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专题13 发酵工程
目录索引
第一部分 主干知识归纳与回顾
第二部分 命题角度+考情分析+高考预测
第三部分 核心题型（3 大题型）
第四部分 类题狂刷
考点01 发酵
程及
应用
工
其
一 果酒和果醋的制作
1.制作原理与发酵条件
2.制作流程
3.发酵装置及各部件的作用
1
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注意 若用简易的发酵装置，每隔一段时间排气时只需拧松瓶盖，不要打开瓶盖。
4.结果鉴定
(1)可通过嗅闻、观察和品尝初步鉴定(可能的结果如下)
项目
酒精发酵
醋酸发酵
气味和味道
酒味
酸味
气泡和泡沫
有气泡和泡沫
无气泡和泡沫
发酵液状态
浑浊
浑浊，液面形成白色菌膜
(2)进一步鉴定
①酒精发酵的结果检测：
a.检测试剂：重铬酸钾。b.检测条件：酸性。c.实验现象：呈现灰绿色。d.检验步骤：先在试
管中加入发酵液2 mL，再滴入物质的量浓度为3 mol/L 的H2SO4 3 滴，振荡混匀，最后滴加常
温下饱和的重铬酸钾溶液3 滴，振荡试管，观察颜色变化。
②醋酸发酵的结果检测：可通过检测和比较醋酸发酵前后的pH 作进一步的鉴定。
二 腐乳的制作
1.菌种 主要是毛霉。
2.原理
毛霉等微生物能产生蛋白酶和脂肪酶，作用如下：
――→
――→
3.腐乳的制作流程
2
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4.腐乳制作的注意事项
三 泡菜的制作及亚硝酸盐含量的测定
1.泡菜的制作原理
(1)菌种来源：附着在蔬菜上的乳酸菌。
(2)原理：乳酸菌的无氧呼吸。
――→
(3)制作流程
3
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(4)泡菜制作中的注意事项
2.亚硝酸盐含量的测定
(1)原理
注 亚硝酸盐溶液的浓度高，颜色深些；浓度低，颜色浅些。
(2)操作步骤
(3)泡菜腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐相对含量(或数量)的变化
4
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考点02 微生物的培养与应用
一 微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧
气以及特殊营养物质的要求。
(3)配制原则
2.无菌技术
(1)含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)常用方法
3.大肠杆菌的纯化培养
5
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(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细菌，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一
个纯化的细菌菌落。
(2)常用接种方法：
①平板划线法
②稀释涂布平板法
将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进
行培养
系列稀释操作
涂布平板操作
(3)菌种的保存方法
二 微生物的筛选和计数
1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
(1)实验原理
6
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(2)实验流程
(3)统计细菌数目的方法
①显微镜直接计数法
即稀释涂布平板法
②间接计数法——活菌计数法
原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个
活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(4)实验结果分析与评价
7
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2.土壤中分解纤维素的细菌的分离
(1)纤维素酶组成及作用
(2)纤维素分解菌的培养基成分及鉴定原理
(3)实验流程
(4)分离纤维素分解菌所用两种培养基的比较
分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。
8
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①选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大
多数微生物不能正常生长。
②鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在该培养基上形成肉眼可见的菌落。
③刚果红染色法应用于鉴别(填“选择”或“鉴别”)培养基。
1. 发酵技术的应用 ★★★☆☆
2. 酵母菌培养 ★★★★★
高考频率：100% 试题难度：中等 呈现形式：以选择题或实验题呈现
分析培养基的成分及其作用，比较平板划线法和稀释涂布平板法的异同
题
一
型
：
发酵
传统
1.1
题
三
高考
题
母
精析（
年
真
）
一．
发酵技术的应用
传统
（共7
题
小
）
1.2 解题模型
果酒和果醋制作过程的比较
9
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1.3
考
对点训练（四年省市模
）
一．
发酵技术的应用
传统
（共7
题
小
）
1．（2023·山东·高考真题）以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4 个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；
②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。
下列说法正确的是（ ）
A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
【答案】C
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
（1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
（2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。
10
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（3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。
（4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸
菌等微生物的生命活动不受影响。
（5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及
其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿
的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。
【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响，A
错误；
B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B 错误；
C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，是排气减压、隔绝空气、防止杂菌污染等，C 正确；
D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D 错误。
故选C。
（2023·浙江·统考高考真题）阅读下列材料，完成下面小题。
小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要
有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌
在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。
2．小曲白酒的酿造过程中，酵母菌进行了有氧呼吸和无氧呼吸。关于酵母菌的呼吸作用，下列叙述正确
的是（ ）
A．有氧呼吸产生的[H]与O2结合，无氧呼吸产生的[H]不与O2结合
B．有氧呼吸在线粒体中进行，无氧呼吸在细胞质基质中进行
C．有氧呼吸有热能的释放，无氧呼吸没有热能的释放
D．有氧呼吸需要酶催化，无氧呼吸不需要酶催化
3．关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（ ）
A．糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖
B．发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测
C．若酿造过程中酒变酸，则发酵坛密封不严
D．蒸熟并摊晾的原料加入糟醅，立即密封可高效进行酒精发酵
【答案】2．A 3．D
【分析】有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第
一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]，合
成少量ATP；第三阶段是氧气和[H]反应生成水，合成大量ATP。
2．A、有氧呼吸产生的[H]在第三阶段与O2 结合生成水，无氧呼吸产生的[H]不与O2 结合，A 正确；
B、有氧呼吸的第一阶段在细胞质基质中进行，第二和第三阶段分别在线粒体基质和线粒体内膜中进行，
无氧呼吸的两个阶段都在细胞质基质中进行，B 错误；
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C、酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸过程中释放的能量均大多以热能散失，但无氧呼吸是不彻底的氧化分解过
程，大部分能量存留在酒精，C 错误；
D、有氧呼吸和无氧呼吸过程都需要酶的催化，只是酶的种类不同，D 错误。
故选A。
3．A、由于酿酒酵母不能直接利用淀粉发酵产生酒精（乙醇），故糖化过程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶
将淀粉分解为葡萄糖，以供发酵利用，A 正确；
B、发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测，若存在酒精，则酒精与酸性的重铬酸
钾反应呈灰绿色，B 正确；
C、酿造过程中应在无氧条件下进行，若密封不严，会导致醋酸菌在有氧条件下发酵产生醋酸而使酒变酸，
C 正确；
