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专题二十七 基因工程和生物技术的安全性与伦理问题
基础篇
考点 一 基因工程（重组 DNA 技术） 用氯化钙处理棉花受体细胞 有利于含目
Ｃ. ꎬ
的基因的重组质粒导入
１ ( 届福建漳州一中月考ꎬ )一种双链
. ２０２３ ２８
若将目的基因导入四倍体棉花的花粉 通
分子被三种不同的限制酶切割 切割产 Ｄ. ꎬ
ＤＮＡ ꎬ
过花粉离体培养获得的转基因抗虫棉一
物通过电泳分离 用大小已知的 片段的
ꎬ ＤＮＡ
定能稳定遗传
电泳结果作为分子质量标记 关于该双链
ꎮ
２ 答案 Ｂ
下列说法错误的是 .
ＤＮＡꎬ ( )
３ ( 辽宁丹东二模ꎬ )下列有关酶的叙述
. ２０２２ ８ ꎬ
不正确的是
( )
限制酶能够识别双链 分子的特定核
Ａ. ＤＮＡ
苷酸序列 并切开特定部位两个核苷酸之
ꎬ
间的磷酸二酯键
连接酶 聚合酶和逆转录酶均催
Ｂ.ＤＮＡ 、ＲＮＡ
化形成磷酸二酯键
聚合酶发挥作用时从子链的 端向
呈环状结构
Ｃ.ＤＮＡ ３′
Ａ.
端移动
分子质量大小为
５′
Ｂ. １０ ｋｂ
进行动物细胞的传代培养时 贴壁细胞需
有一个 Ｎｏｔ 和两个 Ｅｃｏ 切点
Ｄ. ꎬ
Ｃ. Ⅰ ＲⅠ
其Ｎｏｔ 切点与Ｅｃｏ 切点的最短距离为 要重新用胰蛋白酶等处理
Ｄ. Ⅰ ＲⅠ
３ 答案 Ｃ
２ ｋｂ .
１ 答案 Ｄ ４ ( 届山东莒南一中期初ꎬ ) 琼脂
. . ２０２３ １４ ＤＮＡ
２ ( 届辽宁六校期初ꎬ )如图表示科学家 糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介
. ２０２３ １４
通过基因工程培育抗虫棉时 从苏云金芽孢 质的琼脂糖 具有网络结构 使大分子物质
ꎬ ꎬ ꎬ
杆菌中提取抗虫基因 放入 棉花细胞中 与 在通过时受到较大阻力 借此分离不同大小
“ ” ꎬ ꎬ
棉花的 分子结合起来发挥作用的过程 的 片段 下列说法错误的是
ＤＮＡ ＤＮＡ ꎮ ( )
示意图 以下说法正确的是 凝胶中的 分子通过染色 可在波长为
ꎮ ( ) Ａ. ＤＮＡ ꎬ
的紫外灯下被检测出来
5 ３００ ｎｍ
年 分子片段长度越大 的移动速率
高 Ｂ.ＤＮＡ ꎬＤＮＡ
考 越大
3
年
凝胶制备中加入的核酸染料能与 分
模
Ｃ. ＤＮＡ
拟
图中 是质粒 步骤 常需用到限制酶和 子结合 用于分离后 的检测
A Ａ. Ⅰ ꎬ ① ꎬ ＤＮＡ
版 聚合酶 琼脂糖凝胶电泳可用于分离 鉴定 分
ＤＮＡ Ｄ. 、 ＤＮＡ
高
图中 是含目的基因的重组 质粒 步骤 子的混合物
考
Ｂ. Ⅱ Ｔｉ ꎬ
生
物 是将重组质粒导入农杆菌细胞 ４ 答案 Ｂ
② .
２５６
考点 二 基因工程的应用与蛋白质工程
除此
ꎻ
５ ( 届重庆八中入学考ꎬ ) 溶菌酶在温 之外 构建的表达载体还需要具有的结构有
. ２０２３ １１ Ｔ４ ꎬ
度较高时易失去活性 研究人员通过蛋白质 答出两点即可
ꎮ ( )ꎮ
工程将 溶菌酶第 位上的异亮氨酸改成 与利用乳腺生物反应器生产人血清白蛋
Ｔ４ ３ (４)
半胱氨酸 该处半胱氨酸可与第 位半胱氨 白相比 利用转基因植物生产药用蛋白的优
ꎬ ９７ ꎬ
酸之间形成一个二硫键 获得了热稳定性高 势在于
ꎬ
的 溶菌酶 下列说法正确的是 答出三点即可
Ｔ４ ꎮ ( ) ( )ꎮ
蛋白质工程与中心法则的流程方向一致 ６ 答案 逆转录酶 形成相同的
Ａ. ꎬ . (１) １４ (２)
即 蛋白质 黏性末端 或平末端 以便进行连接 将目
ＤＮＡ→ｍＲＮＡ→ ( )ꎬ
不能利用抗原 抗体杂交的方法对该酶 的基因整合到受体细胞染色体 上
Ｂ. — ＤＮＡ
进行检测 血清白蛋白基因是通过逆转录得到的
(３) ꎬ
蛋白质工程和基因工程的根本区别是操 无启动子等调控序列 故插入位点在启动子
Ｃ. ꎬ
作对象的差异 下游 标记基因 终止子 不受性别限
、 (４)
上述改造过程会使基因发生定向改变 产 制 生产周期更短 更容易大规模培养等
Ｄ. ꎬ ꎬ ꎬ
生一种全新的基因 考点 三 DNA 的粗提取与鉴定
５ 答案 Ｄ
. ７ ( 湖北黄冈中学二模ꎬ )大肠杆菌经溶
. ２０２２ １９
６ ( 届湖北名校一联ꎬ )临床上人血清白
. ２０２３ ２４ 菌酶和洗涤剂处理后 拟核 就会缠绕在
ꎬ ＤＮＡ
蛋白主要作为血浆容量扩充剂广泛应用于
细胞壁碎片上 静置一段时间 质粒分布在
ꎬ ꎬ
出血性休克 烧伤等的治疗 研究人员利用
、 ꎮ 上清液中 利用上述原理可初步获得质粒
ꎮ
农杆菌转化法将人血清白蛋白基因导入水
下列关于质粒的粗提取和鉴定的分
ＤＮＡꎮ
稻胚乳细胞中 成功培育出能产生人血清白
ꎬ 析正确的是
( )
蛋白的转基因水稻 回答下列问题
ꎮ : 提取 时可加
Ａ. ＤＮＡ
利用血清白蛋白 在
(１) ｍＲＮＡꎬ 入酒精 使不溶于
ꎬ
的催化下获得双链 片段 血清白蛋白
ＤＮＡ ( 酒精的蛋白质等
基因 再利用 技术扩增得到血清白蛋
)ꎬ ＰＣＲ 物质析出
白基因 扩增时 要设计一对引物 引
ꎮ ＰＣＲ ꎬ ( 将提取的 溶 专
物 和引物 过程完成三次循环所需 Ｂ. ＤＮＡ 题
１ ２)ꎬＰＣＲ 于 溶液后 可用二苯胺试 二
０.１４ ｍｏｌ/Ｌ ＮａＣｌ ꎬ 十
引物的总数为
ꎮ 剂在沸水浴条件下进行鉴定 七
在构建基因表达载体时 常用同种限制 基
(２) ꎬ 用限制酶 和 分别处理提取的产物 电 因
Ｃ. Ⅰ Ⅱ ꎬ
酶对含人血清白蛋白基因的 片段和 工
ＤＮＡ Ｔｉ 泳出现如图结果 说明未提取到质粒 程
质粒进行酶切 目的是 ꎬ 和
ꎬ 溶菌酶能溶解大肠杆菌细胞壁 洗涤剂能 生
Ｄ. ꎬ 物
在基因工程中 农
技
ꎮ ꎬ 瓦解其细胞膜 但对 没有影响
ꎬ ＤＮＡ 术
杆菌 质粒上的 片段的功能是 的
Ｔｉ Ｔ－ＤＮＡ ７ 答案 Ｄ 安
.
