文档内容
第 16 讲 发酵工程
目 录
01 考情透视·目标导航
02 知识导图·思维引航
03 核心整合·能力提升
核心整合一 传统食品制作技术
知识串联 传统发酵技术中的菌种比较
核心整合二 微生物培养及应用
知识串联1 比较两种常见的接种方法
知识串联2 酵母菌的纯培养及微生物分离与计数
知识串联3 发酵工程的基本环节
04 题型突破·命题预测
题型1 果酒果醋的制作
真题突破 题型2 微生物的培养及计数
题型3 发酵工程及应用
预测1 结合传统发酵技术的应用，考查实践能力
以热点窥预测
预测2 结合微生物的培养、分离和计数，考查科学思维
05 拓展应用·情境推理
情境1 透明圈
情境2 变色圈
情境3 抑菌圈
情境4 生长圈考试频
核心考点 考题统计 考情分析
次
（2025 浙江卷）果酒果醋的制作 本部分的命题形式多
3 年 10 （2024 江苏卷）泡菜的腌制 样，属于高考必考内
传统发酵技术的应用
次 （2024 浙江卷）果酒果醋的制作 容，试题情境主要来
（2024 湖北卷）果酒果醋的制作 自生产生活实际，与
现实联系密切，核心
（2024 海南卷）培养基成分
素养侧重对科学探究
微生物的培养技术及应 3 年 22 （2024 江苏卷）微生物计数
和科学思维的考查。
用 次 （2024 重庆卷）微生物分离与计数
2025年高考本题组很
（2024 山东卷）微生物培养
可能继续用常见发酵
（2024 天津卷）微生物培养综合
产品的制备过程作为
（2024 福建卷）发酵工程应用
命题情境，联系生产
3 年 17
发酵工程及应用 （2024 江西卷）发酵工程应用
生活实际，考查教材
次
（2024 北京卷）发酵工程应用
中的相关概念和内
（2024 湖南卷）微生物培养技术综合 容。
借助透明圈、抑菌圈、生长圈和变色圈考查了微生物培养过程中的鉴定、筛选
情境设计
等方法，体现了科学思维和科学探究的核心素养。
果酒果醋的制作
备考要点 微生物的培养及计数
发酵工程及应用核心整合一 传统食品制作技术
知识串联 传统发酵技术中的菌种比较
菌种 酵母菌 醋酸菌 乳酸菌
分类 真核生物 原核生物 原核生物
代谢类型 异养兼性厌氧型 异养好氧型 异养厌氧型
发酵条件 前期需氧，后期无氧 需氧 无氧
发酵适宜温
18～30 ℃ 30～35 ℃ 室温
度
①酒精发酵
CH O――→2CHOH(酒精)＋2CO＋能量
6 12 6 2 5 2
②醋酸发酵
主要反应式 当O、糖源充足时：CH O＋2O――→2CHCOOH(乙酸)＋2HO＋2CO＋能量
2 6 12 6 2 3 2 2
当缺少糖源时：CHOH＋O――→CHCOOH(乙酸)＋HO＋能量
2 5 2 3 2
③乳酸发酵
CH O――→2CHO(乳酸)＋能量
6 12 6 3 6 3
生产应用 酿酒、发面 酿醋 制作酸奶、泡菜
【典例1】家庭制作馒头时可以利用前一次发酵保存下来的“面团”，制作泡菜时可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”，而工业上大规模生产馒头或泡菜时往往需要添加单一菌种。下列叙述错误的是（
）
A．家庭制作馒头时采用老面发酵，属于传统发酵技术
B．添加“面团”和“陈泡菜水”可分别为发酵提供酵母菌和乳酸菌等菌种
C．馒头和泡菜的制作都需要创造无氧环境
D．泡菜腌制时食盐用量过高易造成泡菜咸而不酸
核心整合二 微生物培养及应用
知识串联1 比较两种常见的接种方法
【易错提醒】
①检验培养基的灭菌是否合格的方法：随机取若干灭菌后的空白培养基在适宜条件下培养一段时间，观察
培养基上是否有菌落生成。平板培养基储存或培养时要倒置。
②平板划线法只能纯化，不能计数，每次划线前后需要灼烧接种环。
【典例1】获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。下列关于微生物培养技术叙述正确的是（ ）
A．在接种前对培养基进行湿热灭菌或干热灭菌，可以有效杀死其中的杂菌
B．使用平板划线法或稀释涂布平板法接种，可以将微生物分散并形成单个菌落
C．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定
D．分离细菌和真菌时，选择性地添加抗生素到培养基中，可确保获得特定种类的细菌
知识串联2 酵母菌的纯培养及微生物分离与计数
1、酵母菌的纯培养：
（1）方法步骤：制备培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌
（2）注意事项：
①接种坏灭菌的方法是灼烧灭菌②划线操作需要待平板冷却凝固后才能进行
2、分解尿素的细菌：
（1）筛选：以尿素为唯一氮源的选择培养基
（2）鉴别：培养基加入酚红指示剂
（3）群计算公式：每克样品的细菌数=（C÷V）×M【C：平均菌落数，V:稀释液体积，M：稀释倍数】
【典例2】酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行
了如图I所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法错误的是（
）
A．发酵过程中的缺氧环境、酵母菌产生的酒精等可抑制杂菌的繁殖
B．用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数可能低于实际的活菌数
C．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌
D．由图Ⅱ可知，乙、丙、丁培养基浑浊的原因是培养基灭菌不彻底，丁组酵母菌产酒精能力比乙强
知识串联3 发酵工程的基本环节【典例3】与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列叙述正确的
是（ ）
A．发酵工程的菌种可以从自然界筛选，不能通过诱变育种获得
