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第41 讲 动物细胞工程、胚胎工程
目录
01 课标达标练
【题型一】动物细胞培养
【题型二】干细胞的培养及应用
【题型三】单克隆抗体的制备
【题型四】动物体细胞核移植过程和克隆动物
【题型五】胚胎工程的理论
【题型六】胚胎工程及其应用
02 能力突破练 新考法
03 高考溯源练 含2025 真题
题型一 动物细胞培养
1．对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法错误的是（ ）
A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B．动物细胞培养应在含5%CO2的CO2培养箱中进行，CO2的作用维持培养液的pH
C．为了防止动物细胞培养过程中受污染，可向培养液中加入适量的干扰素
D．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分
【答案】C
【详解】A、在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以分解组织细胞间的
蛋白质，得到单个细胞，A 正确；
B、细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，B 正确；
C、为防止动物细胞培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C 错误；
D、使用合成培养基培养动物细胞时，通常要加入血清或血浆等一些天然的成分，以利于动物细胞生长，
D 正确。
故选C。
2．从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如
图。下列叙述正确的是（ ）
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A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理
C．直接用离心法收集细胞进行传代培养
D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
【答案】D
【详解】A、传代培养时培养器皿容许内部气体和培养箱中的气体进行交换，A 错误；
B、选取②的细胞进行传代培养比①更合理，②时细胞增长开始变得缓慢，B 错误；
C、对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后再用
离心法收集，C 错误；
D、细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大、细胞间产生接触抑制有关，D 正确。
故选D。
3．某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。
下列叙述错误的是（ ）
A．①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离
B．②加培养液的目的是促进细胞增殖
C．③分装时需调整到合适的细胞密度
D．整个过程需要在无菌、无毒条件下进行
【答案】B
【详解】A、①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离，A 正确；
B、②加培养液，多次加培养液先洗去残留的消化酶，然后终止消化液的消化作用，并对细胞加以稀释，
B 错误；
C、③分装时需调整到合适的细胞密度，因为若密度过大细胞直接仍存在接触抑制，C 正确；
D、动物细胞培养需要无菌无毒环境，因此整个过程需要在无菌、无毒条件下进行，D 正确。
故选B。
题型二 干细胞的培养及应用
4．2020 年6 月，学术期刊《自然》发表论文称，利用人类多能干细胞培养的皮肤类器官在培养4～5 个月
后，形成了多层皮肤组织，包含毛囊、皮脂腺和神经元回路，是迄今最逼真的人皮肤类器官。下列相
关叙述正确的是（ ）
2
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A．多能干细胞形成多层皮肤组织的过程中，遗传物质通常会发生改变
B．多能干细胞培养形成多层皮肤组织，说明了动物的体细胞具有全能性
C．给烧伤病人移植自身多能干细胞培养成的皮肤类器官可减弱免疫排异反应
D．该项研究结果表明多能干细胞可以分化成为人体内所需的各种组织和器官
【答案】C
【详解】A、多能干细胞形成多层皮肤组织的过程中，遗传物质并未发生改变，只是基因的选择性表达，
A 错误；
B、全能性是指已高度分化的细胞具有发育成为完整个体的潜能，多能干细胞培养形成多层皮肤组织，
未体现出发育成完成个体，不能体现全能性，B 错误；
C、由于多能干细胞培养成的皮肤类器官由自身细胞发育而来，不会出现排异反应，C 正确；
D、研究结果表明，多能干细胞能形成多层皮肤组织，包含毛囊、皮脂腺和神经元回路，但不能说明其
能分化成各种组织和器官，D 错误。
故选C。
5．我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34 成功诱导衍生成胰岛B 细胞。下列相关
叙述错误的是（ ）
A．基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞
B．在小分子TH34 诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因
C．衍生的胰岛B 细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病
D．若衍生的胰岛B 细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡
【答案】B
【详解】A、被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 这个说法是正确的。体细胞可以通过特
定的因子导入和培养条件，基因的调控和表达模式的改变，使得原本专一功能的体细胞去分化成为多
能干细胞，A 正确；
B、小分子药物通常是通过调节现有的生物通路和基因表达来实现其功能，而胰岛素基因在人体所有细
胞中都存在，但只有在胰岛细胞中才会表达，所以多能干细胞在诱导分化的过程中不会突然发生基因
突变获得胰岛素基因，B 错误；
C、胰岛B 细胞在较高的血糖浓度下分泌胰岛素，降低血糖，所以衍生的胰岛B 细胞需在葡萄糖的诱导
下成功表达胰岛素，以确保衍生的胰岛B 细胞能够正常发挥功能，才可用于移植治疗糖尿病，C 正确；
D、凋亡基因的正常表达会导致衍生的胰岛B 细胞发生程序性死亡，也就是发生细胞凋亡，D 正确。
故选B。
6．某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y 染色体去除，获得XO 胚胎干细胞，再经过一系列
处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（ ）
A．营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制
B．获得XO 胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异
C．XO 胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化
D．若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育
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【答案】A
【详解】A、营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞也会发生接触抑制，A 错误；
B、XO 胚胎干细胞中丢失了Y 染色体，因而该细胞的获得过程发生了染色体数目变异，B 正确；
C、XO 胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化，即细胞的功能发生了特化，因而
发生了细胞分化，C 正确；
D、若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法，即获得有功能的卵母细胞，进而用于繁育，实现濒危
物种的保护，D 正确。
故选A。
7．我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞（iPS 细胞），降低了通过导
入原癌基因c-Myc 等基因制备iPS 细胞的潜在成瘤风险。下列叙述正确的是（ ）
A．iPS 细胞的潜在成瘤风险来自于c-Myc 基因抑制了细胞的分裂分化
B．单基因遗传病患者使用iPS 细胞治疗后，体内不再携带致病基因
C．人工制备的iPS 细胞同时具备多向分化潜能和自我更新能力
D．使用非亲缘iPS 细胞能解决干细胞移植中HLA 造成的免疫排斥
【答案】C
【详解】A、原癌基因c-Myc 等基因会促进细胞的分裂，A 错误；
B、单基因遗传病患者使用iPS 细胞治疗后，只是利用了iPS 细胞分化出正常细胞来替代病变细胞，但
体内依旧携带致病基因，B 错误；
C、iPS 细胞为诱导多能干细胞，同时具备多向分化潜能和自我更新能力，C 正确；
D、非亲缘iPS 细胞HLA 不同，使用非亲缘iPS 细胞不能解决干细胞移植中HLA 造成的免疫排斥，D
错误。
故选C。
题型三 单克隆抗体的制备
8．如图所示，将由 2 种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异
性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A．制备单克隆抗体时可采用 PEG 融合法、电融合法和离心法诱导细胞融合
