文档内容
押辽宁卷单选题（黑龙江、吉林适用）
生物技术与工程
押题探究：题号定位、考点押题，高效冲刺
解题秘籍：传统发酵食品的制作+微生物的利用+细胞工程+胚胎工程+基因工程
真题回顾：回顾历年真题，循规探秘，临考提升
押题冲关：临考必刷，高效抢分
押题范围：第3~15题
押题预测：
核心考点 考情统计 押题预测 备考策略
2023·辽宁卷9 1.发酵技术、细胞工程、胚胎
2023·辽宁卷13 工程的命题多以选择题呈现，
1发酵技术及微生物培养。2.植物
2022·辽宁卷15 基因工程的命题多以简答题呈
组织培养和植物体细胞杂交技术。
发酵技术
2021·辽宁卷8 现。
3.动物细胞工程。4.胚胎工程的理
2021·辽宁卷13 2.试题情境以下列几种居多：
论基础及应用。5.基因工程的基本
2024九省联考东三省7
(1)以单克隆抗体为情境考查细
工具、操作程序及应用。6.DNA的
胞工程。
粗提取与鉴定。7.DNA片段的扩增
2023·辽宁卷7
(2)以胚胎移植为情境考查胚胎
及电泳鉴定。8.蛋白质工程。9.生
2022·辽宁卷12
生物工程 工程。
物技术的安全性与伦理问题。
2022·辽宁卷14
(3)最新的文献资料为情境考查
2021·辽宁卷3 基因工程。
1．传统发酵食品的制作
(1)果酒制作的三个方面①菌种来源：酒精发酵的菌种来自附着在果皮上的野生酵母菌。
②发酵原理：酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸并进行大量繁殖，在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精。
③酒精的检测：在酸性条件下，重铬酸钾可与酒精反应呈现灰绿色。
(2)果醋的制作原理：醋酸发酵是需氧发酵，需要不断通入无菌空气。
(3)泡菜制作
①菌种来源：制作泡菜的菌种主要来自植物体表面的天然的乳酸菌。
②发酵原理：乳酸菌在无氧条件下能将葡萄糖分解成乳酸。
2．微生物的利用
(1)培养基
①培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
②培养基的营养成分：培养基可为微生物提供碳源、氮源、无机盐和水等主要营养物质。
(2)无菌技术
①措施：无菌技术的主要措施包括消毒和灭菌。
②常用方法：培养基灭菌常采用湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法，接种环灭菌常采用灼烧灭菌法。
(3)微生物的纯化与计数
①纯化微生物的方法：常用平板划线法和稀释涂布平板法。
②微生物的计数方法：常用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法。
(4)微生物的筛选
①尿素分解菌的筛选：以尿素为唯一氮源的选择培养基可以筛选能分解尿素的细菌。
②尿素分解菌的鉴别：在以尿素为唯一氮源的选择培养基中添加酚红指示剂，可以鉴别分解尿素的细菌。
3．发酵工程的基本环节
选育菌种→扩大培养→配制培养基→灭菌→接种→发酵罐内发酵→分离、提纯产物→获得产品。
4．植物细胞工程——原理：植物细胞的全能性
(1)植物组织培养中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。
(2)脱分化阶段不需要光，再分化阶段需要光。
(3)生长素与细胞分裂素的比值高时，促进根的分化、抑制芽的形成；比值低时，促进芽的分化、抑制根
的形成。
(4)体内细胞未表现全能性的原因：在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性地表达。
5．植物体细胞杂交技术——原理：植物细胞的全能性、细胞膜的流动性
(1)原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁。植物体细胞杂交完成的标志是培育出杂种植株。
(2)植物体细胞杂交的培养基中要添加蔗糖溶液且浓度略大于原生质体内的浓度，这样不仅能为原生质体
提供营养，还能维持一定的渗透压，使原生质体保持正常的形态。
6．动物细胞培养(以贴壁细胞为例)——原理：细胞增殖
(1)动物细胞培养过程
①保障无菌、无毒的措施：对培养液和培养用具进行灭菌处理以及在无菌条件下进行操作，定期更换
培养液。
②动物细胞培养所需气体主要有O 和CO。O 是细胞代谢所必需的，CO 的主要作用是维持培养液的pH。在
2 2 2 2
进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO 的混合气体的CO 培
2 2
养箱中进行培养。③动物细胞培养过程中两次使用胰蛋白酶的作用不同。第一次：处理剪碎的组织，使其分散成单个细胞；
第二次：使贴壁生长的细胞从瓶壁上脱落下来分散成单个细胞。
④区分原代培养和传代培养的关键：是否分瓶培养。
(2)干细胞
诱导多能干细胞(iPS细
比较项目 胚胎干细胞(ES细胞) 成体干细胞
胞)
由高度分化的组织细胞诱
来源 早期胚胎 成体组织或器官内
导形成
具有分化为成年动物体
具有组织特异性，只能 类似胚胎干细胞；诱导过
内的任何一种类型的细
分化成特定的细胞或组 程无须破坏胚胎，理论上
特点 胞，并进一步形成机体
织，不具有发育成完整 可以避免免疫排斥反应，
的所有组织和器官甚至
个体的能力 应用前景更广泛
个体的潜能
7．卵裂期胚胎发育过程中物质和体积变化的规律
(1)有机物：胚胎没有和母体建立联系，不能从母体获取有机物，而呼吸消耗一直进行，因此有机物总量
减少。
(2)细胞数目和体积：胚胎总体积不增加，但细胞数目增多，每个细胞体积减小。
(3)细胞中DNA含量：伴随细胞分裂，细胞数目增多，总DNA含量增多，但每个细胞中核DNA含量保持相对
稳定。
8.胚胎移植中的四个注意点
第一次：用孕激素对受、供体进行同期发情处理；
两次激素使用
第二次：用促性腺激素处理使供体超数排卵
第一次：对收集的胚胎进行检查；
两次检查
第二次：对受体母畜是否妊娠进行检查
牛、羊要培养到桑葚胚或囊胚阶段；
移植时间不同 小鼠、家兔培养到桑葚胚前；
几乎所有动物都不能培养到原肠胚阶段再移植
胚胎由受精卵形成，属于有性繁殖；
繁殖方式
胚胎由核移植或胚胎分割形成，属于无性繁殖
9．PCR
(1)原理：DNA半保留复制。
(2)条件：DNA模板、2种引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸。
(3)扩增过程
过程 说明 图解
