文档内容
（九）：生物技术实践
1.下列有关传统发酵技术的应用，叙述错误的是( )
A.家庭制作果酒与工厂化制作果酒区别之一是原料是否灭菌
B.制作果醋时需要连续通入氧气，否则醋酸菌会缺氧死亡
C.腐乳制作时卤汤中酒的含量应控制在21%左右，含量过高，腐乳成熟的时间会延长
D.制作泡菜时，在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内的无氧环境
2.关于测定亚硝酸盐含量实验操作的有关叙述，正确的是( )
A.泡菜制作需要配制盐水,其中盐与水的质量比为4:1
B.在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料
C.制备样品处理液,加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液
D.泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用 量不影响其含量
3.下列有关培养基配制的描述,正确的是( )
A.液体培养基常用于菌种的分离、计数、鉴定
B.任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐等成分
C.依据微生物的需求,配制出的供微生物生长繁殖的营养基质
D.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、渗透压等的影响
4.研究人员从土壤中分离岀A、B、C、D四种菌株，并用选择培养基对其进行鉴别和筛选，结
果如表所示。下列叙述正确的是( )
以维生素为唯 以酪蛋白为唯
以淀粉为唯一 以尿素为唯一
一碳源的培养 一氮源的培养
碳源的培养基 氮源的培养基
基 基
菌株A +++ - - -
菌株B - +++ - -
菌株C +++ + - -
菌株D - - +++ -
注:+代表产生透明圈，+数量越多表示透明圈越大，-代表无透明圈。
A.四种菌株均可以尿素作为唯一氮源
B.菌株B主要以纤维素作为碳源
C.以淀粉为唯一碳源的培养基可鉴别出菌株A和菌株C
D.菌株C在以纤维素为唯一碳源的培养基上不能生长5.乙草胺（C H C NO ）是一种广泛应用的除草剂，其分解产物和尿素相同，但分解过程却比
14 20 1 2
尿素更复杂。我国科学工作者从土壤中分离获得能有效降解乙草胺的菌株，为利用乙草胺进
行生物修复提供了微生物资源。下列有关叙述错误的是( )
A.从使用乙草胺的土壤取样，使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离
B.配制以乙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可提髙降解菌的浓度
C.在分离纯化菌种后，需要借助生物化学的方法对分离的菌种做进一步的鉴定
D.提供适宜的温度，将培养基的pH调至酸性，有利于降解菌的生长繁殖
6.以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。下列相关
叙述不正确的是( )
A.以绿色叶片和白色花瓣作为外植体，进行组织培养均能获得试管苗
B.外植体脱分化培养成愈伤组织的过程，需要植物生长调节剂的处理
C.若用某一细胞进行组织培养，该细胞必须有完整的细胞核和叶绿体
D.选用花粉粒进行组织培养，不能获得与原植株基因型相同的植物体
7.选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素之一，下列说法正确的是( )
A.任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体
B.对所有植物来说，双核期时花药培养成功率最高
C.对一般植物而言，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高
D.为了挑选到单核期的花药，通常选择略微开放的花朵
8.下面是研究人员以复合酶制剂为材料进行研究的结果，相关叙述错误的是( )
温度/℃ 20 30 40 45 50 60
不加酶去污力/% 15 18 20 21 21.5 22
加酶去污力/% 30 40 48 50 48 37
A.本研究的主要目的是探究温度对复合酶制剂去污力的影响
B.实验所用污布上污染物种类、污染程度等均会影响实验结果
C.实验结果表明，加复合酶制剂后的洗涤温度以40~50℃为宜
D.当温度高于60℃时，加入的复合酶制剂会失去催化活性
9.甲、乙两个实验小组分别进行了“酵母细胞固定化技术”的实验,结果如下图所示。出现乙
组实验结果的原因可能为( )A.CaCl 溶液浓度过高 B.海藻酸钠溶液浓度过高
2
C.注射器滴加速度过慢 D.滴加时注射器出口浸入到CaCl 溶液中
