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第17讲+细胞工程(讲义)(解析版)_2025年新高考资料_二轮复习_01高考语文等多个文件_上好课2025年高考生物二轮复习讲练测(新高考通用)

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第17讲+细胞工程(讲义)(解析版)_2025年新高考资料_二轮复习_01高考语文等多个文件_上好课2025年高考生物二轮复习讲练测(新高考通用)
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5.453 MB
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28 页
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文档内容

第 17 讲 细胞工程 目 录 01 考情透视·目标导航 02 知识导图·思维引航 03 核心整合·能力提升 核心整合一 植物细胞工程  知识串联1 植物组织培养过程  知识串联2 植物体细胞杂交技术 核心整合二 动物细胞工程  知识串联1 动物细胞培养  知识串联2 单克隆抗体的制备  知识串联3 胚胎工程的操作要点 04 题型突破·命题预测 题型1 植物细胞工程综合 题型2 动物细胞培养技术 真题突破 题型3 单克隆抗体制备 题型4 胚胎工程技术及应用 预测1 围绕植物组织培养的过程和条件,考查理解能力 预测2 围绕植物体细胞杂交技术,考查科学思维 以热点窥预测 预测3 结合动物细胞培养,考查生命观念 预测4 结合单克隆抗体制备过程,考查科学探究能力 05 拓展应用·情境推理 新情境 双特异性抗体考试频 核心考点 考题统计 考情分析 次 (2025 浙江卷)植物组织培养  近几年高考题对植物 (2025 浙江卷)植物体细胞杂交技术 细胞工程的考察内容 (2024 广西卷)植物组织培养技术综 较少,试题难度一 合 般。考察重点为植物 3 年 27 植物细胞工程 (2024 江苏卷)植物细胞工程应用 组织培养的过程,或 次 是将培养过程与其他 (2024 北京卷)植物体细胞杂交技术 技术相结合进行综合 (2024 甘肃卷)植物组织培养技术综 考察。针对单克隆抗 合 体,近几年的高考中 (2024 安徽卷)植物细胞工程应用 多是对单克隆抗体的 (2024 福建卷)单克隆抗体的制备 制备过程进行考察, (2024 海南卷)动物细胞融合 3 年 23 并逐渐拓展到多抗和 动物细胞工程 (2024 江苏卷)动物细胞培养 次 双抗的制备等。 (2024 江苏卷)干细胞工程  2025年植物细胞工程 (2024 重庆卷)克隆技术 可能以植物组织培养 或细胞培养为中心, (2024 北京卷)胚胎发育 结合其他技术进行综 (2024 甘肃卷)胚胎移植技术 合考查。动物细胞工 3 年 11 胚胎工程 (2024 湖北卷)精子和卵子的发生 程很可能继续围绕单 次 (2024 湖北卷)胚胎移植 克隆抗体这个中心 点,拓展免疫学与之 相关的前沿内容。 借助双特异性抗体考查了双特异性抗体的制备过程和作用原理,体现了科学思 情境设计 维和科学探究的核心素养。  植物细胞工程综合  动物细胞培养技术 备考要点  单克隆抗体制备  胚胎工程技术及应用核心整合一 植物细胞工程 知识串联1 植物组织培养过程 外植体→愈伤组织→根、芽或胚状体→植物体 (1)外植体:离体培养的植物器官、组织或细胞 (2)脱分化:让已经分化的细胞经过诱导,失去其特有的结构和功能,转变成未分化的细胞的过程。 (3)愈伤组织:植物细胞脱分化形成的不定形的薄壁组织团块 (4)再分化:愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程。【易错提醒】 ①植物组织培养中添加蔗糖的目的是提供碳源营养和调节渗透压。 ②脱分化阶段不需光,再分化阶段需光。 ③生长素/细胞分裂素的比值高时,促进根的分化、抑制芽的形成;比值低时,促进芽的分化、抑制根的 形成。 ④体内细胞未表现全能性的原因:在特定的时间和空间条件下,基因的表达具有选择性。 【典例1】甘草是中医使用最多的药材之一,其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利 用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径,如图所示。下列叙述正确的是( ) A.B代表愈伤组织,两条技术路径均证明了植物细胞具有全能性 B.获得愈伤组织的过程应保持在无菌、无毒和 环境条件下 C.①②③的培养基中含有植物激素和多种无机盐,还需要添加蔗糖等能源物质 D.路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体,使用纤维素酶也可以达成该目的 【答案】C 【解析】途径二并未从已分化的植物细胞获得完整植株,不能体现植物细胞的全能性,A错误;获得愈伤 组织的过程是植物组织培养中的脱分化过程,此过程应保持无菌、无毒的环境。 而5%CO 环境是动物细胞 2 培养时需要的条件,目的是维持培养液的pH,植物组织培养一般不需要5%CO 环境,B错误;①②③的培 2 养过程均为植物组织培养的相关过程。植物组织培养的培养基中除了含有植物激素(如生长素、细胞分裂 素等)和多种无机盐外,还需要添加蔗糖等能源物质,蔗糖可以为植物细胞提供碳源和能量,C正确;图 示过程中添加果胶酶的主要目的瓦解植物的胞间层,更快获得细胞悬液,使用纤维素酶也可以达成该目的, D错误。 知识串联2 植物体细胞杂交技术 【易错提醒】 ①植物体细胞杂交的结果最终要经过组织培养形成杂种植株。 ②植物体细胞杂交过程中没有有性生殖细胞的结合,因此不属于有性生殖,应为无性生殖。③杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和,属于异源多倍体,所以变异类型为染色体变异。 【典例2】普通小麦和偃麦草染色体数不同。山融3号是我国科学家利用植物体细胞杂交技术培育的耐盐 碱小麦品种,下图是其培育过程。下列叙述错误的是( ) A.诱导原生质体融合常采用电融合法或PEG融合法 B.原生质体发育为①的过程需要高尔基体的参与 C.甲、乙培养基除钠盐浓度不同外,其余条件均相同 D.可通过观察染色体数目从②中筛选出山融3号 【答案】C 【解析】诱导原生质体融合常采用电融合法或PEG融合法,A正确;原生质体发育为①需要再生细胞壁的 过程需要高尔基体的参与,B正确;甲、乙培养基除钠盐浓度外,所用激素的比例也存在差异,C错误;筛 选山融3号需找到同时具有普通小麦和偃麦草染色体的植株,即染色体数目是普通小麦与偃麦草的染色体 数目之合的一半的植株,D正确。 核心整合二 动物细胞工程 知识串联1 动物细胞培养 1.动物细胞培养的条件: ①营养条件:细胞在体外培养时,培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。培养动物细胞一般使 用液体培养基,也称为培养液。通常需要加入血清等一些天然成分。 ②无菌、无毒的环境:在体外培养细胞时,必须保证环境是无菌、无毒的,即需要对培养液和所有培 养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换,以便清除代谢物,防止细胞代 谢物积累对细胞自身造成危害。 ③温度、pH和渗透压 ④气体环境:动物细胞培养所需气体主要有O 和CO 。O 是细胞代谢所必需的,CO 的主要作用是维持 2 2 2 2 培养液的pH。在进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,并将它们置于含有95%空气和5% CO 的 2 混合气体的CO 培养箱中进行培养。 2 2.动物细胞培养过程 (1)取动物组织:通常取材于胚胎或幼龄动物的组织、器官,因为这些分化程度低、分裂能力强,容易 培养。 (2)制成细胞悬液:使用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间,将细胞分散成单个细胞。将 细胞悬液置于培养液中,准备进行原代培养。(3)进行原代培养:原代培养是指动物组织经处理后的初次培养,分瓶之前的培养。 细胞贴壁:将细胞悬液放入培养瓶内,置于适宜环境中培养,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长。 