文档内容
押单项选择题
发酵工程
考向预测 考情统计（3年） 核心考点
2021·江苏
2023·2021·山东
从近些年的各地高考试题
2022·2021·湖北
分析，本专题的命题形式多 传统发酵技术的应用与发酵工程
2021·海南
样，属于高考必考内容，试题
2021·辽宁
情境主要来自生产生活实际，
2021·浙江
与现实联系密切。不过本部分
2023·河北
题目难度不大，分值也不高。
2023·重庆
预测此部分内容会以选择题的
2023·辽宁
形式出现在高考试题中，预计
2023·2022·江苏
会针对无菌技术、培养基的配
2023·2022·2021·山东
制、微生物的接种和培养、发
2023·广东 微生物的培养技术及应用
酵工程的应用等知识点进行命
2023·浙江
题，命题多联系生活、生产实
2022·海南
践和环境治理、有渗透科学实
2022·湖北
验与探究。
2021·天津
2021·北京
一、传统发酵技术的应用
考向01 传统发酵技术的应用与发酵工程 1.发酵与传统发酵技术
(1)发酵
1.（2021·江苏·高考真题）某同学选用新鲜成熟的葡萄
制作果酒和果醋，下列相关叙述正确的是（ ）
A．果酒发酵时，每日放气需迅速，避免空气回流入
发酵容器
B．果酒发酵时，用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量
变化，砖红色沉淀逐日增多
C．果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发
酵时
D．果醋发酵时，用重铬酸钾测定醋酸含量变化时，
溶液灰绿色逐日加深
2.（2023·山东·高考真题）以下是以泡菜坛为容器制作
泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中
注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的
是（ ）
A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降
低 2.腐乳制作
3.（2022·湖北·高考真题）废水、废料经加工可变废为
宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的
技术路线如图所示。下列叙述正确的是（ ）
3.制作泡菜
(1)作用菌种 植物体表面天然的乳酸
菌。
(2)原理 在无氧条件下，乳酸菌将葡萄
A．该生产过程中，一定有气体生成 糖 分 解 成 乳 酸 。 反 应 简 式 为
B．微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料 C 6 H 12 O 6 ――→2C 3 H 6 O 3 (乳酸)＋能量。
(3)方法步骤
C．该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D．沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需
要灭菌处理
4.（2022·湖北·高考真题）关于白酒、啤酒和果酒的生
产，下列叙述错误的是（ ）
A．在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的
氧气
B．白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁
提醒
殖的过程
营造“无氧环境”的3项措施：选择
C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基
的泡菜坛密封性要好；加入蔬菜后要注
质，也存在于线粒体
入煮沸冷却的盐水，使盐水没过全部菜
D．生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过
料；盖上坛盖后要在坛盖边沿的水槽中
程中起主要作用的都是酵母菌
注满水。
5.（2021·海南·高考真题）关于果酒、果醋和泡菜这三
4.制作果酒和果醋
种传统发酵产物的制作，下列叙述正确的是（ ）
(1)果酒制作与果醋制作的比较
A．发酵所利用的微生物都属于原核生物
B．发酵过程都在无氧条件下进行
C．发酵过程都在同一温度下进行
D．发酵后形成的溶液都呈酸性
6.（2021·湖北·高考真题）中国的许多传统美食制作过
程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确的是（ ）
A．泡菜制作过程中，酵母菌将葡萄糖分解成乳酸
B．馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO
2
C．米酒制作过程中，将容器密封可以促进酵母菌生长
D．酸奶制作过程中，后期低温处理可产生大量乳酸
杆菌
7.（2021·辽宁·高考真题）利用菠萝蜜制作果醋的大致
流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天
后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列有关叙述错
误的是（ ）
A．乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B．酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C．酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不
同
D．接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度
8.（2021·山东·高考真题）葡萄酒的制作离不开酵母
菌。下列说法错误的是（ ）
A．无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖
B．自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型
酵母菌
(2)果酒和果醋的制作步骤及目的
C．葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成
的
D．制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
9.（2021·浙江·高考真题）用白萝卜制作泡菜的过程
中，采用适当方法可缩短腌制时间。下列方法中错误的是
（ ）
A．将白萝卜切成小块
B．向容器中通入无菌空气
C．添加已经腌制过的泡菜汁
D．用沸水短时处理白萝卜块
二、发酵工程及其应用
1.发酵工程
利用微生物的特定功能，通过现代工程
技术，规模化生产对人类有用的产品。
2.发酵工程基本环节3.啤酒发酵的工业化生产流程及操作目的
4.发酵工程的特点
5.发酵工程的应用尝试解答：
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1.【答案】C
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖
源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为
醋酸。
【详解】A、酒精发酵是利用酵母菌的无氧呼吸，随着果酒发酵的进行，装置内会产生气体（二氧化碳），
容器内压强大于外界，所以空气不会回流，A错误；
B、果酒发酵时，发酵液中的葡萄糖不断被消耗，因此用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化，砖红色
沉淀逐日减少，B错误；
C、以酒精为底物进行醋酸发酵，酒精与氧气发生反应产生醋酸和水，几乎没有气泡产生，发酵液产生的
气泡量明显少于果酒发酵时，C正确；
D、酸性的重铬酸钾用于检测酒精，不能用于测定醋酸含量，D错误。
2.【答案】C
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
（1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
（2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。
（3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。
（4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸
菌等微生物的生命活动不受影响。
（5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及
其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。
【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的乳酸菌被杀
死，A错误；
B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误；
C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，为了制造无氧环境，同时可排出初期酵母菌等发酵产生
的气体，C正确；
D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。
3.【答案】A
【分析】培养基的主要成分有水、无机盐、碳源与氮源，统计微生物的方法有稀释涂布平板法和显微镜直
接计数法。
【详解】A、据图可知，该生产过程中有酿酒酵母的参与，酵母菌呼吸作用会产生二氧化碳，故该生产过
程中，一定有气体生成，A正确；
B、糖类是主要的能源物质，微生物生长所需的碳源主要来源于果糖生产废水，B错误；
C、分析图示可知，该技术中有连续搅拌反应器的过程，该操作的可以增加微生物与营养物质的接触面积，
此外也可增大溶解氧含量，故据此推测该生产工艺利用微生物的有氧发酵技术生产蛋白质，C错误；
D、沼气生产利用的是厌氧微生物，在连续搅拌反应器中厌氧微生物会被抑制，因此沼气池废料无需灭菌，
D错误。
4.【答案】C
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。
【详解】A、在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气，让酵母菌大量繁殖，再进行酒精发酵，
A正确；
B、白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程，如发酵初期酵母菌大量繁殖，B正确；
CD、酒精发酵利用的菌种是酵母菌，葡萄糖转化为乙醇所需的酶存在于细胞质基质，不存在线粒体中，C
错误，D正确。
5.【答案】D
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是
醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；泡菜的制作离不开乳酸菌。
【详解】A、参与果酒制作的微生物是酵母菌，属于真核生物，A错误；
B、参与果醋制作的醋酸菌是好氧菌，因此果醋发酵需要有氧条件，B错误；
C、不同的发酵产物需要的温度不同，C错误；D、果酒、果醋和泡菜发酵后形成的溶液都呈酸性，D正确。
6.【答案】B
【分析】 1、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：毛霉