2
10.下列关于凝胶色谱法分离蛋白质和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的叙述，不正确的是( )
A.在装填凝胶色谱柱时，一旦发现柱内有气泡存在，就需要重装
B.凝胶色谱法分离蛋白质时，大分子蛋白质因阻力大而移动慢，所以最后洗脱出来
C.进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，凝胶中加入的SDS可使蛋白质迁移率完全取决于分子
大小
D.因SDS带负电，故电泳时应在负极一侧点样
11.利用PCR既可以快速扩增特定基因，也可以检测基因的表达。下列有关PCR的叙述，错
误的是( )
A.PCR用的DNA聚合酶是一种耐高温酶
B.变性过程中，双链DNA的解开不需要解旋酶
C.复性过程中，引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则
D.延伸过程中，需要DNA聚合酶、ATP和4种核糖核苷酸
12.下列说法不正确的是( )
A.利用PCR扩增DNA时,需要加入两种引物,引物的基本组成单位是脱氧核苷酸或核糖核苷
酸
B.在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法中加入SDS的作用是使电泳迁速移率完全取决于分子
间的电荷差别
C.在提取血红蛋白的样品处理阶段,洗涤红细胞十分重要,其目的是洗去杂蛋白
D.凝胶色谱柱的装填不紧密,会导致血红蛋白分离过程中红色带区歪曲、散乱、变宽
13.为了筛选获得高产纤维素酶细菌，为新型饲料添加剂的开发提供材料基础。研究人员以玉
米地土壤为样品，使用刚果红平板法筛选获得菌株X。相关叙述错误的是( )
A.刚果红平板以刚果红作为唯一碳源，并添加适量琼脂
B.分离菌株前应对土壤溶液进行摇床培养，以扩大目标菌株数量C.可以先用稀释涂布平板法初筛菌种，再用平板划线法纯化菌种
D.需对菌株X所产生的纤维素酶进行酶活力的测定
14.下列关于探究果胶酶在果汁生产中作用的操作,错误的是( )
A.可以用体积分数为0.1%的NaOH溶液和盐酸进行pH调节
B.为了使果胶酶充分发挥作用,应用玻璃棒不时地搅拌反应混合物
C.制作苹果泥时,可先将苹果切成小块放入榨汁机中
D.用橙子做本课题实验,应去掉橙皮
15.腐乳制作的流程图如下，下列说法不正确的是( )
A.先将豆腐切成块放在消过毒的笼屉中，保持温度在15~18℃，并保持一定湿度
B.毛霉为好氧型真菌，为避免其无氧呼吸，放置豆腐块时要留出一定缝隙
C.将长满毛霉的豆腐分层装瓶腌制时，底层和接近瓶口表面的盐要铺厚一些
D.用胶条密封瓶口时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，以防止瓶口被污染
16.下列关于“泡菜腌制和亚硝酸盐测定”实验的叙述，错误的是( )
A.亚硝酸盐的测定过程需使用显色剂硫酸锌
B.亚硝酸盐的存在是泡菜能较长时间储存的原因之一
C.发酵过程中，亚硝酸盐含量变化趋势为先增加后减少
D.样品亚硝酸盐含量测定结果偏大，原因可能是测定样品时选用了光程更大的比色杯
17.图甲是果酒和果醋发酵的装置图，图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列有
关叙述中，正确的是( )
A.甲装置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作
B.用甲装置制作果酒时，要加入适量的酵母菌，且一直关紧阀b
C.酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度高于果醋发酵
D.过程③和④都需要氧气的参与，且反应场所相同18.泡菜起源于中国，是我国的传统食品之一。贾思勰《齐民要术》中已有制作泡菜的专述：
“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜。若先用淡水洗者，菹烂。洗菜盐水，澄取清者，泻者瓮中，
令没菜把即止，不复调和。”该表述说明食盐的用量非常关键。研究小组探究泡菜制作过程
中不同浓度的食盐对亚硝酸盐产生的影响，结果如图。下列相关叙述正确的是( )
A.腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是细胞呼吸产生水
B.微生物无氧环境的创设主要依靠盐水的浸没，因此蔬菜不能露出水面
C.食盐的浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值越高，这与杂菌繁殖数量有关
D.达到峰值后，亚硝酸盐含量下降的原因是亚硝酸盐被微生物转变成亚硝胺