接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象称为细胞的接触抑制。 (4)分瓶、进行传代培养:悬浮培养的细胞会因密度过大、有害代谢废物积累和培养液中营养物质等因 素而分裂受阻,贴壁细胞在生长增殖时,除受上述因素影响外,还会发生接触抑制现象。 (5)传代培养:指分瓶后的细胞培养。 【易错提醒】 ①动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同:第一次:处理组织,使其分散成单个细胞。第二次:使 贴壁生长的细胞从瓶壁上脱落下来。 ②避免杂菌污染的措施:培养液和所有培养用具灭菌处理以及在无菌环境下进行操作,定期更换培养液。 ③区分原代培养和传代培养的关键为是否分瓶培养。 【典例1】体外培养的细胞,其生命期限并非是无限的。大多数细胞生长繁殖一段时间后,将自行停止生 长。下图表示人体成纤维细胞在培养液中连续培养时的数量变化曲线,下列叙述正确的是( ) A.一般用胃蛋白酶处理新鲜组织以获取单个细胞进行培养 B.原代培养的细胞,其性状与体内相应细胞相似,可用于药物检测实验 C.传代期的细胞少数贴壁生长、多数悬浮在培养液中生长增殖 D.在细胞连续培养过程中,贴壁细胞表面相互接触时细胞仍能分裂增殖 【答案】B 【解析】新鲜的动物组织需用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理,A错误;原代培养的人体成纤维细胞为二倍体 核型,其性状与体内相应细胞相似,可用于药物检测实验,B正确;传代期的细胞少数悬浮在培养液中生 长增殖,多数贴壁生长,C错误;连续培养过程中,当细胞表面相互接触时细胞通常会停止分裂增殖,因 此需要分瓶培养,D错误。 知识串联2 单克隆抗体的制备 1.制备原理 ①B淋巴细胞的特点:每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,B淋巴细胞在体外不能无限增殖。②骨髓瘤细胞的特点:在体外能大量增殖,但不能产生抗体。 ③杂交瘤细胞的特点:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞,既能迅速大量增殖,又能产 生专一的抗体。 2.制备过程 ①制备产生特定抗体的B淋巴细胞:用特定的抗原对小鼠进行免疫处理,并从该小鼠的脾中得到能产 生特定抗体的B淋巴细胞。 ②培养骨髓瘤细胞。 ③将小鼠的骨髓瘤细胞与从脾中得到的B淋巴细胞融合。 ④用特定的选择培养基进行筛选:在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会 死亡,只有杂交瘤细胞才能生长。 ⑤克隆化培养和抗体检测:对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选, 就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 ⑥将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖。 ⑦提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【易错提醒】 ①用特定抗原对小鼠进行免疫的原因:B淋巴细胞要经过免疫过程,即接触抗原,增殖分化为有特异性免 疫功能的B淋巴细胞,才能产生相应的抗体,所以,与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是经过特定抗 原免疫的B淋巴细胞。 ②杂交细胞:在诱导因素的作用下进行细胞的诱导融合,形成的杂交细胞有多种,若仅考虑两两融合的情 况,形成的杂交细胞有三种,AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我们所需要的杂交细胞,所以需要用选择培养基进行筛选。 ③两次筛选的目的:第一次是在诱导融合之后,利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。第二次是对上 述杂交瘤细胞进行筛选,利用96孔板培养,采用专一抗体检测的方法筛选出能产生所需特定抗体的杂交瘤 细胞。 【典例2】某些肿瘤细胞表面的配体(PD-L1)与细胞毒性T细胞表面的受体(PD-1)结合,可以传导抑制 性的信号,使细胞毒性T细胞增殖减弱,从而逃避免疫。实验人员欲制备抗PD-L1单克隆抗体,阻断该信 号传递,流程如图所示。下列叙述错误的是( ) A.P细胞是取自小鼠的骨髓瘤细胞 B.①和④都需要使用PD-L1作为抗原 C.②可采用PEG或灭活的病毒进行诱导 D.只有同种核融合的细胞不能在③中的培养基生长 【答案】D 【解析】制作单克隆抗体是将小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,P细胞是取自小鼠的骨髓瘤细胞,A正 确;①是注射PD-L1诱导小鼠产生相应的B淋巴细胞,④用PD-L1作为抗原对抗体进行检测,B正确;诱导 动物细胞融合可采用PEG或灭活的病毒进行诱导,C正确;没有融合的细胞和同种核融合的细胞都不能在 ③中的培养基生长,D错误。 知识串联3 胚胎工程的操作流程 【易错提醒】 ①受精的标志是观察到两个极体或者雌、雄原核。 ②胚胎移植过程中两次使用激素: 第一次用于供体的超数排卵。 第二次是对供、受体进行同期发情处理。③胚胎移植或分割的两个最佳时期:桑葚胚和囊胚期(内细胞团具有全能性)。 ④分割囊胚时要注意将内细胞团均等分割,否则会影响胚胎的恢复和发育。 ⑤胚胎移植产生的后代是有性生殖还是无性生殖,取决于胚胎发育的起点。若后代是由受精卵形成的,则 为有性生殖;若后代是由核移植技术形成的重构胚或胚胎分割形成的胚胎发育而成,则为无性生殖。 ⑥用于移植的胚胎来源:体内正常受精的胚胎、核移植的胚胎和体外受精获得的胚胎、转基因获得的胚胎、 胚胎分割获得的胚胎等。 【典例3】基因组印记是哺乳动物在自然条件下只能通过精卵结合的方式繁殖后代的原因。精子和卵细胞 中的印记基因不同,只有这些印记基因共同作用时,才能繁殖出健康的后代。为了实现哺乳动物的孤雌生 殖,科研人员利用甲基化和去甲基化技术,改变了小鼠生殖细胞的基因组标记,最终创造出了孤雌小鼠, 如下图所示。下列叙述错误的是( ) A.H19和Gt12基因表达时可能会抑制早期胚胎的形成 B.孤雌小鼠的基因型与提供卵母细胞的个体基因型相同 C.孤雌小鼠有可能正常生长、发育并繁殖后代 D.囊胚移植前,需要对受体进行同期发情处理 【答案】B 【解析】基因甲基化一般抑制基因的转录过程,由图可知培育孤雌小鼠的过程中需对H19和Gt12基因进行 甲基化修饰,因此可推知H19和Gt12基因表达时可能会抑制早期胚胎的形成,A正确;孤雌小鼠是MⅡ卵 母细胞与注入的第二极体融合形成的重组细胞发育而来,因此其基因型与提供卵母细胞的个体不一定相同, B错误;由图可知,孤雌小鼠染色体组成正常,因此有可能正常生长、发育并繁殖后代,C正确;囊胚移植 前,需要对受体进行同期发情处理,以保证其生殖器官的生理状态满足移入的胚胎继续发育的需要,D正 确。 题型1 植物细胞工程综合 1.(2025·浙江·高考真题)某研究小组进行微型月季的快速繁殖研究,结果如表所示。流程 最佳措施或最适培养基 ①外植体腋芽消 75%乙醇浸泡30s+5%NaClO浸泡6min 毒 ②诱导出丛生苗 MS+3.0mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA ③丛生苗的扩增 MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA 1/2MS+0.25mg·L-1IBA+0.25mg·L-1NA ④丛生苗的生根 A 注:从生苗为丛状生长的幼苗,IBA(吲哚丁酸)为生长素类物质 下列叙述正确的是( ) A.流程①的效果取决于消毒剂浓度 B.流程②不需要经过脱分化形成愈伤组织的阶段 C.与流程②相比,流程③培养基中细胞分裂素类与生长素类物质的比值更大 D.与流程③相比,提高流程④培养基的盐浓度有利于从生苗的生根 【答案】B 【解析】流程①中,消毒效果不仅取决于消毒剂浓度,还取决于消毒时间和消毒剂种类,A错误;流程② 不需要经过脱分化形成愈伤组织的阶段,直接经腋芽直接分化为丛生苗,B正确;流程②与流程③都是分 化长出芽,故两者培养基中细胞分裂素类与生长素类物质的比值相同,C错误;与流程③相比,提高流程 ④培养基的IBA浓度有利于从生苗的生根,D错误。 