等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂
肪酸。
2、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。
3、醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充
足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【详解】A、泡菜制作过程中，主要是乳酸菌将葡萄糖分解形成乳酸，A错误；
B、做馒头或面包时，经常要用到酵母菌，酵母菌可以进行有氧呼吸分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳
和水，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得馒头或面包暄软多孔，B正确；
C、酵母菌在有氧条件下可以大量繁殖，在密封也就是无氧条件下产生酒精，C错误；
D、酸奶制作过程中，后期低温处理时大部分乳酸杆菌已死亡，不会大量繁殖，D错误。
7.【答案】B
【分析】1、果酒制作的菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧、
适宜温度是18～25℃，pH值呈酸性。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都
充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋
酸。最适温度为30～35℃。
【详解】A、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌繁殖，
A正确；
B、酵母菌一般以出芽的方式繁殖，醋酸杆菌以二分裂的方式进行增殖，B错误；
C、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧
气，C正确；
D、酵母菌适宜温度是18～25℃，醋酸杆菌最适温度为30～35℃，D正确。
8.【答案】D
【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，条件：温度18-25℃，先通气后密闭。通气阶段，酵母菌有氧呼吸获
得能量大量繁殖，密闭阶段发酵产生酒精。pH最好是弱酸性。
【详解】A、酵母菌进行有氧呼吸获得能量大量繁殖，无氧条件下，发酵产生酒精，故无氧条件下酵母菌能进行无氧呼吸存活但不能大量繁殖，A正确；
B、自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌，B正确；
C、葡萄皮中的色素进入发酵液使葡萄酒呈现颜色，C正确；
D、制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量减少，D错误。
9.【答案】B
【分析】1、泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌，在无氧条件下乳酸菌无氧呼吸产生乳酸。
2、泡菜的制作流程是：选择和处理原料、洗净泡菜坛、调味装坛、密封发酵。
【详解】A、将白萝卜切成小块可以扩大白萝卜与腌料的接触面积，缩短腌制时间，A正确；
B、泡菜制作所需菌种为乳酸菌，制作过程中应保持无氧环境，向容器中通入无菌空气不利于腌制，B错
误；
C、泡菜汁中含有一定量的发酵菌种，所以在腌制过程中，加入一些已经腌制过泡菜汁可缩短腌制时间，C
正确；
D、用沸水短时处理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品质，也可缩短腌制时间，D正确。
一、微生物的基本培养技术
考向02 微生物的培养技术及应用
1.培养基的配制
1.（2023·河北·高考真题）为筛选能平衡肠道 (1)培养基的概念、类型和用途
菌群和降解胆固醇的乳酸菌，下列相关实验设计
错误的是（ ）
A．从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌
B．平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境
C．对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定
D．检测目的菌株对消化道环境的耐受力
2．（2023·重庆·高考真题）垃圾分类有利于变
废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾 (2)培养基的配方
资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（ ①主要营养物质：水、碳源、氮源、无
机盐。
）
②其他条件：pH、特殊营养物质和氧
气。如下表：
A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多
种产品
B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源
厌氧
微生 乳酸
C．X中需要添加合适的菌种，才能产生沼气 霉菌 细菌 微生
物 菌
物
D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆
肥体进行翻动 pH调
添加 pH调 至中
3．（2023·辽宁·高考真题）细菌气溶胶是由悬 特殊
维生 至酸 性或 无氧
浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利 需求
素 性 弱碱
用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所
性
采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下
列叙述错误的是（ ） 2.无菌技术
(1)目的 获得纯净的培养物。
A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处 (2)关键 防止杂菌污染。
理 (3)常用方法 消毒和灭菌。
(4)无菌技术的主要方法及适用对象(连一
B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
连)
C．同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均
值
D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比
实际值高
4．（2023·江苏·高考真题）下列关于细菌和酵
母菌实验的叙述正确的是（ ）
A．通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的
碳氮比 3.微生物的纯培养
(1)概念辨析
B．通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵
母菌落大
C．通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵
母菌培养基用过滤除菌法除菌
D．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测
定，也可用于细菌的数量测定
5．（2023·山东·高考真题）平板接种常用在微 (2)酵母菌纯培养的操作步骤
生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A．不含氮源的平板不能用于微生物培养
B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合
成脲酶的微生物
6．（2023·广东·高考真题）研究者拟从堆肥中
取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角
蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选
到目标菌的条件组合是（ ）
A．a点时取样、尿素氮源培养基
B．b点时取样、角蛋白氮源培养基
C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D．c点时取样、角蛋白氮源培养基
7．（2023·浙江·高考真题）某同学想从泡菜汁
中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜
汁样品，划线接种于一定 NaCl 浓度梯度的培养
基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（
）
A．培养基pH需偏碱性
4.倒平板的操作步骤
B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C．需在无氧条件下培养
D．分离得到的微生物均为乳酸菌
8.（2022·江苏·高考真题）下列是某同学分离
高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（ ）
A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌
株
①培养基要冷却到50 ℃左右时开始倒平
B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
板。温度过高会烫手，过低培养基又会
C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落 凝固。
②要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。
D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染
酶菌
培养基。
9.（2022·海南·高考真题）为探究校内植物园
③倒平板时，要用左手的拇指和食指将
土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样
培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不
本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是（
要完全打开，以免杂菌污染培养基。） ④平板冷凝后，要将平板倒置。因为平
板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒
A．采样时应随机采集植物园中多个不同地点
置后，既可避免培养基表面的水分过快
的土壤样本
地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培
B．培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培
养基，造成污染。
养基
5.平板划线法操作步骤
C．土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌
落
D．鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可
借助生物化学的方法
10.（2022·湖北·高考真题）灭菌、消毒、无菌
操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确
的是（ ）
