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必刷11 发酵工程
高频考点1 果酒和果醋的制作过程
高频考点2 泡菜的制作
高频考点3 微生物的培养技术
1．（2023·辽宁·统考高考真题）利用某种微生物发酵生产DHA 油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。
下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（ ）
A．DHA 油脂的产量与生物量呈正相关
B．温度和溶解氧的变化能影响DHA 油脂的产量
C．葡萄糖代谢可为DHA 油脂的合成提供能量
D．12～60h，DHA 油脂的合成对氮源的需求比碳源高
2．（2023·辽宁·统考高考真题）细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气
微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是
（ ）
A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
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C．同一稀释度下至少对3 个平板计数并取平均值
D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
3．（2023·江苏·统考高考真题）下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是（ ）
A．通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B．通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大
C．通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌
D．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定
4．（2023 秋·广东广州·高三执信中学校考开学考试）高中生物学实验中，下列实验操作能达成所述目标的
是（ ）
A．用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离
B．向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境
C．在目标个体集中分布的区域划定样方调查种群密度
D．对外植体进行消毒以杜绝接种过程中的微生物污染
5．（2023 秋·四川自贡·高三自贡市第一中学校考开学考试）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确
的是（ ）
A．不含氮源的平板不能用于微生物培养
B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
6．（2023 秋·湖南怀化·高三校考开学考试）以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4 个处理：①沸盐水冷却
后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚
硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
7．（2023 秋·广东广州·高三广州市花都区圆玄中学校考阶段练习）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降
解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，
下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（ ）
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A．a 点时取样、尿素氮源培养基
B．b 点时取样、角蛋白氮源培养基
C．b 点时取样、蛋白胨氮源培养基
D．c 点时取样、角蛋白氮源培养基
8．（2023·浙江·高三统考专题练习）某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁
样品，划线接种于一定NaCl 浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．培养基pH 需偏碱性
B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C．需在无氧条件下培养
D．分离得到的微生物均为乳酸菌
9．（2022·天津·高考真题）下图所示实验方法的应用或原理，不恰当的是（ ）
实验方法
应用
原理
A．分离绿叶中的色素
B．不同色素在层析液中溶解度不同
C．细菌计数
D．逐步稀释
A．A
B．B
C．C
D．D
10．（2022 秋·江苏南通·高三校考阶段练习）下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（
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）
A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株
B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌
11．（2022 秋·黑龙江大庆·高三铁人中学校考阶段练习）为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小
组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是（ ）
A．采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B．培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C．土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落
