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必刷11 发酵工程
高频考点1 果酒和果醋的制作过程
高频考点2 泡菜的制作
高频考点3 微生物的培养技术
1.(2023·辽宁·统考高考真题)利用某种微生物发酵生产DHA 油脂,可获取DHA(一种不饱和脂肪酸)。
下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是( )
A.DHA 油脂的产量与生物量呈正相关
B.温度和溶解氧的变化能影响DHA 油脂的产量
C.葡萄糖代谢可为DHA 油脂的合成提供能量
D.12~60h,DHA 油脂的合成对氮源的需求比碳源高
【答案】D
【解析】1、发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节,在发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、
产物浓度等,以了解发酵进程,还要及时添加必需的营养组分,要严格控制温度、PH 和溶解氧等发酵条
件。
2、题图分析:横坐标为发酵时间,纵坐标为发酵过程各种相关物质的含量及生物量。从图可知,随着发
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酵的进行,葡萄糖逐渐减少,发酵到96h 左右减少至0;蛋白胨在0~12h 间快速减少,然后缓慢减少,发
酵到96 小时左右减少至0;生物量和DHA 油脂的产量随着发酵进程逐渐上升。
A.由图可知,DHA 油脂的产量随着发酵进程逐渐增加,生物量也随着发酵进程逐渐增加,它们的变化呈正
相关,A 正确;
B.由图可知,生物量与DHA 油脂的产量呈正相关,温度和溶解氧影响微生物的生长繁殖,进而影响DHA
油脂的产量,B 正确;
C.发酵液中葡萄糖被微生物吸收用于呼吸作用产生能量,供其合成DHA 油脂,C 正确;
D.DHA 油脂是一种不饱和脂肪酸,含C、H、O 不含N,所以在12~60h,DHA 油脂的合成对碳源的需求
高,不需要氮源,D 错误。
故选D。
2.(2023·辽宁·统考高考真题)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气
微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m³)。下列叙述错误的是
( )
A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C.同一稀释度下至少对3 个平板计数并取平均值
D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
【答案】D
【解析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成
这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀
释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),
再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个
细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。
A.为防止杂菌感染,接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌,对实验操作者的双手进行消
毒,A 正确;
B.纯化培养时,为防止污染培养基和水分蒸发,培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养,B 正确;
C.微生物计数时在同一稀释度下,应至少需要对3 个菌落数目在30~300 的平板进行计数,以确保实验的
准确性,C 正确;
D.使用稀释涂布平板法对微生物计数,数值往往偏小,原因是两个或多个细胞连在一起时,在平板上只能
观察到一个菌落,D 错误。
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故选D。
3.(2023·江苏·统考高考真题)下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是( )
A.通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B.通常细菌的生长速度比酵母菌快,菌落比酵母菌落大
C.通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌,酵母菌培养基用过滤除菌法除菌
D.血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定,也可用于细菌的数量测定
【答案】A
【解析】培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长
对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。灭菌常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒常用
的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
A.细菌是原核生物,酵母菌是真核生物,不同微生物对营养物质的需求是不一样,通常酵母菌培养基比细
菌培养基有更高的碳氮比,A 正确;
B.通常细菌的生长速度比酵母菌快,但形成的菌落,不一定细菌的大于酵母菌的,与细菌的种类有关,部
分细菌的菌落小于酵母菌,B 错误;
C.通常细菌和酵母菌的培养基都可以用高压蒸汽灭菌法灭菌,C 错误;
D.血细胞计数板适用于真菌的计数,细菌计数板用于细菌的数量测定等,D 错误。
故选A。
4.(2023 秋·广东广州·高三执信中学校考开学考试)高中生物学实验中,下列实验操作能达成所述目标的
是( )
A.用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离
B.向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境
C.在目标个体集中分布的区域划定样方调查种群密度
D.对外植体进行消毒以杜绝接种过程中的微生物污染
【答案】A
【解析】成熟的植物细胞有一大液泡。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原
生质层进入到外界溶液中,由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,液泡逐渐缩小,原生
质层就会与细胞壁逐渐分离开来,即发生了质壁分离。当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,外界溶液
中的水分就透过原生质层进入到细胞液中,液泡逐渐变大,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,
即发生了质壁分离复原。
A.成熟的植物细胞有中央大液泡,用高浓度蔗糖溶液处理,细胞会失水,成熟植物细胞能发生质壁分离,
因此用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离,A 正确;
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B.向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无氧环境,不能创造无菌环境,B 错误;
C.在用样方法调查种群密度时,应该做到随机取样,而不是在目标个体集中分布的区域划定样方调查种群
密度,C 错误;
D.对外植体进行消毒可以 减少外植体携带的微生物,但不能杜绝接种过程中的微生物污染,D 错误。
故选A。
5.(2023 秋·四川自贡·高三自贡市第一中学校考开学考试)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确
的是( )
A.不含氮源的平板不能用于微生物培养
B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
【答案】D
【解析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,是进行
微生物培养的物质基础。
2、按照培养基的用途,可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种
化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长。
3、消毒和灭菌是两个不同的概念,消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内
部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
A.不含氮源的平板可用于固氮菌的培养,A 错误;
B.平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中,然后在火焰上灼烧灭菌,这种操作属于灭菌,不属于消毒,
B 错误;
C.使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理,不能直接丢弃,以免污染环境,C 错误;
D.脲酶可以催化尿素分解,在以尿素为唯一氮源的平板上,能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而
进行生长繁殖,但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长,因此以尿素为唯一氮源的平板能分离
出合成脲酶的微生物,D 正确。
故选D。
6.(2023 秋·湖南怀化·高三校考开学考试)以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4 个处理:①沸盐水冷却
后再倒入坛中;②盐水需要浸没全部菜料;③盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水;④检测泡菜中亚
硝酸盐的含量。下列说法正确的是( )
A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
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C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
【答案】C
【解析】泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下,乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
(1)泡菜的制作流程是:选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
(2)选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。
(3)原料加工:将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切成条状或片状。
(4)配制盐水:按照比例配制盐水,并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌,冷却之后使用是为了保证乳酸
菌等微生物的生命活动不受影响。
(5)泡菜的制作:将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀,装入泡菜坛内,装至半坛时,放入蒜瓣、生姜及
其他香辛料,继续装至八成满,再徐徐注入配制好的盐水,使盐水没过全部菜料,盖好坛盖。在坛盖边沿
的水槽中注满水,以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。
A.盐水煮沸是为了杀灭杂菌,冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响,A 错误;
B.②盐水需要浸没全部菜料,造成无氧环境,有利于乳酸菌无氧呼吸,B 错误;
C.③盖好坛盖后,向坛盖边沿的水槽中注满水,是排气减压、隔绝空气、防止杂菌污染等,C 正确;
D.④检测泡菜中亚硝酸盐的含量,腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少,D 错误。
故选C。
7.(2023 秋·广东广州·高三广州市花都区圆玄中学校考阶段练习)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降
解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断,
下列最可能筛选到目标菌的条件组合是( )
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A.a 点时取样、尿素氮源培养基
B.b 点时取样、角蛋白氮源培养基
C.b 点时取样、蛋白胨氮源培养基
D.c 点时取样、角蛋白氮源培养基
【答案】D
【解析】筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌,要用角蛋白氮源培养基。
研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌,因此既要耐高温,又要能够高效降解
角蛋白,所以在c 点取样,并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养,所以D 正确,ABC 错误。
故选D。
8.(2023·浙江·高三统考专题练习)某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌,进行了如下实验:取泡菜汁
样品,划线接种于一定NaCl 浓度梯度的培养基,经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是( )
A.培养基pH 需偏碱性
B.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C.需在无氧条件下培养
D.分离得到的微生物均为乳酸菌
【答案】C
【解析】泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等发酵制成的。这些微生物一般
为厌氧、兼性厌氧或微好氧菌。它们的发酵产物不仅有乳酸,还会有醇、酯等,因而使泡菜具有特殊的风
味。
A.因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸,故其生活的环境是酸性,培养基pH 需偏酸性,A 错误;
B.平板划线接种时不需要稀释,B 错误;
C.乳酸菌是厌氧型微生物,所以需在无氧条件下培养,C 正确;
D.参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等,所以分离得到的微生物除了乳酸菌,还会有
