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第40 讲 动物细胞工程
目录
01 课标达标练
【题型一】动物细胞培养技术
【题型二】动物细胞融合技术与单克隆抗体
【题型三】动物体细胞核移植技术和克隆动物
02 能力突破练 (新考法+新情境)
03 高考溯源练 (含2025 高考真题)
题型一 动物细胞培养技术
1．某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述错
误的是（ ）
A．图中所示过程为原代培养
B．①中消化液不可以替换成胃蛋白酶
C．②中培养液需加入血清，有利于促进细胞增殖
D．若细胞不再出现接触抑制，细胞可能发生了癌变
2．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养过程中，动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，分
瓶之后的培养称为传代培养。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ）
A．无论原代培养还是传代培养，大多数细胞是悬浮在培养液中生长增殖的
B．进行分瓶培养的原因之一是贴壁细胞发生接触抑制
C．动物细胞培养液中可添加抗生素防止杂菌生长
D．进行动物细胞培养需将培养液的pH 调至7.2-7.4
3．小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
1
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A．为获得更多的囊胚，可采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B．细胞a 和细胞b 内含有的核基因不同，所以全能性高低不同
C．用胰蛋白酶将细胞a 的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞
D．细胞a 经过诱导也可以分化为胎儿的各种组织和器官
4．科研人员利用猪肺设计人造肺，过程如下：先清除实验猪肺部的全部细胞，再向剩下的胶原蛋白等构
成的“肺支架”中注入人类iPS 细胞，重新形成人造肺。下列有关叙述错误的是（ ）
A．清除实验猪肺部全部细胞，可减弱移植后患者的免疫排斥反应
B．可将特定基因或特定蛋白质导人体细胞中制备iPS 细胞
C．iPS 细胞发育形成人造肺体现了动物细胞具有全能性
D．培养iPS 细胞的CO2培养箱中CO2具有维持pH 的作用
5．2024 至2025 年，科研人员在开发成分明确的无血清培养基方面取得进展，提高了干细胞产品稳定性与
安全性；同时利用重组蛋白和小分子化合物精细调节培养环境，提升了干细胞增殖效率和稳定性；此外，
机器学习在诱导多能干细胞培养中的应用逐渐深入，可预测分化路径、优化诱导条件，AI 驱动的自动化培
养系统上线，有效提升了分化效率。下列叙述错误的是（ ）
A．干细胞移植到患者体内可以分化为任何一种类型的细胞
B．使用无血清培养基的前提是明确细胞生长、增殖所需的生长因子等成分
C．自动化的移液换液可以减少细胞代谢物的积累对细胞自身造成的危害
D．除重组蛋白和小分子化合物外，外源基因也可以诱导多能干细胞
6．利用克隆技术治疗人帕金森模型小鼠的实验流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．①可用显微注射法将体细胞核注入去核卵母细胞
B．②需要定期更换培养液，保证无菌和无毒的环境
C．③过程胚胎干细胞分化为神经元干细胞体现了细胞的全能性
D．④过程运用神经元干细胞还可以治疗阿尔茨海默病
7．细胞核重编程是将已经分化的成体细胞进行诱导，让其重新回到发育早期的多能性干细胞状态，通俗
来讲，就是在细胞层面实现了“返老还童”。早在20 世纪60 年代，Gurdon 等用蝌蚪肠道的成熟特化细胞
的细胞核替换掉青蛙卵母细胞的细胞核，从而使重组细胞发育为性成熟的成体青蛙，过程如图所示。下列
叙述错误的是（ ）
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A．回到发育早期的多能性干细胞状态可重新获得发育成各种类型细胞的能力
B．用紫外线照射破坏卵母细胞中的染色体，其目的是破坏卵母细胞的细胞核
C．对早期胚胎细胞进行培养时，一般需提供营养、酸性环境和95％的氧气
D．图中采用显微注射法将蝌蚪肠上皮细胞的细胞核注入去核的卵母细胞
8．某科研团队利用小鼠的神经元进行细胞培养时，发现神经元生长缓慢，其原因不可能是（ ）
A．血清经过滤灭菌处理后加入培养基
B．培养液或使用的培养用具灭菌不彻底
C．培养基中营养物质的种类和比例不合适
D．培养箱中含有95％的O₂ 和5％CO₂
题型二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
9．某同学列表比较了植物体细胞杂交和动物细胞融合的相关差异,其中错误的是 （ ）
选
项
比较内容
植物体细胞杂交
动物细胞融合
A
培养基区别
