热减少，D 正确。
故选BD。
（5）由图可知，若要通过实验验证光影响了上图所示的“棕色组织脂肪的产热调节途径”，针对实验组
小鼠可采取切断脂肪组织的交感神经检测产热情况；也可以抑制神经递质的合成与分泌；还可以抑制脂肪
细胞相关基因的表达；破坏棕色脂肪组织的神经递质受体等。
19．（10 分）某昆虫（2n＝56）是XY 型性别决定的生物。其长翅对短翅为显性，由常染色体上的等位基
因A、a 控制；抗杀虫剂对不抗杀虫剂为显性，由Ⅹ染色体上的T、t 基因控制。现将一只长翅抗杀虫剂昆
虫与一只短翅不抗杀虫剂昆虫杂交，统计F1的表型及数量，结果如表所示。用杀虫剂处理时，不抗杀虫剂
的昆虫会全部死亡。请回答下列问题：
F1表型
长翅抗杀虫剂雌昆虫
长翅抗杀虫剂雄昆虫
长翅不抗杀虫剂雌昆
虫
长翅不抗杀虫剂雄昆虫
数量/只
199
202
201
198
(1)对该种昆虫进行基因组测序时，需要测定 条染色体上的DNA 碱基序列。根据F1的结果可知，
亲本长翅抗杀虫剂昆虫与短翅不抗杀虫剂昆虫的基因型分别是 。
(2)让F1全部个体自由交配，子代用杀虫剂处理，存活的子代雌果蝇中纯合子所占比例为
。
若F1全部个体在使用杀虫剂处理后自由交配，a 的基因频率将
（填“升高”“不变”或
“降低”）。
(3)该种昆虫的体色有黑体和灰体，用紫外线处理野生型纯合黑体昆虫群体，得到了一只灰体突变体，对该
突变体和野生型昆虫的体色相关基因进行酶切后分别进行琼脂糖凝胶电泳，得到如图所示的结果，由电泳
结果可知，灰体个体出现三个条带的原因是 。该突变为
（填“显性”或“隐性”）突变，该突变是由碱基对的
（填“替换”“增添”或“缺失”）
引起的。
【答案】
(1)29 AAXTXt、aaXtY
(2) 1/10 不变
(3) 控制黑体的基因上没有酶切位点，电泳出现一个条带，基因突变产生的灰体昆虫为杂合子，控制灰体
的基因上有1 个酶切位点，电泳出现两个条带 显性 增添
【分析】伴性遗传是指在遗传过程中的子代部分性状由性染色体上的基因控制，这种由性染色体上的基因
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所控制性状的遗传上总是和性别相关，这种与性别相关联的性状遗传方式就称为伴性遗传。
【详解】（1）基因组测序时，需测定一个染色体组中的常染色体和两条性染色体，该种昆虫有54 条常染
色体，2 条性染色体，故基因组测序时需测定29 条染色体上的DNA 碱基序列。
一只长翅抗杀虫剂昆虫与一只短翅不抗杀虫剂昆虫杂交
仅分析翅型
F1 全为长翅，说明长翅亲本的基因型为AA
总结：亲本长翅抗杀
虫剂昆虫与短翅不抗
杀虫剂昆虫的基因型
分别为AAXTXt、
aaXtY
仅分析杀虫剂抗
性
子代雌性和雄性中，抗杀虫剂和不抗杀虫剂
的比例都为1 1∶，说明抗杀虫剂亲本的基因
型为XTXt，不抗杀虫剂亲本的基因型为XtY
（2）亲本基因型为AAXTXt、aaXtY，F1 基因型为AaXTXt、AaXtXt、AaXTY、AaXtY。由于A/a 与T/t 基因位于
不同染色体上，故对子代使用杀虫剂处理，不影响子代翅型的比例。仅考虑T/t 基因，F1 产生的雌配子为
1/4XT、3/4Xt，F1 产生的雄配子为1/4XT、1/4Xt、1/2Y，F2 基因型及所占比例如表所示。
F1 雄配子
F1 雌配子
1/4XT
1/4Xt
1/2Y
1/4XT
1/16XTXT
1/16XTXt
2/16XTY
3/4Xt
3/16XTXt
3/16XtXt（死亡）
6/16XtY（死亡）
F2 存活雌性中纯合子XTXT 占1/5，再考虑A/a 基因，F1 中产生的雌、雄配子A、a 比例相同，都为1/2，F1
随机交配后，子代纯合的概率为1/2，所以子代存活雌果蝇中纯合子所占比例为1/5×1/2＝1/10。使用杀虫
剂会影响T、t 的基因频率，对A、a 的基因频率没有影响，因此a 的基因频率不变。
（3）由题中信息和电泳结果可知，野生型黑体昆虫为纯合子，突变型灰体昆虫为杂合子，灰体为显性突
变，控制黑体的基因上没有酶切位点，DNA 片段长度为720bp，基因突变产生的灰体昆虫为杂合子，控制
灰体的基因上有1 个酶切位点，被切成500bp、230bp 的片段，控制灰体的基因总长度为730bp，而控制黑
体的基因总长度为720bp，该突变为碱基对的增添。
20．（9 分）金黄色葡萄球菌(Sa)可引起败血症、细菌性肺炎等疾病。不规范使用抗生素易出现多重抗药性
Sa，推测Sa 产生头孢霉素抗性与其质粒上的R 基因有关。为验证该推测，以下图中R 基因的上、下游片段
和质粒1 构建质粒2，然后通过同源重组(质粒2 中的上、下游片段分别与Sa 基因组中R 基因上、下游片段
