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考点47 动物细胞工程（精练）
1.
下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ）
A．用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞
B．将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理并分散成单个细胞，再稀释制成细胞悬液培养
C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖
D．传代培养的细胞在传至10～50 代左右时，增殖会逐渐减慢，以至完全停止，所培养的细胞全部衰
老死亡
【分析】动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养
基中，让这些细胞生长和增殖。
过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原
代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养
液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【解答】解：A、用于培养的细胞最好取自健康动物体内的不断分裂的组织细胞，A 正确；
B、将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理其分散成单个细胞，再稀释制成细胞悬液培养，
B 正确；
C、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，C 正
确；
D、传代培养的细胞在传至40
50
﹣
代左右时，大多数细胞不再分裂了，少数癌变的细胞可无限增殖，D
错误。
故选：D。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关内容，包括动物细胞分散方法，培养目的，细胞原代培养和传代
培养相关知识，意在提升学生分析问题和解决问题的能力，属于中档题。
2.
（2022 春•富拉尔基区校级期中）Vero 细胞系来源于非洲绿猴肾上皮细胞，具有无限分裂和贴壁生长的特
性。将新冠病毒接种到Vero 细胞后，经Vero 细胞培养、新冠病毒灭活及提纯，可制成新冠病毒灭活疫苗。
下列叙述错误的是（ ）
A．Vero 细胞可作为新冠病毒大量繁殖的“培养基”
1
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B．向Vero 细胞培养液中加入适量抗生素可防止杂菌污染
C．分瓶前需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero 细胞
D．每传代1 次，培养瓶中的Vero 细胞分裂1 次
【分析】1、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢
废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或
胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用
胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【解答】解：A、将新冠病毒接种到Vero 细胞，Vero 细胞可作为新冠病毒大量繁殖的“培养基”，A 正
确；
B、向Vero 细胞培养液中加入适量抗生素可防止杂菌污染，B 错误；
C、分瓶前进行传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero 细胞，C 正确；
D、每传代1 次，培养瓶中的Vero 细胞可能分裂多次，D 错误。
故选：D。
【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程，能结合所学的知识准
确答题。
3.
（2023 春•孝感期末）悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻，生
产上常用灌流式培养避免出现该现象。灌流式培养是在细胞培养管内，不断注入新鲜培养液，同时将上清
液不断移出。下列相关说法错误的是（ ）
A．当培养细胞的密度达到一定值时，可进行稀释后再培养
B．新鲜培养液中往往需要加入血清等天然成分
C．灌流式培养杂交瘤细胞时可从移出的上清液中提取单克隆抗体
D．控制灌流速率能提高物质的利用率，添加抗生素能抑制病毒繁殖
【分析】培养动物细胞需要提供无菌、无毒的条件。防止污染是决定细胞培养成败的关键，除了培养材
料、培养基、培养环境、操作过程严格控制无菌外，在培养基中加入抗生素，抗生素主要抑制细菌生长，
从而预防污染。使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分。
【解答】解：A、由于培养瓶中生存空间和营养是有限的，当培养细胞的密度达到一定值时，可进行稀
2
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释后再培养，否则会影微生物进一步的繁殖，A 正确；
B、培养动物细胞时，新鲜培养液中往往需要加入血清等天然成分，B 正确；
C、灌流式培养杂交瘤细胞时，杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体集中分布在上清液中，通过不断移出上清
液可以获取单克隆抗体，C 正确；
D、抗生素对细菌、霉菌、支原体和衣原体等具有抑制和杀灭作用，抑制和杀灭病毒一般用干扰素，D
错误。
故选：D。
【点评】本题主要考查动物细胞培养的相关知识，要求考生能够结合所学知识准确判断各选项，属于识
记和理解层次的考查。
4.