A．动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件
下进行
B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量
的抗生素以防止污染
C．为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对
牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D．可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离
心管、细胞培养瓶等进行灭菌
11.（2022·山东·高考真题）青霉菌处在葡萄糖
浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细
菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实
现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列
说法错误的是（ ）
(1)实验成功关键点
A．发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B．可用深层通气液体发酵技术提高产量
C．选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种
到发酵罐中
D．青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严
格灭菌
12.（2021·天津·高考真题）下列操作能达到灭
菌目的的是（ ）
A．用免洗酒精凝胶擦手
B．制作泡菜前用开水烫洗容器C．在火焰上灼烧接种环 (2)平板划线法操作中几次灼烧接种环的
目的
D．防疫期间用石炭酸喷洒教室
13.（2021·北京·高考真题）野生草本植物多具
有根系发达、生长较快、抗逆性强的特点，除用
于生态治理外，其中一些可替代木材栽培食用
菌，收获后剩余的菌渣可作肥料或饲料。相关叙
述错误的是（ ）
A．种植此类草本植物可以减少水土流失
二、微生物的选择培养和计数
B．菌渣作为农作物的肥料可实现能量的循环
1.选择培养基
利用
C．用作培养基的草本植物给食用菌提供碳源
和氮源
D．菌渣作饲料实现了物质在植物、真菌和动
物间的转移
14.（2021·北京·高考真题）人体皮肤表面存在 常见选择培养基举例
着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。 ①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大
下述操作不正确的是（ ） 气中N 的微生物。
2
②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选
A．对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌
出真菌。
B．使用无菌棉拭子从皮肤表面取样 ③无有机碳源的培养基可筛选出自养微
生物。
C．用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布
2.稀释涂布平板法
(1)系列稀释操作
D．观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的
15.（2021·山东·高考真题）解脂菌能利用分泌 试管中，依次等比稀释。
的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利
用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将
不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种
在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深
蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是
（ ）
(2)涂布平板操作
A．甲菌属于解脂菌
B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区
域进行对比
D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能
力3.微生物的数量测定
(1)利用稀释涂布平板法计数
①为了保证结果准确，一般选择菌落数
为 30～300 的平板进行计数，并且在同
一稀释度下，应至少对 3 个平板进行重
复计数，并求平均值。
②统计结果往往比实际值少。
(2)利用显微镜直接计数
①需用特定的细菌计数板或血细胞计数
板。
②统计结果一般是活菌数和死菌数的总
和。
4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的
实验操作
(1)实验原理
(2)操作步骤
(3)实验结果分析与评价5.分解纤维素的微生物的分离
(1)分离方法与原理
(2)纤维素分解菌的培养基成分及鉴定原
理
提醒
两种纯化细菌的方法的比较
项目 平板划线法 稀释涂布平板法
通过接种环在琼脂固体 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后
培养基表面连续划线的 将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂
操作，将聚集的菌种逐 固体培养基的表面，进行培养。稀释
纯化原理
步稀释分散到培养基表 度足够高时，聚集在一起的微生物将
面。经数次划线后培养，被分散成单个细胞，从而能在培养基
可以分离得到单菌落 表面形成单菌落
主要步骤 平板划线操作 系列稀释操作和涂布平板操作
接种工具 接种环 涂布器
平板示意图
尝试解答：
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1．【答案】B
【分析】筛选目的菌株应从富含目的菌的环境中去取样。倒平板后及平板微生物培养时需要倒置培养，微
生物初步筛选后还要进行相关实验以检测目的菌的发酵能力或特性。
【详解】A、筛选目的菌时应从富含目的菌的环境中去取样，酸奶和泡菜中富含乳酸菌，可以从中采样进
行分离纯化，A正确；
B、平板倒置培养是为了防止培养皿皿盖上的水珠落入培养基造成污染，不是创造无氧环境，B错误；C、筛选的是能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，所以，初步筛选后，还需要进一步进行目的菌胆固
醇降解能力的测定，以获得符合要求的乳酸菌，C正确；
D、因筛选出的目的菌是在肠道发挥作用，所以，还需要检测目的菌株对消化道环境的耐受力，D正确。
2．【答案】D
【分析】生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递，三者缺一不可；物质循环是生态系统的基
础，能量流动是生态系统的动力，信息传递则决定着能量流动和物质循环的方向和状态；信息传递是双向
的，能量流动是单向的，物质循环具有全球性。
【详解】A、压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品，有利于实现物质的循环再生和能量的多级
利用，A正确；
B、添加的木屑有利于堆肥体通气，木屑也可作为某些微生物的碳源，B正确；
C、X中需要添加合适的菌种，通过分解有机物才能产生沼气，C正确；
D、为保证堆肥体中微生物的活性，可以对堆肥体进行翻动，D错误。
3．【答案】D
【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成
这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀
释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），
再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个
细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
【详解】A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的
双手进行消毒，A正确；
B、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确；
C、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30～300的平板进行计数，以确保实验
的准确性，C正确；
D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只
能观察到一个菌落，D错误。
4．【答案】A
【分析】培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长
对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。灭菌常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒常用
的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】A、细菌是原核生物，酵母菌是真核生物，不同微生物对营养物质的需求是不一样，通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比，A正确；
B、通常细菌的生长速度比酵母菌快，但形成的菌落，不一定细菌的大于酵母菌的，与细菌的种类有关，
部分细菌的菌落小于酵母菌，B错误；
C、通常细菌和酵母菌的培养基都可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；
D、血细胞计数板适用于真菌的计数，细菌计数板用于细菌的数量测定等，D错误。
5.【答案】D
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行
微生物培养的物质基础。
2、按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种
化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。
3、消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内
部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误；
B、平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，
B错误；
C、使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；
D、脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源
而进行生长繁殖，但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分
离出合成脲酶的微生物，D正确。
6.【答案】D
【分析】筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，要用角蛋白氮源培养基。
