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第十单元 生物技术与工程
（考试时间：75min 分值：100分）
一、单选题(共50分,1-20题每题1分，21-35题每题2分）
1．（2023秋·河南周口·高三统考阶段练习）乳酸菌发酵过程中，牛奶中约20%的糖、蛋白质被分解成为小
分子，因此酸奶比牛奶更容易被人体吸收。下列叙述正确的是（ ）
A．乳酸菌细胞中没有线粒体、核糖体等复杂的细胞器
B．乳酸菌的一个细胞属于生命系统的细胞层次和个体层次
C．乳酸菌细胞中具有拟核，其DNA 的主要载体是染色体
D．乳酸菌发酵过程中通入氧气有利于其繁殖和产生乳酸
2．（2023秋·云南·高三校联考阶段练习）中国科学院海洋研究所首次发现能有效降解聚乙烯[（CH）n]塑
料的海洋真菌及其分泌的有降解聚乙烯效果的酶种。某兴趣小组欲通过培养获得高品质的该种真菌，下列
说法错误的是（ ）
A．筛选该种真菌的培养基可以聚乙烯为唯一碳源
B．该种真菌分泌降解聚乙烯的酶的过程所需要的能量主要由线粒体提供
C．利用稀释涂布法接种时，稀释倍数越高，越容易得到单菌落
D．可通过观察菌落的形状、颜色等特征对该种真菌进行初步鉴定
3．（2023秋·浙江·高三校联考阶段练习）下列关于传统发酵技术的说法，正确的是（ ）
A．传统发酵技术的目的是获得发酵产品或更多的微生物
B．当缺少糖源时醋酸菌进行无氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸
C．以乙醇为底物进行果醋发酵时发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时的气泡量
D．进行泡菜发酵时，原材料只能装至八成满，是为了防止乳酸菌产生CO 导致发酵液溢出
2
4．（2023秋·江苏扬州·高三扬州中学校考阶段练习）《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同
“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）
生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（ ）
A．该方法的原理是醋酸菌在缺少糖源时可将乙醇最终转化为乙酸
B．加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死酵母菌
C．“衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的
D．挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧
5．（2023秋·上海崇明·高三校考阶段练习）大肠杆菌是一种常见的细菌，为了鉴别待测菌液中是否存在大
肠杆菌，培养基中需要加入 以下哪种试剂（ ）
A．班氏试剂 B．伊红美蓝染液C．苏丹 III 染液 D．龙胆紫染剂
6．（2023秋·湖南·高三校联考阶段练习）为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染
过的土壤进行下图A所示的实验。同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所
示。同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在5个培养基平板上
分别接入0.1mL稀释液，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。
在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，无菌落产生。下列叙述正确的是（ ）
A．乙同学计算得出每升样品中的活菌数约为3.3×108个
B．步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是步骤③的培养基中石油是唯一碳源
C．步骤④甲同学出现图B结果可能的操作失误是样品的稀释程度太低导致
D．步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出能分解石油的细菌
7．（2023秋·全国·高三校联考阶段练习）塑料废弃后难以降解，给人类的生存环境造成极大污染。科学家
从嗜盐细菌中找到一种具有塑料的理化特性且易被微生物降解的聚羟基脂肪酸酯(PHA)。科研人员从某盐
湖中取水，接种到特殊培养基上，培养一段时间后，挑选单菌落并分别扩大培养，再检测菌的数目和PHA
2
原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！的产量，最终获得目标菌株。下列相关叙述正确的是（ ）
A．实验用到的特殊培养基中应含有较高的盐分
B．挑选的单菌落是由若干嗜盐细菌繁殖而来的
C．进行扩大培养时，培养基中需加入适量琼脂
D．实验中，只有接种需要在酒精灯火焰旁进行
8．（2023秋·江苏扬州·高三扬州中学校考阶段练习）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（
）
A．平板涂布时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布
B．空白平板使用前需进行无菌鉴定，接种后未长出菌落的平板可以直接丢弃
C．采用稀释涂布平板计数时，统计结果往往多于原始菌液中微生物数量
D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
9．（2023秋·江西宜春·高二江西省宜丰中学校考阶段练习）青霉素是一种常用的抗生素，其工业化生产流
程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．图中的过程①、②都属于扩大培养，目的是增加菌种的数量