D、蒸熟并摊晾的原料需要冷却后才可加入糟醅，以免杀死菌种，且需要在有氧条件下培养一段时间，让
酵母菌大量繁殖，此后再密封进行酒精发酵，D 错误。
故选D。
4．（2022·湖北·统考高考真题）关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述错误的是（ ）
A．在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B．白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体
D．生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
【答案】C
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。
【详解】A、在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气，让酵母菌大量繁殖，再进行酒精发酵，
A 正确；
B、白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程，如发酵初期酵母菌大量繁殖，B 正确；
CD、酒精发酵利用的菌种是酵母菌，葡萄糖转化为乙醇所需的酶存在于细胞质基质，不存在线粒体中，C
错误，D 正确。
故选C。
5．（2021·海南·高考真题）关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作，下列叙述正确的是（ ）
A．发酵所利用的微生物都属于原核生物
B．发酵过程都在无氧条件下进行
C．发酵过程都在同一温度下进行
D．发酵后形成的溶液都呈酸性
【答案】D
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是
醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；泡菜的制作离不开乳酸菌。
【详解】A、参与果酒制作的微生物是酵母菌，属于真核生物，A 错误；
B、参与果醋制作的醋酸菌是好氧菌，因此果醋发酵需要有氧条件，B 错误；
C、不同的发酵产物需要的温度不同，C 错误；
D、果酒、果醋和泡菜发酵后形成的溶液都呈酸性，D 正确。
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故选D。
6．（2021·湖北·统考高考真题）中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确的是（
）
A．泡菜制作过程中，酵母菌将葡萄糖分解成乳酸
B．馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2
C．米酒制作过程中，将容器密封可以促进酵母菌生长
D．酸奶制作过程中，后期低温处理可产生大量乳酸杆菌
【答案】B
【分析】 1、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：毛霉
等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂
肪酸。
2、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。
3、醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充
足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【详解】A、泡菜制作过程中，主要是乳酸菌将葡萄糖分解形成乳酸，A 错误；
B、做馒头或面包时，经常要用到酵母菌，酵母菌可以进行有氧呼吸分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳
和水，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得馒头或面包暄软多孔，B 正确；
C、酵母菌在有氧条件下可以大量繁殖，在密封也就是无氧条件下产生酒精，C 错误；
D、酸奶制作过程中，后期低温处理时大部分乳酸杆菌已死亡，不会大量繁殖，D 错误。
故选B。
题
二
型
微生物培养
2.1
题
三
高考
题
母
精析（
年
真
）
一．微生物培养技术与应用（共10
题
小
）
7．（2024·河北邢台·宁晋中学校考模拟预测）某果汁加工厂在制造柑橘汁时，为提高柑橘的经济价值、减
少原料的浪费，设计了如图所示的生产加工方案。下列叙述错误的是（ ）
A．过程①温度控制在18～30℃，过程②温度控制在30～35℃
B．若过程③为冷却过程，则目的是防止高温使酶变性失活
C．过程①与④提取的成分存在很大差异，主要是因为果肉与果皮的DNA 组成不同
D．果酒与果醋的制作都需要微生物的参与，两种制作过程的气体环境不同
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【答案】C
【分析】果酒发酵，菌种为酵母菌，代谢类型为兼性厌氧型，温度控制在18～30℃；醋酸发酵，菌种为醋
酸菌，代谢类型为异养需氧型，温度控制在30～35。
【详解】A、过程①为果酒发酵，菌种为酵母菌，温度控制在18～30℃，过程②为醋酸发酵，菌种为醋酸
菌，温度控制在30～35℃，A 正确；
B、若过程③为冷却过程，则目的是防止高温破坏酶的空间结构，使酶变性失活，B 正确；
C、但果肉与果皮都是由同一受精卵发育而来，果肉与果皮的DNA 组成相同，过程①与④提取的成分存在
很大差异，主要是因为基因的选择性表达，C 错误；
D、果酒制作需要酵母菌，代谢类型为兼性厌氧型，果醋的制作需要醋酸菌，代谢类型为异养需氧型，因
此两种制作过程的气体环境不同，D 正确。
故选C。
8．（2023·河北邢台·宁晋中学校考三模）下列关于酵母菌和醋酸菌的叙述，正确的是（ ）
A．二者都具有核膜包被的细胞核
B．二者都能进行无氧呼吸，使培养液pH 降低
C．前者可用于酿酒，后者可用于泡菜制作
D．二者均以DNA 为遗传物质，前者具有染色体
【答案】D
【分析】醋酸菌为原核生物，酵母菌为真核生物。原核细胞和真核细胞最本质的区别是有无以核膜为界限
的细胞核，其共同点是都有膜、细胞质，都以 DNA 作为遗传物质。
【详解】A、醋酸菌是原核生物，没有核膜，A 错误；
B、醋酸菌进行有氧呼吸，B 错误；
C、泡菜制作利用的是乳酸菌，C 错误；
D、原核生物和真核生物都以DNA 作为遗传物质，酵母菌是真核生物具有染色体，D 正确。
故选D。
9．（2023·海南省直辖县级单位·校考模拟预测）“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。”葡萄酒中含有多
种酚类化合物、花青素等，具有抗氧化作用，能够减少自由基对身体的损伤，延缓衰老，因而广受人们的
喜爱。酿制葡萄酒时，向培养基中添加一定浓度的葡萄糖溶液有利于发酵的进行。研究发现，自酿的葡萄
酒中通常含有甲醇，甲醇主要来自原料中果胶的分解、氨基酸脱氧和发酵原料的霉变。下列有关叙述错误
的是（ ）
A．自酿葡萄酒时，主要利用葡萄皮表面附着的野生酵母菌来进行发酵
B．酿制葡萄酒时，葡萄糖浓度越高，由于能量充足，酵母菌的繁殖速度越快
C．酿制葡萄酒时，前期通入空气有利于酵母菌进行有氧呼吸，从而大量繁殖
D．改进葡萄酒酿制方法，如增加过滤、杀菌等工序，可使葡萄酒中的甲醇含量减少
【答案】B
【分析】酵母菌是一类单细胞真菌，能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的
水果、蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，
可用于酿酒、制作馒头和面包等。
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【详解】A、家庭自酿葡萄酒时，由于葡萄皮上有酵母菌，可以利用葡萄皮表面附着的野生酵母菌来进行
发酵，A 正确；
B、酿制葡萄酒时，葡萄糖可以作为酵母菌呼吸作用的底物，但并不是葡萄糖浓度越高越好，葡萄糖浓度
过高，会导致溶液渗透压过高，抑制酵母菌的增殖，B 错误；
C、酵母菌是兼性厌氧微生物，在酿制葡萄酒时，前期通入空气有利于酵母菌进行有氧呼吸，产生更多的
能量，从而大量繁殖，C 正确；
D、在酿酒过程中，改进葡萄酒酿制方法，如增加过滤、杀菌等工序，使杂菌数量减少、葡萄酒中的甲醇
含量减少，D 正确。
故选B。
10．（2023·贵州遵义·校考模拟预测）果实中含有多种对人体有益的矿物质元素，人们用果实可加工成果
汁、果酒、果醋等产品。下列说法错误的是（ ）
A．在制作葡萄酒的过程中，应先反复冲洗，再去除枝梗，这样可减少杂菌污染
B．在果酒发酵期间，为保持无氧条件，不能拧松发酵瓶的盖子
C．制作果酒、果醋时，控制通气的情况不同
D．葡萄酒的颜色是葡萄皮中色素进入发酵液形成的
【答案】B
【分析】1、果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃、前
期需氧，后期不需氧。
2、果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧。当
氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再
将乙醛变为醋酸。
【详解】A、制作葡萄酒应先清洗干净，反复冲洗后去除枝梗，从而能够减少杂菌污染，A 正确；
B、酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程中密闭，但需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放
气，B 错误；
C、制作果酒和果醋的条件不同，控制通风情况也不同，C 正确；
D、葡萄酒的颜色是果皮中的色素进入发酵液形成的，D 正确。
故选B。
11．（2023·河北·统考三模）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤
是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水
淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T 不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。
实验流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．菌T 能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖
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B．灭菌的目的是杀死淋洗液中的微生物，以免干扰实验
C．接种酵母菌后，发酵罐温度要控制在30~35℃
D．生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验
【答案】C
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌
无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性
重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【详解】A、在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T 能够将秸秆中的纤维素大量分解，所以
菌T 能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，A 正确；
B、灭菌的目的是杀死淋洗液中的微生物，以免干扰实验，B 正确；
C、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，C 错误；
D、生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色，D 正确。
故选C。
12．（2023·广西北海·统考一模）《齐民要术》记载了古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的许多宝
贵经验。其中关于桃醋的做法有如下记载：“桃烂自零者，收取，内之于瓮中，以物盖口。七日之后，既
烂，漉去皮核，密封闭之。三七日酢成，香美可食。”下列相关叙述错误的是（ ）
A．与未成熟的桃子相比，成熟的桃子单糖含量更高，利于酵母菌发酵
B．“以物盖口”和“密封闭之”都是为了防止杂菌污染、创设无氧环境
C．“漉去皮核”可增加微生物与营养物质的接触面积，提高发酵效率
D．“七日之后”发酵液中的pH 会降低，其表面可能形成一层菌膜
【答案】B
【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是—种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能
进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖
分解为醋酸; 当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-
35℃。
【详解】A、桃子在成熟过程中，多糖转化成单糖，单糖含量不断增高，利于酵母菌发酵，A 正确；
B、“密封闭之”的主要目的只是为了防止杂菌污染，醋酸发酵是需氧过程，B 错误；
C、过滤皮核后，发酵微生物与营养物质的接触机会增加，发酵效率提高，C 正确；
D、“七日之后”主要进行醋酸发酵，该过程产生的醋酸可以使发酵液中的pH 降低，发酵液表面会出现一
层醋酸菌膜，D 正确。
故选B。
13．（2023·河北保定·统考二模）酸笋是“螺蛳粉的灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主
要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。下列叙述错误的是（ ）
A．酸笋发酵过程中的乳酸菌属于单细胞原核生物
B．从发酵液中分离纯化乳酸菌时可采用稀释涂布平板法或平板划线法
C．硫化氢气体是蛋白质分解后含硫氨基酸的代谢产物之一
16
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D．乳酸菌在发酵初期会出现种群数量的“J”形增长
【答案】D
【分析】由原核细胞构成的生物叫原核生物，由真核细胞构成的生物叫真核生物；原核细胞与真核细胞相
比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体，原核细胞只有核
糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸和蛋白质等物质。
【详解】A、乳酸菌是细菌，属于单细胞原核生物，A 正确；
B、稀释涂布平板法与平板划线法是最常用的两种微生物分离纯化方法，分离乳酸菌可任选其中一个，B
正确；
C、从题干中“作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质”可知，硫化氢气体是蛋白质分解后氨基酸
的代谢产物之一，C 正确；
D、只有在食物和空间条件充裕、气候适宜、没有敌害等条件下才形成“J”形增长，而在自然发酵过程中
还有很多微生物与乳酸菌进行种间竞争，D 错误。
故选D。
14．（2023·海南·统考模拟预测）《齐民要术》是我国古代的一部有很高科学价值的“农业百科全书”，
其在记叙酿酒方法时指出蒸软的米要“舒（摊开）使极冷，然后纳之（下酿瓮中去）”，酿酒完成的标志
是“味足沸定”。下列相关叙述错误的是（ ）
A．“舒使极冷，然后纳之”可避免高温杀死发酵所需的菌种
B．将米蒸软既有助于杀灭杂菌，又能加速淀粉糖化
C．酿酒时，向酿瓮中持续通入足量空气有利于缩短发酵时间
D．“沸定”说明大部分菌种不再进行细胞呼吸释放CO2，发酵完成
【答案】C
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、舒令极冷”是将米饭推开，可防止熟米温度过高，从而导致发酵微生物死亡，A 正确；
B、将米蒸软可以杀灭杂菌，同时又能加速淀粉糖化，为发酵作准备，B 正确；
C、酒精发酵需要在无氧条件下进行，故需要密封瓮体，因此，不需要向酿瓮中持续通入足量空气，C 错
误；
D、“沸定”说明大部分菌种不再进行细胞呼吸释放CO2，发酵完成，此时酒精含量较高，糖分基本消耗
完，D 正确。
故选C。
15．（2023·浙江温州·瑞安中学校考三模）浙江绍兴有种习俗，女儿出生之时在桂花树下埋几坛上好的黄
酒，待到女儿出嫁之时，挖出飨客。下列相关分析正确的是（ ）
A．传统黄酒酿制过程中，温度控制在30～35℃为宜
B．传统黄酒酿制过程中，需不断通入空气
C．传统黄酒酿制过程中，若封口不严，可能会使酒变酸
D．传统黄酒酿制过程中，需将发酵缸装满
【答案】C
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【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、酿酒酵母的最适生长温度约为28℃，酿酒温度控制在18~30℃，A 错误；
B、传统黄酒酿制过程中利用的是酵母菌无氧呼吸产酒精，所以需要密封发酵，B 错误；
C、传统黄酒酿制过程中，若封口不严，可能会使醋酸菌发酵产生醋酸，使酒变酸，C 正确；
D、传统黄酒酿制过程中，发酵缸需要预留1/3 的空间，排出发酵产的CO2 ，防止爆裂，D 错误。
故选C。
16．（2023·河北·河北巨鹿中学校联考三模）泡菜酸脆爽口，是人们喜爱的佐餐佳品。下列有关制作泡菜
的叙述正确的是（ ）
A．泡菜“咸而不酸”可能是加盐过多，抑制了乳酸菌发酵过程
B．乳酸菌是厌氧细菌，因此泡菜坛需要装满以保证无氧环境
C．腌制泡菜时，可以通过加入抗生素来抑制杂菌的生长
D．泡菜制作过程中“冒泡”是因为乳酸菌发酵产生了CO2
【答案】A
【分析】泡菜制作是应用了乳酸菌的发酵原理，提供的新鲜蔬菜是它的培养基，乳酸菌是厌氧微生物，在
缺氧的环境条件下发酵可产生大量乳酸，能抑制其他厌氧菌的生存;在有氧情况下，自身受抑制，不能进行
乳酸发酵，使需氧菌繁殖而变质。乳酸菌生长繁殖需要消耗有机物，发酵过程中会产生更多种类的有机物。
【详解】A、泡菜腌制过程中如果加盐过多，会导致泡菜水的渗透压过高，抑制乳酸菌的生长，可能出现
“咸而不酸”的现象，A 正确；
B、泡菜坛通常只装八成满，以防止发酵过程中发酵液溢出，B 错误；
C、抗生素在抑制杂菌生长的同时也会抑制乳酸菌的生长，因此腌制泡菜时不能加入抗生素，C 错误；
D、乳酸菌只能进行无氧呼吸，产物为乳酸，不产生CO2，D 错误。
故选A。
2.2 解题模型
选择培养基与鉴别培养基的区别
种类
制备方法
原理
用途
举例
选择培
养基
培养基中加入某
些化学物质
依据某些微生物对某些
物质的抗性而设计
从众多微
生物中分
离所需的
微生物
加入青霉素，
分离得到酵母
菌和霉菌
鉴别培
养基
培养基中加入某
种指示剂或化学
药品
依据微生物产生的某种
代谢产物与培养基中的
特定指示剂或化学药品
反应，产生明显的特征
变化而设计
鉴别不同
种类的微
生物
伊红美蓝培养
基可以鉴别大
肠杆菌
2.3
考
对点训练（四年省市模
）
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一．微生物培养技术与应用（共8
题
小
）
17．（2023·重庆·统考高考真题）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源
化处理的流程设计。下列叙述错误的是（ ）
A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品
B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源
C．X 中需要添加合适的菌种，才能产生沼气
D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动
【答案】D
【分析】生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递，三者缺一不可；物质循环是生态系统的基
础，能量流动是生态系统的动力，信息传递则决定着能量流动和物质循环的方向和状态；信息传递是双向
的，能量流动是单向的，物质循环具有全球性。
【详解】A、压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品，有利于实现物质的循环再生和能量的多级
利用，A 正确；
B、添加的木屑有利于堆肥体通气，木屑也可作为某些微生物的碳源，B 正确；
C、X 中需要添加合适的菌种，通过分解有机物才能产生沼气，C 正确；
D、为保证堆肥体中微生物的活性，可以对堆肥体进行翻动，D 错误。
故选D。
18．（2023·辽宁·统考高考真题）细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空
气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的
是（ ）
A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C．同一稀释度下至少对3 个平板计数并取平均值
D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
【答案】D
【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成
这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀
释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），
再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个
细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
