曲一线 2023版《5年高考3年模拟》B版
第九单元 生物技术与工程
专题 25 传统发酵技术与微生物的应用
高频考点
考点1 传统发酵技术与发酵工程
该考点的基础层级训练内容为利用微生物制作腐乳、泡菜、果酒与果醋等,重难层级试
题常通过较为复杂的生活实践情境考查传统发酵技术的操作与应用。
限时25分钟,正答率: /9。
基础
1.(2022湖北,11,2分)关于白酒、啤酒和果酒的生产,下列叙述错误的是( )
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程
C.葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质,也存在于线粒体
D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同,但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
答案 C
2.(2021山东,12,2分)葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是( )
A.无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖
B.自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌
C.葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的
D.制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
答案 D
3.(2021辽宁,8,2分)利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为:先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母
菌,发酵6天后,再接入活化的醋酸杆菌,发酵5天。下列有关叙述错误的是( )
A.乙醇既是醋酸发酵的底物,又可以抑制杂菌繁殖
B.酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C.酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D.接入醋酸杆菌后,应适当升高发酵温度
答案 B
4.(2021浙江1月选考,10,2分)用白萝卜制作泡菜的过程中,采用适当方法可缩短腌制时
间。下列方法中错误的是( )
A.将白萝卜切成小块
B.向容器中通入无菌空气
C.添加已经腌制过的泡菜汁
D.用沸水短时处理白萝卜块
答案 B
5.(2021海南,17,3分)关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作,下列叙述正确
的是 ( )
A.发酵所利用的微生物都属于原核生物
B.发酵过程都在无氧条件下进行
C.发酵过程都在同一温度下进行
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D.发酵后形成的溶液都呈酸性
答案 D
6.(2021湖北,3,2分)中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确
的是( )
A.泡菜制作过程中,酵母菌将葡萄糖分解成乳酸
B.馒头制作过程中,酵母菌进行呼吸作用产生CO
2
C.米酒制作过程中,将容器密封可以促进酵母菌生长
D.酸奶制作过程中,后期低温处理可产生大量乳酸杆菌
答案 B
重难
7.(2022湖北,14,2分)废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气
池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是( )
A.该生产过程中,一定有气体生成
B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
答案 A
8.(2020山东,12,2分)我国的酿酒技术历史悠久,古人在实际生产中积累了很多经验。
《齐民要术》记载:将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发,如鱼眼汤,净淘米八斗,炊作饭,
舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化,冒出鱼眼大小的气泡,把八斗米淘净,蒸熟,摊开冷
透。下列说法错误的是( )
A.“浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快
B.“鱼眼汤”现象是微生物呼吸作用产生的CO 释放形成的
2
C.“净淘米”是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施
D.“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡
答案 C
9.(2021全国乙,37,15分)工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与
合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具
有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。
回答下列问题:
(1)米曲霉发酵过程中,加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质,大豆中
的 可为米曲霉的生长提供氮源,小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供
。
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(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖,大量分泌制作酱油过程所需的
酶类,这些酶中的 、 能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸
收、风味独特的成分,如将蛋白质分解为小分子的肽和 。米曲霉发酵过程需要
提供营养物质、通入空气并搅拌,由此可以判断米曲霉属于 (填“自养厌氧”
“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。
(3)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于 (填“真核生物”或“原核生物”);添
加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是 。在该阶段抑制杂菌污染和繁
殖是保证酱油质量的重要因素,据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是
(答出1点即可)。
答案 (1)蛋白质 碳源 (2)蛋白酶 脂肪酶 氨基酸 异养好氧 (3)原核生物 乙醇