19.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是( )
A.在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌
B.步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
C.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
20.大肠杆菌pUC118 质粒具有氨苄青霉素抗性基因，某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ
基
因中。在特定的选择培养基中，若lacZ 基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ 基
因被破坏，则菌落呈白色。图表示转基因操作过程。下列有关叙述错误的是( )A．应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
B．若大肠杆菌的菌落为蓝色，则导入的是普通质粒
C．作为受体的大肠杆菌应含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选
D．选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素
21.三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素，但该菌株的高产性状容易退化，需要定期筛选出高产
菌株，研究表明菌体细胞内含有可将无色的TTC还原为红色复合物的物质，且菌体细胞内该
物质的含量越高，还原能力越强，胡萝卜素合成能力也越强。结合下列筛选菌株及提取胡萝
卜素的流程图回答问题:
(1)图中提取到胡萝卜素后进行鉴定一般要用_________法。胡萝卜素能够治疗夜盲症和干皮
症等疾病，是因为1分子的β-胡萝卜素可被氧化分解成2分子_________。
(2)图中收集菌丝后进行的处理是粉碎和_________，其中萃取的效率主要取决于萃取剂的
_________。
(3)图中将菌液涂布到含TTC的培养基上，目的是筛选出合成胡萝卜素较强的菌体，含TTC
的培养基属于(填“选择”或“鉴别”)培养基。对照组需将涂布等量_________的培养基放
入相同环境中培养，以判断培养基是否被污染。挑取单菌落时，若菌落周围_________，则菌
株合成胡萝卜素的能力较强。
22.腐乳是我国传统的发酵豆制品，已有近千年的历史。腐乳的生产过程一般分为前酵期(培
菌)和后酵期(装瓶后常温条件下放置，自然发酵3个月)，采集各时段腐乳坯样品，测定相关
物质含量如图所示。回答下列问题。(1)豆腐为毛霉的生长提供的基本营养物质有碳源、_______。毛霉产生的酶能将酪蛋白分解
而产生透明圈，将三种纯化的毛霉菌种接种在酪蛋白培养基中得到三种单菌落甲、乙、丙，其
菌落直径平均值分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm，菌落与透明圈一起的直径平均值分别为
3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落________(填“甲”、“乙”或“丙”)作为产蛋白酶活力高
的毛霉候选菌。
(2)装瓶腌制腐乳时，在接近瓶口的表面要将盐铺厚一点，原因是________。卤水中的香辛料
和料酒(食用酒)的作用是________。
(3)据图分析从“白块”到“晾晒2d”，腐乳坯中游离氨基酸含量变化的最主要原因是
________；加盐腌制(腌坯)之后，腐乳坯中的游离氨基酸含量下降的原因________(答出两点)。
请预测后酵期发酵瓶中的游离氨基酸的变化是________。
23.肠道疾病九成以上都是自身菌群失调引起的，酸奶被很多人看成是补充乳酸菌等益生菌
的食品。某兴趣小组拟用下图所示方法探究某品牌酸奶对小鼠肠道菌群的影响，请补充实验
内容。
(1)实验步骤:①选取状况良好、年龄和体重近似的小鼠20只，平均分为甲、乙两组。
②用含有某品牌酸奶的食物连续饲喂甲组小鼠12周；用含有等量的经过________处理的该
品牌酸奶的相同食物连续饲喂乙组小鼠12周作为对照，其他情况相同。
③收集两组小鼠粪便，制成悬浮液，用稀释涂布平板法接种在________(填“全营养”或“以
该品牌酸奶为唯一碳源”)的________(填“液体”或“固体”)培养基上。
④接种后置于________(填“有氧”或“无氧”)条件下培养，通过观察________以初步鉴定
小鼠肠道中的微生物种类。⑤统计并比较两组中微生物的种类和数量，分析得出结论。如果
在104稀释倍数下各取0.1mL稀释液涂布于3个平板上，经培养获得的菌落数分别为165、