【详解】研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够
高效降解角蛋白，所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养，所以D正确，ABC错误。
7.【答案】C
【分析】泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等发酵制成的。这些微生物一般
为厌氧、兼性厌氧或微好氧菌。它们的发酵产物不仅有乳酸，还会有醇、酯等，因而使泡菜具有特殊的风
味。
【详解】A、因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸，故其生活的环境是酸性，培养基pH需偏酸性，A错误；
B、平板划线接种时不需要稀释，B错误；
C、乳酸菌是厌氧型微生物，所以需在无氧条件下培养，C正确；
D、参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离得到的微生物除了乳酸菌，还会有其他耐高盐的微生物，D错误。
8.【答案】D
【分析】为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养
基上能生长，其它微生物在该培养基上因缺乏氮源而不能生长，可用于分离含脲酶的微生物。
【详解】A、农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物，A正确；
B、为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养基上
能生长，B正确；
C、当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，C正确；
D、在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示
剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定，D错误。
9.【答案】C
【分析】1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物
生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2、统计菌落数目的方法：（1）稀释涂布平板法（间接）：①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长
的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌
数。（2）利用显微镜直接计数。
【详解】A、采集植物园中土壤样本的原则之一是要随机采样，A正确；
B、牛肉膏蛋白胨固体培养基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等，可用于细菌的培养，B
正确；
C、土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的细菌分散开，有助于在培养基表面形成单菌落，C错误；
D、不同种类细菌的理化特性一般不同，鉴定细菌种类时，除根据菌落特征进行形态学鉴定外，还可以借
助生物化学的方法进行鉴定，D正确。
10.【答案】D
【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法
有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部
分微生物的过程。
【详解】A、动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行，A错误；
B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培养不能加入抗生
素，B错误；
C、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；D、可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。
11.【答案】D
【分析】培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等四类营养物质。配制培养基时除了满足基本的营养
条件外，还需满足微生物生长对特殊营养物质、pH、O 的要求。
2
【详解】A、青霉菌处于葡萄糖浓度不足的环境中会通过分泌青霉素杀死细菌；提供相同含量的碳源，葡
萄糖溶液单位体积中溶质微粒较多，会导致细胞失水，发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖，乳糖是二糖，可
被水解为半乳糖和葡萄糖，是青霉菌生长的最佳碳源，可以被青霉菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条
件，A正确；
B、青霉菌的代谢类型为异养需氧型，可用深层通气液体发酵技术提高产量，B正确；
C、选育出的高产青霉素菌株经扩大培养纯化后，才可接种到发酵罐中进行工业化生产，C正确；
D、为了防止细菌、其他真菌等微生物的污染，获得纯净的青霉素，发酵罐仍需严格灭菌，D错误。
12.【答案】C
【分析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法
有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的
一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】A、用免洗酒精凝胶擦手属于消毒，A错误；
B、制作泡菜前用开水烫洗容器属于消毒过程，B错误；
C、在火焰上灼烧接种环能达到灭菌目的，C正确；
D、防疫期间用石炭酸喷洒教室，属于消毒，D错误。
13.【答案】B
【分析】能量流动的特点：单向流动、逐级递减。物质可以循环利用，但能量是单向流动的，不能循环利
用。
【详解】A、此类草本植物根系发达可以固定更多的土壤，故种植此类草本植物可以减少水土流失，A正
确；
B、能量可多级利用，但不能循环利用，B错误；
C、草本植物含有蛋白质和纤维素，可给食用菌提供碳源和氮源，C正确；
D、草本植物可栽培食用菌，而菌渣可作肥料或饲料，故实现了物质在植物、真菌和动物间的转移，D正
确。
14.【答案】C
【分析】实验室常用的消毒和灭菌方法的比较：
1、消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高温的液体，如牛奶）、化学药剂消毒法（如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等）、紫外线消毒法（接种室、操作台）；
2、灭菌：灼烧灭菌（接种工具）、干热灭菌（玻璃器皿、金属用具）、高压蒸汽灭菌（培养基及容器）。
【详解】A、为避免杂菌污染干扰，需对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌，A正确；
B、葡萄球菌需从人体皮肤的微生物中分离，为避免杂菌污染，故需要使用无菌棉拭子从皮肤表面取样，B
正确；
C、用取样后的棉拭子浸出液在固体培养基上涂布，C错误；
D、根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别，D正
确。
15.【答案】B
【分析】选择培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使
混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。
鉴别培养基：依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化
而设计。
【详解】A、根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”，说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂
肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确；
B、乙菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌落不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌落也可以
在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B错误；
C、可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C正确；
D、可以利用该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力，观察指标可以以菌落周围深蓝色圈的大小，D
正确。
1．下列关于发酵工程及其应用的叙述正确的是（ ）
A．发酵工程选育出性状优良的菌种后，即可进行中心环节——发酵罐内发酵
B．发酵过程中环境条件既会影响微生物生长繁殖，也会影响微生物代谢物形成
C．一些极端微生物已应用于生产实践，例如嗜热菌有助于提高热敏性产品的产量
D．生产各种各样的食品添加剂，可改善食品的口味和色泽，但不能增加食品的营养及防腐
【答案】B
【分析】1、自然界中还存在着一定数量的极端微生物，它们能在各种极端恶劣的环境（如高温、高压、高盐和低温等环境） 中正常生活，对它们的研究已成为国际热点，其中一些极 端微生物已应用于生产实
践。例如，嗜热菌、嗜盐菌可以用来生产洗涤剂，嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量。2、随着生活
水平的提高，人们对食品的需求越来越多样化，食品添加剂应运 而生，它不仅可以增加食品的营养，改
善食品的口味、色 泽和品质，有时还可以延长食品的保存期。许多食品添加 剂都能通过发酵工程生产。
【详解】A、发酵工程选育出性状优良的菌种后要进行扩大培养，A错误；
B、发酵过程中环境条件既会影响微生物生长繁殖，也会影响微生物代谢物形成，B正确；
C、一些极端微生物已应用于生产实践，例如嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量，C错误；
D、生活水平的提高，人们对食品的需求越来越多样化，食品添加剂应运 而生，它不仅可以增加食品的营
养，改善食品的口味、色 泽和品质，有时还可以延长食品的保存期。许多食品添加 剂都能通过发酵工程
生产。D错误。
2．塑料污染是当今世界面临的最紧迫的环境问题之一。中国科学院海洋研究所首次发现能有效降解聚乙
烯塑料的海洋真菌及其分泌的有降解聚乙烯效果的酶。某研究学习小组欲从环境中分离高效降解聚乙烯的
真菌。下列叙述错误的是（ ）
A．应在富含聚乙烯的环境中采集样本
B．可采用高压蒸汽灭菌法对实验所用培养基进行灭菌
C．选择培养时应以聚乙烯为唯一碳源
D．利用稀释涂布法接种时，稀释倍数越高，越容易得到目标单菌落
【答案】D
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；培养基
中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物
