文档内容
押多选/不定项选择题
生物技术与工程
考向预测 考情统计（3年） 核心考点
2023·河北
通过有不定项或多选的各
2021·2022·2023·江苏
省考题来看，生物技术与工程 发酵工程
2021·2022·2023·山东
多集中在发酵工程和细胞与胚
2022·江苏
胎工程上。预测2024年可能会
出现基因工程。 2022·2023·江苏
细胞与胚胎工程
2022·河北
一、发酵工程
考向01 发酵工程 1..发酵工程基本环节
1.（2023·河北·高考真题）乳酸链球菌素（Nisin）是乳
酸链球菌分泌的一种抗菌肽。研究者对Nisin发酵生产过
程相关指标进行了检测，结果如图。下列叙述正确的是（
）
A．适度提高乳酸链球菌接种量可缩短Nisin发酵生产
周期
B．发酵的中后期适量补加蔗糖溶液可促进菌体生长
C．向发酵罐内适时适量添加碱溶液可提高Nisin产量
D．发酵结束后主要通过收获并破碎菌体以分离获得 2.啤酒发酵的工业化生产流程及操作目的
Nisin产品
2.（2023·江苏·高考真题）某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌；醋醅含有醋酸
菌；糖化即淀粉水解过程。下列相关叙述正确的有
（ ）
A．糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化
和灭菌
B．发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸
C．醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度
和改善通气状况
二、微生物的纯培养
D．啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间
3.2023·山东·高考真题）果酒的家庭制作与啤酒的工业化
生产相比，共同点有（ ）
A．都利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理
B．都需要一定的有氧环境供发酵菌种繁殖
C．发酵前都需要对原料进行灭菌
D．发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期
4.（2022·辽宁·高考真题）β-苯乙醇是赋予白酒特征风味
的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌
应用于白酒生产。下列叙述正确的是（ ）
A．所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧
灭菌
B．通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母
菌
C．还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能
力
D．该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发
5.（2022·江苏·高考真题）在制作发酵食品的学生实践
中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述错误的有（
）
A．泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气
菌繁殖，需开盖放气
B．制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制 三、微生物的选择培养和计数
作泡菜的盐水要淹没全部菜料
1.选择培养基
C．葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，
可直接通入无菌空气制作葡萄醋
D．果酒发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温
度宜控制在30-35℃
6.（2022·山东·高考真题）啤酒的工业化生产中，大麦经
发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（ ） 常见选择培养基举例
A．用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能 ①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大
产生α-淀粉酶 气中N 的微生物。
2
②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选
B．焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌
出真菌。
C．糖浆经蒸煮、冷却后需接种酵母菌进行发酵
③无有机碳源的培养基可筛选出自养微
D．通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，
生物。
缩短啤酒的发酵周期
2.稀释涂布平板法
7.（2021·江苏·高考真题）为提高一株石油降解菌的净化