（2023 春•渝中区校级期末）科学家利用雌性小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS 细胞），随后添加生
物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞。使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康
小鼠。下列说法不正确的是（ ）
A．iPS 细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相同
B．iPS 细胞培养过程需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的培养箱中
C．题中研究过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合、体外受精、胚胎移植等技术
D．该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题
【分析】动物细胞培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢
废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（4）动物细胞培养条件：气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的
pH）。
【解答】解：A、原始生殖细胞样细胞由iPS 细胞分化而来，iPS 细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相
同，A 正确；
B、动物细胞培养需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的二氧化碳培养箱中，其中95%空气是细胞
代谢必需的，5%的CO2是维持培养液的pH，B 正确；
C、将体细胞诱导成多能干细胞进而诱导成原始生殖细胞样细胞，需要动物细胞培养技术；使其完成减
数分裂形成卵细胞，进行体外受精，需要体外受精技术；最后生育健康小鼠，需要胚胎移植技术，没有
涉及动物细胞融合技术，C 错误；
D、该技术通过体细胞最后可诱导形成卵细胞，故该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题，
3
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D 正确。
故选：C。
【点评】本题主要考查动物细胞培养，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，
能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
5.
（2022 秋•沙坪坝区校级月考）科学家将4 种调控细胞周期的相关基因C
myc
﹣
、KTF4、Sox2 和Oct
3/4
﹣
导入体外培养的高度分化的小鼠成纤维细胞内，使其重回胚胎细胞状态，诱导产生多能干细胞（简称iPS
细胞）。下列有关iPS 细胞的叙述错误的是（ ）
A．四种相关基因的表达使小鼠成纤维细胞更易体现细胞的全能性
B．小鼠成纤维细胞和诱导产生的iPS 细胞的遗传物质相同
C．利用iPS 细胞制备视网膜的过程既进行有丝分裂也进行细胞分化
D．若iPS 细胞来源于病人自身的体细胞，移植回病人体内后可减少免疫排斥反应
【分析】据题意可知，小鼠成纤维细胞是高度分化的细胞，一般情况下不再具有细胞周期，而科学家将
4 种调控细胞周期的相关基因C
myc
﹣
、KTF4、Sox2 和Oct
3/4
﹣
导入体外培养的高度分化的小鼠成纤维
细胞内，使其重回胚胎细胞状态，诱导产生多能干细胞。
【解答】解：A、由分析可知，四种相关基因的表达使得小鼠成纤维细胞重回胚胎细胞状态，使细胞更
容易体现全能性，A 正确；
B、诱导产生的iPS 细胞人为导入了4 种调控细胞周期的相关基因，故和小鼠成纤维细胞的遗传物质不
同，B 错误；
C、利用iPS 细胞制备视网膜的过程，既进行有丝分裂（细胞数量增加）也进行细胞分化（细胞种类增
加），C 正确；
D、免疫系统会识别“异己”，若iPS 细胞来源于病人自身的体细胞，移植回病人体内后可减少免疫排
斥反应，D 正确。
故选：B。
【点评】本题考查细胞分化与免疫的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综
合分析问题的能力是解答本题的关键。
6.
