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胰酪大豆胨琼脂培养基平皿(TSA)验收模板(仅供参考)
GB/T 16294-2025即将执行，TSA质量要求你需要再熟悉
（本文仅供参考，如果能对你实验室制度与文件修订起到作用，已是万分有幸）
文件名称 | 胰酪大豆胨琼脂培养基平皿（TSA）验收记录 | ||||
文件编号 | LAB-QR-XXX-01 | 版本号 | 02 | 页数 | 共6页 |
生效日期 | 年月日 | 分发部门 | 质量管理部QC实验室 | 归档部门 | 文件档案室 |
起草人/日期 | 审核人/日期 | 批准人/日期 |
1. 目的
建立预制胰酪大豆胨琼脂培养基平皿（TSA，用于药品微生物检验及洁净区环境监测）的接收标准与符合性验收记录，确保购入的预制TSA平皿质量符合《中国药典》2025年版四部通则9203（药品微生物实验室质量管理指导原则）及通则1105（微生物计数法）的要求，防止培养基自身带菌引入假阳性或质量缺陷导致检出率下降（假阴性），保证微生物检验与环境监测结果的准确、可靠。
2. 适用范围
适用于本实验室采购的成品预制TSA平皿（含含中和剂TSA平皿，如添加聚山梨酯80和卵磷脂的消毒剂中和型平皿）到货后的验收、检验及放行管理。
3. 职责
3.1 质量管理部（QA）：负责审核验收记录，批准放行。
3.2 QC实验室：负责到货核对、外观检查、理化检查、微生物学检查并填写验收记录。
3.3 物料/仓储部门：负责到货接收、按标签贮存条件暂存及状态标识管理。
4. 依据
4.1 《药品生产质量管理规范（2010年修订）》及其附录《确认与验证》《质量控制实验室与物料系统》；《药品GMP指南（2023年版）》；
4.2 《中国药典》2025年版四部通则9203《药品微生物实验室质量管理指导原则》（管理与验收要求）、通则1105《微生物计数法》（适用性检查/促生长试验操作方法）、指导原则9205（环境监测用培养基及培养条件）；
4.3 GB/T 16292、16293、16294—2025《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌、沉降菌的测试方法》；
4.4 合格供应商《预制培养基质量标准》、产品出厂检验报告（COA）及有效期确定资料；
4.5 中国食品药品检定研究院《胰酪大豆胨琼脂对照培养基（TSARM）使用说明书》（参比培养基）。注：T/CQAP 2003—2024《洁净环境微生物监测预制培养基平板》等行业/团体标准作为外部参考资料，其技术指标经验证评估后可作为本记录验收限值的制定参考。
5. 验收程序与记录
5.1 到货信息核对及包装、标签检查（接收标准）
逐项核对品名、批号、数量、外观性状、处方与使用说明、有效期、贮藏条件、生产商质控报告及有效期确定资料；核对随货资料（装箱单、COA、辐照剂量验证资料、有效期确定资料等）是否齐全。平板应为三层包装（10块/包），经灭菌剂量的Co60辐照灭菌（无菌保证水平SAL≤10⁻⁶），外包装辐照指示标签应呈已通过辐照剂量处理的指示状态；平板底部应喷印产品批号、有效期和唯一编码，信息应完整清晰；贮存条件为2～25℃密闭储存；培养皿（PS材质）表面应无划痕裂痕、无缺损、无杂质。用于环境监测的培养基须特别防护，宜采用双层包装和终端灭菌；不能终端灭菌的平皿，使用前应100%预培养（见5.3）。逐项如实填写表1。
表1 到货信息核对及包装、标签检查记录
产品名称 | 胰酪大豆胨琼脂培养基平皿（TSA） | 供应商 | |||||
产品类别 | □TSA □TSA＋中和剂 □TSA＋加酶（青霉素酶） | 培养皿规格 | □90mm（皿底85.5±0.3mm） □55mm（接触皿） | ||||
产品号 | 规格 | 10块/包三层层压热封包装 | 接收数量 | 采购订单号 | |||
生产批号 | 生产日期 | 失效日期 | 贮存条件 | 2~25℃密闭储存 | |||
底部喷印核对（批号/有效期/唯一编码） | □完整清晰 □缺蚀/不清 | 辐照指示标签（Co60辐照，SAL≤10⁻⁶） | □已变色（通过）□未变色（未通过） | ||||