液体培养基,含蔗糖和植物激素等
固体培养基,含葡萄糖和动物血清等
B
原理
细胞膜的流动性、细胞的全能性
细胞膜的流动性
C
融合方法
物理、化学方法
物理、化学、生物方法
D
成功标志
得到杂种植株
得到杂交细胞
A．A
B．B
C．C
D．D
10．某科研所为防治SARS，以SARS 病毒核衣壳蛋白为抗原制备出了单克隆抗体。下列叙述错误的是（
）
A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，以获得相应的B 淋巴细胞
B．体外培养单个B 淋巴细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体
C．将B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞
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D．利用该单克隆抗体与SARS 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法能诊断出SARS 病毒感染者
11．下列关于单克隆抗体制备的叙述中，错误的是（ ）
A．用特定抗原免疫小鼠后，可从小鼠脾脏中获取能产生相应抗体的B 淋巴细胞
B．B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，需在特定的选择培养基中筛选杂交瘤细胞
C．杂交瘤细胞经过克隆化培养和抗体检测，可获得产生所需抗体的细胞株
D．最终分离筛选出的每一种杂交瘤细胞都可以产生针对多种病原体的抗体
12．蛇毒种类繁多，制备单克隆抗体可以快速检测伤口毒液种类，为毒蛇咬伤的快速诊断提供可靠工具。
抗蛇毒单克隆抗体的制备不需要涉及的过程是（ ）
A．将蛇毒注入小鼠体内获取相应已免疫的B 淋巴细胞
B．利用CO₂ 培养箱培养，获得大量从小鼠提取的浆细胞
C．用PEG 诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞相互融合
D．对杂交瘤细胞进行抗体检测和克隆化培养
13．下图是制备抗白细胞介素-6(IL-6)单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．步骤①给小鼠注射IL-6 后，应从脾中分离筛选T 淋巴细胞
B．步骤②能分离出大量产生相同抗体的单一淋巴细胞
C．步骤③加入灭活病毒或PEG 诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
14．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗 HCG 单克隆
抗体可用于早孕的诊断。下列叙述正确的是（ ）
A．杂交瘤细胞分泌的抗 HCG 克隆抗体能与 HCG 发生特异性结合
B．用特定选择培养基进行第一次筛选时，融合细胞均能大量增殖
C．杂交瘤细胞体外培养出现接触抑制现象时需先酶解再分瓶培养
D．灭活病毒诱导法是唯一可以诱导骨髓瘤细胞与B 淋巴细胞融合的方法
15．单克隆抗体在病原体鉴定、疾病治疗等方面有广泛的应用。下表中关于制备病原体A 的单克隆抗体的
相关操作及目的或结果，都正确的是（ ）
选项
操作
目的或结果
A
注射灭活的抗原结构均被破坏的病原体A
获得能产生特定抗体的B 淋巴细胞
B
利用PEG 诱导B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
获得的都是既能产生单一抗体，又能大量增
殖的杂交瘤细胞
4
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C
筛选出杂交瘤细胞后，再利用96 孔板培养和筛选
培养和筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
D
将所得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内
使杂交瘤细胞在小鼠体内大量增殖，从而提
高该小鼠抵御病原体A 的能力
A．A
B．B
C．C
D．D
题型三 动物体细胞核移植技术和克隆动物
16．下列研究中，主要运用体细胞核移植技术的是（ ）
A．提供疾病模型动物
B．治疗帕金森综合征
C．生产单克隆抗体
D．培养可供移植的人体皮肤
17．下图为克隆高产奶牛的大致过程。下列相关叙述错误的是（ ）
A．“激活并培养”过程中常用Ca2+载体等方法激活重构胚
B．“移植”前的早期胚胎处于囊胚时期，此时细胞逐渐分化
C．“移植”前需对丙个体进行免疫检查，防止发生免疫排斥现象
D．子代丁的性状与甲相似，二者遗传物质基本相同
18．关于生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（ ）
A．植物体细胞杂交技术，可直接用聚乙二醇处理两种植物细胞进行膜融合
B．单克隆抗体制备技术，两两融合的细胞都能在选择培养基上存活
C．动物体细胞核移植技术，融合细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛
D．体外受精技术，常以在显微镜下观察到雌、雄原核或两个极体作为受精的标志
19．核移植后，从克隆胚胎中分离、培育而成的干细胞称为核移植干细胞（NTESC），NTESC 能被诱导
分化为各种组织细胞，用于疾病的治疗。下图为NTESC 制备的过程及应用，①、②、③代表操作过程。
下列叙述错误的是（ ）
A．①可通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞
B．②过程需激活重构胚，使其完成细胞的分裂和发育进程
C．③过程需分离出内细胞团培育成NTESC，NTESC 类似于胚胎干细胞
D．诱导分化形成的组织细胞移植给小鼠甲和乙均不会引起免疫排斥反应
20．2019 年1 月24 日，我国科学家宣布世界首批疾病克隆猴——5 只生物节律紊乱体细胞克隆猴在中国诞
生，开启了克隆猴模型应用于生命科学研究的“春天”。科学家采集了一 只一岁半的、睡眠紊乱最明显
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的BMAL1（生物节律基因）敲除猴A6 的体细胞，通过体细胞核移植技术，获得了5 只克隆猴——这是国
际上首次成功构建一批遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴模型。下列相关叙述错误的是（ ）
A．体细胞核移植技术的原理是动物细胞（核）的全能性
B．5 只克隆猕猴细胞核基因型与核供体细胞完全一致
C．体细胞核移植需用取自新鲜卵巢的卵母细胞直接做受体细胞
D．该研究可弥补实验猕猴繁殖周期长、单胎数量少的不足
1．牙齿再生术是一种重建修复牙齿结构的医疗手段，常见做法是通过从患者脱落的乳牙中获取具有细胞
贴壁现象的牙髓干细胞，经过体外培养，将形成的成体干细胞聚合体植入患者牙髓腔里，使牙齿神经、血
管再生，从而恢复牙齿原有功能。下列叙述正确的是（ ）
A．恢复牙齿功能的过程中，细胞的数目未改变
B．培养过程中定期更换培养液，可防止杂菌污染
C．牙髓干细胞和胚胎干细胞均能分化为动物体内任何一种类型的细胞
D．在体外培养过程中需用胰蛋白酶处理具有细胞贴壁现象的牙髓干细胞
2．我国科学家成功利用iPS 细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d 为组蛋白去甲基
化酶，TSA 为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列叙述正确的是（ ）
A．小鼠成纤维细胞中部分不表达的基因通过步骤①将重新表达
B．步骤②“去核”就是通过显微操作法将卵母细胞的细胞核去除
C．③过程中诱导细胞两两融合，这体现了细胞膜的选择透过性
D．组蛋白去甲基化和乙酰化不利于重构胚后续的胚胎发育过程
3．研究发现利用人胚胎肾细胞（HEK293）扩增并释放出腺病毒（AdV），可生产基因治疗载体。正常的
HEK293 细胞扩增时是贴壁生长的，扩增速度慢，载体制备效率低。研究人员通过基因改造，获得一种可
悬浮培养的、无致瘤性HEK293 细胞系-SF03。下列叙述错误的是（ ）
A．SF03 在悬浮培养时，仍需提供适宜的温度和pH 等条件
B．细胞贴壁生长特性的改变是由于腺病毒感染所导致
C．可采用离心技术从细胞培养上清液中分离出腺病毒
D．悬浮培养的SF03 进行传代时，无需用胰蛋白酶处理
4．活化的T 细胞表面的程序性死亡受体1 （PD-1）与正常细胞表面程序性死亡配体1 （PD-
L1）一旦结合，T 细胞即可“认清”对方，不触发免疫反应。肿瘤细胞可过量表达PD-L1 进行免疫逃逸。
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肿瘤治疗时将化疗药物与抗PD-L1 单克隆抗体结合，形成抗体-药物偶联物（抗PD-L1-ADC），效果比只
使用抗PD-L1 单克隆抗体更好。下列叙述错误的是（ ）
A．制备抗PD-L1 单克隆抗体时，第二种筛选过程需要用到PD-L1 蛋白
B．体外条件下培养第二种筛选得到的杂交瘤细胞可获取大量所需抗体
C．抗PD-L1-ADC 既可阻断PD-1 与PD-L1 结合，又能杀伤肿瘤细胞
D．若设计制备抗PD-1-ADC 可产生与抗PD-L1-ADC 相同的治疗效果
5．为获得能够特异性识别乳腺癌细胞的单克隆抗体，科研人员优化了单克隆抗体的制备过程，如图所示。
下列说法正确的是（ ）
A．由于基因选择性表达，测试细胞与驱动细胞表面的蛋白质存在差异
B．Y1、Y2、Y3是由同一种浆细胞分泌的抗体，该过程还需T 细胞参与
C．从第二组小鼠中获取的脾细胞还需要通过原代培养以扩大细胞数量
D．该实验也可用于筛选衰老神经细胞区别于正常神经细胞抗原的抗体
6．伤寒沙门氏菌的致病毒素是其细胞壁外的脂多糖（LPS）。研发LPS 疫苗时常用多肽模拟
LPS，两者相似程度越高，多肽与LPS 竞争抗体的能力越强。科研人员用抗LPS 单克隆抗体分别鉴定了多
肽A、B 与LPS 抗原的相似程度，部分实验步骤如图a，结果如图b。下列叙述正确的是（ ）