(1)系列稀释操作
能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致
取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的
死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（
试管中，依次等比稀释。
）
A．将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基
污染的概率
B．涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL
C．需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以
确定最佳诱变时间
(2)涂布平板操作
D．挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行
降解效率分析
8.（2021·山东·高考真题）含硫蛋白质在某些微生物的作
用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚
铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否
产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分
别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，
如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是（
）
3.微生物的数量测定
(1)利用稀释涂布平板法计数
A．乙菌的运动能力比甲菌强
①为了保证结果准确，一般选择菌落数
B．为不影响菌的运动需选用液体培养基 为 30～300 的平板进行计数，并且在同
一稀释度下，应至少对 3 个平板进行重
C．该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量
复计数，并求平均值。
D．穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
②统计结果往往比实际值少。
(2)利用显微镜直接计数
①需用特定的细菌计数板或血细胞计数
板。
②统计结果一般是活菌数和死菌数的总
和。
4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的
实验操作
(1)实验原理(2)操作步骤
(3)实验结果分析与评价
5.分解纤维素的微生物的分离
(1)分离方法与原理
(2)纤维素分解菌的培养基成分及鉴定原
理
尝试解答：
____________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________一、动物细胞融合技术与单克隆抗体
考向02 细胞与胚胎工程
1.动物细胞融合技术
1.（2023·江苏·高考真题）我国科学家利用猴胚胎干
细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流程如图所示。下
列相关叙述正确的有（ ）
2.单克隆抗体及其应用
制备过程 原理：细胞膜的流动性和
细胞增殖
A．猴的成纤维细胞和胚胎干细胞功能不同，但具有
相同的基因组
B．囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的
基因都不同
C．移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满CO₂的培
养箱中进行
D．移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体
激素分泌
2.（2022·江苏·高考真题）下图表示利用细胞融合技
术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体
会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现
检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃
羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸
甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列
相关叙述正确的有（ ）A．加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合
B．细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细
胞
提醒
C．芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基
因位于11号染色上 ①获取小鼠经免疫的 B 淋巴细胞的部
位：脾。