2.(2024·广西·高考真题)广西是我国甘蔗主产地。甘蔗一般采用无性繁殖,但会由于病毒积累而产 下降,可通过植物组织培养获得脱毒苗的方法来解决。关于该方法,下列说法错误的是( ) A.可选用甘蔗的茎尖为外植体 B.选用的外植体需经高温灭菌处理 C.一般采用加入琼脂的固体培养基 D.脱毒苗的形成包括再分化过程 【答案】B 【解析】培育脱毒苗时,一般选取茎尖(或芽尖或根尖)作为外植体,其依据是植物分生区附近(茎尖) 病毒极少,甚至无病毒,A正确;植物组织培养过程中,为防止杂菌污染,外植体需消毒处理,B错误; 植物组织培养过程中的脱分化与再分化所用的培养基一般采用加入了不同植物激素比例的琼脂固体培养基, C正确;细胞脱分化是指已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变为未分化细胞的 过程,切取植物的茎尖进行组织培养时经过脱分化与再分化的过程可以获得脱毒苗,D正确。 【易错提醒】高温会导致培养对象失去生物活性。 3.(2024·江苏·高考真题)图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是( )A.步骤①添加盐酸以去除细胞壁 B.步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗 C.原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间 D.台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养 【答案】C 【解析】步骤①添加纤维素酶或果胶酶去除细胞,其原理是酶的专一性,A错误;步骤②吸取原生质体放 入等渗液中清洗,否则会导致原生质体吸水涨破,B错误;结合图示可知原生质体处于甘露醇和蔗糖溶液 之间,因而可推测原生质体的密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间,C正确;台盼蓝检测后应选择无 色的原生质体继续培养,染成蓝色的原生质体活性差或死亡,D错误。 4.(2024·北京·高考真题)大豆叶片细胞的细胞壁被酶解后,可获得原生质体。以下对原生质体的叙 述错误的是( ) A.制备时需用纤维素酶和果胶酶 B.膜具有选择透过性 C.可再生出细胞壁 D.失去细胞全能性 【答案】D 【解析】大豆叶片细胞是植物细胞,具有细胞壁,其细胞壁的成分是纤维素和果胶,所以制备原生质体, 需用纤维素酶和果胶酶进行处理,A正确;生物膜的功能特点是具有选择透过性,所以膜具有选择透过性, B正确;原生质体可以再生出新的细胞壁,C正确;分离出的原生质体具有全能性,可用于植物体细胞杂交, 为杂种植株的获得提供了理论基础,D错误。 【易错提醒】细胞具有全能性的原因是细胞含有发育成本物种所需的全套遗传信息。 5.(2024·北京·高考真题)五彩缤纷的月季装点着美丽的京城,其中变色月季“光谱”备受青睐。 “光谱”月季变色的主要原因是光照引起花瓣细胞液泡中花青素的变化。下列利用“光谱”月季进行的实 验,难以达成目的的是( ) A.用花瓣细胞观察质壁分离现象 B.用花瓣大量提取叶绿素 C.探索生长素促进其插条生根的最适浓度 D.利用幼嫩茎段进行植物组织培养 【答案】B 【解析】花瓣细胞含有中央大液泡,液泡中含有花青素,因此可用花瓣细胞观察质壁分离现象,A不符合 题意;花瓣含花青素,因此不能用花瓣提取叶绿素, B符合题意;生长素能促进月季的茎段生根,可利用 月季的茎段为材料来探索生长素促进其插条生根的最适浓度,C不符合题意;月季的幼嫩茎段能分裂,能 利用幼嫩茎段的外植体进行植物组织培养,D不符合题意。 【易错提醒】花瓣没有叶绿体,不含叶绿素。题型2 动物细胞培养技术 6.(2024·吉林·高考真题)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养,在传代后的不同时 间点检测细胞数目,结果如图。下列叙述正确的是( ) A.传代培养时,培养皿需密封防止污染 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C.直接用离心法收集细胞进行传代培养 D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 【答案】D 【解析】传代培养时培养器皿容许内部气体和培养箱中的气体进行交换,A错误;选取②的细胞进行传代 培养比①更合理,②时细胞增长开始变得缓慢,B错误;对于贴壁生长的细胞进行传代培养时,先需要用 胰蛋白酶等处理,使之分散为单个细胞,然后再用离心法收集,C错误;细胞增长进入平台期可能与细胞 密度过大、细胞间产生接触抑制有关,D正确。 7.(2024·浙江·高考真题)某动物细胞培养过程中,细胞贴壁生长至接触抑制时,需分装培养,实验 操作过程如图。 下列叙述错误的是( ) A.①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离B.②加培养液的目的是促进细胞增殖 C.③分装时需调整到合适的细胞密度 D.整个过程需要在无菌、无毒条件下进行 【答案】B 【解析】①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离,A正确;②加培养液,并对细胞加以稀释,B错误;③分 装时需调整到合适的细胞密度,因为若密度过大细胞直接仍存在接触抑制,C正确;动物细胞培养需要无 菌无毒环境,因此整个过程需要在无菌、无毒条件下进行,D正确。 【易错提醒】多次加培养液先洗去残留的消化酶,然后终止消化液的消化作用。 8.(2024·江苏·高考真题)我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞,再用小分子TH34成功诱导衍 生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是( ) A.基因选择性表达被诱导改变后,可使体细胞去分化成多能干细胞 B.在小分子TH34诱导下,多能干细胞发生基因突变,获得胰岛素基因 C.衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素,才可用于移植治疗糖尿病D.若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达,细胞会发生程序性死亡 【答案】B 【解析】被诱导改变后,可使体细胞去分化成多能干细胞 这个说法是正确的。体细胞可以通过特定的因 子导入和培养条件,基因的调控和表达模式的改变,使得原本专一功能的体细胞去分化成为多能干细胞, A正确; 小分子药物通常是通过调节现有的生物通路和基因表达来实现其功能,而胰岛素基因在人体所有 细胞中都存在,但只有在胰岛细胞中才会表达 ,所以多能干细胞在诱导分化的过程中不会突然发生基因突 变获得胰岛素基因,B错误;胰岛B细胞在较高的血糖浓度下分泌胰岛素,降低血糖,所以衍生的胰岛B 细胞需在葡萄糖的诱导下成功表达胰岛素,以确保衍生的胰岛B细胞能够正常发挥功能,才可用于移植治 疗糖尿病,C正确;凋亡基因的正常表达会导致衍生的胰岛B细胞发生程序性死亡,也就是发生细胞凋亡, D正确。 9.(2023·辽宁·高考真题)大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞,可用于流感疫苗的生产。下列叙 述错误的是( ) A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制 B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清 C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖 D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量 【答案】D 【解析】悬浮培养单克隆细胞,可以保证足够的气体交换,通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮 于培养液内,可有效避免接触抑制,A正确;由于细胞的生长是比较复杂的过程,血清中含有一些必须的 因子,用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清,B正确;病毒借助于细胞进行繁殖,利用了活细胞的 物质、能量、酶等,当病毒达到一定数量时细胞的生命活动受到影响,会影响细胞的增殖,C正确;细胞 的正常生命活动需要适宜的pH,培养基pH会影响细胞代谢,进而影响单克隆细胞的病毒产量,D错误。 