【详解】A、为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的
双手进行消毒，A 正确；
B、纯化培养时，为防止污染培养基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B 正确；
C、微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3 个菌落数目在30～300 的平板进行计数，以确保实验
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的准确性，C 正确；
D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只
能观察到一个菌落，D 错误。
故选D。
19．（2023·江苏·统考高考真题）下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是（ ）
A．通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B．通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大
C．通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌
D．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定
【答案】A
【分析】培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长
对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。灭菌常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒常用
的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】A、细菌是原核生物，酵母菌是真核生物，不同微生物对营养物质的需求是不一样，通常酵母菌
培养基比细菌培养基有更高的碳氮比，A 正确；
B、通常细菌的生长速度比酵母菌快，但形成的菌落，不一定细菌的大于酵母菌的，与细菌的种类有关，
部分细菌的菌落小于酵母菌，B 错误；
C、通常细菌和酵母菌的培养基都可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，C 错误；
D、血细胞计数板适用于真菌的计数，细菌计数板用于细菌的数量测定等，D 错误。
故选A。
20．（2023·北京·统考高考真题）高中生物学实验中，下列实验操作能达成所述目标的是（ ）
A．用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离
B．向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境
C．在目标个体集中分布的区域划定样方调查种群密度
D．对外植体进行消毒以杜绝接种过程中的微生物污染
【答案】A
【分析】成熟的植物细胞有一大液泡。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原
生质层进入到外界溶液中，由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，液泡逐渐缩小，原生
质层就会与细胞壁逐渐分离开来，即发生了质壁分离。当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液
中的水分就透过原生质层进入到细胞液中，液泡逐渐变大，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，
即发生了质壁分离复原。
【详解】A、成熟的植物细胞有中央大液泡，用高浓度蔗糖溶液处理，细胞会失水，成熟植物细胞能发生
质壁分离，因此用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离，A 正确；
B、向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无氧环境，不能创造无菌环境，B 错误；
C、在用样方法调查种群密度时，应该做到随机取样，而不是在目标个体集中分布的区域划定样方调查种
群密度，C 错误；
D、对外植体进行消毒可以 减少外植体携带的微生物，但不能杜绝接种过程中的微生物污染，D 错误。
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故选A。
21．（2023·山东·高考真题）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A．不含氮源的平板不能用于微生物培养
B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
【答案】D
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行
微生物培养的物质基础。
2、按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种
化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。
3、消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内
部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A 错误；
B、平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，
B 错误；
C、使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C 错误；
D、脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源
而进行生长繁殖，但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分
离出合成脲酶的微生物，D 正确。
故选D。
22．（2022·天津·高考真题）下图所示实验方法的应用或原理，不恰当的是（ ）
实验方法
应用
原理
A．分离绿叶中的色素
B．不同色素在层析液中溶解度不同
C．细菌计数
D．逐步稀释
A．A
B．B
C．C
D．D
【答案】C
【分析】平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的
开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
21
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【详解】AB、图示为分离绿叶中的色素，常用层析法，原理是各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从
而分离色素，溶解度大，扩散速度快;溶解度小，扩散速度慢，AB 正确；
CD、图示为平板划线法，是分离微生物的一种方法，不能用于细菌计数，是指把混杂在一起的微生物或同
一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单
个细胞，并让其成长为单菌落的方法，C 错误，D 正确。
故选C。
23．（2023·浙江·统考高考真题）某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样
品，划线接种于一定NaCl 浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．培养基pH 需偏碱性
B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C．需在无氧条件下培养
D．分离得到的微生物均为乳酸菌
【答案】C
【分析】泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等发酵制成的。这些微生物一般
为厌氧、兼性厌氧或微好氧菌。它们的发酵产物不仅有乳酸，还会有醇、酯等，因而使泡菜具有特殊的风
味。
【详解】A、因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸，故其生活的环境是酸性，培养基pH 需偏酸性，A 错误；
B、平板划线接种时不需要稀释，B 错误；
C、乳酸菌是厌氧型微生物，所以需在无氧条件下培养，C 正确；
D、参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离得到的微生物除了乳酸菌，还会
有其他耐高盐的微生物，D 错误。
故选C。
24．（2024·广东·校联考一模）超市中酸奶的配料表显示其有乳杆菌、嗜热链球菌等乳酸菌。研究小组计
划将酸奶中的不同乳酸菌进行分离纯化，下列操作的顺序正确的是（ ）
①高压蒸汽灭菌、倒固体平板
②将酸奶进行系列稀释
③准备水、培养皿并配制培养基
④挑取单菌落接种到斜面培养基
⑤用涂布器涂布并进行37℃厌氧培养
A．①→②→③→④→⑤
B．③→①→②→⑤→④
C．①→③→②→⑤→④
D．②→③→①→④→⑤
【答案】B
【分析】微生物常见的接种的方法:
1、平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养。在线的开始部
分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
2、稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养血表面经培养后可形成单个菌落。
【详解】微生物的分离纯化的操作顺序为：
准备水、培养皿并配制培养基
高压蒸汽灭菌、到固体平板
将酸奶进行系列稀释
用涂布器涂布并进
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行37℃厌氧培养
挑取单菌落接种到斜面培养基。
故顺序③→①→②→⑤→④，ACD 错误，B 正确。
故选B。
25．（2024·吉林白山·统考一模）垃圾实际上是放错了地方的资源，垃圾分类处理具有社会、经济、生态
三方面的效益。目前中国生活垃圾一般可分为四大类：可回收垃圾、厨余垃圾、有害垃圾和其他垃圾。某
科研所想分离和培养几种微生物用于对厨余垃圾进行分解处理。下列相关叙述错误的是（ ）
A．厨余垃圾中的蔬菜废料、果皮等可用纤维素分解菌进行分解处理
B．厨余垃圾浸出液可作为选择培养基中的成分来分离所需要的微生物
C．若用厨余垃圾培养某种微生物，加入之前需对其进行高压蒸汽灭菌
D．培养分解厨余垃圾的微生物要用液体培养基，培养过程中不断搅拌的目的是提高培养液的温度
【答案】D
【分析】1、纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶，包
括C1 酶、CX 酶和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤
维素分解菌。
2、培养基的营养构成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；不同培养
基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】A、厨余垃圾中的蔬菜废料、果皮等富含纤维素，可用纤维素分解菌进行分解处理，A 正确；
B、厨余垃圾浸出液可为所需的微生物提供营养物质，而不能为其他微生物提供营养物质，所以厨余垃圾
浸出液可作为选择培养基中的成分来分离所需要的微生物，B 正确；
C、若用厨余垃圾培养某种微生物，为防止杂菌污染，加入之前需用高压蒸汽灭菌对其进行灭菌，把微生
物彻底杀死，C 正确；
D、培养分解厨余垃圾的微生物要用液体培养基，培养过程中不断搅拌的目的是为了使菌体充分接触营养
物质和溶解氧，促进细菌生长繁殖，D 错误。
故选D。
26．（2024·湖南株洲·统考一模）L-天冬酰胺酶由细菌和真菌合成，可分解天冬酰胺释放出氨，然后与奈
斯勒试剂反应呈棕色。为筛选获得L-天冬酰胺酶高产菌株，设计了如下固体培养基。固体培养基：主要成
分有牛肉膏、蛋白胨、水、NaCl、琼脂、奈斯勒试剂。实验结果如下图。下列叙述错误的是（ ）
A．根据实验结果可知，接种时采用的是稀释涂布平板法
B．应选择菌落C 作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养
C．该培养基从功能来看属于选择培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏
D．无菌技术还可以避免操作者被有害微生物感染，实验结束后的培养基不能直接丢弃
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【答案】C
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法，将已经灭菌的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划
线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最
后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法，将待分离的菌液经过适合的稀释后，均匀涂布在培养皿表面，
经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、从接种结果来看，菌落分布较为均匀，应该采用的是稀释涂布平板法，A 正确；
B、菌落B 和菌落C 周围棕色圈的直径相同，但C 的菌落直径更小，因此菌落C 的单个细胞产生的L-天冬
酰胺酶更多，应选择菌落C 作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养，B 正确；
C、培养基中加入有奈斯勒试剂，若微生物能产生L-天冬酰胺酶则菌落周围会出现棕色圈，因此该培养基
从功能来看属于鉴别培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏和蛋白胨，C 错误；
D、无菌技术可用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，还可以避免操作者被有害微生物感染，
但实验结束后为避免环境污染，培养基在丢弃前要进行灭菌处理，D 正确。
故选C。
27．（2023·贵州·清华中学校联考模拟预测）结核病又叫“痨病”，是由结核杆菌引起的一种慢性传染病，
临床上常采用利福平（一种抗生素）进行治疗，随着药物利福平不断使用，使得结核病患者对利福平的耐
药率不断上升给结核病的治疗带来较大的困难。为了筛选新的抗结核药物，科研人员进行了下图所示的研
究。已知罗氏固体培养基中有抑制杂菌生长的物质，链霉素能作用于结核杆菌的核糖体，通过诱导遗传密
码的错读来抑菌。下列说法错误的是 （ ）
A．图中步骤①与步骤②目的不同，其中步骤①的目的是为了扩大培养结核杆菌
B．图中罗氏固体培养基属于鉴别培养基，可通过观察菌落的形态来初步鉴定目的菌株
C．不同抗生素选择的方向不同，多种抗生素同时联合用药能延缓耐药菌株的出现
D．链霉素可通过抑制结核杆菌翻译过程来抑制蛋白质的合成进而来抑制结核杆菌
【答案】B
【分析】图中①是将细菌接种在基本培养基上，目的是扩大培养目的菌，②是将扩繁后的菌种接种到选择
培养基上，筛选目的菌株，③是挑选菌落，④是对菌落进行观察鉴定。
【详解】A、图中①是将细菌接种在基本培养基上，目的是扩大培养目的菌，②是将扩繁后的菌种接种到
选择培养基上，筛选目的菌株，A 正确；
B、罗氏固体培养基中有抑制杂菌生长的物质，属于选择培养基，B 错误；
C、由于抗生素对细菌定向选择，长期使用单一抗生素会出现抗药性，不同抗生素的选择方向不同，因此
多种抗生素同时或先后联合用药能有效延缓耐药菌株的出现，C 正确；
D、链霉素能作用于结核杆菌的核糖体，诱导遗传密码的错读可导致翻译停止，从而抑制蛋白质的合成，
以达到抑菌的目的，D 正确。
故选B。
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28．（2023·贵州黔东南·统考一模）某实验小组筛选得到塑料降解菌，用来降解塑料，以解决塑料的污染
问题。下列叙述错误的是（ ）
A．培养基灭菌后再依次分装到各个培养皿中
B．可采用平板划线法来统计样液中的细菌数量
C．获得塑料降解菌纯培养物的关键是防止杂菌污染
D．实验结束后，已使用的培养基要灭菌后才能倒掉
【答案】B
【分析】微生物培养的关键是防止杂菌污染；培养基制作完成后需要进行灭菌处理，培养基通常可以进行
高压蒸汽灭菌；倒平板后需要将培养皿倒置。
【详解】A、配制好的选择培养基高压蒸汽灭菌，再在无菌环境中分装到培养皿中，A 正确；
B、采用平板划线法接种后，菌落一般生长在划线的末端，而不是均匀分布，因此可采用稀释涂布平板法
统计样液中细菌的数量，B 错误；
C、微生物培养中，获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，C 正确；
D、为了防止污染环境，则实验结束后，已使用的培养基要灭菌后才能倒掉，D 正确。
故选B。
29．（2024·云南·校联考模拟预测）金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物，其具有耐高盐的特
性，在环境中分布广泛。下列相关叙述错误的是（ ）
A．可从食物和人的粪便中分离得到金黄色葡萄球菌
B．培养过金黄色葡萄球菌的培养基要灭菌后才能丢弃
C．分离样品中的金黄色葡萄球菌时，用高盐液体培养基培养不能增加该菌的浓度
D．在固体选择培养基上采用平板划线法接种，可获得金黄色葡萄球菌的纯培养物
【答案】C
【分析】培养基
(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质
以及氧气的要求。
(3)种类：①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。②按照成分的来源可分为天然
培养基和合成培养基。③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
【详解】A、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物，因此可从食物和人的粪便中分离得到金黄
色葡萄球菌，A 正确；
B、使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，B 正确；
C、金黄色葡萄球菌可在盐浓度接近8％的环境中生长，具有耐高盐的特性，因此分离样品中的金黄色葡萄
球菌时，用高盐液体培养基培养可以增加该菌的浓度，C 错误；
D、对微生物进行分离、纯化可用平板划线法或稀释涂布法，因此，在固体选择培养基上采用平板划线法
接种，可获得金黄色葡萄球菌的纯培养物，D 正确。
故选C。
30．（2024·广西南宁·南宁三中校考一模）为了处理污水中的一种有毒的、难以降解的有机化合物A，某
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研究团队利用化合物A、磷酸盐、镁盐和微量元素等配制了培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A 的
细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。下列相关叙述中，错误的是（ ）
A．振荡培养的目的是提高培养液的溶氧量，并使目的菌和培养液充分接触
B．若干天后应选择化合物A 含量最低的培养液再接种到新的培养液中连续培养
C．该实验可以选择平板划线法或稀释涂布平板法向固体培养基接种
D．重复多次上述实验后获得的目的菌可直接用于环境保护实践
【答案】D
【分析】题意分析，该实验的目的是筛选出高效降解化合物A 的细菌，在含化合物A 的培养基中，只有能
降解化合物A 的微生物才能以化合物A 为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A 的微生物因缺乏碳源和
氮源，无法生长繁殖。
【详解】A、振荡培养的目的是提高培养液的溶氧量及增加目的菌和培养液的充分接触，以达到增大目的
菌数量的目的，A 正确；
B、振荡培养后，应选择目的菌浓度最大，即化合物A 含量最少的锥形瓶进行选择接种，B 正确；
C、向固体培养基进行接种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法等，其中稀释涂布平板法还可用于计数，
C 正确；
D、重复多次上述实验获得的目的菌用于环境保护实践之前，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生
对环境有害的代谢废物，大量使用目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，
从而打破微生物菌群的平衡等，D 错误。
故选D。
31．（2023·湖南郴州·统考一模）野生型大肠杆菌菌株能在基础培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株
无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，
①②③④代表培养基，A、B、C 表示操作步骤，D、E 为菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．图中①②③为完全培养基，培养基一般用湿热灭菌法进行灭菌
B．A 操作的目的是提高大肠杆菌基因突变的概率，增加突变株的数量
C．B 的正确操作是用接种环蘸取菌液后在②表面涂布来接种菌种
D．在C 过程原位影印时，用同一块无菌绒布先影印④，再影印③号培养基，可从④中挑取 D 进行纯化培
养。
【答案】B
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【分析】由图分析可知，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用将菌种接种到两种培养基中，
