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第40 讲 动物细胞工程
目录
01 课标达标练
【题型一】动物细胞培养和核移植技术
【题型二】动物细胞融合与单克隆抗体的制备
【题型三】干细胞培养技术
【题型四】动物细胞工程的应用
02 能力突破练（新角度+新情境+新考法）
03 高考溯源练（含2025 年高考真题）
题型一 动物细胞培养和核移植技术
1．肿瘤细胞表面有受体EGFR，CD3 是T 细胞表面的标志性抗原，科研人员制备双特异性抗体EGFR/
CD3，可招募T 细胞定向移至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力，过程如图所示。双杂交瘤细胞表达
产生的H 链和L 链可以随机组合。下列叙述正确的是（ ）
A．培养细胞A 和B 时都会因接触抑制导致细胞分裂受阻
B．②过程需经过克隆化培养和抗体检测筛选出产生抗EGFR 抗体的杂交瘤细胞
C．②④过程中诱导动物细胞融合可采用的化学方法有PEG 融合法和灭活病毒诱导法
D．筛选双特异性抗体EGFR/CD3 时使用EGFR 进行抗原—抗体杂交即可
【答案】B
【详解】A、由图可知，细胞A 为骨髓瘤细胞，骨髓瘤细胞培养时不存在接触抑制的情况，而细胞B 不能
进行细胞分裂，A 错误；
B、②过程提取出来的B 细胞可能有多种已免疫的B 淋巴细胞，杂交细胞也有多种，②过程首先需用特定
的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，从而筛选出能产生抗
EGFR 抗体的杂交瘤细胞，B 正确；
C、诱导动物细胞融合用的灭活病毒诱导法属于生物法，C 错误；
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D、抗原和抗体能特异性结合，筛选双特异性抗体EGFR/CD3 时需使用EGFR 和CD3 这两种抗原进行抗原
—抗体杂交，D 错误。
故选B。
2．科学家将Oct3/4、Sox2、c-Myc 和KLf4 基因通过逆转录病毒转入小鼠分化成熟的成纤维细胞中，然后
在ES 细胞培养基上培养这些细胞，2~3 周后，这些细胞表现出ES 细胞的特征，它们被称为iPS 细胞。下
列说法正确的是（ ）
A．成纤维细胞也就是胚胎干细胞，其具有全能性
B．培养细胞时需要提供95%O2和5%CO2的混合气体
C．该技术可以避免免疫排斥，并降低肿瘤发生的风险
D．逆转录病毒在该技术中作为载体与其感染性和整合性有关
【答案】D
【详解】A、成纤维细胞是已分化的体细胞，而胚胎干细胞（ES 细胞）是未分化的，具有全能性。成纤维
细胞的全能性受限，A 错误；
B、动物细胞培养通常需要95%空气（含约20%O₂）和5%CO₂（维持培养液pH），而非95%O₂，B 错误；
C、iPS 技术使用原癌基因（如c-Myc），可能增加肿瘤风险；若使用自体细胞可避免免疫排斥，但题干未
明确是否自体，且“降低肿瘤风险”表述错误，C 错误；
D、逆转录病毒作为载体，依赖其感染性将基因导入宿主细胞，并通过整合性使基因插入宿主基因组，D
正确。
故选D。
3．五只生物节律紊乱体细胞克隆猴登上《国家科学评论》期刊封面，标志着中国体细胞克隆技术走向成
熟。培育生物节律紊乱克隆猴的操作过程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．可用乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
B．为了获得更多的重组胚胎，需对囊胚期胚胎的滋养层进行均等分割
C．体外培养皮肤细胞过程中为了避免杂菌污染，通常需要定期更换培养液
D．为避免受体母猴对植入的胚胎产生免疫排斥反应，应注射免疫抑制剂
【答案】A
【详解】A、可用物理或化学方法激活重构胚，如用乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细
胞分裂和发育进程，A 正确；
B、为了获得更多的重组胚胎，需对囊胚期胚胎的内细胞团进行均等分割，均等分割可以降低对胚胎发育
的影响，而滋养层细胞将来会发育成胎盘和胎膜，B 错误；
C、体外培养皮肤细胞过程中为了避免杂菌污染，通常需要加入适量的抗生素，定期更换培养基是为了保
证细胞增殖对营养的需求，同时可以避免代谢废物对细胞增殖的影响，C 错误；
D、受体母猴子宫基本不会对植入的胚胎产生免疫排斥反应，这是胚胎移植的理论基础，D 错误。
故选A。
4．动物细胞工程最基本技术为动物细胞培养，人造皮肤的构建，动物分泌蛋白规模化生产都离不开该技
术，下列分析正确的是（ ）
A．为了防止培养过程中杂菌的污染，除对培养液严格灭菌外可向其中加入适量的干扰素
B．动物细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2以刺激细胞呼吸
C．培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
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D．悬浮培养的细胞会因为细胞密度过大或有害代谢物积累和营养缺乏而分裂受阻
【答案】D
【详解】A、干扰素用于抗病毒而非抑制细菌生长，动物细胞培养液通常添加抗生素来防止杂菌污染，A
错误；
B、动物细胞培养通常需要95%的空气和 5%的CO2，其中5%CO2 的作用是维持培养液的pH，B 错误；
C、胰蛋白酶用于贴壁细胞传代培养的消化分瓶，仅在细胞贴壁生长至接触抑制时才需处理，（悬浮生长
的细胞不需要用胰蛋白酶处理），C 错误；
D、悬浮培养的细胞分裂受阻的主要原因是细胞密度过大导致营养耗竭、代谢废物积累，因此需要定期更
换培养液、清除有害的代谢废物，D 正确。
故选D。
5．通过动物细胞工程技术，可以利用患者自身的细胞在体外诱导发育成特定的组织器官，然后再移植回
患者体内。图1 和图2 表示利用自身细胞进行器官移植的两种方法，其中诱导多能干细胞（iPS 细胞）类似
于人类的胚胎干细胞。下列叙述正确的是（ ）
A．两方法都需要动物细胞培养技术，需将细胞置于含有95%O2和5%CO2混合气体的CO2培养箱中
B．利用两种方法所获得的组织器官的遗传物质均与患者的完全相同，移植后不会发生免疫排斥反应
C．可利用农杆菌转化法或显微注射法将图1 中4 种基因导入成纤维细胞
D．图2 中去核去除的是纺锤体—染色体复合物，核移植时可将整个供体细胞注入去核的卵母细胞中
【答案】D
【详解】A、动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础，两种方法都需要运用动物细胞培养技术，
需要将细胞置于含有 95%空气和5%CO2 的混合气体的CO2 培养箱中，A 错误；
B、图1 所示方法导入了 Oct3/4 基因、Sox 基因、c-Myc 基因和Klf 基因，图2 中提供细胞质遗传物质的
卵母细胞的来源未知，因此两种方法所获得的组织器官的遗传物质均可能和患者的不完全相同，B 错误；
C、将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法，农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞常用的
方法，C 错误；
D、核移植的过程中，卵母细胞去核实际去除的是纺锤体—染色体复合物，核移植时供体细胞不用去核，
可将整个供体细胞注入去核的卵母细胞中，D 正确。
故选D。
题型二 动物细胞融合与单克隆抗体制备
6．饲养细胞是指一些在体外培养中不分裂，但仍然保持代谢活性的细胞。在体外进行特定的动物细胞培
养前，会先在培养基铺上一层饲养细胞，这些细胞能够分泌生长因子和其他必要的营养物质，支持目的细
胞的生长。一旦培养基中目的细胞达到一定数量，饲养细胞便会逐渐死亡。下列说法正确的是（ ）
A．动物细胞培养基中除了合成成分，还需要加入动物血液等天然成分
B．动物细胞培养过程中加入的CO2是为了抑制呼吸作用，减少有机物消耗
C．饲养细胞可能经过了分裂抑制剂的处理
D．传代培养时，需要去除饲养细胞，否则将干扰目的细胞分离
【答案】C
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【详解】A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需
要添加血清（血浆）等天然成分，A 错误；
B、动物细胞培养中加入CO₂ 的主要作用是维持培养液的pH 稳定，B 错误；
C、饲养细胞不分裂但保持代谢活性，可能通过射线照射或分裂抑制剂（如DNA 复制抑制剂）处理实现，
C 正确；
D、题干指出饲养细胞在目的细胞达到一定数量后会逐渐死亡，传代时无需额外去除，D 错误。
故选C。