和CO 食盐
2
考点2 微生物的培养与利用
该考点的基础层级训练内容为微生物的纯化培养方法及生产应用,重难层级试题常结合
生活实践、科学实验等情境信息进行考查。
限时15分钟,正答率: /13。
基础
1.(2022湖北,5,2分)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确
的是( )
A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C.为防止蛋白质变性,不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D.可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
答案 D
2.(2022海南,12,3分)为探究校内植物园土壤中的细菌种类,某兴趣小组采集园内土壤样
本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是( )
A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B.培养细菌时,可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C.土壤溶液稀释倍数越低,越容易得到单菌落
D.鉴定细菌种类时,除形态学鉴定外,还可借助生物化学的方法
答案 C
3.(2021天津,1,4分)下列操作能达到灭菌目的的是( )
A.用免洗酒精凝胶擦手
B.制作泡菜前用开水烫洗容器
C.在火焰上灼烧接种环
D.防疫期间用石炭酸喷洒教室
答案 C
4.(2021北京,12,2分)人体皮肤表面存在着多种微生物,某同学拟从中分离出葡萄球菌。
下述操作不正确的是( )
A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌
B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样
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C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布
D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
答案 C
5.(2020江苏,19,2分)为纯化菌种,在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌,培养结果如
图所示。下列叙述正确的是( )
A.倒平板后需间歇晃动,以保证表面平整
B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多,应从Ⅲ区挑取单菌落
C.该实验结果因单菌落太多,不能达到菌种纯化的目的
D.菌落周围的纤维素被降解后,可被刚果红染成红色
答案 B
重难
6.(2021山东,14,2分)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利
用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分
别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色,乙菌菌落周围不变色。
下列说法错误的是( )
A.甲菌属于解脂菌
B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
答案 B
7.(2019北京理综,3,6分)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养
后,若细菌能分解淀粉,培养平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈(如图),实验
结果见表。
菌落直径: 透明圈直
菌种 H/C
C(mm) 径:H(mm)
细菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2
细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6
有关本实验的叙述,错误的是( )
A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B.筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布
C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
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D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
答案 C
8.(2021山东,20,3分)(不定项)含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污
水发臭,硫化
氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢
及两种菌的运动能力,用穿刺接种的方法分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基
上进行培养,如图所示。若两种菌繁殖速度相等,下列说法错误的是( )
A.乙菌的运动能力比甲菌强
B.为不影响菌的运动需选用液体培养基
C.该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量
D.穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
答案 B
综合
9.(2022全国甲,37,15分)某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石
油的细菌,在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力,并分析两个菌株的其他
生理功能。
实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ:K HPO ,MgSO ,NH NO ,石油。
2 4 4 4 3
培养基Ⅱ:K HPO ,MgSO ,石油。
2 4 4
操作步骤:
①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养,得到A、B菌液;
②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂,分别制成平板Ⅰ、Ⅱ,并按图中所示在平板上打甲、乙
两孔。
回答下列问题。
(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是 。培养基中NH NO 的作用是为菌
4 3
株的生长提供氮源,氮源在菌体内可以参与合成 (答出2种即可)等
生物大分子。