B．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的 2 种抗原
C．同时注射 2 种抗原可刺激 B 细胞分化为产双抗的浆细胞
D．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
【答案】C
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【详解】A、诱导动物细胞融合的方法包括物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）和生
物法（灭活的病毒），A 正确；
B、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2 种抗原结合，B 正确；
C、同时注射2 种抗原可刺激B 细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，一种浆细
胞只能产生一种抗体，C 错误；
D、根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药
物发挥相应的作用，D 正确。
故选C。
9．甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测
PTH，有关制备过程的叙述不正确的是（ ）
A．需要使用动物细胞培养技术
B．需要制备用PTH 免疫的小鼠
C．利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D．筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
【答案】D
【详解】A、单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养，即需要使用动物细胞培养技术，A
正确；
B、该操作的目的是制备单克隆抗体用于快速检测PTH，故应用PTH 刺激小鼠，使其产生相应的B 细
胞，B 正确；
C、抗原与抗体的结合具有特异性，可利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞，C 正确；
D、由于一种B 细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌
多种抗体，D 错误。
故选D。
10．大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错误的是（ ）
A．悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制
B．用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清
C．当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖
D．培养基pH 不会影响单克隆细胞的病毒产量
【答案】D
【详解】A、悬浮培养单克隆细胞，可以保证足够的气体交换，通过振荡或转动装置使细胞始终处于
分散悬浮于培养液内，可有效避免接触抑制，A 正确；
B、由于细胞的生长是比较复杂的过程，血清中含有一些必须的因子，用于培养单克隆细胞的培养基
通常需加血清，B 正确；
C、病毒借助于细胞进行繁殖，利用了活细胞的物质、能量、酶等，当病毒达到一定数量时细胞的生
命活动受到影响，会影响细胞的增殖，C 正确；
D、细胞的正常生命活动需要适宜的pH，培养基pH 会影响细胞代谢，进而影响单克隆细胞的病毒产
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量，D 错误。
故选D。
11．我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临
床上的应用。下列叙述错误的是（ ）
A．该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术
B．该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合
C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤
D．该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测
【答案】D
【详解】A、依据题干信息，戊肝诊断试剂盒属于单克隆抗体的研究成果，单克隆抗体制备过程需要
已免疫的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，所以动物细胞融合技术，A 正确；
B、该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合，B 正确；
C、依据题干信息，该试剂盒以尿液中的抗原为靶标，所以该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成
创伤，C 正确；
D、抗体具有特异性，所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测，不能用于其他类型病毒性肝炎的检
测，D 错误。
故选D。
12．海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物
细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B 淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗
体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（ ）
A．利用的原理均是细胞的全能性
B．使用的培养基均需添加葡萄糖和血清
C．培养时的温度和pH 均相同
D．产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
【答案】D
【详解】A、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，利用的原理是细胞的全能性；制备单克隆抗体
使用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，这两种技术利用的原理分别是细胞的增殖和细胞膜的流动
性，A 错误；
B、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，使用的培养基中添加的是蔗糖，不需添加葡萄糖和血清，
B 错误；
C、由于植物细胞和动物细胞生长所需的适宜温度和pH 存在差异，所以培养时的温度和pH 均不相同，
C 错误；
D、愈伤组织是外植体（离体的植物器官、组织或细胞）经脱分化形成的，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细
胞和产生特定抗体的B 淋巴细胞融合后形成的，因此产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能
力，D 正确。
故选D。
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13．猪繁殖与呼吸综合征是一种严重威胁养猪业发展的传染病，由PRRSV 病毒引起。我国科学家制备出
PRRSV 病毒GP3 蛋白的单克隆抗体可对该病进行诊断和治疗，过程如下图所示。下列叙述正确的是
（ ）
A．用纯化的GP3 蛋白反复注射到小鼠体内，以获得相应的B 淋巴细胞
B．过程①可以用PEG 诱导融合，融合原理是细胞膜具有一定的流动性
C．用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，融合细胞都能正常生长
D．丙和丁只含杂交瘤细胞，第2 次筛选前需对细胞丙进行克隆培养
【答案】ABD
【详解】A、用纯化的GP3 蛋白作为抗原，反复注射到小鼠体内，以获得能产生相应抗体的效应B 细
胞，A 正确；
B、过程①可以用PEG 诱导融合，融合原理是细胞膜具有一定的流动性，B 正确；
C、用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞可以生
长，其他细胞(未融合的和同种融合的细胞)不能生长，C 错误；
D、丙和丁只含杂交瘤细胞，经过两次筛选，第2 次筛选前，需先对细胞丙进行克隆化培养，再通过
专一抗体(阳性)检测的方法筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，D 正确。
故选ABD。
14．抗体—药物偶联物（ADC）通过采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到能特异性识别肿瘤
细胞的单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC 的结构及其发挥作用的机理如图所示，
下列有关说法错误的是（ ）
A．单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
B．用96 孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体
C．ADC 以胞吞的方式进入肿瘤细胞，这体现了细胞膜的功能特点具有一定的流动性
D．ADC 在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡
【答案】C
【详解】A、B 淋巴细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，
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因此利用动物细胞融合技术将B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖，