7．由于人类的捕杀、栖息地被破坏，哺乳动物甲濒临灭绝，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量
多）进行了如图所示的研究，下列相关叙述错误的是（ ）
A．克隆动物的组织细胞的核基因组来源于动物甲
B．进行体外受精时，需在精子获能后，使其与发育到MⅡ期的卵母细胞受精
C．囊胚③的内细胞团和滋养层细胞遗传物质相同，发育潜力相同
D．进行胚胎移植前，需要对代孕母体进行同期发情处理
【答案】C
【详解】A、结合图示可知，克隆动物的核基因组来源于甲，细胞质中的基因来源于乙，A 正确；
B、体外受精需用获能的精子与MⅡ期的卵母细胞受精，因为此时的精子和卵母细胞具有受精能力，B 正
确；
C、囊胚③的内细胞团和滋养层细胞遗传物质不同，发育潜力也不同，内细胞团将来可以发育成完整的胚
胎，而滋养层细胞将来可以发育成胎盘和胎膜，C 错误；
D、进行胚胎移植前，需要对代孕母体进行同期发情处理，这样可以使受体子宫给移入的胚胎创造相同的
生理环境，有利于胚胎的存活，D 正确。
故选C。
8．科学家利用核移植技术克隆出了多种动物。下列关于动物核移植技术的叙述，正确的是（ ）
A．核移植过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核
B．胚胎细胞核移植比体细胞核移植难度大
C．核移植时，提供细胞核和去核卵细胞的动物都应为雌性
D．通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质全部来自供体细胞核
【答案】A
【详解】A、核移植时需使用显微操作技术去除卵母细胞的细胞核，这里的细胞核是染色体和纺锤体的复
合物，A 正确；
B、胚胎细胞分化程度低，核移植成功率高于体细胞，故体细胞核移植难度更大，B 错误；
C、核移植时，供核动物性别不限，但卵母细胞必须来自雌性，C 错误；
D、克隆动物的核DNA 来自供体细胞核，但细胞质DNA 主要来自受体卵母细胞，D 错误。
故选A。
9．2023 年9 月，我国科学家成功在某哺乳动物X 体内培养出人源肾脏，这是人类第一次在其他物种体内
培养出人源器官。该过程中利用了胚胎补偿技术，即将人源的iPS 细胞注入特定器官发育缺陷的宿主囊胚
中，使其补偿发育出所需器官。经检测，这些肾脏中人源细胞比例最高可达70%。下列叙述正确的是（
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）
A．缺乏基因P 和M，则动物X 的各种器官均难以发育
B．对动物X 的卵母细胞去核是指去除减数分裂Ⅰ中期卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物
C．人源的iPS 细胞应注入特定器官发育缺陷的宿主囊胚，其注人位置应该是囊胚的滋养层
D．利用胚胎补偿技术制备的器官进行移植后需要给患者使用免疫抑制剂
【答案】D
【详解】A、 P、M 基因缺失主要导致所需器官（肾脏）无法正常发育，其它器官仍能正常发育，A 错误；
B、对动物X 的卵母细胞去核是指去除减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物，B 错误；
C、人源的iPS 细胞应注入囊胚的内细胞团中，滋养层发育成的是胎盘和胎膜，C 错误；
D、该技术在猪胚胎中发育生成人源化肾脏，肾脏中人源细胞比例最高可达70%，利用胚胎补偿技术制备
的器官进行移植仍存在免疫排斥问题，所以需要给患者使用免疫抑制剂，D 正确。
故选D。
10．将人的正常胃壁细胞反复注入小鼠体内，提取、纯化小鼠血浆中的抗体。将抗体与人的胃癌细胞表面
的抗原结合，再将胃癌细胞连同结合的抗体注入其他小鼠体内，分离小鼠的脾细胞用于制备单克隆抗体。
则该单克隆抗体可用于（ ）
A．识别胃癌细胞表面的特异性抗原
B．识别胃癌细胞内部的特异性抗原
C．识别正常胃细胞表面的特异性抗原
D．识别正常胃细胞内部的特异性抗原
【答案】A
【详解】A、制备的单克隆抗体是针对胃癌细胞表面与正常胃壁细胞共有的抗原，但题目中通过多次免疫
和筛选，最终抗体特异性结合胃癌细胞表面的抗原，因此可用于识别胃癌细胞表面的特异性抗原，A 正确；
B、抗体无法直接识别细胞内部的抗原，且题目未涉及内部抗原的暴露，B 错误；
C、虽然正常胃细胞表面可能表达相同抗原，但单克隆抗体应该针对的是胃癌细胞，而非正常细胞，C 错
误；
D、抗体无法穿透细胞膜识别内部抗原，且题目未提及正常细胞内部抗原，D 错误。
故选A。
题型三 干细胞培养技术
11．免疫荧光技术是利用抗原和抗体特异性结合与荧光标记技术相结合来研究特异性蛋白抗原在细胞内分
布的方法。将不影响抗体（或抗原）活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，其与相应抗原（或抗体）
结合后，在荧光显微镜下可观察到一种特异性荧光反应。下列叙述错误的是（ ）
A．该技术可用于观察特定蛋白质的分布和动态变化
B．该技术中涉及的抗体可由单克隆抗体技术制备获得
C．该技术中抗体的作用与ADC 药物中抗体的作用一致
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D．该技术快速、灵敏，但分辨能力有限，特异性不强
【答案】D
【详解】A、免疫荧光技术通过荧光标记的抗体与抗原结合，可定位特定蛋白质的分布，并追踪其动态变
化，A 正确；
B、单克隆抗体技术能制备大量高特异性抗体，适用于该技术，B 正确；
C、无论是ADC 药物中的抗体，还是免疫荧光中的抗体，主要具有识别并特异性结合抗原，两者作用一致，
C 正确；
D、免疫荧光技术快速、灵敏、特异性强，缺点是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性
不足，技术程序也还比较复杂，分辨率有限，D 错误。
故选D。
12．科研人员通过动物细胞融合技术，将杂交瘤细胞 A 和 B 再次融合形成双杂交瘤细胞 AB。该双杂交
瘤细胞可产生识别两种抗原的双特异性抗体。据图分析，下列叙述正确的是（ ）
A．制备杂交瘤细胞 A 需经过两次筛选，第一次筛选后，两两融合的细胞均可增殖
B．获得的双杂交瘤细胞需α、β 抗原刺激后才能产生双特异性抗体
C．双杂交瘤细胞在进行传代培养前通常需使用胰蛋白酶使之分散
D．若双特异性抗体用于肿瘤治疗，则α、β 抗原中至少一种为癌细胞表面抗原
【答案】D
【详解】A、制备杂交瘤细胞A 需经过两次筛选，第一次筛选是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次
筛选是用抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，第一次筛选后，B-B 融合细胞不能增殖，A 错误；
B、杂交瘤细胞可以在体外培养条件下无限增殖并产生抗体，不需要α、β 抗原刺激，B 错误；
C、双杂交瘤细胞在进行传代培养前通常需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使之分散，而不是蛋白酶，C 错误；
D、若双特异性抗体用于肿瘤治疗，则α、β 抗原中至少一种为癌细胞表面抗原，这样抗体才能特异性地识
别并结合癌细胞，从而发挥治疗作用，D 正确。
故选D。
13．研究发现，通过蛋白质工程构建的三特异性抗体可实现对小鼠多发性骨髓瘤细胞（MM）的选择性杀
伤。作用机理如图所示。下列叙述不正确的是（ ）
A．三特异性抗体是由三种抗体融合得到
B．正常小鼠的组织细胞中不会大量表达CD38
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C．三特异性抗体通过T 细胞的活化并释放细胞因子提高对MM 的杀伤力
D．三特异性抗体与CD28 结合抑制T 细胞的死亡，从而使T 细胞维持一定数量
【答案】A
【详解】A、三特异性抗体指的是一种抗体，通过蛋白质工程构建三特异性抗体的基因表达载体，然后获
得相应的杂交瘤细胞，最终获得三特异性抗体，不是三种抗体融合而成，A 错误；
B、小鼠多发性骨髓瘤（MM）细胞是癌细胞，其基因发生突变后会合成CD38，CD38 主要在多发性骨髓
瘤（MM）中表达，在正常细胞中不表达或少量表达，B 正确；
C、从图中看出，三特异性抗体结合T 淋巴细胞表面受体TCR，能促进T 细胞活化产生并释放细胞因子，
提高机体对MM 细胞的杀伤力，C 正确；
D、从图中看出，一方面三特异性抗体与T 细胞膜上的CD28 结合，抑制T 细胞死亡，另一方面特异性抗
体与T 细胞膜上的TCR 结合，促进T 细胞活化，所以三抗与TCR 和CD28 结合可保持较高的T 细胞数量
和活性，D 正确。
故选A。
14．在单克隆抗体技术基础上，科研人员尝试制备“双功能抗体”，这类抗体可同时结合两种不同抗原表
位，在疾病诊断与治疗中有潜在应用价值。其制备流程为：先获得能分泌识别抗原X 抗体的单克隆细胞株
