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2025-2026 学年度（上） 一诊模拟考试
高 2023 级 生物
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C B D C C C B C D C
题号 11 12 13 14 15
答案 C C C D C
1．C
【分析】1、结合水：与细胞内其它物质结合，是细胞结构的组成成分。自由水：（占大多数）以游离形式存在，
可以自由流动；生理功能：①良好的溶剂；②运送营养物质和代谢的废物；③参与许多化学反应；④为细胞提供
液体环境。
2、无机盐的存在形式：主要以离子形式存在的；作用：细胞中某些复杂化合物的重要组成成分；维持细胞的生命
活动；维持细胞的酸碱度。
【详解】A、无机盐在细胞中大多数以离子的形式存在，A正确；
B、农作物细胞内结合水的存在形式主要是水与蛋白质、多糖等物质结合，因此，结合水是细胞的重要组成成分，
B正确；
C、氮元素被农作物吸收参与构成蛋白质后，主要存在于蛋白质的主链（如：肽键）上，C错误；
D、细胞中生物膜的主要成分是磷脂和蛋白质，磷脂的组成元素为C、H、O、N、P，因此，农作物从外界吸收的
磷元素可用于细胞内合成磷脂，D正确。
故选C。
2．B
【详解】A、由题干可知，透性酶是一种载体蛋白，载体蛋白的合成、加工过程与分泌蛋白相同，高尔基体可对来
自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装等，不能进行合成（在核糖体上合成），A错误；
B、由题目信息可知，G−6−磷酸酶位于光面内质网上，可以将G-6-磷酸水解成葡萄糖，B正确；
C、糖原主要存在于肝脏细胞和肌细胞中，由消化道吸收的单糖被转运至细胞内，可以用于合成糖原后储存在细胞
中，所以在细胞生活的液体环境—内环境中没有糖原，C错误；
D、图示反应发生在肝细胞中，红细胞不发生，D错误。
故选B。
3．D
【分析】哺乳动物的红细胞在成熟过程中，将细胞核和各种细胞器排出。线粒体内膜向内折叠形成嵴，增大内膜
答案第1页，共10页
学科网（北京）股份有限公司的面积。线粒体是有氧呼吸的主要场所。核仁与某种 RNA 的合成以及核糖体的形 成有关，核孔实现核质之间频
繁的物质交换和信息 交流。
【详解】A、哺乳动物成熟的红细胞内没有细胞核和众多细胞器，细胞内含有大量的血红蛋白，利于携带氧，体现
了结构和功能相适应的观点，A不符合题意；
B、线粒体的内膜向内折叠形成嵴，增大了内膜的面积，有利于附着更多的与有氧呼吸有关的酶，体现了结构和功
能相适应的观点，B不符合题意；
C、核仁与核糖体的形成有关，而核糖体是合成蛋白质的场所，核孔是大分子物质如RNA和蛋白质进出细胞核的
通道，故分泌旺盛的胰腺细胞核，核仁较大，核孔较多，体现了结构和功能相适应的观点，C不符合题意；
D、不同生物膜上成分和结构相似，但不同的生物膜有不同的功能，不能体现结构和功能相适应的观点，D符合题
意。
故选D。
4．C
【分析】非经典分泌途径有四种：
1、通过分泌型溶酶体；
2、直接跨膜；
3、通过外来体的释放；
4、通过质膜释放。
【详解】A、细胞间信息交流可以通过蛋白质与靶细胞上特异性受体实现，所以蛋白质分泌是重要环节，A正确；
B、经典蛋白质分泌需要通过囊泡来实现，体现细胞膜的流动性，B正确；
C、非经典分泌是经典分泌的补充，不是所有细胞都具有，C错误；
D、非经典分泌是一种不同于经典分泌的方式，是经典分泌的必要和有益补充，D正确。
故选C。
【点睛】本题考查课本的经典分泌和题中所给非经典分泌，要注意课本知识和外来信息的综和，找出它们的交叉
点。
5．C