又能产生特异性抗体，利用该细胞制备单克隆抗体，A 正确；
B、单克隆抗体制备过程中至少经过两次筛选，一次是用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细
胞，杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，即用96 孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，就可
获得既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，B 正确；
C、ADC 以胞吞的方式进入肿瘤细胞，这体现了细胞膜的结构特点具有一定的流动性，C 错误；
D、ADC 通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，溶酶体使其裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀
伤，D 正确。
故选C。
题型四 动物体细胞核移植过程和克隆动物
15．2018 年1 月国际顶尖学术期刊《Cell》杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供
体成功克隆两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列相关叙述错误的是（ ）
A．克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能
B．研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体
C．培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同
D．这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性
【答案】D
【详解】A、克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能，能使人们更好的追踪研
究疾病的发展过程和治疗疾病，A 正确；
B、卵母细胞含有丰富的营养物质，且体积比较大，容易操作；同时卵细胞的细胞质中存在促进核基
因表达的物质，因此研究中需要使用成熟卵母细胞作为移植核的受体，B 正确；
C、克隆的两只猕猴是以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，同一个体的细胞的细胞核的基因组
是相同的，因此培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同，C 正确；
D、因为克隆的两只猕猴是以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体发育而来的，该过程经过了细胞
核移植，只能说明分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，D 错误。
故选D。
16．“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的
非人灵长类动物。如图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A．图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等
8
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B．这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎
C．融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件
D．利用A 猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度更大些
【答案】C
【详解】A、图示过程包括核移植和动物细胞培养等技术，没有干细胞移植技术，A 错误；
B、这两只克隆猕猴是通过核移植、胚胎移植产生的，没有用到受精卵，B 错误；
C、融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件，C 正确；
D、动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困
难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，所以利用A 猴的胚胎干细胞核移植获得
克隆猕猴的难度更小些，D 错误。
故选C。
17．如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列有关叙述正确的是（ ）
A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B．通过电融合法使两细胞融合，形成重构胚
C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D．过程③不能用蛋白酶合成抑制剂激活重构
【答案】B
【详解】A、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由
甲和乙的遗传物质共同决定，A 错误；
B、供体细胞核植入受体卵母细胞后，通常用电融合法、钙离子载体、乙醇等使供体细胞和去核卵母
细胞融合形成重构胚，B 正确；
C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C 错误；
D、用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分
裂和发育的进程，D 错误。
故选B。
18．如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”的培育流程，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理带
来光明前景。下列叙述正确的是（ ）
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A．过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，体现细胞膜的选择透过性
B．过程②在培养基中加入的动物血清含有激发成纤维细胞核全能性表达的物质
C．过程③进行同步发情处理，可降低代孕母猴对“中中”“华华”的免疫排斥反应
D．与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理、研发诊治药物
【答案】D
【详解】A、过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，未体现细胞膜的选择透过性，A 错误；
B、在培养细胞时需在培养基中加入一定量的动物血清的作用是模拟内环境和补充未知的缺少的营养
物质，激发成纤维细胞核的全能性的是卵细胞的细胞质中的物质，B 错误；
C、过程③进行同步发情处理，是为了为胚胎移入受体提供相同的生理环境，C 错误；
D、猴子与人类的亲缘关系比小鼠近，与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理、
研发诊治药物，D 正确。
故选D。
19．下图是利用体细胞核移植克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（ ）
A．后代丁的遗传性状由甲、乙、丙三者的遗传物质共同决定
B．过程①需要提供 95%空气和 5%CO2的混合气体
C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
【答案】B
【详解】A、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由
甲和乙的遗传物质共同决定，A 错误；
B、动物细胞培养中需要提供95%空气(保证细胞的有氧呼吸)和5%CO2(维持培养液的pH)的混合气体，
B 正确；
C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C 错误；
D、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，D 错误。
故选B。
20．我国科学家利用体细胞核移植技术成功克隆了濒临灭绝的某地方牛种。下列叙述错误的是（ ）
A．从该牛种耳上取的体细胞培养室需在合成培养基中加入血清
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B．从牛卵巢中采集的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期
C．代孕母牛为重构胚发育提供空间和营养，不会影响犊牛的遗传物质
D．胚胎移植前需要对供体牛与受体牛进行同期发情处理
【答案】D
【详解】A、由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需
要加入血清等一些天然成分，A 正确；
B、从牛卵巢中采集的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期才具备与精子受精的能力，B 正确；
C、代孕母牛为重构胚发育提供空间和营养，没有为犊牛提供遗传物质，不会影响犊牛的遗传物质，C
正确；
D、体细胞核移植技术中，通常不需要对供体进行同期发处理，D 错误。
故选D。
21．多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体 才能获得后代。下图列举了几项技术成果。