160、170个，则1mL菌液中的微生物数为________个。
(2)若要验证菌群中含有大肠杆菌，配制培养基时添加________，培养基中出现黑色菌落则有
大肠杆菌。该培养基在功能上属于________培养基。
24.某小组为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份进行实验。甲、乙
两组在洗衣粉中加入蛋白酶和脂肪酶中的1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同
种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录。请分析回答：
水温
10 20 30 40 50
组别 甲 乙 丙 甲 乙 丙 甲 乙 丙 甲 乙 丙 甲 乙 丙
清除血 67 66 88 52 51 83 36 34 77 13 12 68 12 11 67
渍时间
清除油 93 78 95 87 63 91 82 46 85 75 27 77 69 8 68
渍时间
(1) 提高去污能力的方法有____________________________(至少答两点)，乙组在洗衣粉中
加入了__________酶。
(2) 甲、乙两组洗涤效果的差异，说明酶具有________。实验结果表明，加入了蛋白酶的洗衣
粉适宜的洗涤温度为________。
(3) 如果甲、乙和丙3组均在水温为100℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果并说明
理由：________________________________________________________________________。
(4) 加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用。请判断这是否运用
了酶的同定化技术并说明理由。
________________________________________________________________________
____________________________。
(5) 右图为某种碱性蛋白酶去污力的实验结果曲线，该实验的目的是________。50℃时加酶
洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量约是________%。
25.如图1表示研究人员为筛选纤维素酶高产菌株进行的相关实验流程,其中透明圈是微生物
在固体培养基上消耗特定营养物质形成的。请回答下列问题:
(1)本实验中,选择蘑菇培养基质作为纤维素酶高产菌株的来源,这是因为__________。
(2)筛选用的培养基应以__________作为唯一碳源,并在配制培养基时加入__________作为凝
固剂。筛选时应选择D/d较大的菌株,因为这一指标值越大说明__________。(3)图2、图3是研究纤维素酶的最适温度和热稳定性的结果。
①研究纤维素酶的热稳定性时,首先将纤维素酶液置于35—65℃的不同温度条件下保温2h,
再取上述不同温度处理的纤维素酶液和__________,并在__________℃下测定纤维素酶的催
化速率,计算酶活性残留率。
②生产中使用该纤维素酶时,最好将温度控制在40℃左右,依据是__________。
26.如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，
具体流程如下图(以EcoR I酶切为例)：
请据图回答问题：
(1)步骤Ⅰ用的EcoR I是一种酶，它通过识别特定的________________切割特定位点。
(2)步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3'-羟基与5'-磷酸间形成
________________；PCR循环中，升温到95 ℃是为了获得________________；Taq DNA聚合
酶的作用是催化________________。
(3)若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是
________________ (从引物①②③④中选择，填编号)。DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列）
已知序列
①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′
②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′
PCR引物
③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′