分别是基本培养基、完全培养基；在基本培养基中，某氨基酸突变株不能生长，而在完全培养基中能够生
长，据此可以选择出氨基酸突变株。
【详解】A、结合题图信息分析可知，野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型
菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，且③中只有部分菌落，故图中
①②④为完全培养基，③为基本培养基，A 错误；
B、紫外线可以提高突变的频率，而A 操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度（A 操作不能提高突
变率），即增加突变株的数量，B 正确；
C、B 操作是将菌液滴加到培养基表面，再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C 错误；
D、由图观察可知，D 在基本培养基中无法生长，而在完全培养基上能够生长，据此推测D 是氨基酸营养
缺陷型菌株，若先影印④，由于④为完全培养基，会导致绒布上含有④的成分，用同一块无菌绒布无法起
到筛选作用，D 错误。
故选B。
1．（2023·贵州遵义·校考模拟预测）关于实验室培养和纯化纤维素分解菌过程中的部分操作，下列说法正
确的是（ ）
A．为了防止杂菌污染应将采集的土样进行高压蒸汽灭菌
B．倒平板时将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，防止杂菌污染
C．纯化培养时，对培养皿皿盖做标记，培养皿应正放于恒温培养箱内进行培养
D．获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH
【答案】B
【分析】倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手
拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝
隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒
过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。
【详解】A、为了防止杂菌污染应将用于采集的器具进行灭菌，土样不能进行灭菌，灭菌后的土样中微生
物均被杀死，无法获得目的菌落，A 错误；
B、倒平板时需要将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，这样可防止杂菌污染，B 正确；
C、纯化培养时，培养皿是倒置培养的，所以对培养皿皿底做标记，C 错误；
D、培养细菌时需将pH 调至中性或微碱性，纤维素分解菌属于细菌，则在获取纯培养物时，需要将培养基
的pH 调至中性或微碱性，D 错误。
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故选B。
2．（2023 上·江苏南通·高三统考期中）下图为传统白酒酿造工艺流程，相关叙述正确的是（ ）
A．制成的酒曲中的多种微生物参与了糖化和发酵过程
B．糖化时采用的温度越高，淀粉水解速度越快
C．密坛发酵温度控制在18~30℃，每隔12 小时需将坛盖打开进行排气
D．制成的白酒需经湿热灭菌后并窖藏一段时间后才可饮用
【答案】A
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理是酵
母菌利用葡萄糖在无氧条件下产生酒精。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都
充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、糖化主要是利用大曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖，参与酒制作的微生物有多种但起
主要作用的是酵母菌，A 正确；
B、温度高，蛋白质会发生变性，会使酶失去催化作用，所以温度太高，淀粉水解速度会变慢，B 错误；
C、液态酒精发酵阶段的温度应控制在18~30℃，由于酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，故每隔12 小
时需将坛盖拧松进行排气，C 错误；
D、传统酿造的白酒不需经湿热灭菌，D 错误。
故选A。
3．（2024·吉林长春·统考一模）生活饮用水中大肠杆菌超标会引起肠道外感染和急性腹泻，严重时会危及
生命。某研究小组利用表中的培养基对生活饮用水中的大肠杆菌进行培养和计数，下列叙述正确的是（
）
成分
蛋白胨
蔗糖
乳
糖
K2HPO4
显色剂（伊红—亚甲
蓝）
琼脂
含量
10.0g
5.0g
2.0g
2.0g
0.2g
12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
A．按照用途划分，该培养基属于选择培养基
B．配置培养基时，应先进行灭菌后再调节pH 值
C．计数时，应采用稀释涂布平板法进行接种
D．为防止杂菌污染，应向培养基中添加适量抗生素
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【答案】C
【分析】分析表格可知，该培养基中加入了显色剂，属于鉴别培养基，该培养基中的碳源有蔗糖、乳糖和
蛋白胨，蛋白胨还可提供氮源，在配制培养基时应先调节pH，再灭菌后倒平板，若先灭菌，后调pH，可
能在调pH 的过程中再次引发杂菌污染。
【详解】A、该培养基中含伊红—亚甲蓝显色剂，根据用途划分该培养基属于鉴别培养基，A 错误；
B、在配制培养基时应先调节pH 值，再灭菌后倒平板，B 错误；
C、稀释涂布平板法进行接种可以用来计数，C 正确；
D、不可以在培养基中添加抗生素，以免影响大肠杆菌的生长，D 错误。
故选C。
4．（2023·浙江金华·统考模拟预测）我国是酱油生产最早的国家。制曲是酱油生产的重要工序之一，其主
要目的是给米曲霉创造最佳条件，使其生长繁殖并分泌和积累相应的酶，制曲设备示意图如下。下列叙述
错误的是（ ）
A．鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气
B．酶及微生物的种类和数量是鉴定成曲质量的指标
C．将曲料摊铺在帘架上有利于控制微生物生长的温度
D．该制曲过程主要的发酵产物是葡萄糖、乙醇、乳酸等物质
【答案】D
【分析】鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气，为米曲霉的生长提供足量的氧气，为米曲霉生长创做条件，
以便其大量繁殖，积累相应的酶。
【详解】A、米曲霉的代谢类型是异养需氧型，因此鼓风机应不断通入经过滤的新鲜空气，A 正确；
B、发酵的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖并分泌和积累相应的酶，所以酶及微生物的种类和数量是鉴
定成曲质量的指标，B 正确；
C、微生物的生长需要适宜的温度，曲料摊铺在帘架上可以及时散热，有利于控制微生物生长的温度，C
正确；
D、葡萄糖使发酵的底物，不是产物，D 错误。
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故选D。
5．（2023 上·广东湛江·高三统考阶段练习）下列有关食品保存和发酵食品制作的叙述，正确的是（ ）
A．巴氏消毒法是将牛奶煮沸以杀死杂菌
B．低氧保存果蔬可抑制微生物的细胞呼吸
C．制作泡菜时需要先通入空气然后再密封
D．通过细菌的发酵作用可将豆腐变成腐乳
【答案】B
【分析】制作泡菜利用了乳酸菌发酵的原理，乳酸菌是厌氧菌，需要在无氧环境下生活，泡菜制作的过程
中应一直密封。
【详解】A、巴氏消毒法是指在62~65℃消毒30min，或80~90℃处理30s~1min，A 错误；
B、低氧保存果蔬的原理是低氧状态下微生物的细胞呼吸被抑制，有机物消耗减少，B 正确；
C、制作泡菜时依赖乳酸菌，而乳酸菌是厌氧菌，不能通入空气，C 错误；
D、腐乳发酵主要是依赖毛霉，不是细菌，D 错误。
故选B。
6．（2023·湖南永州·统考一模）为了解生长素和细胞分裂素的用量比例对愈伤组织再分化的影响，研究者
逐渐改变MS 培养基中这两种激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示。下列有关叙述正确的
是（ ）
A．MS 培养基中除含有无机盐外，还需加入葡萄糖等有机物
B．植物激素X 和植物激素Y 分别表示细胞分裂素、生长素
C．植物激素X 和Y 的浓度比大于1 时，未分化细胞群分化形成根
D．植物激素X 的浓度越高，未分化细胞群越容易诱导分化形成芽
【答案】B
【分析】由图可知：①当植物激素X 与植物激素Y 的浓度比等于1 时，未分化细胞群经分裂形成愈伤组织；
②当植物激素X 与植物激素Y 的浓度比大于1 时，未分化细胞群分化形成芽；③当植物激素X 与植物激素
Y 的浓度比小于1 时，未分化细胞群分化形成根；分析可知，激素X 是细胞分裂素，激素Y 是生长素；生
长素在植物组织培养中其主要作用是促进细胞的生长、分裂和分化。
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【详解】A、蔗糖不是微生物利用的直接能源，可以有效减少培养基的污染；MS 培养基中除含有无机盐外，
还需加入蔗糖等有机物，A 错误；
B、生长激素可以诱导生根，细胞分裂素可以诱导生芽；分析题图，当植物激素X 为0 时，植物激素Y 促
进细胞群分化出根，当植物激素Y 为0 时，植物激素X 促进细胞群分化出芽，可知植物激素X 为细胞分裂
素，植物激素Y 为生长素，B 正确；
C、分析题图可知，植物激素X 和Y 的浓度比大于1 时，未分化细胞群分化形成芽，C 错误；
D、生长素的作用是促进细胞的伸长和分化，而细胞分裂素是促进细胞的分裂和增殖。因此在组织培养中，
如果生长素的浓度过高，就会导致细胞过渡伸长和分化，而细胞分裂素则会受到抑制，从而影响组织的增
殖和生长，相反，如果细胞分裂素的浓度过高，就会导致细胞过渡分裂和增殖，而细胞的伸长和分化则会
受到抑制，从而影响组织和生长和发育。在组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例对于组织的生长和发
育至关重要，故植物激素X 的浓度越高，未分化细胞群不会越容易诱导分化形成芽，诱导形成芽，需要生
长素和细胞分裂素具有合适的比例，D 错误。
故选B。
7．（2023 上·浙江嘉兴·高三统考阶段练习）味精的主要成分是谷氨酸钠， 一般通过谷氨酸棒状杆菌发酵
生产。谷氨酸棒状杆菌是一种好氧菌，依靠细胞膜上的转运蛋白分泌谷氨酸。下列措施中，不利于提高谷
氨酸钠产量的是（ ）
A．筛选谷氨酸高产菌株
B．敲除谷氨酸转运蛋白基因
C．适当通气并搅拌
D．适当增加谷氨酸棒状杆菌接种量
【答案】B
【分析】生产味精常用的菌种是谷氨酸棒状杆菌，在一定条件下，利用淀粉、谷氨酸棒状杆菌以及发酵罐，
可以生产味精。谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是异养需氧型。