D．胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激
②两次筛选的目的：
酶基因位于X染色体上
第一次是在诱导融合之后，利用特定的
3.（2022·河北·高考真题）人染色体DNA中存在串
选择培养基筛选出杂交瘤细胞。第二次
联重复序列，对这些序列进行体外扩增、电泳分离后可得
到个体的DNA指纹图谱。该技术可用于亲子鉴定和法医 是对上述杂交瘤细胞进行筛选，利用 96
学分析。下列叙述错误的是（ ） 孔板培养，采用专一抗体检测的方法筛
选出能产生所需特定抗体的杂交瘤细
A．DNA分子的多样性、特异性及稳定性是DNA鉴定
技术的基础 胞。
③杂交瘤细胞的抗体检测和克隆化培
B．串联重复序列在父母与子女之间的遗传不遵循孟德
尔遗传定律 养：融合后的细胞经选择培养基培养
后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但
C．指纹图谱显示的DNA片段属于人体基础代谢功能
这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗
蛋白的编码序列
体的细胞，通常用“有限稀释法”来选
D．串联重复序列突变可能会造成亲子鉴定结论出现
择，直至确信每个孔中增殖的细胞为单
错误
克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克
隆化培养。
二、胚胎工程技术及其应用
1.体外受精
2.胚胎移植(1)概念理解
(2)过程
提醒
胚胎移植过程中两次使用激素的目的：
第一次用孕激素对受、供体进行同期发
情处理，第二次用促性腺激素处理使供
体超数排卵。两次检查的目的：第一次
是对收集的胚胎进行质量检查，第二次
是对受体母畜是否妊娠进行检查。
3.胚胎移植的生理学基础4.胚胎分割 无性繁殖或克隆的方法之一
(1)胚胎分割
(2)主要仪器设备
体视显微镜和显微操作仪。
(3)操作程序
提醒
①将内细胞团均等分割，以免影响分割
后胚胎的恢复和进一步发育。
②胚胎移植前进行性别鉴定的方法：取
滋养层细胞做DNA分析。
尝试解答：
____________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________
1．利用非对称细胞融合技术可以实现两个原生质体核、质基因的优化组合，该技术对细胞质中含有优良
基因的某一原生质体进行去核或破坏染色体处理，对细胞核中含有优良基因的第二种原生质体进行细胞质
失活处理，然后将两个原生质体进行融合。下列说法正确的是（ ）
A．采用梯度离心，紫外线照射等方法可以实现细胞去核B．病毒表面的糖蛋白和酶能使细胞膜上的蛋白质和脂质重新排布
C．该种技术能够转移细胞质雄性不育基因，培育优良作物不育系
D．将融合细胞培养为植株时，通常用葡萄糖提供碳源并调节渗透压
2．田间常施用的草铵膦（含碳有机物）农药，在环境中难以降解。科学家通过图1所示方法筛选出了可降
解草铵膦的植物乳杆菌（ST-3），并研究了固定态（固定在多孔载体上）和培养液中游离态的ST-3的降解
效果，结果如图2所示。下列相关叙述错误的有（ ）
A．图1中②过程可使用无菌水，③④⑤过程应用以草铵膦为唯一碳源的培养基
B．图1中配制好的培养基可放入干热灭菌箱内进行灭菌处理
C．由图2可知，固定态ST-3对土壤中草铵膦的降解效果优于游离态ST-3
D．固定态ST-3降解率高可能是因为载体避免ST-3直接接触高浓度草铵膦
3．研究人员将PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S（箭头表示转录方向）插入图中载体P区，构建表达
载体，转入大肠杆菌，获得能够检测水中毒物的大肠杆菌。下列叙述不正确的是（ ）
A．PCR扩增时，应在启动子两侧引入EcoRⅠ、BamHI识别序列
B．用Mg2+处理大肠杆菌以便转入构建好的表达载体
C．在添加氨苄青霉素的培养基上存活的菌株不一定为所需菌株
D．可通过转基因大肠杆菌的荧光情况判断水中是否含有毒物
4．研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A与B的培养基中（+代表含抗生素，+多少代表
抗生素浓度，一代表不含抗生素），对两种抗生素药性分析。在37℃环境下培养24小时后，细菌生长情
况如图。下列说法错误的是（ ）A．为排除杂菌的影响，倒平板前需对培养基采用高压蒸汽灭菌
B．该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培养
C．长期使用抗生素A不会增加结核杆菌的抗药性基因频率
D．与单独使用抗生素A相比，联合使用抗生素B可显著增强对结核杆菌的抑制作用
5．小麦花叶病毒（CWMV）是引起小麦严重减产的主要病毒。研究人员以CWMV外壳蛋白（CP）为抗
原，利用杂交瘤技术获得4种抗CWMV的单克隆抗体，同时对这4种单抗的特异性进行了检测，检测结果
如下图。下列说法错误的是（ ）
A．实验中获得的4种单克隆抗体均具有特异性强
B．实验中用CP免疫小鼠以分离出能产特定抗体的浆细胞
C．4种单抗均是由同一个杂交瘤细胞经过扩大培养得到的
D．体外培养杂交瘤细胞时需在95%空气和5%O 的环境中