生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求；在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止
其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在
恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形
成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可
形成单个菌落。
【详解】A、欲从环境中分离高效降解聚乙烯的真菌，应在富含聚乙烯的环境中采集样本，A正确；
B、常采用高压蒸汽灭菌法培养基进行灭菌，B正确；
C、该菌能够分泌的有降解聚乙烯效果的酶，因此筛选高效降解聚乙烯的真菌的培养基应以聚乙烯为唯一
碳源，C正确；D、利用稀释涂布法接种时，稀释倍数过高或过低，均不容易得到单菌落，D错误。
3．下列关于发酵技术的说法，正确的是（ ）
A．发酵过程中若要快速直观的统计微生物数量，可采用稀释涂布平板法
B．当缺少氧气、糖源时醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸
C．以乙醇为底物进行果醋发酵时发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时的气泡量
D．进行泡菜发酵时，原材料只能装至八成满，是为了防止乳酸菌产生CO 导致发酵液溢出
2
【答案】C
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是
醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的
糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。参与腐乳制作的微生物主要
是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白
质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、发酵过程中若要快速直观的统计微生物数量，应用显微镜直接观察计数，A错误；
B、醋酸菌为好氧菌，当缺少糖源时醋酸菌进行有氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸，B错
误；
C、以酒精为底物进行醋酸发酵，产物是醋酸和水，几乎不产生气泡，而果酒发酵会产生二氧化碳，故果
醋发酵时产生的气泡量明显少于果酒发酵，C正确；
D、进行泡菜发酵时，原材料只能装至八成满，是为了防止发酵液溢出，乳酸菌无氧呼吸不产生气体，D
错误。
4．我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品，如酱油、腐乳、豆豉等，传承和发扬了中华优
秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，错
误的是（ ）
A．泡菜“咸而不酸”是因为盐水浓度过高，抑制乳酸菌发酵所致
B．工业化生产啤酒时，酵母菌的繁殖主要在主发酵阶段完成
C．水封泡菜坛的目的是隔绝空气，确保坛内乳酸菌发酵处于无氧环境
D．腐乳和果醋都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品
【答案】D
【分析】与果酒、果醋的生产有关的微生物分别是酵母菌、醋酸菌，泡菜腌制过程中起作用的主要是乳酸
菌。
【详解】A、制作泡菜时，如果盐水浓度过高，乳酸菌会通过渗透作用失水，抑制乳酸菌生长，制作的泡菜会“咸而不酸”，A正确；
B、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，B正确；
C、乳酸菌是厌氧菌，水封泡菜坛的目的是隔绝空气，确保坛内乳酸菌发酵处于无氧环境，C正确；
D、腐乳和果醋都是在有氧条件下发酵产生的传统食品，D错误。
5．培养基可以为培养物提供其生长繁殖所需的营养。根据加入的琼脂的含量，培养基可以分为固体培养
基、半固体培养基和液体培养基。下列关于培养基的叙述中，错误的是（ ）
A．对微生物种类进行鉴定时，通常选用固体培养基
B．使用培养液时可以搭配摇床，以增加溶氧量
C．利用植物细胞培养获得代谢产物时，通常选用液体培养基
D．使用液体培养基可对细胞扩大培养，但无法实现分离纯化
【答案】D
【分析】在发酵工程分离、提纯产物阶段：如果产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法将菌体
分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当提取、分离和纯化措施来获
得产品。
【详解】A、对微生物种类进行鉴定时，通常选用固体培养基，通过菌落的形态结构、颜色进行判断，A
正确；
B、使用培养液时可以搭配摇床，通过震荡增加溶氧量，B正确；
C、利用植物细胞培养获得代谢产物时，通常选用液体培养基，在培养液中可提取代谢产物，C正确；
D、使用液体培养基可对细胞扩大培养，可以实现分离纯化，如果产品是微生物细胞本身，可采用过滤、
沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品，D错误。
6．生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也会引起人们对其安全性和伦理道德的关注，下列关于相
关生物技术的说法中，合理的是（ ）
A．5次平板划线操作的实验需要对接种环灼烧5次
B．只要数量不太大，生殖性克隆人是允许的
C．在移植前对人类胚胎进行遗传学诊断不符合伦理要求
D．基因工程将创造出新物种而影响区域生态平衡
【答案】C
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对
生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响），对待转基因技术的利弊，正确的做法应该
是趋利避害，不能因噎废食。
2、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。
【详解】A、每次接种前以及最后一次接种之后均需要灭菌处理，5次平板划线操作的实验需要对接种环灼
烧6次，A错误；
B、中国政府禁止生殖性克隆人，B错误；
C、设计试管婴儿在移植前对人类胚胎进行遗传学诊断，虽然能解决一些问题比如治疗白血病，但不符合
伦理要求，C正确；
D、基因工程是指按照人们意愿，通过转基因等技术，赋予生物新的特性，创造出更符合人们需要的新的
生物类型和生物产品，基因工程不能创造出新物种，D错误。
7．为筛选出可高效抑制番茄枯萎病菌（一类真菌）的土壤芽孢杆菌菌株，科研人员从土壤中采集、分离、
筛选芽孢杆菌菌株作为待测菌株，并采用平板对峙培养法观察各待测菌株的抑菌能力。如下图为研究过程
示意图，下列叙述正确的是（ ）
注：对峙培养法是明确有益微生物或其次生代谢产物的抑（杀）菌效果和作用范围时必须采用的方法
A．过程①可用平板划线法筛选并计数芽孢杆菌菌落数
B．过程②必须通过显微镜观察挑选芽孢杆菌，再进行对峙培养
C．实验筛选出的菌株仍需进行大田种植试验以检测防治效果
D．若用过程①统计土壤中菌落数，则甲乙丙可相互对照，无需增设空白对照
【答案】C
【分析】微生物常见的接种的方法（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，
划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最
后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，
经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、过程①常利用稀释涂布平板法对菌落进行计数，而平板划线法无法计数，A错误；
B、每种细菌都有特定的菌落的形态、大小和颜色，所以过程②可肉眼观察芽孢杆菌菌落的形态、颜色进
行挑选，B错误；C、需要进一步确定菌株的最佳条件，进行大田种植试验，检测防治效果，C正确；
D、若用过程①统计土壤中菌落数，需增设空白平板作为对照，D错误。
8．啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段，下列有关啤
酒工业化生产流程说法错误的是（ ）
A．焙烤过程加热会杀死种子但不使淀粉酶失活
B．酵母菌的繁殖和代谢物的生成都在后发酵阶段完成
C．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酵母菌体本身
D．发酵的温度和时间不同会影响啤酒的口味
【答案】B
【分析】啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都
是在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行
后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差
异。
【详解】A、焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活，A正确；
B、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，B错误；
C、发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酵母菌体本身，如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发
酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物
的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，C正确；
D、发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异，D正确。
9．蛋白S为菌株C（一种细菌）的分泌产物，可被广泛应用于医药、食品和化工工业。某小组通过实验比
较不同碳源对菌体生长和蛋白S产量的影响，结果如表所示。下列说法正确的是（ ）
碳源 细胞干重/（g·L-1） 蛋白S产量/（g·L-1）
葡萄糖 3.12 0.15
淀粉 0.01 0
制糖废
2.30 0.18
液
A．菌株C的培养基的pH一般要调节至酸性
B．培养基中碳源物质浓度越高，菌株合成蛋白S越多
C．适合菌体生长和生产蛋白S的碳源均为葡萄糖
D．菌株C可能因不能合成淀粉酶而无法利用淀粉
【答案】D【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮
元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳
酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中
性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、细菌的培养基的pH一般要调节至中性或弱碱性，A错误；
B、培养基中碳源物质浓度过高，可能会使菌株失水死亡，B错误；
C、分析题表可知，以葡萄糖为碳源时，细胞干重最大，故菌株C生长的最适碳源是葡萄糖；以制糖废液
为碳源时，S产量最高，故用菌株C生产S的最适碳源是制糖废液，C错误；