D．鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法
12．（2022·湖北·来凤一中统考二模）废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池
废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．该生产过程中，一定有气体生成
B．微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C．该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D．沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
13．（2022·湖北·来凤一中统考二模）关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述错误的是（ ）
A．在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B．白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体
D．生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
14．（2022 秋·福建泉州·高三校联考期中）青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀
死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法
错误的是（ ）
A．发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
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B．可用深层通气液体发酵技术提高产量
C．选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中
D．青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌
15．（2023·湖南郴州·统考一模）野生型大肠杆菌菌株能在基础培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株
无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，
①②③④代表培养基，A、B、C 表示操作步骤，D、E 为菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．图中①②③为完全培养基，培养基一般用湿热灭菌法进行灭菌
B．A 操作的目的是提高大肠杆菌基因突变的概率，增加突变株的数量
C．B 的正确操作是用接种环蘸取菌液后在②表面涂布来接种菌种
D．在C 过程原位影印时，用同一块无菌绒布先影印④，再影印③号培养基，可从④中挑取 D 进行纯
化培养。
16．（2023·湖南永州·统考一模）一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐
药性。为探究某种抗生素对细菌的选择作用，实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种
抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径。从抑菌圈边
缘的菌落上挑取细菌富集培养，然后重复上述步骤培养三代，结果如下表所示。下列有关叙述错误的是（
）
培养代数
平板各区域滤纸片周围抑菌圈的直径/cm
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①号区域
②号区域
③号区域
④号区域
第一代
0
2.27
2.13
2.27
第二代
0
1.95
2.02
1.87
第三代
0
1.80
1.87
1.78
A．一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异
B．采用稀释涂布平板法将金黄色葡萄球菌接种到固体培养基上
C．平板中①号区域的滤纸片不含抗生素，起空白对照的作用
D．随培养代数增多，抑菌圈的直径越小，说明细菌的耐药性越强
17．（2023·湖南永州·统考一模）为了解生长素和细胞分裂素的用量比例对愈伤组织再分化的影响，研究
者逐渐改变MS 培养基中这两种激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示。下列有关叙述正确
的是（ ）
A．MS 培养基中除含有无机盐外，还需加入葡萄糖等有机物
B．植物激素X 和植物激素Y 分别表示细胞分裂素、生长素
C．植物激素X 和Y 的浓度比大于1 时，未分化细胞群分化形成根
D．植物激素X 的浓度越高，未分化细胞群越容易诱导分化形成芽
18．（2023·湖南·校联考一模）尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素（CH4N2O）分解为氨（NH3）和CO2，
进而利用氨合成一些所需的物质。尿素分解菌的分离与纯化的培养基通常只需要将细菌的完全培养基中的
氮源作一些调整。下列有关叙述正确的是（ ）
A．尿素分解菌为自养生物，属于生产者
B．尿素能为尿素分解菌提供碳源和氮源
C．尿素分解菌的分离纯化需以尿素为唯一氮源
D．其他杂菌无法在分离纯化残留的培养基上生长
19．（2023·河北秦皇岛·校考二模）精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能
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在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱
变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在甲平板上，培
养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图所示。过程②是将甲平板中菌落利用影印接种法（一种能达到在