全
ꎮ ８ ( 湖北十堰二模ꎬ 改编)如图是 性
血清白蛋白基因应插入 质粒中启动 . ２０２１ １８ “ＤＮＡ 与
伦
(３) Ｔｉ 的粗提取和鉴定 实验中几个重要操作的示
理
子的下游 其原因是 ” 问
ꎬ 意图 下列叙述错误的是 题
ꎬ ( )
２５７
伦理问题
１０ 答案 Ｄ
.
１１ ( 辽宁六校期初ꎬ ) 不定项 下列关
. ２０２２ ２０ ( )
于生物技术与伦理问题的观点 不正确的是
图中实验的顺序为
ꎬ
Ａ. ③①②④
图 的原理是 不溶于酒精 而某些蛋
( )
Ｂ. ① ＤＮＡ ꎬ
利用体外受精等技术筛选早期胚胎性
白质可溶于酒精
Ａ.
别 设计试管婴儿
图 中需要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅
ꎬ
Ｃ. ①
基于科学和理性讨论转基因作物的安全
拌 便于 析出并保持结构完整
Ｂ.
ꎬ ＤＮＡ
性问题
图 操作中需使用 的 溶液
Ｄ. ④ ２ ｍｏｌ/Ｌ ＮａＣｌ
通过基因筛查禁止重大疾病基因携带者就业
８ 答案 Ａ
Ｃ.
.
大量引入国外转基因作物与本地近缘作
９ ( 山东肥城一模ꎬ )在利用鸡血进行
Ｄ.
. ２０２２ １２
物品种杂交
的粗提取与鉴定 的实验中 相关叙述
“ＤＮＡ ” ꎬ
１１ 答案 ＡＣＤ
正确的是 .
( )
１２ ( 届福建漳州一模ꎬ )
用蒸馏水将 溶液的物质的量浓度调
. ２０２３ ２１ ＣＲＩＳＰＲ/Ｃａｓ９
Ａ. ＮａＣｌ
基因编辑系统包含 Ｃａｓ９ 基因和 编
至 过滤去除析出物
ＳｇＲＮＡ
０.１４ ｍｏｌ/Ｌꎬ
码序列 该系统表达 和
调节 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶 都
(ｇＲＮＡｓ)ꎮ Ｃａｓ９
Ｂ. ＮａＣｌ ꎬ
单链 能与 结
可以去除部分杂质
ＳｇＲＮＡ( ＲＮＡ)ꎮ Ｃａｓ９ ＳｇＲＮＡ
合 并在 引导下 切割双链 以
将丝状物溶解在浓度为 的
ꎬ ＳｇＲＮＡ ꎬ ＤＮＡ
Ｃ. ２ ｍｏｌ/Ｌ ＮａＣｌ
敲除目标基因或插入目的基因
溶液中 加入二苯胺试剂即呈紫色
ꎮ
ꎬ
与 结合形成复合体后
用植物替代鸡血作实验材料 其实验操作
(１) ＳｇＲＮＡ Ｃａｓ９ ꎬ
Ｄ. ꎬ
通过 原则与目标
步骤相同
ＳｇＲＮＡ
９ 答案 Ｂ 序列结合 引导 切断 双链
. ＤＮＡ ꎬ Ｃａｓ９ ＤＮＡ
的
ꎮ
考点 四 生物技术的安全性与伦理问题
基因驱动是指特定基因有偏向性地遗
(２)
１０ ( 届湖北名校一联ꎬ ) 年 月 传给下一代的自然现象 借助
. ２０２３ ６ ２０２２ １ １０ ꎮ ＣＲＩＳＰＲ/
日 美国马里兰大学医学院为一名 岁的 基因编辑 科学家构建拟南芥蓝光受
ꎬ ５７ Ｃａｓ９ ꎬ
男子进行了转基因猪 该转基因猪经过了基 体 ＣＲＹ１ 基因驱动元件 过程如图 所示
( ꎬ １ ꎬ
因编辑 修饰或敲除部分基因 心脏移植手 以实现人工基因驱动
: ) ꎮ
术并获得成功 该患者在接受手术后的
ꎮ ２
个月去世 具体原因还未报道 但可能与免
5 ꎬ ꎬ
年 疫排斥反应有关 下列叙述错误的是
高 ꎬ ( )
考
免疫排斥反应主要依赖于 细胞的作用
3
Ａ. Ｔ
年
患者在术后需使用免疫抑制剂以抑制免
模
Ｂ.