B．过程③可以用化学药物进行灭菌处理，防止培养基中掺杂其他微生物
C．青霉菌在罐内发酵是中心环节，该发酵过程高耗氧，要严格监控溶解氧
D．过程④常用的方法是过滤和沉淀，分离出的菌体可再投入发酵罐使用
10．（2023秋·安徽·高三校联考阶段练习）刺梨是云贵川的特有水果，富含超氧化物歧化酶和大量的维生
素C、花青素等，是制作果酒和果醋的优质原料。刺梨酒和刺梨醋的主要生产流程如图所示。下列叙述正
确的是（ ）
A．发酵过程Ⅱ需要氧并产生大量CO
2
B．图示发酵过程中发酵液pH先升高后降低C．发酵I过程的温度比发酵过程Ⅱ高
D．发酵I、Ⅱ是此生产过程的中心环节
11．（2023秋·云南昆明·高三云南民族大学附属中学校考阶段练习）中医常说“百病从肝治，养肝如养
命”。近年来，我国酒精性肝病的发病率逐年提升，危害仅次于病毒性肝炎。研究发现，雪莲次生代谢物
对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下
列相关叙述错误的是（ ）
A．从雪莲中提取的次生代谢物是雪莲生长所必需的
B．经射线处理①后可能获得雪莲培养物高产的细胞
C．切取雪莲茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
D．培养细胞获得次生代谢物时使用的是液体培养基
12．（2023秋·新疆省直辖县级单位·高三新疆石河子一中校考阶段练习）甘薯由于具有增强免疫功能、防
癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等作用，故越来越被人们喜爱。但甘薯属于无性繁殖作物，同时又是同源
六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相
关操作不合理的是（ ）
A．用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，可以解决种苗用量大、成本高的问题
B．利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高
C．利用原生质体融合实现体细胞杂交，克服杂交不亲和，可以充分利用遗传资源
D．利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，有利于缩短育种年限
13．（2024·河南·高三统考专题练习）宋代诗人苏轼的诗中写到“日啖荔枝三百颗，不辞长作岭南人”。
作为“南国四大果品”之一，荔枝果肉多汁酸甜可口，营养价值很高。下图是科研人员利用现代生物科技
培育无核荔枝的流程图。下列叙述错误的是（ ）
A．过程①获得的原生质体具有的结构包括细胞膜、细胞质及细胞核
4
原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！B．过程②不仅需要用灭活的病毒诱导原生质体融合，还需要诱导原生质体再生出细胞壁
C．过程③获得的无核荔枝可能具有荔枝A和荔枝B的优良性状
D．三倍体荔枝的培育过程中用到了植物体细胞杂交技术、植物组织培养技术等
14．（2023秋·广东·高三广州大学附属中学校联考阶段练习）将Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通过逆
转录病毒转入小鼠成纤维细胞后得到类似于小鼠胚胎干细胞的一种细胞，命名为诱导多能干细胞（iPS细
胞）。与ES细胞相比，iPS细胞更容易获得，广泛应用于药物筛选或基因治疗。下列说法错误的是
（ ）
A．可通过实验判断每个基因对诱导多能干细胞作用的大小
B．iPS细胞的应用中存在分化成肿瘤细胞的风险
C．体细胞经诱导产生iPS细胞后再转化为需要的细胞给病人治病，会引起免疫排斥
D．欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，应设置不转入外源基因的对照组
15．（2023秋·山东青岛·高三青岛二中校考阶段练习）CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的
信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正
常细胞高1.6~5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以
解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列说法不正确的是（ ）
A．多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的淋巴细胞
B．步骤②后可筛选出既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞
C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO 培养箱
2
D．对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测
16．（2023秋·湖北·高三荆州中学校联考阶段练习）小鼠作为一种与人类基因组序列相似度较高的哺乳动
物，常用于人类某些疾病的研究。小鼠胚胎干细胞的培养过程如图所示，下列叙述错误的是（ ）A．胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型细胞的潜能
B．体外培养胚胎干细胞需提供的气体环境是95%的CO 和5%的空气
2
C．图中胚胎干细胞分化后的组织移入小鼠替代病变器官属于治疗性克隆
D．图中重组细胞重编程、分裂、分化最终产生的小鼠与患病鼠性状相似
17．（2023秋·浙江·高三绍兴鲁迅中学校联考阶段练习）甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重