④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′
(4)对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中(虚线处省略了
部分核苷酸序列)，结果正确的是____________。
A.5'- AACTATGCG……AGCCCTT-3' B.5'- AATTCCATG ……CTGAATT-3'
C.5'- GCAATGCGT……TCGGGAA-3' D.5'- TTGATACGC……CGAGTAC-3'
答案以及解析
1.答案：C
解析：家庭制作果酒的菌种来源于原料或自然环境，原料不需要灭菌，而工厂化制作果酒，为
了达到最佳效果，必须先将原料进行灭菌，然后再接种菌种进行发酵，A正确；醋酸菌是需氧
型生物，对氧气含量非常敏感，缺氧会导致醋酸菌死亡，B正确；腐乳制作时卤汤中酒的含量
应该控制在12%左右，C错误；泡菜的制作主要依靠的是乳酸菌的无氧呼吸，在坛盖边沿的
水槽中注满水，以保证坛内的无氧环境，D正确。
2.答案：C
解析：泡菜制作需要配制盐水，其中盐与水的质量比为1:4，,A错误；在盐酸酸化条件下，亚
硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，产物与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红
色染料，B错误；制备样品处理液，加入氢氧化铝乳液的目的是吸附泡菜液中的色素等杂质，
使泡菜液变澄清，C正确；泡菜腌制时间的长短会影响亚硝酸盐含量，温度和食盐的用量也
会影响其含量，D错误。3.答案：D
解析：固体培养基常用于菌种的分离、计数、鉴定，A错误；培养基不一定含有碳源、氮源，如
培养自养型微生物的培养基不需加碳源，分离自生固氮菌的培养基不需加氮源，B错误；人
们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质叫培养基，C错误；
微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧气、渗透压等的影响，D正确。
4.答案：B
解析：A.由题意可知，选择培养基上的透明圈越大，说明分解相应物质的能力越强。由表格内
容可知，四种菌株在以尿素为唯一氮源的培养基上均不能产生透明圈，说明四种菌株均不能
分解尿素，即不能以尿素作为唯一氮源，错误。
B对比菌株B在四种选择培养基上产生透明圈的情况可知，菌株B主要以纤维素作为碳源，
正确。
C.菌株A和菌株C均可以淀粉为唯一碳源，因此不能用以淀粉为唯一碳源的培养基鉴别岀
菌株A和菌株C，错误。
D.菌株C在以纤维素为唯一碳源的培养基上可以生长，错误。
5.答案：D
解析：本题主要考查微生物的培养与分离，考查学生的实验与探究能力。培养霉菌时需要将
培养基的pH调至酸性，培养细菌时需要将培养基的 pH 调至中性或微碱性，D项错误。
6.答案：C
解析：本题考查的是植物组织培养的相关内容。植物的绿色叶片和白色花瓣均具有本物
种的全套遗传物质，利用它们作为外植体进行组织培养，均能获得试管苗；外植体脱分化
培养成愈伤组织的过程，需要生长素和细胞分裂素或其他植物生长调节剂的处理；选用
花粉粒进行组织培养获得的是单倍体植株，其体细胞核中DNA是原植株体细胞的一半，
因此选用花粉粒进行组织培养，不能获得与原植株基因型相同的植物体。
7.答案：C
解析：不同时期的花粉诱导成功率是不同的，在花粉发育的过程中，只有某一时期对离体刺
激敏感，并不是任何时期的花粉都可以产生愈伤组织或胚状体，A错误；对一般植物而言，在
单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高，B错误，C正确；为了挑
选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾，对于盛开或略微开放的花，花瓣已经松动，
给材料消毒带来困难，D错误。
8.答案：D解析：据表格内容可知，本题的自变量是不同的温度，因变量是加酶去污力与不加酶去污力
的大小，因此本研究的主要目的是探究温度对复合酶制剂去污力的影响，A正确;实验中的无
关变包括污布上污染物种类、污染程度等，这些无关变量均会影响实验结果，B正确;据表格
实验数据可知，40~50℃时，加复合酶制剂的去污力最强，洗涤衣物时应控制温度在该范围
最适宜，C正确;据表格数据只能看出在40~50℃范围内，加入的复合酶制剂的活性先增加
后减少，且40~50℃时复合酶制剂的活性最高，60℃复合酶制剂的活性下降，无法看出温度
高于60℃时，复合酶制剂会失去催化活性，D错误。
9.答案：B
解析：题图所示的凝胶珠不是圆形或椭圆形，而呈蝌蚪状，原因可能是海藻酸钠溶液浓度偏