D、分析实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，说明其不能分解利用淀粉，故其不能生长的原因
是缺少淀粉酶，D正确。
10．灰霉病是由灰葡萄孢（一种真菌）引起的农作物病害。为了绿色、高效地防治灰霉病，研究人员从灰
霉病多发的大棚土壤中取样、分离出多种单菌落并进行扩大培养，随后将各组微生物的无菌发酵滤液与未
凝固的普通培养基混合后倒平板，冷却后在平板中央接种灰葡萄孢，通过比较灰葡萄孢菌丝生长情况，从
而筛选出高效的灰葡萄孢拮抗菌。下列叙述，错误的是（ ）
A．在灰霉病多发的大棚土壤取样，比普通土壤更有可能获得灰葡萄孢拮抗菌
B．取无菌发酵滤液的目的是用拮抗菌的代谢产物对灰葡萄孢产生抑制作用
C．为筛选出高效拮抗菌，只需在普通培养基接种等量灰葡萄孢作为对照
D．灰葡萄孢菌丝生长最缓慢、稀疏的组别对应的微生物即为最高效拮抗菌
【答案】C
【分析】纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法的过程是：由接种环沾取少许待
分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划
线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表
面得到单菌落。稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖
而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
【详解】A、由题意可知，灰霉病是由灰葡萄孢（一种真菌）引起的农作物病害，因此在灰霉病多发的大
棚土壤取样，比普通土壤更有可能获得灰葡萄孢拮抗菌，A正确；
B、取无菌发酵滤液的目的是排除其他杂菌的干扰，利用拮抗菌的代谢产物对灰葡萄孢产生抑制作用，从
而获得专一性的拮抗菌，B正确；
C、为筛选出高效拮抗菌，需在普通培养基接种等量不同浓度的灰葡萄孢来进行实验，挑选出对灰葡萄孢
拮抗效果最好的拮抗菌，C错误；D、最高效拮抗菌对灰葡萄孢的拮抗效果是最好的，导致灰葡萄孢菌丝生长最缓慢、稀疏，D正确。
11．产黄青霉菌是一种好氧真菌，其生长繁殖的适宜温度是30℃，但在20℃的条件下才会大量合成分泌青
霉素。工业上采用玉米浆、棉籽饼等作为原料，通过合理设计，进行青霉素的生产。已知青霉素在碱性条
件下易水解，下列叙述，错误的是（ ）
A．要选育符合生产要求的产黄青霉菌，可采用诱变育种或基因工程育种等方法
B．发酵过程中需要对发酵罐及时加热或降温处理，还要及时调节pH、通入无菌空气
C．发酵过程采用单一菌种进行发酵，有助于提高青霉素的产量和品质
D．发酵结束后，应将发酵液进行离心取菌体并进行破碎处理，从中提取青霉素
【答案】D
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要
包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、灭菌，
接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、发酵工程中性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种
获得，A正确；
B、发酵过程中需要严格控制发酵条件，维持产黄青霉素菌的适宜代谢环境，包括及时加热或降温，保持
适宜的温度；及时调节pH，保证菌种的生长，避免青霉素水解；通入无菌空气，使其进行有氧呼吸，B正
确；
C、在青霉素生产过程中如果污染了杂菌，某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，C正确；
D、青霉素是分泌到细胞外的代谢产物，提取之前不需要破碎处理，D错误。
12．芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质可被蛋白酶降解后在菌落周围形成透明
圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程，下列叙述错误的是（ ）
A．70～80℃水浴10分钟的目的是杀死非芽孢杆菌
B．在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种
C．以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用
D．通过透明圈大小可筛选出蛋白酶高产菌株
【答案】D
【分析】分析题图所示过程从土壤中筛选能降解蛋白质的细菌，实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以奶粉为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。
【详解】A、细菌中的芽孢杆菌较为耐高温，70~80℃水浴10分钟的目的是杀死非芽孢菌，A正确；
B、为防止杂菌污染，在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种，B正确；
C、蛋白酶降解培养基中的蛋白质可在菌落周围形成透明圈，奶粉富含蛋白质，以奶粉为唯一氮源的培养
基能起到选择作用，C正确；
D、通过透明圈与菌落直径的比值大小，可对产蛋白酶芽孢杆菌降解蛋白质的能力进行比较，D错误。
13．A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌（Sau）引起的肺炎，为选出具有最佳疗效的抗生
素，科研人员分别将含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基
上，在适宜条件下培养48h，结果如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．Sau的培养过程中，培养基的pH需要保持中性或弱酸性
B．滤纸片b周围抑菌圈中出现菌落是染色体变异的结果
C．滤纸片a周围抑菌圈的区域最大，抗生素A的疗效最好
D．由结果可知，该实验是通过平板划线法将Sau接种在培养基上的
【答案】C
【分析】培养基：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基
质； （2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、
特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养
基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或弱碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、Sau金黄色葡萄球菌属于细菌，培养细菌时应把PH调至中性或弱碱性，A错误；
B、细菌无染色体，不会出现染色体变异，B错误；
C、滤纸片a周围抑菌圈的区域最大，抑菌能力最强，说明抗生素A治疗Sau感染引起的肺炎的效果最好，
C正确；
D、该实验平板上的Sau是均匀分布的，因此该实验是用稀释涂布平板法进行接种的，D错误。
14．味精是由谷氨酸棒状杆菌发酵得到的谷氨酸经过一系列处理而制成的食品调味品。图示为利用发酵工
程生产味精的流程。下列叙述错误的是（ ）A．小麦预处理后的淀粉水解糖装入发酵罐前不需要灭菌
B．对谷氨酸棒状杆菌培养时除必需的营养物质外还需要提供O
2
C．应在中性和弱碱性条件下生产谷氨酸
D．采用提取、分离和纯化的措施从发酵罐中获得产品
【答案】A
【分析】谷氨酸的发酵生产：在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸；在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和
N-乙酰谷氨酰胺。
【详解】A、发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种。一旦有杂菌污染，可能导致产量大大下降。因此，
淀粉水解糖装入发酵罐前必须经过严格的灭菌，A错误；
B、在氧气充足和弱碱性的环境中，谷氨酸棒状杆菌可以发酵粮食合成味精，因此培养时需要必需的营养
物质和氧气，B正确；
C、谷氨酸棒状杆菌在中性和弱碱性条件下会生产并积累谷氨酸，C正确；
D、谷氨酸是代谢物，可根据性质性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，D正确。
15．泡姜属于四川风味泡菜，有发汗解表、促进血液循环、驱散寒邪的功效。在腌制泡姜之前，泡菜坛宜
用开水烫一遍；腌制过程中，泡菜坛口的水槽中要始终保持有水状态，否则泡菜坛内可能会长出一层白膜。
下列有关叙述错误的是（ ）
A．在腌制泡姜前，用开水烫一遍泡菜坛是为了防止杂菌污染
B．在制作泡姜时，加入适量青花椒等香辛料既能防腐又能调节口味
C．泡姜腌制过程泡菜坛内长出白膜是由于氧气进入导致乳酸菌大量繁殖
D．腌制两天后，泡姜的风味逐渐显现，但不宜食用，因为此时泡姜中亚硝酸盐的含量较高
【答案】C
【分析】1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将
蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸；
2、泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵；
3、泡菜发酵过程中，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制十天后，亚硝酸盐的含量开始下降。
【详解】A、在腌制泡姜之前，泡菜坛宜用开水烫一遍，其目的是防止杂菌污染，A正确；B、在制作泡姜时，加入适量的高度白酒、蒜瓣、红尖椒、青花椒等香辛料不仅可以抑制微生物的生长，
还能调节泡姜的风味，B正确；
C、在泡姜腌制过程中，泡菜坛口的水槽中要始终保持有水状态，如果不能确保良好的密封性，泡菜坛内
会长出一层白膜，这是因为制作泡菜需要厌氧环境，如果泡菜坛密封不严导致有氧气进入，产膜酵母会大
量繁殖，C错误；
D、腌制两天后，泡姜的风味逐渐显现，但此时还不宜食用，原因是亚硝酸盐的含量较高，一般在腌制10
天后食用为宜，D正确。
16．下面有关生物技术操作流程的描述正确的是（ ）
A．植物体细胞杂交之前必须在低渗溶液中用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁
B．分离土壤中能分解尿素的细菌的关键是配制以尿素为唯一氮源的选择培养基
C．动物细胞培养时需要对细胞悬液进行灭菌处理，并在无菌环境下进行操作以保证无菌条件
D．胚胎移植过程中需要用性激素促进供体超数排卵，且无需对受体进行胚胎免疫检查
【答案】B
【分析】细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，
按照人们的意愿来改变细胞内遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据细胞类型的不同，可以
把细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程两大类。
【详解】A、植物体细胞杂交之前必须在等渗溶液中用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，如果在
低渗溶液中，去除细胞壁以后，植物细胞容易吸水涨破，A错误；