下列叙述正确的是 （ ）
A．经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致
B．①需获得MII 期的去核卵母细胞
C．②能大幅改良动物性状
D．③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良
【答案】D
【详解】A、子代动物的遗传性状与供体基本一致，但与受体无关，A 错误；
B、核移植过程中需要处于MII 中期的去核卵母细胞，而过程1 是培育试管动物，需要培育到适宜时
期（桑葚胚或囊胚等时期）进行胚胎移植，B 错误；
C、过程2 得到的是克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状，C 错误；
D、过程2 克隆技术可得到大量同种个体，为过程3 提供了量产方式；过程3 是转基因技术，转基因
可导入外源优良基因，为过程1、2 提供了改良性状的方式，D 正确。
故选D。
题型五 胚胎工程的理论
22．如图表示蛙的受精卵发育至囊胚过程中，DNA 总量、每个细胞体积、所有细胞体积之和、有机物总量
的变化趋势（横坐标为发育时间）。其中正确的是（ ）
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A．①②
B．①③
C．②④
D．③④
【答案】A
【详解】①受精卵发育至囊胚过程中，由于卵裂（方式是有丝分裂），每个分裂形成的细胞都有一份
DNA，①正确；
②在卵裂过程中，随细胞数目的增加，每个细胞的体积在逐渐变小，②正确；
③在卵裂过程中，随细胞数目的增加，每个细胞的体积在逐渐变小，囊胚的总体积与受精卵的大小相
似，且囊胚中出现了囊胚腔，因此所有细胞体积之和应该略有减小，③错误；
④蛙的胚胎发育所需的营养物质来自受精卵中的卵黄，在卵裂过程中，细胞不断分裂需要消耗大量能
量。能量通过细胞氧化分解有机物提供，在此过程中，胚胎不能从外界摄入有机物，故有机物含量逐
渐减少，④错误。
故选A。
23．下图表示精子入卵后，发生(或引起的)一系列变化形成受精卵的过程，下列叙述正确的是（ ）
A．图中X 指卵细胞膜反应，Y 指卵子的减数分裂Ⅱ
B．经图中Y 过程只形成了雌原核
C．精子入卵主要指整个精子进入卵细胞内
D．观察到两个极体或雌、雄原核标志着受精完成
【答案】A
【详解】AB、受精阶段，精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，形成
阻止多精入卵的第一道屏障，精子入卵后，卵细胞膜也会立即发生生理反应，形成第二道屏障，即图
中X 过程，精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体，形成雌原核，精子入卵后被激
活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体，形成雌原核，故Y 过程既形成了雌原核，又形成了第二极
体，A 正确、B 错误；
C、精子入卵主要指精子头部外膜与卵细胞膜融合，C 错误；
D、在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志，D 错误。
故选A。
24．下列有关早期胚胎发育的叙述，错误的是（ ）
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A．卵裂期每个细胞的核质比逐渐增大，胚胎中DNA 总量逐渐增加
B．孵化是指透明带破裂，桑葚胚从透明带中伸展出来
C．滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定
D．在胚胎移植中，选择桑葚胚或囊胚期的胚胎进行移植较易成功
【答案】B
【详解】A、卵裂期的早期胚胎的总体积并没有增加，但是细胞数目在增加，该过程中每个细胞的核
质比逐渐增大，同时胚胎中DNA 总量逐渐增加，A 正确；
B、孵化是指透明带破裂，囊胚从透明带中伸展出来的过程，B 错误；
C、囊胚分为内细胞团和滋养层，其中滋养层将来发育为胎膜和胎盘，可用于性别鉴定，而内细胞团
将会发育成完整的胚胎，C 正确；
D、在胚胎移植中，选择桑葚胚或囊胚期的胚胎进行移植较易成功，因为此时的胚胎处于游离状态，
同时此时的胚胎全能性较高， D 正确。
故选B。
25．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（ ）
A．通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
B．哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质
C．克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
D．将小鼠桑葚胚分割成2 等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
【答案】C
【详解】A、精子获能是获得受精的能力，不是获得能量，A 错误；
B、哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促
生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分，B 错误；
C、克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，C 正确；
D、胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法，D 错误。
故选C。
26．下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述错误的是（ ）
A．在桑葚胚阶段胚胎的内部开始出现含有液体的腔
B．胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得
C．桑葚胚之前细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化
D．受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加
【答案】A
【详解】A、在桑葚胚阶段，32 个细胞左右的胚胎，胚胎的内部无含有液体的腔，A 错误；
B、胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎或原始性腺中分离获得，B 正确；
C、桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化，C 正确；
D、受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略微缩小，D 正
确。
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故选A。
27．下列有关牛体外受精的叙述错误的是（ ）
A．精子需经过获能步骤，才可用于体外受精
B．卵母细胞需培养至MⅡ期，与精子结合完成受精
C．体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合
D．精子入卵后卵细胞膜发生生理反应，阻止其他精子进入
【答案】C
【详解】A、体外受精时，采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力，A 正确；
B、动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数
第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力，B 正确；
C、聚乙二醇常用于细胞融合，而不是体外受精过程，C 错误；
D、卵细胞膜反应是指精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过
程，这是防止多精入卵的第二道屏障，D 正确。
故选C。
题型六 胚胎工程及其应用
28．下图表示精子入卵后，发生(或引起)的一系列变化及形成受精卵的过程,下列叙述错误的是（ ）
A．经图中Y 过程只形成了雌原核
B．精子入卵后精子的尾部留在外面，并在溶酶体的作用下自溶
C．精子入卵主要指精子的头部外膜与卵细胞膜融合
D．图中X 指卵细胞膜发生生理反应，Y 指卵子的减数分裂Ⅱ
【答案】A
【详解】AD、受精阶段，精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，形成
阻止多精入卵的第一道屏障，精子入卵后，卵细胞膜也会立即发生生理反应，形成第二道屏障，即图
中X 过程，精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体，形成雌原核，即图中Y 过程，
故Y 过程既形成了雌原核，又形成了第二极体，A 错误，D 正确；
B、精子入卵后，精子的尾部脱离，留在外面，并在溶酶体的作用下自溶，而头部经一系列变化形成
雄原核，B 正确；
C、精子入卵主要指精子头部外膜与卵细胞膜融合，体现了生物膜的流动性这一结构特点，C 正确。
故选A。
29．下列关于“试管牛”培养流程的叙述，正确的是（ ）
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A．过程①可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子
B．过程②发生的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体或雌、雄原核
C．大量的研究已经证明，过程③基本不会发生免疫排斥反应
D．移入受体的供体胚胎的遗传特性，在孕育过程中受受体的影响
【答案】ABC