（2022•南京模拟）2022 年3 月，中国科学家通过体细胞诱导培养出了类似受精卵发育3 天状态的人类全能
干细胞，这是目前全球在体外培养的“最年轻”的人类细胞，在解决器官短缺和器官移植排斥等问题上有
重要意义。下列有关叙述，正确的是（ ）
A．体细胞诱导形成全能干细胞的过程和癌变的过程一样均会导致遗传物质发生改变
B．全能干细胞可实现人体器官体外再生，该过程可能包括细胞增殖、分化、衰老、凋亡等过程，并都
涉及基因的选择性表达
4
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C．在有丝分裂中期和减数分裂Ⅱ后期的人类细胞中的染色体形态、数目均不相同
D．人类成熟的红细胞寿命很短，在红细胞进行细胞分裂过程中，中心体在间期复制并在前期移向细胞
两极
【分析】1、干细胞具有增殖、自我更新能力及分化潜能，在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型
的细胞，与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关，因而在医学上有着广泛的应用。通过体细胞诱
导培养出人类全能干细胞的过程会发生类似于植物组织培养过程中的脱分化。
2、有丝分裂不同时期的特点：（1）间期：进行DNA 的复制和有关蛋白质的合成；
（2）前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；
（3）中期：染色体形态固定、数目清晰；
（4）后期：着丝粒分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；
（5）末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。
3、减数分裂过程：
（1）减数分裂前的间期：染色体的复制。
（2）减数第一次分裂：①前期：联会，同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换；②中期：同源染
色体成对的排列在赤道板上；③后期：同源染色体分离，非同源染色体自由组合；④末期：细胞质分
裂。
（3）减数第二次分裂：①前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；②中期：染色体
形态固定、数目清晰；③后期：着丝粒分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；④
末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。
【解答】解：A、体细胞诱导形成全能干细胞的过程，类似于植物组织培养过程中的脱分化，遗传物质
并没有发生改变；细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变，会导致遗传物质发生改变，
A 错误；
B、全能干细胞可在体外增殖、分化成各种各样的组织和器官，该过程可能包括细胞增殖、分化、衰老、
凋亡等过程，并都涉及基因的选择性表达，B 正确；
C、人类细胞在有丝分裂中期有46 条染色体，每条染色体含两条姐妹染色单体，减数分裂Ⅱ后期由于着
丝粒分裂，也有46 条染色体，但无姐妹染色单体，所以二者染色体的数目相同，但形态不同，C 错误；
D、人类成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器，无法进行细胞分裂，无中心体的复制和移向细胞两
极，D 错误。
故选：B。
【点评】本题考查细胞分化、干细胞、有丝分裂和减数分裂等知识，要求考生识记干细胞的种类，掌握
细胞分化的实质；识记细胞有丝分裂和减数分裂不同时期的特点，能结合所学的知识准确答题。
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7.
（2022 春•黑山县校级月考）关于动物细胞融合的说法错误的是（ ）
A．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的多核细胞称为杂交细胞
B．动物细胞融合已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段
C．常用于诱导动物细胞融合手段有聚乙二醇融合法、灭活的病毒诱导法、电融合法等
D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
【分析】动物细胞融合：（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细
胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。（2）诱导动
物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等。（3）
动物细胞融合的意义：打破了生殖隔离，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和
生物新品种培育等的重要手段。（4）最主要的用途：制备单克隆抗体。
【解答】解：A、动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细
胞，A 错误；
B、动物细胞融合已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段，B 正确；
C、常用于诱导动物细胞融合手段有：化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）、物理法（如电激
等），C 正确；
D、细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，打破了远缘杂交不亲和的障碍，使远缘杂交成为可能，
D 正确。
故选：A。
【点评】本题主要考查动物细胞融合与单克隆抗体的制备的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学
知识准确答题。
8.
（2023 春•灵宝市校级月考）下列有关动物细胞核移植和克隆动物的叙述，错误的是（ ）
A．胚胎细胞核移植的难度明显低于体细胞核移植
B．用于核移植的卵母细胞需要在体外培养到MⅡ期
C．核移植后形成的重构胚可以直接移入受体动物体内
D．克隆动物和体细胞供体动物的性状基本相同
【分析】动物克隆主要通过核移植技术来完成；动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去
掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二
次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞
核和细胞质的猴子不需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和
发育。
【解答】解：A、体细胞分化程度高，表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因
6
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此胚胎细胞核移植的难度明显低于体细胞核移植，A 正确；
B、获得的卵母细胞去核后，需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植，B 正确；
C、重构胚，使其培养到桑葚胚或囊胚期才能移入受体动物体内，C 错误；
D、个体性状表现主要由细胞核控制，因此克隆动物的性状表现与供体动物（供核动物）基本相同，D
正确。
故选：C。
【点评】本题考查细胞核移植技术，要求考生识记细胞核移植技术的相关应用及实例，意在考查学生的
识记能力和判断能力，考查生命观念和科学思维的核心素养。
9.