拟
疫细胞的活性 图
A １
版 转基因猪的心脏引起的免疫排斥作用相 为确定基因驱动元件是否插入 ＣＲＹ１ 基因
Ｃ. ꎬ
高
对较弱 应选择引物 进行 电泳
考
ＰＣＲ－
生
物 对动物基因进行编辑不存在安全问题和 鉴定 反应体系中除了引物 模板
Ｄ. ꎮ ＰＣＲ 、
２５８
缓冲液 无菌水 切割同源染色体上的 基因 基因
ＤＮＡ、 、 Ｃａｓ９ Ａ ꎮ Ａ
外 还应加入 受损后 携带 基因的染色体将作为模板
ꎬ ꎬ ａ
修复受损的 当修复完成后 这一对同
ＤＮＡꎬ ꎬ
源染色体都携带 基因 因此 子二代中
ａ ꎮ ꎬ
写出两种 电泳结 含有 基因的个体比例 填 大
( )ꎮ ａ ( “
果如图 据图分析 于 等于 或 小于
２ꎬ ꎬ ”“ ” “ ”)１/２ꎮ
基因驱动元件的大小 若将改造后的纯合雌蚊突变体释放到
(４)
约为 疟疾疫区 可通过
ｂｐꎮ ꎬ
用基因驱动技术 从而降低按蚊的
(３) 图 ꎬ
２
改造传播疟疾的按蚊 种群密度
ꎮ
染色体上的 基因 获得 基因 含 基 １２ 答案 碱基互补配对 磷酸二酯键
Ｘ Ａ ꎬ ａ ꎬ ａ . (１)
因的精子不能成活 用改造后的纯合雌蚊 和 Ｔａｑ 聚合酶 种脱氧核
ꎮ (２)Ｐ１ Ｐ４ ＤＮＡ 、４
突变体与野生型雄蚊交配获得子一代 子 苷酸 均为雄性 大于
ꎬ ４ ６００ (３)
一代相互交配 子二代性别情况是 破坏按蚊种群的性别比例 降低出生率
ꎬ (４) ꎬ
部分子一代按蚊在胚胎发育前
ꎮ ꎬ
专
题
二
十
七
基
因
工
程
和
生
物
技
术
的
安
全
性
与
伦
理
问
题
２５９
综合篇
提升 限制酶的选择和标记基因筛选原理 图中 形成含 基因的重组 质粒
Ｂ. (１)(２) Ｇ Ｔｉ
的过程 需要限制酶Ｅｃｏ 和 连接酶
１ ( 届福建福安一中一检ꎬ )某同学欲利 ꎬ ＲⅠ ＤＮＡ
. ２０２３ １６
图中的转基因过程 利用了农杆菌的感染
用转基因技术将绿色荧光蛋白基因 整合 Ｃ. ꎬ
(Ｇ) 能力
到某行道树中 让行道树含有 基因而在夜
ꎬ Ｇ 图中利用了植物细胞全能性的原理
晚发出绿色荧光 这样既可照明 又可美化环 Ｄ.
ꎬ ꎬ １ 答案 Ｂ
境 图中 和 分别为实验所用的农杆菌 .
ꎮ (１) (２) ２ ( 届福建泉州一模ꎬ )像 Ｂｃｌ
质粒和含绿色荧光蛋白基因 的外源 . ２０２３ １６ Ⅰ(—Ｔ↓
(Ｇ) ＤＮＡ
Ｂｇｌ Ｍｂｏ
片段 下列相关叙述不正确的是 ＧＡＴＣＡ—)、 Ⅱ(—Ａ↓ＧＡＴＣＴ—)、 Ⅰ
ꎮ ( )
这样 识别序列不同 但能产
(—↓ＧＡＴＣ—) ꎬ ꎬ
生相同的黏性末端的一类限制酶被称为同
尾酶 如图表示目的基因及质粒上的酶切
ꎮ
位点 选用不同的限制酶对质粒和目的基
ꎮ
因进行切割 并用 连接酶进行连接 下
ꎬ ＤＮＡ ꎮ
列分析错误的是
( )
图中选择 质粒作为载体的原因是 质
Ａ. Ｔｉ Ｔｉ
粒上的 可转移至受体细胞 并整
Ｔ－ＤＮＡ ꎬ
合到受体细胞染色体 上
ＤＮＡ
在构建基因表达载体时 填
选项 切割质粒 切割目的基因 结果分析
(１) ꎬ (
能 不能 选用 Ｐｓｔ 切割质粒和含肿瘤
形成的重组质粒 “ ”“ ”) Ⅰ
Ｂｃｌ 和 Ｂｃｌ 和 坏死因子基因的 片段 其原因是
Ⅰ Ⅰ 的碱基排列顺序
ＤＮＡ ꎬ
Ａ Ｂｇｌ Ｂｇｌ
Ⅱ Ⅱ 不一定相同 若用
ꎻ
Ｈｉｎ 和 Ｂｇｌ 切割含肿瘤坏死因子基因的
切割后的质粒不
ｄⅢ Ⅱ
Ｂｃｌ 和 可自我环化ꎬ切割 片段 除选用 Ｈｉｎ 和 Ｂｇｌ 组合外
Ⅰ Ｍｂｏ ＤＮＡ ꎬ ｄⅢ Ⅱ ꎬ
Ｂ Ｂｇｌ Ⅰ 后的目的基因可 还可以选用 组合切割质粒
Ⅱ ꎮ
以自我环化
利用 技术扩增 ＴＮＦ 基因时 扩增过
(２) ＰＣＲ ꎬ
形成的重组质粒 程可以在 中自动完成 已知
ꎮ ＤＮＡ
可被Ｍｂｏ 再次切
Ｂｃｌ 和 Ⅰ 复制时 只能从子链的 端向 端开始延
Ｍｂｏ Ⅰ 开ꎬ但可能无法被 ꎬ ５′ ３′
Ｃ Ⅰ Ｂｇｌ 伸 据此可知应选择图甲 乙 丙 丁四种引
Ⅱ Ｂｃｌ 和Ｂｇｌ 再次 ꎬ 、 、 、
Ⅰ Ⅱ
物中的 作为引物 若扩增 次 共
切开
ꎬ ４ ꎬ
需要引物 个
切割后的质粒可 ꎮ
以自我环化ꎬ切割
Ｍｂｏ Ｍｂｏ
Ｄ Ⅰ Ⅰ 后的目的基因也
可以自我环化
科学家需将 ＴＮＦ 基因与
２ 答案 Ｂ (３)
.
