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考点43 传统发酵技术
考点44 微生物的培养技术及应用（精练）
1.
（2023•贵港开学）泡菜是许多人喜爱的一道开胃菜。制作泡菜时利用的微生物是（ ）
A．青霉
B．乳酸杆菌
C．曲霉
D．酵母菌
2.
（2023 春•绵阳期末）某生物兴趣小组制作泡菜时，对发酵早期发酵液中的乳酸菌含量和亚硝酸盐含量进
行了测定，结果如图。分析错误的是（ ）
A．前2 天乳酸菌含量变化慢，可能是坛子内的O2抑制了乳酸菌繁殖
B．前4 天亚硝酸盐的含量变化快，可能是其他细菌大量繁殖导致的
C．第6 天后亚硝酸盐含量变化缓慢，可能是大量乳酸抑制杂菌活动
D．为减少泡菜中亚硝酸盐的含量，该泡菜腌制8 天左右食用最佳
3.
（2023 春•张家口期末）约9000 年前，我们的祖先就会利用传统发酵技术生产果酒、果醋、泡菜和腐乳等
发酵产品，后来又发展了发酵工程。下列有关叙述错误的是（ ）
A．传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主
B．果酒、腐乳发酵利用的主要菌种均是真核生物，果醋、泡菜发酵利用的主要菌种均是原核生物
C．果酒发酵的最适温度为18～30℃，果醋发酵的最适温度为30～35℃
D．进行泡菜发酵时，原材料只能装至八成满，是为了防止乳酸菌产生的CO2导致发酵液溢出
4.
（2023 春•易门县期末）下列关于传统发酵的做法，合理的是（ ）
A．每日从泡菜坛中取少量泡菜品尝，以确定自制泡菜是否可以食用
B．利用传统作坊中的酒曲，有利于大规模生产黄酒
C．将葡萄汁煮沸冷却后灌入约
瓶，密闭发酵即可自制葡萄酒
D．腐乳制作过程中需要添加蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等
1
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5.
（2023•山东）以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4 个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要
浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法
正确的是（ ）
A．①主要是为了防止菜料表面的酣酸杆菌被杀死
B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
6.
（2022 春•浙江期中）如图是酱油发酵工艺过程，微生物分解大豆、小麦中的蛋白质、脂肪等有机物，最
终形成具有特殊色泽和良好风味的酱油。下列叙述错误的是（ ）
A．发酵池中两种主要微生物产生的酒精、乳酸均可抑制杂菌生长
B．米曲霉发酵阶段应提供氧气，发酵池发酵阶段应密封
C．米曲霉与酵母菌在结构上的主要区别是有无成形的细胞核
D．使用米曲霉菌与乳酸菌进行食品生产时，需要合理控制温度、pH 等发酵条件
7.
（2023•江苏开学）某同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相关叙述正确的是（ ）
A．果酒发酵，每日放气需迅速，避免空气回流
B．发酵过程中pH 持续降低，有机物的种类和含量持续增加
C．果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时
D．果酒发酵后，提高发酵环境温度即可进行旺盛的果醋发酵
8.
（2023•邯郸开学）下列有关家庭制作果酒、果醋的叙述，错误的是（ ）
A．制作果酒与制作果醋的主要微生物的细胞结构存在明显差异
B．制作果酒时，对葡萄进行酒精浸泡或反复冲洗有利于果酒发酵
C．制作果醋时，接种优良的醋酸菌可以提高发酵速度和产品质量
D．两种发酵都可通过控制温度与氧气实现对发酵过程的有效控制
9.
（2021 春•孝感期末）如图表示利用苹果制备果酒、果醋的流程图。下列有关叙述错误的是（ ）
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A．过程①接种人工培育的酵母菌可以提高苹果酒的品质
B．从变酸的葡萄酒表面获得菌膜，再培养分离也可为③提供所需菌种
C．整个发酵过程都必须在严格无菌条件下才能正常进行
D．过程①所需的最适温度低于过程②
10. （2022 春•海陵区校级期中）研究人员开展酵母接种量对红树莓果酒中花色苷含量和酒精度影响的研究，
结果如图。相关叙述错误的是（ ）
A．利用红树莓发酵产生果酒的场所主要是红树莓果的细胞质基质
B．发酵温度和时间属于无关变量，会影响实验结果
C．果酒中的花色苷易溶于酒精，来源于红树莓果皮细胞的液泡
D．在实验发酵条件下，酵母的最佳接种量为0.2%左右
11.