变性 温度超过90 ℃时，双链DNA解聚为单链温度下降到50 ℃左右时，两种引物通过
复性
碱基互补配对与两条单链DNA结合
温度上升到72 ℃左右时，溶液中的4种
脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作
延伸
用下，根据碱基互补配对原则合成新的
DNA链
(4)PCR过程的两点提醒
①复性不一定均为引物与DNA模板结合。复性时，引物与DNA模板的结合是随机的，也存在DNA解开的两
条链的结合。
②PCR反应的结果不都是所需的DNA片段。因为第一次循环得到的DNA片段只有一种引物，比所需的DNA
片段要长，从第二次循环才出现所需的DNA片段，这样的片段存在两种引物。
10．蛋白质工程
(1)目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行设计改造。
(2)操作手段：改造或合成基因。
(3)设计流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变
相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。
11．DNA的粗提取与鉴定的注意事项
(1)加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成丝状沉淀。
(2)本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核(无DNA)。
可选用鸡血细胞作为材料。
(3)鉴定DNA时，一支试管为对照组，另一支试管为实验组。两支试管中都先加入物质的量浓度为 2 mol/L
的NaCl溶液；在实验组试管中加入DNA丝状物，对照组不加；加入二苯胺试剂后沸水浴加热。结果可以看
到加入DNA丝状物的试管呈现蓝色，对照组无色。如果实验组蓝色较浅，说明提取出的DNA量太少。
12．DNA片段的扩增及电泳鉴定的注意事项
(1)为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压
灭菌处理。
(2)该实验所需材料可以直接从公司购买，缓冲液和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存。使用前，将所需
试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。
(3)在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换，避免试剂的污
染。
(4)在进行操作时，一定要戴好一次性手套。
(5)观察DNA带的分布及粗细程度来评价扩增的效果。
1. （2023·辽宁卷7）7. 大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错
误的是( )A．悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制
B．用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清
C．当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖
D．培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量
【答案】D
【解析】培养动物细胞使用合成培养基时需要加入血清等一些天然成分，必须保证环境是无菌、无毒
的，培养液还需要定期更换。O 是细胞代谢所必需的，CO 主要作用是维持培养液的pH。细胞贴附
2 2
在培养瓶的瓶壁上称为细胞贴壁，贴壁细胞在生长增殖时会发生接触抑制的现象。
A、悬浮培养单克隆细胞，可以保证足够的气体交换，通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮
于培养液内，可有效避免接触抑制，A正确；
B、由于细胞的生长是比较复杂的过程，血清中含有一些必须的因子，用于培养单克隆细胞的培养基
通常需加血清，B正确；
C、病毒借助于细胞进行繁殖，利用了活细胞的物质、能量、酶等，当病毒达到一定数量时细胞的生
命活动受到影响，会影响细胞的增殖，C正确；
D、细胞的正常生命活动需要适宜的pH，培养基pH会影响细胞代谢，进而影响单克隆细胞的病毒产
量，D错误。
故选：D。
2. （2023·辽宁卷9） 细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物
采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是
( )
A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C．同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
【答案】D
【解析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖
而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀
的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表
一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。
经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手
进行消毒，A正确；
B、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确；
C、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30~300的平板进行计数，以确保实
验的准确性，C正确；
D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板
上只能观察到一个菌落，D错误。
故选：D。
3.（2023·辽宁卷13） 利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。下图
为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是( )