（2022 春•思明区校级月考）科学家利用小鼠的成纤维细胞成功培育了克隆鼠，培育过程如图所示。下列
叙述错误的是（ ）
A．细胞A 为培育到MⅡ期的卵母细胞
B．克隆鼠的遗传物质主要来自鼠成纤维细胞
C．利用胚胎干细胞作为核供体更难培育克隆鼠
D．在培养瓶中培养成纤维细胞时会出现细胞贴壁和接触抑制现象
【分析】分析图示可知：本实验主要涉及的技术为体细胞核移植技术和动物细胞培养。体细胞核移植相
比较于胚胎细胞核移植更难实现，动物细胞培养一般存在贴壁生长和接触抑制现象。
【解答】解：A、用于细胞核移植的受体细胞为培育到MI 中期的卵母细胞，A 正确；
B、由于重组细胞的细胞核来自于鼠成纤维细胞，因此克隆鼠的遗传物质主要来自鼠成纤维细胞，B 正
确；
C、胚胎干细胞进行核移植更容易成功，是由于其分化程度低，全能性表现更容易，C 错误；
D、动物细胞培养时常常表现出贴壁生长和接触抑制现象，D 正确。
故选：C。
【点评】本题考查核移植和动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，难度不大。
10. （2022•南京模拟）科学家培育克隆羊时，使用了3 种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵母
细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重构胚，这些重构胚的发育情况如下，据此分析正确的是
（ ）
细胞核供体细胞类型
妊娠数/受体母羊数
7
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乳腺上皮细胞
胚胎成纤维细胞
早期胚胎细胞
A．细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行
B．重组细胞的发育与去核卵母细胞的细胞质无关
C．早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞时妊娠成功率最高
D．培养动物细胞的培养液中含维生素、动物激素等多种能源物质
【分析】哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。选用去核
卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作；卵（母）细胞细胞质多，营养丰富，可以激活
细胞核表达全能性。
【解答】解：A、细胞核移植主要在同种动物细胞的普通细胞与去核卵细胞之间进行，不是同种组织，
A 错误；
B、去核卵细胞的细胞质才能让重组细胞的发育表达出全能性，B 错误；
C、早期胚胎细胞分化程度低，作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高，C 正确；
D、培养动物细胞的培养液中需含维生素、生长因子等物质，但它们不是能源物质，D 错误。
故选：C。
【点评】本题考查细胞工程技术在核移植中的应用，要求考生理解并识记有关技术的原理及操作步骤，
掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
11.
（2023•日照模拟）乳腺癌、胃癌细胞表面有大量的HER2 蛋白，T 细胞表面有CD3 蛋白和CD28 蛋白。研
究人员将上述三种蛋白作为抗原分别制备单克隆抗体，然后将其在体外解偶联后重新偶联制备得到三特异
性抗体，简称三抗（如图）。下列说法错误的是（ ）
A．同时注射3 种抗原蛋白，可刺激B 细胞增殖分化为分泌三抗的浆细胞
B．利用抗原—抗体杂交的原理筛选图示三抗时需要3 种相应抗原蛋白
C．与植物原生质体融合相比，制备单抗时可采用灭活的病毒进行诱导融合
D．与单抗相比，三抗增加了两个特异性抗原结合位点，对癌细胞的杀伤更强
8
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【分析】根据题意，三种特异性抗体能同时与HER2 蛋白、CD3 蛋白和CD28 蛋白特异性结合，进而将
T 细胞带至肿瘤细胞处，促进T 细胞对肿瘤细胞的杀伤。
【解答】解：A、每个浆细胞只能产生一种抗体，A 错误；
B、筛选图示三抗时，需要用3 种相应抗原蛋白利用抗原—抗体杂交的原理进行筛选，B 正确；
C、动物细胞融合过程中可用灭活的病毒诱导融合，而植物细胞融合不能用灭活的病毒诱导，C 正确；
D、与单抗相比，三抗增加了两个特异性抗原结合位点，除了抗体的作用，还将T 细胞带至肿瘤细胞处，
促进T 细胞对肿瘤细胞的杀伤，因此对癌细胞的杀伤更强，D 正确。
故选：A。
【点评】本题考查免疫调节和单克隆抗体的相关知识，考查考生的识图能力，根据所学知识解决问题的
能力。
12. （2023•岳阳县模拟）甲状旁腺激素（PTH）是调节钙磷代谢的主要激素之一，临床上可通过PTH 来评估
骨转换、肾脏疾病以及血液透析患者的预后。研究人员利用人PTH 免疫小鼠制备抗PTH 的单克隆抗体，
以建立快速检测PTH 的方法。下列说法错误的是（ ）
A．利用人PTH 免疫小鼠的目的是获得能产生抗PTH 抗体的B 淋巴细胞
B．诱导骨髓瘤细胞和B 淋巴细胞融合后，再进行筛选才能获得杂交瘤细胞
C．将从选择培养基上获得的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔即可生产单克隆抗体
D．抗PTH 的单克隆抗体用于检测血清PTH 时，不与其他蛋白质激素相结合