【详解】A、筛选谷氨酸高产菌株，可以提高谷氨酸产量，A 正确；
B、根据题意“谷氨酸棒状杆菌是一种好氧菌，依靠细胞膜上的转运蛋白分泌谷氨酸”，可知敲除谷氨酸
转运蛋白基因，不利于谷氨酸的分泌，不利于提高谷氨酸产量，B 错误；
C、谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是异养需氧型，适当通气并搅拌，有利于谷氨酸的生成，C 正确；
D、适当增加谷氨酸棒状杆菌接种量，可以提高谷氨酸产量，D 正确。
故选B。
8．（2023 上·山东·高三校联考开学考试）泡菜、腐乳、米酒和米醋等传统发酵食品的制作离不开各种各样
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的微生物，下列叙述正确的是（ ）
A．为防止乳酸菌产生的CO2导致发酵液溢出，泡菜坛不能装满
B．腐乳的制作过程中，毛霉等多种微生物参与了豆腐的发酵
C．米饭蒸熟后应立即撒上制好的酒曲粉，并趁热装入发酵缸中
D．与酒精发酵相比，醋酸发酵需要在较低的温度条件下进行
【答案】B
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都
充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物
产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、无氧条件下，乳酸菌能将葡萄糖分解成乳酸，不会产生CO2，A 错误；
B、参与腐乳制作的微生物是毛霉等多种微生物，B 正确；
C、饭蒸熟后应温度过高，会导致酵母菌死亡，C 错误；
D、与酒精发酵相比，醋酸发酵需要在较高的温度条件下进行，D 错误。
故选B。
9．（2022 上·江苏南京·高三校联考阶段练习）某种物质A（一种含有C、H、N 的有机物）难以降解，会
对环境造成污染，只有某些细菌能降解A。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A 的
细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和A，乙的组分为无机盐、水、A
和B、下列表述正确的是（ ）
A．乙组分的B 物质为琼脂，为了提高准确度，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照
B．实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
C．步骤③的接种工具是接种环，菌落数目稳定时，大小不同的菌落形成的起始时间一般不同
D．实验中初步估测摇瓶M 中细菌细胞数为1.5×107个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL 稀释后的菌液，
且保证每个平板上长出的菌落数不超过150 个，则至少应将摇瓶M 中的菌液稀释104倍
【答案】D
【分析】分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以A 为
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唯一碳源和氮源的选择培养基上，结合题意，甲的组分为无机盐、水和A，乙的组分为无机盐、水、A 和
B，则其中B 为琼脂，④为挑取单菌落接种，⑤在以A 为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一步筛选出高
效降解A 的菌株。
【详解】A、根据图示和题意可知，③稀释涂布平板法接种到以A 为唯一碳源和氮源的选择培养基上，乙
的组分为无机盐、水、A 和B，在乙培养基上要得到单菌落，则其中B 为琼脂，为了提高准确度，实验需
设平行重复实验，且需要另外设置空白对照，检测培养基配制是否合格，A 错误；
B、实验时，从淤泥中分离得到能高效降解A 的细菌菌株，则图①为淤泥取样进行稀释，可以取淤泥加无
菌水制成菌悬液，淤泥中有菌种，因此不能进行灭菌处理；盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进
行灭菌，B 错误；
C、识图分析可知，③稀释涂布平板法接种到以A 为唯一碳源和氮源的选择培养基上，因此步骤③的接种
工具是涂布器，且大小不同的菌落是分解菌分解能力不同导致的，C 错误；
D、利用稀释涂布平板法对细菌进行计数，要保证每个平板上长出的菌落数不超过150，假设稀释倍数为
a，在每个平板上涂布0.1mL 稀释后的菌液，则有150×a÷0.1=1.5×107，则稀释倍数a=104，D 正确。
故选D。
10．（2023 上·河北邢台·高三宁晋中学校联考开学考试）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙
醇的小型实验，实验流程如图所示(清水淋洗时菌T 不会流失)。下列分析错误的是（ ）
A．在粉碎的秸秆中接种菌T 是为了将秸秆中的纤维素大量分解
B．淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供碳源、能源等
C．采用湿热灭菌法对培养基进行灭菌时需控制压力为100kPa，温度为100℃
D．与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，图中方式能节约粮食和提高能量利用率
【答案】C
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水，在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌
无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性
重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
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【详解】A、菌T 能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸杆中接种
菌T，培养一段时间后发现菌T 能够将桔杆中的纤维素大量分解，A 正确；
B、采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供
碳源、能源等，B 正确；
C、采用湿热灭菌法对培养基进行灭菌时需控制压力为100kPa，温度为121℃，C 错误；
D、利用作物秸秆生产燃料乙醇与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，能节约粮食和提高能量利用率，D 正
确。
故选C。
11．（2023 上·河北邢台·高三宁晋中学校联考开学考试）酸马奶酒是一种以鲜马奶为原料，经乳酸菌和酵
母菌共同自然发酵而成的一种传统的乳酸、酒精发酵乳饮料。下列叙述错误的是（ ）
A．乳酸菌和酵母菌都以DNA 作为遗传物质
B．乳酸菌和酵母菌都具有细胞壁、细胞膜和细胞核等结构
C．乳酸菌和酵母菌进行发酵时都不需要O2
D．乳酸菌和酵母菌的一个细胞均可属于生命系统的个体层次
【答案】B
【分析】由原核细胞构成的生物叫原核生物，由真核细胞构成的生物叫真核生物；原核细胞与真核细胞相
比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体，原核细胞只有核
糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质等结构，也含有核酸和蛋白质等物质。
【详解】A、乳酸菌和酵母菌都是细胞生物，均以DNA 作为遗传物质，A 正确；
B、乳酸菌无细胞核，是原核生物，B 错误；
C、乳酸菌为厌氧型细菌，发酵过程中不需要氧气，酵母菌为兼性厌氧微生物，其无氧呼吸的产物是酒精，
在发酵过程中也不需要氧气，C 正确；
D、乳酸菌和酵母菌均为单细胞生物，其一个细胞即为一个个体，均可属于生命系统的个体层次，D 正确。
故选B。
12．（2023 上·湖南·高三长郡中学校联考阶段练习）尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素（CH4N2O）分解为
氨（NH3）和CO2，进而利用氨合成一些所需的物质。尿素分解菌的分离与纯化的培养基通常只需要将细
菌的完全培养基中的氮源作一些调整。下列有关叙述正确的是（ ）
A．尿素分解菌为自养生物，属于生产者
B．尿素能为尿素分解菌提供碳源和氮源
C．尿素分解菌的分离纯化需以尿素为唯一氮源
D．其他杂菌无法在分离纯化残留的培养基上生长
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【答案】C
【分析】由题意可知，尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素（CH4N2O）分解为氨（NH3）和CO2，进而利
用氨合成一些所需的物质，说明尿素能为尿素分解菌提供氮源，而不能提供碳源，尿素分解菌是异养型生
物。
【详解】A、尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素（CH4N2O）分解为氨（NH3）和CO2，进而利用氨合成
一些所需的物质，尿素是有机物，即尿素分解菌利用有机物合成其他物质，而不是利用无机物合成有机物，
其为异养生物，不属于生产者，A 错误；
B、尿素（CH4N2O）被分解为氨（NH3）和CO2，尿素分解菌利用氨合成一些所需的物质，说明尿素能
为尿素分解菌提供氮源，而不能提供碳源，B 错误；
C、尿素分解菌的分离纯化需以尿素为唯一氮源，对应的培养基为选择培养基，C 正确；
D、在分离纯化残留的培养基上有尿素分解菌的代谢产物，可能有些杂菌能在分离残留的培养基上生长，D
错误。
故选C。
13．（2023·辽宁大连·大连八中校考模拟预测）某高校采用发酵罐进行葡萄酒发酵。下列叙述正确的是（
）
A．可以采用过滤、沉淀等方法来获得葡萄酒
B．发酵工程中的中心环节是分离和提纯产物
C．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
D．在发酵工程中培养基需经过严格的灭菌，而发酵设备则保持干净不需灭菌
【答案】C
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或
直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种
子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
【详解】A、发酵工程生产的产品不同，分离提纯的方法一般不同：①如果产品是菌体，可采用过滤，沉
淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提
取，葡萄酒属于发酵产品，应用萃取、蒸馏等方法获得，A 错误；
B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B 错误；