其他耐高盐的微生物,D 错误。
故选C。
9.(2022·天津·高考真题)下图所示实验方法的应用或原理,不恰当的是( )
实验方法
应用
原理
A.分离绿叶中的色素
B.不同色素在层析液中溶解度不同
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C.细菌计数
D.逐步稀释
A.A
B.B
C.C
D.D
【答案】C
【解析】平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养,在线的
开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。
AB、图示为分离绿叶中的色素,常用层析法,原理是各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同,从而分离色
素,溶解度大,扩散速度快;溶解度小,扩散速度慢,AB 正确;
CD、图示为平板划线法,是分离微生物的一种方法,不能用于细菌计数,是指把混杂在一起的微生物或同
一微生物群体中的不同细胞,用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单
个细胞,并让其成长为单菌落的方法,C 错误,D 正确。
故选C。
10.(2022 秋·江苏南通·高三校考阶段练习)下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计,不合理的是(
)
A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株
B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌
【答案】D
【解析】为了筛选可分解尿素的细菌,配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源,含脲酶的微生物在该培养
基上能生长,其它微生物在该培养基上因缺乏氮源而不能生长,可用于分离含脲酶的微生物。
A.农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物,A 正确;
B.为了筛选可分解尿素的细菌,配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源,含脲酶的微生物在该培养基上能
生长,B 正确;
C.当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,C 正确;
D.在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH 升高,酚红指示
剂将变红,因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,能对分离的菌种做进一步鉴定,D 错误。
故选D。
11.(2022 秋·黑龙江大庆·高三铁人中学校考阶段练习)为探究校内植物园土壤中的细菌种类,某兴趣小
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组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是( )
A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B.培养细菌时,可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C.土壤溶液稀释倍数越低,越容易得到单菌落
D.鉴定细菌种类时,除形态学鉴定外,还可借助生物化学的方法
【答案】C
【解析】1、培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物
生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2、统计菌落数目的方法:(1)稀释涂布平板法(间接):①当样品的稀释庋足够高时,培养基表面生长
的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌;②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌
数。(2)利用显微镜直接计数。
A.采集植物园中土壤样本的原则之一是要随机采样,A 正确;
B.牛肉膏蛋白胨固体培养基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等,可用于细菌的培养,B 正
确;
C.土壤溶液稀释倍数足够高时,才能将聚集的细菌分散开,有助于在培养基表面形成单菌落,C 错误;
D.不同种类细菌的理化特性一般不同,鉴定细菌种类时,除根据菌落特征进行形态学鉴定外,还可以借助
生物化学的方法进行鉴定,D 正确。
故选C。
12.(2022·湖北·来凤一中统考二模)废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池
废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是( )
A.该生产过程中,一定有气体生成
B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
【答案】A
【解析】培养基的主要成分有水、无机盐、碳源与氮源,统计微生物的方法有稀释涂布平板法和显微镜直
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接计数法。
A.据图可知,该生产过程中有酿酒酵母的参与,酵母菌呼吸作用会产生二氧化碳,故该生产过程中,一定
有气体生成,A 正确;
B.糖类是主要的能源物质,微生物生长所需的碳源主要来源于果糖生产废水,B 错误;
C.分析图示可知,该技术中有连续搅拌反应器的过程,该操作的可以增加微生物与营养物质的接触面积,
此外也可增大溶解氧含量,故据此推测该生产工艺利用微生物的有氧发酵技术生产蛋白质,C 错误;
D.沼气生产利用的是厌氧微生物,在连续搅拌反应器中厌氧微生物会被抑制,因此沼气池废料无需灭菌,
D 错误。
故选A。
13.(2022·湖北·来凤一中统考二模)关于白酒、啤酒和果酒的生产,下列叙述错误的是( )
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
C.葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质,也存在于线粒体
D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同,但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
【答案】C
【解析】果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌是兼性厌氧型生物,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大
量繁殖,在无氧条件下,酵母菌进行酒精发酵。
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气,让酵母菌大量繁殖,再进行酒精发酵,A 正确;
B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程,如发酵初期酵母菌大量繁殖,B 正确;
CD、酒精发酵利用的菌种是酵母菌,葡萄糖转化为乙醇所需的酶存在于细胞质基质,不存在线粒体中,C
错误,D 正确。
故选C。
14.(2022 秋·福建泉州·高三校联考期中)青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时,会通过分泌青霉素杀
死细菌,以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产,关于该生产过程,下列说法
错误的是( )
A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B.可用深层通气液体发酵技术提高产量
C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中
D.青霉素具有杀菌作用,因此发酵罐不需严格灭菌
【答案】D
【解析】培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等四类营养物质。配制培养基时除了满足基本的营养
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条件外,还需满足微生物生长对特殊营养物质、pH、O2 的要求。
A.青霉菌处于葡萄糖浓度不足的环境中会通过分泌青霉素杀死细菌;提供相同含量的碳源,葡萄糖溶液单
位体积中溶质微粒较多,会导致细胞失水,发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖,乳糖是二糖,可被水解为半
乳糖和葡萄糖,是青霉菌生长的最佳碳源,可以被青霉菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件,A 正确;
B.青霉菌的代谢类型为异养需氧型,可用深层通气液体发酵技术提高产量,B 正确;
C.选育出的高产青霉素菌株经扩大培养纯化后,才可接种到发酵罐中进行工业化生产,C 正确;
D.为了防止细菌、其他真菌等微生物的污染,获得纯净的青霉素,发酵罐仍需严格灭菌,D 错误。
故选D。
15.(2023·湖南郴州·统考一模)野生型大肠杆菌菌株能在基础培养基上生长,氨基酸营养缺陷型突变株
无法合成某种氨基酸,只能在完全培养基上生长,如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图,
①②③④代表培养基,A、B、C 表示操作步骤,D、E 为菌落。下列叙述正确的是( )
A.图中①②③为完全培养基,培养基一般用湿热灭菌法进行灭菌
B.A 操作的目的是提高大肠杆菌基因突变的概率,增加突变株的数量
C.B 的正确操作是用接种环蘸取菌液后在②表面涂布来接种菌种
D.在C 过程原位影印时,用同一块无菌绒布先影印④,再影印③号培养基,可从④中挑取 D 进行纯
化培养。
【答案】B
【解析】由图分析可知,图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌,然后运用将菌种接种到两种培养基中,
分别是基本培养基、完全培养基;在基本培养基中,某氨基酸突变株不能生长,而在完全培养基中能够生
长,据此可以选择出氨基酸突变株。
A.结合题图信息分析可知,野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长,而氨基酸营养缺陷型菌株由于发
生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长,且③中只有部分菌落,故图中①②④为完全培
养基,③为基本培养基,A 错误;
B.紫外线可以提高突变的频率,而A 操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度(A 操作不能提高突变
率),即增加突变株的数量,B 正确;
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C.B 操作是将菌液滴加到培养基表面,再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面,C 错误;
D.由图观察可知,D 在基本培养基中无法生长,而在完全培养基上能够生长,据此推测D 是氨基酸营养缺
陷型菌株,若先影印④,由于④为完全培养基,会导致绒布上含有④的成分,用同一块无菌绒布无法起到
筛选作用,D 错误。
故选B。
16.(2023·湖南永州·统考一模)一般情况下,一定浓度的抗生素会杀死细菌,但变异的细菌可能产生耐
药性。为探究某种抗生素对细菌的选择作用,实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种
抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片,一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径。从抑菌圈边
缘的菌落上挑取细菌富集培养,然后重复上述步骤培养三代,结果如下表所示。下列有关叙述错误的是(
)
培养代数
平板各区域滤纸片周围抑菌圈的直径/cm
①号区域
②号区域
③号区域
④号区域
第一代
0
2.27
2.13
2.27
第二代
0
1.95
2.02
1.87
第三代
0
1.80
1.87
1.78
A.一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异
B.采用稀释涂布平板法将金黄色葡萄球菌接种到固体培养基上
C.平板中①号区域的滤纸片不含抗生素,起空白对照的作用
D.随培养代数增多,抑菌圈的直径越小,说明细菌的耐药性越强
【答案】A
【解析】1、抗生素是指由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具
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有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物,能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。抗生素的抑菌或
杀菌作用,主要是针对“细菌有而人(或其他动植物)没有”的机制进行杀伤,包含四大作用机理,即:
抑制细菌细胞壁合成、增强细菌细胞膜通透性、干扰细菌蛋白质合成、抑制细菌核酸复制转录。
2、实验原理:若病原菌对各种抗生素敏感,在该抗生素纸片周围会出现透明圈,透明圈越大,说明病原
菌对抗生素越敏感,若病原菌对各种抗生素不敏感,则不会出现透明圈。根据题干信息实验人员在接种了
金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片,故抑菌圈直径
越大说明耐药性弱,抑菌圈直径越小,细菌耐药性越强。
A.细菌耐药性的变异是在使用抗生素之前就已存在,一定浓度的抗生素起选择作用,能够筛选出具有耐药
性的细菌,A 错误;
B.稀释涂布平板法可以获得的单个菌落且便于计数,故采用稀释涂布平板法将金黄色葡萄球菌接种到固体
培养基上,B 正确;
C.为排除滤纸片对实验结果的影响,应增设空白对照组,即增加不含抗生素的滤纸片或含无菌水的滤纸片
作为对照组;平板①号区域的滤纸片不含抗生素,起空白对照的作用,C 正确;
D.根据题干信息实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗
生素的圆形滤纸片,故抑菌圈直径越小,说明细菌的耐药性越强,题表可知随培养代数增多,抑菌圈的直
径越小,说明细菌的耐药性越强,D 正确。
故选A。
17.(2023·湖南永州·统考一模)为了解生长素和细胞分裂素的用量比例对愈伤组织再分化的影响,研究