一系列培养皿的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种方法）接种到乙平板，继续培养相同时间。下列相
关叙述错误的是（ ）
A．与甲平板中成分相比，乙平板中不含精氨酸
B．菌落A 是采用稀释涂布平板法接种后培养得到的
C．菌落B 可能是鸟氨酸发酵的优良菌种
D．野生型菌经过紫外线处理后一定能获得精氨酸依赖型菌
20．（2023·江苏苏州·校联考三模）为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解细菌，培养结果如图所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．图示采用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法
B．可用干热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌
C．该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
D．培养基中的尿素被分解后，可使酚红指示剂变为红色
21．（2023 春·浙江·高二课堂例题）某同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相关叙述正确的是
（ ）
A．果酒发酵时，每日放气需迅速，避免空气回流入发酵容器
B．果酒发酵时，用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化，砖红色沉淀逐日增多
C．果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时
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D．果醋发酵时，用重铬酸钾测定醋酸含量变化时，溶液灰绿色逐日加深
22．（2023·河北保定·统考二模）酸笋是“螺蛳粉的灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主
要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。下列叙述错误的是（ ）
A．酸笋发酵过程中的乳酸菌属于单细胞原核生物
B．从发酵液中分离纯化乳酸菌时可采用稀释涂布平板法或平板划线法
C．硫化氢气体是蛋白质分解后含硫氨基酸的代谢产物之一
D．乳酸菌在发酵初期会出现种群数量的“J”形增长
23．（2023·河北沧州·沧州市第二中学校联考三模）黑曲霉是一种丝状真菌，是重要的发酵工业菌种，其
代谢产物广泛应用于食品加工等领域。黑曲霉的PDA 液体产酶培养基组成为麸皮、豆粉饼、（NH4）
2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4，培养时需要通气振荡。下列说法错误的是（ ）
A．黑曲霉的代谢类型为异养需氧型
B．上述培养基需要灭菌后将pH 调至酸性
C．豆粉饼可提供黑曲霉生长所需的碳源和氮源
D．工业化生产时，黑曲霉接种前一般要进行扩大化培养
24．（2023 秋·江苏南通·高三校考阶段练习）发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。 下
列叙述正确的是（ ）
A．菌落的大小、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B．筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产
C．单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，常用作微生物饲料等
D．在生产酸奶时采用巴氏消毒法，杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分
25．（2023·河北保定·河北省唐县第一中学校考二模）“寒霜屡下，园菜渐肥。取而曝之，俟略干，置缸
中，腌以盐。旬余，便可取食。若藏之于瓮，泥封其口，虽留至明年，犹可食也。”以上为小古文《腌
菜》。下列有关说法正确的是（ ）
A．古人多选择在秋冬季节腌菜与乳酸菌的最适温度低有关
B．为成功制得腌菜，可将“园菜”和“瓮”用沸水泡烫片刻
C．腌菜时“泥封其口”是为了创造无氧环境，减少杂菌污染
D．“旬余，便可取食”与发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低有关
26．（2023 春·高二课时练习）某培养基成分如下：
葡萄糖4～10g，（NH4）2SO44g，K2HPO47g，KH2PO42g，MgSO41g，CaCl20．02g，
微量元素（Fe、Co、Mn、Zn、Cu、Ni、Mo）各2～10μg，蒸馏水1000mL，pH7．2．
下列相关叙述正确的是（ ）
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A．从培养基组成来看，该培养基属于固体培养基
B．从培养基的pH 分析该培养基可用于培养霉菌
C．去掉（NH4）2SO4，该培养基可用于选择培养固氮微生物
D．微量元素在生物体中含量很少，培养基中可以不加或少加
27．（2023 春·高二课时练习）熔喷布是生产口罩的重要材料，主要成分是聚丙烯，废弃口罩会对环境造
成污染。某人从土壤中分离到一种能分解聚丙烯的细菌。下列说法错误的是（ ）
A．制备培养基时需要先将培养基的pH 调节至中性或弱碱性，再灭菌、倒平板
B．以聚丙烯为唯一碳源的培养基，按功能划分，该培养基属于选择培养基
C．从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌，可采用平板划线法、稀释涂布平板法接种
D．对该菌进行扩大培养时，应持续增加培养液中营养物质浓度，以提高菌种密度
28．（2023 春·全国·高二课堂例题）垃圾的生物处理是指利用生物（主要是微生物），将垃圾中的有机物
转化为稳定的产物、能源和其他有用的物质的一种处理技术。下列有关叙述不合理的是（ ）
A．降解塑料（成分是聚乙烯）垃圾，需用聚乙烯作唯一碳源的培养基筛选菌种
B．筛选降解石油的细菌时，培养基及接种工具分别需要干热灭菌和灼烧灭菌
C．厌氧技术处理生活垃圾，产生沼气，实现了生活垃圾的能源化