【详解】A、过程①可对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵，即使其排出更多的卵子，A 正确；
B、过程②表示体外受精作用，可以在获能溶液或专门的受精溶液中完成，受精的标志是在卵黄膜和
透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）或雌、雄原核，B
正确；
C、胚胎移植时，受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植成功的理论基础，C
正确；
D、“试管牛”的遗传物质来自供体母牛和供体公牛，胚胎遗传性状不受受体任何影响，D 错误。
故选ABC。
30．近年来发展起来的胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限可能。下图为经体外受精和胚胎分
割移植培育优良奶牛的过程。下列相关说法正确的是（ ）
A．体外受精所需的成熟卵子可以从母体卵巢中直接获取，但在受精前要对精子进行获能处理
B．进行胚胎分割时，应选择发育到原肠胚时期的胚胎进行操作
C．胚胎分割的方法只能用分割针在显微镜下将胚胎均等分割成若干份
D．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎几乎不发生免疫排斥反应
【答案】D
【详解】A、卵巢中获取的卵细胞必需在体外进行培养到减数第二次分裂中期，才能与获能精子融合
即可得到受精卵，A 错误；
B、进行胚胎分割时，应选择发育到桑椹胚（桑葚胚）或囊胚时期的胚胎进行操作，B 错误；
C、不同阶段的胚胎进行胚胎分割时，可采用的方法有一定的差别，若胚胎处于卵裂期可以采用酶解
法或机械法，若囊胚则只能运用机械法分割，C 错误；
D、受体母牛必须和供体牛属于同一物种，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫
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对外来胚胎不发生排斥反应，D 正确。
故选D。
31．下列有关哺乳动物体外受精的叙述，正确的是（ ）
A．给实验动物注射促性腺激素，使其产生更多的精子
B．采集的卵母细胞可直接与获能的精子受精
C．获能的精子和成熟的卵子要在适当的培养液中完成受精
D．卵母细胞与精子受精前均已完成减数分裂Ⅱ
【答案】C
【详解】A、给实验动物注射促性腺激素，目的是使其产生更多的卵细胞，A 错误；
B、从卵巢中采集的卵母细胞一般培养到成熟后才与精子共同培养完成受精，B 错误；
C、体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应受精溶液或获能液中受精，C 正确；
D、次级卵母细胞减数第二次分裂是在精子和卵子结合过程中完成的，D 错误。
故选C。
32．胚胎工程技术的迅速发展实现了优良家畜品种的大量繁殖，能显著提高畜产品质量改善人民生活，还
可以解决濒危动物繁育的问题。下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A．刚采集到的卵母细胞即可与获能处理后的精子在体外受精
B．在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，标志着卵子受精
C．卵裂在透明带内进行，此时胚胎细胞数量和总体积不断增加
D．为了获得大量同卵多胚，可对囊胚或桑葚胚进行无限次分割
【答案】B
【详解】A、刚采集到的卵母细胞需培养到减数分裂Ⅱ中期才能与获能处理后的精子在体外受精，A
错误；
B、判断卵子是否受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以看到两个极体，B 正确；
C、受精卵在卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加，甚至略微缩小，C 错误；
D、采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，
D 错误。
故选B。
33．甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。
为促进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下
图。下列叙述错误的是（ ）
A．藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵
B．藏羊乙的获能精子与藏羊甲培养至MⅡ期的卵母细胞受精
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C．受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理
D．后代丁羊的细胞质中遗传物质来源于藏羊甲和丙
【答案】D
【详解】A、促性腺激素能作用于卵巢，藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵，
A 正确；
B、从卵巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期）后才可与获能的精子进行体外受
精，B 正确；
C、在胚胎移植前要对接受胚胎的受体和供体进行同期发情处理，使受体的生理状况相同，因此受体
藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理，C 正确；
D、后代丁是由藏羊甲的卵细胞和藏羊乙的精子结合形成的受精卵发育而来，因此后代丁的遗传物质
来源于藏羊甲和藏羊乙，D 错误。
故选D。
34．波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程
技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ）
A．选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理
B．胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测
C．普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体
D．生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选
【答案】D
【详解】A、选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体，进行超数排卵处理，A 正确；
B、胚胎移植前，采集部分滋养层细胞进行遗传学检测，B 正确；
C、作为受体的杜泊母山羊只需具备健康的体质和正常繁殖能力即可，但山羊和绵羊是不同的物种，
具有生殖隔离，不能将山羊的胚胎移植到绵羊子宫发育，即普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受
体，C 正确；
D、生产中需选择品质良好的波尔公山羊提供精子，D 错误。
故选D。
35．近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲
黑熊。他们期望通过体外授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（
）
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A．胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A 使其超数排卵
B．A 超数排卵排出的细胞必须生长到MII 期才能与C 的获能后的精子发生受精
C．D 受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B 同期发情处理
D．E 后代遗传性状与A 和C 一致，F 后代遗传性状与B 一致
【答案】B
【详解】A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A 使其超数排卵，A 错误；
B、A 超数排卵排出的细胞必须生长到MII 期才具有受精能力，C 的精子获能后才能发生受精，B 正确；
C、D 受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A 体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊♀A 同期发情
处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊♀B 只需要提供体细
胞，所以不需要同期发情处理，C 错误；
D、E 后代遗传物质来源于A 和C，F 后代遗传物质来源于A 和B，D 错误。
故选B。
1．猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成
功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，如图所示，提高了克隆成功率，并
在2024 年获得了首个活到成年的克隆猴。下列分析错误的是（ ）
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A．成纤维细胞应注入去除纺锤体-染色体复合物的食蟹猴MII 期卵母细胞
B．Kdm4d 的mRNA 和酶TSA 通过影响表观遗传促进胚胎细胞的正常分化
C．囊胚b 的滋养层将发育为胎盘，为克隆胚胎提供营养并改变其遗传特性
D．该技术在克隆具有特定疾病的模型动物以及辅助生殖等领域有广阔前景
【答案】C
【详解】A、在体细胞核移植（克隆）过程中，供体细胞（如成纤维细胞）的核需要注入去除了纺锤
体-染色体复合物的MII 期卵母细胞中，以确保供体细胞的基因组能够替代卵母细胞的基因组，A 正确；