者逐渐改变MS 培养基中这两种激素的浓度比,未分化细胞群的变化情况如下图所示。下列有关叙述正确
的是( )
A.MS 培养基中除含有无机盐外,还需加入葡萄糖等有机物
B.植物激素X 和植物激素Y 分别表示细胞分裂素、生长素
C.植物激素X 和Y 的浓度比大于1 时,未分化细胞群分化形成根
D.植物激素X 的浓度越高,未分化细胞群越容易诱导分化形成芽
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【答案】B
【解析】由图可知:①当植物激素X 与植物激素Y 的浓度比等于1 时,未分化细胞群经分裂形成愈伤组织;
②当植物激素X 与植物激素Y 的浓度比大于1 时,未分化细胞群分化形成芽;③当植物激素X 与植物激素
Y 的浓度比小于1 时,未分化细胞群分化形成根;分析可知,激素X 是细胞分裂素,激素Y 是生长素;生
长素在植物组织培养中其主要作用是促进细胞的生长、分裂和分化。
A.蔗糖不是微生物利用的直接能源,可以有效减少培养基的污染;MS 培养基中除含有无机盐外,还需加
入蔗糖等有机物,A 错误;
B.生长激素可以诱导生根,细胞分裂素可以诱导生芽;分析题图,当植物激素X 为0 时,植物激素Y 促进
细胞群分化出根,当植物激素Y 为0 时,植物激素X 促进细胞群分化出芽,可知植物激素X 为细胞分裂素,
植物激素Y 为生长素,B 正确;
C.分析题图可知,植物激素X 和Y 的浓度比大于1 时,未分化细胞群分化形成芽,C 错误;
D.生长素的作用是促进细胞的伸长和分化,而细胞分裂素是促进细胞的分裂和增殖。因此在组织培养中,
如果生长素的浓度过高,就会导致细胞过度伸长和分化,而细胞分裂素则会受到抑制,从而影响组织的增
殖和生长,相反,如果细胞分裂素的浓度过高,就会导致细胞过度分裂和增殖,而细胞的伸长和分化则会
受到抑制,从而影响组织和生长和发育。在组织培养中,生长素和细胞分裂素的比例对于组织的生长和发
育至关重要,故植物激素X 的浓度越高,未分化细胞群不会越容易诱导分化形成芽,诱导形成芽,需要生
长素和细胞分裂素具有合适的比例,D 错误。
故选B。
18.(2023·湖南·校联考一模)尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素(CH4N2O)分解为氨(NH3)和CO2,
进而利用氨合成一些所需的物质。尿素分解菌的分离与纯化的培养基通常只需要将细菌的完全培养基中的
氮源作一些调整。下列有关叙述正确的是( )
A.尿素分解菌为自养生物,属于生产者
B.尿素能为尿素分解菌提供碳源和氮源
C.尿素分解菌的分离纯化需以尿素为唯一氮源
D.其他杂菌无法在分离纯化残留的培养基上生长
【答案】C
【解析】由题意可知,尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素(CH4N2O)分解为氨(NH3)和CO2,进而利
用氨合成一些所需的物质,说明尿素能为尿素分解菌提供氮源,而不能提供碳源,尿素分解菌是异养型生
物。
A.尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素(CH4N2O)分解为氨(NH3)和CO2,进而利用氨合成一些所需的
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物质,尿素是有机物,即尿素分解菌利用有机物合成其他物质,而不是利用无机物合成有机物,其为异养
生物,不属于生产者,A 错误;
B.尿素(CH4N2O)被分解为氨(NH3)和CO2,尿素分解菌利用氨合成一些所需的物质,说明尿素能为
尿素分解菌提供氮源,而不能提供碳源,B 错误;
C.尿素分解菌的分离纯化需以尿素为唯一氮源,对应的培养基为选择培养基,C 正确;
D.在分离纯化残留的培养基上有尿素分解菌的代谢产物,可能有些杂菌能在分离残留的培养基上生长,D
错误。
故选C。
19.(2023·河北秦皇岛·校考二模)精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶,不能
在缺少精氨酸的培养基上正常生长,但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱
变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图,过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在甲平板上,培
养至菌落不再增加时,平板上的菌落如图所示。过程②是将甲平板中菌落利用影印接种法(一种能达到在
一系列培养皿的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种方法)接种到乙平板,继续培养相同时间。下列相
关叙述错误的是( )
A.与甲平板中成分相比,乙平板中不含精氨酸
B.菌落A 是采用稀释涂布平板法接种后培养得到的
C.菌落B 可能是鸟氨酸发酵的优良菌种
D.野生型菌经过紫外线处理后一定能获得精氨酸依赖型菌
【答案】D
【解析】稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单
个菌落。
A.根据实验结果可以推断出乙平板中无精氨酸,因此精氨酸依赖型菌不能繁殖形成菌落,甲平板中含精氨
酸,精氨酸依赖型菌可繁殖形成菌落,A 正确;
B.平板上的菌落分布较均匀,故菌落A 是采用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果,B 正确;
C.菌落B 在甲平板上不能形成,在乙平板上可形成,可判断其为精氨酸依赖型菌,可作为鸟氨酸发酵的优
良菌种,C 正确;
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D.该培育菌种的方法为诱变育种,基因突变具有不定向性,因此不一定能筛选出精氨酸依赖型菌,D 错误。
故选D。
20.(2023·江苏苏州·校联考三模)为纯化菌种,在鉴别培养基上接种尿素分解细菌,培养结果如图所示。
下列叙述正确的是( )
A.图示采用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法
B.可用干热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌
C.该实验结果因单菌落太多,不能达到菌种纯化的目的
D.培养基中的尿素被分解后,可使酚红指示剂变为红色
【答案】D
【解析】图示为平板划线法,划线的起始区是Ⅰ区,Ⅲ区为最后划线区。
A.图示采用的接种方法为平板划线法,A 错误;
B.可用湿热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌,B 错误;
C.该实验Ⅲ区有单菌落,可以达到菌种纯化目的,C 错误;
D.培养基中的尿素被分解后呈碱性,可使酚红指示剂变为红色,D 正确。
故选D。
21.(2023 春·浙江·高二课堂例题)某同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋,下列相关叙述正确的是
( )
A.果酒发酵时,每日放气需迅速,避免空气回流入发酵容器
B.果酒发酵时,用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化,砖红色沉淀逐日增多
C.果醋发酵时,发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时
D.果醋发酵时,用重铬酸钾测定醋酸含量变化时,溶液灰绿色逐日加深
【答案】C
【解析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气、糖
源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为
醋酸。
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A.酒精发酵是利用酵母菌的无氧呼吸,随着果酒发酵的进行,装置内会产生气体(二氧化碳),容器内压
强大于外界,所以空气不会回流,A 错误;
B.果酒发酵时,发酵液中的葡萄糖不断被消耗,因此用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化,砖红色沉
淀逐日减少,B 错误;
C.以酒精为底物进行醋酸发酵,酒精与氧气发生反应产生醋酸和水,几乎没有气泡产生,发酵液产生的气
泡量明显少于果酒发酵时,C 正确;
D.酸性的重铬酸钾用于检测酒精,不能用于测定醋酸含量,D 错误。
故选C。
22.(2023·河北保定·统考二模)酸笋是“螺蛳粉的灵魂”。在自然发酵过程中,酸笋中的乳酸菌作为主
要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质,形成了螺蛳粉的特殊风味。下列叙述错误的是( )
A.酸笋发酵过程中的乳酸菌属于单细胞原核生物
B.从发酵液中分离纯化乳酸菌时可采用稀释涂布平板法或平板划线法
C.硫化氢气体是蛋白质分解后含硫氨基酸的代谢产物之一
D.乳酸菌在发酵初期会出现种群数量的“J”形增长
【答案】D
【解析】由原核细胞构成的生物叫原核生物,由真核细胞构成的生物叫真核生物;原核细胞与真核细胞相
比,最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核,没有核膜、核仁和染色体,原核细胞只有核
糖体一种细胞器,但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构,也含有核酸和蛋白质等物质。
A.乳酸菌是细菌,属于单细胞原核生物,A 正确;
B.稀释涂布平板法与平板划线法是最常用的两种微生物分离纯化方法,分离乳酸菌可任选其中一个,B 正
确;
C.从题干中“作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质”可知,硫化氢气体是蛋白质分解后氨基酸的
代谢产物之一,C 正确;
D.只有在食物和空间条件充裕、气候适宜、没有敌害等条件下才形成“J”形增长,而在自然发酵过程中还
有很多微生物与乳酸菌进行种间竞争,D 错误。
故选D。
23.(2023·河北沧州·沧州市第二中学校联考三模)黑曲霉是一种丝状真菌,是重要的发酵工业菌种,其
代谢产物广泛应用于食品加工等领域。黑曲霉的PDA 液体产酶培养基组成为麸皮、豆粉饼、(NH4)
2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4,培养时需要通气振荡。下列说法错误的是( )
A.黑曲霉的代谢类型为异养需氧型
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B.上述培养基需要灭菌后将pH 调至酸性
C.豆粉饼可提供黑曲霉生长所需的碳源和氮源
D.工业化生产时,黑曲霉接种前一般要进行扩大化培养
【答案】B
【解析】各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素
的物质)和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
A.由题意可知,培养黑曲霉菌需要添加有机碳源且需要通气振荡,因此该菌的代谢类型为异养需氧型,A
正确;
B.调节pH 应该在灭菌之前进行,B 错误;
C.豆粉饼中含有蛋白质、糖类等,可提供黑曲霉生长所需的碳源和氮源,C 正确;
D.工业化生产时,发酵罐体积大,所需大量的微生物数,因此黑曲霉接种前一般要进行扩大化培养,增加
菌种的数量,D 正确。
故选B。
24.(2023 秋·江苏南通·高三校考阶段练习)发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。 下
列叙述正确的是( )
A.菌落的大小、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B.筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产
C.单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质,常用作微生物饲料等
D.在生产酸奶时采用巴氏消毒法,杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分
【答案】D
【解析】发酵工程是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或
直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种
子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯(生物分离工程)等方面。
A.菌落的大小、颜色、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据,但是有无荚膜通过肉眼无法
观察,A 错误;
B.筛选出能高产柠檬酸的黑曲霉菌种后还需要进一步扩大化培养才能接种到发酵罐中进行发酵生产,B 错
误;
C.单细胞蛋白是微生物菌体,不是从微生物细胞中提取的蛋白质,C 错误;
D.在生产酸奶时采用巴氏消毒法,比较温和的消毒方法,杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分,D 正
确。
故选D。
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25.(2023·河北保定·河北省唐县第一中学校考二模)“寒霜屡下,园菜渐肥。取而曝之,俟略干,置缸
中,腌以盐。旬余,便可取食。若藏之于瓮,泥封其口,虽留至明年,犹可食也。”以上为小古文《腌
菜》。下列有关说法正确的是( )
A.古人多选择在秋冬季节腌菜与乳酸菌的最适温度低有关
B.为成功制得腌菜,可将“园菜”和“瓮”用沸水泡烫片刻
C.腌菜时“泥封其口”是为了创造无氧环境,减少杂菌污染
D.“旬余,便可取食”与发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低有关
【答案】C
【解析】1、泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌在无氧条件下,乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
2、乳酸菌是原核生物,代谢类型为异养厌氧型。
A.古人多选择在秋冬季节腌菜是因为春夏季节时温度高,杂菌繁殖速度快,容易导致菜腐烂变质,A 错误;
B.“园菜”不能用沸水泡烫,因为传统发酵过程中制作腌菜所需乳酸菌主要来自蔬菜表面,B 错误;
C.腌菜时“泥封其口”的目的是创造无氧环境,因为无氧且酸度较高的条件可减少杂菌污染,C 正确;
D.“旬余,便可取食”,是因为发酵过程中亚硝酸盐含量先升高后逐渐降低并于10 日左右达到最低点,故
需一段时间后方可食用腌菜,D 错误。
故选C。
26.(2023 春·高二课时练习)某培养基成分如下:
葡萄糖4~10g,(NH4)2SO44g,K2HPO47g,KH2PO42g,MgSO41g,CaCl20.02g,
微量元素(Fe、Co、Mn、Zn、Cu、Ni、Mo)各2~10μg,蒸馏水1000mL,pH7.2.