D．春季播种前利用微生物堆肥处理农田秸秆，有利于提高土壤储碳量
29．（2023 春·高二课时练习）下列关于微生物实验操作的叙述正确的是（ ）
A．对酵母菌细胞进行计数时，通常使用细菌计数板
B．平板划线时，只有在最后一个划线区域才可得到所需单菌落
C．在统计样品活菌数时，需对每个稀释度进行涂布培养并计数
D．在平板上划线和涂布时，均需避免弄破培养基表面
30．（2023 春·高二课时练习）研究人员以黑豆为原料运用混合菌种固体发酵技术制作黑豆豉，并对黑豆
与黑豆豉的8 种游离必需氨基酸含量进行检测，结果如表，下列相关分析中，错误的是（ ）
赖
氨酸
苏
氨酸
亮
氨酸
异亮
氨酸
色
氨酸
甲硫
氨酸
缬
氨酸
苯丙
氨酸
黑豆
5.94
3.65
7.36
4.46
1.01
1.20
5.03
5.32
黑豆
豉
20.4
9.8
20.4
14.1
-
19.2
21.9
34.8
注：单位为mg/100g
A．8 种氨基酸之间的区别在于 R 基不同
B．与黑豆相比，黑豆鼓更易于消化吸收
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C．与黑豆相比，黑豆豉有机物种类减少
D．苯丙酮尿症患儿不宜食用黑豆豉
31．（2023 秋·天津武清·高三天津市武清区杨村第一中学校考开学考试）被誉为“岭南佳果”的荔枝，味
道鲜美、营养丰富，其鲜果是酿酒的良好材料。下列关于制作荔枝果酒叙述错误的是（ ）
A．工业发酵前需蒸煮荔枝汁，可除去荔枝中的杂菌，利于酵母菌繁殖
B．在荔枝汁发酵液中添加适量蔗糖，有利于酵母菌繁殖和代谢
C．为增加荔枝果酒的产量，将发酵液装入发酵瓶时应尽可能装满
D．对荔枝果酒产品进行装罐前需要杀菌，应在62~65℃消毒30min
32．（2023·海南·统考模拟预测）《齐民要术》是我国古代的一部有很高科学价值的“农业百科全书”，
其在记叙酿酒方法时指出蒸软的米要“舒（摊开）使极冷，然后纳之（下酿瓮中去）”，酿酒完成的标志
是“味足沸定”。下列相关叙述错误的是（ ）
A．“舒使极冷，然后纳之”可避免高温杀死发酵所需的菌种
B．将米蒸软既有助于杀灭杂菌，又能加速淀粉糖化
C．酿酒时，向酿瓮中持续通入足量空气有利于缩短发酵时间
D．“沸定”说明大部分菌种不再进行细胞呼吸释放CO2，发酵完成
33．（2023·四川成都·石室中学校考模拟预测）微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，以防止杂菌污
染，请分析下列操作，错误的是（ ）
①煮沸消毒可以杀死微生物的细胞和部分芽孢
②接种操作要在酒精灯火焰附近进行
③培养基要进行高压蒸汽灭菌
④加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
⑤紫外线消毒可以对接种室、超净工作台和操作人员进行消毒，以杀死物体表面或者空气中的微生物
⑥在接种过程中，试管口、瓶口等易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌
A．①②
B．⑤⑥
C．③⑤
D．④⑤
34．（2023·四川成都·石室中学校考模拟预测）我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，
定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖， 浸于水中，…… 则所泡之菜不得坏
矣。泡菜之水， 用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……。如有霉花， 加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，
勿令其干。”下列说法正确的是（ ）
A．“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌
B．“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜
C．“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内适宜湿度
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D．对泡菜汁中的乳酸菌计数，可用稀释涂布平板法和平板划线法
35．（2023 春·山东淄博·高二校考期末）研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A 与B 的培
养基中（+代表含抗生素，+多少代表抗生素浓度，一代表不含抗生素），对两种抗生素药性分析。在37℃
环境下培养24 小时后，细菌生长情况如图。下列说法错误的是（ ）
A．为排除杂菌的影响，倒平板前需对培养基采用高压蒸汽灭菌
B．该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培养
C．长期使用抗生素A 可能会增加结核杆菌的抗药性基因频率
D．与单独使用抗生素A 相比，联合使用抗生素B 可显著增强对结核杆菌的抑制作用
36．（2023 秋·湖北武汉·高三武钢三中校考阶段练习）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。
有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出
有溶菌特性的细菌。
（1）用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供
和维生素等。
(2)A 菌通常被用作溶菌对象。研究者将含有一定浓度A 菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成
薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明 。
（3）为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样
后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A 菌的菌落周围会出现 。
采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P 菌。