A（染色体数70-80 条）、能分泌识别抗原Y 抗体的单克隆细胞株B，再通过细胞融合技术得到融合细胞，
经多次检测筛选，获得少量可产双功能抗体的目标融合细胞。下列推断合理的是（ ）
A．细胞株A、B 可通过将相应B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、筛选获得
B．诱导细胞株A 与B 融合时，常用PEG 融合法，也可尝试电融合、灭活病毒诱导等
C．融合细胞需经多次检测筛选，是因为仅少数融合细胞能同时保留分泌两种抗体的相关基因并正常
表达
D．目标融合细胞染色体数约为140-160 条，且能稳定分泌双功能抗体，说明融合后细胞染色体稳定无
变化
【答案】B
【详解】A、单克隆细胞株A、B 的制备需将抗原刺激后的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再通过两次筛
选（杂交瘤细胞筛选和抗体检测筛选）获得，A 错误；
B、动物细胞融合的常用方法包括 PEG 融合法（化学法）、电融合法（物理法）和灭活病毒诱导法（生
物法），诱导细胞株 A 和 B 融合时上述方法均可采用，B 正确；
C、通过细胞融合技术得到的细胞存在多种类型：未融合的A 细胞、未融合的B 细胞、A-A 融合细胞、B-
B 融合细胞、A-B 融合细胞，仅A-B 融合细胞是目标细胞，需经多次检测筛选才可以得到；筛选同时携带
分泌两种抗体的相关基因并正常表达的融合细胞为下一筛选步骤，C 错误；
D、融合后细胞染色体数可能存在后续分裂中的不稳定现象，D 错误。
故选B。
15．某实验室做了下图所示的实验研究，有关叙述错误的是（ ）
A．图中肝细胞、神经细胞及X 细胞具有相同的基因组成
B．过程①是诱导纤维母细胞中基因选择性表达的结果
C．过程②细胞中DNA 结合RNA 聚合酶的位置不完全相同
D．过程③得到的Z 细胞还需进行克隆化培养和抗体检测及筛选
【答案】A
【详解】A、图中的肝细胞、神经细胞均来自于甲鼠，是由诱导干细胞经过有丝分裂、分化形成的，具有
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相同的基因组成，但X 细胞是瘤细胞，具有无限增殖的能力，虽然也是来自诱导干细胞，但其应该经过了
基因突变引起了无限增殖，因此X 细胞与图中的肝细胞和神经细胞在遗传物质上有差异，A 错误；
B、①过程是通过诱导基因作用使纤维母细胞脱分化为干细胞，该过程的发生是基因选择性表达的结果，B
正确；
C、②过程是干细胞再分化为其他组织器官细胞，是基因选择性表达的结果，由于不同细胞中被选择表达
的基因不同，因此过程②细胞的DNA 中结合RNA 聚合酶的位置不完全相同，C 正确；
D、③过程是细胞融合形成杂交瘤细胞过程，需要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，同时还需要进
行克隆化培养和抗体检测及筛选，D 正确。
故选A。
题型四 动物细胞工程应用
16．单克隆抗体的制备需通过免疫动物、细胞融合及多次筛选，最终获得可稳定分泌特异性抗体的杂交瘤
细胞群。其中，初次筛选需排除未融合的亲本细胞及融合的具有同种核的细胞，二次筛选则通过抗体检测
确定目标细胞。下列叙述错误的是（ ）
A．免疫小鼠血清中的抗体不能直接用于单克隆抗体的规模化生产
B．诱导B 细胞与骨髓瘤细胞融合时，灭活病毒通过表面糖蛋白促进细胞膜融合
C．初筛培养液中至少存在3 种类型的细胞，第二次筛选依赖于抗原—抗体反应
D．最终获得的杂交瘤细胞可在体外培养液或小鼠腹腔内增殖并分泌所需单克隆抗体
【答案】C
【详解】A、免疫小鼠血清中的抗体为多克隆抗体，由多种B 细胞分泌，无法直接用于单克隆抗体的规模
化生产（需单一杂交瘤细胞分泌），A 正确；
B、灭活病毒通过表面糖蛋白介导细胞膜融合，促进B 细胞与骨髓瘤细胞融合，B 正确；
C、初筛使用HAT 培养基，未融合的B 细胞（无法增殖）和骨髓瘤细胞（HGPRT 缺陷型）均死亡，仅杂
交瘤细胞存活，故初筛后培养液中仅含1 种细胞，C 错误；
D、杂交瘤细胞可在体外培养液或小鼠腹腔内增殖并分泌单克隆抗体，D 正确。
故选C。
17．下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（ ）
A．细胞在贴壁生长的过程中会出现接触抑制现象，但不影响细胞分裂
B．CO2培养箱中含有95%O2和5%CO2，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸
C．胚胎干细胞具有全能性，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血中
D．iPS 细胞有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期
【答案】D
【详解】A、接触抑制现象指细胞在贴壁生长至相互接触时停止分裂，此时细胞分裂会停止，A 错误；
B、CO2 培养箱中CO2 的主要作用是维持培养液pH，而非刺激细胞呼吸（细胞呼吸依赖O2），且实际
95%的空气，B 错误；
C、胚胎干细胞主要存在于早期胚胎（如囊胚内细胞团），而骨髓和脐带血中的是造血干细胞（成体干细
胞），C 错误；
D、iPS 细胞可分裂，具有细胞周期；神经细胞高度分化后失去分裂能力，无细胞周期，D 正确。
故选D。
18．随着再生医学的发展，科学家尝试利用细胞工程技术培育人造器官用于器官移植。下图是人造肝脏培
育的部分过程，相关叙述错误的是（ ）
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A．从患者肝脏组织中获取肝脏干细胞时，需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块，使细胞分散
B．培养肝脏干细胞时，加入的细胞因子和生长因子只能促进细胞的增殖，不能诱导细胞分化
C．培养肝脏干细胞的培养液中需添加血清等天然成分，主要为细胞提供一些未知的营养成分
D．该技术为解决器官移植供体短缺问题提供了新的途径和希望
【答案】B
【详解】A、获取动物细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块使其分散成单个细胞，A 正确；
B、不同的细胞因子和生长因子既能促进细胞增殖，也能诱导细胞分化，B 错误；
C、由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此培养基中添加血清主要为细胞提供一些未知
的营养成分和生长因子等，C 正确；
D、该技术可培育人造器官，为解决器官移植供体短缺问题提供了新的途径和希望，D 正确。
故选B。
19．图示科研人员利用多能干细胞（iPS 细胞）培养多种细胞的相关流程。下列叙述正确的是（ ）
A．重编辑过程提高了体细胞的分化程度和分裂能力
B．过程①中需5%CO2促进iPS 细胞的呼吸
C．过程②中需导入不同的基因诱导分化形成不同的组织
D．使用iPS 细胞治疗可避免移植器官不足和伦理等问题
【答案】D
【详解】A、重编辑过程是将分化体细胞重编程为iPS 细胞，iPS 细胞具有多能性，该过程降低了体细胞的
分化程度，使其具有更强的分裂和分化能力，而不是提高了体细胞的分化程度，A 错误；
B、过程①培养iPS 细胞时，5%CO2 的作用是维持培养液的pH，而不是促进iPS 细胞的呼吸，B 错误；
C、过程②是iPS 细胞分化形成不同的体细胞，由于不同组织细胞的形成是基因选择性表达的结果，所以
需导入不同的诱导分化因子诱导iPS 细胞分化形成不同的组织，C 错误；
D、iPS 细胞可以分化形成各种组织和器官，使用iPS 细胞治疗可避免移植器官不足和伦理等问题，D 正确。
故选D。
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20．下列有关细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．细胞工程应用的是细胞生物学、分子生物学和发育生物学等学科的原理和方法
B．可以通过在分子水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质
C．根据操作对象的不同，可以分为植物细胞工程和动物细胞工程
D．细胞工程可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
【答案】B
【详解】A、细胞工程以细胞生物学、分子生物学为基础，可能涉及发育生物学（如胚胎工程）等学科的
原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内遗传物质或获得细胞产
品的一门综合科学技术，A 正确；
B、“分子水平操作改变遗传物质”属于基因工程的特点，而细胞工程主要在细胞或细胞器水平操作，B
错误；