下列相关叙述正确的是( )
A.从培养基组成来看,该培养基属于固体培养基
B.从培养基的pH 分析该培养基可用于培养霉菌
C.去掉(NH4)2SO4,该培养基可用于选择培养固氮微生物
D.微量元素在生物体中含量很少,培养基中可以不加或少加
【答案】C
【解析】人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质—培养基,用以培养、
分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
A.从培养基组成来看,该培养基属于合成培养基,因其不含凝固剂琼脂,属于液体培养基,A 错误;
B.该培养基的pH 为7.2 是弱碱性,适于细菌的培养,霉菌培养需将pH 调至酸性,B 错误;
C.去掉(NH4)2SO4 后,培养基成分缺乏氮源,只有固氮微生物能生长,故可用于固氮微生物的培养,C
正确;
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D.微量元素在生物体内的含量少,但作用很重要,是生物体必不可少的成分,培养基中必须添加,D 错误。
故选按C。
27.(2023 春·高二课时练习)熔喷布是生产口罩的重要材料,主要成分是聚丙烯,废弃口罩会对环境造
成污染。某人从土壤中分离到一种能分解聚丙烯的细菌。下列说法错误的是( )
A.制备培养基时需要先将培养基的pH 调节至中性或弱碱性,再灭菌、倒平板
B.以聚丙烯为唯一碳源的培养基,按功能划分,该培养基属于选择培养基
C.从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌,可采用平板划线法、稀释涂布平板法接种
D.对该菌进行扩大培养时,应持续增加培养液中营养物质浓度,以提高菌种密度
【答案】D
【解析】1、稀释涂布平板法:将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,
使成单个细胞存在,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。
2、平板划线法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞,用接种环在平板表面上作多次
由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞,并让其成长为单菌落的方法。
A.培养细菌时,需将培养基调至中性或弱碱性,A 正确;
B.用以聚丙烯为唯一碳源的培养基来筛选能分解聚丙烯的细菌,按功能划分,该培养基属于选择培养基,
B 正确;
C.从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌,可采用的接种法有平板划线法和稀释涂布平板法,C 正确;
D.在对该菌进行扩大培养时,不能持续增加培养液中营养物质的浓度,因为持续增加培养液中营养物质的
浓度,细菌会渗透失水,影响其生长繁殖,D 错误。
故选D。
28.(2023 春·全国·高二课堂例题)垃圾的生物处理是指利用生物(主要是微生物),将垃圾中的有机物
转化为稳定的产物、能源和其他有用的物质的一种处理技术。下列有关叙述不合理的是( )
A.降解塑料(成分是聚乙烯)垃圾,需用聚乙烯作唯一碳源的培养基筛选菌种
B.筛选降解石油的细菌时,培养基及接种工具分别需要干热灭菌和灼烧灭菌
C.厌氧技术处理生活垃圾,产生沼气,实现了生活垃圾的能源化
D.春季播种前利用微生物堆肥处理农田秸秆,有利于提高土壤储碳量
【答案】B
【解析】选择培养基是指允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。获
得纯净的培养物关键是防止外来杂菌的入侵。微生物接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
A.降解塑料(成分是聚乙烯)垃圾,需用聚乙烯作唯一碳源的选择培养基筛选菌种 ,能在该选择培养基
生存的菌种才能降解塑料垃圾,A 不符合题意;
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B.微生物的培养基的灭菌方式是湿热灭菌,接种工具可灼烧灭菌,B 符合题意;
C.厌氧技术处理生活垃圾,产生沼气,沼气可以作为燃料或发电,实现了生活垃圾的能源化 ,C 不符合题
意;
D.春季播种前利用微生物堆肥处理农田秸秆,将秸秆中的纤维素等有机物分解为小分子有机物,有利于提
高土壤储碳量 ,D 不符合题意。
故选B。
29.(2023 春·高二课时练习)下列关于微生物实验操作的叙述正确的是( )
A.对酵母菌细胞进行计数时,通常使用细菌计数板
B.平板划线时,只有在最后一个划线区域才可得到所需单菌落
C.在统计样品活菌数时,需对每个稀释度进行涂布培养并计数
D.在平板上划线和涂布时,均需避免弄破培养基表面
【答案】D
【解析】统计菌落数目的方法
(1)显微镜直接计数法 ①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品
中微生物数量;②方法:用计数板计数;③缺点:不能区分死菌与活菌。
(2)间接计数法(活菌计数法) ①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源
于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
A.酵母菌属于真菌,对酵母菌细胞进行计数时,通常使用血细胞计数板,A 错误;
B.平板划线时,一般在最后一个划线区域可得到所需单菌落,B 错误;
C.在统计样品活菌数时,并不需对每个稀释度进行涂布培养并计数,较为理想的计数平板在涂布培养后菌
落数应在 30-300 之间,要得到这样的适合计数的平板,C 错误;
D.在平板上划线和涂布时,均需避免弄破培养基表面,否则会导致不能形成正常菌落,D 正确。
故选D。
30.(2023 春·高二课时练习)研究人员以黑豆为原料运用混合菌种固体发酵技术制作黑豆豉,并对黑豆
与黑豆豉的8 种游离必需氨基酸含量进行检测,结果如表,下列相关分析中,错误的是( )
赖
氨酸
苏
氨酸
亮
氨酸
异亮
氨酸
色
氨酸
甲硫
氨酸
缬
氨酸
苯丙
氨酸
黑豆
5.94
3.65
7.36
4.46
1.01
1.20
5.03
5.32
黑豆
豉
20.4
9.8
20.4
14.1
-
19.2
21.9
34.8
注:单位为mg/100g
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A.8 种氨基酸之间的区别在于 R 基不同
B.与黑豆相比,黑豆鼓更易于消化吸收
C.与黑豆相比,黑豆豉有机物种类减少
D.苯丙酮尿症患儿不宜食用黑豆豉
【答案】C
【解析】构成蛋白质的基本单位是氨基酸,每种氨基酸分子至少都含有一个氨基和一个羧基,且都有一个
氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上,这个碳原子还连接一个氢和一个R 基,氨基酸的不同在于R 基的
不同。
A.构成生物体的氨基酸分子至少都含有一个氨基和一个羧基,且都有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳
原子上,这个碳原子还连接一个氢和一个R 基,氨基酸之间的区别在于R 基不同,A 正确;
BC、黑豆在混合菌种固体发酵技术制作成黑豆豉,经过微生物的分解作用,产生一些中间代谢产物,与黑
豆相比,黑豆豉有机物种类增多,氨基酸含量增多,更易于消化吸收,B 正确,C 错误;
D.苯丙酮尿症表现为苯丙氨酸代谢异常,产生的苯丙酮酸增多,苯丙酮酸会阻碍脑的发育,造成智力低下,
而黑豆豉富含苯丙氨酸,因此,苯丙酮尿症患儿不宜食用黑豆豉,D 正确。
故选C。
31.(2023 秋·天津武清·高三天津市武清区杨村第一中学校考开学考试)被誉为“岭南佳果”的荔枝,味
道鲜美、营养丰富,其鲜果是酿酒的良好材料。下列关于制作荔枝果酒叙述错误的是( )
A.工业发酵前需蒸煮荔枝汁,可除去荔枝中的杂菌,利于酵母菌繁殖
B.在荔枝汁发酵液中添加适量蔗糖,有利于酵母菌繁殖和代谢
C.为增加荔枝果酒的产量,将发酵液装入发酵瓶时应尽可能装满
D.对荔枝果酒产品进行装罐前需要杀菌,应在62~65℃消毒30min
【答案】C
【解析】参与果酒制作的微生物是酵母菌,其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是
醋酸菌,其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的
葡萄糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
A.工业发酵时所需的菌种可通过筛选后培养,故发酵前需蒸煮荔枝汁,可除去荔枝中的杂菌,利于酵母菌
繁殖,A 正确;
B.在荔枝汁发酵液中添加适量蔗糖,除了可以让果酒口感更甜以外,还可以提高酒精度,B 正确;
C.制作葡萄酒的过程中,把葡萄浆装入发酵瓶,装量不要超过2/3,既可为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气,
又可防止发酵旺盛时产生CO2 而造成汁液溢出,C 错误;
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D.将发酵好的山楂果醋在上市前需要在62~65℃消毒30min 目的是杀死其中的微生物,同时防止果醋的营
养物质被破坏,D 正确。
故选C。
32.(2023·海南·统考模拟预测)《齐民要术》是我国古代的一部有很高科学价值的“农业百科全书”,
其在记叙酿酒方法时指出蒸软的米要“舒(摊开)使极冷,然后纳之(下酿瓮中去)”,酿酒完成的标志
是“味足沸定”。下列相关叙述错误的是( )
A.“舒使极冷,然后纳之”可避免高温杀死发酵所需的菌种
B.将米蒸软既有助于杀灭杂菌,又能加速淀粉糖化
C.酿酒时,向酿瓮中持续通入足量空气有利于缩短发酵时间
D.“沸定”说明大部分菌种不再进行细胞呼吸释放CO2,发酵完成
【答案】C
【解析】果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌是兼性厌氧微生物,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大
量繁殖,把糖分解成二氧化碳和水;在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。
A.舒令极冷是将米饭推开,可防止熟米温度过高,从而导致发酵微生物死亡,A 正确;
B.将米蒸软可以杀灭杂菌,同时又能加速淀粉糖化,为发酵作准备,B 正确;
C.酒精发酵需要在无氧条件下进行,故需要密封瓮体,因此,不需要向酿瓮中持续通入足量空气,C 错误;
D.“沸定”说明大部分菌种不再进行细胞呼吸释放CO2,发酵完成,此时酒精含量较高,糖分基本消耗完,
D 正确。
故选C。
33.(2023·四川成都·石室中学校考模拟预测)微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,以防止杂菌污
染,请分析下列操作,错误的是( )
①煮沸消毒可以杀死微生物的细胞和部分芽孢
②接种操作要在酒精灯火焰附近进行
③培养基要进行高压蒸汽灭菌
④加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
⑤紫外线消毒可以对接种室、超净工作台和操作人员进行消毒,以杀死物体表面或者空气中的微生物
⑥在接种过程中,试管口、瓶口等易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌
A.①②
B.⑤⑥
C.③⑤
D.④⑤
【答案】D
【解析】1、使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌,常用的
方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。
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2、消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有
煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
100℃
①
煮沸5~6min 可以杀死微生物细胞和一部分芽孢,①正确;
②酒精灯火焰附近存在一个无菌区,为了无菌操作,接种操作要在酒精灯火焰附近进行,②正确;
③培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,该方法应注意将压力达到预定要求,③正确;
④指示剂和染料混有微生物,故加入培养基前需灭菌,④错误;
⑤接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可以用紫外线消毒,但不能对操作人员进行紫外线消毒,⑤错
误;
⑥将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属工具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以
迅速彻底地灭菌,此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰燃烧来灭菌,
⑥正确。
综上所述,错误的是④⑤。ABC 不符合题意,D 符合题意。
故选D。
34.(2023·四川成都·石室中学校考模拟预测)我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载:“泡盐菜法,
定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式,四周内可盛水;坛口覆一盖, 浸于水中,…… 则所泡之菜不得坏
矣。泡菜之水, 用花椒和盐煮沸,加烧酒少许。……。如有霉花, 加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换,
勿令其干。”下列说法正确的是( )