（4）为探究P 菌溶解破坏A 菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实
验材料和设备：P 菌、A 菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱） 。
37．（2023 春·高二课时练习）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步
骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清
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水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T 不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发
酵）。实验流程如图所示。
回答下列问题。
（1）在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T 能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是
。
（2）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成
分，氮源的主要作用是 （答出1 点即可）。通常，可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使
用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有 （答出2 点即可）。
（3）将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的
是 。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是 。发酵液中的乙醇可用
溶液检测。
（4）本实验收集的淋洗液中的 可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相
比，本实验中乙醇生产方式的优点是 。
38．（2022·河北·统考高考真题）番茄灰霉病菌严重影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌
具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者设计了相关实验。
回答下列问题：
（1）检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时，取适量 菌液涂布于固体培养基上，将无
菌滤纸片（直径5mm）在 菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，数秒后取出滤纸片，培养皿倒置
培养后测量 大小以判定抑菌效果。
（2）枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用 （填“静置”或“摇床震荡”）培养。培
养过程中抽样检测活菌数量时，应采用 （填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”），其
原因是 。
（3）电泳分离蛋白质混合样品的原理是 。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定枯草芽孢杆菌的抗
菌蛋白分子量时，SDS 的作用是 。
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（4）枯草芽孢杆菌长期保藏时，常以其 作为保藏对象。
39．（2022·北京·统考高考真题）人体细胞因表面有可被巨噬细胞识别的“自体”标志蛋白C，从而免于
被吞噬。某些癌细胞表面存在大量的蛋白C，更易逃脱吞噬作用。研究者以蛋白C 为靶点，构建了可感应
群体密度而裂解的细菌菌株，拟用于制备治疗癌症的“智能炸弹”。
（1）引起群体感应的信号分子A 是一种脂质小分子，通常以 的方式进出细胞。细胞内外的A 随细
菌密度的增加而增加，A 积累至一定浓度时才与胞内受体结合，调控特定基因表达，表现出细菌的群体响
应。
（2）研究者将A 分子合成酶基因、A 受体基因及可使细菌裂解的L 蛋白基因同时转入大肠杆菌，制成AL
菌株。培养的AL 菌密度变化如图1。其中，AL 菌密度骤降的原因是：AL 菌密度增加引起A 积累至临界
浓度并与受体结合， 。
（3）蛋白K 能与蛋白C 特异性结合并阻断其功能。研究者将K 基因转入AL 菌，制成ALK 菌株，以期用
于肿瘤治疗。为验证ALK 菌能产生蛋白K，应以 菌株裂解的上清液为对照进行实验。请从下列选
项中选取所需材料与试剂的序号，完善实验组的方案。
实验材料与试剂：①ALK 菌裂解的上清液②带荧光标记的K 的抗体③带荧光标记的C 的抗体④肿瘤细胞
实验步骤：先加入 保温后漂洗，再加入 保温后漂洗，检测荧光强度。
（4）研究者向下图2 所示小鼠左侧肿瘤内注射ALK 菌后，发现ALK 菌只存在于该侧瘤内，两周内即观察
到双侧肿瘤生长均受到明显抑制。而向瘤内单独注射蛋白K 或AL 菌，对肿瘤无明显抑制作用。请应用免
疫学原理解释“智能炸弹”ALK 菌能有效抑制对侧肿瘤生长的原因 。
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40．（2022 秋·贵州贵阳·高三统考期中）研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期
在“科学号”考察船对中国南海科考中，中国科学家采集了某海域1146 米深海冷泉附近沉积物样品，分离、
鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
回答下列问题：
（1）研究者先制备富集培养基，然后采用 法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌
氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养物，除了稀释涂布平板法，还可采
用 法。据图分析，拟杆菌新菌株在以 为碳源时生长状况最好。