（2023•石嘴山校级开学）下列关于微生物培养过程的说法，正确的是（ ）
A．培养基中同一种物质可能既做碳源又做氮源
B．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基
C．倒平板时，应将打开的皿盖放在一边，以免培养基溅到皿盖上
D．只有平板划线法接种培养后可获得单菌落
12. （2023 春•临夏州期末）科研人员利用无机盐、琼脂和石油配制培养基，从被石油污染的土壤中分离获得
了能降解石油成分的菌株CT
6
﹣，步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
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A．配制好的培养基采用高压蒸汽灭菌的方法进行灭菌
B．振荡培养可使菌体与培养液充分接触
C．需用未接种的空白培养基一同培养，判断灭菌是否彻底
D．测定CT
6
﹣活菌数量，可采用平板划线法进行计数
13. （2021•山东模拟）尿素（CO（NH2）2）是一种高浓度N 肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有被土壤
中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的
叙述，其中正确的是（ ）
A．利用平板划线法可以直接进行尿素分解菌的分离、计数和鉴定
B．向以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红溶液可以鉴别出能产生脲酶的细菌
C．分离后的尿素分解菌可以接种到试管的斜面培养基上长期保存
D．若要判断以尿素为唯一氮源的培养基是否起到了选择作用，需设置接种的牛肉膏蛋白胨培养基作对
照
14. （2023 春•绵阳期末）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污
染展开，常用的方法是消毒和灭菌。下列有关无菌技术的叙述，错误的是（ ）
A．消毒和灭菌的原理都相同，杀死物体内外所有的微生物
B．在100℃煮沸5～6 分钟可以杀死微生物细胞，属于消毒
C．接种室、接种箱或超净工作台在使用前可用紫外线消毒
D．高压蒸汽灭菌时，锅内的压力一般为100kPa，温度为121℃
15. （2023 春•和硕县校级期末）微生物接种的方法有很多，平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意
图，划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是（ ）
A．划线操作时，用蘸有菌种的接种环在培养基表面划线
B．蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰附近进行
C．在第②～④区域中划线前都要对接种环进行灭菌
D．划线时要将第④区域的划线与第①区域的划线相连
16. （2023•福建模拟）野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨
基酸，只能在完全培养基上生长。如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，其中①②③④
代表培养基，A、B、C 表示操作步骤，D、E 为菌落。下列叙述错误的是（ ）
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A．过程A 中大肠杆菌的基因可能发生了碱基对的增添、缺失或替换
B．相比于基本培养基③，培养基④中加入了某种氨基酸
C．过程B 中的接种方法为平板划线法或稀释涂布平板法
D．经过程C 原位影印及培养后，可从培养基④中挑取D 进行纯化培养
17. （2023 春•泽普县校级期末）下列关于统计菌落数目方法的叙述，不 正确的是（ ）
A．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
B．为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数
C．采用稀释涂布平板法计数获得的菌落数往往少于实际的活菌数
D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结
果
18. （2023•吕梁开学）尿素是一种非蛋白氮饲料，常被用于反刍动物日粮配制，以降低日粮蛋白用量，节约饲
养成本。反刍动物的瘤胃中尿素被分解成氨，氨则被用于合成优质微生物蛋白。某兴趣小组尝试从奶牛的
瘤胃中分离出尿素分解菌。下列有关叙述正确的是（ ）
A．需配制以尿素为唯一碳源的培养基，还需要加牛肉膏等营养物质
B．用灭菌后的涂布器蘸取0.1mL 菌液在酒精灯火焰旁将菌液涂布均匀
C．以未接种的培养基为对照组，可判断选择培养基是否具有选择作用
D．尿素分解成氨后，培养基中的pH 升高，可用酚红指示剂进行鉴定
19. （2022•枣庄二模）自生固氮菌是土壤中能独立进行固氮的细菌。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离
和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。已知步骤④获得的三个平板的菌落数分别为90、95、100，
对照组平板为0。相关叙述正确的是（ ）
A．步骤②振荡20min 的目的是扩大菌种数量，属于选择培养