B、配制以尿素为唯一氮源的选择培养基，由于缺乏氮源，因此除了能分解尿素的微生物，其他的微生物
都不能在该培养基生存，B正确；
C、如果对动物细胞培养时需要对细胞悬液进行灭菌处理，则动物细胞也会被杀死，C错误；
D、胚胎移植过程中需要用性激素促进供体超数排卵，受体对移入子宫的外来胚胎一般不发生免疫排斥反
应，因此无需对受体进行胚胎免疫检查，D错误。
17．双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。具体做法是：在无菌培养皿中倒入琼脂含量为2%的培
养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至 45~48℃，然后加入敏感指示菌和待测
噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板(见下图)。培养一段时间后，在
双层培养基的上层会出现透亮的无菌圆形空斑——噬菌斑，下列有关说法正确的是（ ）A．实验用到的培养基和培养皿常用干热法进行灭菌
B．若利用双层平板法对 T2噬菌体进行计数，可选用农杆菌作敏感指示菌
C．上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是噬菌体单独在培养基上繁殖形成的噬菌斑
D．倒上层平板时需将培养基冷却至45~48℃时进行接种，目的是防止培养基温度过高引起敏感指示菌
和待测噬菌体死亡
【答案】D
【分析】双层平板法，先在培养皿中倒入底层固体培养基，凝固后再倒入含有宿主细菌和一定稀释度噬菌
体的半固体培养基。培养一段时间后，计算噬菌斑的数量。双层平板法的优点：①加了底层培养基后，可
使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补；②所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上，因此不仅每
一噬菌斑的大小接近、边缘清晰，而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象；③因上层培养基中琼脂较稀，故
形成的噬菌斑较大，更有利于计数。
【详解】A、实验用到的培养皿常用干热法进行灭菌，培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A错误；
B、T2噬菌体专门寄生在大肠杆菌体内，所以不可选用农杆菌作敏感指示菌，B错误；
C、噬菌体无法单独在培养基上繁殖，上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是敏感菌裂解后形成的，C错
误；
D、倒上层平板时需将培养基冷却至45～48℃时进行接种，目的是防止培养基温度过高引起敏感指示菌和
待测噬菌体死亡，D正确。
18．无糖组织培养技术，通常以珍珠岩或蛭石代替琼脂作为支撑物，加入无蔗糖培养液，用CO。代替糖
2
作为植物体的碳源，是更接近植物自然生长状态的一种新型植物组织培养技术。下列说法错误的是（ ）
A．该过程必须选用具有一定叶面积的外植体
B．该技术也需要经历脱分化和再分化过程
C．该技术由于去除蔗糖，减少了微生物污染率
D．自养微生物可在无蔗糖培养液中繁殖并形成菌落
【答案】D【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的
培养条件，诱导其形成完整植株的技术。植物组织培养的流程是：离体的植物器官、组织或细胞经脱分化
形成愈伤组织，经再分化形成芽、根或胚状体，进而形成完整植株。
【详解】A、因为无糖培养是依靠植物叶片光合作用产生有机物来促进植物生长，所以无糖培养的对象必
须是具有一定叶面积的外植体，A正确；
B、无糖组织培养技术作为一种新型植物组织培养技术，也需要经历脱分化和再分化过程，B正确；
C、无糖培养液不添加蔗糖，使各种杂菌失去能源，可以很大程度上解决微生物污染问题，C正确；
D、自养微生物可利用无机碳源，因此可在无蔗糖培养液中繁殖，但菌落的形成需要固体培养基，D错误。
19．格瓦斯采用俄式大面包为基质，经糖化、乳酸菌和酵母菌等多菌株混合，传统发酵工艺加工发酵而成。
含有维生素、氨基酸、乳酸、钙等对人体有益的成分。具有开胃、健脾、降血压、消除疲劳等作用。下列
关于传统发酵技术的说法错误的是（ ）
A．面包屑糖化产生葡萄糖进入线粒体参与发酵过程
B．发酵过程中，容器的密封可以提高酒精产量
C．格瓦斯开盖后有气体喷出应该是酵母菌无氧呼吸产生的CO₂
D．发酵产物中的乳酸是在无氧条件下产生的
【答案】A
【分析】酒精发酵涉及的微生物主要是酵母菌，其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度
为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。乳酸发酵涉及的微生物主要是乳酸菌，
在无氧环境下，乳酸菌将葡萄糖分解为乳酸。
【详解】A、面包屑糖化产生葡萄糖进入细胞质参与发酵过程，葡萄糖不能进入线粒体，A错误；
B、容器的密封有利于酵母菌进行无氧呼吸，可以提高酒精产量，B正确；
C、格瓦斯开盖后有气体喷出应该是酵母菌无氧呼吸产生的CO，C正确；
2
D、乳酸菌在无氧条件下产生了乳酸，所以发酵产物中含有乳酸，D正确。
20．橄榄油的主要成分是甘油三酯。研究者利用“橄榄油平板透明圈法”筛选获得两株产脂肪酶的菌株X
和Y， 检测结果如表。下列相关叙述不正确的是（ ）
酶活性（U•mL-1） 透明圈
空白 -
菌株X 6.9
菌株Y 7.7
A．可将样液梯度稀释后涂布于平板进行筛选
B．培养基中的橄榄油提供微生物生长的碳源C．图中透明圈大小仅与酶活性的大小成正比
D．以上两株菌株均可将脂肪酶分泌至细胞外
【答案】C
【分析】选择培养原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止
其他微生物生长。
【详解】A、可利用稀释涂布平板法将样液梯度稀释后涂布于平板进行筛选，A正确；
B、橄榄油的主要成分是甘油三酯，要筛选产脂肪酶的菌株X和Y，则培养基中的橄榄油提供微生物生长
的碳源，B正确；
C、图中透明圈大小不仅与酶活性的大小成正比，也和产酶量相关，C错误；
D、两株菌株均可将脂肪酶分泌至细胞外，对培养基中的橄榄油进行分解，D正确。
21．为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解菌，培养结果如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．用平板划线法接种可获得图示培养结果，接种过程中接种环需要灼烧3次
B．用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至50℃左右开始倒平板操作
C．可在该培养基上生存并使酚红指示剂变红的菌落可能是固氮菌形成的
D．用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率以及分离的成功率
【答案】B
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划
线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后
可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培
养后可形成单个菌落。
【详解】A、据图可知，要获得图示培养结果，需要用平板划线法进行接种，划线区域有三个，因此接种
过程中接种环需要灼烧4次，A错误；
B、用高压蒸汽灭菌法灭菌结束后，待培养基冷却至50℃左右开始倒平板操作，B正确；
C、固氮菌可在以尿素为唯一氮源的培养基上生存，但不能分解尿素生成碱性物质，因此也不能使酚红指
示剂变红，C错误；
D、用液体培养基能提高目的菌对营养物质的利用效率，但不能分离出目的菌，D错误。22．苯丙酮尿症（PKU）患者由于苯丙氨酸代谢途径中的酶缺陷，导致苯丙氨酸及其代谢产物苯丙酮酸在
体内蓄积，从而对神经系统造成损伤，低蛋白饮食是目前主要的治疗手段。为探究新的治疗手段，科研人
员在大肠埃希菌EcN菌株中导入苯丙氨酸裂解酶基因，构建了表达苯丙氨酸裂解酶的工程益生菌 EcN-
PAL，并分别在有氧、缺氧条件下培养EcN-PAL 和EcN，检测苯丙氨酸降解率，结果如图下列分析错误的
是（ ）
A．培养基应加入一定浓度的苯丙氨酸并进行高压蒸汽灭菌处理
B．设置 EcN 组是为了排除苯丙氨酸自然降解对实验结果的干扰
C．对比有氧、缺氧条件下的表现可帮助评价其在消化道中作用
D．若 EcN-PAL 能大量分泌苯丙氨酸裂解酶可以提高其治疗效果
【答案】B
【分析】苯丙酮尿症是常染色体隐性遗传病，由于控制苯丙氨酸代谢途径中的有关酶形成的基因突变，导
致相关酶缺陷，使得苯丙氨酸不能转变成酪氨酸。
【详解】A、为检测苯丙氨酸降解率，培养基中应加入一定浓度的苯丙氨酸，为防止杂菌污染，培养基应
该进行高压蒸汽灭菌处理，A正确；
B、设置 EcN 组是为了排除 EcN 本身对苯丙氨酸降解的影响，B错误；
C、消化道为无氧环境，对比有氧、缺氧条件下的表现可帮助评价其在消化道中作用，C正确；
D、苯丙氨酸裂解酶能降解苯丙氨酸，若 EcN-PAL 能大量分泌苯丙氨酸裂解酶可以提高其治疗效果，D
正确。
23．某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平
板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法正确的是（ ）A．图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶
B．若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍
C．图中左上角培养基菌落连成一片，可能是稀释倍数不够造成的
D．若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
【答案】B
【分析】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，
选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。
【详解】A、本实验是探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，因此图中接种的培养基是以尿素为唯
一氮源的固体培养基，在此培养基上能生长的微生物不一定都能合成脲酶，如固氮菌也能生存，A错误；
B、若每支试管稀释10倍，即将0.3mL菌液与amL无菌水混合稀释10倍，需要a的数值为2.7，5g土壤溶
于定溶剂形成50mL溶液被稀释了10倍，故5号试管共稀释了106倍，B正确；
C、图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的，C错误；
D、若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是（275＋285＋280）
÷3÷0.2×105×5＝7×108个，D错误。
24．红茶菌液是一种以糖茶水为原料的微生物发酵饮料，能帮助消化，治疗多种胃病。红茶菌种是酵母菌、
醋酸菌和乳酸菌的共生体，其制备流程为：红茶糖液→接种红茶菌种→发酵→红茶菌液。下列叙述错误的
是（ ）
A．为防止杂菌污染，接种前要将红茶糖液煮沸杀菌
B．可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种