2
6．在细胞工程中，多种技术都涉及生物材料以及细胞类型的筛选。下列选项中对应关系正确的是（ ）
选
操作方法 操作目的
项
A 选择植物幼嫩的部分、花粉进行组织培养 实验材料的分化程度低、分裂能力强、易表现全能性
植物体细胞杂交中，选择两种细胞融合的 新个体遗传物质来自两种生物且均表现出两种生物的
B
细胞 特征
C 动物细胞融合实验中选择杂交瘤细胞 杂交瘤细胞均可无限增殖并产生所需抗体
胚胎移植时通过性别鉴定选择雌性胚胎移
D 通过乳腺在特定时期产生乳汁的特点分离药物
植
A．A B．B C．C D．D
7．融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，
从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析不正确的是（ ）A．上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对
B．可在同一个反应体系中进行甲基因和乙基因的扩增
C．融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物，不需要另加入引物
D．若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物
8．人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人
参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建
立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，如图1、2所示，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，
Rg3具有抗癌作用。据题分析，下列说法错误的有（ ）
A．人参皂苷不是人参和西洋参生长和生存所必需，其药用价值体现生物多样性的直接价值
B．图1所示过程主要依据植物细胞的全能性
C．图1中过程②为再分化，过程④中蔗糖浓度过低、过高都不利于悬浮细胞的培养
D．杂种胚中的大多数种类皂苷含量均高于其他两种，应作为抗癌药物的优先选择
9．肿瘤细胞表面的糖蛋白CD47是一般细胞的1.6～5倍，通过CD47—SIRPα信号通路抑制吞噬细胞作用。
CD47单抗是一类靶向CD47—SIRPα信号通路的药物，能帮助吞噬细胞发挥出抵抗肿瘤的作用。如图为
CD47单克隆抗体的简要制备过程。下列叙述正确的是（ ）A．肿瘤细胞表面的糖蛋白较正常细胞表面的糖蛋白含量高
B．步骤①中免疫多次的目的是获得较多B淋巴细胞
C．步骤②中需要选择培养基和多孔细胞培养板
D．可将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养生产单克隆抗体
10．北京航空航天大学教授杨军成功从黄粉虫幼虫消化道中分离出能降解聚乙烯塑料的细菌——微小杆菌
YT2。下图表示目的菌的获取过程。下列相关叙述中，合理的是（ ）
A．富集培养应使用牛肉膏蛋白胨培养基，以促进目的菌增殖
B．选择培养基的成分中应以塑料作为唯一碳源
C．将1ml菌液加入培养基，再使用涂布器进行均匀涂布
D．使用固体斜面培养基保存微生物时，应置于低温环境中
11．生物技术是把双刃剑，造福人类的同时也带来了安全性和伦理问题，人们必须高度重视。下列叙述正
确的是（ ）
A．利用核移植技术获得胚胎，从中分离出ES细胞治疗白血病不涉及伦理问题
B．若有国家把研制出的新型鼠痘病毒作为生物武器，将会威胁人类安全
C．研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播
D．干细胞的研究具有广阔的应用前景，应大力支持和发展，不需要监管
12．为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与
载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列操作与实验目的相符的是（ ）
A．用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA—ACA融合基因
B．与只用Kpn I相比，Kpn I和Xho I处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C．将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞
D．用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中
13．在酒的酿造过程中，除酿酒酵母外还有非酿酒酵母的参与，其中非酿酒酵母发酵能力弱，乙醇耐受力
差，难以充当酒精发酵的主要菌株，但其代谢产物及分泌的酶类能促进酿酒酵母降解葡萄糖等发酵底物，
产生醛、酯、酸等芳香化合物，对最终酒产品的风味产生积极影响。关于传统发酵制作果酒的过程，下列
说法错误的是（ ）
A．制作果酒时，发酵温度应控制在30～35℃之间