【分析】本题考查细胞的增殖、分化等相关知识，图中a细胞，通过有丝分裂产生细胞b、d，其中细胞b继续有
丝分裂，c为处于有丝分裂后期的细胞，d细胞分化为细胞e、f，g为初级卵母细胞，h为次级卵母细胞。
【详解】b→c过程为有丝分裂，不会发生交叉互换，A错误；细胞e、f都是由同一个细胞细胞a 通过有丝分裂产
生的子细胞b分化而来，所以遗传物质相同，但mRNA种类不完全相同，B错误；b→c、a→g过程中发生的可遗
传变异，都可为生物进化提供原材料，C正确；根据g图中非同源染色体的组合情况分析可知，细胞h为次级卵母
细胞，D错误；
答案选C。
答案第2页，共10页【点睛】本题易错点是对细胞g的分析：根据细胞质的不均等分裂判断细胞g为初级卵母细胞，根据非同源染色体
的组合情况分析，细胞h应为次级卵母细胞。
6．C
【答案】C
【详解】A、由图可知，A、B、C基因共用一个启动子，多顺反子mRNA由A、B、C基因转录而来，故多顺反子
mRNA可作为模板翻译出多种蛋白质，分别对应A、B、C等基因的表达产物，A正确；
B、题意显示，激活蛋白CAP与激活物位点结合，可增强转录，即能促进RNA聚合酶与启动子的结合，进而启动
转录过程，B正确；
C、阻遏蛋白可结合操纵基因抑制转录，小分子效应物（如乳糖）能结合阻遏蛋白并改变其构象，从而调节其活性，
即从“抑制转录变成不抑制转录”，阻遏蛋白并未失去活性，C错误；
D、分析题意可知，激活蛋白可通过结合激活物位点增强转录，阻遏蛋白可结合操纵基因抑制转录，从而实现对基
因转录的控制，D正确。
故选C。
7．B
【详解】A、结合“甲、乙、丙表示人体内环境的三大主要成分”分析题图可知：甲与丙之间是双向箭头，说明一
方是血浆，一方是组织液，又因为丙的箭头指向乙，说明乙是淋巴液，因此丙是组织液，甲是血浆。静脉注射的
药物直接进入甲(血浆)中，可以快速使药物到达患者病变部位，A错误；
B、②可与淋巴液进行物质交换，故可为淋巴细胞，病情严重时通过雾化治疗，药物可以不经过甲、乙，而是通过
呼吸道直接作用于呼吸道黏膜处发挥免疫效应的淋巴细胞，以增强治疗效果，B正确；
C、乙是淋巴液，②是淋巴细胞，丙是组织液，③是组织细胞，呼吸机辅助通气可使较充足的O 先进入甲(血浆)，
2
再进入丙（组织液），最后进入③（组织细胞）等被利用，C错误；
D、人体的内环境稳态包括内环境的理化性质和组成成分的相对稳定，此外还需要神经—体液—免疫调节网络共同
调节，故甲、乙、丙中水和电解质平衡，人体仍可能患病，D错误。
故选B。
8．C
【分析】第一幅图为辅助性T细胞（Th1和Th17）在桥本甲状腺炎（HT）的发病过程中作用机制。
①辅助性T细胞作用B细胞活化形成浆细胞，产生抗体作用与甲状腺细胞，使得甲状腺细胞坏死/凋亡，甲状腺功
能减退。
②辅助性T细胞作用CD8-T细胞活化形成细胞毒性T细胞作用与甲状腺细胞，使得甲状腺细胞坏死/凋亡，甲状腺
功能减退。
【详解】A、根据题意，当抗原抗体结合后，会形成复合体覆盖在甲状腺细胞表面，因此TPOAb和TGAb均为针
答案第3页，共10页
学科网（北京）股份有限公司对甲状腺细胞表面抗原的抗体，A正确；
B、B细胞在辅助性T细胞的细胞因子刺激下分化为浆细胞，B正确；
C、HT患者由于由免疫系统的细胞敌我不分的攻击自身细胞引起的，是免疫自稳功能异常所致，甲状腺功能减退，
可能导致代谢减慢和反应迟钝，C错误；
D、根据图示，表面覆盖有抗原抗体复合体的甲状腺细胞是对细胞毒性T细胞有激活作用的靶细胞，D正确。
故选C。
9．D
【详解】A、IA的调控作用依赖其双重结合能力：与胰岛素受体结合可促进GT合成，与GT结合可直接影响葡萄
糖转运，二者共同构成血糖调控的关键，A正确；
B、正常情况下，当血糖升高，葡萄糖与GT结合①增多，导致细胞摄取葡萄糖的速率升高导致②IA与GT结合减