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经
免疫的B 淋巴细胞，诱导B 细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检
测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；
最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【解答】解：A、为获得能产生抗PTH 抗体的B 淋巴细胞，可用人PTH 对小鼠进行免疫，A 正确；
B、诱导骨髓瘤细胞和B 淋巴细胞融合后，再利用选择性培养基把杂交瘤细胞筛选出来，B 正确；
C、从培养基获得的杂交瘤细胞，还需要经过抗体检测和克隆化培养才能获得足够数量的能产生所需抗
体的杂交瘤细胞，C 错误；
D、由于抗体与抗原的特异性，抗PTH 的单克隆抗体用于检测血清PTH 时，不与其他蛋白质激素相结
合，D 正确。
故选：C。
【点评】本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间
内在联系，运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
13. （2023•滨州二模）如图所示为单克隆抗体的结构，其中抗体的VH 区和VL 区共同构成与抗原特异结合的
9
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部位。科学家利用蛋白质工程对A 抗原的单克隆抗体结构进行改造，获得了一种只含A 单抗V 区的抗体，
称为A 纳米抗体。该抗体虽结构简单，但具有比A 单抗更强的特异性结合A 抗原的能力。下列说法错误的
是（ ）
A．注射病原体可能引起动物产生多种抗体
B．可利用纳米抗体偶联药物进行靶向运输
C．设计纳米抗体过程中，首先要做的是筛选具有优良活性的单克隆抗体
D．纳米抗体与A 抗原特异性结合力更强，原因可能是与抗原接触面积更大
【分析】利用蛋白质工程对A 抗原的单克隆抗体结构进行改造，获得了一种只含A 单抗V 区的抗体，
称为A 纳米抗体。蛋白质工程属于第二代基因工程。
【解答】解：A、病原体可能有多种抗原，注射病原体可能引起动物产生多种抗体，A 正确；
B、可利用纳米抗体偶联药物形成“生物导弹”进行靶向运输，B 正确；
C、设计纳米抗体属于蛋白质工程，首先要做的是设计纳米抗体的空间结构，C 错误；
D、纳米抗体与A 抗原特异性结合力更强，原因可能是与抗原接触面积更大，D 正确。
故选：C。
【点评】本题主要考查单克隆抗体的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系
的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
14. （2023•鄄城县校级三模）精准爆破肿瘤细胞的“生物导弹”——ADC（抗体偶联药物）能对肿瘤细胞进
行选择性杀伤，该物质由抗体（导弹体）、药物（核弹头）和接头三部分组成，ADC 的作用机制如图。下
列相关叙述错误的是（ ）
10
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A．ADC 的制备过程运用了细胞培养和细胞融合技术
B．制备ADC 中的抗体需要经过两次筛选
C．ADC 能精准地识别肿瘤细胞，进入癌细胞需要消耗ATP
D．癌细胞的凋亡是由于溶酶体中水解酶的水解作用
【分析】单克隆抗体的制备过程：
（1）制备产生抗体的B 淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B 淋
巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B 淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交
瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测。
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：A、ADC 是抗体与药物的偶联物，其制备过程运用了细胞培养和细胞融合技术，A 正确；
B、制备ADC 中的抗体为单克隆抗体，至少涉及两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选
出杂交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测的方法筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的
杂交瘤细胞，B 正确；
C、ADC 能精准地识别肿瘤细胞，进入癌细胞为胞吞，需要消耗ATP，C 正确；
D、结合图示可知，癌细胞的凋亡是由于溶酶体中水解酶将ADC 水解，释放药物，药物将癌细胞裂解，
D 错误。
故选：D。
【点评】本题考查细胞癌变的机制和防治，要求学生在掌握细胞癌变的原因、凋亡的特点等基础上，对
题干中给出的模式图精准分析，归纳出ADC 杀伤肿瘤细胞的过程，据此答题。
15. （2023•泰安一模）一种杂交瘤细胞只能产一种抗体，抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科学