A．抗LPS 单克隆抗体的制备应从小鼠的血液中获得骨髓瘤细胞
B．与多肽结合的抗体在过程Ⅲ中会被洗脱下来
C．据图分析可知，用多肽B 模拟LPS 的效果较好
D．将筛选出的多肽注射到小鼠体内可激发细胞免疫和体液免疫
7．由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗，多抗的种类数取决于抗原上抗原决定簇的种类数，一种
抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（单抗）。现将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72 注入小鼠体内制备抗
p72 的单抗。下列叙述错误的是（ ）
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A．若用含有多种抗原决定簇的某抗原刺激某个B 淋巴细胞，则该B 淋巴细胞会产生多抗
B．上述制备单抗的过程中，可以用经抗原刺激后的B 淋巴细胞同小鼠的骨髓瘤细胞融合
C．将衣壳蛋白p72 注入小鼠体内，小鼠的血清中可能会出现抗p72 的多抗
D．若衣壳蛋白p72 的部分结构发生改变，仍可以制备抗p72 的单抗
8．线粒体置换技术可用于预防母系线粒体遗传疾病。次级卵母细胞减数分裂Ⅱ中期（MII 期）
形成的纺锤体-染色体复合体（X）可用于该技术以获得正常个体，如图。下列说法正确的是（ ）
A．胚胎的遗传物质来自三个亲本，患者携带的色盲基因仍可能遗传给胎儿
B．重组次级卵母细胞可与获得能量后的精子完成受精作用
C．通过该技术获得的胚胎的DNA 一半来自患者，一半来自供体
D．图示获得子代个体的生殖方式与动物克隆的生殖方式相同
9．非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种具有包膜的双链DNA 病毒，病毒蛋白p30 位于病毒的包膜上，在病毒
进入宿主细胞时期具有重要作用。科研人员设计如下流程制备ASFV 单克隆抗体。下列叙述错误的是（
）
A．该流程利用了动物细胞融合和动物细胞培养技术
B．该单克隆抗体直接应用于人体可能会引起过敏反应
C．①是从免疫小鼠脾脏中提取的多种B 淋巴细胞
D．②和③所进行的两次筛选过程都不需要用到ASFV
10．由于胚胎发育率低，导致非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难。我国科学家经过反复
实验，成功培育出了体细胞克隆猴，流程如图（图中Kdm4d 组蛋白去甲基化酶，TSA 是组蛋白脱乙酰酶
抑制剂）。下列叙述错误的是（ ）
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A．去核操作其实是去除卵母细胞中的染色体-纺锤体复合物
B．体细胞克隆猴的线粒体DNA 完全来自提供卵母细胞的母猴
C．用灭活的仙台病毒处理可使细胞膜上的蛋白质分子和磷脂分子重新排布
D．重构胚中组蛋白的甲基化水平降低、乙酰化水平提高可能会提高胚胎发育率
1．（2025·江西·高考真题）诱导多能干细胞(ips 细胞)在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利用多
种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得ips 细胞。下列叙述错误的是（ ）
A．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B．小鼠胎儿成纤维细胞形成ips 细胞的过程属于细胞分化
C．利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D．培养小鼠胎儿成纤维细胞和ips 细胞时需提供一定浓度的CO2
2．（2025·广西·高考真题）科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因（GT）的NDV 病毒靶向感染人体内癌
细胞，从而强烈激活免疫系统，起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是（ ）
A．培养体外实验使用的癌细胞时，通常需添加血清
B．感染NDV-GT 的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬
C．经NDV-GT 方法治愈的患者，体内不存在能识别GT 蛋白的免疫细胞
D．人体正常细胞若被感染并表达了GT，不会被免疫系统识别为“非己”成分
3．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏
膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于
等适宜条件下培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
4．（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK 扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等