C、发酵液中残留糖的浓度可指示发酵的进程，随着发酵的进行，当发酵液中糖的浓度降到较低水平时，
酵母代谢减慢，此时可终止发酵，C 正确；
D、在发酵工程中，为了获得纯净培养物，防止外来杂菌的污染，培养基和发酵设备都应经过严格的灭菌
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才能使用，D 错误。
故选C。
14．（2023·江苏苏州·校联考三模）为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解细菌，培养结果如图所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．图示采用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法
B．可用干热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌
C．该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
D．培养基中的尿素被分解后，可使酚红指示剂变为红色
【答案】D
【分析】图示为平板划线法，划线的起始区是Ⅰ区，Ⅲ区为最后划线区。
【详解】A、图示采用的接种方法为平板划线法，A 错误；
B、可用湿热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌，B 错误；
C、该实验Ⅲ区有单菌落，可以达到菌种纯化目的，C 错误；
D、培养基中的尿素被分解后呈碱性，可使酚红指示剂变为红色，D 正确。
故选D。
15．（2023·河北沧州·沧州市第二中学校联考三模）黑曲霉是一种丝状真菌，是重要的发酵工业菌种，其
代谢产物广泛应用于食品加工等领域。黑曲霉的PDA 液体产酶培养基组成为麸皮、豆粉饼、（NH4）
2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4，培养时需要通气振荡。下列说法错误的是（ ）
A．黑曲霉的代谢类型为异养需氧型
B．上述培养基需要灭菌后将pH 调至酸性
C．豆粉饼可提供黑曲霉生长所需的碳源和氮源
D．工业化生产时，黑曲霉接种前一般要进行扩大化培养
【答案】B
【分析】各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素
的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
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【详解】A、由题意可知，培养黑曲霉菌需要添加有机碳源且需要通气振荡，因此该菌的代谢类型为异养
需氧型，A 正确；
B、调节pH 应该在灭菌之前进行，B 错误；
C、豆粉饼中含有蛋白质、糖类等，可提供黑曲霉生长所需的碳源和氮源，C 正确；
D、工业化生产时，发酵罐体积大，所需大量的微生物数，因此黑曲霉接种前一般要进行扩大化培养，增
加菌种的数量，D 正确。
故选B。
16．（2023·江苏苏州·校联考三模）发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。 下列叙述正
确的是（ ）
A．菌落的大小、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B．筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产
C．单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，常用作微生物饲料等
D．在生产酸奶时采用巴氏消毒法，杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分
【答案】D
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或
直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种
子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
【详解】A、菌落的大小、颜色、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据，但是有无荚膜通
过肉眼无法观察，A 错误；
B、筛选出能高产柠檬酸的黑曲霉菌种后还需要进一步扩大化培养才能接种到发酵罐中进行发酵生产，B
错误；
C、单细胞蛋白是微生物菌体，不是从微生物细胞中提取的蛋白质，C 错误；
D、在生产酸奶时采用巴氏消毒法，比较温和的消毒方法，杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分，D
正确。
故选D。
17．（2023 上·山西朔州·高三怀仁市第一中学校校考开学考试）“寒霜屡下，园菜渐肥。取而曝之，俟略
干，置缸中，腌以盐。旬余，便可取食。若藏之于瓮，泥封其口，虽留至明年，犹可食也。”以上为小古
文《腌菜》。下列有关说法正确的是（ ）
A．古人多选择在秋冬季节腌菜与乳酸菌的最适温度低有关
B．为成功制得腌菜，可将“园菜”和“瓮”用沸水泡烫片刻
C．腌菜时“泥封其口”是为了创造无氧环境，减少杂菌污染
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D．“旬余，便可取食”与发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低有关
【答案】C
【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
2、乳酸菌是原核生物，代谢类型为异养厌氧型。
【详解】A、古人多选择在秋冬季节腌菜是因为春夏季节时温度高，杂菌繁殖速度快，容易导致菜腐烂变
质，A 错误；
B、“园菜”不能用沸水泡烫，因为传统发酵过程中制作腌菜所需乳酸菌主要来自蔬菜表面，B 错误；
C、腌菜时“泥封其口”的目的是创造无氧环境，因为无氧且酸度较高的条件可减少杂菌污染，C 正确；
D、“旬余，便可取食”，是因为发酵过程中亚硝酸盐含量先升高后逐渐降低并于10 日左右达到最低点，
故需一段时间后方可食用腌菜，D 错误。
故选C。
18．（2023·湖南娄底·涟源市第一中学校联考模拟预测）某培养基成分如下：
葡萄糖4～10g，（NH4）2SO44g，K2HPO47g，KH2PO42g，MgSO41g，CaCl20．02g，
微量元素（Fe、Co、Mn、Zn、Cu、Ni、Mo）各2～10μg，蒸馏水1000mL，pH7．2．
下列相关叙述正确的是（ ）
A．从培养基组成来看，该培养基属于固体培养基
B．从培养基的pH 分析该培养基可用于培养霉菌
C．去掉（NH4）2SO4，该培养基可用于选择培养固氮微生物
D．微量元素在生物体中含量很少，培养基中可以不加或少加
【答案】C
【分析】人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质—培养基，用以培养、
分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
【详解】A、从培养基组成来看，该培养基属于合成培养基，因其不含凝固剂琼脂，属于液体培养基，A
错误；
B、该培养基的pH 为7.2 是弱碱性，适于细菌的培养，霉菌培养需将pH 调至酸性，B 错误；
C、去掉（NH4）2SO4 后，培养基成分缺乏氮源，只有固氮微生物能生长，故可用于固氮微生物的培养，
C 正确；
D、微量元素在生物体内的含量少，但作用很重要，是生物体必不可少的成分，培养基中必须添加，D 错
误。
故选按C。
19．（2023·海南·统考模拟预测）熔喷布是生产口罩的重要材料，主要成分是聚丙烯，废弃口罩会对环境
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造成污染。某人从土壤中分离到一种能分解聚丙烯的细菌。下列说法错误的是（ ）
A．制备培养基时需要先将培养基的pH 调节至中性或弱碱性，再灭菌、倒平板
B．以聚丙烯为唯一碳源的培养基，按功能划分，该培养基属于选择培养基
C．从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌，可采用平板划线法、稀释涂布平板法接种
D．对该菌进行扩大培养时，应持续增加培养液中营养物质浓度，以提高菌种密度
【答案】D
【分析】1、稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，
使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。
2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次
由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。
【详解】A、培养细菌时，需将培养基调至中性或弱碱性，A 正确；
B、用以聚丙烯为唯一碳源的培养基来筛选能分解聚丙烯的细菌，按功能划分，该培养基属于选择培养基，
B 正确；
C、从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌，可采用的接种法有平板划线法和稀释涂布平板法，C 正确；
D、在对该菌进行扩大培养时，不能持续增加培养液中营养物质的浓度，因为持续增加培养液中营养物质
的浓度，细菌会渗透失水，影响其生长繁殖，D 错误。
故选D。
20．（2023·吉林·统考模拟预测）垃圾的生物处理是指利用生物（主要是微生物），将垃圾中的有机物转
化为稳定的产物、能源和其他有用的物质的一种处理技术。下列有关叙述不合理的是（ ）
A．降解塑料（成分是聚乙烯）垃圾，需用聚乙烯作唯一碳源的培养基筛选菌种
B．筛选降解石油的细菌时，培养基及接种工具分别需要干热灭菌和灼烧灭菌
C．厌氧技术处理生活垃圾，产生沼气，实现了生活垃圾的能源化
D．春季播种前利用微生物堆肥处理农田秸秆，有利于提高土壤储碳量
【答案】B
【分析】选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。获
得纯净的培养物关键是防止外来杂菌的入侵。微生物接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
【详解】A、降解塑料（成分是聚乙烯）垃圾，需用聚乙烯作唯一碳源的选择培养基筛选菌种 ，能在该选
择培养基生存的菌种才能降解塑料垃圾，A 不符合题意；
B、微生物的培养基的灭菌方式是湿热灭菌，接种工具可灼烧灭菌，B 符合题意；
C、厌氧技术处理生活垃圾，产生沼气，沼气可以作为燃料或发电，实现了生活垃圾的能源化 ，C 不符合
题意；
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D、春季播种前利用微生物堆肥处理农田秸秆，将秸秆中的纤维素等有机物分解为小分子有机物，有利于
提高土壤储碳量 ，D 不符合题意。
故选B。
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