A.“泡菜之水,用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌
B.“霉花”主要由酵母菌繁殖形成,酵母菌往往来自蔬菜
C.“坛沿外水须隔日一换,勿令其干”以保证坛内适宜湿度
D.对泡菜汁中的乳酸菌计数,可用稀释涂布平板法和平板划线法
【答案】B
【解析】1、泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下,乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
2、泡菜的制作过程:将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀,装入泡菜坛内,装至半坛时,放入蒜瓣、生姜
及其他香辛料,继续装至八成满,再徐徐注入配制好的盐水,使盐水没过全部菜料,盖好坛盖。向坛盖边
沿的水槽中注满水,以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。
发酵时间长短受室内温度的影响。
A.“泡菜之水,用花椒和盐煮沸”的目的包括提升泡菜味道、减少水中的溶氧量和消毒杀菌防止杂菌污染,
A 错误;
B.“霉花”指的是泡菜坛内表面的白膜,主要由酵母菌繁殖形成,而酵母菌往往来自蔬菜,B 正确;
C.“坛沿外水须隔日一换,勿令其干”以保证坛内的无氧环境,C 错误;
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D.分离泡菜汁中的乳酸菌,可用稀释涂布平板法,不可用平板划线法,D 错误。
故选B
35.(2023 春·山东淄博·高二校考期末)研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A 与B 的培
养基中(+代表含抗生素,+多少代表抗生素浓度,一代表不含抗生素),对两种抗生素药性分析。在37℃
环境下培养24 小时后,细菌生长情况如图。下列说法错误的是( )
A.为排除杂菌的影响,倒平板前需对培养基采用高压蒸汽灭菌
B.该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌,待菌液被吸收后方可倒置培养
C.长期使用抗生素A 可能会增加结核杆菌的抗药性基因频率
D.与单独使用抗生素A 相比,联合使用抗生素B 可显著增强对结核杆菌的抑制作用
【答案】D
【解析】微生物培养需要用到培养基,根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物的
培养的关键是无菌操作,需要对操作环境和操作者进行消毒,同时如果培养基、接种工具、培养器具不能
彻底灭菌,培养过程中被杂菌污染都会导致微生物的培养失败。
A.为排除杂菌的影响,应该用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,然后冷却到50℃左右倒平板,A 正确;
B.如图,菌落分布均匀,是利用了稀释涂布平板法接种结核杆菌,待菌液被吸收后方可倒置培养,B 正确;
C.长期使用抗生素A,在抗生素A 的选择作用下,结核杆菌的抗药性基因频率可能会增加,C 正确;
D.根据图中平板上菌落的分布可知,与单独使用抗生素A 相比,联合使用抗生素B 不能增强对结核杆菌的
抑制作用,D 错误。
故选D。
36.(2023 秋·湖北武汉·高三武钢三中校考阶段练习)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。
有些细菌具有溶菌特性,能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出
有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分,其中蛋白胨主要为细菌提供
和维生素等。
(2)A 菌通常被用作溶菌对象。研究者将含有一定浓度A 菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上,凝固形成
薄层。培养一段时间后,薄层变浑浊(如图),表明 。
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(3)为分离出具有溶菌作用的细菌,需要合适的菌落密度,因此应将含菌量较高的湖泊水样
后,依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后,能溶解A 菌的菌落周围会出现 。
采用这种方法,研究者分离、培养并鉴定出P 菌。
(4)为探究P 菌溶解破坏A 菌的方式,请提出一个假设,该假设能用以下材料和设备加以验证(主要实
验材料和设备:P 菌、A 菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱) 。
【答案】(1)氮源、碳源
(2)A 菌能在培养平板中生长繁殖
(3) 稀释 溶菌圈
(4)假设P 菌通过分泌某种化学物质使A 菌溶解破裂
【解析】微生物的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等。微生物的培养基按其特殊用途可分为选择
性培养基和鉴别培养基,培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)蛋白胨主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等。
(2)将含有一定浓度A 菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上,凝固形成薄层。培养一段时间后,薄层
变浑浊,表明A 菌能在培养平板中生长繁殖。
(3)将含菌量较高的湖泊水样稀释后,依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后,能溶解A
菌的菌落周围会出现溶菌圈。
(4)根据实验材料和设备,圆形滤纸小片可用于吸收某种物质,离心机可用于分离菌体和细菌分泌物,
为探究P 菌溶解破坏A 菌的方式,可假设P 菌通过分泌某种化学物质使A 菌溶解破裂。
37.(2023 春·高二课时练习)某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步
骤是:先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中,喷水浸润、接种菌T,培养一段时间后,再用清
水淋洗秸秆堆(清水淋洗时菌T 不会流失),在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌,进行乙醇发酵(酒精发
酵)。实验流程如图所示。
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回答下列问题。
(1)在粉碎的秸秆中接种菌T,培养一段时间后发现菌T 能够将秸秆中的纤维素大量分解,其原因是
。
(2)采用液体培养基培养酵母菌,可以用淋洗液为原料制备培养基,培养基中还需要加入氮源等营养成
分,氮源的主要作用是 (答出1 点即可)。通常,可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使
用该方法时,为了达到良好的灭菌效果,需要注意的事项有 (答出2 点即可)。
(3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中,拧紧瓶盖,置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的
是 。但是在酵母菌发酵过程中,还需适时拧松瓶盖,原因是 。发酵液中的乙醇可用
溶液检测。
(4)本实验收集的淋洗液中的 可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相
比,本实验中乙醇生产方式的优点是 。
【答案】(1)菌T 能够分泌纤维素酶
(2) 为合成微生物细胞结构提供原料(微生物细胞中的含氮物质,如核酸、蛋白质、磷脂) ①把
锅内的水加热煮沸,将其中原有的冷空气彻底排除;②为达到良好的灭菌效果,一般在压力为100 kPa,
温度为121℃的条件下,维持15~30 min;③无菌包不宜过大,不宜过紧,各包裹间要有间隙,使蒸汽能对
流易渗透到包裹中央,有利于蒸汽流通;④灭菌完成后,应使锅内蒸气压力缓慢降低,排气时间不少于10
一12 分钟。
(3) 制造无氧环境 排出二氧化碳 酸性的重铬酸钾溶液
(4) 葡萄糖 节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广
【解析】果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌是兼性厌氧微生物,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大
量繁殖,把糖分解成二氧化碳和水;在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌
无氧呼吸产生酒精,酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~30℃;生产中是否有酒精的产生,可用酸性
重铬酸钾来检验,该物质与酒精反应呈现灰绿色。
(1)菌T 能够分泌纤维素酶,纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖,因此在粉碎的秸秆中接种菌T,培
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养一段时间后发现菌T 能够将秸秆中的纤维素大量分解。
(2)培养基的主要成分:水、碳源、氮源、无机盐,其中氮源主要为合成微生物的细胞结构提供原料
(微生物细胞中的含氮物质,如核酸、蛋白质、磷脂)。 高压蒸汽灭菌法的注意的事项有①把锅内的水
加热煮沸,将其中原有的冷空气彻底排除后,将锅密闭,如果高压锅内的空气未排除或未完全排除,则蒸
汽不能达到饱和,蒸汽的温度未达到要求的高度,结果导致灭菌的失败;②为达到良好的灭菌效果,一般
在压力为100 kPa,温度为121℃的条件下,维持15~30 min;③无菌包不宜过大,不宜过紧,各包裹间要
有间隙,使蒸汽能对流易渗透到包裹中央,有利于蒸汽流通;④灭菌完成后,应使锅内蒸气压力缓慢降低,
排气时间不少于10 一12 分钟,否则锅内蒸气压力突然降低,液体突然沸腾,冲走瓶盖,使液体喷出或使
容器破裂。
(3)果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精,将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行酒精发酵,酒
精发酵需要在无氧的条件下进行,此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒
精和二氧化碳,在发酵过程中密闭,所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳,酒精可用酸性重
铬酸钾溶液来检测,该物质与酒精反应呈现灰绿色。
(4)与以粮食为原料发酵生产乙醇相比,利用纤维素为原料生产乙醇具有节约粮食、废物利用、清洁环
保、不污染环境、生产成本低、原料来源广等优点。
38.(2022·河北·统考高考真题)番茄灰霉病菌严重影响番茄生产,枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌
具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治,研究者设计了相关实验。
回答下列问题:
(1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时,取适量 菌液涂布于固体培养基上,将无
菌滤纸片(直径5mm)在 菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心,数秒后取出滤纸片,培养皿倒置
培养后测量 大小以判定抑菌效果。
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,液体培养时应采用 (填“静置”或“摇床震荡”)培养。培
养过程中抽样检测活菌数量时,应采用 (填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”),其
原因是 。
(3)电泳分离蛋白质混合样品的原理是 。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定枯草芽孢杆菌的抗
菌蛋白分子量时,SDS 的作用是 。
(4)枯草芽孢杆菌长期保藏时,常以其 作为保藏对象。
【答案】(1) 番茄灰霉病菌 枯草芽孢杆菌 抑菌圈
(2) 摇床震荡 稀释涂布平板法 用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个
活细胞,而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内
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(3) 利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不
同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离 SDS 带有大量的负电荷,且能使蛋白质变性成为肽
链,使蛋白质的迁移速率只与蛋白质的相对分子质量有关,而与所带电荷性质无关
(4)菌液
【解析】统计菌落数目的方法:
(1)显微镜直接计数法
原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。
(2)间接计数法(活菌计数法)
原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.通过统