B、Kdm4d 是一种组蛋白去甲基化酶，TSA（曲古抑菌素A）是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂。它们
通过调节表观遗传（如DNA 甲基化和组蛋白修饰），促进克隆胚胎的正常发育和分化，B 正确；
C、囊胚的滋养层确实会发育为胎盘，为胚胎提供营养，但胎盘不会改变胚胎的遗传特性，C 错误；
D、通过克隆技术可以创建特定疾病的动物模型，用于研究疾病机制和药物开发。此外，该技术还可
能用于辅助生殖，帮助解决不孕不育等问题，D 正确。
故选C。
2．我国科学家成功地用iPS 细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d 为组
蛋白去甲基化酶，TSA 为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ）
A．组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
B．用电刺激、Ca²+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C．③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合
D．图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术
【答案】B
【详解】A、结合题图，重构胚在加入中Kdm4d 的mRNA 和TSA 后，发育成克隆鼠，而Kdm4d 的
mRNA 表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA 为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制
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组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发
育过程，A 错误；
B、在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶
抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B 正确；
C、③为动物细胞融合的过程，诱导动物细胞发生融合所用的是灭活的病毒，C 错误；
D、图示流程运用了体细胞核移植、胚胎移植等技术，并未运用重组 DNA 技术，D 错误。
故选B。
3．哺乳动物细胞合成DNA 有D、S 途径：氨基蝶呤阻断D 途径；S 途径需HGPRT、TK 两种酶
催化相关原料生成DNA。单克隆抗体制备中，HAT 培养基含氨基蝶呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷（后
两者为S 途径合成DNA 的原料），用于筛选杂交瘤细胞。已知B 淋巴细胞有HGPRT 和TK，骨髓瘤细
胞无。下列叙述错误的是（ ）
A．从功能上划分，单克隆抗体制备过程使用的HAT 培养基属于选择培养基
B．在HAT 培养基中，骨髓瘤细胞的D 途径被阻断，无S 途径，不能合成DNA
C．在HAT 培养基中，杂交瘤细胞的D 途径被阻断，但可利用S 途径合成DNA
D．经HAT 培养基筛选得到的杂交瘤细胞即可用于大量生产单克隆抗体
【答案】D
【详解】A、HAT 培养基通过氨基蝶呤阻断D 途径，并利用S 途径的原料筛选出具备HGPRT 和TK 酶
的杂交瘤细胞，属于选择培养基，A 正确；
B、骨髓瘤细胞缺乏HGPRT 和TK 酶，无法利用S 途径的原料，同时D 途径被氨基蝶呤阻断，因此不
能合成DNA，B 正确；
C、杂交瘤细胞继承了B 淋巴细胞的HGPRT 和TK 酶，在D 途径被阻断时，可通过S 途径利用次黄嘌
呤和胸腺嘧啶核苷合成DNA，C 正确；
D、HAT 培养基仅筛选出杂交瘤细胞，但其中可能存在多种杂交细胞（如B-瘤、B-B、瘤-瘤融合），
需进一步通过抗体检测和克隆化培养才能获得单一抗体分泌的细胞群，D 错误。
故选D。
4．抗体结构分为可变区（V 区）和恒定区（C 区），与抗原特异性结合的区域为CDR 区，位于V 区中。
在医药领域，单克隆抗体在疾病诊断和病原体鉴定中发挥重要作用，但鼠源的单抗容易在人体内引发
人抗鼠抗体反应（HAMA），从而削弱其治疗的有效性。科学家对鼠源杂交抗体进行改造，生产出效
果更好的鼠—人嵌合抗体，主要流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．鼠—人嵌合抗体至少含有4 个游离氨基，其抗体特异性由肽链的C 区决定
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B．上述表达载体的构建过程主要利用了基因突变的生物学原理
C．为提高嵌合基因与载体的连接效率，扩增时应在两条引物的3'端添加同种限制酶酶切位点
D．鼠—人嵌合抗体的研制过程属于蛋白质工程，图中转染细胞的方法可能是显微注射法
【答案】D
【详解】A、由图可知，鼠一人嵌合抗体含有4 条肽链，因此至少含有4 个游离氨基，其抗体特异性
由肽链的V 区决定，A 错误；
B、表达载体的构建过程主要利用了基因重组的生物学原理，不是基因突变，B 错误；
C、子链延伸只能从5′端向3′端，为避免自身环化和反向链接，应使用两种不同的限制酶进行酶切，
因此应在两条引物的5′端添加不同的限制酶酶切位点，C 错误；
D、鼠-人嵌合抗体是对鼠源抗体改造，即对蛋白质改造，属于蛋白质工程；将基因表达载体导入动物
细胞（Sp2/0 细胞 ）常用显微注射法，D 正确。
故选D。
5．正常情况下，由于父源基因和母源基因中有特定的“印记基因”，只能表达来自特定一方的基因，因
此哺乳动物的2 个精子无法形成1 个正常发育的胚胎。如某些父源基因促进胚胎细胞增殖和营养吸收，
某些母源基因抑制胚胎过度生长。科研人员使用特定技术修改关键的印记基因后，创造出“双父无
母”的小鼠，具体过程如下图。下列叙述错误的是（ ）
A．正常小鼠胚胎发育过程中，父源基因和母源基因共同表达
B．“双父”小鼠的培育过程中，不需要使用特定技术抑制母源基因的表达
C．图中“？”的处理可能是进行X 染色体的复制
D．整个过程不需雌性小鼠的参与
【答案】D
【详解】A、题干中提到正常情况下只能表达来自特定一方的基因，但正常小鼠胚胎发育是由受精卵
发育而来，受精卵的基因来自父方和母方，在正常胚胎发育过程中父源基因和母源基因共同表达才能
保证胚胎正常发育，A 正确；
B、“双父”小鼠是通过对父源细胞进行处理得到的，在这个过程中不需要抑制母源基因表达，因为
没有母源基因参与，B 正确；
C、丢失Y 染色体的iPS 细胞为XO 型，要得到XX 型卵原细胞，“？”的处理可能是进行X 染色体的
复制，然后细胞分裂得到XX 型细胞，C 正确；
D、从图中可以看出，整个过程是将小鼠成纤维细胞经一系列处理最终培育出“双父”小鼠，但是
“双父”小鼠需要在雌性小鼠子宫内进行胚胎发育，需要雌性小鼠的参与，D 错误。
故选D。
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一、单选题
1．（2025·江西·高考真题）诱导多能干细胞(ips 细胞)在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利用多
种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得ips 细胞。下列叙述错误的是（ ）
A．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B．小鼠胎儿成纤维细胞形成ips 细胞的过程属于细胞分化
C．利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D．培养小鼠胎儿成纤维细胞和ips 细胞时需提供一定浓度的CO2
【答案】B
【详解】A、小分子化合物通过调控基因表达使成纤维细胞重编程为ips 细胞，改变了原有基因表达模
式，A 正确；
B、成纤维细胞形成ips 细胞的过程是逆分化（去分化），而非细胞分化，B 错误；
C、胰蛋白酶可分解细胞间质蛋白，使组织分散为单个细胞，符合动物细胞培养操作，C 正确；
D、动物细胞培养通常需要5% CO2以维持培养液pH，成纤维细胞和ips 细胞培养均需此条件，D 正确。
故选B。
2．（2025·广西·高考真题）科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因（GT）的NDV 病毒靶向感染人体内癌
细胞，从而强烈激活免疫系统，起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是（ ）
A．培养体外实验使用的癌细胞时，通常需添加血清
B．感染NDV-GT 的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬
C．经NDV-GT 方法治愈的患者，体内不存在能识别GT 蛋白的免疫细胞
D．人体正常细胞若被感染并表达了GT，不会被免疫系统识别为“非己”成分
【答案】A
【详解】A、动物细胞培养时，培养基中需添加血清等天然成分以提供细胞生长所需的营养物质和生
长因子，因此培养体外实验使用的癌细胞通常需要添加血清，A 正确；
B、巨噬细胞的吞噬作用属于非特异性免疫，不具有特异性，即使癌细胞被NDV-GT 感染，其吞噬过
程仍为非特异性，B 错误；
C、NDV-GT 治疗会激活免疫系统产生记忆细胞，这些细胞能够长期识别GT 蛋白，因此治愈后患者体
内仍存在识别GT 蛋白的免疫细胞，C 错误；
D、若正常细胞被感染并表达GT 蛋白（异源蛋白），会被免疫系统识别为抗原，从而引发免疫反应，
D 错误。
故选A。
3．（2025·重庆·高考真题）为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了