家通过动物细胞融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞（A 和B）融合形成双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞
能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体AB。过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
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A．杂交瘤细胞A、B 混合并诱导融合后，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞AB
B．双杂交瘤细胞同时识别α、β 抗原后，才能产生双特异性抗体
C．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理
D．将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，腹水能为细胞提供所需的营养条件
【分析】抗原α、β 分别注射到小鼠体内，小鼠分别产生的α、β 的两种单克隆抗体；双杂交瘤细胞产生
双特异性抗体。
【解答】解：A、单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞需要进行两次筛选，第一次利用选择培养基筛选
出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细胞，第二次筛选可用抗原﹣抗体杂交的方法筛选出产生
特异性抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞本身就是由两个杂交瘤细胞融合而成，利用选择培养基无法筛
选出双杂交瘤细胞AB，A 正确；
B、杂交瘤细胞是由已免疫的B 细胞和骨髓瘤细胞融合，无需接触抗原就能产生抗体，B 错误；
C、杂交瘤细胞是悬浮培养的细胞，细胞之间并未接触，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上
清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C 正确；
D、将杂交瘤细胞注射到小鼠腹水中培养，腹水作为天然培养基，为细胞提供各种生长条件，D 正确。
故选：B。
【点评】本题主要考查的是单克隆抗体的制备以及应用的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌
握，难度适中。
16. （2023 春•武汉期末）如图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述，错误的是（ ）
A．每个脾B 淋巴细胞只能产生一种抗体
B．细胞融合可使用灭活病毒，灭活病毒的抗原结构依然存在
C．灭活的病毒促融合的效率一般不能达到100%
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D．克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经
免疫的B 淋巴细胞，诱导B 细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行抗体检
测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，
最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【解答】解：A、脾B 淋巴细胞只能产生针对相应抗原的抗体，每个脾B 淋巴细胞只能产生一种抗体，
A 正确；
B、灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，
使细胞互相凝聚，故灭活病毒的抗原结构依然存在，B 正确；
C、灭活的病毒能诱导动物细胞融合，但促融合的效率一般不能达到100%，C 正确；
D、杂交瘤细胞无接触抑制现象，故克隆化培养过程中杂交瘤细胞不会出现接触抑制的现象，D 错误。
故选：D。
【点评】本题主要考查单克隆抗体及其应用，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的
能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
17. （2023 春•高碑店市期末）中国科学院团队对雌性猕猴进行克隆，成功获得“中中”和“华华”两姐妹，
突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理
研发诊治药物带来光明前景。下列相关叙述不正确的是（ ）
A．这说明已分化的动物体细胞的细胞核是具有全能性的
B．该过程属于无性生殖，图中的卵子实际上是次级卵母细胞
C．激活重构胚后在体外进行培养后得到克隆猴
D．中中、华华的性别由纤维细胞的遗传物质决定
【分析】动物细胞核移植技术是将动物的细胞核移入一个去核卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，
继而发育成动物个体的技术。分析图示可知，①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②为对重组