少，③同时IA与胰岛素受体结合增多，导致④膜上的GT增多；当血糖降低是过程相反，B正确；
C、血糖升高时，IA与胰岛素受体结合，促进GT增多，加速葡萄糖进入细胞，降低血糖； 血糖降低时，IA与
GT结合可能抑制葡萄糖过度转运，减少血糖消耗，有助于血糖升高，实现双向调控，C正确；
D、受体缺陷导致胰岛素不敏感的群体，IA虽无法通过胰岛素受体发挥作用，但可直接与GT结合，调节葡萄糖转
运效率，仍可能改善血糖代谢，D错误。
故选D。
10．C
【详解】A、据遗传系谱图（患者有男有女，且遗传与性别无关），可判断DaseIL3基因位于常染色体上。Ⅱ 为
1
正常个体，若遗传方式为常染色体隐性，控制该病的相关基因用A、a表示，其儿子Ⅲ 为患者，基因型为aa，则
1
Ⅱ 必为杂合子携带者Aa，携带致病基因的概率为1，A正确；
1
B、突变后蛋白质由275个氨基酸减少为268个氨基酸，可能因基因内部缺失一对碱基（非3的倍数）导致移码突
变，终止密码子提前出现，翻译提前终止，B正确；
C、Ⅲ 为携带者Aa，与表型正常男性结婚后，后代可能患病，但该病为单基因遗传病，非染色体异常。产前诊断
3
应进行基因检测（如羊水穿刺后测序），染色体分析（如核型分析）无法检测基因突变，C错误；
D、I 为携带者Aa，在减数分裂Ⅱ后期因着丝粒分裂，可形成含2条X染色体和2个致病基因的次级卵母细胞，D
2
正确。
故选C。
11．C
【分析】
【详解】A、由题意和图分析可知是发生了易位属于染色体变异，故A正确。
B、因为易位后产生了新的基因即融合基因，故B正确。
C、三氧化二砷是引起癌蛋白的降解病没有改变癌细胞中DNA的结构，故C错误。
答案第4页，共10页D、“诱导分化疗法”最终使癌细胞变为正常或使癌变的凋亡，故能有效减少病人骨骼中积累的癌细胞，故D正确。
故选C。
12．C
【分析】紧扣题干信息“在机体缺氧时，肾脏产生红细胞生成酶，该酶作用于肝脏所生成的促红细胞生成素原，
使其转变成促红细胞生成素（ESF）。促红细胞生成素一方面刺激骨髓造血组织，使周围血液中红细胞数增加，改
善缺氧；另一方面又反馈性地抑制肝脏中的促红细胞生成素原的生成”答题。
【详解】A、促红细胞生成素抑制肝脏中的促红细胞生成素原的生成，这属于负反馈调节，这种机制保证了生物体
内物质含量的相对稳定，A正确；
B、骨髓中的造血干细胞还能产生淋巴细胞（B淋巴细胞和T淋巴细胞），参与免疫调节，B正确；
C、由图可知，促红细胞生成素作用的靶细胞是骨髓造血组织和肝脏，C错误；
D、相对于组织液和淋巴，血浆中含有较多的蛋白质，血浆渗透压的大小主要与无机盐、蛋白质含量有关，D正确。
故选C。
【点睛】本题结合模式图，考查内环境的理化特性，要求考生识记内环境的理化特性，能正确分析题图，再结合
图中信息准确判断各选项。
13．C
【详解】A、家鸡为ZW型性别决定，雄性为ZZ，雌性为ZW。若致死基因型为ZEW，则与喙相关的基因型雄性
有2种（ZEZe、ZeZe），基因型ZEZE不能形成，雌性个体只有一种基因型ZeW；若致死基因型为ZeW，则与喙相关
的基因型雄性有2种（ZEZe、ZEZE），基因型ZeZe不能形成，雌性个体只有一种基因型ZEW；以上两种情况，与喙
相关的基因型共3种，A错误；
B、子一代雄性：雌性=2：1，说明雌性中某基因型致死。若亲本为ZEZe（♂）和ZeW（♀），子一代雄性个体基
因型为ZEZe和ZeZe，雌性子代ZEW致死，存活雌性为ZeW，子一代中♂：♀=2:1；若亲本为ZEZe（♂）和ZEW
（♀），子一代雄性个体基因型为ZEZe和ZEZE，雌性子代ZeW致死，存活雌性为ZEW，子一代中♂：♀=2:1，B
错误；
C、根据B选项可知，若ZeW致死，子一代雄性中ZEZe和ZeZe各占50%，雌性为ZEW，自由交配后，子二代为