A．DHA油脂的产量与生物量呈正相关
B．温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量
C．葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量
D．12~60h，DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高
【答案】D
【解析】1、发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数
量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧
等发酵条件。
2、题图分析：横坐标为发酵时间，纵坐标为发酵过程各种相关物质的含量及生物量。从图可知，随着
发酵的进行，葡萄糖逐渐减少，发酵到96h左右减少至0；蛋白胨在0~12h间快速减少，然后缓慢减
少，发酵到96小时左右减少至0；生物量和DHA油脂的产量随着发酵进程逐渐上升。
A、由图可知，DHA油脂的产量随着发酵进程逐渐增加，生物量也随着发酵进程逐渐增加，它们的变
化呈正相关，A正确；B、由图可知，生物量与DHA油脂的产量呈正相关，温度和溶解氧影响微生物的生长繁殖，进而影响
DHA油脂的产量，B正确；
C、发酵液中葡萄糖被微生物吸收用于呼吸作用产生能量，供其合成DHA油脂，C正确；
D、DHA油脂是一种不饱和脂肪酸，含C、H、O不含N，所以在12~60h，DHA油脂的合成对碳
源的需求高，不需要氮源，D错误。
故选：D。
4. （2022·辽宁卷12）抗虫和耐除草剂玉米双抗12−5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因
生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是
( )
A．预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制
B．后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分
C．延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制
D．转基因品种经检测含有目的基因后即可上市
【答案】B
【解析】PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；
2、原理：DNA复制；
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；
5、过程：① 高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键
可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③ 中温延伸：合成子链。
A、预变性过程可促进模板DNA解旋，没有促进复制，A错误；
B、后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分，B正确；
C、延伸过程仍需引物参与才能完成半保留复制，C错误；
D、转基因品种经检测含有目的基因并能稳定表达，且有生物活性后才能上市，D错误。
故选：B。
5. （2022·辽宁卷14）蓝莓细胞富含花青素等多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚
至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是( )
A．花青素通常存在于蓝莓细胞的液泡中
B．适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率以减少褐变
C．在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变
D．宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体
【答案】D
【解析】A、花青素是水溶性色素，主要存在于蓝莓细胞的液泡中，A正确；
B、适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率，以及时清除多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，
以减少褐变，B正确；
C、接种外植体时，在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变，C正确；
D、宜选用蓝莓幼嫩叶片为材料制备外植体，因为幼嫩叶片细胞分裂旺盛、易培养，D错误。
故选：D。
6. （2022·辽宁卷15）为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净
的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是( )
A．航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物
B．细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀
C．在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品
D．采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征
【答案】D
【解析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培
养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物
质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐；
2、微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的
开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单
个菌落；
3、菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形