细胞进行体外培养，发育成新胚胎，再进行③胚胎移植过程，最终获得克隆猴。
【解答】解：A、该过程没有经过精卵的结合，属于无性繁殖过程，重组细胞能发育成完整个体说明动
物体细胞的细胞核具有全能性，A 正确；
B、该过程没有经过精卵的结合，属于无性繁殖过程，体外培养到减数第二次分裂中期的卵子才能参与
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受精，图中的卵子实际上是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞，B 正确；
C、激活重构胚后在体外进行培养后得到胚胎，即胚胎的体外培养，然后移植到代孕母猴内进一步发育
形成克隆猴，C 错误；
D、中中、华华是由重组细胞发育而来，其细胞核内的遗传物质来自纤维细胞，因此性别由纤维细胞的
遗传物质决定，D 正确。
故选：C。
【点评】本题考查了细胞核移植技术、动物胚胎移植，要求学生识记动物胚胎移植的过程，掌握细胞核
移植技术的过程，明确克隆动物遗传物质的来源，并结合所学知识准确判断各项。
18. （2021•河南模拟）某科研人员将人的体细胞的细胞核植入兔去核的卵母细胞中，使之融合形成杂种细胞，
培养杂种细胞使之发育至囊胚期，从中分离出人的胚胎干细胞，通过体外培养可知，获得的胚胎干细胞能
长期增殖并保持不分化的状态。回答下列问题：
（1）动物细胞培养技术是其他动物细胞工程的基础，该技术的原理是
。培养人的细胞时，
要将人的细胞置于
气体环境中培养。为了防止杂菌污染，在培养过程中
可采取的措施有
。
（2）在接受移植的细胞核之前，兔的卵母细胞需要在体外培养至
（填时期）。
人的细胞核能在兔去核的卵母细胞中重新启动，原因是兔去核的卵母细胞中有
。
（3）从功能上分析，获得的胚胎干细胞的特点是
。在体外培养胚胎干细胞
时，常在培养皿底部铺设一层饲养层细胞，其作用是
。
【分析】动物细胞培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢
废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、体细胞核移植过程：
（以克隆高产奶牛为例）
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【解答】解：（1）动物细胞培养技术依据的原理是细胞增殖，培养液中通入一定浓度的CO2可维持培
养液pH 值的稳定，为了防止杂菌污染，在培养过程中可加入抗生素，定期更换培养液。
（2）在接受移植的细胞核之前，兔的卵母细胞需要在体外培养至减数第二次分裂中期）。人的细胞核
能在兔去核的卵母细胞中重新启动，原因是兔去核的卵母细胞中有能激发人细胞核全能性的物质。
（3）从功能上分析，胚胎干细胞的特点是具有发育的全能性。在体外培养胚胎干细胞时，常在培养皿
底部铺设一层饲养层细胞，其作用是抑制细胞分化，促进细胞生长。
故答案为：
（1）细胞增殖 含95%空气+5%CO2的混合 加入抗生素，定期更换培养液
（2）减数第二次分裂中期 能激发人细胞核全能性的物质
（3）具有发育的全能性 抑制细胞分化，促进细胞生长
【点评】本题考查了动物细胞培养和动物细胞核移植的相关知识，意在考查考生的理解和应用能力，难
度适中。
19. （2023 春•新洲区校级期末）破伤风类毒素单克隆抗体可以用于破伤风的快速检测及治疗。如图是我国科
学工作者制备破伤风类毒素单克隆抗体的过程示意图。请回答下列问题：
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（1）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是
。单克隆抗体制备过程运用了
等技术手段。
（2）过程⑤所用的HAT 培养基从用途上看属于选择培养基。该培养基选择的结果是
。经过选择性培养的杂交瘤细胞，
还需进行
，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需特异抗体的细
胞。
（3）过程⑥中将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在96 孔板的细胞培养，使每孔细胞尽量只接种
个，
通过培养让其增殖，然后通过ELISA 法（又称酶联免疫吸附试验法）检测各孔上清液中细胞分泌的抗
体，可与
结合的培养孔为阳性孔。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或
注射到小鼠腹腔内增殖，从
或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。
【分析】在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠免疫，产生相应的浆细胞，然后将浆细胞与骨髓瘤细胞融
合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，
使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。
【解答】解：（1）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的特点是能准确识别抗原的细微差异，与