10.(2023·海南·高考真题)某团队通过多代细胞培养,将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除,获得XO胚 胎干细胞,再经过一系列处理,使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是( ) A.营养供应充足时,传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D.若某濒危哺乳动物仅存雄性个体,可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 【答案】A 【解析】营养供应充足时,传代培养的胚胎干细胞也会发生接触抑制,A错误;XO胚胎干细胞中丢失了Y 染色体,因而该细胞的获得过程发生了染色体数目变异,B正确;XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞 的过程发生了细胞分化,即细胞的功能发生了特化,因而发生了细胞分化,C正确;若某濒危哺乳动物仅 存雄性个体,可用该法,即获得有功能的卵母细胞,进而用于繁育,实现濒危物种的保护,D正确。 题型3 单克隆抗体制备 11.(2024·福建·高考真题)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒, 该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是( ) A.该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术 B.该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合C.该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤 D.该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测 【答案】D 【解析】依据题干信息,戊肝诊断试剂盒属于单克隆抗体的研究成果,单克隆抗体制备过程需要已免疫的 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合,所以动物细胞融合技术,A正确;该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异 性结合,B正确;依据题干信息,该试剂盒以尿液中的抗原为靶标,所以该试剂盒检测前的采样不会对受 检者造成创伤,C正确;抗体具有特异性,所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测,不能用于其他类型 病毒性肝炎的检测,D错误。 【易错提醒】抗原和抗体均具有特异性。 12.(2024·海南·高考真题)海南龙血树具有药用和观赏价值,可利用植物组织培养技术产生愈伤组织, 进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞, 进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述,正确的是( ) A.利用的原理均是细胞的全能性 B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清 C.培养时的温度和pH均相同 D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力 【答案】D 【解析】利用植物组织培养技术获得海南龙血树,利用的原理是细胞的全能性;制备单克隆抗体使用了动 物细胞培养技术和细胞融合技术,这两种技术利用的原理分别是细胞的增殖和细胞膜的流动性,A错误; 利用植物组织培养技术获得海南龙血树,使用的培养基中添加的是蔗糖,不需添加葡萄糖和血清,B错误; 由于植物细胞和动物细胞生长所需的适宜温度和pH存在差异,所以培养时的温度和pH均不相同, C错误; 愈伤组织是外植体(离体的植物器官、组织或细胞)经脱分化形成的,杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和产生 特定抗体的B淋巴细胞融合后形成的,因此产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力,D正确。 13.(2024·湖北·高考真题)糖尿病是危害人类健康的主要疾病之一。恢复功能性胰岛B细胞总量是治疗 糖尿病的重要策略。我国学者研究发现,向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受体单克隆抗体(mAb), 可以促进胰岛A细胞增殖,诱导少数胰岛A细胞向胰岛B细胞转化,促进功能性胰岛B细胞再生。根据上 述实验结果,下列叙述错误的是( ) A.mAb的制备可能涉及细胞融合技术 B.注射mAb可降低胰腺分泌胰高血糖素的量 C.mAb和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合 D.胰高血糖素主要通过促进肝糖原分解和非糖物质转化为糖,升高血糖水平 【答案】B 【解析】单克隆抗体的制备涉及细胞融合技术和动物细胞培养技术,mAb属于单克隆抗体,其制备可能涉 及细胞融合技术,A正确;单克隆抗体(mAb),可以促进胰岛A细胞增殖;而胰岛A细胞可分泌胰高血糖 素,可见注射mAb可提高胰岛A细胞分泌胰高血糖素的量,B错误;题干信息,mAb是胰高血糖素受体单克 隆抗体,可见Ab和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合,C正确;胰高血糖素主要作用于肝,促 进肝糖原分解成葡萄糖进入血液,促进非糖物质转变成糖,使血糖浓度回升到正常水平,D正确。 14.(2023·北京·高考真题)甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备 单克隆抗体用于快速检测PTH,有关制备过程的叙述不正确的是( )A.需要使用动物细胞培养技术 B.需要制备用PTH免疫的小鼠 C.利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞 D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞 【答案】D 【解析】单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养,即需要使用动物细胞培养技术,A正确; 该操作的目的是制备单克隆抗体用于快速检测PTH,故应用PTH刺激小鼠,使其产生相应的B细胞,B正确; 抗原与抗体的结合具有特异性,可利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞,C正确;筛选出的单个杂交 瘤细胞无法分泌多种抗体,D错误。 【易错提醒】一种B细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体 题型4 胚胎工程技术及应用 15.(2024·北京·高考真题)我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞,形成了类似囊胚的结构(类囊 胚),为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系(如图)。相关叙述错误的是( ) A.实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能 B.实验过程中使用的培养基含有糖类 C.类囊胚的获得利用了核移植技术 D.可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育 【答案】C 【解析】体外诱导食蟹猴胚胎干细胞, 形成了类似囊胚的结构(类囊胚),证实了食蟹猴胚胎干细胞具有 分化潜能,A正确;实验过程中使用的培养基需含有糖类,糖类可为细胞培养提供能源物质,B正确;类囊 胚的获得利用了动物细胞培养技术,并没有进行核移植,C错误;可借助胚胎移植技术将类囊胚移植到相 应的雌性受体中继续胚胎发育,从而可以用来研究类囊胚的后续发育,D正确。 