重组在一
３ ( 届河南开封开学考ꎬ )肿瘤坏死因子
. ２０２３ ２８ 起 通过 等方法 导入哺乳动物
在体内 体外均能杀死某些肿瘤细胞 ꎬ ꎬ
(ＴＮＦ) 、 的 中 由其发育成的转基因动物进
或抑制肿瘤细胞的增殖作用 科研人员利 ꎬ
ꎮ 入泌乳期后 可以在其分泌的乳汁中获取所
用乳腺生物反应器大量生产肿瘤坏死因子 ꎬ
ꎮ 需要的
已知限制酶 Ｂａｍ Ｈｉｎ Ｐｓｔ Ｂｇｌ 的 ＴＮＦꎮ
ＨⅠ、 ｄⅢ、 Ⅰ、 Ⅱ ３ 答案 不能 用 Ｐｓｔ 切割质粒会破坏
识别 序 列 及 切 点 分 别 是 . (１) Ⅰ
Ｇ ↓ ＧＡＴＣＣ、 四环素抗性基因 Ｈｉｎ Ｂａｍ
回答 ｄ Ⅲ、 Ｈ Ⅰ
Ａ↓ＡＧＣＴＴ、ＣＴＧＣ↓ＡＧ、Ａ↓ＧＡＴＣＴꎮ 仪 乙 丙 乳腺细胞中特
下列问题 (２)ＰＣＲ 、 ３０ (３)
: 异表达的基因的启动子等调控元件 显微注
射 受精卵
图 图
１ ２
5
年
高
考
3
年
模
拟
A
版
高
考
生
物
２６０
创新篇
创新 PCR 定点突变技术 物和侧翼引物 第一轮产物作第二轮 扩
ꎬ ＰＣＲ
增的大引物 过程如图所示 下列叙述正确
１ ( 湖北十堰外国语学校二模ꎬ )大引物 ꎬ ꎮ
. ２０２１ ２０ 的是
定点突变常用来研究蛋白质结构改变 ( )
ＰＣＲ
导致的功能变化 单核苷酸的定点诱变仅
ꎮ
需进行两轮 即可获得 第一轮加诱变引
ＰＣＲ ꎬ
的第 位点引入特定突变后 原理见图
４７ ( )ꎬ
合成了大量抗凝血活性增强的水蛭素 下
ꎮ
列相关叙述正确的是
( )
第一轮 过程中退火所用的温度与第
Ａ. ＰＣＲ
二轮 退火的温度是一样的
ＰＣＲ
扩增的定点诱变产物通常需要连接
Ｂ.ＰＣＲ
到载体分子上才能表达出相应的性状 该
ꎬ
定点诱变产物需具备起始密码 终止密码
、
等结构才能进行转录和翻译 若原基因拟突变位点的碱基对为 则
Ａ. Ａ—Ｔꎬ
第二轮 所用的引物是第一轮 的 让其突变为 后即能达到目的
Ｃ. ＰＣＲ ＰＣＲ Ｔ—Ａ
产物 的两条链 除图示物质外 过程 和 还需提供
ＤＮＡ Ｂ. ꎬ ②、③ ⑤
将某功能蛋白的第 位 改造 含 ２＋的缓冲液 耐高温的 聚合酶
Ｄ. １７ Ｃｙｓ(ＵＧＵ) Ｍｇ 、 ＤＮＡ
成 属于蛋白质工程 和 种脱氧核苷酸
Ｓｅｒ(ＵＣＵ)ꎬ ４
１ 答案 Ｄ 过程 和 可在同一反应容器内同时进
. Ｃ. ② ③
２ ( 届河北邢台开学考ꎬ ) 多选 水蛭 行 过程 的引物可使用引物 和引物
. ２０２３ １８ ( ) ꎬ ⑤ １ ４
素是一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质 突变后的水蛭素基因需要与载体结合 并
ꎮ Ｄ. ꎬ
若用赖氨酸 密码子为 替换水蛭 将其导入受体细胞内进行表达 才能获得
( ＡＡＡ、ＡＡＧ) ꎬ
素第 位的天冬酰胺 密码子为 相应的蛋白质产品
４７ ( ＡＡＣ、
可以提高它的抗凝血活性 某科研 ２ 答案 ＡＢＤ
ＡＡＵ)ꎬ ꎮ .
团队运用重叠延伸 技术在水蛭素基因
ＰＣＲ
专
题
二
十
七
基
因
工
程
和
生
物
技
术
的
安
全
性
与
伦
理
问
题
２６１
高考真题篇
１ ( 江苏ꎬ ꎬ 分)采用基因工程技术调控 １ 答案 Ｂ
. ２０２２ ６ ２ .
植物激素代谢 可实现作物改良 下列相关 ２ ( 山东ꎬ ꎬ 分)关于 的粗提取与
ꎬ ꎮ . ２０２２ １３ ２ “ＤＮＡ
叙述不合理的是 鉴定 实验 下列说法错误的是
( ) ” ꎬ ( )
用特∙异∙启∙动子诱导表达 ｉａａＭ 生长素合成 过滤液沉淀过程在 冰箱中进行是为
Ａ. ( Ａ. ４ ℃
基因 可获得无子果实 了防止 降解
) ＤＮＡ
大量表达 ｉｐｔ 细胞分裂素合成关键基因 离心研磨液是为了加速 的沉淀
Ｂ. ( ) Ｂ. ＤＮＡ
可抑制芽的分化 在一定温度下 遇二苯胺试剂呈现蓝色
Ｃ. ꎬＤＮＡ
提高 ｇａ２ｏｘ 氧化赤霉素的酶基因 的表达
粗提取的 中可能含有蛋白质
Ｃ. ( )
Ｄ. ＤＮＡ
水平可获得矮化品种
２ 答案 Ｂ
.
在果实中表达 ａｃｓ 乙烯合成关键酶基因
Ｄ. ( ) ３ ( 辽宁ꎬ ꎬ 分)抗虫和耐除草剂玉米
. ２０２２ １２ ２
的反义基因可延迟果实成熟
双抗 是我国自主研发的转基因品种 完全酶切果蝇基因组 理论上得到
１２－５ ꎮ ＤＮＡꎬ ＤＮＡ
为给监管转基因生物安全提供依据 采用 片段的平均长度 碱基对 约为
ꎬ ( ) ( )
方法进行目的基因监测 反应程序如图
ＰＣＲ ꎬ Ａ.６ Ｂ.２５０
所示 下列叙述正确的是
ꎮ ( ) Ｃ.４ ０００ Ｄ.２４ ０００
６ 答案 Ｃ
.
７ ( 辽宁ꎬ ꎬ 分)腈水合酶 广泛应
. ２０２１ １４ ２ (Ｎ０)
用于环境保护和医药原料生产等领域 但不
ꎬ
耐高温 利用蛋白质工程技术在 的 和
预变性过程可促进模板 边解旋边复制
Ａ. ＤＮＡ
ꎬ Ｎ０ α β
后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分 亚基之间加入一段连接肽 可获得热稳定的
Ｂ. ꎬ
延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制 融合型腈水合酶 下列有关叙述错误
Ｃ. (Ｎ１)ꎮ
转基因品种经检测含有目的基因后即可上市 的是
Ｄ. ( )
３ 答案 Ｂ 与 氨基酸序列的差异是影响其热稳
. Ａ.Ｎ１ Ｎ０
４ ( 山东ꎬ ꎬ 分)粗提取 时 向鸡 定性的原因之一
. ２０２１ １３ ２ ＤＮＡ ꎬ
血细胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌 过 加入连接肽需要通过改造基因实现
ꎬ Ｂ.
滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤 获得 的过程需要进行转录和翻译
ꎬ Ｃ. Ｎ１
在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取 检测 的活性时先将 与底物充分混
Ｄ. Ｎ１ Ｎ１
出 相对含量较高的白色丝状物的处理 合 再置于高温环境
ＤＮＡ ꎬ
方式是 ７ 答案 Ｄ
( ) .