ZEZe：ZEZE：ZEW=1：3：3，Ze基因频率=1/（1×2+3×2+3）=1/11；同理若ZEW致死，子一代雄性中ZEZe和ZeZe各
占50%，雌性为ZEW，自由交配后，子二代为ZEZe：ZeZe：ZeW=1：3：3，ZE基因频率=1/（1×2+3×2+3）=1/11，
C正确；
D、若ZEW致死，随着代数增加，ZE基因逐渐减少，雌性死亡率下降，雄性比例不会持续增大，D错误。
故选C。
14．D
【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，
答案第5页，共10页
学科网（北京）股份有限公司合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端
延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能
从3′端延伸DNA链。
【详解】A、巨噬细胞、树突状细胞、B细胞属于抗原呈递细胞，而T细胞不具有摄取处理呈递抗原能力，A错误；
B、过程Ⅱ对1个单链cDNA进行20次循环，共形成219个DNA分子，故理论上需要消耗219个引物B，B错误；
C、未感染时，野生型和JNK基因敲除组RT−PCR的Ct值相同，说明CD23受体的数量和一氧化氮合酶的活性可
能相同，C错误；
D、感染时，JNK基因敲除组RT−PCR的Ct值低于野生型，说明JNK基因会抑制CD23基因的表达，CD23基因的
表达产物会降低感染，故使用JNK蛋白激酶抑制剂或一氧化氮合酶激活剂可治疗真菌感染，D正确。
15．C
【详解】A、过程①是用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁（酶解）。酶处理时间差异的原因是两种植物的细胞壁成分
（纤维素、果胶的含量或结构）存在差异，A错误；
B、过程②是诱导原生质体融合，方法包括物理法（离心、振动、电激）和化学法（PEG）；但 “灭活的病毒”
是动物细胞融合的诱导方法，B错误；
C、过程⑤是再分化阶段，通常要更换 2 次培养基： 诱导生根的培养基和诱导生芽的培养基，生长素与细胞分裂
素比值不同，比值高诱导生根，比值低诱导生芽，促进器官分化，C正确；
D、若得到的植株未兼有甲、乙优良性状，可能是因为融合的原生质体是 “同种类型”（如甲与甲融合、乙与乙
融合，属于同源多倍体，并非杂种植株）；但即使是 “异种原生质体融合的杂种植株”，也可能因基因表达调控
等问题未表现出优良性状，D错误。
故选C。
16．
(1) 去雄和套袋 分离 A>A>A A A 紫花:红花:白花=7:5:4
2 1 2
(2) 碱基对的替换 增加3个氨基酸（残基）
(3) 将抗病的紫花植株和不抗病白花（不抗病红花）植株杂交 A 基因所在的染色体上 A基因所在的
2
染色体上 抗病紫花:不抗病红花:抗病红花:不抗病紫花=1:1:1:1
【分析】基因自由组合定律：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；在减数分裂过程中，
同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
【详解】（1）在进行杂交实验前，对母本去雄是为了防止自花传粉，套袋是为了防止外来花粉的干扰，保证杂交
的顺利进行。花色由一对等位基因（A、A、A）控制，符合基因的分离定律。甲（AA）与红花（AA或AA ，
1 2 2 1
这里根据结果推测红花基因型为AA）杂交，F 紫花：红花=1:1，说明A 对A为显性；甲（AA）与白花（AA）
1 2 2 1 1