C、根据操作对象的不同，细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程，如植物组织培养和动物细胞融合，
C 正确；
D、细胞工程（如植物体细胞杂交）可克服生殖隔离，实现远缘杂交，D 正确。
故选B。
21．我国在胚胎移植领域的成果已处于国际前沿，尤其在异种器官移植和高效繁育技术上。2025 年3 月，
基因编辑猪肾脏成功移植到终末期肾病患者体内（技术流程见下图），术后血肌酐恢复正常，成为亚洲首
例活体异种肾移植案例。下列相关叙述错误的是（ ）
①从猪耳提取体细胞→②基因编辑→③构建胚胎→④移植至代孕母猪体内→培育出无病
原体供体
A．步骤①获得的体细胞培养时，为保证细胞正常增殖，往往要加入动物血清
B．步骤②基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原
C．步骤③构建胚胎，需要利用体细胞核移植技术、电融合以及早期胚胎培养
D．为提高步骤④成功率，应对代孕母猪进行同期发情处理，使用免疫抑制剂
【答案】D
【分析】基因工程的操作步骤：(1)目的基因的获取；方法有从基因文库中获取、利用PCR 技术扩增和人
工合成；(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子
和标记基因等；(3)将目的基因导入受体细胞；根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入
植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显
微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的
检测：①检测转基因生物染色体的DNA 是否插入目的基因-DNA 分子杂交技术②检测目的基因是否转录出
了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：
抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、在动物细胞培养过程中，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养时，
通常需要在培养基中加入动物血清等天然成分，以保证细胞的正常增殖。所以步骤①获得的体细胞培养时，
为保证细胞正常增殖，往往要加入动物血清，A 正确；
B、异种器官移植面临的主要问题之一是免疫排斥反应，猪细胞表面存在一些引发人免疫排斥的关键抗原。
基因编辑的目标之一就是对这些关键抗原进行改造或消除，从而降低免疫排斥反应的发生，提高移植的成
功率。所以步骤②基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原，B 正确；
C、构建用于异种器官移植的胚胎，需要利用体细胞核移植技术将供体体细胞的细胞核移植到去核卵细胞
中，形成重组细胞；然后通过电融合等方法激活重组细胞使其分裂发育；最后进行早期胚胎培养，使其发
育到一定阶段。所以步骤③构建胚胎，需要利用体细胞核移植技术、电融合以及早期胚胎培养，C 正确；
D、为提高步骤④代孕的成功率，应对代孕母猪进行同期发情处理，使代孕母猪的子宫生理状态与供体胚
胎相适应，为胚胎植入创造良好的条件。但代孕母猪不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应，D 错误。
故选D。
22．青霉素的发酵生产过程中遇到两个问题，首先发酵过程中总会产生头孢霉素如图1，其次青霉素发酵
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需要大量氧气。为保证发酵过程中青霉素的持续高产，研究人员将透明颤菌（细菌）的血红蛋白引入青霉
菌，设计方案如图2 所示。相关叙述错误的是（ ）
A．菌种选育时，敲除青霉菌中控制酶B 合成的基因可使其只产青霉素
B．①②过程需要用相同的酶去除细胞壁获得原生质体
C．③过程可在略高渗溶液中采用PEG 融合法诱导原生质体融合
D．可利用缺乏甲硫氨酸和精氨酸的基本培养基筛选出融合细胞
【答案】B
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育
成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇
等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。
【详解】A、从图1 可知，前体物质在酶A 作用下生成青霉素，在酶B 作用下生成头孢霉素。 若敲除青霉
菌中控制酶B 合成的基因，那么前体物质就不会在酶B 作用下生成头孢霉素，只会在酶A 作用下生成青霉
素，A 正确；
B、青霉菌是真菌，其细胞壁主要成分是几丁质等；透明颤菌是细菌，其细胞壁主要成分是肽聚糖。 由于
二者细胞壁成分不同，去除细胞壁时所用的酶不一样，不是用相同的酶去除细胞壁获得原生质体，B 错误；
C、③过程是原生质体融合，没有细胞壁， 在略高渗溶液中细胞不会吸水引起涨破。采用PEG 融合法诱
导原生质体融合是常见的技术手段，能够促使不同的原生质体融合，C 正确；
D、甲硫氨酸营养缺陷型青霉菌不能在缺乏甲硫氨酸的培养基上生长，精氨酸营养缺陷型透明颤菌不能在
缺乏精氨酸的培养基上生长。 只有融合细胞含有两者的遗传物质，能在缺乏甲硫氨酸和精氨酸的基本培
养基上生长，所以可利用缺乏甲硫氨酸和精氨酸的基本培养基筛选出融合细胞，D 正确。
故选B。
23．干细胞有自我更新能力及分化潜能，小鼠成纤维细胞可被诱导成为iPS 细胞，而小鼠胚胎干细胞经定
向诱导可获得多种功能细胞用于研究。某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色
小鼠胚胎干细胞（ES 细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES 细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培
育嵌合体小鼠。下列错误的是（ ）
A．荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分
B．iPS 细胞也能由已分化的B 细胞和T 细胞诱导而来，用iPS 细胞分化形成的器官组织治疗疾病理论
上可以避免免疫排斥
C．注入ES 细胞的囊胚移植前需用激素对受体母鼠进行同期发情处理
D．割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA 分析或核型分析即可检测嵌合体子代鼠的性别
【答案】D
【分析】胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无
限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES 细胞都能被诱导分化为机体几乎所有
的细胞类型。
【详解】A、荧光素基因导入到灰色小鼠胚胎，荧光素基因会表达荧光蛋白，将来检测子代小鼠有荧光蛋
白的即为灰色小鼠胚胎发育而来的，据此推测荧光素基因在该实验操作中可起到检测灰色小鼠囊胚发育的
部分，A 正确；
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B、由于iPS 细胞可以来源于患者自身的细胞，因此用这些细胞分化形成的器官组织进行治疗理论上可以
避免免疫排斥反应，B 正确；
C、注入ES 细胞的囊胚移植前需用促性腺激素对受体母鼠进行同期发情处理，C 正确；
D、嵌合体小鼠中既有纯种灰色小鼠胚胎干细胞，也有纯种黄色小鼠细胞，不能只割取黄色小鼠囊胚的滋
养层细胞做DNA 分析即可检测嵌合体子代鼠的性别，D 错误。
故选D。
1．（25-26 高三上·湖南永州·阶段练习）将基因编辑猪肾脏移植到终末期肾病患者体内的技术
流程为：①从猪耳提取体细胞→②基因编辑→③构建胚胎→④移植至代孕母猪体内→培育出无病原体供体。
下列相关叙述错误的是（ ）
A．步骤①获得的体细胞培养时，需置于含有95％空气和5％CO2的混合气体的培养箱中
B．步骤②基因编辑的目标是获得无病原体的细胞
C．步骤③构建胚胎，需要利用体细胞核移植技术及早期胚胎培养
D．步骤④胚胎移植中，受体对供体基本不会发生免疫排斥反应
【答案】B
【详解】A、动物细胞培养通常置于含95%空气（提供氧气）和5%CO2（维持培养液pH）的环境中，A
正确；
B、基因编辑的目标是敲除或修改可能引发免疫排斥的基因，而非直接消除病原体，B 错误；
C、构建胚胎需将基因编辑后的体细胞核移植到去核卵母细胞中，形成重组细胞后经早期胚胎培养，C 正
确；
D、胚胎移植时，受体子宫对供体胚胎的免疫排斥反应较弱，因胚胎与受体间存在免疫耐受，D 正确。
故选B。
2．（2025·湖南·模拟预测）草鱼是我国养殖的经济鱼品种，但其肝病的发生较为常见。科学家