（2）研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原
因可能是 。（答一点即可）
（3）藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的
角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是 。
（4）深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，
其特性可能还有 。
41．（2023·贵州·统考模拟预测）反刍动物的瘤胃中含有分解尿素的微生物，科研小组利用图所示过程从
瘤胃中分离培养分解尿素的微生物。回答下列问题：
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（1）配制培养基时，培养基的灭菌应该在分装到各试管 （填“之前”或“之后”），培养基常用
的灭菌方法是 。为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择尿素作为氮源，不选择
NH4NO3作为氮源的原因是 。
（2）将I 得到的菌液接种到充满N2的密闭试管Ⅱ中，培养一段时间后可在试管壁的薄层培养基上获得单
菌落。与I 相比，Ⅱ所用培养基中还需要添加的物质是 。按照对O2的需求划分，所培养的微生物属于
型。
(3)Ⅲ过程中，科研小组从 （填“细胞”“种群”或“群落”）水平对微生物的种类进行了鉴定，可
根据菌落特征来初步区分不同种的微生物，原因是 。
42．（2023 春·全国·高二随堂练习）传统的农耕时代，自给自足呈现出来的美食文化，足以征服天下人的
味蕾，就如三伏天做的豆瓣酱。传统豆瓣酱的制作流程如下：
①制作霉豆瓣： 把带壳干蚕豆在水中浸泡几个小时后去壳，待其晾干，加面粉搅匀平铺在簸箕里，用南
瓜叶盖上，自然发酵七天左右，见蚕豆上长满一层霉状物即可。
②辣椒胚制作：选料去把，辣椒轧碎，加盐、加酒发酵。
③混合装坛：将霉豆瓣、辣椒胚、香辛料混合均匀，加菜籽油装坛，“翻、晒、露”。
请回答相关问题：
（1）霉豆瓣制作过程中，起主要作用的真菌是 （至少写两个），面粉主要为其生长提供： ；霉豆
瓣发酵过程中，产生了大量的酶类，其中 能把豆瓣中的蛋白质分解成易吸收的 ，使其风味更独特。
（2）辣椒胚制作时，加入白酒的目的是 。
（3）豆瓣酱制作过程中，硝酸盐会在硝酸盐还原菌的作用下转变成亚硝酸盐。有人认为过量食用豆瓣酱
会影响身体健康，是因为亚硝酸盐会转变成 ，可能对人体有致癌、致畸作用。而油封装坛后，亚硝酸
盐含量会降低，可能原因是 。
43．（2023·四川绵阳·四川省绵阳南山中学校考模拟预测）腐乳是用豆腐发酵制成的，民间老法生产腐乳
为自然发酵，现代腐乳生产多采用优良的毛霉菌种进行发酵。现代化生产流程如图。请回答下列问题：
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（1）腐乳制作时，从微生物培养的角度分析，豆腐相当于 ，豆腐中的脂肪可作为微生物生长所需
的 。含水量过高的豆腐不适宜制作腐乳，原因是 。
（2）传统制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自 ，现代腐乳生产是在严格无菌的条件下，将优良的毛霉
菌种直接接种在豆腐上，这样可以 。
（3）当豆腐上长出毛霉后，对豆腐要进行的“A 处理”是 。腐乳制作的后期要加入酒和香辛料配
制的卤汤，其中酒的含量一般控制在12%左右，原因是
（
答出两点）。
44．（2023·辽宁沈阳·沈阳市第一中学校考模拟预测）尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能
更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问
题，请分析回答：
（1）如图是利用 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步 到培养基的表面。除此
方法外，获得纯培养物的接种方法还有 。
（2）在培养基上进行划线操作中，在2 至5 区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的 。
（3）下面是两种培养基配方
①微生物纯培养的操作步骤：
（
用字母顺序回答）。
a.接种 b.配制培养基 c.灭菌 d.分离和培养
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择 (A、B）配方的培养基，在该培养基中加入
指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
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③据B 培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是
（
填“自养型”或“异养型”）。
（4）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，取
0.2ml 稀释液涂布，得到以下统计结果：
甲同学涂布了1 个平板，统计的菌落数是260；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240 和246，取平均值232；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212 和256，取平均值163；
在三位同学的统计中， 同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液
中的菌体数是 。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量 。
45．（2023·四川眉山·校考一模）啤酒生产过程大致如下：将经过灭菌的麦芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌
种后输入发酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精浓度渐渐上升，泡沫不断增多，当糖度下降到
一定程度后，结束发酵，最后分别输出有形物质和啤酒。根据上述过程，回答以下问题：