16.(2024·甘肃·高考真题)甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种,是季节性发情动物,每年产羔一次, 每胎一羔,繁殖率较低。为促进畜牧业发展,研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊 的繁殖率,流程如下图。下列叙述错误的是( ) A.藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 B.藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精 C.受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理 D.后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙【答案】B 【解析】促性腺激素能作用于卵巢,藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵,A正确; 从卵巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟(减数第二次分裂中期)后才可与获能的精子进行体外受精,B错 误; 在胚胎移植前要对接受胚胎的受体和供体进行同期发情处理,使受体的生理状况相同,因此受体藏羊丙需 和藏羊甲进行同期发情处理,C正确;后代丁是由藏羊甲的卵细胞和藏羊乙的精子结合形成的受精卵发育 而来,因此后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙,D正确。 【易错提醒】刚采集的卵母细胞未成熟 17.(2024·湖北·高考真题)研究者探究不同浓度的雌激素甲对牛的卵母细胞和受精卵在体外发育的影 响,实验结果如下表所示。根据实验数据,下列叙述错误的是( ) 甲的浓度(μg/ 卵母细胞 第一极体排出 成熟率 卵裂数 卵裂率 mL) (个) (个) (%) (个) (%) 0 106 70 66.0 28 40.0 1 120 79 65.8 46 58.2 10 113 53 46.9 15 28.3 100 112 48 42.8 5 10.4 A.实验结果说明甲抑制卵裂过程 B.甲浓度过高抑制第一极体的排出 C.添加1μg/mL的甲可提高受精后胚胎发育能力 D.本实验中,以第一极体的排出作为卵母细胞成熟的判断标准 【答案】A 【解析】由表可知,甲低浓度时促进卵裂,高浓度时抑制卵裂,A错误;对照组第一极体排出个数为70个, 甲浓度过高(>10μg/mL,第一极体排出个数<70)抑制第一极体的排出,B正确;添加1μg/mL的甲, 卵裂数增大,即该条件可提高受精后胚胎发育能力,C正确;卵母细胞成熟的判断标准是第一极体的排出, D正确。 18.(2024·湖北·高考真题)波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉,具有生长速度快、肉质细嫩等优 点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是( ) A.选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B.胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C.普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D.生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 【答案】D 【解析】选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体,进行超数排卵处理,A正确;胚胎移植前,采集 部分滋养层细胞进行遗传学检测,B正确;作为受体的杜泊母山羊只需具备健康的体质和正常繁殖能力即 可,但山羊和绵羊是不同的物种,具有生殖隔离,不能将山羊的胚胎移植到绵羊子宫发育,即普通品质的 健康杜泊母绵羊不适合作为受体,C正确;生产中需选择品质良好的波尔公山羊提供精子,D错误。19.(2023·天津·高考真题)多种方法获得的早期胚胎,均需移植给受体 才能获得后代。下图列举了 几项技术成果。 下列叙述正确的是 ( ) A.经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B.①需获得MII期的去核卵母细胞 C.②能大幅改良动物性状 D.③可通过②技术实现扩大化生产,①②可通过③技术实现性状改良 【答案】D 【解析】子代动物的遗传性状与供体基本一致,但与受体无关,A错误;核移植过程中需要处于MII中期 的去核卵母细胞,而过程1是培育试管动物,需要培育到适宜时期(桑葚胚或囊胚等时期)进行胚胎移植, B错误;过程2得到的是克隆动物,是无性生殖的一种,不能大幅改良动物性状,C错误;过程2克隆技术 可得到大量同种个体,为过程3提供了量产方式;过程3是转基因技术,转基因可导入外源优良基因,为 过程1、2提供了改良性状的方式,D正确。 预测1 围绕植物组织培养的过程和条件,考查理解能力 1.在愈伤组织生芽过程中,CK(细胞分裂素)通过ARRs(A)基因和WUS(W)基因起作用。现将A基因功 能缺失但正常表达W基因的突变体(突变体a)、缺乏A基因但能过量表达W基因(材料甲)和野生型三组 愈伤组织在高CK培养基中培养,三组愈伤组织分化生芽的比例如图,由上述实验结果不能得出的结论是( ) A.A基因在愈伤组织分化生芽的过程中起作用 B.W基因的表达产物调控A基因的表达 C.A基因功能缺失但正常表达W基因不能促进生芽D.过量表达W基因可使生芽时间提前 【答案】B 【解析】据题图中的数据可知,突变体a的愈伤组织不能分化出芽,而野生型的愈伤组织可以,说明A基 因在愈伤组织分化生芽的过程中发挥作用,A不符合题意;实验缺乏检测A基因表达量的数据,不能说明W 基因的表达产物调控A基因的表达,B符合题意;根据图示,A基因功能缺失突变体a愈伤组织分化生芽率 为0,说明A基因功能缺失但正常表达W基因不能促进生芽,C不符合题意; 由材料甲曲线和野生型曲线 比较可知,过量表达W基因可使生芽时间提前,D不符合题意。 2.下图为植物组织培养流程图。下列叙述错误的是( ) A.离体培养的植物器官、组织或细胞被称为外植体 B.①过程中已分化的细胞失去其特有的结构和功能转变成未分化的细胞 C.②过程中生长素、细胞分裂素的浓度及比例会影响愈伤组织发育方向 D.③过程需在无菌条件下进行,防止杂菌污染 【答案】D 【解析】外植体是指离体培养的植物器官、组织或细胞,可利用外植体进行植物组织培养,A正确;①过 程是指外植体脱分化形成愈伤组织的过程,已分化的细胞经过脱分化,会失去其特有的结构和功能,转变 为未分化的细胞,变成愈伤组织,B正确;②过程是愈伤组织形成芽、根的过程,其中生长素、细胞分裂 素的浓度及比例会影响愈伤组织发育方向,当细胞分裂素与生长素的比例低时,有利于根的分化、抑制芽 的形成,C正确;③过程为移栽过程,不需在无菌条件下进行,D错误。 3.如图为利用大花灼兰地下芽实现濒危植物规模化培养过程,其中①~③代表培养流程。下列相关叙述错 误的是( ) A.大花灼兰地下芽外植体需用酒精和次氯酸钠溶液处理 B.②过程为再分化,该过程的培养基成分与①过程不同 C.③过程中将多个丛芽分割培养可提高快速繁殖的效率 D.培养过程会发生基因重组,增加大花灼兰的遗传多样性 【答案】D 【解析】植物组织培养过程中,需用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒处理,A正确;过程①为脱分 化,过程②为再分化,这两个过程所需的培养基成分不同,主要是植物激素的种类和比例不同,B正确; ③过程中将多个丛芽分割培养,可使一个外植体培养出更多的植株,从而提高快速繁殖的效率,C正确; 植物组织培养过程中,细胞进行的是有丝分裂,不会发生基因重组,基因重组一般发生在减数分裂过程中, D错误。 4.优良品种的培育是提高作物产量和品质的重要手段,也是保障粮食安全、端牢中国饭碗的关键。