C．温度高低既会影响发酵速度，也会影响菌液口味
D．发酵过程需要在严格的无氧条件下进行
【答案】D
【分析】根据题目信息可知，红茶菌是由含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌三种菌的混合菌液共同发酵完成，酵
母菌为兼性厌氧菌，醋酸菌为好氧菌，乳酸菌为厌氧菌。
【详解】A、接种前要将红茶糖液煮沸杀菌，目的是防止杂菌污染，A正确；B、可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种，目的是增加菌种的数量，B正确；
C、温度会影响细胞呼吸酶的活性，所以温度高低既会影响发酵速度，进而影响菌液口味，C正确；
D、酵母菌属于兼性厌氧菌，醋酸菌属于严格的好氧细菌，乳酸菌属于厌氧细菌，活菌饮料由3种菌共同
发酵产生，因此发酵的整个过程不需要在严格的无氧条件下进行，D错误。
25．泡菜是一种在低浓度食盐液中泡制的蔬菜乳酸发酵加工品。下列有关泡菜的说法错误的是（ ）
A．泡菜坛边加水的目的是隔绝空气，创造无氧环境有利于发酵
B．制作泡菜时，保留原来坛中的泡菜汁，可以缩短泡菜的成品时间
C．泡菜主要利用的是乳酸菌，可用血细胞计数板对其进行计数
D．制作泡菜过程中对盐水进行煮沸可以达到灭菌的目的
【答案】D
【分析】1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够
将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
2、泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
【详解】A、制作泡菜时所使用的微生物是乳酸菌，乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型，因此泡菜坛边加水
的目的在于隔绝空气，创造无氧环境有利于发酵，A正确；
B、原来坛中的泡菜汁中含有大量的乳酸菌，可以增加乳酸菌的数量，缩短发酵时间，B正确；
C、泡菜主要利用的是乳酸菌，微生物计数可以用血细胞计数板，C正确；
D、对盐水进行煮沸只能达到消毒目的，不能灭菌，D错误。
26．某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌；醋醅含有醋酸菌；糖化即淀
粉水解过程。下列相关叙述错误的有（ ）
A．糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和灭菌
B．发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸
C．啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间
D．醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度和改善通气状况
【答案】B
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精
发酵时，一般将温度控制在18~30℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野
生酵母菌。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏
感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，
醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌
的最适生长温度为30~35℃。
【详解】A、糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的均有利于灭菌和糖化过程，A正确；
B、图中制酒用到了酒曲，酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，霉菌属于真菌，其为需氧型，该过程霉菌产
生的淀粉酶有利于将糯米中的淀粉分解，其中的乳酸菌进行的是无氧呼吸，酵母菌主要进行无氧呼吸过程
完成酿酒的过程，醋酸发酵过程中主要利用了醋酸杆菌的有氧呼吸进行醋酸发酵，B错误；
C、啤酒酿造流程中利用的原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，若适当增加溶解氧有利于酵母菌有
氧呼吸产生更多的能量满足酵母菌自身增殖的需要，因而可缩短发酵时间，C正确；
D、醋酸发酵过程中利用了醋酸菌的有氧呼吸，在发酵过程中经常翻动发酵物，有利于散热，可控制发酵
温度和改善通气状况，D正确。
27．呼吸作用受多种环境条件的影响，其原理常被运用于生产、生活当中。下列是生产、生活中常采取的
一些措施，其中影响呼吸作用的条件与其他三项不同的是（ ）
A．储存前将粮食进行晾晒 B．水稻田要定期进行排水
C．作物栽培后进行中耕松土 D．酿制果酒时要先进行通气
【答案】A
【分析】影响光合作用强度的因素：①外因：光照强度，温度，CO 浓度，矿质元素，水分等。②内因：
2
酶的种类、数量、活性，叶面指数等。
【详解】储存粮食前将粮食进行晾晒，其原理是减少粮食中的自由水，降低呼吸作用；水稻田定期排水，
一方面是为了抑制水稻根系的无氧呼吸，另一方面，是通过改善氧气供应来促进作物根系的有氧呼吸，以
利于作物的生长；作物栽培后进行中耕松土，是通过改善氧气供应来促进作物根系的有氧呼吸，以利于作
物的生长；酿制果酒时先进行通气，是通过改善氧气供应来促进酵母菌的有氧呼吸，利于酵母菌的繁殖，
A符合题意，BCD不符合题意。
28．我国科学家利用如下图所示的液态厌氧发酵工艺，实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌蛋白。下列叙述错
误的是（ ）A．乙醇梭菌可利用CO、CO 等物质，并生成乙醇
2
B．乙醇梭菌是自养厌氧型细菌，其厌氧发酵的过程需要进行搅拌
C．通过该工艺高效生产清洁能源乙醇，会降低生态足迹
D．此蛋白的加工需要乙醇梭菌的内质网、高尔基体、线粒体参与
【答案】D
【分析】生态足迹，又叫生态占用，是指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一
个国家或全人类）生存所需要的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。
【详解】A、由图可知，乙醇梭菌可利用CO、CO 等物质，并生成乙醇，实现了将无机物转变成有机物的
2
过程，A正确；
B、乙醇梭菌是自养厌氧型细菌，其厌氧发酵的过程需要进行搅拌，通过搅拌可使细菌和营养物质充分混
合，提高培养基的使用效率，B正确；
C、通过该工艺高效生产清洁能源乙醇，可减少化石燃料的燃烧，进而降低生态足迹，C正确；
D、乙醇杆菌是原核生物，其细胞中不含内质网、高尔基体、线粒体等细胞器，因此乙醇梭菌蛋白合成过
程中不需要内质网，高尔基体、线粒体等参与，D错误。
29．草莓采摘之后极易变质，将草莓加工成果酒，可提高草莓利用价值。科学家利用酿酒酵母进行草莓酒
的发酵，其工艺流程是：草莓挑选→清洗→打浆→添加果胶酶等→糖酸调整→接种酵母菌→主发酵→过滤
→倒罐→后发酵→陈酿→澄清→过滤→成品。下列说法错误的是（ ）
A．应挑选无腐烂、无病斑，成熟度较好的草莓果实进行发酵
B．加入果胶酶可促进果汁澄清，提高出汁率
C．将主发酵后的发酵液过滤后经高压蒸汽灭菌后再倒罐
D．果汁中的糖既可用来维持酵母菌的生长繁殖，又可用来发酵生成酒精
【答案】C
【分析】酵母菌的增殖和酒精产生均在主发酵阶段完成，主发酵时先进行通气后密闭。
【详解】A、应挑选无腐烂、无病斑，成熟度较好的草莓果实进行发酵，提高产品的品质和产量，A正确；
B、果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，因此其能够
提高果汁的出汁率和澄清度，B正确；
C、主发酵后的发酵液过滤后不需要经高压蒸汽灭菌，C错误；D、酵母菌是兼性厌氧菌，果酒制作的前期果汁中的糖作为有氧呼吸的底物，用来维持酵母菌的生长繁殖，
后期糖作为无氧呼吸的底物，用来发酵生成酒精，D正确。
30．传统泡菜腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化如图所示，其中亚硝酸盐是硝酸盐还原菌促进
硝酸盐还原形成的，硝酸盐还原菌适宜的酸碱度为中性。若摄入过多亚硝酸盐，则对人体有害。下列说法
错误的是（ ）
A．发酵初期，亚硝酸盐含量升高，主要是由于硝酸盐还原菌大量繁殖
B．发酵中期，乳酸菌进行有氧呼吸而大量繁殖产生大量的乳酸
C．发酵后期，乳酸菌数量下降与营养物质的消耗和乳酸的积累都相关
D．取食泡菜的时间宜在发酵的中期靠后期
【答案】B
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、发酵初期，亚硝酸盐含量升高，主要是由于硝酸盐还原菌大量繁殖，A正确；
B、发酵中期，无氧的环境有利于乳酸菌进行大量繁殖产生大量的乳酸，B错误；
C、发酵后期，乳酸菌数量下降与营养物质的消耗和乳酸的积累都相关，C正确；
D、取食泡菜的时间宜在发酵的中期靠后期，此时的亚硝酸盐含量较低，D正确。
31．堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的
生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、
蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（ ）A．微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高
B．与a点相比b点时微生物的数量较多，与b点相比c点时微生物种类较多
C．c点时，可对堆肥取样并用角蛋白氮源培养基对微生物群进行培养和筛选
D．若采用平板划线法分离微生物，无需对取样获得的原液进行适当稀释后划线
【答案】B
【分析】 平板划线法：①将接种环放到火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。②在火焰旁冷却接种环。
同时，拔出试管的棉塞。③将试管口通过火焰。④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。⑤将试管口通过火
焰，并塞上棉塞。⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖
上皿盖。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、
四、五次划线，注意不要将最后一次划线与第一次的相连。
【详解】A、在堆肥过程中，微生物呼吸作用产生的热量积累，会导致其堆肥内部逐渐升高，A正确；
B、a点温度较低且微生物的分解作用刚刚开始，此时堆肥材料中的微生物的数量相对较少，b点时经过一
段时间的代谢和增殖，b点处微生物的数量比a点多，b点到c点过程中，堆肥温度逐渐升高，并达到80℃
左右，该温度条件下不耐热的微生物大量死亡，所以c点时微生物的种类数少于b点，B错误；
C、筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效降解角蛋白，
所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养，C正确；
D、采用平板划线法分离微生物，不需要对取样原液进行适当稀释，通过连续多次划线即可达到分离微生
物的目的，D正确。