高或注射器中的混合液推进速度过快，故选B。
10.答案：B
解析：在装填凝胶色谱柱时，凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在，因为气泡会影响
蛋白质洗脱的次序，因此一旦发现柱内有气泡存在，就需要重装，A正确；凝胶色谱法分离蛋
白质时，大分子蛋白质因不能进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程短，移动速度
快，所以最先洗脱出来，B错误；进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，凝胶中加入的SDS可使
蛋白质迁移率完全取决于分子大小，C正确；因SDS带负电，故电泳时应在负极一侧点样，D
正确。
11.答案：D
解析：A、PCR用的DNA聚合酶是一种耐高温酶，A正确；
B、变性过程中，双链DNA的解开不需要解旋酶，该过程通过高温使DNA双链间的氢键断裂，
B正确；
C、复性过程中，引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则，C正确；
D、延伸过程中，需要DNA聚合酶、ATP和4种脱氧核糖核苷酸，D错误。
故选：D。
12.答案：B
解析：利用PCR扩增DNA时,需要加入两种引物,引物是一小段DNA或RNA,其基本单位是
脱氧核苷酸或核糖核苷酸,A正确;在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法中加入SDS的作用是
掩盖不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移速率完全取决于分子的大小,B错误; 在提取血红
蛋白的样品处理阶段,洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,以利于后续步骤的分离纯化,C正确;在血红蛋白分离过程中,如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明凝胶色谱柱的装填不紧密,需重
新装填,D正确。
13.答案：A
解析：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，是一种鉴定试剂，不能作为高产纤维素酶细菌
的碳源，A错误；分离菌株前应对土壤溶液进行摇床培养，可增加培养液中的溶氧量以及菌
体与培养液的接触，以扩大目标菌株数量，B正确；筛选高产纤维素酶细菌时，可先用稀释涂
布平板法初筛菌种，挑选透明圈较大的菌落，再用平板划线法纯化菌种，C正确；为了保证菌
株X产生的纤维素酶具有较高活性，能将纤维素高效分解，还需对菌株X所产生的纤维素酶
进行酶活力的测定，D正确。
14.答案：D
解析：可以用体积分数为0.1%的NaOH溶液和盐酸进行pH调节，A正确;用玻璃棒不时地搅
拌反应混合物，有利于底物与果胶酶充分接触，B正确;苹果切成小块，有利于果胶酶与底物
的接触，C正确;橙子不需要去皮，D错误。
15.答案：C
解析：先将豆腐切成块放在消过毒的笼屉中，保持温度在15~18℃，并保持一定的湿度，A正
确;参与腐乳制作的微生有多种，其中起主要作用的是毛霉，而毛霉为好氧型真菌，所以为避
免其无氧呼吸，放置豆腐块时要留出一定缝隙，B正确;将长满毛霉的豆腐放入瓶中，并逐层
加盐，接近瓶口表面的盐要铺厚一些，避免杂菌污染，C错误;用胶条密封瓶口时，最好将瓶口
通过酒精灯的火焰，以防止瓶口被污染，D正确。
16.答案：A
解析：A、对氨基苯磺酸溶液与N-1-萘基乙二胺溶液等体积混合作为亚硝酸盐的测定的显色
剂，A错误；B、亚硝酸盐浓度较高，微生物因失水而不能生存，B正确；C、在泡菜腌制过程中，
亚硝酸盐含量先增加，一般腌制10d后，亚硝酸盐含量开始下降，C正确；D、如果样液的比色
杯光程大于制作标准曲线时的比色杯光程，测得的样液中亚硝酸盐含量偏大，D正确。故选
A。
17.答案：A
解析：本题考查果酒和果醋的制作。甲装置中，阀a控制进气，阀b控制排气，所以可先用于
果酒的制作，后阀a保持开放，用于果醋的制作，A正确；甲装置中，阀a控制进气，阀b控制
排气，制作果酒时应关闭阀a以创造缺氧环境，适时打开阀b几秒钟以排出产生的CO，B错
2
误；果酒发酵的最适温度是18~25℃，果醋发酵的最适温度是30~35℃，所以果醋发酵所需的最适温度高于果酒发酵，C错误；过程③表示酵母菌有氧呼吸的第二和第三阶段，该过程的
反应场所是线粒体，过程④表示果醋发酵，醋酸菌属于原核生物，所以该过程的反应场所是
细胞质基质，D错误。
18.答案：C
解析：腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是蔬菜在高于细胞液浓度的盐水中