加入适量的木瓜蛋白酶 ８ ( 江苏ꎬ ꎬ 分)如图是剔除转基因植
Ａ. . ２０２１ １３ ２
的水浴箱中保温 分钟 物中标记基因的一种策略 下列相关叙述错
Ｂ.３７~４０ ℃ １０~１５ ꎬ
加入与滤液体积相等的 体积分数为 误的是
Ｃ. 、 ９５％ ( )
的冷却的酒精
加入 调节浓度至 过滤 调
Ｄ. ＮａＣｌ ２ ｍｏｌ/Ｌ→ →
节滤液中 浓度至
ＮａＣｌ ０.１４ ｍｏｌ/Ｌ
４ 答案 Ａ
.
５ ( 湖北ꎬ ꎬ 分)某实验利用 技术
. ２０２１ １６ ２ ＰＣＲ
获取目的基因 实验结果显示除目的基因条
ꎬ
带 引物与模板完全配对 外 还有 条非特
( ) ꎬ ２
分别带有目的基因和标记基因的两个质
异条带 引物和模板不完全配对 为了减 Ａ.
( )ꎮ
粒 都带有 序列
5 少反应中非特异条带的产生 以下措施中有 ꎬ Ｔ－ＤＮＡ
ꎬ
年 该方法建立在高转化频率基础上 标记基
高 效的是 Ｂ. ꎬ
( )
考 因和目的基因须转到不同染色体上
3 增加模板 的量 延长热变性的时间
年 Ａ. ＤＮＡ Ｂ.
若要获得剔除标记基因的植株 转化植株
模 延长延伸的时间 提高复性的温度 Ｃ. ꎬ
拟 Ｃ. Ｄ.
必须经过有性繁殖阶段遗传重组
５ 答案 Ｄ
A
.
版 获得的无筛选标记转基因植株发生了染
６ ( 湖北ꎬ ꎬ 分)限制性内切酶Ｅｃｏ 识 Ｄ.
高 . ２０２１ ７ ２ ＲⅠ
色体结构变异
考
生 别并切割 双链 用 Ｅｃｏ
物 ＤＮＡꎬ ＲⅠ ８ 答案 Ｄ
.
２６２
９ ( 湖南ꎬ ꎬ 分)水蛭是我国的传统中 凝血活性差异 简要写出实验设计思路
. ２０２２ ２２ １５ ꎬ
药材 主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重
ꎬ
要成分之一 具有良好的抗凝血作用 拟通
ꎬ ꎮ
过蛋白质工程改造水蛭素结构 提高其抗凝
ꎬ ꎮ
血活性 回答下列问题 ９ 答案 多肽链 上决定
ꎮ : . (１) ｍＲＮＡ ｍＲＮＡ
蛋白质工程流程如图所示 物质 是 氨基酸的密码子具有简并性 从基因文
(１) ꎬ ａ (２)
物质 是 在生产 库中获取 人工合成 半保留复制
ꎬ ｂ ꎮ ＤＮＡ
过程中 物质 可能不同 合成的蛋白质空 种类 酶处理后形成的肽中氨基酸的种
ꎬ ｂ ꎬ (３)
间构象却相同 原因是 类 数目和排列顺序不同 在相同条件
ꎬ 、 (４)
下 将蛋白质工程改造后的水蛭素 水蛭蛋白
ꎮ ꎬ 、
酶解产物和天然水蛭素分别进行抗凝血实
验 比较三组血液凝固所需时间长短 所需时
ꎬ ꎬ
蛋白质工程是基因工程的延伸 基因工 间越长说明其抗凝血活性越大
(２) ꎬ
程中获取目的基因的常用方法有 １０ ( 山东ꎬ ꎬ 分)某种类型的白血病
. ２０２２ ２５ １２
和利用 技术扩 由蛋白 引发 蛋白 可使 被蛋白酶
、 ＰＣＲ Ｐ ꎬ ＵＢＣ Ｐ
增 技术遵循的基本原理是 识别并降解 药物 可通过影响这一过程
ꎮ ＰＣＲ ꎬ Ａ
对该病起到治疗作用 为探索药物 治疗
ꎮ ꎮ Ａ
将提取的水蛭蛋白经甲 乙两种蛋白酶 该病的机理 需构建重组载体以获得融合
(３) 、 ꎬ
水解后 分析水解产物中的肽含量及其抗凝 蛋白 和 是缺失
ꎬ ＦＬＡＧ－Ｐ ＦＬＡＧ－Ｐ△ꎮ Ｐ△
血活性 结果如图所示 推测两种处理后酶 特定氨基酸序列的 是一种短肽
ꎬ ꎮ ＰꎬＦＬＡＧ ꎬ
解产物的抗凝血活性差异主要与肽的 连接在 或 的氨基端 使融合蛋白能
Ｐ Ｐ△ ꎬ
填 种类 或 含量 有关 导致其活 与含有 抗体的介质结合 但不影响
( “ ” “ ”) ꎬ ＦＬＡＧ ꎬ Ｐ
性不同的原因是 或 的功能
Ｐ△ ꎮ
为构建重组载体 需先设计引物 通过
ꎮ (１) ꎬ ꎬ
特异性扩增 基因 用于扩增 基因
ＰＣＲ Ｐ ꎮ Ｐ
的引物需满足的条件是
为使 产物
专
ꎮ ＰＣＲ
题
能被限制酶切割 需在引物上添加相应的 二
ꎬ 十
限制酶识别序列 该限制酶识别序列应添 七
ꎬ
基
加在引物的 填 端 或 端
因
( “３′ ” “５′ ”)ꎮ
工
扩增得到的 基因经酶切连接插 程
(２)ＰＣＲ Ｐ 和
入载体后 与编码 的序列形成一个融 生
ꎬ ＦＬＡＧ 物
技
合基因 如图甲所示 其中 为
术
ꎬ ꎬ “ＡＴＧＴＧＣＡ” Ｐ
的
基因编码链起始序列 将该重组载体导入 安
ꎮ 全
细胞后 融合基因转录出的 序列正 性
ꎬ ｍＲＮＡ 与
伦
若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素 确 翻译出的融合蛋白中 的氨基酸序
理
(４) 、 ꎬ ＦＬＡＧ
问
上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗 列正确 但 基因对应的氨基酸序列与 题
ꎬ Ｐ Ｐ
２６３
不同 据图甲分析 出现该问题的原因是 的最后两个碱基编码一个氨基酸 导致
ꎮ ꎬ ꎬ
的密码子被错位读取 在引物中的
ｍＲＮＡ