成肉眼可见的子细胞群落。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，
每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。不同种或同种在不同的培养条件下，菌落特征是不同的。这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。
A、航天器处于外太空等极端环境中，其上可能存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物，A正确；
B、细菌形成菌膜可粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀，故需要洁净的组装车间，B正确；
C、在组装车间地面和设备表面可采集环境微生物样品，C正确；
D、航天器及洁净的组装车间微生物很少，不需要用到平板划线法分离微生物，D错误。
故选：D。
7. （2021·辽宁卷3）下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述，错误的是( )
A．灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合
B．用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体
C．基因工程中常用噬菌体转化植物细胞
D．经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防
【答案】C
【解析】A．促进动物细胞的融合除了物理方法和化学方法外，还可以采用灭活的病毒，A正确；
B．病毒作为抗原可刺激机体发生特异性免疫，产生抗体，用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体，
B正确；
C．基因工程中常用农杆菌转化植物细胞，农杆菌的特点是其细胞内的Ti质粒上的T−DNA片段能够
转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上，C错误；
D．经过灭活或减毒处理的病毒可以作为免疫学中的疫苗，用于免疫预防，D正确。
故选：C。
8. （2021·辽宁卷8）利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天
后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列有关叙述错误的是( )
A．乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B．酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C．酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D．接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度
【答案】B
【解析】A．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌
繁殖，A正确；
B．酵母菌一般以出芽的方式繁殖，醋酸杆菌以二分裂的方式进行增殖，B错误；
C．酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无
菌氧气，C正确；D．酵母菌适宜温度是18～25∘C，醋酸杆菌最适温度为30～35∘C，D正确。
故选：B。
9. （2021·辽宁卷13）下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是
( )
A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B．过程① 需要提供95%空气和5%CO 的混合气体
2
C．过程② 常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D．过程③ 将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
【答案】B
【解析】A．后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由
甲和乙的遗传物质共同决定，A错误；
B．动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO （维持培养液的pH）的混
2
合气体，B正确；
C．过程② 常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误；
D．过程③ 将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，D错误。
故选：B。
10.（2024九省联考东三省7）《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化
合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需要。下
列叙述错误的是( )
A．应用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗
B．可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体
C．富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素
D．应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素
【答案】D
【解析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新
品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
A、应用微型繁殖技术采用茎尖作为外植体可获得大量樱桃脱毒苗，A正确；
B、由于芽原基和叶原基分裂能力旺盛，因而可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体，B正确；C、生长素是由色氨酸经过一系列转变产生的，因此，用富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合