计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(1)分析题意,要检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用,先把适量的番茄灰霉病菌菌液涂布于
固体培养基上,将无菌滤纸片在枯草芽孢杆菌菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心,若对番茄灰霉病菌有
抑制作用,被覆盖的位置的番茄灰霉病菌就会被杀死,培养皿倒置培养后会出现抑菌圈,测量抑菌圈大小
以判定抑菌效果强弱。
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,采用摇床震荡培养可增大培养液的溶氧量,有利于枯草芽孢杆菌的生
长繁殖。培养过程中要抽样检测活菌数量,应该采用稀释涂布平板法,用稀释涂布平板法在培养基上看到
的每一个菌落都来自一个活细胞,而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内。
(3)电泳分离蛋白质混合样品的原理是:利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身的大小、
形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。SDS 带有大量的负电荷,
且能使蛋白质变性成为肽链,使蛋白质的迁移速率只与蛋白质的相对分子质量有关,而与所带电荷性质无
关。
(4)长期保藏枯草芽孢杆菌,应该将培养的菌液转移到灭菌好的甘油瓶中,与甘油充分混合,放在-20℃
的冷冻箱中保存。
39.(2022·北京·统考高考真题)人体细胞因表面有可被巨噬细胞识别的“自体”标志蛋白C,从而免于
被吞噬。某些癌细胞表面存在大量的蛋白C,更易逃脱吞噬作用。研究者以蛋白C 为靶点,构建了可感应
群体密度而裂解的细菌菌株,拟用于制备治疗癌症的“智能炸弹”。
(1)引起群体感应的信号分子A 是一种脂质小分子,通常以 的方式进出细胞。细胞内外的A 随细
菌密度的增加而增加,A 积累至一定浓度时才与胞内受体结合,调控特定基因表达,表现出细菌的群体响
应。
(2)研究者将A 分子合成酶基因、A 受体基因及可使细菌裂解的L 蛋白基因同时转入大肠杆菌,制成AL
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菌株。培养的AL 菌密度变化如图1。其中,AL 菌密度骤降的原因是:AL 菌密度增加引起A 积累至临界
浓度并与受体结合, 。
(3)蛋白K 能与蛋白C 特异性结合并阻断其功能。研究者将K 基因转入AL 菌,制成ALK 菌株,以期用
于肿瘤治疗。为验证ALK 菌能产生蛋白K,应以 菌株裂解的上清液为对照进行实验。请从下列选
项中选取所需材料与试剂的序号,完善实验组的方案。
实验材料与试剂:①ALK 菌裂解的上清液②带荧光标记的K 的抗体③带荧光标记的C 的抗体④肿瘤细胞
实验步骤:先加入 保温后漂洗,再加入 保温后漂洗,检测荧光强度。
(4)研究者向下图2 所示小鼠左侧肿瘤内注射ALK 菌后,发现ALK 菌只存在于该侧瘤内,两周内即观察
到双侧肿瘤生长均受到明显抑制。而向瘤内单独注射蛋白K 或AL 菌,对肿瘤无明显抑制作用。请应用免
疫学原理解释“智能炸弹”ALK 菌能有效抑制对侧肿瘤生长的原因 。
【答案】(1)自由扩散
(2)启动L 蛋白表达引起AL 菌短时间内大量裂解
(3) AL
/
①④
②③
(4)注入瘤内的ALK 菌群体裂解后释放的蛋白K 与蛋白C 结合,且释放的细菌产物激活巨噬细胞,从而
增强了巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用,巨噬细胞加工呈递肿瘤抗原,激活细胞免疫,肿瘤细胞被特异性
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杀伤,因此有效抑制对侧肿瘤生长。
【解析】1、免疫系统对病原体的识别:在人体所有细胞膜的表面,有一组作为分子标签来起作用的蛋白
质,它们能被自身的免疫细胞所识别。病毒、细菌等病原体也带有各自的身份标签,当它们侵入人体后,
能被免疫细胞识别出来。免疫细胞是靠细胞表面的受体来辨认它们的。
2、体液免疫与细胞免疫的关系:B 细胞和细胞毒性T 细胞的活化离不开辅助性T 细胞的辅助;体液免疫中
产生的抗体,能消灭细胞外液中的病原体;而消灭侵入细胞内的病原体,要依靠细胞免疫将靶细胞裂解,
使病原体失去藏身之所,此时体液免疫又能发挥作用了。
(1)引起群体感应的信号分子A 是一种脂质小分子,脂溶性的小分子物质通常以自由扩散的方式进出细
胞。
(2)由图可知,AL 菌密度达到相应的值后会骤降,而L 蛋白可使细菌裂解。可推测AL 菌密度骤降的原
因是,AL 菌密度增加引起A 积累至临界浓度并与受体结合,启动L 蛋白表达引起AL 菌短时间内大量裂解。
(3)AL 菌株不含K 基因,ALK 菌株含K 基因,因此,为验证ALK 菌能产生蛋白K,应以AL 菌株裂解
的上清液为对照进行实验。某些癌细胞表面存在大量的蛋白C,蛋白K 能与蛋白C 特异性结合并阻断其功
能,为验证ALK 菌能产生蛋白K,可用带荧光标记的K 的抗体,如果有K 蛋白生成,则K 蛋白与K 的抗
体结合,可发出荧光;由于蛋白K 能与蛋白C 特异性结合,因此也可用带荧光标记的C 的抗体,如果有蛋
白K 生成,对照组与实验组荧光强度会有差异。具体的实验步骤为,先加入①ALK 菌裂解的上清液和④
肿瘤细胞,保温后漂洗,再加入②带荧光标记的K 的抗体或加入③带荧光标记的C 的抗体,保温后漂洗,
检测荧光强度。
(4)“智能炸弹”ALK 菌能有效抑制对侧肿瘤生长是因为注入瘤内的ALK 菌群体裂解后释放的蛋白K 与
蛋白C 结合,且释放的细菌产物激活巨噬细胞,从而增强了巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用,巨噬细胞加
工呈递肿瘤抗原,激活细胞免疫,肿瘤细胞被特异性杀伤,因此有效抑制对侧肿瘤生长。而单独注射蛋白
K 不能有效激活细胞免疫,单独注射AL 菌也无法阻断蛋白C 的功能。
40.(2022 秋·贵州贵阳·高三统考期中)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期
在“科学号”考察船对中国南海科考中,中国科学家采集了某海域1146 米深海冷泉附近沉积物样品,分离、
鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
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回答下列问题:
(1)研究者先制备富集培养基,然后采用 法灭菌,冷却后再接入沉积物样品,28℃厌
氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物,为了获得纯种培养物,除了稀释涂布平板法,还可采
用 法。据图分析,拟杆菌新菌株在以 为碳源时生长状况最好。
(2)研究发现,将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来,推测其原
因可能是 。(答一点即可)
(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质,通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的
角度考虑,拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是 。
(4)深海冷泉环境特殊,推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,除具有酶的一般共性外,
其特性可能还有 。
【答案】(1) 高压蒸汽灭菌 平板划线 纤维素
(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活)
(3)拟杆菌作为分解者,将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物,归还到无机环境中,有利
于碳循环的顺利进行
(4) 耐低温
【解析】进行微生物纯种培养物时,人们需要按照微生物对营养物质的不同需求配制培养基;还需要防止
杂菌污染,无菌技术主要包括消毒和灭菌。获得微生物纯培养物的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板
法。
(1)培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。可以采用稀释涂布平板法或平板划线法,将单个微生物
分散在固体培养基上,经过培养得到单菌落,从而获得纯净培养物。分析图12 可知,在以纤维素为碳源的
培养基中,细胞数量最多,可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。
(2)深海冷泉中可能存在某些微生物,只有利用冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定
环境中才能存活),故将采集的样品置于各种培养基中培养,仍可能有很多微生物不能被分离筛选出来。
(3)拟杆菌为异养生物,作为该生态系统的分解者,能将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机
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物,归还到无机环境中,有利于碳循环的顺利进行。
(4)深海冷泉温度较低,故生活在其中的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,应具有耐低温的特性,才能
高效降解多糖,保证拟杆菌的正常生命活动所需。
41.(2023·贵州·统考模拟预测)反刍动物的瘤胃中含有分解尿素的微生物,科研小组利用图所示过程从
瘤胃中分离培养分解尿素的微生物。回答下列问题:
(1)配制培养基时,培养基的灭菌应该在分装到各试管 (填“之前”或“之后”),培养基常用
的灭菌方法是 。为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择尿素作为氮源,不选择
NH4NO3作为氮源的原因是 。
(2)将I 得到的菌液接种到充满N2的密闭试管Ⅱ中,培养一段时间后可在试管壁的薄层培养基上获得单
菌落。与I 相比,Ⅱ所用培养基中还需要添加的物质是 。按照对O2的需求划分,所培养的微生物属于
型。
(3)Ⅲ过程中,科研小组从 (填“细胞”“种群”或“群落”)水平对微生物的种类进行了鉴定,可
根据菌落特征来初步区分不同种的微生物,原因是 。
【答案】(1) 之前 高压蒸汽灭菌法 能分解尿素和不能分解尿素的细菌都能利用 NH4NO3,
不能起到筛选作用
(2) 琼脂 厌氧
(3) 群落
在一定培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征
【解析】人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基,用以培养、
分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。其中,不含凝固剂(如琼脂)、呈液体状态的培养基为液体培
养基,呈固体状态的培养基为固体培养基。在液体培养基中加入琼脂后制成的琼脂固体培养基,是实验室
中最常用的培养基之一。微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长,可以形成肉眼可见的菌落。
人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH 等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。在
微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培
养基。
(1)培养基的制备过程为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,即灭菌应在分装(倒平板)之前,否则会
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杀死装入的细菌;培养基、无菌水等常使用高压蒸汽灭菌法,所用器械为高压蒸汽灭菌锅;能分解尿素和
不能分解尿素的微生物都能以NH4NO3 为氮源,起不到筛选作用。
(2)据图可知,在 II 培养基上培养的菌落需进行菌落特征观察,应为固体培养基,应加入凝固剂琼脂;
密闭试管营造无氧环境,故其类型应为厌氧型微生物。
(3)菌落为生活在一定区域的同种生物的所有个体,对微生物的种类进行鉴定,属于群落水平的研究;
在一定的培养条件下(相同的培养基、温度及培养时间),同种生物表现出稳定的菌落特征,包括菌落性
状、大小、隆起程度和颜色等方面,进而区分不同种微生物。
42.(2023 春·全国·高二随堂练习)传统的农耕时代,自给自足呈现出来的美食文化,足以征服天下人的
味蕾,就如三伏天做的豆瓣酱。传统豆瓣酱的制作流程如下:
①制作霉豆瓣: 把带壳干蚕豆在水中浸泡几个小时后去壳,待其晾干,加面粉搅匀平铺在簸箕里,用南
瓜叶盖上,自然发酵七天左右,见蚕豆上长满一层霉状物即可。
②辣椒胚制作:选料去把,辣椒轧碎,加盐、加酒发酵。
③混合装坛:将霉豆瓣、辣椒胚、香辛料混合均匀,加菜籽油装坛,“翻、晒、露”。
请回答相关问题:
(1)霉豆瓣制作过程中,起主要作用的真菌是 (至少写两个),面粉主要为其生长提供: ;霉豆
瓣发酵过程中,产生了大量的酶类,其中 能把豆瓣中的蛋白质分解成易吸收的 ,使其风味更独特。
(2)辣椒胚制作时,加入白酒的目的是 。
(3)豆瓣酱制作过程中,硝酸盐会在硝酸盐还原菌的作用下转变成亚硝酸盐。有人认为过量食用豆瓣酱
会影响身体健康,是因为亚硝酸盐会转变成 ,可能对人体有致癌、致畸作用。而油封装坛后,亚硝酸
盐含量会降低,可能原因是 。
【答案】(1) 酵母菌、毛霉、曲霉等 碳源 蛋白酶 小分子的肽和氨基酸
(2)杀菌、增加风味