要诊断指标，研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH。下列有关于制备过程的叙述正确的是（ ）
A．需要使用动物细胞培养技术
B．筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
C．利用小鼠的腹水进行扩大培养时需要使用免疫抑制剂
D．将细胞培养物进行离心后取其沉淀物用于PTH检测
18．（2023秋·安徽·高三安徽师范大学附属中学校考阶段练习）某科研团队通过多代细胞培养，将小鼠胚
胎干细胞的Y染色体去除，获得XO（只有一条X染色体）细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能
的卵母细胞。若某濒危哺乳动物仅存雄性个体时，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育后代，进行濒
危物种保护。下列有关叙述错误的是（ ）
A．XO胚胎干细胞转变为卵母细胞的过程中可能发生了减数分裂
B．胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程中全能性逐渐降低
C．胚胎干细胞原代培养在发生接触抑制后，可用胰蛋白酶处理使其分散为单个细胞再进行传代培养
D．iPS细胞类似于胚胎干细胞，在用于治疗人体疾病时理论上可以避免免疫排斥反应的发生
19．（2024·全国·高二课堂例题）克隆猴“中中”和“华华”登上学术期刊《细胞》封面，表明我国的克
隆技术再次走在世界前列。“中中”和“华华”的诞生成功证明了（ ）
A．动物细胞的全能性 B．动物细胞的再生能力
C．动物细胞核的全能性 D．动物细胞的分化能力
20．（2023春·全国·高二随堂练习）下图表示某哺乳动物的受精卵在卵裂期的几项指标的变化趋势，其中
正确的是（ ）
6
原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！A．①② B．①③ C．②④ D．①④
21．（2022春·辽宁大连·高二大连八中校考期中）以下叙述正确的是（ ）
A．刚刚排出的精子能立即与卵子受精
B．不同种动物的精子的形态相似，大小略有不同，体型越大的动物精子越大
C．孵化是指桑椹胚进一步扩大，导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来的过程
D．成熟卵子成熟的场所是输卵管
22．（2023春·云南昆明·高三云南师大附中校考阶段练习）科学家采用体外受精技术或动物细胞核移植技
术获得大熊猫胚胎，并进行胚胎移植，该工作有助于恢复濒危大熊猫的种群数量。下列叙述正确的是（
）
①动物细胞核移植属于动物细胞工程技术
②体外受精前需要对大熊猫的精子进行获能处理
③体外受精前常需要对雌性大熊猫进行超数排卵处理
④胚胎早期发育时，桑葚胚内部开始出现含液体的腔
⑤胚胎移植时，受体常会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应
A．③④⑤ B．②④ C．①②③ D．③④
23．（2023秋·江苏南通·高三校考阶段练习）下图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程，相关叙述错
误的是（ ）
A．卵母细胞只有在受精后才能完成减数分裂，因此不能直接用卵母细胞培养
B．过程①中，精子需要在 ATP 培养液中获能，卵母细胞应处于减数第二次分裂中期
C．过程②中，经历了有丝分裂和分化，不同阶段表达的基因存在差异
D．“早期胚胎”最可能是囊胚，其中的内细胞团细胞具有全能性
24．（2023春·新疆乌鲁木齐·高二校考期中）采用机械方法将早期胚胎切割后移植，可以获得同卵双胎或多胎，下列说法正确的是（ ）
A．胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚
B．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
C．胚胎分割时，需将囊胚的滋养层进行均等分割
D．胚胎移植充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能
25．（2023秋·浙江·高三校联考期中）杜泊羊以生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。
科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，下列叙述正确的是（ ）
A．为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂
B．通过繁育试管动物，可以充分发挥雌性优良个体繁殖潜力
C．采集到的生殖细胞均需要在体外进一步培养成熟才能进行受精
D．在以上过程中需要用到两次激素处理，激素种类相同
26．（2024·新疆·校联考模拟预测）下图表示“DNA 粗提取与鉴定”实验的基本流程，下列叙述错误的是
（ ）
①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA 鉴定
A．本实验使用的酒精的浓度与“低温诱导植物细胞染色体数目的变化”实验中的相同
B．步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料
C．步骤①中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液
D．步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后静置5min后即可呈现蓝色