Ｅｃｏ 识别序列 端添加 个碱基
ꎮ ＲⅠ ３′ １
修改扩增 基因时使用的带有 Ｅｃｏ 识 增强 与 的结合 参与
Ｐ ＲⅠ (３) ＦＬＡＧ－Ｐ ＵＢＣ Ｐ
别序列的引物来解决该问题 具体修改方 与 的结合 药物 通过增强 与
ꎬ ＵＢＣ (４) Ａ Ｐ
案是 结合促进 降解
ＵＢＣ Ｐ
１１ ( 河北ꎬ 节选ꎬ 分)蛋白酶抑制剂
ꎮ
. ２０２２ ２４ １３
基因转化是作物抗虫育种的新途径 某研
ꎮ
究团队将胰蛋白酶抑制剂 和胰凝乳
(ＮａＰＩ)
蛋白酶抑制剂 的基因单独或共
(ＳｔＰｉｎ１Ａ)
同转化棉花 获得了转基因植株
ꎬ ꎮ
回答下列问题
:
图甲 蛋白酶抑制剂的抗虫机制是
(１)
融合蛋白表达成功后 将
(３) ꎬ ＦＬＡＧ－Ｐ、 ꎮ
药物 和 按照图乙中的 是实施基因工程
ＦＬＡＧ－Ｐ△、 Ａ ＵＢＣ (２)
组合方式分成 组 各组样品混匀后分别 的核心
５ ꎮ ꎮ
流经含 抗体的介质 分离出与介质结 利用农杆菌转化法时 必须将目的基因
ＦＬＡＧ ꎬ (３) ꎬ
合的物质并用 抗体检测 检测结果如 插入质粒的 上
ＵＢＣ ꎬ ꎮ
图丙所示 已知 和 不
为检测目的基因在受体细胞基因组中
ꎮ ＦＬＡＧ－Ｐ ＦＬＡＧ－Ｐ△
(４)
能降解 由 组结果的差异推测
的整合及其转录和翻译 可采用的检测技
ＵＢＣꎬ ①②③ ꎬ
ꎬ
药物 的作用是
术有
Ａ
由
写出两点即可
ꎻ ②
( )ꎮ
组或 组的差异推测 中缺失的特
确认抗虫基因在受体细胞中稳定表达
④ ③⑤ ꎬＰ△
(５)
定序列的作用是
后 还需进一步做抗虫的 以鉴
ꎮ
ꎬ
定其抗性程度 图为三种不同遗传操作产
ꎮ
生的转基因棉花抗虫实验结果 据结果分
ꎬ
析 填 或 或
( “ＮａＰＩ” “ＳｔＰｉｎ１Ａ”
图乙 转基因棉花的抗虫效果
“ＮａＰＩ＋ＳｔＰｉｎ１Ａ”)
最佳 其原因是
ꎬ
5
年 图丙 ꎮ
高
考 根据以上结果推测 药物 治疗该病的
3 (４) ꎬ Ａ
年
机理是
模
拟
A ꎮ
版 １０ 答案 能与 基因母链的一段碱基序
. (１) Ｐ
高
列互补配对 短单链核酸 端 基
考
、 ５′ (２)Ｐ
生
物 因编码链的第一个碱基与 Ｅｃｏ 识别序列
ＲⅠ
２６４
中的 来进
ＲＮＡ
行 过程每次循环分为 步 其中温
ꎮ ＰＣＲ ３ ꎬ
度最低的一步是
ꎮ
某人同时进行了新冠病毒核酸检测和
(３)
抗体检测 检测体内是否有新冠病毒抗
(
体 若核酸检测结果为阴性而抗体检测结
基因突变可产生新的等位基因 在自然
)ꎬ
(６) ꎬ
果为阳性 说明
选择的作用下 昆虫种群的基因频率会发
ꎬ
ꎬ
答出 种情况即可 若核
生 导致昆虫朝着一定的方向
( １ )ꎻ
ꎬ
酸检测和抗体检测结果均为阳性 说明
不断进化 据此推测 被蛋白酶抑制剂转
ꎬ
ꎮ ꎬ
基因作物长期选择后 某些昆虫具有了抗
ꎮ
ꎬ
常见的病毒疫苗有灭活疫苗 蛋白疫苗
蛋白酶抑制剂的能力 其分子机制可能是
(４) 、
ꎬ
和重组疫苗等 已知某种病毒的特异性蛋
ꎮ
白 具有抗原性 的编码序列 目的基
Ｓ( ) (
因 为了制备蛋白疫苗 可以通过基因工
写出两点即可
)ꎮ ꎬ
( )ꎮ
程技术获得大量蛋白 基因工程的基本
１１ 答案 抑制害虫胰蛋白酶活性 使害虫
Ｓꎮ
. (１) ꎬ
操作流程是
不能正常消化食物而达到抗虫的目的
基因表达载体的构建
ꎮ
(２) (３)Ｔ－ＤＮＡ
１２ 答案 逆转录酶 特定核苷酸序列
技术 抗原 抗体杂交技术 接
. (１) (２)
(４)ＰＣＲ 、 — (５)
复性 被检测者曾经感染过病毒 体
种试验 的
(３) ꎬ
ＮａＰＩ＋ＳｔＰｉｎ１Ａ ＮａＰＩ＋ＳｔＰｉｎ１Ａ
内出现抗体但目前没有病毒 被检测者感
转基因棉花的虫体质量最低且每株棉铃数
染了病毒并产生了抗体 获得目的基
最多 定向改变 昆虫在胰蛋白酶抑 (４)
(６)
因 构建表达载体 导入受体细胞 目的
制剂的选择下 抗性基因频率逐渐提高 从
→ → →
ꎬ ꎬ
基因的检测与鉴定
而提升了其抗胰蛋白酶抑制剂的能力 昆虫
ꎻ
１３ ( 广东ꎬ ꎬ 分) 绿水逶迤去 青山
的胰蛋白酶基因发生突变 原有的胰蛋白酶
. ２０２２ ２２ １２ “ ꎬ
ꎬ
相向开 大力发展低碳经济已成为全社会
抑制剂不能发挥作用
”ꎬ
的共识 基于某些梭菌的特殊代谢能力
１２ ( 全国乙ꎬ ꎬ 分) 新冠疫情出现 ꎮ ꎬ
. ２０２２ ３８ １５
有研究者以某些工业废气 含 等一碳
后 病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控 ( ＣＯ２ 专
ꎬ
温室气体 多来自高污染排放企业 为原 题
中发挥了重要作用 回答下列问题 ꎬ ) 二
ꎮ ꎮ 十
料 通过厌氧发酵生产丙酮 构建一种生产
新冠病毒是一种 病毒 检测新冠 ꎬ ꎬ 七
(１) ＲＮＡ ꎬ
高附加值化工产品的新技术 基
病毒 核酸检测 可以采取 ꎮ 因
ＲＮＡ( ) ＲＴ－ＰＣＲ
工
法 这种方法的基本原理是先以病毒 程
ꎮ ＲＮＡ 和