优点。但MDCK 细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛
选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK 细胞——XF06.下列叙述错误
的是（ ）
A．XF06 悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率
B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致
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C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA 的污染
5．（2025·北京·高考真题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，调控pH 的CO2耗尽，培养基转
为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是（ ）
A．必需氨基酸
B．抗生素
C．酸碱指示剂
D．血清
6．（2025·贵州·高考真题）下图为PML 蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（ ）
A．应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间
B．W 细胞是先提取B 淋巴细胞再用PML 蛋白免疫而获得
C．步骤2 的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞
D．应选择孔2 中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体
7．（2025·甘肃·高考真题）肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者
利用细胞工程技术制备了TNF-α 的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α 引发的疾病，制备流程如下图。下列叙
述正确的是（ ）
A．①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞
B．②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞
C．③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞
D．④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测
8．（2024·海南·高考真题）海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进
而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B 淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，
进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（ ）
A．利用的原理均是细胞的全能性
B．使用的培养基均需添加葡萄糖和血清
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C．培养时的温度和pH 均相同
D．产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
9．（2024·重庆·高考真题）自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有
物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过下图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼
类的保护。下列叙述正确的是（ ）
A．诱导后的iPGCs 具有胚胎干细胞的特性
B．移植的iPGCs 最终产生的配子具有相同的遗传信息
C．该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲
D．通过该实验可以获得甲的克隆
10．（2024·全国甲卷·高考真题）某种病原体的蛋白质A 可被吞噬细胞摄入和处理，诱导特异性免疫。回
答下列问题。
(1)病原体感染诱导产生浆细胞的特异性免疫方式属于 。
(2)溶酶体中的蛋白酶可将蛋白质A 的一条肽链水解成多个片段，蛋白酶切断的化学键是 。
(3)不采用荧光素标记蛋白质A，设计实验验证蛋白质A 的片段可出现在吞噬细胞的溶酶体中，简要写出实
验思路和预期结果
。
11