如图所示的研究，下列叙述正确的是（ ）
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A．克隆动物的核基因组来源于甲、乙
B．体外受精需用获能的精子与MI 期的卵母细胞受精
C．囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体
D．滋养层可影响内细胞团的发育
【答案】D
【详解】A、克隆动物的核基因组来源于甲，细胞质中的基因来源于乙，A 错误；
B、体外受精需用获能的精子与MⅡ期的卵母细胞受精，而不是MI 期，B 错误；
C、囊胚①的内细胞团可发育为个体，滋养层细胞发育为胎膜和胎盘，C 错误；
D、滋养层可影响内细胞团的发育，如滋养层细胞分泌的某些物质可能会影响内细胞团细胞的分化等，
D 正确。
故选D。
4．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏
膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（
）
A．制备细胞悬液
B．置于
等适宜条件下培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
【答案】D
【详解】A、动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A 正确；
B、置于
等适宜条件下培养，其中5%的CO2可维持培养液的pH，B 正确；
C、在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C 正确；
D、不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D 错误。
故选D。
5．（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK 扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等
优点。但MDCK 细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通
过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK 细胞——XF06．下列
叙述错误的是（ ）
A．XF06 悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率
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B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致
C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA 的污染
【答案】B
【详解】A、悬浮培养的XF06 细胞无需贴壁，可在培养液中自由增殖，从而提高细胞密度，扩大病
毒产量，提升生产效率，A 正确；
B、XF06 细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于
扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式），B 错误；
C、流感病毒释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病毒（上清液），C 正确；
D、无成瘤性细胞不含癌基因，可避免疫苗中混入致瘤性DNA 片段，确保疫苗安全性，D 正确；
故选B。
6．（2025·北京·高考真题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，调控pH 的CO2耗尽，培养基转
为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是（ ）
A．必需氨基酸
B．抗生素
C．酸碱指示剂
D．血清
【答案】C
【详解】A、必需氨基酸是细胞生长的营养成分，不参与指示pH 变化，A 错误；
B、抗生素用于抑制微生物污染，与培养基颜色无关，B 错误；
C、酸碱指示剂（如酚红）在培养基中用于显示pH 变化，在低pH 值时酚红使培养液呈黄色，而较高
的pH 值时使培养液呈紫色，pH 值7.2-7.4 时为红色，C 正确；
D、血清提供生长因子，不直接导致颜色变化，D 错误。
故选C。
7．（2025·河北·高考真题）生物工程在社会生产中的应用日益广泛，下列相关技术和方法错误的是（ ）
A．利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和优良性状的保持
B．在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞培养
C．利用灭活病毒诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
D．对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵用于胚胎制备
【答案】B
【详解】A、植物组织培养技术可以快速繁殖植物，并且由于是无性繁殖，能保持母本的优良性状，
兰花可以利用组织培养技术实现快速繁殖和优良性状的保持，A 正确；
B、胚胎干细胞培养时，需要一定浓度的CO2，CO2的作用是维持培养液的pH，所以不能在没有CO2
的环境中进行胚胎干细胞培养，B 错误；
C、诱导动物细胞融合的方法有物理法（如电激）、化学法（如聚乙二醇）和生物法（如灭活病毒），
可以利用灭活病毒诱导B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，C 正确；
D、在胚胎工程中，对供体母牛注射促性腺激素，能使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞用于胚
胎制备，D 正确。
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故选B。
8．（2025·山东·高考真题）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是
（ ）
A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞
B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行
C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液
D．可用PCR 技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛
【答案】B
【详解】A、对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，以便后续进行
核移植操作，A 正确；
B、卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B 错误；
C、在培养动物体细胞时，需要定期更换培养液，防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害，C
正确；
D、PCR 技术可以扩增特定的DNA 片段，通过检测犊牛丁细胞中是否含有转基因的DNA 片段，就可
以鉴定犊牛丁是否为转基因牛，D 正确。
故选B。
9．（2025·安徽·高考真题）细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物
细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞
B．将特定基因或特定蛋白导入已分化的T 细胞，可将其诱导形成iPS 细胞
C．将B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞
D．采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化
【答案】B
【详解】A、胰蛋白酶处理后直接培养的细胞为原代细胞，A 错误；
B、将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如Oct4、Sox2、Klf4 和c-Myc）导入已分化的T 细胞，
可将其诱导形成iPS 细胞，B 正确；
C、融合细胞有具有同种核的融合细胞和杂交瘤细胞，需筛选才能获得分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C
错误；
D、囊胚细胞已开始分化，D 错误。
故选B。
10．（2025·云南·高考真题）孕酮具有促进子宫内膜增生，为受精卵着床做准备的作用。某奶牛场发现一
头高产奶量母牛生产两胎后重复配种均未成功妊娠，该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛。为获得
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该母牛的后代，下列说法正确的是（ ）
A．运用体外受精或人工授精技术可提高该牛的妊娠率
B．使用外源促性腺激素处理该牛获得更多卵子进而可获得多枚胚胎
C．体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康受体可提高存活率
D．使用该牛MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植可获得可育后代
【答案】C
【详解】A、该母牛孕酮量低于正常母牛，子宫内膜增生可能不足，不利于受精卵着床，即使运用体
外受精或人工授精技术，也难以提高妊娠率，A 错误；