27．（2024·全国·高二课堂例题）限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是（ ）
A．限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸
B．DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键
C．E.coli DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端
D．限制酶主要从原核生物中分离纯化而米，所以也能剪切自身的DNA
28．（2023春·全国·高二课堂例题）作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由正确的是（
）
A．具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合
8
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C．对宿主细胞无伤害，以便于重组 DNA 的筛选
D．能在宿主细胞中稳定保存并复制，以便产生大量的目的基因
29．（2023秋·江西宜春·高二江西省宜丰中学校考阶段练习）荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA
含量，用于病毒检测。其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针。
当耐高温的聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，
就有一个荧光分子生成（如下图）。通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值（荧光信号达到设定阈值时所
经历的循环次数）。下列相关叙述错误的是（ ）
A．PCR每个循环包括变性、复性（引物和模板结合）、延伸3个阶段
B．耐高温的聚合酶在该反应中的作用是合成磷酸二酯键和水解磷酸二酯键
C．最终监测的荧光强度与起始时反应管内样本DNA的含量呈正相关
D．Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高
30．（2023秋·北京·高三北京二中校考阶段练习）为利用链霉菌生产药物A，研究者构建重组DNA并导入
链霉菌。重组DNA含启动子P、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）。培养和筛选过程如下图
所示。
下列叙述不正确的是（ ）A．导入成功的链霉菌细胞内可能发生基因重组
B．诱变处理使培养液中的链霉菌产生不同突变
C．卡那霉素抗性强弱可反映药物A基因的表达量
D．应选用培养基b上的菌株进一步鉴定以生产药物A
31．（2023秋·重庆·高三重庆南开中学校考阶段练习）常见的启动子可分为三类：组织特异型启动子，调
控基因只在某些特定的部位中表达；组成型启动子，驱动基因在所有细胞、组织和器官中持续表达；诱导
型启动子，通常在光、盐等信号作用下，使目的基因的转录水平有所提高。下列叙述正确的是（ ）
A．启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，是DNA聚合酶识别和结合的部位
B．细胞分化与组织特异型启动子的调控有关，与组成型启动子无关
C．乳腺生物反应器的构建需要将组成型启动子与目的基因连接
D．植物在长日照下开花，与诱导型启动子被激活有关
32．（2023秋·贵州六盘水·高三统考阶段练习）生物技术在迅猛发展，它与人类健康、生产生活的关系越
来越密切。下列说法错误的是（ ）
A．利用马铃薯茎尖组织培养获得的脱毒苗能提高产量
B．单克隆抗体在疾病诊断和病原体鉴定中发挥重要作用
C．通过乳房生物反应器可在分泌的乳汁中获得所需的药物
D．蛋白质工程可对蛋白质结构直接改造以满足生产生活需求
33．（2023秋·浙江·高三校联考阶段练习）下列有关生物技术安全性等问题的观点正确的是（ ）
A．生殖性克隆人理论上增加了人类基因的多样性
B．生殖性克隆需要核移植技术，而治疗性克隆不需要
C．生物武器的特点有具有传染性、携带和投放相对简单、研发门槛较高等
D．“设计试管婴儿”可以有目的地改造特定基因，特定情况下可用于疾病治疗
34．（2023春·浙江·高二随堂练习）下列有关生物多样性与全球性生态环境问题的叙述，正确的是
（ ）
A．我国实行的“三孩政策"有利于提高出生率，从而调整年龄结构
B．解决粮食短缺问题的一个重要措施是大量开垦森林、草地等
C．全球气候变化、土地荒漠化及食品安全问题等都属于全球性生态环境问题
D．转基因农作物进行推广种植可以增加生物多样性促进生态平衡
35．（2024·全国·高二随堂练习）下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
A．DNA连接酶具有特异性，只能连接同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端
B．若能在植物细胞中检测到相应的目的基因，则说明基因工程项目获得成功
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原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！C．蛋白质工程需构建基因表达载体，改造后的蛋白质的性状可遗传给后代
D．将抗虫基因整合到某植物的线粒体DNA中，可通过花粉传播，从而引起基因污染
二、非选择题（50分）
36．（10分）（河南省九师联盟2022-2023学年高三下学期2月第二次联考（老教材老高考）理综生物试
题）果枝条中含有大量纤维素类物质，利用纤维素酶可处理果枝条中的纤维素。筛选、分离对废弃果枝条
纤维素具有高效降解作用的细菌，对农业废弃物的高效利用有重要意义。回答下列问题：