成生长素，C正确；
D、应用樱桃细胞培养可工厂化生产次生代谢产物槲皮素，D错误。
故选：D。
11.（2024九省联考东三省9)为探究H基因对肿瘤细胞M增殖能力的影响，分别将H基因和突变h基因过
量表达的细胞M在含琼脂的半固体培养基中培养，检测细胞克隆（由单个细胞分裂形成的肉眼可见的
细胞群）数量如下表，作为判断肿瘤细胞恶性程度的指标之一。下列叙述错误的是( )
组别 ① ② ③ ④
条件及结果
10%血清 − + + +
H基因 − − + −
突变h基因 − − − +
细胞克隆数量
5 9 15 27
（个）
注：“+”表示加入或过量表达；“−”表示未加入或无表达
A．血清为细胞M的生长增殖提供了营养物质等天然成分
B．克隆间相互离散，能有效避免克隆内细胞的接触抑制
C．H基因的过量表达导致克隆数增加，说明其不是抑癌基因
D．突变h基因过量表达，容易引起细胞M在体内分散和转移
【答案】B
【解析】癌细胞的特征：
（1）具有无限增殖的能力；
（2）细胞形态结构发生显著变化；
（3）细胞表面发生改变，细胞膜上的糖蛋白等物质降低，导致细胞彼此间的黏着性减小，易于扩散转
移；
（4）失去接触抑制。
A、在进行动物细胞培养时，培养液中通常需加入血清、血浆等一些天然成分，主要目的是为细胞提
供促生长因子，以补充细胞生长和增殖过程中所需的营养物质，A正确；
B、形成的肉眼可见的细胞群过程中发生了基因突变，则可能不会出现接触抑制现象，B错误；
C、原癌基因负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的过程，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增
殖，原癌基因突变使相应的基因产物过量表达可引起细胞癌变，因此H基因的过量表达导致克隆数增加，说明其不是抑癌基因，C正确；
D、突变h基因过量表达，导致细胞克隆数量增多，容易引起细胞M在体内分散和转移，D正确。
故选：B。
12. （2024九省联考东三省10）胚胎工程等生物技术促进了具有优良性状和经济价值的动物快速繁育与应
用。下列叙述错误的是( )
A．克隆珍稀野生动物，可使用体细胞核移植结合胚胎工程技术
B．胚胎分割技术可增加移植胚胎数目，还可产生遗传性状相同的后代
C．为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精
D．动物胚胎移植前，控制胚胎性别比例可降低后代的伴性遗传病发病率
【答案】C
【解析】胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
A、克隆珍稀野生动物，可使用体细胞核移植结合胚胎工程技术，该过程实现了濒危动物的保护， A
正确；
B、胚胎分割技术属于无性繁殖技术，因而可产生遗传性状相同的后代，B正确；
C、为提高体外受精成功率，新采集的精子应需要经过获能培养才能受精，C错误；
D、伴性遗传往往表现与性别有关，因此可根据患病动物的特征，在动物胚胎移植前，控制胚胎性别
比例可降低后代的伴性遗传病发病率，D正确。
故选：C。
1.废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。
下列叙述正确的是 ( )
A.该生产过程中,一定有气体生成
B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理答案 A 连续搅拌反应器是为了使菌体进行有氧呼吸,快速生长繁殖,即该生产过程一定有气体生成,A正
确;微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料和果糖生产废水中的含碳有机物,B错误;由图中“连续搅拌
反应器”可知,该生产工艺利用微生物有氧发酵技术生产蛋白质,C错误;杂菌对利用酿酒酵母生产蛋白质的
生产工艺过程无较大影响,故不需要对加入反应器的原料进行灭菌处理,D错误。
2.我国的酿酒技术历史悠久,古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载:将蒸熟的米和酒曲混
合前需“浸曲发,如鱼眼汤,净淘米八斗,炊作饭,舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化,冒出鱼眼大小的气
泡,把八斗米淘净,蒸熟,摊开冷透。下列说法错误的是( )
A.“浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快
B.“鱼眼汤”现象是微生物呼吸作用产生的CO 释放形成的
2
C.“净淘米”是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施
D.“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡
答案 C 长期干燥的酒曲中微生物处于休眠状态,可长时间保存,使用前使其活化,可加快微生物的代谢,A
正确;“鱼眼汤”说明酒曲中的微生物进行细胞呼吸产生了二氧化碳,B正确;“净淘米”是为了去除杂质,
而“蒸熟”是为了消除杂菌对酿酒过程的影响,C错误;如果将酒曲放入刚刚蒸好的米中则过高的温度会导
致酒曲中的微生物死亡,而“舒令极冷”则可防止此问题的发生,D正确。
3.含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭,硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑
色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力,用穿刺接种的方法分别将两种
菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养,如图所示。若两种菌繁殖速度相等,下列说法错误的是(
)
A.乙菌的运动能力比甲菌强
B.为不影响菌的运动需选用液体培养基
C.该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量
D.穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