B、使用外源促性腺激素处理该牛，可促使其超数排卵，获得更多卵子，但孕酮量低于正常母牛，受
精卵不能成功着床，不能获得成活胚胎，B 错误；
C 、该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛，故可通过体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健
康的受体内可提高存活率，C 正确；
D 、使用该牛 MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植，由于该牛本身孕酮分泌异常等问题，获得的后
代也可能存在发育等方面的问题，不一定可育，D 错误。
故选C。
11．（2025·江苏·高考真题）梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精
能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是（
）
A．采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度
B．人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道
C．超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂
D．母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础
【答案】C
【详解】A、采集的精子需要经过稀释和固定处理，否则活动精子会影响计数准确性，且血细胞计数
板通常用于已固定的细胞，A 错误；
B、人工授精时，精子在雌性生殖道内自然获能，无需提前体外处理，B 错误；
C、超数排卵通过注射促性腺激素（如FSH 和LH）促进卵泡发育和排卵，C 正确；
D、胚胎移植的生理学基础是母体子宫对胚胎的免疫耐受性高，不会发生免疫排斥，而非耐受低下，
D 错误。
故选C。
12．（2025·陕晋青宁卷·高考真题）科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了
羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是（ ）
A．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理
B．为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理
C．受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加
D．对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响
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【答案】C
【详解】A、促性腺激素可促进供体超数排卵，从而获得更多卵子，A 正确；
B、为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，受体与供体需同期发情处理以保证胚胎移植后生理环
境同步，B 正确；
C、桑葚胚阶段的细胞通过卵裂增殖，细胞数量增加，但胚胎总体积不变，或略有减小，C 错误；
D、本实验的自变量是是否对绵羊受精卵进行基因编辑等，其余为无关变量，对照组与实验组的无关
变量（如年龄、性别）需保持一致，以排除干扰，D 正确。
故选C。
13．（2025·黑吉辽蒙卷·高考真题）研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，
且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是（ ）
A．体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚
B．移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态
C．胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化
D．为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植
【答案】C
【详解】A、由于M Ⅱ期卵母细胞的细胞更大，便于进行技术操作，细胞质中含有激发细胞核全能性
的物质，因此体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A 正确；
B、移植前胚胎发育率低，细胞核来自于已分化的体细胞，全能性容易受到影响，因此可能是植入的
体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态，B 正确；
C、根据题干，早期胚胎大多都不能发育至囊胚期，必然不是孵化的原因，着床在孵化之后发生，孵
化是胚胎从透明带中伸展出来（不是滋养层），C 错误；
D、胚胎细胞核全能性高于体细胞，因此为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，
D 正确。
故选C。
二、多选题
14．（2025·黑吉辽蒙卷·高考真题）下图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述错
误的是（ ）
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A．步骤①给小鼠注射IL-6 后，应从脾中分离筛选T 淋巴细胞
B．步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液
C．步骤③加入灭活病毒或PEG 诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
【答案】ABD
【详解】A、步骤①给小鼠注射IL-6 后，应从小鼠的脾中获取B 淋巴细胞，A 错误；
B、步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬液，B 错误；
C、步骤③是诱导细胞融合过程，该过程可加入灭活病毒或PEG 诱导，细胞融合的过程体现了细胞膜
的流动性，C 正确；
D、步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗
体，步骤⑤经过克隆化培养和抗体检测筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D 错误。
故选ABD。
三、填空题
15．（2025·浙江·高考真题）某同学欲开展小鼠的排卵、受精以及观察受精卵发育的实验，其基本过程如
下。
(1)制备垂体细胞提取液：取小鼠的垂体，加入少量的培养液，剪碎，___________，经处理制成垂体
细胞悬液。取垂体细胞悬液，___________，制成某一浓度的垂体细胞悬液。将垂体细胞培养一段时
间后，破碎，___________，取上清液，经处理获得提取液。
(2)采集精子：将人工采集的精子置于培养液中，培养一段时间。此过程可使精子获得___________。
(3)采集卵细胞：给成年雌鼠注射垂体细胞提取液，一段时间后，采集卵子。注射垂体细胞提取液可促
进雌鼠排卵的原因是 ___________。
(4)受精：将精子和卵细胞混合培养。精子入卵后，会使卵子完成减数第二次分裂，排出________，形
成雌原核。
(5)观察受精卵的发育：受精卵开始卵裂，其中的细胞体积___________，细胞数量增加，但胚胎的总
体积变化 ___________。结果表明这一阶段胚胎细胞的细胞周期中，显著缩短的时期是___________。
【答案】(1) 用胰蛋白酶消化 用血细胞计数板在显微镜下计数，用培养液稀释 离心
(2)受精能力
(3)提取液中含有促性腺激素
(4)第二极体
(5) 变小 不明显 间期
【详解】（1）在制备细胞悬液时，剪碎组织后通常需要用胰蛋白酶消化，以分散细胞。因为胰蛋白
酶可以分解细胞间的蛋白质成分，使细胞相互分离。 要制成某一浓度的垂体细胞悬液，在取垂体细
胞悬液后，用血细胞计数板在显微镜下计数，稀释。将垂体细胞培养一段时间后破碎，为了获得细胞
内的物质（提取液的有效成分），需要进行离心操作，离心后细胞碎片等杂质会沉淀在底部，而上清
液中含有我们需要的物质。
（2）在体外受精过程中，将人工采集的精子置于培养液中培养一段时间，此过程可使精子获得获能。
精子获能后才具备与卵子受精的能力。
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（3）提取液中含有促性腺激素，能作用于雌鼠的卵巢，促进卵泡发育和成熟，从而促使雌鼠排卵。
（4）卵子在体外培养至减数第二次分裂中期（MⅡ 期）时具备受精能力，此时细胞内存在一个第二
极体（减数第一次分裂产生第一极体后，次级卵母细胞停滞在 MⅡ 期）。当精子成功入卵后，会激
活卵子完成减数第二次分裂，最终排出第二极体，剩余的细胞核则形成雌原核。
（5）受精卵进行的早期分裂称为卵裂，其特点是：细胞持续进行有丝分裂，但分裂过程中不伴随细
胞生长（或生长极短）。因此： 每次分裂后，子细胞的体积会逐渐变小（因细胞质被平均分配，且
无明显物质积累）； 尽管细胞数量不断增加，但胚胎的总体积基本不变或略有缩小（不会随细胞数
增多而明显增大）。 细胞周期包括分裂间期（G₁ 期、S 期、G₂ 期，占时较长）和分裂期（M 期，占
时较短）。卵裂阶段胚胎细胞需快速增殖以增加细胞数量，核心是缩短细胞周期时长。由于S 期
（DNA 复制期）和M 期（染色体分离期）的生理过程相对固定，难以大幅缩短，因此主要通过缩短
分裂间期的（尤其是 G₁ 期，为DNA 复制作准备的时期）来实现快速分裂。
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