为模板合成 这一过程需要的酶是 生
ｃＤＮＡꎬ 物
技
再通过 技术扩增相应
术
ꎬ ＰＣＲ
的
的 片段 根据检测结果判断被检测 回答下列问题 安
ＤＮＡ ꎮ : 全
者是否感染新冠病毒 研究者针对每个需要扩增的酶基因 如 性
ꎮ (１) ( 与
伦
为了确保新冠病毒核酸检测的准确性 图 设计一对 利用 技术 在
理
(２) ꎬ ) ꎬ ＰＣＲ ꎬ
问
在设计 引物时必须依据新冠病毒 优化反应条件后扩增得到目标酶基因 题
ＰＣＲ ꎮ
２６５
研究者构建了一种表达载体 分析纤毛相关基因 Ｘ 是否发生了变异 对
(２) ｐＭＴＬ８０ｋꎬ ꎬ
用于在梭菌中建立多基因组合表达库 经 基因 Ｘ 进行了 扩增与产物测序 从
ꎬ ＰＣＲ ꎮ
筛选后提高丙酮的合成量 该载体包括了 细胞样品中分离 时 可通过交替调节
ꎮ ＤＮＡ ꎬ
启动子 终止子及抗生素抗性基因等 其中 盐浓度将与核蛋白结合的 分离出来
、 ꎬ ＤＮＡ ꎬ
抗生素抗性基因的作用是 溶液中添加 至 的目的是
ＮａＣｌ ２.０ ｍｏｌ/Ｌ
终止子的作用是 扩增时 需在
ꎬ ꎮ ＰＣＲ ꎬ
催化下 在引物的 端进
ꎮ ꎬ
培养过程中发现重组梭菌大量表达上 行 链的延伸 获得扩增产物用于测序
(３) ＤＮＡ ꎬ ꎮ
述酶蛋白时 出现了生长迟缓的现象 推测 为研究蛋白质 在细胞中的定位 构建
ꎬ ꎬ (３) Ｘ ꎬ
其原因可能是 绿色荧光蛋白 与 的融合蛋白 融合
ＧＦＰ Ｘ ꎬ
此外丙酮的积累会伤害细 蛋白具有绿色荧光 可指示其在细胞内位
ꎬ ꎬ
胞 需要进一步优化菌株和工艺才能扩大 置 将Ｘ ＧＦＰ基因融合片段 导入如图
ꎬ ꎮ － Ｍ Ⅱ
应用规模 所示载体质粒 构建 重组质粒 在
ꎮ Ｙꎬ Ｙ－Ｍ (
这种生产高附加值化工产品的新技术 Ｅｃｏ 位点插入片段 请完成下表
(４) ꎬ ＲⅤ )ꎮ ꎮ
实现了 体现了循环经
ꎬ
济特点 从 碳中和 的角度看 该技术的
ꎮ “ ” ꎬ
优势在于 具有广泛的应
ꎬ
用前景和良好的社会效益
ꎮ
１３ 答案 引物 便于筛选含有目的
. (１) (２)
基因的受体细胞 使转录在所需要的地方
停下来 酶蛋白的大量合成消耗了大
(３)
量物质和能量 废弃物的资源化 减
(４)
少了碳排放 图
Ⅱ
１４ ( 江苏ꎬ ꎬ 分)纤毛是广泛存在的
. ２０２２ ２４ １２
细胞表面结构 功能异常可引发多种疾病
ꎬ ꎮ
因此 研究纤毛形成的作用机制具有重要
ꎬ
意义 请回答下列问题
ꎮ ꎮ
纤毛结
(１)
构如图 所
Ⅰ
示 由细胞膜
ꎬ
5 延伸形成的
年
高
纤毛膜主要
考
图
3 Ⅲ
由
年 图
模 Ⅰ 分步实验目标 简易操作、结果、分析
拟 组 成
ꎮ
鉴定正向重 选择图 引物 ꎻ
A 基体由中心体转变而来 中心体在有丝分 ＰＣＲ ① Ⅱ
版 ꎬ 组质粒 目的产物约为
Ｙ－Ｍ ②ＰＣＲ ｂｐ
裂中的功能是
高
ꎮ 确保 及连接处 质粒测序ꎬ图 中正确的是
考 Ｍ ③ Ⅲ
生
物 (２)
某病人肾小管上皮细胞纤毛异常
ꎬ
为了 序列正确 (选填序列编号)
２６６
续表 构建的重组基因表达载体中必须
ꎮ
分步实验目标 简易操作、结果、分析 含有标记基因 其作用是
ꎬ
对照质粒 (仅表达
④ Ｙ－ＧＦＰ
ꎮ
)与实验质粒 分别导
ＧＦＰ Ｙ－Ｍ 进行前期研究时 将含有 ＹＣＦ１ 基因的
检测 融 合 蛋 白 入细胞ꎬ发现对照组整个细胞 (３) ꎬ
重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜
定位 均有绿色荧光而实验组荧光集 ꎬ
采用最多的方法是 研究者
中在纤毛基部ꎬ说明
ꎮ
进一步获得了转 ＹＣＦ１ 基因的不育杨树株
系 采用不育株系作为实验材料的目的是
为研究另一纤毛病相关基因 Ｚ 表达的
ꎬ
(４)
变化 采用荧光定量 法检测健康人与
ꎮ
ꎬ ＰＣＲ
将长势一致的野生型和转基因杨树苗
病人基因 Ｚ 的转录水平 采集样本 提取
(４)
ꎮ 、
移栽到 污染的土壤中 半年后测定植株
总 经 形成 作为模板
Ｃｄ ꎬ
ＲＮＡꎬ ｃＤＮＡ ꎬ
干重 图 及不同器官中 含量 图
扩增结果显示 在总 模板量相
( １) Ｃｄ ( ２)ꎮ
ＰＣＲ ꎬ ｃＤＮＡ
据图 可知 与野生型比 转基因植株对
等的条件下 健康人 Ｃｔ 值为 而病人 Ｃｔ
１ ꎬ ꎬ Ｃｄ
ꎬ １５ꎬ
具有更强的 填 耐性 或 富集
值为 Ｃｔ 值是产物荧光强度达到设定阈
( “ ” “
２０(
能力 据图 可知 对转基因植株的
值时的 循环数 从理论上估算 在
”)ꎻ ２ ꎬ
ＰＣＲ )ꎮ ꎬ
进行后续处理对于缓解土壤 污染
扩增 个循环的产物中 健康人样品
Ｃｄ
ＰＣＲ ２０ ꎬ
最为方便有效
的目的产物大约是病人的 倍
ꎮ
ꎮ
１４ 答案 脂质和蛋白质 发出星射线 形
. (１) ꎬ
成纺锤体 溶解 Ｔａｑ 聚合酶
(２) ＤＮＡ ＤＮＡ
或耐高温的 聚合酶
( ＤＮＡ ) ３′ (３)①ａ、ｂ
蛋白 定位于纤毛
②１ １００ ③Ｑ４ ④ Ｘ