配对，并发生交换)敲除Sa 的R 基因。回答下列问题：
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注1：1kb=1000 碱基对；
2：Y 是可被脱水四环素(不作为抗生素起作用)诱导表达的Sa 致死基因。
(1) 利用PCR 技术扩增出较多的R 基因及其上下游序列，应在引物的 (填“3'端”或“5'端”)添
加相应的限制酶识别序列。若要扩增出较多DNA 单链序列，在添加引物时需做怎样的处理？
。
(2)质粒2 的构建过程中需选择
(填限制酶)对PCR 扩增产物进行酶切。
(3)用质粒2 转化临床分离获得具有头孢霉素抗性、对氯霉素敏感且含质粒2 的Sa，涂布在含有氯霉素的平
板上，经培养获得含质粒2 的Sa 单菌落，再经多次传代增加同源重组敲除R 基因的概率，随后稀释涂布在
含
的平板上，筛选并获得不再含有质粒2 的菌落。从这些菌落中分别挑取少许菌体，依次
接种到含
的平板上，若无法增殖，则对应菌落中细菌的R 基因可能被敲除。
(4)以上述获得的菌株基因组为模板，采用不同引物组合进行PCR 扩增，电泳检测结果如图，表明R 基因已
被敲除的是
。
【答案】(1) 5'端 一种引物的比例显著多于另一种引物
(2)SacⅡ和EcoRⅠ
(3) 脱水四环素 头孢霉素
(4)D
【分析】基因工程技术的基本步骤： 1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR 技术
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扩增和人工合成。 2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、
启动子、终止子和标记基因等。 3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不
一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物
细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 4、目的基因
的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA 是否插入目的基因--DNA 分子杂
交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗
体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）在PCR 技术中，DNA 聚合酶只能从引物的3'端开始延伸DNA 链，所以应在引物的5'端添加
相应的限制酶识别序列，这样在后续对PCR 产物进行酶切时，就可以将带有目的基因（R 基因及其上下游
序列）的片段切下来用于构建质粒等操作；若要扩增出较多DNA 单链序列，可在添加引物时，需要扩大两
种引物的相对比例，一种引物是另一种引物的50 至100 倍，这样就能在较少的双链DNA 分子的基础上扩
增出较多的单链DNA；
（2）由图可知，质粒2 上依次接有SacⅡ、EcoRⅠ、SacⅡ三个酶切位点，而质粒1 上只有SacⅡ酶切位点，
R 基因的上下游依次含有SacⅡ、EcoRⅠ，EcoRⅠ、SacⅡ酶切位点，若要构建质粒2，可以采用引物1 和4
进行PCR 扩增可得到整个R 基因，以及上下游片段（或采用引物1 和3 以及引物2 和4 分别进行PCR 扩
增），用SacⅡ和EcoRⅠ对PCR 产物进行酶切，然后回收上、下游片段，再与SacII 酶切质粒1 所得大片段
连接，获得质粒2；
（3）因为Y 是可被脱水四环素诱导表达的Sa 致死基因，用质粒2 转化临床分离获得的Sa 后，要筛选并获
得不再含有质粒2 的菌落，就需要将菌液稀释涂布在含有脱水四环素的平板上，含有质粒2 的菌体会因为
脱水四环素诱导Y 基因表达而死亡，从而筛选出不含质粒2 的菌落；为了验证R 基因是否被敲除，由于推
测Sa 产生头孢霉素抗性与其质粒上的R 基因有关，所以从这些菌落中分别挑取少许菌体，依次接种到含头
孢霉素的平板上，若无法增殖，说明其可能失去了R 基因，从而失去了头孢霉素抗性；
（4）从电泳检测结果来看，D 组引物组合扩增出的条带大小(1.9kb)与预期的R 基因(0.7+2.2+1.2=3.1kb)大小
明显不一致，说明R 基因(2.2kb)已被敲除。
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