答案 B 硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀,甲、乙菌的穿刺路径相同,但乙菌在试管中形成的
黑色范围大,这说明乙菌的运动能力比甲菌强,A正确;穿刺培养是将接种针深插至半固体培养基中进行接种
以培养微生物的一种方法,常用于厌氧或兼性厌氧微生物的培养,B错误;在琼脂层中进行穿刺培养,可根据
细菌自穿刺部位的扩散状况来了解细菌的运动性能,但不能比较两种菌产生硫化氢的量,C正确;穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌污染,D正确。
4.青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时,会通过分泌青霉素杀死细菌,以保证自身生存所需的能量供应。
目前已实现青霉素的工业化生产,关于该生产过程,下列说法错误的是 ( )
A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B.可用深层通气液体发酵技术提高产量
C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中
D.青霉素具有杀菌作用,因此发酵罐不需严格灭菌
答案 D 由题意可知,当葡萄糖浓度不足时,青霉菌会分泌青霉素,故工业化生产青霉素时,发酵液中的碳
源不宜使用葡萄糖,A正确;青霉菌为异养需氧型真菌,深层通气液体发酵技术可为发酵提供充足的氧气,可
提高产量,B正确;工业发酵罐体积较大,需要接种的菌株较多,故选育出的高产青霉素菌株经扩大培养后,才
可用于工业化生产,C正确;青霉素可抑制细菌生长,但不抑制真菌生长,且污染发酵罐的杂菌种类多,某些杂
菌会分泌青霉素酶将青霉素分解,故发酵罐需严格灭菌,D错误。
5. 关于白酒、啤酒和果酒的生产,下列叙述错误的是 ( )
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
C.葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质,也存在于线粒体
D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同,但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
答案 C 生产白酒、啤酒、果酒的原材料不同,但发酵的主要菌种都是酵母菌,发酵初期需要提供一定的
氧气以促进酵母菌的有氧呼吸,从而促进其大量生长繁殖,A、B、D正确;葡萄糖转化为乙醇的场所是细胞质
基质,因此该反应所需的酶只存在于细胞质基质,C错误。
6.《诗经》有云:“十月获稻,为此春酒,以介眉寿。”记录了古人用新鲜稻米酿酒,以求延年益寿的习俗。
米酒酿造主要包括蒸米、拌酒曲、发酵三步,酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌,霉菌主要起到糖化的作
用(把米中的淀粉转化成葡萄糖)。下列说法错误的是( )
A.酿造米酒的过程中,酵母菌进行细胞呼吸的类型是有氧呼吸和无氧呼吸
B.蒸米后通常需要进行冷却,其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物
C.米酒发酵初期,霉菌可以通过糖化作用,为酵母菌的呼吸作用提供底物
D.腐乳发酵过程中,也是利用了毛霉等微生物的糖化作用
答案 D 酵母菌是兼性厌氧型生物,细胞呼吸的方式为有氧呼吸和无氧呼吸,A正确;加入的酒曲中含有菌
种,因此蒸米后通常需要进行冷却,防止温度过高杀死酒曲中的微生物,B正确;糖化作用能将淀粉转化为葡
萄糖,为酵母菌的细胞呼吸提供底物,C正确;腐乳发酵的原理是毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的
蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,D错误。7.耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。嗜热菌可以在高温环境中生存,其产生的淀粉酶最
适温度较高。筛选能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌过程如图1所示,其中Ⅰ号培养基用碘液处理的结果如图2
所示。下列叙述正确的是 ( )
图1
图2
A.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
B.倒平板后对培养皿进行高压蒸汽灭菌
C.淀粉是图2所示固体培养基的唯一碳源
D.甲、乙试管中均为选择培养基
答案 A 淀粉与碘液反应呈现蓝色,能分解淀粉的嗜热菌在培养基上生长时可释放淀粉酶分解培养基中的
淀粉,故周围不显蓝色的菌落含有所需菌种,A正确;倒平板时培养皿和培养基都已灭菌处理,因此倒平板后
不需要对培养皿再进行高压蒸汽灭菌,B错误;据图2可知,培养基上出现了周围显蓝色的菌落,也出现了周
围不显蓝色的菌落,因此淀粉可能不是图2所示固体培养基的唯一碳源,C错误;图1中①过程是梯度稀释,
②过程是用涂布平板法进行接种,因此甲、乙试管主要是对嗜热菌样品进行稀释,不具备选择作用,不属于
选择培养基,D错误。
8.两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原
因断裂,形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出,未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞
的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理,将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得
了耐盐小麦新品种,过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞
B.过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂C.过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合
D.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段