特定抗原发生特异性结合，并且能大量制备。由图可看出，单克隆抗体制备过程运用了动物细胞培养和
动物细胞融合等技术手段。
（2）过程⑤可筛选出杂交瘤细胞，其所用的HAT 培养基从用途上看属于选择培养基。在该培养基上，
未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞会死亡，从而筛选出既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗
体的杂交瘤细胞。经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可
获得足够数量的能分泌所需特异抗体的细胞。
（3）过程⑥筛选的是能产生特定抗体的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多
孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1 个，通过培养让其增殖，然后通过ELISA 法检测各孔上清液
中细胞分泌的抗体，可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培
养，或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。
故答案为：
（1）能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，大量制备 动物细胞培养和动物细
胞融合
（2）未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 克
隆化培养和抗体检测
（3）1 特定抗原（破伤风类毒素） 细胞培养液
【点评】本题考查细胞工程技术在单克隆抗体制备中的应用，要求考生理解并识记有关技术的原理及操
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作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
20. （2023•大连二模）干细胞的应用前景吸引众多科学家投入到相关研究中。请回答下列问题：
（1）人体干细胞主要包括成体干细胞和
，后者可以从囊胚的
中获取，这涉
及了
问题，因此限制了其在医学上的应用。将诱导患者的皮肤成纤维细胞获得的iPS 细胞用于
该患者疾病的治疗，其优点是
。
（2）科学家将Oct3/4、Sox2、Klf4 和c
Myc
﹣
基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，然后在特
定培养基中培养可获得iPS 细胞。
①在进行细胞培养时除了提供充足的营养和所需气体环境外，还需满足的条件有
。
②实验中逆转录病毒的作用是
。
③已知c
Myc
﹣
是原癌基因，研究表明将诱导iPS 细胞获得的神经干细胞移入小鼠体内会增加发生恶性
肿瘤的风险，推测可能的原因是细胞中原癌基因
导致相应蛋白质活性过强。当实
验对象是人类成纤维细胞时，为提高应用iPS 细胞的安全性，可通过设计实验判断c
Myc
﹣
在诱导获得
iPS 细胞的过程中是否必需，思路如下：将导入
的小鼠成纤维细胞，与导入
的小鼠成纤维细胞的诱导情况进行比较。
【分析】胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，
具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖
而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
【解答】解：（1）人体干细胞主要包括成体干细胞和胚胎干细胞。其中胚胎干细胞可以从囊胚的内细
胞团中获取，但这涉及了伦理问题，因此限制了其在医学上的应用。
诱导患者的皮肤成纤维细胞获得的iPS 细胞是一种全能干细胞，可用于该患者疾病的治疗，避免了免疫
排斥反应。
（2）①在进行动物细胞培养时除了提供充足的营养和所需气体环境外，还需要无菌无毒的环境、适宜
的温度、pH 和渗透压等条件。
②逆转录病毒可以作为载体，将目的基因（外源基因）导入小鼠成纤维细胞（受体细胞）中。
③诱导iPS 细胞获得的神经干细胞移入小鼠体内会增加发生恶性肿瘤的风险，推测可能的原因是细胞中
原癌基因突变或过量表达，从而导致相应蛋白质活性过强所致。判断c
Myc
﹣
在诱导获得iPS 细胞的过
程中是否必需的实验思路如下：将导入Oct3/4、Sox2、和Klf4 的小鼠成纤维细胞，与导入Oct3/4、
Sox2、Klf4 和c
Myc
﹣
的小鼠成纤维细胞的诱导情况进行比较，观察二者是否相同。
故答案为：
（1）胚胎干细胞 内细胞团 伦理 避免免疫排斥反应
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（2）①无菌无毒的环境、适宜的温度、pH 和渗透压
②作为载体，将目的基因（外源基因）导入小鼠成纤维细胞（受体细胞）中
③突变或过量表达 Oct3/4、Sox2、和Klf4 Oct3/4、Sox2、Klf4 和c
Myc
﹣
【点评】本题主要考查干细胞的培养及其应用，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和
所学知识进行分析应用。
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