（1）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得
到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基：在基本培养基的基础上，注意 和添加高浓度葡萄糖。加琼脂后进行灭
菌，制成固体平板。
步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4：根据 筛选出突变菌。
（2）酿酒过程中，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是 ；采取该措施的原因
是 。
（3）为研究酵母菌的生长状况，需定时取样并测定pH 值。通过比较pH 大小判断取样先后顺序的主要依
据是 。
（4）小麦脱粒以后还有大量的麦秆，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，
原因是其 。请列举两种解决该问题的方法 。
46．（2023·海南·统考二模）黄曲霉素（C17H12O6）是由黄曲霉产生的，具有极强的毒性和致癌性。研究人
员利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株，部分实验过程如下图所示，请回答下列问题：
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（1）研究人员常从霉变的花生、玉米中采样，原因是 。
（2）图中1 号培养基与2 号培养基的物理状态不同，二者在成分上的主要区别是 。
（3）过程②为选择培养，常将1 号培养基置于摇床上振荡，其目的是 。
（4）过程③接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是 。2 号培养基以 为唯一碳源。
用2 号培养基计数，实验结果一般比实际活菌数 ，原因是 。
（5）经过选择培养得到了多个菌落，设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，那么
的菌落，就是能高效降解黄曲霉素的目的菌群。
47．（2023·河北·校联考二模）灌丛是荒漠生态系统中的一种重要的植被类型，某研究小组对灌丛的演替
进行研究。
（1）群落的演替是指 。
（2）如图是研究人员对灌丛生活环境调查后绘制的结构模型。统计土壤中植食性小动物的物种相对数量
的方法可选择 ，若啮齿类、鸟类同化的能量一共为a kJ，判断捕食性鸟
类和哺乳动物同化的能量是否最多为0.2a kJ 并说明原因： 。
（3）如表是灌丛演替过程中植物种类、细菌多样性指数、土壤中的氮含量的调查结果。调查细菌多样性
时，同时接种多个培养皿，为防止搞混则需要在培养皿 进行标号。研究发现表中植物种类、细菌
多样性指数、土壤中氮含量的增加是有顺序的，则最可能的先后顺序依次是 。
演替阶段
植物种类（种）
细菌多样性指数
（ACE）
土壤中氮含量（g/kg）
初级阶段
11
3 694.97±676.29
0.04±0.01
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发育阶段
12
3 939.91±510.61
0.05±0.01
成熟阶段
18
3 853.56±487.31
0.06±0.01
注：ACE 指数越大，表明丰富度越高。
48．（2023·陕西宝鸡·统考二模）控制新型冠状病毒肺炎（简称“新冠肺炎”）在医疗机构内传播既是保
护患者也是保护医务工作者乃至最后消灭疫情的关键环节之一，若医务人员在疫情初期普遍缺乏防疫意识，
会造成新冠肺炎早期防控效果不佳。回答下列问题：
（1）医务工作人员在新冠肺炎诊疗期间做好消毒和灭菌可从
（
从传染病传播的三个环节作答）等方
面有效控制新型冠状病毒的传播。简述消毒和灭菌的区别是 。煮沸消毒法是常用的消毒方法，
一般在100℃煮沸5—6min，此消毒方法的原理是 。
（2）获得纯净培养物的关键是 ，医务人员进行某些实验操作时常在酒精灯火焰附近进行，原因
是 ，实验操作时还应避免 与周围的物品相接触。
（3）对于许多医疗器械都需要进行高压蒸汽灭菌，即将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，
锅内水加热煮沸，将其中 后，再将锅密闭。
49．（2023 秋·宁夏石嘴山·高三石嘴山市第三中学校考开学考试）泡菜是一种独特且具有悠久历史的发酵
蔬菜制品，回答下列问题：
（1）泡菜发酵的原理是 。
（2）泡菜制作中，需注意控制食盐用量以及 ，否则容易造成 而导致亚硝酸盐增加，影响泡
菜品质。
（3）泡菜发酵过程中，乳酸菌的呼吸作用本来无气体产生，但是在实际腌制过程中，从外观上可以看到
泡菜瓶中有间歇性的气泡冲出，坛盖有响声，其有气泡原因可能是 。
（4）泡菜发酵过程，为确定最佳取食时间，需检测亚硝酸盐含量。回答下列问题：
补充检测步骤：①配置溶液；② ；③制备样品处理液；④ 。
检测亚硝酸盐含量的原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与 发生重氮化反应后，与N-1-萘
基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料。
50．（2023·四川眉山·校考一模）预防新冠肺炎，需要大家共同努力，出门戴口罩可以有效降低新冠病毒
的传染率。但随着新冠疫情的持续，人类消耗了大量的一次性口罩，这些口罩不及时处理会对环境造成一
定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纤维）的细菌。请回答下列问
题：
（1）分离纯化目的菌时，培养基需要以 为唯一碳源，从功能上看，该培养属于 培养基。
（2）筛选目的菌时，为了使培养基上出现的菌落尽可能都是单菌落，应采用的接种方法是 ，采
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用该方法的原因是 。菌种的长期保存方法是 。
（3）专家指出不能反复使用同一个口罩。因为口罩频繁使用会导致口罩内侧细菌的种类和数量增多，进
而引发疾病。请设计实验验证与使用一次的口罩相比，频繁使用的口罩内侧的细菌种类和数量会增多。简
要写出实验思路：（口罩使用过程中接触的环境，口罩每天使用时长等无关变量都相同）：
。
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