通过肝细胞体外培养的方法展开研究。实验过程中需要添加裂解液、胰岛素、台盼蓝等物质。裂解液中特
定的酶会对红细胞表面的专属抗原进行攻击，引起红细胞的变性。下列说法错误的是（ ）
A．处理4 表示“添加裂解液”，目的是消除肝组织中的红细胞
B．处理1 的方法有机械法、酶解法
C．胰岛素可促进细胞对葡萄糖的吸收，改善细胞的增殖能力
D．在显微镜下可以看到染成蓝色的死细胞
【答案】A
【分析】1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋
白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重
新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养；
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，
当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
【详解】A、裂解液中特定的酶会对红细胞表面的专属抗原进行攻击，引起红细胞的变性。裂解液是为了
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消除肝组织中存在的红细胞，应该在原代培养前加入培养液，A 错误；
B、在进行细胞培养时，首先要对动物组织块进行处理：或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等
处理一段时间，将组织分散成单个细胞。因此，处理1 的方法有：机械法、酶解法，B 正确；
C、胰岛素能促进细胞对葡萄糖的摄取、利用，为细胞增殖提供营养及能量，C 正确；
D、死细胞膜的通透性改变，选择透过性丧失，台盼蓝可以进入细胞，D 正确。
故选A。
3．（以克隆动物的培育为情境）（24-25 高三下·湖南娄底·阶段练习）随着生物技术的发展，商
业化克隆犬、猫逐渐进入人们视野。下图是克隆动物的基本流程，下列关于商业化克隆犬、猫的叙述正确
的是（ ）
A．克隆猫的培育运用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术，其中核移植过程中选用的受体细胞
为MI 期卵母细胞
B．在克隆猫的动物细胞培养过程中，为防止杂菌污染，需在培养液中添加干扰素，同时需定期更换培
养液，以清除代谢产物
C．商业化克隆猫面临着诸多伦理问题，例如克隆猫可能会导致对动物商品化的过度追求，进而忽视动
物本身的权益
D．从遗传物质角度来看，克隆猫与提供细胞核的猫遗传物质完全相同，这是商业化克隆猫能满足客户
对宠物猫特定遗传特征需求的原因
【答案】C
【分析】核移植技术中受体细胞的选择通常为MⅡ期（减数第二次分裂中期）的卵母细胞。MⅡ期卵母细
胞细胞质中含有激活细胞核全能性的物质，且细胞核位置靠近第一极体，便于通过显微操作去核。动物细
胞培养的关键条件是防止杂菌污染，在培养液中添加抗生素，除此之外要定期更换培养液，以清除代谢产
物（如乳酸、氨），避免细胞毒性积累，维持适宜的营养环境。
【详解】A、核移植过程中选用的受体细胞为MⅡ期卵母细胞，而非MⅠ期卵母细胞，MⅡ期卵母细胞才具
备受精能力，A 错误；
B、在动物细胞培养时，为防止杂菌污染，需在培养液中添加抗生素，而非干扰素。干扰素主要用于抗病
毒、调节免疫等，B 错误；
C、商业化克隆猫确实面临诸多伦理问题，把猫商品化过度追求经济利益会忽视动物权益，C 正确；
D、克隆猫与提供细胞核的猫遗传物质并非完全相同，因为细胞质中也含有少量遗传物质来自去核卵母细
胞。并且生物的性状是由遗传物质和环境共同决定的，即使核遗传物质相同，环境不同，性状也不完全一
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样，D 错误。
故选C。
4．（2025·湖南长沙·三模）为了加快优良牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法。请根据
图示信息分析，下列正确的是（ ）
A．试管牛和克隆牛的培育过程中均用到了胚胎移植技术，均属于有性生殖
B．胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
C．获得的优秀公牛的新鲜精液，可直接用于受精作用
D．如图方法Ⅱ，产生F 牛的性别与C 相同，性状也与C 完全一致
【答案】B
【分析】分析题图：图示为加快优良牛繁殖速度的两种方法，方法Ⅰ采用了体外受精、早期胚胎培养和胚
胎移植技术，产生的试管牛E 属于有性生殖的产物；方法II 采用了体细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移
植技术，产生的克隆牛F 属于无性生殖的产物。
【详解】A、试管牛的培育用到的技术有体外受精、细胞培养、胚胎移植，克隆牛的培育用到的技术有核
移植、细胞培养、胚胎移植，均用到了胚胎移植技术，但克隆牛不需要进行生殖细胞的受精过程，属于无
性生殖，A 错误；
B、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下（供体和受体之间）空间位置的置换，B 正确；
C、获得的优秀公牛的新鲜精液，需获能后才能进行受精作用，C 错误；
D、F 牛是核移植后经细胞培养，然后将早期胚胎移入母牛子宫发育而产生的，为无性生殖，F 牛的性别由
其细胞核决定，与良种奶牛C 的性别一致，为雌性，但F 牛一少部分遗传物质来自无核卵细胞中的细胞质，
因此性状也与C 不完全一致，D 错误。
故选B。
5．（2025·湖南岳阳·一模）为拯救濒危野化单峰骆驼，科研人员利用现代生物技术尝试进行人工培育，流
程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
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A．过程①中常用促性腺激素处理以便获得更多的卵母细胞
B．过程②中卵细胞膜和透明带先后发生生理反应阻止多精入卵
C．过程③应选用MⅡ期的卵母细胞，过程④移植的应为原肠胚
D．与F 后代相比，E 大多存在健康问题，表现出遗传和生理缺陷
【答案】A
【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、
胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足
人类的各种需求。
【详解】A、为了获得更多的卵母细胞，可以对B 驯养单峰骆驼用促性腺激素处理进行超数排卵，A 正确；
B、过程②受精作用过程中先后发生透明带反应和卵细胞膜反应，防止多精入卵，B 错误；
C、过程③应选用MII 期的卵母细胞，过程④移植的应为桑葚胚（桑椹胚）或囊胚，C 错误；
D、F 后代是经过核移植获得的，而E 后代正常精卵结合而来，与E 后代相比，F 常表现出发育困难和免疫
失调等生理缺陷，D 错误。
故选A。
6．（2025·湖南永州·三模）为研究供体细胞RNAm6A 修饰（RNA 的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的
影响，研究者比较了猪骨髓间充质干细胞（甲组，属于多能干细胞）和猪胎儿成纤维细胞（乙组，属于高
度分化的细胞）内RNAm6A 修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如下图。下列相关叙述正
确的是（ ）
A．分化程度越高的细胞中RNAm6A 修饰水平越高
B．核供体细胞的分化程度越低，核移植重构胚的发育效率越高
C．抑制重构胚的RNAm6A 修饰水平，可提高早期胚胎的发育效率
D．该研究涉及动物细胞培养、细胞核移植和胚胎移植等操作技术
【答案】B
【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发
育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。
【详解】A、从图中可知，甲组（多能干细胞，分化程度低）的RNAm⁶A 修饰水平高于乙组（高度分化的
细胞）。 这表明分化程度越高的细胞中RNAm⁶A 修饰水平越低，A 错误；
B、观察图中数据，在卵裂期和囊胚期，甲组（分化程度低）作为核供体时重构胚的发育效率均高于乙组
（分化程度高）。 由此可以得出核供体细胞的分化程度越低，核移植重构胚的发育效率越高，B 正确；
C、题干及图中仅展示了不同分化程度细胞的RNAm⁶A 修饰水平以及对应的重构胚发育效率情况，并没有
关于抑制重构胚的RNAm⁶A 修饰水平对早期胚胎发育效率影响的相关信息。 所以无法得出抑制重构胚的
RNAm⁶A 修饰水平可提高早期胚胎发育效率的结论，C 错误；