下图 是利用植物体细胞杂交技术,以甲、乙两种具有不同优良性状的作物为基础,培育高产、耐盐杂种植株的 流程图。下列相关叙述错误的是( )A.用纤维素酶和果胶酶对甲、乙植物细胞进行a处理可以获得甲、乙原生质体 B.诱导原生质体的融合,除了PEG诱导法外,还有电融合法和灭活病毒诱导法 C.通过对b的培养获得的耐盐植株是种间杂种植物,克服了远缘杂交不亲和问题 D.将c种植在高盐土壤中,判断所获植株是否符合要求的依据是植株产量的高低 【答案】B 【解析】a表示酶解法去除细胞壁,用纤维素酶或果胶酶可以获得甲、乙原生质体,A正确;诱导原生质体 融合的物理法包括离心、振动、电刺激等,化学法一般是用聚乙二醇(PEG)、高Ca2+-高pH融合法等,灭 活病毒诱导法适用于动物细胞融合,B错误;b表示诱导原生质体融合,对b的培养获得的耐盐植株是种间 杂种植物,克服了远缘杂交不亲和问题,C正确;判断所获植株是否符合要求的依据是植株产量的高低, 要将植株种在高盐环境中,筛选获得的耐高盐植株,D正确。 5.利用百合脱毒苗通过组织培养技术能生产出无病毒、健康、高产的百合植株。脱毒苗在商业种植、科 研育种和园艺观赏等方面具有广泛应用,为百合产业的发展提供了有力支持。制备百合脱毒苗的实验操作 流程如图所示。下列叙述错误的是( ) A.取材于百合的分生区,是因为该部位所含的病毒极少,甚至无病毒 B.过程①需要在培养基中加入细胞分裂素和生长素 C.过程②不需要更换培养基,但需要增加光照 D.培养基中的脱毒苗在移栽前需要去除封口膜,并在培养箱中生长几日 【答案】C 【解析】用百合的分生区作为外植体培育脱毒苗,是因为该部位所含的病毒极少,甚至无病毒,A正确; 过程①是脱分化形成愈伤组织的过程,该过程所用的培养基需要加入细胞分裂素和生长素,B正确;过程 ①②培育过程中,细胞所需的激素及其比例等条件不同,因此,过程②需要根据细胞的需要更换培养基, C错误; 培养基中的脱毒苗在移栽前需要去除封口膜,从而降低湿度,然后在培养箱中生长几日,D正确。 预测2 围绕植物体细胞杂交技术,考查科学思维 6.为持续培养适合广东沿海地区栽培的“高产耐盐碱”优质海水稻植株,某研究小组利用植物体细胞杂交技术对两种优质水稻设计了如下实验流程图。已知耐盐、高产性状分别受细胞质基因和细胞核基因控制, 下列叙述正确的是( ) A.分别选用叶细胞和根细胞便于①过程通过观察结构与颜色来判断融合情况 B.原生质体A1和B1应在低渗透溶液中长期保存,以防止过度失水而死亡 C.失活处理后原生质体A2的细胞质和原生质体B2的细胞核失活 D.②过程体现了植物细胞全能性,它是植物体细胞融合的技术基础 【答案】A 【解析】由于叶绿体有颜色且有特定结构,①过程的细胞融合中可通过观察原生质体的结构与颜色来判断 其融合情况,A正确;原生质体A1和B1应在等渗透溶液中长期保存,以防止过度失水而死亡,B错误; 由于耐盐、 高产性状分别受细胞质基因和细胞核基因控制,在原生质体融合前,需对原生质体进行失活 处理,分别使原生质体A2的细胞核失活和原生质体B2的细胞质失活,C错误;植物体细胞融合的技术基 础是细胞膜具有一定的流动性,D错误。 7.科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇(PEG)对沙打旺和紫花苜蓿原生质体融合率的影响,实验结果如 图,虚线代表最高融合率,异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率,已知PEG浓度较高时对细 胞有毒害作用。下列叙述错误的是( ) A.PEG融合法还可用于诱导骨髓瘤细胞与B细胞融合 B.不同种的原生质体的融合依赖于细胞膜具有一定的流动性 C.据图可知,不同PEG浓度下同源融合率均大于异源融合率 D.PEG浓度为35%时诱导紫花苜蓿与沙打旺原生质体融合的效果最好 【答案】C 【解析】PEG融合法还可以用于动物细胞融合,A正确;没有细胞膜的流动性,原生质体的融合就不能实现, B正确;柱形图没有体现出同源融合率与PEG浓度的关系,因此,不能表明不同PEG浓度下同源融合率均 大于异源融合率,C错误;PEG浓度为35%和40%时异源融合率相同,且均高于其他浓度下的异源融合率, 但较低浓度的PEG对细胞的毒害作用较小,D正确。 8.植物甲抗病性强,植物乙结实率高。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的 植物丙,过程如下图所示。关于此实验下列叙述错误的是( )A.过程①中处理时间的差异可能是甲乙的细胞壁组分比例有差异 B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C.过程④是脱分化,得到的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块 D.过程⑤是再分化,细胞分化时可能会发生基因突变 【答案】B 【解析】过程①是去除细胞壁获取原生质体,过程①中酶处理的时间不同,可能是甲乙的细胞壁组分比例 有差异,A正确;过程②为诱导原生质体的融合,常用PEG诱导原生质体融合,灭活的仙台病毒可诱导动 物细胞融合,不能用于植物,B错误;过程④形成愈伤组织,属于脱分化,在此过程中,已经分化的细胞 失去其特有的结构和功能转变成未分化细胞,进而形成不定形的薄壁组织团块,这称为愈伤组织,C正确; 基因突变是随机发生的,过程⑤是再分化,细胞分化时可能会发生基因突变,D正确。 9.板蓝根(2n=14)具抗菌等作用。某课题组以甘蓝型油菜(2n=38)与板蓝根作为原材料,通过体细胞 杂交培育了抗病菌的板蓝根-油菜杂交种。部分杂交种细胞染色体组成以及分裂过程中细胞两极染色体数 目占比如表所示,下列叙述正确的是( ) 减数分裂Ⅰ后期细胞两极染色体数目比的细胞占 杂交 体细胞染色 比(%) 种 体数 26:26 28:24 23:29 27:25 其它 AS1 52 63.4 10.6 7.2 14.8 0.0 AS6 52-62 32.3 9.6 8.2 11.0 38.8 AS7 52-58 40.3 9.6 7.2 12.5 30.5 A.可以用PEG或灭活的病毒诱导板蓝根细胞和油菜细胞融合 B.板蓝根—油菜杂种AS1属于二倍体,体细胞中有两个染色体组 C.若要将获得的AS1、AS6和AS7等杂交种作为有性杂交的亲本,最好选择AS1 D.ASI有10.6%的细胞两极染色体数目比为28:24,可能是有部分染色单体未分离 【答案】C 【解析】植物体细胞杂交中,诱导植物细胞融合的方法有物理法(离心、振动、电激等)和化学法(PEG 融合法等),而灭活的病毒只能用于诱导动物细胞融合,不能用于诱导植物细胞融合,所以不能用灭活的 病毒诱导板蓝根细胞和油菜细胞融合,A错误;板蓝根是二倍体(2n = 14),甘蓝型油菜是二倍体(2n = 38),通过体细胞杂交培育的板蓝根 - 油菜杂种 AS1 体细胞染色体数为 52 条,是由两个不同物种的体 细胞融合形成的,属于异源四倍体,体细胞中有四个染色体组,而不是两个染色体组,B错误;从表格数 据来看,AS1 体细胞染色体数为 52 条,在减数分裂Ⅰ后期细胞两极染色体数目比相对较为集中,且“其它”占比为 0,说明其染色体组成相对稳定;而 AS6 体细胞染色体数为 52 - 62 条,AS7 体细胞染色体 数为 52 - 58 条,它们的染色体数不稳定,且“其它”占比较大,说明减数分裂时染色体行为异常的细 胞较多。所以若要将获得的 AS1、AS6 和 AS7 等杂交种作为有性杂交的亲本,最好选择 AS1,C正确;减 数分裂Ⅰ后期发生同源染色体分离,着丝点并不分裂,不存在染色单体分离的情况。AS1有10.6%的细胞两 极染色体数目比为28:24,可能是减数分裂Ⅰ后期同源染色体分离异常导致的,而不是部分染色单体未分 离,D错误。 10.生菜是我们餐桌上的常见蔬菜,而生菜原生质体的研究,可用于基因功能探索、信号转导研究等多个 领域。2024年12月,我国某大学研究团队通过优化主要影响因素,成功建立了从生菜茎尖组织等获得高 产高活力原生质体的方法,流程如下。下列叙述错误的是( ) A.茎尖组织的细胞壁较薄,纤维素含量较低,利于去壁 B.用酶解法去壁时,主要用到的酶通常是纤维素酶和果胶酶 C.只要对原生质体混合液不断过滤即可获得纯净的原生质体 D.