答案 C 分析题图可知,①过程是去除植物细胞的细胞壁,该过程需要使用纤维素酶和果胶酶处理细胞,A
正确;结合题干信息分析,过程②的目的是使中间偃麦草原生质体中的染色体发生断裂,断裂后的染色体片
段可能能保留在杂种植株中,从而可能培养出耐盐小麦,B正确;过程③是原生质体融合的过程,该过程必须
借助一定的技术手段进行人工诱导,而人工诱导的方法有物理法和化学法,灭活的病毒用于动物细胞融合,C
错误;结合题干信息和题图中②的处理,可推断耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段,D正确。
9.甲、乙是严重危害某二倍体观赏植物的病害。研究者先分别获得抗甲、乙的转基因植株,再将二者杂交
后得到F,结合单倍体育种技术,培育出同时抗甲、乙的植物新品种。以下对相关操作及结果的叙述,错误
1
的是( )
A.将含有目的基因和标记基因的载体导入受体细胞
B.通过接种病原体对转基因的植株进行抗病性鉴定
C.调整培养基中植物激素比例获得F 花粉再生植株
1
D.经花粉离体培养获得的若干再生植株均为二倍体
答案 D 本题借助育种相关知识,考查考生运用所学知识,分析某些生物学问题、作出合理判断的能力;试
题通过抗甲、乙病害的植物新品种的培育,体现了科学思维素养中的演绎与推理要素。基因工程中需将含
有目的基因和标记基因的载体导入受体细胞,A正确;通过接种病原体,可在个体生物学水平上对转基因的植
株进行抗病性鉴定,B正确;在花粉离体培养过程中,生长素与细胞分裂素的比例影响脱分化与再分化过程,
调整培养基中生长素与细胞分裂素比例有利于获得F 花粉再生植株,C正确;经花粉离体培养获得的若干再
1
生植株均为单倍体,D错误。
10.下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是 ( )
A.通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
B.哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质
C.克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
D.将小鼠桑椹(葚)胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
答案 C 在体外受精前,需要对精子进行获能处理,通常体外获能的方法有培养法和化学诱导法,但精子获
能是精子获得与卵细胞受精的能力,不是获得能量,A错误;哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养需要额外提
供血清等一些天然成分,B错误;克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植
等过程,C正确;胚胎分割是用机械方法将早期胚胎平均分割成二分胚、四分胚甚至八分胚,经培养后植入受
体,以得到同卵双生或同卵多生后代的技术,该过程属于无性生殖,D错误。11.精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞,形成转基因动物的方法。某科研小组
利用精子载体法将人的促卵泡激素(β-FSH)基因导入受精卵中形成转基因牛来生产促卵泡激素。下列有关
说法错误的是 ( )
A.①过程中需将精子诱导处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
B.②过程的精子需要先在获能液或雌性生殖道中进行获能处理
C.③过程的早期胚胎需要发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植
D.④过程的代孕牛需要与卵细胞供体牛用相关激素进行同期发情处理
答案 C 过程①表示将外源基因导入精子,需将精子诱导处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,即成
为感受态细胞,A正确;②过程表示受精作用,该过程精子需要获能,可在获能液或雌性生殖道中进行获能处
理,B正确;胚胎移植时,胚胎需发育到桑葚胚或囊胚期才能进行移植,C错误;进行胚胎移植前要使供体和受
体处于相同的生理状态,因此要用相关激素对代孕牛进行同期发情处理,D正确。
12.为检测某药物X的抗癌活性,在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞,使其贴壁生长,实验组
加入溶于二甲基亚矾的药物X,培养72小时后进行计数,比较实验组和对照组每个孔中细胞数目。下列有关
叙述错误的是 ( )
A.细胞培养液中通常需要加入血清等天然成分
B.可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并进行计数
C.对照组中应加入等体积的生理盐水,其他条件一致
D.若实验组细胞数远低于对照组,可初步判断此药物有抗癌效果
答案 C 培养动物细胞时,细胞培养液中通常需要加入血清等天然成分,A正确;对于已经贴壁生长的动物
细胞,可用胰蛋白酶处理,使细胞脱落下来并进行计数,B正确;分析题干信息可知,本实验的自变量为是否加
入药物X,因变量是癌细胞数量,所以根据单一变量原则,对照组中应加入等体积的二甲基亚矾(溶剂),C错误;
若添加药物X的实验组肝癌细胞数目远低于对照组,可以初步判断药物X具有抗癌效果,D正确。
13.如图是利用体细胞核移植技术获得克隆奶牛的流程图。下列叙述错误的是 (
)A.过程①可通过显微操作去除细胞核
B.过程②和过程④所使用的培养基成分不完全相同
C.过程③可用电刺激使供体细胞和去核卵母细胞融合
D.过程⑤操作前需要用促性腺激素对代孕母牛进行发情处理
答案 D 过程①去除牛卵母细胞中的细胞核可以用显微操作技术,A正确。过程②是培养动物细胞的过程,
过程④是早期胚胎培养,二者所使用的培养基成分不完全相同,B正确。过程③供体细胞核植入受体卵母细
胞,可用电刺激使供体细胞和去核卵母细胞融合,C正确。过程⑤操作前需要用孕激素对代孕母牛进行发情
处理,D错误。
14.采用CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因定点插入受精卵的Y染色体上,获
得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配,通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操