D、该研究只是比较了不同细胞的RNAm⁶A 修饰水平和作为核供体时重构胚的发育效率，未提及胚胎移植
操作技术。 D 错误。
故选B。
7．（2025·湖南邵阳·三模）在传染病预防过程中，单克隆抗体和疫苗发挥了重要作用。以下关于单克隆抗
体和疫苗的叙述，正确的是（ ）
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A．疫苗都是通过向人体注射灭活或减毒的病原体来刺激机体产生免疫反应的
B．接种疫苗后，人体产生的抗体和记忆细胞可以长期存在，能对所有变异后的病原体起作用
C．单克隆抗体是由单个杂交瘤细胞经克隆形成的细胞群所产生的
D．制备单克隆抗体时，需要将经过免疫的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，融合后得到的细胞都能
产生单克隆抗体
【答案】C
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免
疫的B 淋巴细胞；诱导B 细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛
选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培
养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、传统疫苗是通过注射灭活或减毒病原体刺激免疫反应，但现代疫苗技术还包括重组蛋白疫苗、
病毒载体疫苗、mRNA 疫苗等，这些并非直接使用病原体，A 错误；
B、接种疫苗后，人体产生的记忆细胞可以长期存在，但是抗体具有特异性，不能对所有变异后的病原体
起作用，B 错误；
C、单克隆抗体技术通过融合B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞，形成杂交瘤细胞，经克隆化培养和抗体检测获得
能分泌产生特异性强、灵敏度高的单克隆抗体的杂交瘤细胞群体，C 正确；
D、制备单克隆抗体时，只有杂交瘤细胞能产生单克隆抗体，融合了只有同种核的细胞不能产生单克隆抗
体，D 错误。
故选C。
8．（2025·湖南湘西·三模）科研人员利用杂交瘤技术制备抗新冠病毒单克隆抗体，过程如下：将新冠病毒
S 蛋白免疫小鼠，获取B 淋巴细胞后与骨髓瘤细胞在聚乙二醇或灭活病毒诱导下融合，经HAT 培养基筛选
获得杂交瘤细胞，再通过有限稀释法克隆化培养和抗体检测筛选得到能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。
下列叙述正确的是（ ）
A．HAT 培养基中，未融合的B 淋巴细胞因缺乏增殖能力而死亡
B．细胞融合后需要用特定的选择培养基筛选出能分泌抗体的杂交瘤细胞
C．通过抗原-抗体杂交实验可检测杂交瘤细胞培养上清液中的目标抗体
D．该技术制备的抗体可用于新冠病毒的检测，但用于治疗时需进行人源化改造
【答案】B
【分析】单克隆抗体制备过程中，先将经特定抗原免疫的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；融合后用特定的
选择培养基筛选出杂交瘤细胞，后期还需要进行克隆化培养和抗体检测；杂交瘤细胞进行体内或体外培养，
是为了获得单克隆抗体。
【详解】A、HAT 培养基中，未融合的B 淋巴细胞因缺乏无限增殖能力而死亡，A 错误；
B、细胞融合后用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，后期还需要进行克隆化培养和抗体检测，进而筛
选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B 正确；
C、通过抗原-抗体杂交的原理，可从克隆化培养的细胞群中筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C 错误；
D、该技术制备的抗体可用于新冠病毒的检测，但用于治疗的单克隆抗体在制备前需要通过基因工程实现
人源化改造，D 错误。
故选B。
9．（2025·湖南·模拟预测）角膜缘干细胞是位于角膜缘基底层的一类具有自我复制能力和多向分化潜能的
细胞，是维持角膜上皮组织稳定和修复的重要细胞来源。角膜缘干细胞的功能对于维持正常的眼表功能具
有重要的作用，角膜缘干细胞缺乏（LSCD）将影响角膜上皮细胞的正常生理功能，甚至引发角膜盲，影
响视力。下列叙述正确的是（ ）
A．角膜上皮细胞的自然更新靠角膜上皮细胞的分裂和凋亡共同维持
B．角膜缘干细胞属于成体干细胞，具有组织特异性
C．分化形成的角膜上皮细胞的细胞核不再具有全能性
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D．角膜缘干细胞分化成角膜上皮细胞的过程中遗传物质发生了改变
【答案】B
【分析】细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发
生稳定性差异的过程。细胞分化的实质：基因的选择性表达。
【详解】A、角膜上皮细胞的自我更新能力来源于角膜缘干细胞。角膜上皮受损后，可以通过角膜缘干细
胞的增殖、分化、迁移而完全修复，角膜上皮组织的自然更新靠细胞的分裂和分化共同维持，A 错误；
B、角膜缘干细胞属于成体干细胞，具有组织特异性，它们具有自我更新和分化的能力，负责维持角膜上
皮细胞的稳态和修复，B 正确；
C、已分化的角膜上皮细胞的细胞核中含有全套的遗传物质，因而具有全能性，C 错误；
D、角膜缘干细胞分化成角膜上皮细胞的过程中，遗传物质（DNA）没有发生改变，只是发生了基因的选
择性表达，D 错误。
故选B。
10．（25-26 高三上·湖南衡阳·开学考试）自杀基因系统是指将外源基因导入受体细胞后会表达相应的酶，
该酶可催化无毒的药物前体转化为有毒物质，从而导致受体细胞死亡。为探究外源基因TK 与药物更昔洛
韦能否组成自杀基因系统，研究人员以肝癌细胞为受体细胞进行实验，结果如图所示。下列说法正确的是
（ ）
A．培养肝癌细胞的过程中不需要定期更换培养液
B．肝癌细胞在细胞培养过程中会发生接触抑制
C．对照组和实验组应分别为导入TK 和未导入TK 的肝癌细胞
D．实验结果表明外源基因TK 与更昔洛韦可组成自杀基因系统
【答案】D
【详解】A、培养肝癌细胞的过程中需定期更换培养液，以补充细胞生长所需的营养物质，清除细胞代谢
物等，A 错误；
B、肝癌细胞具有无限增殖的特点，在培养过程中不会发生接触抑制，B 错误；
C、为探究外源基因TK 与药物更昔洛韦能否组成自杀基因系统，自变量为肝癌细胞是否导入TK 基因，对
照组应为未导入TK 的肝癌细胞，实验组应为导入TK 的肝癌细胞，C 错误；
D、从图中可以看出，添加更昔洛韦后，实验组细胞数量明显少于对照组，说明外源基因TK 与更昔洛韦
可组成自杀基因系统，D 正确。
故选D。
10．（以用缺陷型小鼠成纤维细胞获得iPS 细胞为情境）（2025·湖南长沙·三模）科研人员将
Sox2、Oct4、Lin-8 和Klf4 基因通过逆转录病毒转入遗传物质缺陷型小鼠成纤维细胞中，获得iPS 细胞，进
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一步获得克隆鼠，相关流程如图。下列叙述错误的是（ ）
A．由于iPS 细胞具有活跃的分裂能力，用它进行治疗时可能存在安全风险
B．为排除iPS 细胞由培养基诱导产生，需以小鼠成纤维细胞直接培养作为对照
C．实验中需用显微注射法将载体逆转录病毒导入成纤维细胞
D．X 鼠的遗传物质来自黑鼠和灰鼠，其体色为黑色
【答案】C
【分析】科学家通过体外诱导小鼠成纤细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为多能干细胞
（简称iPS 细胞）。
【详解】A、由于iPS 细胞具有活跃的分裂能力，若不受控制可能转化为癌细胞，所以用它进行治疗时可
能存在安全风险，A 正确；
B、对照组可以排除干扰因素，为排除iPS 细胞由培养基诱导产生，需以小鼠成纤维细胞直接培养作为对
照，B 正确；
C、若用病毒作为基因的载体，则不需要进行显微注射导入受体细胞，C 错误；
D、X 鼠的遗传物质来自黑鼠和灰鼠，图中克隆动物的体色与提供成纤维细胞的黑鼠体色相同，为黑色，D
正确。
故选C。
1．（2025·黑吉辽蒙卷·高考真题）研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且
仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是（ ）
A．体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚
B．移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态