(2)步骤①中,在资源和空间不受限制的阶段,若最初接种N 个A细菌,繁殖n代后细菌的
0
数量是 。
(3)为了比较A、B降解石油的能力,某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验,结
果如表所示(“+”表示有透明圈,“+”越多表示透明圈越大,“-”表示无透明圈),推测该同学的
实验思路是 。
菌株 透明圈大小
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平板Ⅰ 平板Ⅱ
A +++ ++
B ++ -
(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤,根据上表所示实验结果,治理石油污染应选用的菌株
是 ,理由是 。
答案 (1)石油 蛋白质、核酸 (2)2nN (3)将含等量A、B的菌液分别接种到平板Ⅰ、
0
Ⅱ的甲、乙两孔中,分析A、B菌株在有无NH NO 的条件下对石油的降解能力,透明圈
4 3
越大表明其降解石油的能力越强 (4)A菌株 在平板Ⅱ中,A菌株周围有透明圈,而B菌
株周围没有透明圈
10.(2022全国乙,37,15分)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可
生产S,S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此,某小组通过实验比较不同
碳源对菌体生长和S产量的影响,结果见表。
碳源 细胞干重(g/L) S产量(g/L)
葡萄糖 3.12 0.15
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
回答下列问题。
(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所用的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有
(答出2点即可)。
(2)由实验结果可知,菌株C生长的最适碳源是 ;用菌株C生产S的最适碳源
是 。菌株C的生长除需要碳源外,还需要 (答出2
点即可)等营养物质。
(3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因是 。
(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关实验。
请简要写出实验思路: 。
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是
(答出1点即可)。
答案 (1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌 (2)葡萄糖 制糖废液 水、氮源、无机盐 (3)菌
株C缺少淀粉酶 (4)用一系列浓度梯度的制糖废液分别培养菌株C,测定不同浓度制糖
废液中的S产量,S产量最高时对应的制糖废液浓度即为最适碳源浓度 (5)减少污染、
节省原料、降低生产成本
11.(2022广东,21,12分)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近
期在“科学号”考察船对南中国海科考中,中国科学家采集了某海域1 146 米深海冷泉
附近沉积物样品,分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
回答下列问题:
(1)研究者先制备富集培养基,然后采用 法灭菌,冷却后再接入沉积物样
品,28 ℃厌氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物。为了获得纯种培养,除了
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稀释涂布平板法,还可采用 法。据图分析,拟杆菌新菌株在以 为碳源时
生长状况最好。
(2)研究发现,将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来,
推测其原因可能是 。(答一点即可)
(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质,通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系
统组成成分的角度考虑,拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是
。
(4)深海冷泉环境特殊,推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,除具有酶的
一般共性外,其特性可能还有 。
答案 (1)高压蒸汽灭菌 平板划线 纤维素 (2)培养基的营养成分不能满足部分微
生物的营养需求;培养条件不利于微生物繁殖;可能与其他微生物之间存在互利共生关系
(3)拟杆菌作为分解者,可将碎屑中的有机碳分解为无机碳,加快碳循环 (4)低温条件下
酶活性较高
12.(2021河北,23节选,10分)葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣(皮渣)。目前这些
皮渣主要用作饲料或肥料,同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。
回答下列问题:
(2)为了解皮渣中微生物的数量,取10 g皮渣加入90 mL无菌水,混匀、静置后取上清液,
用稀释涂布平板法将0.1 mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落
数量分别为78、91和95,则每克皮渣中微生物数量为 个。
(3)皮渣堆积会积累醋酸菌,可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时,需要将培养基
的pH调至
性,灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板,加
入碳酸钙的目的是 。培养筛选得到的醋酸菌时,在缺少糖源的液
体培养基中可加入乙醇作为 。
(4)皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时,乳酸菌有可能混入
其中,且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验,区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌。
(简要写出实验步骤和预期结果)
答案 (2)8.8×106 (3)中性或弱碱 醋酸菌产生的醋酸分解碳酸钙可在培养基上形成
透明圈,形成的透明圈的大小可作为筛选优良菌株的依据 碳源(合成醋酸的原料) (4)
挑取单菌落,分别将其接种于盛有液体培养基的试管中,并添加石蜡油隔绝空气,在恒温培
养箱中进行培养,一段时间后检测菌种是否增殖,能进行增殖的菌即为乳酸菌,不能增殖的
菌为醋酸菌。
13.(2021广东,21,12分)中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖
蜜(甘蔗榨糖后的废弃液,含较多蔗糖)为原料,在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可
降解材料,期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。
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回答下列问题:
(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率,可在液体培养基中将蔗糖作为 ,
并不断提高其浓度,经多次传代培养(指培养一段时间后,将部分培养物转入新配的培养
基中继续培养)以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用 的方法进行
菌落计数,评估菌株增殖状况。此外,选育优良菌株的方法还有
等。(答出两种方法即可)
(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系
统,其培养基盐浓度设为60 g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60 d以上。该系统不需
要灭菌的原因是
。(答出两点即可)
(3)研究人员在工厂进行扩大培养,在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵,结果发
现发酵液中菌株H细胞增殖和 PHA产量均未达到预期,并产生了少量乙醇等物质,说明
发酵条件中 可能是高密度培养的限制因素。
(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾(主要含蛋白质、淀粉、油脂等)来生产PHA,说明其能
分泌 。
答案 (1)唯一碳源 稀释涂布平板 诱变育种、基因工程育种 (2)在高盐和较高pH
的发酵液中,菌株H可以生长繁殖,而大多数其他微生物因无法适应这一环境而受到抑制
(3)氧气 (4)蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶
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易混易错
易混 消毒与灭菌
1.(2018全国Ⅱ,37,15分)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的
污染。回答下列问题:
(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具 (填“可以”或“不可以”)放入干
热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优
点是 。
(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能 。在照
射前,适量喷洒 ,可强化消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过 (填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒
的。
(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,
最可能的原因是 。
答案 (1)可以 (2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少 (3)破坏DNA结构 消
毒液 (4)氯气 (5)未将锅内冷空气排尽
易错 选择培养基与鉴别培养基
2.(2022江苏海门中学期初,1)下列关于微生物培养和利用的叙述,正确的是( )
A.以尿素为唯一氮源且含刚果红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌
B.接种前要了解固体培养基是否被污染需用完全培养基接种菌液培育检测
C.鉴别培养基作用的原理是显现某微生物的特征,以区别于其他微生物
D.应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏大
答案 C
疑难 微生物的计数方法
3.(2018全国Ⅰ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。
在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。
回答下列问题:
(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制 的生长,加入了链
霉素的培养基属于 培养基。
(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源
外还有 (答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有
(答出两点即可)。
(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加
入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是 ,该方法能筛选出产淀粉
酶微生物的原理是 。
(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍
数下得到以下结果:
甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;
乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。
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有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是
。
答案 (1)细菌 选择 (2)碳源、无机盐 蛋白质、核酸 (3)碘液 淀粉遇碘液显蓝色,
产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈 (4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果
与另2个相差悬殊,结果的重复性差
情境应用
简单情境
1.无菌操作(2022辽宁重点高中协作体二模,16)下列关于无菌操作的叙述,错误的是(
)
A.倒平板和接种操作都需在酒精灯火焰旁进行,以防杂菌污染
B.用划线法接种时,如果有五个划线区域,则接种环至少灼烧五次
C.适当喷洒石炭酸或煤酚皂溶液,再用紫外线照射可加强消毒效果
D.高压蒸汽灭菌时,需要用棉塞塞住盛有培养基的锥形瓶口并包上牛皮纸
答案 B
2.泡菜的制作(2022湖北武汉二模,15)我国制作泡菜历史悠久。家庭制作泡菜时,主要选
择的是芥菜。在发酵过程中,芥菜产生的亚硝酸盐在特定条件下会转变成致癌物——亚
硝胺。泡菜虽美味,但不宜过量食用。下列叙述错误的是( )
A.原料宜选用新鲜的芥菜,原因是新鲜的芥菜中亚硝酸盐的含量低
B.制作过程中需要用食盐,其作用是析出芥菜中的水分并抑制微生物生长