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B．步骤④使用接种环划线接种，使用前需要灼烧灭菌
C．1g 土壤中平均自生固氮菌数约为9.5×106个
D．所用培养基应加入碳源、氮源、无机盐、水和琼脂
20. （2022•通州区一模）精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，下图为野生型
谷氨酸棒状杆菌经诱变和筛选获得精氨酸依赖型菌过程示意图，过程②将紫外线照射处理过的菌液接种在
培养基甲上，培养至菌落不再增加。过程③向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关说法错误的
是（ ）
A．紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生基因突变
B．过程②所用的培养基是缺少精氨酸的选择培养基
C．图甲中菌落A 是采用平板划线法接种后培养得到
D．图乙中菌落B 应为精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌
21. （2023•辽宁模拟）2022 年由于环境的污染导致化合物S 被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C
可生产S，S 的产量与菌株C 培养所利用的碳源关系密切。为此，某科学家通过实验比较不同碳源对菌体
生长和S 产量的影响，结果见表。下列说法错误的是（ ）
碳源
细胞干重/（g/L）
S 产量/（g/L）
葡萄糖
3.12
0.15
淀粉
0.01
0.00
制糖废液
2.30
0.18
A．实验室培养微生物时，除碳源外，还需要提供水、氮源和无机盐等
B．由实验结果可知，菌株C 生长的最适碳源是制糖废液
C．由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C 不能生长，其原因可能是缺少淀粉酶
D．利用制糖废液生产S 可以实现废物利用，其意义是减少污染、节省原料、降低生产成本
22. （2021 秋•武强县校级月考）果酒、果醋、腐乳、泡菜是人们非常喜爱的发酵食品，请回答下列相关问题：
（1）与醋酸菌相比，酵母菌细胞结构的主要特点是
。
（2）果汁发酵后是否产生酒精，可以用
来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现
色。
（3）某同学在通过发酵制作果酒时，发现在制作原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度，原因是
。
（4）传统发酵技术以葡萄为原料制作葡萄酒时，可以不添加酵母菌，原因是
6
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。
（5）如图为腐乳的生产工艺流程：
现代科学研究发现a 过程有多种微生物参与，其中起主要作用的是
。经过发酵后的腐乳味道
鲜美，易于消化吸收，原因是：
。
23. （2023 春•南宁期末）人体每天产生的尿酸有
通过肾排出，其余
则通过肠道排泄，其中肠道菌群对尿
酸的代谢起着重要作用。利用肠道细菌降解尿酸可为高尿酸血症的治疗提供新思路。回答下列问题。
（1）研究人员需要从
（填“高”或“低”）尿酸人群的粪便中采集标本，制备成菌液保存。要
测定菌液中细菌的数目，可在显微镜下用
计数板直接计数；除此之外还可以采用
，该方法的测量值与实际值相比一般会偏小。
（2）本实验用到的尿酸选择培养基需要进行
（填灭菌方式）处理；培养皿需要
进行
（填灭菌方式）处理。
（3）高效尿酸降解菌的驯化过程采用浓度梯度法把菌液分别接种于不同浓度尿酸（1.7mmol/L，
1.9mmol/L、2.1mmol/L，2.3mmol/L）选择培养液中，每组3 个平行样本，厌氧条件下37℃，220r/min
摇床培养48h。每组3 个平行样本的目的是
；在厌氧
条件下培养的原因是
。
（4）通过驯化筛选获得1 株肠道细菌，命名为S3A，其在不同尿酸浓度驯化培养基中均可生长且尿酸
降解率如表，通过分析可得到的结论是
。
培养基初始尿酸浓
度/（mmol•L
1
﹣）
降解后培养基尿酸浓
度/（mmol•L
1
﹣）
尿酸降解率/%
1.74±0.06
1.18±0.04
32.2
1.89±0.04
1.19±0.03
37.0
2.05±0.09
1.20±0.06
41.5
2.26±0.08
1.13±0.04
50.0
24. （2023•陕西开学）随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆进行燃料乙醇的生产对缓解全球
能源危机有着重大意义。黑土壤中富含由多年落叶形成的腐殖质，科研人员利用其为原料开展了筛选、诱
变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如图1 所示。回答下列问题：
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图1
图2
（1）一般情况下，图1 中的富集培养基属于
（填物理形态）培养基。采用黑土壤富集产纤维
素酶菌株的原因是
。
（2）常采用稀释涂布平板法或
去将富集培养后的菌种接种于CMC 平板上进行筛选，
CMC 平板的筛选原理是
。培养一段时间后，可根据
初步鉴定
并挑取产纤维素酶菌株XZ
33
﹣
。
（3）选育高产纤维素酶菌株时，可通过向培养基中加入刚果红染液筛选出透明圈直径与
比
值大的菌落作为目的菌落。
8