(1)初筛：在获得纯净菌株的培养过程中，最关键的是 ，因此对配制的培养基宜采用 法进行灭菌
处理，与消毒相比，灭菌的优点是 。
从果树种植试验基地采集出现降解现象的带菌枝条，用无菌水冲刷制备成菌悬液，为消除菌悬液中的杂菌，
通常采用平板划线法进行单菌落分离。连续划线接种过程中应注意的事项有 （答两点）。
(2)复筛：在进行筛选获得高效降解果枝条中纤维素的纯净菌株时，应选择以 为唯一碳源的培养基，
通过比较 筛选出分解能力强的菌株。
(3)应用：科研人员通过复筛获得了对果枝条中纤维素具有高效降解能力的菌株X-2。为了更好地将该菌株
应用到生产实践，科研人员又进行了相关实验，实验结果如下图所示：
①据图判断，该实验的目的是 ；
②据实验结果分析，该菌应用到生产实践中的最佳条件是 。
37．（10分）（2023·全国·高二随堂练习）下图是通过植物细胞工程技术培育耐盐杂种植株的过程。回答
下列问题：(1)过程①使用的酶是 ，过程②人工诱导原生质体融合的具体的物理方法有
，从杂种细胞到幼芽的过程中运用的生物技术是 ，过程③指 。
(2)过程④选择培养时需要的条件是 。
(3)上述培育耐盐杂种植株的过程运用了植物体细胞杂交技术，此技术的优势是 。若甲植物
（2N=18），乙植物（4N=32），则目的植株细胞内含染色体数目为 ，该目的植株
（填“可育”或“不可育”），原因是 。
(4)甲植物能产生次生代谢物——紫草宁，具有重要的药用价值，但在植物细胞中含量低、难提取、难体外
合成，可通过 生产，以获得次生代谢物。
38．（10分）（2023秋·江西宜春·高二江西省宜丰中学校考阶段练习）肺癌就是生长在气管、支气管、细
支气管包括肺泡组织的一种恶性肿瘤。目前是我们国家发病率最高、死亡率最高的一种恶性肿瘤。癌症的
治疗过程会出现各种副作用，为降低肺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，
构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。
(1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自 。
(2)已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可
用 诱导融合。
(3)为了得到能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。其中“第1次筛选”用特定的选择培养基筛
选出来的细胞具有 特点；对第1次筛选的细胞还需进行“第2次筛选”，即需要进行 才能得到
产生抗单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(4)单克隆抗体的优点是 。单克隆抗体是ADC中的 （填“a”或“b”）部分。
12
原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！(5)研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。
①ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于 ，可导致癌细胞凋
亡。
②ADC能降低肺癌治疗药物的副作用，是因为 。
39．（10分）（2023秋·陕西咸阳·高三校考阶段练习）为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下
两种方法，请根据图示信息回答有关问题：
(1)E牛培育过程进行的生殖方式是 ；F牛培育过程进行的生殖方式是 ；图示繁育牛的两种方法
中，方法 更有利于牛的进化。
(2)繁殖E牛时，获能的精子和成熟卵子相遇后首先发生 反应，之后精子接触卵细胞膜，并进一步与
卵子结合，在该过程中， 和 可以防止多精入卵。此过程中，受精的标志和受精完成的标志分别
是 、 。
(3)培育克隆牛F时使用的不同于试管牛E的生物技术是 。
(4)A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵子结合，完成受精作用，这
个过程称为 。
40．（10分）（2023春·广西·高二校联考阶段练习）1965 年中国科学家人工合成了具有生物活性的结晶
牛胰岛素，摘取了人工合成蛋白质的桂冠。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素
方法：利用胰岛素的 mRNA 得到胰岛素基因，导入工程菌获得胰岛素。下图是利用基因工程生产人胰岛
素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。lacZ 基因表达产物β-半乳糖苷酶可以分解无色的 X-gal 产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。回答下列问题。
(1)获取胰岛素 mRNA 可以从 细胞中获取，在 催化下获得胰岛素基因。之后需要通过 PCR
技术进行扩增，已知胰岛素基因 a 链①处的碱基序列为－CCTTTCAG－， 则其中一种引物设计的序列是
5′- -3′。
(2)为使目的基因与载体正确连接，在设计 PCR 引物时可对目的基因添加限制酶 的识别序列。
(3)经 处理的大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后，筛选出工程菌。筛选思路为 。
(4)工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌生产胰岛素，现在生产胰岛素多采用重组的酵母菌作为受
体细胞，后者的优势是 。
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