杂交，F 紫花：红花=1:1，说明A对A 为显性，所以显隐性关系为A>A>A 。根据杂交结果，甲与红花、白花杂
1 1 2 1
交的后代比例，可推出甲的基因型为AA。杂交②中F 的基因型及比例为AA:AA=1:1。杂交②中的F 植株随机
2 1 2 1 1 1
答案第6页，共10页交配，产生的配子类型及比例为A:A:A =1:1:2，利用棋盘法，可得F 为紫花：红花：白花=7:5:4。
2 1 2
（2）从电泳结果看，基因A突变为基因A 时，片段长度等有变化，是由于碱基对的替换导致的。测定基因A和
2
A 的模板链序列，据图读出的为编码链序列（与mRNA序列相似）为CGTTAGGCTCCATGA、
2
CGTTAGGCTCCATGA，增加3个氨基酸（残基）：因为碱基对的替换，使得转录出的mRNA上终止密码子的位
置后移，所以最终编码的蛋白质的氨基酸数增加了3个。
（3）将抗病的紫花植株和不抗病白花（不抗病红花）植株杂交：通过杂交实验，观察子代的表现型及比例，来判
断基因D的位置。A 基因所在的染色体上：若抗病紫花：不抗病红花=1:1，说明基因D与A 基因连锁，位于A 基
2 2 2
因所在的染色体上。A基因所在的染色体上：若抗病红花：不抗病紫花=1:1，说明基因D与A基因连锁，位于A
基因所在的染色体上。抗病紫花：不抗病红花：抗病红花：不抗病紫花=1:1:1:1：若基因D与花色基因位于非同源
染色体上，遵循自由组合定律，杂交后代会出现四种表现型，且比例为1:1:1:1。
17．(1) 辅助性T细胞 细胞毒性T细胞 自稳和监视
(2) 实验组KD饮食可以增强小鼠抵抗IAV感染的能力 γT细胞
(3) A基因敲除小鼠 适量的KD饮食 1组小鼠的γT细胞数量显著低于2组
(4)KD饮食通过促进A基因的表达，促使γT细胞数量增多，从而诱导肺部粘液生成细胞的增殖
【分析】人体免疫包括非特异性免疫和特异性免疫，非特异性免疫包括第一、二道防线，第一道防线由皮肤和黏
膜组成，第二道防线由体液中的杀菌物质和吞噬细胞组成；特异性免疫是人体的第三道防线，由免疫器官、免疫
细胞借助于血液循环和淋巴循环组成，包括细胞免疫和体液免疫两种方式。
【详解】（1）体液免疫中，一些病毒被树突状细胞、B细胞等抗原呈递细胞摄取，处理后将抗原呈递到细胞表面，
然后将抗原呈递给辅助性T细胞。被病原体感染的细胞称为靶细胞，细胞毒性T细胞将靶细胞裂解，释放抗原。
除防御功能之外，免疫系统还具有免疫自稳和免疫监视功能。
（2）实验组KD饮食可以增强小鼠抵抗IAV感染的能力，所以IAV感染三天后，实验组的生存率显著高于对照组。
γT细胞的实验组细胞的相对数量最高，说明γT细胞在KD饮食增强小鼠抵御IAV感染能力方面发挥主要作用。
（3）①该实验的自变量为有无A基因，因变量小鼠的生存率（或小鼠的死亡率），设计实验为：取若干A基因敲
除小鼠（1组）和若干普通小鼠（2组），都用（等量）高脂肪低糖类（KD）饲料饲喂，饲喂7天后再用一定浓度
的IAV感染两组小鼠，定期统计两组小鼠的生存率或小鼠的死亡率。
②由于A基因是决定γT细胞分化成功的关键基因，则实验的检测结果为1组小鼠的γT细胞数量显著低于2组。
（4）实验组小鼠肺部黏液生成细胞数目高于对照组，而KD饮食的A基因敲除小鼠的检测结果与（3）的对照组
无显著差异，说明是A基因促使γT细胞数量增多，使小鼠肺部黏液增多，存活率增大。判断KD饮食增强小鼠抵
御IAV感染的机理是：KD通过促进A基因的表达，促使γT细胞数量增多，从而诱导肺部黏液生成细胞的增殖，
产生更多的黏液捕获病毒，以此增强小鼠抵御IAV感染的能力。
18．(1) 叶绿体、线粒体、过氧化物酶体 叶绿体基质 进行光反应重新生成ATP
答案第7页，共10页
学科网（北京）股份有限公司(2) 催化乙醇酸生成乙醛酸 因酶X缺陷，乙醇酸无法正常转变为C ，糖类生成受阻；而自然状态下CO