获得的原生质体需置于等渗溶液中,是为保证其活力基本稳定 【答案】C 【解析】茎尖组织细胞分化程度低,细胞壁较薄,纤维素含量较低,在获取原生质体时更利于去除细胞壁, A正确;植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,所以用酶解法去壁时,主要用到的酶通常是纤维素酶和 果胶酶,B正确;过滤虽然可以去除细胞碎片,但并不能保证获得纯净的原生质体,还需要进一步的纯化 步骤,如离心等,C错误;原生质体没有细胞壁的保护,将其置于等渗溶液中可以维持原生质体的渗透压 平衡,防止细胞破裂或皱缩,从而保持其活力,D正确。 预测3 结合动物细胞培养,考查生命观念 11.科学家尝试利用培养的人体细胞构建组织、器官,用于临床器官移植,目前已成功获得人造皮肤和膀 胱。下列叙述正确的是( ) A.培养皮肤细胞的培养液中需加入干扰素以抑制杂菌的生长 B.动物细胞培养获得人造膀胱体现了细胞具有全能性 C.传代培养前可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散 D.制备动物细胞悬液时应向锥形瓶中加入无菌水 【答案】C 【解析】为抑制杂菌的生长,培养皮肤细胞的培养液中需加入抗生素,A错误;通过动物细胞培养获得的 大量细胞,但并没有形成完整动物个体,因此不能证明动物体细胞具有全能性,B错误;由于动物细胞之 间通过胶原蛋白相连,所以动物细胞培养前可通过胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,使细胞分散,C正确;制 备动物细胞悬液时应向锥形瓶中加入培养液 ,D错误。 12.动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染,该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是( )A.配制细胞培养基时,加血清(含细胞生长必需的蛋白)和氯霉素后湿热灭菌 B.在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中,需要考虑细胞和细菌生长双重因素 C.考察“黑胶虫”污染程度时,应取细胞培养液,直接涂布在平板上培养后计数 D.采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染 【答案】B 【解析】配制细胞培养基时,湿热灭菌后通过过滤灭菌加入血清(含细胞生长必需的蛋白)和氯霉素,A 错误;在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中,需要考虑细胞和细菌生长双重因素,保证动物细胞的正 常生长,同时抑制细菌的生长,B正确;考察“黑胶虫”污染程度时,应取细胞培养液,稀释后涂布在平 板上培养,待菌落数目稳定后计数,C错误;采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作都不能清 除“黑胶虫”污染,D错误。 13.某科研小组为验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理,进行了图1所示实验,检测结果如图2, Cxel12,Oste,mALP,Runx2,mCOL为骨细胞内表达的不同基因。 下列叙述错误的是( ) A.图1实验组模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响 B.用离心法获取MSCs时去除上清液,有利于除菌 C.加入灭菌过的胎牛血清,可提高MSCs存活率 D.交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达起抑制作用 【答案】D 【解析】分析题意,该实验的目的是验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理,结合图1可知,实验组加 入去甲肾上腺素模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响,A正确;培养液中可能混有杂菌,经 过离心后,杂菌出现在上清液中,故用离心法获取MSCs时去除上清液,有利于除菌,B正确;添加胎牛血 清能为细胞培养提供未知营养成分,故加入灭菌过的胎牛血清,可提高MSCs存活率,C正确;分析图2, 去甲肾上腺素组与对照组相比,Cxel12、Oste、mALP和mCOL在骨细胞内表达量较低,而Runx2在骨细胞 内表达量较高,由此可知,交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达并不是都起抑制作用,D错误。 14.为研究红霉素(EM)联合顺铂(CDDP)用药对肺癌细胞增殖、凋亡的影响,科研人员将肺癌细胞均分 成四组进行不同实验处理,实验结果如下表。下列有关叙述正确的是( ) 分裂间期的细胞比 细胞凋亡率 细胞周期蛋白相对 细胞凋亡蛋白相对 组别 例(%) (%) 表达量 表达量 空白对照组 89.12 0.46 0.89 0.41 10mg/LEM组 91.37 0.51 0.76 0.73IC50-CDDP组 93.93 16.08 0.84 0.42 10mg/LEM+IC50-CDDP 96.61 19.71 0.75 0.75 组 注:IC50(半数抑制浓度)是指能将细胞生长、增殖等抑制50%所需的浓度。 A.培养肺癌细胞时,无需向培养液添加经灭菌处理的动物血清 B.肺癌细胞在悬浮培养时会因细胞密度过大出现接触抑制现象 C.肺癌细胞的细胞凋亡率与细胞凋亡蛋白相对表达量呈正相关 D.联合用药可降低细胞周期蛋白相对表达量,进而增强抑癌效果 【答案】D 【解析】由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,因此在使用合成培养基时,通常需要加入血 清等一些天然成分,所以培养肺癌细胞时,也需要向培养液添加经灭菌处理的动物血清,A错误;肺癌细 胞能够在适宜条件下无限增殖,在悬浮培养时一般不会因细胞密度过大出现接触抑制现象,B错误;分析 表格可知,IC50-CDDP组与空白对照组相比,细胞凋亡蛋白相对表达量相差不大,但IC50-CDDP组细胞凋 亡率很高,因此不能说明肺癌细胞的细胞凋亡率与细胞凋亡蛋白相对表达量呈正相关,C错误;分析表格 可知,联合用药组细胞周期蛋白相对表达量比两种药物单独使用组低,说明联合用药可降低细胞周期蛋白 相对表达量,进而增强抑癌效果,D正确。 15.为研究红霉素(EM)联合顺铂(CDDP)用药对肺癌细胞增殖、凋亡的影响,科研人员将肺癌细胞均分 成四组进行不同实验处理,实验结果如下表。下列有关叙述正确的是( ) 细胞凋 分裂间期的细 细胞周期蛋白 细胞凋亡蛋白 组别 亡率 胞比例(%) 相对表达量 相对表达量 (%) 空白对照组 89.12 0.46 0.89 0.41 10mg/L EM组 91.37 0.51 0.76 0.73 IC50-CDDP组 93.93 16.08 0.84 0.42 10mg/L EM+IC50-CDDP组 96.61 19.71 0.75 0.75 注:IC50(半数抑制浓度)是指能将细胞生长、增殖等抑制50%所需的浓度。 A.培养肺癌细胞时,无需向培养液添加经灭菌处理的动物血清 B.肺癌细胞在悬浮培养时会因细胞密度过大出现接触抑制现象 C.肺癌细胞的细胞凋亡率与细胞凋亡蛋白相对表达量呈正相关 D.联合用药可降低细胞周期蛋白相对表达量,进而增强抑癌效果 【答案】D 【解析】动物细胞培养应注意无菌操作,培养肺癌细胞时,需向培养液添加经灭菌处理的动物血清,A错 误; 肺癌细胞能够在适宜条件下无限增殖,在悬浮培养时不会出现接触抑制现象,B错误;肺癌细胞的细胞凋 亡率与细胞凋亡蛋白相对表达量并非呈正相关:如IC50-CDDP组的凋亡率是16.08,细胞周期蛋白相对表达量是0.84,而10mg/L EM+IC50-CDDP组的凋亡率是19.71,细胞周期蛋白相对表达量是0.75,C错误; 分析表格数据可知,与对照组和其他组别相比,10mg/L EM+IC50-CDDP组联合用药可降低细胞周期蛋白相 对表达量,而细胞凋亡率高,说明可增强抑癌效果,D正确。 预测4 结合单克隆抗体制备过程,考查科学探究能力 16.2024年2月,我国科研人员首次采用体细胞核移植技术对现存藏羊群体中的优良个体进行种质复原保 存,并用于良种藏羊高效繁育,选择优良欧拉型良种公羊和湖羊母羊,顺利培育了“克隆藏羊”,基本过 程如图所示。相关分析正确的是( ) A.甲羊为湖羊母羊,采集其卵母细胞在体外培养到MⅡ期后去核 B.