作错误的是( )
A.基因编辑处理的受精卵在体外培养时,不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液
B.基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期,须将其植入同期发情小鼠的子宫,才可获得表达EGFP的小
鼠
C.分离能表达EGFP的胚胎干细胞,通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠
D.通过观察早期胚胎的荧光,能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎
答案 B 受精卵在体外培养时,由于不同发育阶段的胚胎细胞所需的环境有所不同,因此需要更换不同成
分的培养液,A正确;进行胚胎移植的早期胚胎通常为发育到8细胞以上的胚胎,如早期囊胚,B错误;利用胚
胎干细胞通过核移植等技术来获得转基因小鼠时,可在短时间内获得大量的转基因小鼠胚胎,再通过胚胎移
植技术大量培养转基因小鼠,C正确;根据题干信息可知,EGFP基因被定点插入Y染色体上,而Y染色体只有
雄性才具有,因而观察早期胚胎的荧光,能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎,D正确。
15.腈水合酶(N)广泛应用于环境保护和医药原料生产等领域,但不耐高温,利用蛋白质工程技术在N 的α
0 0
和β亚基之间加入一段连接肽,可获得热稳定的融合型腈水合酶(N)。下列有关叙述错误的是( )
1
A.N 与N 氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之一
1 0
B.加入连接肽需要通过改造基因实现
C.获得N 的过程需要进行转录和翻译
1
D.检测N 的活性时先将N 与底物充分混合,再置于高温环境
1 1答案 D 根据题意可知,与N 相比,N 多了一段连接肽,二者氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之
0 1
一,A正确;利用蛋白质工程改造蛋白质时需对相关基因进行修饰或合成,在N 的结构中加入连接肽需要通过
0
改造相关基因来实现,B正确;获得N 的过程需要进行转录和翻译,C正确;检测N 的活性时,需要先将N 与底
1 1 1
物置于高温环境下,再将N 与底物充分混合,D错误。
1
16.羊瘙痒病是感染性蛋白粒子PrPSc引起的。某些羊体内存在蛋白质PrPc,但不发病。当羊感染了PrPSc
后,PrPSc将PrPc不断地转变为PrPSc,导致PrPSc积累,从而发病。把患瘙痒病的羊组织匀浆接种到小鼠后,小
鼠也会发病。下列分析合理的是 ( )
A.动物体内的 PrPSc可全部被蛋白酶水解
B.患病羊体内存在指导PrPSc合成的基因
C.产物PrPSc对PrPc转变为PrPSc具有反馈抑制作用
D.给PrPc基因敲除小鼠接种PrPSc,小鼠不会发病
答案 D 感染性蛋白粒子PrPSc会将羊体内的PrPc不断转变为PrPSc,PrPSc在体内积累从而导致发病,可见
动物体内的PrPSc并不会全部被蛋白酶水解,A错误;患病羊体内存在指导蛋白质PrPc合成的基因,而PrPSc并
不是自身合成的,而是外界感染的,B错误;PrPSc在体内积累从而导致发病,说明产物PrPSc对PrPc转变为
PrPSc不具有反馈抑制作用,C错误;把患瘙痒病的羊组织匀浆接种到小鼠后,小鼠也会发病,原因是患瘙痒病
的羊组织匀浆含有感染性蛋白粒子PrPSc,小鼠体内含有PrPc,PrPc基因敲除小鼠不含PrPc,接种PrPSc后也不
会发生使PrPc转变为PrPSc并积累PrPSc而致病的现象,D正确。
17.图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作。若限制酶EcoR Ⅰ
识别G↓AATTC,BamHⅠ识别G↓CATCC。下列选项正确的是( )
A.利用PCR技术扩增基因时,反应缓冲溶液中要添加Ca2+来激活DNA聚合酶
B.构建基因表达载体时可使用E.coliDNA连接酶将DNA片段连接起来
C.农杆菌侵染人参细胞后Ti质粒整合到受体细胞的染色体DNA上
D.检测干扰素基因是否导入人参愈伤组织细胞需要利用抗原—抗体杂交答案 B 利用PCR技术扩增基因时,反应体系中一般要添加Mg2+来激活耐高温的DNA聚合酶,A错误;由于
EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ对目的基因和Ti质粒进行切割产生的是黏性末端,黏性末端可以用E.coliDNA连接酶进
行连接,B正确;农杆菌侵染人参细胞后,整合到宿主细胞染色体DNA上的是Ti质粒上的T-DNA片段,而不是
整个Ti质粒,C错误;检测目的基因是否导入受体细胞常用分子杂交技术,D错误。
18.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量,其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入
一个与某条模板链互补的荧光探针,当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处时,会水解探针,使荧光监
测系统接收到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成,过程如图所示。下列相关叙述错误的是
( )
A.引物与探针均具特异性,与模板结合时遵循碱基互补配对原则
B.反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关
C.若用cDNA作模板,上述技术也可检测某基因的转录水平
D.耐高温的DNA聚合酶催化DNA的合成总是从子链的3'端向5'端延伸的
答案 D PCR中,引物是利用目的基因的一部分已知序列设计出来的,探针也是通过待测序列的一部分设计
出来的,均具有特异性,且二者都是通过碱基互补配对原则与模板结合的,A正确;由题可知,荧光的产生是荧
光探针被水解所致,因此起始时的模板DNA含量越高,与其结合的荧光探针就越多,扩增时水解的探针越多,
荧光就越强,B正确;若用cDNA作模板进行转录,水解特异性荧光探针时会发出荧光,根据荧光的强度可确定
转录水平,C正确;耐高温的DNA聚合酶催化DNA的合成,总是从子链的5'端向3'端延伸的,D错误。