(3) 亚硝胺 油封装坛后氧气量减少,抑制了硝酸盐还原菌的作用,使亚硝酸盐含量下降(或乳酸
菌大量繁殖,产生乳酸抑制了硝酸盐还原菌的作用)
【解析】制作霉豆瓣时,豆瓣上长的霉状物是毛霉、曲霉的匍匐菌丝。豆瓣酱制作过程中加入白酒,其具
有杀菌消毒和增加风味的作用。
(1)霉豆瓣制作过程中,起主要作用的真菌有酵母菌(使霉豆瓣具有醇香味)、霉菌包含毛霉、曲霉等,
其产生的蛋白酶将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,面粉(成分为淀粉)为上述菌种提供碳源。
(2)辣椒胚制作时,加入的白酒具有杀菌消毒和增加风味的作用。
(3)亚硝酸盐会转变为亚硝胺,亚硝胺对人体有害。油封装坛后,氧气量减少,抑制了硝酸盐还原菌的
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作用,使亚硝酸盐含量下降。
43.(2023·四川绵阳·四川省绵阳南山中学校考模拟预测)腐乳是用豆腐发酵制成的,民间老法生产腐乳
为自然发酵,现代腐乳生产多采用优良的毛霉菌种进行发酵。现代化生产流程如图。请回答下列问题:
(1)腐乳制作时,从微生物培养的角度分析,豆腐相当于 ,豆腐中的脂肪可作为微生物生长所需
的 。含水量过高的豆腐不适宜制作腐乳,原因是 。
(2)传统制作腐乳,豆腐块上的毛霉来自 ,现代腐乳生产是在严格无菌的条件下,将优良的毛霉
菌种直接接种在豆腐上,这样可以 。
(3)当豆腐上长出毛霉后,对豆腐要进行的“A 处理”是 。腐乳制作的后期要加入酒和香辛料配
制的卤汤,其中酒的含量一般控制在12%左右,原因是
(
答出两点)。
【答案】(1) (固体)培养基 碳源(或碳源和能源) 豆腐不容易成形
(2) 空气中的毛霉孢子 避免其他菌种的污染,保证产品的质量
(3) 加盐腌制 酒精含量过高,腐乳成熟的时间将会延长;酒精含量过低,不足以抑制微生物生长,
可能导致豆腐腐败
【解析】腐乳的制作原理:参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种,其中起主要作用的
是毛霉,其代谢类型为异养需氧型,适宜温度为15℃~18℃;毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶,将蛋白质和
脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸,这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。
(1)制作腐乳时豆腐相当于毛霉等微生物的固体培养基,豆腐中的脂肪等物质可以为微生物提供营养物
质碳源(或碳源和能源),含水量过高的豆腐不容易成形,因此不适宜制作腐乳。
(2)传统制作腐乳,豆腐块上的毛霉来自空气中的毛霉孢子,现代腐乳生产是在严格无菌的条件下,将
优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上,能够避免其他菌种的污染,这样可以保证产品的质量。
(3)当豆腐上长出毛霉后,对豆腐要进行加盐腌制。腐乳制作的后期酒精的含量一般控制在12%左右,
这是因为酒精浓度过高会导致腐乳的成熟时间会延长,酒精浓度过低,不足以抑制微生物的生长,可能导
致豆腐腐败。
44.(2023·辽宁沈阳·沈阳市第一中学校考模拟预测)尿素是一种重要的农业肥料,需经细菌的分解才能
更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问
题,请分析回答:
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(1)如图是利用 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步 到培养基的表面。除此
方法外,获得纯培养物的接种方法还有 。
(2)在培养基上进行划线操作中,在2 至5 区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的 。
(3)下面是两种培养基配方
①微生物纯培养的操作步骤:
(
用字母顺序回答)。
a.接种 b.配制培养基 c.灭菌 d.分离和培养
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择 (A、B)配方的培养基,在该培养基中加入
指示剂,可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
③据B 培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是
(
填“自养型”或“异养型”)。
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取
0.2ml 稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了1 个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240 和246,取平均值232;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212 和256,取平均值163;
在三位同学的统计中, 同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液
中的菌体数是 。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量 。
【答案】(1) 平板划线 稀释 稀释涂布平板法
(2)灭菌
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(3) bcad A 酚红 异养型
(4) 乙 1.16×109 少
【解析】1、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢
子)的手段,常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法;灭菌是使用强烈
的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子),常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高
压蒸汽灭菌。
2、微生物常见的接种的方法①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在
恒温箱里培养.在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形
成单个菌落;②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可
形成单个菌落。
(1)图中的接种工具是接种环,因而如图是利用平板划线法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分
离到培养基的表面,从而获得单菌落。除外,常用的微生物接种方法还有稀释涂布平板法,该方法是通过
将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面获得单菌落的,同时该方法还可用于计数。
(2)如果要对培养的菌落进行纯化,在培养基上划线操作时,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接
种环,第一次划线前灼烧接种环的目的是杀死接种环上的杂菌,此后每次划线都有灼烧接种环的目的是使
划线的菌种来自上次划线的末端,总之都是为了灭菌,灼烧过的接种环必须冷却后才能接种是为了防止高
温杀死要接种的微生物。
(3)①微生物纯培养过程应该按:配制培养基、灭菌、接种、培养、分离的步骤进行,则微生物纯培养
的操作步骤为bcad。
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择上述以尿素为唯一氮源的A 培养基,在该培养基中加入酚
红指示剂,可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
B
③
培养基的成分中,碳源为有机物,所培养微生物的同化作用类型是异养型。
(4)为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300 的平板进行计数,甲同学只做了一个平板,不具有说
服力;乙同学三个平板的菌落数均在30~300 之间;丙同学的三个平板中,有一个平板菌落数为21,未在
30~300 之间,且三个平板之间菌落数相差较大,故乙同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的
结果,每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=233÷0.2×106=1.165×109。当两个或
多个细胞连在一起时,平板上观察的是一个菌落,因此用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量少。
45.(2023·四川眉山·校考一模)啤酒生产过程大致如下:将经过灭菌的麦芽汁充氧,接入啤酒酵母菌菌
种后输入发酵罐。初期,酵母菌迅速繁殖,糖度下降,酒精浓度渐渐上升,泡沫不断增多,当糖度下降到
一定程度后,结束发酵,最后分别输出有形物质和啤酒。根据上述过程,回答以下问题:
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(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得
到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:
步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2:制备选择培养基:在基本培养基的基础上,注意 和添加高浓度葡萄糖。加琼脂后进行灭
菌,制成固体平板。
步骤3:将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4:根据 筛选出突变菌。
(2)酿酒过程中,经检测活菌数量适宜但却不产生酒精,应采取的措施是 ;采取该措施的原因
是 。
(3)为研究酵母菌的生长状况,需定时取样并测定pH 值。通过比较pH 大小判断取样先后顺序的主要依
据是 。
(4)小麦脱粒以后还有大量的麦秆,主要成分为木质素、纤维素和半纤维素,但是酵母菌无法直接利用,
原因是其 。请列举两种解决该问题的方法 。
【答案】(1) 酸性条件 是否长出菌落
(2) 密封处理 在无氧条件下酵母菌才会发酵产生酒精
(3)酵母菌无氧呼吸时产生酒精pH 值开始变小
(4) 纤维素等是多糖,酵母菌只能靠单糖进行发酵 ①用纤维素酶将纤维素等分解为葡萄糖②对酵
母进行诱变处理得到可以靠多糖多酵的特性突变菌
【解析】1、自然界中目的菌株的筛选
①依据:根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例:PCR 技术过程中用到的耐高温的Taq DNA 聚合酶,就是从热泉中筛选出来的Taq 细菌中提取出来
的。
2、实验室中目的菌株的筛选
原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以
尿素作为氮源.缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以
用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
(1)筛选耐高糖和耐酸特性的酵母菌,则应添加高浓度蔗糖(葡萄糖),调低pH(或酸性条件),加琼
脂后形成固体培养基,灭菌,制成固体平板,根据是否能在选择培养基上长出菌落筛选出突变菌。
(2)酵母菌是兼性厌氧性生物,在酿酒过程中,经检测活菌数量适宜但却不产生酒精,应采取的措施是
隔绝空气(密封处理),因为在无氧条件下酵母菌才会发酵产生酒精。
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(3)为研究发酵罐中酵母菌的生长状况可通过pH 值的大小来判定,酵母菌喜欢偏酸的环境,酵母菌无氧
呼吸时产生酒精pH 值开始变小,故一般情况下pH 值越小取样时间越靠后。
(4)纤维素是多糖,酵母菌只能靠单糖进行发酵,因此酵母菌无法直接利用麦秆。为了解决这一问题,
可以用纤维素酶将纤维素等分解为葡萄糖或者对酵母进行诱变处理得到可以靠多糖多酵的特性突变菌。
46.(2023·海南·统考二模)黄曲霉素(C17H12O6)是由黄曲霉产生的,具有极强的毒性和致癌性。研究人
员利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株,部分实验过程如下图所示,请回答下列问题:
(1)研究人员常从霉变的花生、玉米中采样,原因是 。
(2)图中1 号培养基与2 号培养基的物理状态不同,二者在成分上的主要区别是 。
(3)过程②为选择培养,常将1 号培养基置于摇床上振荡,其目的是 。
(4)过程③接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是 。2 号培养基以 为唯一碳源。
用2 号培养基计数,实验结果一般比实际活菌数 ,原因是 。
(5)经过选择培养得到了多个菌落,设不同菌种的菌落面积为s,菌落周围透明圈的面积为S,那么
的菌落,就是能高效降解黄曲霉素的目的菌群。
【答案】(1)霉变的花生、玉米中含有黄曲霉素,在此环境下可能含有能降解黄曲霉素的菌株
(2)1 号培养基中没有琼脂,2 号培养基中有琼脂
(3)有助于菌株与营养物质充分接触和增加溶氧量
(4) 防止培养液滴落 黄曲霉素 少 两个或多个细胞在一起形成了一个菌落
(5)S/s 的值最大(或s/S 的值最小)
【解析】1、在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养
基,称为选择培养基。
