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史上最全质粒图谱及看法!全套可下载!
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每当拿到一个质粒图谱,第一反应就是一脸懵,这是什么玩意?这些ori、RBS、tet是什么鬼?这些箭头代表什么,转录的方向吗?为什么都不相同,不会“撞车”么?这玩意究竟怎么看啊?
如何看懂质粒图谱
Step 1:先了解质粒的基本组成元素,Ori复制起始点、抗性基因有哪些、多克隆位点在哪里,有哪些酶切位点?有哪些荧光标记或蛋白标签序列?

Step 2: 看质粒是否是表达载体,如果是,那就必定有这些原件:启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。

Step 3: 弄清楚方向。为什么质粒图谱上有的箭头顺时针有的箭头逆时针?那其实是代表两条 DNA 链,即质粒是环状双链 DNA,它的启动子等在其中一条链上,而它的某些基因在另一条链上。当然,最重要的是要弄清楚目的基因插入那一段(从T7启动子到终止子那一段)的方向,即下图黄色圈圈所示的箭头方向,其它的大可以忽略。

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