3 2
含量较低，固定的效率较低，积累有机物较少
(3)ABCE
【分析】由图可知：光呼吸需要叶绿体和线粒体共同参与。光呼吸时，叶绿体内生成乙醇酸，细胞质基质转化成
乙醛酸，经过线粒体生成甘氨酸，最后在叶绿体内消耗ATP生成C 。
3
【详解】（1）由图分析可知，光呼吸完整过程依次经过叶绿体、过氧化物酶体和线粒体，产生乙醇酸的具体场所
是叶绿体基质，甘油酸转化为C 会消耗ATP产生ADP和Pi，产生的ADP和Pi在叶绿体类囊体薄膜上进行光反应
3
重新生成ATP。
（2）酶X缺陷型的水稻突变株在0.03%CO 的条件下，乙醇酸含量明显增加。再根据图中所示，乙醇酸可转化为
2
乙醛酸，故推知酶A具有催化乙醇酸生成乙醛酸的功能。在较低的大气CO 浓度（0.03%）条件下，突变植株的长
2
势不如野生植株的，机制可能是因酶X缺陷，乙醇酸无法正常转变为C ，糖类生成受阻；而自然状态下CO 含量
3 2
较低，固定的效率较低，积累有机物较少。
（3）酶Y能催化乙醇酸生成CO，并抑制叶绿体膜上乙醇酸转运蛋白基因的表达，这样一来就改变了乙醇酸的利
2
用途径，减少了叶绿体中碳的损失，一定程度抑制了光呼吸，有利于加速C 生成C ，故该途径提高了水稻的净光
3 5
合速率，ABCE符合题意。
19．(1) 专一性 降低化学反应的活化能
(2) 高温使酶的空间结构遭到破坏 在一定浓度范围内，三种水解产物都对NAGase的催化活力有抑制作
用；随着水解产物浓度的增加，抑制作用增大；在相同浓度下，抑制作用葡萄糖大于半乳糖大于蔗糖
(3) 几丁质浓度和是否添加果糖 不添加
(4)防治害虫，作为生物杀虫剂，提高农作物的产量
【分析】过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏,使酶永久失活。在0℃左右时，酶的活性很低，但
酶的空间结构稳定，在适宜的温度下酶的活性会升高。因此，酶制剂适宜在低温下保存。
【详解】（1）酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化学反应。NAGase 在降解昆虫外骨骼时仅能与几丁质
结合，体现了其对底物的选择性，即专一性。酶与无机催化剂的作用机理一致，均通过降低化学反应的活化能来
加快反应速率。
（2）酶的活性受温度影响显著，高温会破坏酶的空间结构（低温仅抑制活性，不破坏结构）。图 1-a 中，温度从
40℃升至 60℃时，NAGase 的空间结构因高温被破坏，导致活性大幅下降。结合图 1-b（推测趋势），在一定浓
度范围内，三种水解产物都对NAGase的催化活力有抑制作用；随着水解产物浓度的增加，抑制作用增大；在相
答案第8页，共10页同浓度下，抑制作用葡萄糖大于半乳糖大于蔗糖。
（3）①自变量是实验中人为改变的变量，本实验为 “几丁质浓度” 和 “是否添加果糖”（一组加果糖，一组
不加，形成对照）。对照组：不添加果糖（用于对比果糖的抑制作用）。
②图 2 中模型甲为竞争性抑制剂（与底物竞争酶的活性位点），其特点是：当底物浓度足够高时，抑制剂的作用
可被抵消，最终酶活性能接近正常水平（最大反应速率不变）。 对应图 3 的曲线应表现为：有果糖组的曲线始
终在无果糖组下方，但最终趋近于无果糖组的最大活性。
（4）昆虫和线虫的表皮、卵壳依赖几丁质维持结构，NAGase 可降解几丁质，导致害虫 / 线虫的结构破坏（如外
骨骼软化、卵壳破裂），从而抑制其生存繁殖。因此，NAGase 可作为生物杀虫剂，减少化学农药使用，实现害
虫防治、提高农作物产量。
20．(1) DNA 连接酶 不能 PCR 5’端
(2) ABC a、d或d、a Ca²⁺ 引物1和4
(3) 除草剂 真核 不出现