2、实验目的是利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株,所以应该以黄曲霉素作为唯一碳源。
3、根据物理状态不同,可以将培养基分为液体培养基和固体培养基。
(1)实验的目的是利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株,而霉变的花生、玉米中含有黄曲霉
素,在此环境下可能含有能降解黄曲霉素的菌株,所以从霉变的花生、玉米中采样。
(2)根据图中所示的实验操作过程可知,1 号是液体培养基,2 号是固体培养基,二者在成分上的主要区
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别是1 号培养基中没有琼脂,2 号培养基中有琼脂。
(3)1 号是液体培养基,液体培养基可以快速增加菌株的数量,在摇床上振荡有助于菌株与营养物质充分
接触和增加溶氧量。
(4)如果接种后,立即将培养基倒置,可能造成培养液滴落,所以为防止培养液滴落,接种后的培养皿
不能立即倒置培养;要在2 号培养基选择出高效降解黄曲霉素的菌株,所以以黄曲霉素为唯一碳源;2 号
培养基中由于两个或多个细胞在一起形成了一个菌落,所以实验结果一般比实际活菌数少。
(5)设不同菌种的菌落面积为s,菌落周围透明圈的面积为S,那么,选择S/s 的值最大(或s/S 的值最
小)的菌落,就是能高效降解黄曲霉素的目的菌群。因为菌落周围透明圈的面积S 越大,代表微生物对黄
曲霉素的降解能力越强。
47.(2023·河北·校联考二模)灌丛是荒漠生态系统中的一种重要的植被类型,某研究小组对灌丛的演替
进行研究。
(1)群落的演替是指 。
(2)如图是研究人员对灌丛生活环境调查后绘制的结构模型。统计土壤中植食性小动物的物种相对数量
的方法可选择 ,若啮齿类、鸟类同化的能量一共为a kJ,判断捕食性鸟
类和哺乳动物同化的能量是否最多为0.2a kJ 并说明原因: 。
(3)如表是灌丛演替过程中植物种类、细菌多样性指数、土壤中的氮含量的调查结果。调查细菌多样性
时,同时接种多个培养皿,为防止搞混则需要在培养皿 进行标号。研究发现表中植物种类、细菌
多样性指数、土壤中氮含量的增加是有顺序的,则最可能的先后顺序依次是 。
演替阶段
植物种类(种)
细菌多样性指数
(ACE)
土壤中氮含量(g/kg)
初级阶段
11
3 694.97±676.29
0.04±0.01
发育阶段
12
3 939.91±510.61
0.05±0.01
成熟阶段
18
3 853.56±487.31
0.06±0.01
注:ACE 指数越大,表明丰富度越高。
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【答案】(1)随着时间的推移,一个群落被另一个群落代替的过程
(2) 记名计算法或目测估计法 不是,捕食性鸟类和哺乳动物除啮齿类、鸟类外还有其他的食物来
源
(3) 底部 植物种类、细菌多样性指数、土壤中氮含量
【解析】1、群落演替:指随着时间的推移,一个群落被另一个群落代替的过程。
2、许多土壤小动物有较强的活动能力,且身体微小,因此不适于用样方法和标记重捕法调查,常用取样
器取样的方法进行采集、调查。
(1)群落的演替是指随着时间的推移,一个群落被另一个群落代替的过程。
(2)许多土壤小动物有较强的活动能力,且身体微小,常用取样器取样的方法进行采集、调查。统计土
壤中植食性小动物的物种相对数量的方法可选择记名计算法或目测估计法。一个营养级的总能量大约只有
10%~20% 传递到下一个营养级,图中捕食性鸟类和哺乳动物除啮齿类、鸟类外还有其他的食物来源,若
啮齿类、鸟类同化的能量一共为akJ,判断捕食性鸟类和哺乳动物同化的能量最多不是0.2akJ。
(3)接种后,需将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培
养基,造成污染,因此接种多个培养皿,为防止搞混则需要在培养皿底部进行标号。据表格数据分析,随
灌丛的发育和演化,植物种类越来越多,细菌多样性指数先增多后减少,然后土壤含氮量增加。
48.(2023·陕西宝鸡·统考二模)控制新型冠状病毒肺炎(简称“新冠肺炎”)在医疗机构内传播既是保
护患者也是保护医务工作者乃至最后消灭疫情的关键环节之一,若医务人员在疫情初期普遍缺乏防疫意识,
会造成新冠肺炎早期防控效果不佳。回答下列问题:
(1)医务工作人员在新冠肺炎诊疗期间做好消毒和灭菌可从
(
从传染病传播的三个环节作答)等方
面有效控制新型冠状病毒的传播。简述消毒和灭菌的区别是 。煮沸消毒法是常用的消毒方法,
一般在100℃煮沸5—6min,此消毒方法的原理是 。
(2)获得纯净培养物的关键是 ,医务人员进行某些实验操作时常在酒精灯火焰附近进行,原因
是 ,实验操作时还应避免 与周围的物品相接触。
(3)对于许多医疗器械都需要进行高压蒸汽灭菌,即将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内,
锅内水加热煮沸,将其中 后,再将锅密闭。
【答案】(1) 控制传染源、切断传播途径 消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面
或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子);灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,
包括芽孢和孢子 破坏病毒的蛋白质、核酸结构,从而使病毒无法增殖
(2) 防止外来杂菌的入侵 酒精灯火焰附近可形成无菌区,以避免周围环境中微生物的污染
已经灭菌处理的材料用具
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(3)原有的冷空气彻底排除
【解析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢
子);灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
(1)医务工作人员在新冠肺炎诊疗期间做好消毒和灭菌是从控制传染源、切断传播途径等方面有效控制
新型冠状病毒的传播,做好防控相当于是保护易感人群的措施。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法
杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子);灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外
所有的微生物,包括芽孢和孢子,可见,消毒和灭菌的区别表现在手段不同,同时获得的效果也不同,但
对不同的材料和器具需要采用不同的方法。煮沸消毒法是常用的消毒方法,一般在100℃煮沸5—6min,
此消毒方法的原理是利用高温破坏病毒的蛋白质、核酸结构,从而使病毒无法增殖,达到预防的目的。
(2)防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键,防止外来杂菌的入侵措施包括消毒和灭菌的相关手
段;医务人员进行某些实验操作时常在酒精灯火焰附近进行,因为在酒精灯火焰附近可形成无菌区,在该
处进行操作可以有效避免周围环境中微生物的污染,实验操作时还应避免已经灭菌处理的材料用具与周围
的物品相接触,从而做到防止杂菌污染的目的。
(3)对于许多医疗器械都需要进行高压蒸汽灭菌,即将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内,
锅内水加热煮沸,将其中原有的冷空气彻底排除后,再将锅密闭,这样可以保证锅内气压达到100Kpa。
49.(2023 秋·宁夏石嘴山·高三石嘴山市第三中学校考开学考试)泡菜是一种独特且具有悠久历史的发酵
蔬菜制品,回答下列问题:
(1)泡菜发酵的原理是 。
(2)泡菜制作中,需注意控制食盐用量以及 ,否则容易造成 而导致亚硝酸盐增加,影响泡
菜品质。
(3)泡菜发酵过程中,乳酸菌的呼吸作用本来无气体产生,但是在实际腌制过程中,从外观上可以看到
泡菜瓶中有间歇性的气泡冲出,坛盖有响声,其有气泡原因可能是 。
(4)泡菜发酵过程,为确定最佳取食时间,需检测亚硝酸盐含量。回答下列问题:
补充检测步骤:①配置溶液;② ;③制备样品处理液;④ 。
检测亚硝酸盐含量的原理是:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与 发生重氮化反应后,与N-1-萘
基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料。
【答案】(1)在无氧情况下,乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸
(2) 腌制时间、温度 细菌大量繁殖
(3)泡菜中除乳酸菌外,还有酵母菌和大肠杆菌等,酵母菌能将糖分分解为乙醇和二氧化碳等
(4) 制备标准显色液 比色(目测比较) 对氨基苯磺酸 玫瑰红
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【解析】泡菜制作的原理是乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸,为了防止微生物污染,制作泡菜过程中应进行
无菌操作;泡菜盐水的浓度过高会抑制乳酸菌发酵,造成咸而不酸,盐浓度过低不足以抑制微生物生长,
造成杂菌污染;为了缩短制作时间可以加入陈泡菜水,以增加乳酸菌数量。
(1)泡菜发酵的原理是在无氧情况下,乳酸菌(厌氧菌)将葡萄糖分解成乳酸。
(2)泡菜制作中,需注意控制食盐用量以及腌制时间、温度,否则容易造成细菌大量繁殖而导致亚硝酸
盐增加,影响泡菜品质,所以泡菜制作过程中需要定期测定亚硝酸盐的含量,一般采用比色法,将显色反
应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比,可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
(3)在制作过程中,从外观上可以看到泡菜瓶中有间歇性的气泡冲出,坛盖有响声,其原因可能是泡菜
中除乳酸菌外,还有酵母菌和大肠杆菌等,酵母菌能将葡萄糖分解为乙醇和二氧化碳等物质,使得坛里的
气压大于外界气压,从而会有多余的空气排出坛子,造成声响。
(4)亚硝酸盐含量测定的步骤:配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色(目测比较)。测
定原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合
形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中
亚硝酸盐的含量。
50.(2023·四川眉山·校考一模)预防新冠肺炎,需要大家共同努力,出门戴口罩可以有效降低新冠病毒
的传染率。但随着新冠疫情的持续,人类消耗了大量的一次性口罩,这些口罩不及时处理会对环境造成一
定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是聚丙烯纤维)的细菌。请回答下列问
题:
(1)分离纯化目的菌时,培养基需要以 为唯一碳源,从功能上看,该培养属于 培养基。
(2)筛选目的菌时,为了使培养基上出现的菌落尽可能都是单菌落,应采用的接种方法是 ,采
用该方法的原因是 。菌种的长期保存方法是 。
(3)专家指出不能反复使用同一个口罩。因为口罩频繁使用会导致口罩内侧细菌的种类和数量增多,进
而引发疾病。请设计实验验证与使用一次的口罩相比,频繁使用的口罩内侧的细菌种类和数量会增多。简
要写出实验思路:(口罩使用过程中接触的环境,口罩每天使用时长等无关变量都相同):
。
【答案】(1) 聚丙烯纤维 选择
(2) 稀释涂布平板法 高倍数的稀释能将聚集在一起的细胞分散成单个细胞,从而形成单菌落
甘油管藏
(3)将反复使用和使用一次的口罩分别进行取样,放在培养基中恒温培养1~2 天,观察两个培养基中菌
落数目的大小
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【解析】1、选择培养基:培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微
生物生长。
2、微生物常见的接种的方法:
(1)平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开
始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。
(2)稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个
菌落。
(1)由题意可知,该实验的目的是筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是聚丙烯纤维)的细菌,所
以分离纯化目的菌时,培养基需要以聚丙烯纤维为唯一碳源,从功能上看,该培养属于选择培养基。
(2)微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,筛选目的菌时,为了使培养基上出现的
菌落尽可能都是单菌落,应采用的接种方法是稀释涂布平板法,采用该方法的原因是高倍数的稀释能将聚
集在一起的细胞分散成单个细胞,从而形成单菌落。对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法,
将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀,放于-20℃的冷冻箱内保存。
(3)由题意可知,实验目的是验证使用一次的口罩相比,频繁使用的口罩内侧的细菌种类和数量会增多,
故自变量是口罩的使用次数多少,因变量是细菌种类和数量。所以实验思路为:分别取使用一次的口罩和
频繁使用的口罩,用棉签分别取这两种口罩的内侧细菌,然后分别进行稀释涂布平板,在相同且适宜条件
下培养一段时间, 观察培养基中形成菌落的特征(种类)和数目的大小。
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