基部 逆转录
(４) ３２
１５ ( 河北ꎬ ꎬ 分)采矿污染和不当使 图 图
. ２０２１ ２４ １５ １ ２
用化肥导致重金属镉 在土壤中过量积 已知 特异定位于转基因植物细
(Ｃｄ) (５) ＹＣＦ１
累 利用植物修复技术将土壤中的 富 胞的液泡膜上 据此分析 转基因杨树比
ꎮ Ｃｄ ꎮ ꎬ
集到植物体内 进行后续处理 例如 收集 野生型能更好地适应高 环境的原因是
ꎬ ( ꎬ Ｃｄ
植物组织器官异地妥善储存 可降低土壤 专
)ꎬ 题
中 的含量 为提高植物对 污染土壤 二
Ｃｄ ꎮ Ｃｄ ꎮ 十
的修复能力 研究者将酵母液泡 转运蛋 相较于草本植物 采用杨树这种乔木作为 七
ꎬ Ｃｄ ꎬ
基
白 ＹＣＦ１ 基因导入受试植物 并检测了相 污染土壤修复植物的优势在于 因
( ) ꎬ Ｃｄ
工
关指标 写出两点即可 程
ꎮ ( )ꎮ 和
回答下列问题 １５ 答案 基因文库 限制酶和 生
: . (１) (２) ＤＮＡ 物
技
为获取 ＹＣＦ１ 基因 将酵母细胞的全部 连接酶 鉴别受体细胞中是否含有目的基
术
(１) ꎬ
的
提取 切割后与载体连接 导入受体菌 因 从而将含有目的基因的细胞筛选出来 安
ＤＮＡ 、 ꎬ ꎬ 全
的群体中储存 这个群体称为 农杆菌转化法 防止 ＹＣＦ１ 基因随花粉 性
ꎬ ꎮ (３) 与
伦
将 序列插入 质粒构建重组载 扩散 给生态系统带来风险 耐性 叶
理
(２) ＤＮＡ Ｔｉ ꎬ (４)
问
体时 所需要的两种酶是 转基因杨树液泡膜上的 转运蛋白 题
ꎬ (５) Ｃｄ
２６７
可将细胞质基质中的 转运至液泡贮存 转化前需用 处理大肠杆菌细胞
Ｃｄ ꎬ (３) ＣａＣｌ２ ꎬ
降低 对细胞代谢的影响 乔木比草本生 使其处于
Ｃｄ
物量大 与外界物质交换能力强 的生理状态 以提高转化效率
ꎬ ꎬ ꎮ
１６ ( 辽宁ꎬ ꎬ 分) 蛋白具有抑制 将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青
. ２０２１ ２４ １０ ＰＨＢ２ (４)
细胞增殖的作用 为初步探究某动物 霉素的培养基上进行培养 随机挑取单菌
ꎮ ꎬ
蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因 落 分别编号为 培养并提取质粒
ＰＨＢ２ ꎬ ( １、２、３、４) ꎬ
研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基 用 中选用的两种限制酶进行酶切 酶切
(２) ꎬ
因编码序列 简称 ｐｈｂ２ 基因 大小为 产物经电泳分离 结果如图 号菌
( )ꎬ ꎬ ２ꎬ
碱基对 利用大肠杆 落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒
０.９ ｋｂ(１ ｋｂ＝１ ０００ )ꎬ ꎮ
菌表达该蛋白 回答下列问题
ꎮ : 注 为指示分
: Ｍ
为获取 ｐｈｂ２ 基因 提取该动物肝脏组
(１) ꎬ 子大小的标准参
织的总 再经 过程得到
照物 小于
ＲＮＡꎬ ꎻ ０.２ ｋｂ
将其作为 的模板 并设计一对 的 分子条带
ｃＤＮＡꎬ ＰＣＲ ꎬ ＤＮＡ
特异性引物来扩增目的基因 未出现在图中
ꎮ 图
图 为所用载体 ２
(２) １ 将纯化得到的 蛋白以一定浓度
图谱示意图 图中限 (５) ＰＨＢ２
ꎬ 添加到人宫颈癌细胞培养液中 培养 小
制酶的识别序列及 ꎬ ２４
时后 检测处于细胞周期 示意图见图
切割位点见表 为 ꎬ ( ３)
ꎮ 不同时期的细胞数量 统计结果如图 分
使 ｐｈｂ２ 基因 该基 ꎬ ４ꎮ
( 析该蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖可能的原
因序列不含图 中
１ 因是将细胞阻滞在细胞周期的
限制酶的识别序列 图
) １ 填 或 或 期
与载体正确连接 在扩增的 ｐｈｂ２ 基因两端
( “Ｇ１” “Ｓ” “Ｇ２/Ｍ”) ꎮ
ꎬ
分别引入 和 两种不同限
制酶的识别序列 经过这两种酶酶切的
ꎮ
ｐｈｂ２ 基因和载体进行连接时 可选用
ꎬ
填 Ｅ ｃｏｌｉ 连接酶 或
( “ . ＤＮＡ ”
连接酶
“Ｔ４ ＤＮＡ ”)ꎮ
相关限制酶的识别序列及切割位点
识别序列 识别序列 １６ 答案 逆转录 Ｐｖｕ Ｅｃｏ
名称 名称 . (１) (２) Ⅱ ＲⅠ
及切割位点 及切割位点
连接酶 一种能吸收周围环境
Ｔ４ ＤＮＡ (３)
5
↓ ↓
年 Ｈｉｎ ＡＡＧＣＴＴ Ｅｃｏ ＧＡＡＴＴＣ 中 分子
高 ｄⅢ ＲⅠ ＤＮＡ (４)３ (５)Ｇ２/Ｍ
考 ＴＴＣＧＡＡ ＣＴＴＡＡＧ
3 ↑ ↑
年 ↓ ↓
模 Ｐｖｕ ＣＡＧＣＴＧ Ｐｓｔ ＣＴＧＣＡＧ
拟 Ⅱ Ⅰ
ＧＴＣＧＡＣ ＧＡＣＧＴＣ
A ↑ ↑
版 ↓ ↓
Ｋｐｎ ＧＧＴＡＣＣ Ｂａｍ ＧＧＡＴＣＣ
高 Ⅰ ＨⅠ
ＣＣＡＴＧＧ ＣＣＴＡＧＧ
考
↑ ↑
生
物 注:箭头表示切割位点
２６８