B．发酵瓶中只含有酿酒酵母和非酿酒酵母两种微生物
C．制作葡萄酒时，酿酒酵母和非酿酒酵母都主要来自葡萄的果皮
D．发酵过程中，非酿酒酵母的数量逐渐下降，酿酒酵母的数量不断上升
14．鸡蛋表面污染的细菌会逐渐侵入蛋内，缩短鸡蛋保质期。对某地不同季节及不同养殖模式下生产的鸡
蛋取样，按每克鸡蛋用1mL无菌生理盐水清洗鸡蛋表面，收集清洗液，培养计数结果如下表。相关叙述正
确的是（ ）
菌落数（个·g-1）
季节
半封闭式养殖模
全封闭式养殖模式
式
夏季 3.92×104 7.24×103
冬季 7.60×104 1.24×104
A．稀释涂布平板法得到的鸡蛋表面菌落数比实际数略少
B．表中数据是对清洗液稀释1×103倍后涂布平板获得的
C．比较两种养殖模式可知鸡蛋表面的细菌主要来自环境
D．冬季鸡舍更需要消毒以减少鸡蛋表面的细菌污染
15．慢病毒是逆转录病毒的一种，可改造为基因工程载体，其可有效感染肝细胞、肿瘤细胞等多种细胞。
如图为慢病毒包装及侵染过程，已知转移质粒携带目的基因，包装质粒携带慢病毒的结构基因和逆转录酶
基因，包膜质粒携带糖蛋白基因。据此下列有关叙述不正确的是（ ）
A．图中共转染肝细胞属于基因工程中将表达载体导入受体细胞过程B．培养的肝细胞发生接触抑制时，可用胰蛋白酶或胃蛋白酶处理
C．包膜质粒上的糖蛋白基因若发生甲基化，不改变子代慢病毒的遗传信息
D．步骤②后获得的A和B两种肝细胞中，电泳结果差异与蛋白质分子大小有关
16．柑橘花叶病毒（CiMV）能引起柑橘果皮出现各种绿色花纹，使其商业价值下降。CiMV 外壳蛋白中
11-475 残基（485taa）的肽具有较强的免疫原性。为及早发现并消除受感染的树木，研究人员利用动物细
胞工程技术开发了一种针对 CiMV 的灵敏且快速的兔源性单克隆抗体（mAb）诊断试剂盒。下列说法正
确的是（ ）
A．制备 mAb 过程中，需用 CiMV 的 485aa 对实验兔进行多次免疫处理
B．可用 PEG 处理已免疫的 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，促使二者融合
C．经选择培养后的杂交瘤细胞在体外扩大培养可以获得大量 mAb
D．该诊断试剂盒利用了 mAb 与 CiMV 的 485aa 特异性结合的原理
17．草莓植株的营养物质含量与发育状况和染色体组数目有关，感染病毒后会出现结实率下降，品质变差
等问题。育种工作者用森林草莓（2n，某对染色体上有抗虫基因）和哈尼草莓（8n=56）进行实验，培育
草莓新品种。下列叙述正确的是（ ）
A．待森林草莓长出1cm左右不定根后用低温（4℃）处理，能诱导染色体数目加倍
B．可切取一定大小的哈尼草莓茎尖进行植物组织培养，获得抗病毒草莓
C．两种草莓杂交得到的多倍体植株不育
D．可诱变处理哈尼草莓愈伤组织来获得突变体，进而培育成新品种
18．下列关于土壤中纤维素分解菌的分离培养过程的叙述，正确的是（ ）
A．为确保实验的准确性，选择土壤进行取样时，需要随机取样
B．分离土壤中的纤维素分解菌时，可用含有刚果红的牛肉膏蛋白胨培养基，刚果红与纤维素形成红
色复合物
C．分离土壤中纤维素分解菌的方法可以是稀释涂布平板法或平板划线法
D．纤维素分解菌能产生纤维素酶，将纤维素分解为纤维二糖、葡萄糖等
19．狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉且其细胞中的黄酮类化合物可入药。某科研小组以狼爪瓦松
为材料，开展植物细胞工程应用的研究，具体过程如图所示（其中数字序号代表相应的处理过程）。下列
有关分析错误的有（ ）A．过程③在生长素/细胞分裂素比值高的培养基中培养，再移至相应比值低的培养基中
B．过程④常用射线或化学物质处理，处理后培养即可获得大量所需的突变体植株丙
C．过程⑤所得原生质体经体细胞杂交技术最终形成丁，该过程实现了远缘杂交育种
D．过程⑥利用愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点，可大量获得黄酮类化合物
20．科研人员利用MRS-溴甲酚绿培养基，从传统臭鳜鱼中分离筛选到一株乳酸菌，并研究其对多种微生
物的抑菌能力。MRS-溴甲酚绿培养基的配方见下表，乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈，溴甲酚绿为pH显
色剂，酸性显示黄色。科研人员分别将含有四种病原菌的培养基倒入A~D四个培养皿中，通过一定的方法
使每个培养基上形成4个大小相同的小孔，标号为1~4。1号孔作为对照，2~4号孔中均加入100μL含有该
株乳酸菌代谢产物的液体培养基，在适宜条件下静置培养24h，测量抑菌圈直径，结果如下图。下列叙述
正确的是（ ）
MRS-溴甲酚绿培养基配方
物 牛肉 番茄
胰蛋白胨 葡萄糖 碳酸钙 酵母粉 溴甲酚绿 琼脂
质 膏 汁
含
10g/L 10g/L 10g/L 20g/L 10g/L 0.1g/L 200g/L 18g/L
量
A．分离筛选乳酸菌时，应选择具有溶钙圈的黄色菌落继续培养
B．应向1号孔中加入100μL无菌水作为对照
C．传统臭鳜鱼不容易变质与乳酸菌能抑制多种微生物的增殖有关
D．该株乳酸菌代谢产物对四种病原菌都有抑制作用，但对丁香假单胞菌的抑制效果最好