B．传统发酵以液体发酵及半固体发酵为主，而发酵工程以液体发酵为主
C．发酵工程的发酵环节要严格控制发酵条件以防影响微生物生长繁殖及代谢
D．通过发酵工程从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可用作家畜、家禽的饲料
题型1 果酒果醋的制作
1．（2025·浙江·高考真题）传统发酵技术为我们提供了多种食品、饮料及调味品。下列叙述错误的是
（ ）
A．泡菜的风味由乳酸菌的种类决定
B．用果酒发酵制作果醋的主要菌种是醋酸菌
C．家庭酿制米酒的过程既有需氧呼吸又有厌氧呼吸
D．传统发酵通常是利用多种微生物进行的混合发酵
【易错提醒】泡菜的风味由原料、发酵菌种类、发酵环境等因素共同决定的。2．（2024·江苏·高考真题）关于“利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡菜”的实验，下列叙述正确的是（
）
A．制作泡菜的菜料不宜完全淹没在煮沸后冷却的盐水中
B．制作酸奶的牛奶须经过高压蒸汽灭菌后再接种乳酸菌
C．发酵装置需加满菜料或牛奶并封装，以抑制乳酸菌的无氧呼吸
D．控制好发酵时间，以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质
（2024·浙江·高考真题）阅读下列材料，完成下面小题。
柿子具有较高的营养价值和药用价值。采用液体发酵法可酿制出醋香浓郁、酸味纯正的柿子醋，提高了柿
子的经济价值。柿子醋的酿造工艺流程如图所示。
3．下列关于酒精发酵和醋酸发酵的叙述，错误的是（ ）
A．酒精发酵是吸能反应 B．酒精发酵在无氧条件下进行
C．醋酸发酵是放能反应 D．醋酸发酵在有氧条件下进行
4．下列关于柿子醋酿造过程的叙述，错误的是（ ）
A．加酶榨汁环节加入果胶酶，有利于提高柿子汁产量
B．酒精发酵前可对柿子汁进行杀菌，以利于酒精发酵
C．若柿子酒的酒精度过高，应稀释后再用于醋酸发酵
D．用不同品种和成熟度的柿子酿造的柿子醋风味相同
【易错提醒】呼吸作用属于放能反应。
5．（2024·湖北·高考真题）制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物，常
用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（ ）
A．食用醋的酸味主要来源于乙酸 B．醋酸菌不适宜在无氧条件下生存
C．醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D．葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
【易错提醒】醋酸菌属于细菌，没有线粒体。
题型2 微生物的培养及计数
6．（2024·海南·高考真题）某小组为检测1株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和
时间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（ ）
组别 培养条件 实验结果
① 基础培养基 无法生长
② 基础培养基+甲、乙、丙3种氨基酸 正常生长
③ 基础培养基+甲、乙2种氨基酸 无法生长
④ 基础培养基+甲、丙2种氨基酸 正常生长
⑤ 基础培养基+乙、丙2种氨基酸 正常生长A．组别①是②③④⑤的对照组
B．培养温度和时间属于无关变量
C．①②结果表明，甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸
D．①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型
7．（2024·江苏·高考真题）酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（
）
A．酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌
B．酵母菌是真核细胞，需放置在CO 培养箱中进行培养
2
C．可用稀释涂布平板法对酵母菌计数
D．该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰
8．（2024·江苏·高考真题）某同学进行下列实验时，相关操作合理的是（ ）
A．从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌
B．观察黑藻的细胞质流动时，在高倍镜下先调粗准焦螺旋，再调细准焦螺旋
C．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理
D．鉴定脂肪时，子叶临时切片先用体积分数为50%的乙醇浸泡，再用苏丹Ⅲ染液染色
【易错提醒】高倍镜观察时只能调细准焦螺旋。
9．（2024·重庆·高考真题）养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为
尿素进而产生NH，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH 产生的微生物。兴趣小组按
3 3
图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ）
A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落
B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验
C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙
D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH 的减少