③过程通常采用的诱导方法是PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等 C.④过程依次经历囊胚、桑椹胚、原肠胚等发育阶段 D.丁羊为克隆藏羊,其遗传物质全部来自乙羊,性状与乙羊一致 【答案】A 【解析】甲提供卵细胞细胞质,因此为湖羊母羊,采集其卵母细胞在体外培养到MⅡ期后去核,A正确; ③过程为细胞核与细胞质融合,通常采用电融合法,灭活病毒诱导法是诱导细胞融合的方法,B错误; ④过程依次经桑葚胚、历囊胚、原肠胚等发育阶段,C错误;丁羊为克隆藏羊,其核遗传物质来自乙羊, 质遗传物质来自甲羊,D错误。 17.利用现代生物技术获得的早期胚胎均需移植给受体才能获得后代。如图列举了几项技术成果,据此分 析,下列叙述正确的是( ) A.胚胎移植需要对受体做超数排卵处理 B.试管动物需细胞核移植技术,其生殖方式是无性生殖 C.克隆动物和转基因动物的培育都需要动物细胞培养技术 D.转基因动物的培养可以将目的基因导入受精卵或多能干细胞 【答案】C 【解析】胚胎移植需对受体进行同期发情处理,对供体进行超数排卵处理,A错误;试管动物的培育需体 外受精技术,其生殖方式是有性生殖,B错误;图中三种动物的培养都需要动物细胞培养技术,C正确; 转基因动物的培育需要将目的基因导入受精卵中而不是多能干细胞中,D错误。 18.胚胎工程技术可以用于品质优良奶牛的扩繁。下列叙述错误的是( ) A.采集的新鲜精子经获能处理后可用于体外受精B.受精卵发育成桑葚胚或囊胚时可用于胚胎分割 C.外源促性腺激素处理供体母牛可诱发超数排卵 D.同一胚胎经分割产生的后代具有不同的遗传物质 【答案】D 【解析】在体外受精时,采集的新鲜精子必须要经过获能处理,才能具备受精能力,从而用于体外受精, A正确;受精卵发育到桑葚胚或囊胚阶段时,细胞具有较高的全能性,此时可进行胚胎分割,B正确;给供 体母牛注射外源促性腺激素,可以促使其超数排卵,获得更多的卵子,C正确;同一胚胎经分割产生的后 代,它们来自同一个受精卵,遗传物质是相同的,而不是具有不同的遗传物质,D错误。 19.精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞,用该方法制备转基因鼠的基本流程 如图所示。下列叙述正确的有( ) A.①过程中精子获能后细胞膜的流动性增加 B.②过程采用体外受精技术,受精卵中的遗传物质都来自父母双方 C.③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植 D.④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理 【答案】A 【解析】①是筛选获得导入外源基因的精子的过程,该过程中获能后的精子运动加速,能够迅速的游向卵 子,膜流动性增加,A正确;②采用体外受精技术,受精卵中的遗传物质来自父母双方和外源基因,不都 来自父母双方,B错误;③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或囊胚才能进行胚胎移植,C错误;④是胚胎 移植过程,应选择遗传特性和生产性能优秀的供体,有健康的体质和正常繁殖能力的受体,进行胚胎移植 前需要对供体雌性个体进行超数排卵处理,对受体进行同期发情处理,D错误。 20.下列有关体外受精和胚胎移植培育动物过程的相关叙述,正确的是( ) A.体外受精过程涉及体细胞核移植、动物细胞培养等过程 B.胚胎移植之前,可取囊胚期的内细胞团细胞进行性别鉴定 C.胚胎移植中受体对来自供体的胚胎基本上不发生免疫排斥反应 D.将小鼠桑葚胚分割成两等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖 【答案】C 【解析】体外受精主要是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术,涉及精 子的采集与获能、卵母细胞的采集和培养以及受精等环节,并不涉及体细胞核移植,A错误;胚胎移植之 前,可取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定,而不是内细胞团细胞,内细胞团将来发育成胎儿的各种组织, 若取内细胞团细胞进行性别鉴定会影响胚胎发育,B错误;胚胎移植中受体对来自供体的胚胎基本上不发 生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能,C正确;将小鼠桑葚胚分割成两等份获得同卵双 胎的过程属于无性生殖,因为该过程没有经过两性生殖细胞的结合,D错误。新情境:双特异性抗体 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合,目前最 常利用杂交—杂交瘤的方法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉,其所含的长春碱具有良好的 抗肿瘤作用。图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术(免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产 能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程,图2是某双特异性抗体作用图。 典例赏析:双特异性抗体可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合,它一端与癌细胞结合,一端与 T细胞结 合,将T细胞拉近癌细胞,大大提高了杀灭癌细胞的效率。CD19是癌细胞表面的抗原蛋白,CD3蛋白受体 位于T细胞表面,与抗体结合后,其免疫功能得到激活。下图是研究人员通过杂交瘤细胞技术生产双特异 性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题。 (1)给小鼠注射CD19蛋白,是为了从小鼠的脾中分离得到________________________;注射的抗原A是指 ________。 (2)过程②和④所用诱导方法与诱导植物细胞融合所用方法的不同之处是__________________。过程③培 养杂交瘤细胞时需提供的气体条件是 95%空气和 5%CO2 的混合气体,其中 CO2 的主要作用是 。 过程⑤筛选获得的细胞具有的特点是____________________________________________。 (3)与从血清中提取的CD19抗体、抗A抗原的抗体相比,通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优 点是_________________________________________________。双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用,原因是______________________________。 【答案】 (1)免疫的B淋巴细胞 CD3蛋白 (2)可用灭活的病毒诱导 维持培养液的pH 既能无限增殖, 又能产生特异性抗体 (3)双特异性单克隆抗体可以识别两种抗原 既不损伤正常细胞,又减少了用药剂 量 【解析】(1)给小鼠注射CD19蛋白,是为了从小鼠的脾中分离得到已免疫的B淋巴细胞,该细胞能够产生 特定抗体。分析题意,本过程的目的是得到双特异性抗体,故为保证最终双特异性抗体的产生,注射的抗 原A应是CD3蛋白。(2)过程②和④是诱导动物细胞融合,该过程所用诱导方法与诱导植物细胞融合所用方 法的不同之处是可用灭活的病毒诱导;过程③培养杂交瘤细胞时需提供的气体条件是 95%空气和5%CO 的混 2 合气体,其中CO 的主要作用是维持培养液的pH;过程⑤是融合细胞的筛选,筛选后得到的杂交瘤细胞, 2 特点是既能无限增殖,又能产生特异性抗体。(3)与从血清中提取的CD19抗体、抗A抗原的抗体相比,通 过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是能同时识别CD19和A两种抗原,作用效果更显著。双特 异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用,原因是该特异性抗体可以借助单 克隆抗体的识别作用,将药物带到癌细胞所在位置,既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。