【分析】基因工程技术的基本步骤：
(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆
菌转化法和花粉管通道法等；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞
答案第9页，共10页
学科网（北京）股份有限公司的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子
杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA一分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原一抗
体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）在构建基因表达载体时，需用限制酶将载体切开，以便目的基因的插入，需要DNA连接酶将目的
基因与载体进行重组。载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列不能出现在目的基因内部，要保持目的基因的
完整性，否则目的基因会被破坏。若目的基因两侧缺少相应的限制酶识别序列，可通过PCR技术在目的基因两侧
添加相应限制酶识别序列，由于DNA聚合酶从引物的3’端连接脱氧核苷酸，故一般在5’端引物的添加相应限制酶
识别序列。
（2）①无缝克隆In-Fusion 技术中 In-Fusion酶可以将任何具有相同15bp末端序列的线性 DNA分子进行连接，
无需限制酶切割，类似同源重组，该方法能免去传统方法双酶切的繁杂操作、能保证目的片段插入载体时方向正
确、如果载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列出现在目的基因内部，该技术可克服传统方法的局限性，
ABC正确。
②结合图3分析，引物2上额外添加的片段对应于GUS基因中加粗的e片段，那么进行ln-Fusion反应时，A基因
的右侧序列、GUS基因的左侧序列会连接在一起。还需要将A基因、GUS基因连接到载体上，根据质粒两条核苷
酸链的方向(5＇→3)判断，引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的片段a、d，才能确保A基因的左侧
序列、GUS基因的右侧序列分别与质粒连接（或反向连接，引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的
片段d、a）。经钙离子处理成为感受态细胞的细胞，吸收外源DNA的能力强。
③为筛选成功转入目标重组DNA分子的菌落，可以检测A基因与GUS基因，因而可以选取引物1、4扩增目的基
因并电泳检测。阳性菌落含有融合基因，约为1400bp，电泳结果如下：
（3）农杆菌转化愈伤组织时，需要用含除草剂的选择培养基筛选转化的愈伤组织，能在该培养基上正常生长的愈
伤组织为具有对除草剂的抗性；愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织（假阳性）也可能在选择培养
基上生长。由于成功实现转化的愈伤组织中具有抗除草剂的基因，也有GUS基因，而报告基因GUS表达产物能催
化无色物质K呈现蓝色，因此用无色物质K分别处理上述的愈伤组织，出现蓝色的是无农杆菌附着的转化愈伤组
答案第10页，共10页织和无蓝色的是假阳性的农杆菌，这里依据的原理是GUS基因在真核细胞中表达，而在农杆菌中不表达。
答案第11页，共10页
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