C.在发酵初期有气泡产生,原因是微生物呼吸作用产生了CO 和坛中存在空气
2
D.在发酵过程中,乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的含量均会先增加后减少再趋于稳定
答案 D
复杂情境
3.发酵工程(2022辽宁抚顺一模,10)发酵工程是指采用现代工程技术手段,利用微生物的
某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技
术。下列相关叙述正确的是( )
A.通过有性杂交可形成工程细胞,也可采用基因工程的方法构建工程菌
B.单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质,可作为食品添加剂、微生物饲料等
C.如果发酵产品是微生物细胞本身,可在发酵结束之后,采用提取、分离、纯化等措施来
获得产品
D.啤酒生产的后发酵阶段需要在低温和密闭环境下进行
答案 D
4.甜酒酿(2022辽宁辽阳二模,10)甜酒酿是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种
甜米酒,其制作流程如图所示。下列有关叙述错误的是( )
浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿
A.蒸米既可以将米粒上的微生物杀死,又有利于淀粉的快速糖化
B.蒸米后凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死
C.发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器,发酵过程中适时排气
D.发酵时将温度控制在28 ℃左右以便于酿酒酵母的繁殖
答案 C
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5.抑菌圈(2022湖北武汉期末,19)在某病原菌均匀分布的平板上铺设含有不同种抗生素
的纸片后进行培养,在纸片周围会出现透明区域抑菌圈。可测定该病原菌对各种抗生素
的敏感性。相关叙述正确的是( )
A.图中的接种方法可能为平板划线法或稀释涂布平板法
B.未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异
C.形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感
D.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响
答案 D
复杂陌生情境
6.营养缺陷型菌株的筛选(2022江苏苏州期末,24)营养缺陷型菌株是在人工诱变或自发
突变后由于某些酶的缺失导致代谢过程中的一些合成反应不能正常进行的菌株。如图
是实验人员利用“影印法”筛选出某种氨基酸缺陷型菌株的示意图。请据图回答下列
问题:
(1)与完全培养基相比,图中基本培养基组成成分上的区别是 。培养基需
要进行高压蒸汽灭菌,影响灭菌效果的因素有 、灭菌时间、灭菌材料和数量等。
(2)过程①的接种方法为 ,接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是
。
(3)进行过程②时,应先将丝绒布转印至 培养基上,原因是
。丝绒布在两个培养基之间进行转印的操作要点是 。
(4)筛选氨基酸缺陷型菌株的方法是挑选 的菌落(填序号)。
①完全培养基和基本培养基对应位置上都有 ②完全培养基中有,基本培养基对应位置
上没有 ③基本培养基中有,完全培养基对应位置上没有
(5)将筛选出的氨基酸缺陷型菌株转接在斜面上进行低温保存,操作简单且无需特殊设备,
但具有保存时间不长、 、 等缺点。
(6)统计菌落数时要每隔24 h观察计数一次,直到菌落数目稳定,以防止培养时间不足导
致遗漏,若培养时间太长将导致 ,影响计数。
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答案 (1)不含该种氨基酸 温度和压力 (2)稀释涂布平板法 防止培养液流出(或“滴
落”) (3)基本 防止将特定营养成分(或“氨基酸”)从完全培养基带入基本培养基
保持丝绒布转印的方向一致 (4)② (5)易被污染 易产生变异 (6)菌落黏连(重叠、混
杂)、菌体死亡
审题解题
1.(2022江苏南京、盐城一模,19)(多选)钙果又名欧李,果实中含有多种对人体有益的矿
物质元素,利用其加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列有关叙述正确的是( )
A.利用醋酸菌进行钙果果醋发酵时,温度应控制在30~35 ℃
B.在钙果果酒发酵期间,为保持无氧环境,不能拧松发酵瓶盖
C.传统制作钙果果酒、果醋时,应将原料钙果果汁进行高压蒸汽灭菌
D.钙果果酒的颜色是钙果果皮中的色素进入发酵液形成的
补充设问
审题方法
设问① 传统制作果酒、果醋时,所利用的菌种来自哪里?它们的代谢类型是怎样的?发酵
过程所需的条件是否相同?
解题思路
设问② 利用醋酸菌进行钙果果醋发酵时,所利用的反应物是什么?果酒发酵过程需要排
气,这是为什么?
答案 AD
补充设问答案 设问① 传统制作果酒、果醋时,所利用的菌种来自果皮表面附着的
野生酵母菌和空气中的醋酸菌,前者是异养兼性厌氧型,后者是异养需氧型。二者发酵条
件不同:酵母菌发酵温度为18~30 ℃,无氧条件;醋酸菌发酵温度为30~35 ℃,有氧条件。
设问② 当O 、糖源都充足时,醋酸菌将果汁中的糖分解成乙酸,因此反应物可以是葡萄
2
糖和O ;当缺少糖源时,醋酸菌直接将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸,因此反应物也
2
可以是乙醇和O 。果酒发酵过程需要排气是因为此过程会产生CO ,为防止发酵瓶内气
2 2
压过大需及时排气(拧松瓶盖而非打开瓶盖)。
2.(2022江苏海门中学期末,14)野生型大肠杆菌菌株能在基础培养基上生长,氨基酸营养
缺陷型突变株无法合成某种氨基酸,只能在完全培养基上生长,如图为纯化某氨基酸营养
缺陷型突变株的部分流程图,①②③④代表培养基,A、B、C表示操作步骤,D、E为菌落。
下列叙述错误的是( )
A.图中①②④为完全培养基,③为基础培养基
B.A操作的目的是提高突变率,增加突变株的数量
C.B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面
D.经C过程原位影印及培养后,可从④中挑取D进行纯化培养
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补充设问
审题方法
设问① 完全培养基与基础培养基有什么不同?
解题思路
设问② B采用了何种方法分离菌种?无菌绒布的作用是什么?
答案 C
补充设问答案 设问① 基础培养基能满足野生型菌株生长需要。完全培养基能满足
野生型菌株及营养缺陷型菌株生长需要。
设问② B利用稀释涂布平板法分离细菌。无菌绒布的作用是影印(将②中菌种转移到③、
④两种培养基中,以达到在培养皿的相同位置上出现遗传型相同的菌落)。
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