失水，A错误；为了保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境：①选择的泡菜坛要封闭性好；②加
入蔬菜后要注入煮沸冷却的盐水，使盐水没过全部蔬菜；③盖上坛盖后要在坛边沿的水槽中
注满清水，主要依赖①③，B错误；由于食盐用量过低，造成微生物大量繁殖，将蔬菜中的硝
酸盐还原成亚硝酸盐，所以制作泡菜时食盐的浓度越低，亚硝酸盐含量的峰值出现得越早，
且峰值较高，C正确；据图分析可知，食盐用量和腌制时间都会影响亚硝酸盐含量；亚硝酸盐
含量达到峰值后下降，是因为缺氧和酸性环境抑制杂菌生长，使亚硝酸盐的产生量降低；同
时乳酸菌产生亚硝酸还原酶会将亚硝酸盐分解，D错误。
19.答案：C
解析：培养和分离微生物时，需要配制培养基，将配方中的试剂溶化以后要先调pH，再用高
压蒸汽灭菌法灭菌，这样可以减少被杂菌污染的机会，A正确；纯化微生物时，不管使用哪种
接种方法，目的都是将聚集在一起的细菌分散成单个细胞，从而获得单菌落，B正确；根据图
示可知，接种方法是稀释涂布平板法，但是要筛选出能高效分解尿素的细菌，所使用的培养
基应以尿素为唯一氮源，而牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，所以步骤③不能用牛肉膏蛋白胨
培养基，C错误；步骤④是要对细菌分解尿素的能力进行鉴定和比较，所以需要从③中挑取
不同的菌落，分别接种，彼此形成相互对照，根据结果比较分析，D正确。
20.答案：C
解析：A、白色菌落的大肠杆菌是转入了目的基因的，所以应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩
大培养，A正确；
B、若大肠杆菌的菌落为蓝色，说明lacZ基因没有被破坏，因此证明导入的是普通质粒，B正
确；
C、PUC118质粒携带了氨苄青霉素抗性基因，为了便于筛选，受体大肠杆菌应不含氨苄青霉
素抗性基因，这样才能在含有氨苄青霉素的培养基上筛选出导入重组质粒的受体大肠杆菌，
C错误；
D、图中可以看出，质粒中还存在氨苄青霉素抗性基因，因此培养基中加入适量氨苄青霉素，
这样可以将没有导入目的基因的大肠杆菌淘汰，D正确。故选：C。
21.答案：（1）纸层析；维生素A
（2）干燥；性质和使用量
（3）鉴别；无菌水；红色圈较深（或红色圈较大）
解析：（1）对胡萝卜素进行分离鉴定的方法是纸层析法；1分子β-胡萝卜素在人体内可被氧
化成2分子的维生素A，因此，β-胡萝卜素可以用来治疗夜盲症等疾病。
（2）图中收集菌丝后进行的处理是粉碎和干燥，使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度；胡
萝卜素萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。
（3）筛选出合成胡萝卜素较强的菌体使用鉴别培养基；对照组培养基涂布等量无菌水，放入
相同环境中培养，观察是否产生菌落，判断培养基是否被污染；依据“研究表明菌体细胞内
含有可将无色的TTC还原为红色复合物的物质，且菌体细胞内该物质含量越高，还原能力越
强，胡萝卜素合成能力也越强”，推测挑取单菌落时，菌落周围红色圈越大，颜色越深，该菌
株合成胡萝卜素能力越强。
22.答案：(1)水、无机盐、氮源；乙
(2)瓶口处被杂菌污染的可能性较大，加多点盐可以有效抑制微生物的生长；抑菌、防腐和调
味
(3)毛霉等微生物产生的蛋白酶将蛋白质分解成氨基酸，使氨基酸含量增加；食盐使毛霉的酶
活性降低；加盐使豆腐中的水分析出，部分氨基酸随之析出；增加
解析：判断产蛋白酶活力高低的指标是菌落直径和菌落与透明圈一起的直径的比值，比值越
大，说明该菌产蛋白酶活力越低，所以产蛋白酶活力最高的是乙组的毛霉。“白块”到“晾
晒2d”发生的变化依赖毛霉进行的发酵，毛霉等微生物产生的蛋白酶将蛋白质分解成氨基酸，
使氨基酸含量增加。加盐腌制后，由于食盐使毛霉的酶活性降低，同时加盐使豆腐中的水分
析出，部分氨基酸随之析出，所以，腐乳坯中的游离氨基酸含量下降。后酵期由于有蛋白酶继
续进行发酵，所以发酵瓶中的游离氨基酸会增加。
23.答案：(1)②灭菌；③全营养；固体；④无氧；菌落的特征；⑤1.65×107
(2)伊红美蓝；鉴别
解析：(1)②探究实验需要遵循对照原则和单一变量原则。该实验的目的是探究某品牌酸奶对
小鼠肠道菌群的影响，因此可用含有某品牌酸奶的食物连续饲喂甲组小鼠12周(实验组)，用
含有等量的经过灭菌的该品牌酸奶的相同食物连续饲喂乙组小鼠12周(对照组)。
③该实验的目的是探究某品牌酸奶对小鼠肠道菌群的影响，而不是筛选出某种微生物，因此
应收集甲组和乙组(实验组和对照组)小鼠粪便制成悬浮液涂布于全营养的固体培养基上。④肠道菌群生活在缺氧的环境中，因此接种后应该置于无氧条件下培养，通过观察菌落的特