C．胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化
D．为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植
【答案】C
【分析】动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞
核移植。胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物
体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。
通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。
【详解】A、由于M Ⅱ期卵母细胞的细胞更大，便于进行技术操作，细胞质中含有激发细胞核全能性的物
质，因此体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A 正确；
B、移植前胚胎发育率低，细胞核来自于已分化的体细胞，全能性容易受到影响，因此可能是植入的体细
胞核不能完全恢复分化前的功能状态，B 正确；
C、根据题干，早期胚胎大多都不能发育至囊胚期，必然不是孵化的原因，着床在孵化之后发生，孵化是
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胚胎从透明带中伸展出来（不是滋养层），C 错误；
D、胚胎细胞核全能性高于体细胞，因此为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D
正确。
故选C。
2．（2025·河北·高考真题）生物工程在社会生产中的应用日益广泛，下列相关技术和方法错误的是（ ）
A．利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和优良性状的保持
B．在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞培养
C．利用灭活病毒诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
D．对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵用于胚胎制备
【答案】B
【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的
培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【详解】A、植物组织培养技术可以快速繁殖植物，并且由于是无性繁殖，能保持母本的优良性状，兰花
可以利用组织培养技术实现快速繁殖和优良性状的保持，A 正确；
B、胚胎干细胞培养时，需要一定浓度的CO2，CO2 的作用是维持培养液的pH，所以不能在没有CO2 的
环境中进行胚胎干细胞培养，B 错误；
C、诱导动物细胞融合的方法有物理法（如电激）、化学法（如聚乙二醇）和生物法（如灭活病毒），可
以利用灭活病毒诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，C 正确；
D、在胚胎工程中，对供体母牛注射促性腺激素，能使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞用于胚胎制
备，D 正确。
故选B。
3．（2025·安徽·高考真题）细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物
细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞
B．将特定基因或特定蛋白导入已分化的T 细胞，可将其诱导形成iPS 细胞
C．将B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞
D．采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化
【答案】B
【分析】动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗
体等，其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。
【详解】A、胰蛋白酶处理后直接培养的细胞为原代细胞，A 错误；
B、将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如Oct4、Sox2、Klf4 和c-Myc）导入已分化的T 细胞，可将
其诱导形成iPS 细胞，B 正确；
C、融合细胞有具有同种核的融合细胞和杂交瘤细胞，需筛选才能获得分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C 错
误；
D、囊胚细胞已开始分化，D 错误。
故选B。
4．（2025·山东·高考真题）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是
（ ）
A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞
B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行
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C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液
D．可用PCR 技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛
【答案】B
【分析】动物细胞培养的条件（1）营养条件。（2）无菌、无毒的环境：培养液和培养用具灭菌处理、无
菌环境下操作、定期更换培养液。（3）适宜的温度、pH 和渗透压。（4）气体环境：95%空气和
5%CO2。
【详解】A、对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，以便后续进行核移
植操作，A 正确；
B、卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B 错误；
C、在培养动物体细胞时，需要定期更换培养液，防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害，C 正确；
D、PCR 技术可以扩增特定的DNA 片段，通过检测犊牛丁细胞中是否含有转基因的DNA 片段，就可以鉴
定犊牛丁是否为转基因牛，D 正确。
故选B。
5．（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK 扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等
优点。但MDCK 细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛
选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK 细胞——XF06.下列叙述错误
的是（ ）
A．XF06 悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率
B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致
C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA 的污染
【答案】B
【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，
让这些细胞生长和增殖的技术。动物细胞培养需满足基本的营养条件，培养液中需有氨基酸、无机盐、糖
类和维生素等，同时需要适宜的温度、pH 和渗透压，还需在无菌无毒的环境下去培养。无菌：对培养液和
所有的培养用具进行灭菌处理，在无菌的环境下进行操作；无毒：定期更换培养液，以便清除代谢产物。
【详解】A、悬浮培养的XF06 细胞无需贴壁，可在培养液中自由增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产量，
提升生产效率，A 正确；
B、XF06 细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于扩增
病毒，不改变宿主细胞生长方式），B 错误；
C、流感病毒释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病毒（上清液），C 正确；