3
10．（2024·浙江·高考真题）脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活
性。下列叙述错误的是（ ）
A．镍是组成脲酶的重要元素
B．镍能提高尿素水解反应的活化能
C．产脲酶细菌可在以NHCl为唯一氮源的培养基生长繁殖
4
D．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌
题型3 发酵工程及应用
11．（2024·天津·高考真题）实验中常根据菌落外表特征鉴别微生物，进而对实验结果做出判断，下列实验不是根据菌落外表特征做出判断的是（ ）
A．艾弗里证明肺炎链球菌的转化因子是DNA
B．判断分离酵母菌的固体培养基是否被毛霉污染
C．利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株
D．判断在尿素为唯一氮源的培养基上生长的尿素降解菌是否有不同种类
12．（2024·福建·高考真题）虾酱是以虾为原料的传统发酵食品。在乳酸菌、芽孢杆菌等多种微生物共
同作用下，原料中的蛋白质和脂肪发生水解，形成虾酱的特有风味。下列叙述错误的是（ ）
A．虾酱特有风味的形成受发酵时间的影响
B．传统虾酱的制作过程需要严格执行无菌操作
C．原料中的蛋白质会被水解成小分子的肽和氨基酸
D．虾酱发酵过程微生物种类和数量的分析有助于改良风味
【易错提醒】传统发酵过程利用原料中带有的微生物进行发酵，不需要经过严格无菌操作。
13．（2024·江西·高考真题）井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素，它由吸水链霉菌井
冈变种（JGs，一种放线菌，菌体呈丝状生长）发酵而来，在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列
关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述，正确的是（ ）
A．JGs可发酵生产井冈霉素，因为它含有能够编码井冈霉素的基因
B．JGs接入发酵罐前需要扩大培养，该过程不影响井冈霉素的产量
C．提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度，会提高井冈霉素的产量
D．稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化
14．（2024·湖南·高考真题）微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（ ）
A．①②⑤⑥ B．③④⑥⑦ C．①②⑦⑧ D．①③④⑤
15．（2024·山东·高考真题）在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由
菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬
酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（ ）
A．相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢
B．发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量C．发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长
D．发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品
16．（2023·辽宁·高考真题）利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。
下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（ ）
A．DHA油脂的产量与生物量呈正相关
B．温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量
C．葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量
D．12～60h，DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高
预测1 结合传统发酵技术的应用，考查实践能力
1．“扬美豆豉”制作技艺属于广西非物质文化遗产，该技艺包括选豆、洗豆、煮豆、制曲、洗曲、调味
和发酵等。下列说法错误的是（ ）
A．煮豆可使蛋白质适度变性，易于被微生物利用
B．制曲目的是促使有益微生物生长繁殖，并分泌多种酶
C．调味时加入食盐，主要目的是促进微生物的生长繁殖
D．发酵过程中，微生物将原料转化为特定代谢产物，使豆豉风味独特
2．面包发酵中使用的“啤酒花种”，其适宜的酸碱度在pH3.8～4.0，温度为27～28℃。下列说法错误的
是（ ）
A．酵母菌的大量繁殖，须渗透压、酸碱度、温度等培养条件适宜
B．单细胞生物直接从环境中获取所需的养料和O，排出代谢废物
2
C．面包发酵过程中，如果加盐不足，会导酵母菌吸水涨破而死亡
D．不同层次生命系统的代谢活动都需要类似于内环境稳态的特性
3．红曲霉作为发酵食品常用菌种在我国具有悠久的历史，接种在一定量大米上通过发酵可得到红曲，红
曲可用于酿酒、制醋、做豆腐乳的着色剂和调味剂等。红曲霉耐酸，古人接种时及培养过程中，会加入醋酸或明矾水调节酸度。下列说法正确的是（ ）
A．蒸煮过的大米更有利于红曲霉的利用
B．红曲霉接种到刚蒸煮好的热米饭上有利于提高酶的活性和发酵菌的代谢
C．接种时及培养过程中加入醋酸或明矾水调节酸度可抑制所有杂菌生长