征以初步鉴定小鼠肠道中的微生物种类。
⑤在104稀释倍数下各取0.1mL稀释液涂布于3个平板上，经培养获得的菌落数分别为
165、160、170个，平均值为165个，则1mL菌液中微生物数为 个。
(2)伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌，含有伊红美蓝的培养基属于鉴别培养基。
24.答案：增加洗衣粉的用量、加酶、延长浸泡时间和适当提高温度等(答两点即给分) 蛋白酶
和脂肪
(2) 专一性 50℃左右(答“大于40℃”也可)
(3) 没有差异，因为高温使酶失活(须答全)
(4) 未运用酶的固定化技术，因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用(须答全)
(5) 探究温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响 0.6
解析：（1）根据表格显示，将丙组与甲、乙两组对比可知，加酶可提高洗衣粉去污能力；根据
表中数据可知，适当提高温度也能提高洗衣粉去污能力；据分析可知，乙组在洗衣粉中加入
了蛋白酶和脂肪酶。
（2）甲中含有蛋白酶，乙中含有蛋白酶和脂肪酶，甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具
有专一性。实验结果表明，50℃时各组用时都最少，所以加入了蛋白酶的洗衣粉适宜的洗涤
温度为50℃左右。
（3）如果甲、乙和丙3组均在水温为100℃时洗涤同一种污渍，则这3组洗涤效果没有差异，
因为高温已经使酶失活。
（4）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶
迅速发挥催化作用，这个过程中未运用酶的固定化技术，因为酶未固定在不溶于水的载体上，
也不能重复利用。
（5）根据题图显示，横坐标为碱性蛋白酶含量，纵坐标表示去污力，不同的曲线代表不同的温
度，因此该实验的目的是探究温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响。据图可知，50℃时加酶
洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量约是0.6%。
25.答案：(1)蘑菇培养基质中富含纤维素，会聚集较多的纤维素分解菌
(2)纤维素；琼脂；单个菌体产生的纤维素酶的活性越强
(3)未经保温处理的纤维素酶液；50；该温度下，纤维素酶的热稳定性高，作用时间持久，且酶
活性相对较高解析：(1)蘑菇培养基质中富含纤维素,会聚集较多的纤维素分解菌,因此本实验中选择蘑菇培
养基质作为纤维素酶高产菌株的来源。
(2)筛选纤维素分解菌,用的培养基应以纤维素作为唯一碳源,这样纤维素分解菌能正常生长,
其他微生物则不能生长。筛选用的培养基是固体培养基,应加入琼脂作为凝固剂:筛选时应选
择D/d较大的菌株,因为这一指标值越大说明单个菌体产生的纤维素酶的活性越强。
(3)①根据对照实验的基本原则,应选择经不同溫度条件下保溫处理的纤维素酶液和未经保溫
处理的纤维素酶液比较,又据图2可知,在50℃时酶的活性最高,因此应在50℃下测定纤维素
酶的催化速率,计算酶活性残留率。②据图3可知,在40℃左右,纤维素酶的热稳定性高,作用
时间持久,且酶活性相对较高,因此生产中使用该纤维素酶时,最好将温度控制在40℃左右。
26.答案： (1)限制性核酸内切(或限制或限制性内切核酸)；核苷酸序列
(2)磷酸二酯键；DNA单链；以DNA为模板的DNA链的延伸
(3)②④
(4)B
解析：(1)EcoR Ⅰ是一种限制酶，它通过识别特定的核苷酸序列切割特定位点，使切割后的
DNA片段带有相同的黏性末端。
(2)DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成磷酸二酯键。在PCR循环中，
升温到95 ℃是为了使DNA变性，DNA双链解旋为DNA单链，以作为DNA扩增的模板链。
Taq DNA聚合酶(耐高温的DNA聚合酶)以DNA单链为模板，以结合在特定DNA模板上的
引物为出发点，将4种游离的脱氧核苷酸按5′→3′方向沿模板链顺序合成新的DNA子链，故
其作用是催化以DNA为模板的DNA链的延伸。
(3)片段F中,已知的DNA序列为
要通过设计引物进行反向PCR，从而得到已知序列在两端、未知序列在中间段的PCR产物
(过程如反向PCR的原理示意图)，则需要反向的互补引物来扩增两引物以外的DNA片段，
因此要选择5′- GCAATGCGTAGCCTCT-3'和5′- TCATGAGCGCATAGTT-3′这对引物。
(4)据题图及反向PCR的原理示意图可知片段F的两端为 EcoR I切割后的黏性末端，故正确
选项为B。