D、无成瘤性细胞不含癌基因，可避免疫苗中混入致瘤性DNA 片段，确保疫苗安全性，D 正确；
故选B。
6．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏
膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于
等适宜条件下培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
【答案】D
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换
培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入
血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH 为7.2-7.4。（4）气体环境：
95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）
【详解】A、动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A 正确；
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B、置于
等适宜条件下培养，其中5%的CO2 可维持培养液的pH，B 正确；
C、在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C 正确；
D、不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D 错误。
故选D。
7．（2025·云南·高考真题）孕酮具有促进子宫内膜增生，为受精卵着床做准备的作用。某奶牛场发现一头
高产奶量母牛生产两胎后重复配种均未成功妊娠，该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛。为获得该母牛
的后代，下列说法正确的是（ ）
A．运用体外受精或人工授精技术可提高该牛的妊娠率
B．使用外源促性腺激素处理该牛获得更多卵子进而可获得多枚胚胎
C．体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康受体可提高存活率
D．使用该牛MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植可获得可育后代
【答案】C
【分析】体外受精是指将卵子和精子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
【详解】A、该母牛孕酮量低于正常母牛，子宫内膜增生可能不足，不利于受精卵着床，即使运用体外受
精或人工授精技术，也难以提高妊娠率，A 错误；
B、使用外源促性腺激素处理该牛，可促使其超数排卵，获得更多卵子，但孕酮量低于正常母牛，受精卵
不能成功着床，不能获得成活胚胎，B 错误；
C 、该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛，故可通过体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康的
受体内可提高存活率，C 正确；
D 、使用该牛 MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植，由于该牛本身孕酮分泌异常等问题，获得的后代也
可能存在发育等方面的问题，不一定可育，D 错误。
故选C。
8．（2024·吉林·高考真题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点
检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（ ）
A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理
C．直接用离心法收集细胞进行传代培养
D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
【答案】D
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶
处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理
分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和
pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、
检测有毒物质等。
【详解】A、传代培养时培养器皿容许内部气体和培养箱中的气体进行交换，A 错误；
B、选取②的细胞进行传代培养比①更合理，②时细胞增长开始变得缓慢，B 错误；
C、对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后再用离
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心法收集，C 错误；
D、细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大、细胞间产生接触抑制有关，D 正确。
故选D。
9．（2024·浙江·高考真题）某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作
过程如图。
下列叙述错误的是（ ）
A．①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离
B．②加培养液的目的是促进细胞增殖
C．③分装时需调整到合适的细胞密度
D．整个过程需要在无菌、无毒条件下进行
【答案】B
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期
更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需
加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：
95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】A、①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离，A 正确；
B、②加培养液，多次加培养液先洗去残留的消化酶，然后终止消化液的消化作用，并对细胞加以稀释，B
错误；
C、③分装时需调整到合适的细胞密度，因为若密度过大细胞直接仍存在接触抑制，C 正确；
D、动物细胞培养需要无菌无毒环境，因此整个过程需要在无菌、无毒条件下进行，D 正确。
故选B。
10．（2024·湖北·高考真题）糖尿病是危害人类健康的主要疾病之一。恢复功能性胰岛B 细胞总量是治疗
糖尿病的重要策略。我国学者研究发现，向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受体单克隆抗体（mAb），
可以促进胰岛A 细胞增殖，诱导少数胰岛A 细胞向胰岛B 细胞转化，促进功能性胰岛B 细胞再生。根据上
述实验结果，下列叙述错误的是（ ）
A．mAb 的制备可能涉及细胞融合技术
B．注射mAb 可降低胰腺分泌胰高血糖素的量
C．mAb 和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合
D．胰高血糖素主要通过促进肝糖原分解和非糖物质转化为糖，升高血糖水平
【答案】B
【分析】血糖调节是神经调节和体液调节共同作用的结果。胰岛素是唯一降血糖的激素，胰高血糖素和肾
上腺素是升血糖的激素。血糖平衡调节：由胰岛A 细胞分泌胰高血糖素（分布在胰岛外围）提高血糖浓度，
促进血糖来源；由胰岛B 细胞分泌胰岛素（分布在胰岛内）降低血糖浓度，促进血糖去路，减少血糖来源。
【详解】A、单克隆抗体的制备涉及细胞融合技术和动物细胞培养技术，mAb 属于单克隆抗体，其制备可
能涉及细胞融合技术，A 正确；
B、单克隆抗体（mAb），可以促进胰岛A 细胞增殖；而胰岛A 细胞可分泌胰高血糖素，可见注射mAb 可
提高胰岛A 细胞分泌胰高血糖素的量，B 错误；
C、题干信息，mAb 是胰高血糖素受体单克隆抗体，可见Ab 和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性
结合，C 正确；
D、胰高血糖素主要作用于肝，促进肝糖原分解成葡萄糖进入血液，促进非糖物质转变成糖，使血糖浓度
回升到正常水平，D 正确。
故选B。
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