D．接种的大米发酵时红曲霉种群数量呈现“J”形增长
4．我国民间传统的酿醋技术流程如下图所示。淀粉加水分解成甜味产物的过程称为淀粉糖化，在食品发
酵过程中，常会对淀粉进行糖化处理，糖化的方法基本上分为三类：酸法、酶法、酸酶结合法。
根据以上信息，结合所学知识对下列选项进行判断，错误的是（ ）
A．进行酒精发酵和乙酸发酵的主要微生物分别是酵母菌和醋酸菌
B．粉碎能使原料与微生物充分接触，加速淀粉分解，有效缩短酿醋时间
C．与乙酸发酵相比，酒精发酵需要在较高温度条件下进行
D．当粉碎蒸熟的原料温度降低至一定温度时，可以迅速均匀拌入 α-淀粉酶，使谷物中的淀粉糖化
5．在利用葡萄自然发酵产生果酒的过程中，未经杀菌，但其他杂菌不能生长的原因是（ ）
A．经冲洗后的葡萄上只有野生酵母菌，无其他杂菌
B．其他杂菌不能利用葡萄汁中的糖作为碳源
C．酵母菌发酵产生大量酒精，杀死了其他杂菌
D．在缺氧和呈酸性的发酵液中，其他杂菌因不适应环境而被抑制
预测2 结合微生物的培养、分离和计数，考查科学思维
6．热泉中含有能够分解淀粉的耐热古细菌，在固体培养基中，该类细菌分解淀粉会形成透明圈。如图表
示筛选能高效产生淀粉酶的耐热古细菌的过程，下列分析正确的是（ ）
A．②过程是利用稀释涂布平板法分离并筛选耐热古细菌
B．配制Ⅰ号培养基时需要加入琼脂，先灭菌再调节pH
C．为防止污染需要对Ⅰ、Ⅱ号培养基及培养皿进行干热灭菌
D．从Ⅰ号培养基中选择透明圈最小的菌落接种到Ⅱ号培养基
7．生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法
是常用的获取纯培养物的方法。下列相关叙述错误的是（ ）
A．两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
B．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小
C．获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH
D．对10mL土样样液稀释106倍后，取0.1mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、260，则该
10mL土样样液中目的菌数为2.48×1010个8．高浓度的铵盐对池塘养殖的对虾有一定的毒害作用，硝化细菌是一种好氧菌，可有效净化水体中的铵
盐，降低对虾的死亡率。科研人员拟从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，
操作流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．从对虾死亡率低的养殖池塘中取样，能 提高筛选的成功率
B．纯化菌种时，若按图中所示的接种方法 接种，接种环需要灼烧4次
C．在锥形瓶中培养硝化细菌时需要振荡培 养，目的是增加硝化细菌与营养物质、溶 解氧的充分接触
D．可选择铵盐浓度减小得最多的一组候选 菌进行后续培养
9．如图为用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌数目的流程示意图，下列叙述正确的是（ ）
A．过滤待测水样用到的滤杯、滤膜和滤瓶均需要进行消毒处理
B．制备EMB培养基时，待培养基冷却至室温后在酒精灯火焰附近倒平板
C．接种时用无菌镊子夹取滤膜边缘，滤膜截流细菌面向上紧贴于EMB培养基上
D．EMB培养基为选择培养基，培养后平板上的菌落均为大肠杆菌菌落
10．白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母通过分泌普切明酸对白地霉具有生物
防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产
生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有
不同浓度FeCl 的培养基如表所示。实验结果为随FeCl 浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如图所示。下
3 3
列相关叙述正确的是（ ）
MgSO NaHPO
2
成分 蛋白胨 FeCl 溶液 水 琼脂
3
4 4
7
用量 5g 7g 15g 500mL 20g
gA．蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素，琼脂不是营养物质
B．白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法
C．结果表明，FeCl 浓度增大，普切明酸与Fe3+结合的数量减少
3
D．结果表明，FeCl 能升高桔梅奇酵母对白地霉的防治效果
3
情境1：透明圈
1.原理
在固体培养基中掺入可被特定菌利用的营养成分M，造成浑浊、不透明的培养基背景。同时加入能与M
形成有色复合物的染色剂，待筛选菌的菌落周围会形成透明圈。
2.实验
纤维素能与刚果红形成红色复合物，但其水解产物纤维二糖和葡萄糖不能与刚果红形成红色复合物。在以
纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红，接种土壤微生物培养，菌落周围出现透明圈，说明这些细菌能
分解纤维素。
3.关键指标分析
典例赏析：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获
得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：
(1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺(一种磷脂类物质)为唯一碳源制
备________培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有________、________、
________等营养物质。
(2)方法2采用________技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，
该技术还需要________、________、________等“分子工具”。(3)除了上述2种方法之外，还可以通过________技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的
微生物。
(4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基(在牛肉膏蛋白胨液体培养基中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷
脂)平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解
圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，其原因可能是
____________________________________________________________________。
情境2：变色圈
1.原理
将指示剂直接掺入固体培养基中，进行待筛选菌悬液的单菌落培养时，目的菌株代谢物使指示剂变色，
在菌落周围形成变色圈。
2.实例
(1)分离尿素分解菌
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。接种土壤微生物(产生脲酶)培养，菌落周围出现红色，
说明该细菌能够分解尿素。
(2)分离谷氨酸产生菌
在分离谷氨酸产生菌时，可在培养基中加入溴百里酚蓝，它是一种酸碱指示剂，当 pH在6.2以下时为黄色，
pH7.6以上为蓝色。若平板上出现产酸菌，其菌落周围会变成黄色，可以从这些产酸菌中筛选谷氨酸产生
菌。
典例赏析：解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成脂肪酸和甘油并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平
板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周
围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色。下列说法错误的是( )
A.甲菌属于解脂菌
B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
情境3：抑菌圈
1.原理
待筛选的菌株能分泌产生某些能抑制工具菌生长的物质，或能分泌某种酶并将无毒的物质水解成对工
具菌有毒的物质，从而在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈。该法常用于抗生素产生菌的筛选，工
具菌常是抗生素敏感菌。2.关键指标分析
典例赏析：番茄灰霉病菌严重影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。
为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者设计了相关实验。
回答下列问题：
(1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时，取适量________菌液涂布于固体培养基上，将无菌
滤纸片(直径5 mm)在________菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，数秒后取出滤纸片，培养皿倒置培养
后测量________________大小以判定抑菌效果。
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用________(填“静置”或“摇床震荡”)培养。培养过
程中抽样检测活菌数量时，应采用________(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”)，其原因是
____________________________________________________________________。
情境4：生长圈
1.原理
利用一些有特别营养要求的微生物作为工具菌，若待分离的菌在缺乏上述营养物的条件下，能合成该
营养物，或能分泌酶将该营养物的前体转化成营养物，那么，在这些菌的周围就会有工具菌生长，形成环
绕菌落生长的生长圈。该法常用来选育氨基酸、核苷酸和维生素的生产菌，工具菌往往都是对应的营养缺
陷型菌株。
2.关键指标分析
典例赏析：当某单一营养缺陷型菌株所需的营养大类确定后，就要确定其生长所需的特殊营养物质。首先
对特殊营养物质进行编组，如表是对15种特殊营养物质进行的编组，编组完成后，将沾有组合特殊营养物质的滤纸片放在涂有试验菌甲、乙、丙的培养基上，培养并观察其生长情况，三种试验菌的生长谱如图所
示。据图分析，下列叙述错误的是( )
组别 组合特殊营养物质
A 1 2 3 4 5
B 2 6 7 8 9
C 3 7 10 11 12
D 4 8 11 13 14
E 5 9 12 14 15
A.实验中所用的培养基应为不含特殊营养物质的基本培养基
B.试验菌甲、乙自身分别不能合成特殊营养物质13、2
C.若单缺的特殊营养物质为10、11中的一种，则在培养基上均会出现两个生长圈
D.试验菌丙的生长谱结果可能是由于所加营养物质浓度过高，产生了抑菌圈