随货资料 | COA□ 质控报告□ 辐照剂量验证资料□ 有效期确定资料□ | 处方/中和剂 | □无中和剂 □含：聚山梨酯80/卵磷脂/青霉素酶/其他： | ||||
序号 | 批号 | 包装完整性 | 标签完整性 | 平板外观（裂痕/脱边） | 胀袋/漏液 | 判定 | 备注 |
1 | |||||||
2 |
检查人/日期： 复核人/日期：
5.2 外观性状、装量、凝胶强度及pH检查
随机抽取3个包装的平皿，于自然光线明亮处目视检查，并透过光源检查装量均匀性及透明度：培养基应为淡黄色至黄色固体，表面整洁光滑，浇灌及内部不应有气泡及任何异物；冷藏产品无结晶、无微生物污染；55mm接触皿培养基表面应有明显凹凸。装量验收：琼脂培养基装量不宜以体积（mL）直接验收，可采用称重法（g，换算体积）或测定琼脂厚度（mm）验收，也可采信供应商COA中的装量检验结果（装量要求应在采购合同/质量协议中约定，参考：90mm平板灌装量约25mL，只允许正偏差）。凝胶强度用质构仪测定（单位g/cm²，每次样品测定3个平行，取平均值。pH测定：平板冷却至25℃左右测定，拆开包装取出平板于室温放置平衡约30min后，用平头电极贴敷于平板表面测量（或按经验证的表面pH测定方法），测定均值偏差不得超过规定值±0.2（TSA类均为7.3±0.2）。逐项如实填写表2。
表2 外观性状、装量、凝胶强度及pH检查记录
序号 | 批号 | 性状（淡黄至黄色固体，表面光滑，无气泡/异物；皿无划痕缺损） | 装量检查（□称重 g □琼脂厚度 mm□采信厂家COA） | 凝胶强度(g/cm²)（TSA：150~300；含中和剂/加酶：200~350） | pH测定值（25℃，7.3±0.2） | 均值 | 判定 |
1 | |||||||
2 | |||||||
3 | |||||||
4 | |||||||
质构仪编号：pH计编号： 测定温度： ℃检查人/日期： 复核人/日期： |
5.3 无菌性检查／预培养
每批随机抽取5包（按照取样原则取样）平皿培养：TSA平皿（含中和剂/加酶）先于20～25℃培养3~5天，再转入30～35℃培养2~3天，定期观察，均应无菌生长；同时设阴性对照（同批已验收合格平皿）。凡未采用终端灭菌的平皿，使用前应100%预培养（按供应商推荐条件，一般30～35℃培养不少于48小时），预培养后逐件目视检查，有菌生长者不得使用，预培养情况一并填写表3。
表3 无菌性检查／100%预培养记录
序号 | 批号 | 平皿编号 | 培养条件（20~25℃ 3~5d →30~35℃ 2~3d） | 观察结果（应无菌生长） | 判定 | 备注 |
1 | ||||||
2 | ||||||
3 | ||||||
4 | ||||||
培养箱编号：检查人/日期： 复核人/日期： |
5.4 适用性检查（促生长能力）
按《中国药典》2025年版通则1105《微生物计数法》进行促生长测试（适用性检查，管理要求按通则9203指导原则执行）。用涂布法分别接种不大于100cfu的试验菌于被检培养基及参比培养基（胰酪大豆胨琼脂对照培养基TSA-RM，中检院）平板上，每一试验菌株平行制备2个平皿；培养条件：细菌株30～35℃培养1~3天，白色念珠菌、黑曲霉30～35℃培养2~5天（或真菌于20～25℃培养不超过5天），计数并计算生长率。
评定标准：PR = Ns / No 应为0.5～2（Ns为被检培养基平板菌落总数，No为参比培养基平板菌落平均数，即回收率50%～200%；回收率＝Ns/No×100%，验收限值可参照行业团体标准不低于60%从严掌握），且菌落大小、形态特征应与参比培养基一致，则促生长能力符合规定。
试验菌株应涵盖药典规定的标准菌株；巴西曲霉（ATCC 16404）及环境分离株为非必选项目，按企业质量控制需要确定（环境分离株应经鉴定、保存；无法获得时应说明理由并经批准）。
表4 适用性检查（促生长能力）记录
序号 | 质控菌株及编号 | 接种量(cfu) | 被检皿1菌落数 | 被检皿2菌落数 | 对照皿平均菌落数No | 培养条件 | PR(Ns/No) | 菌落形态（应与对照一致） |
1 | 铜绿假单胞菌CMCC(B)10104 | ≤100 | ||||||
2 | 金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 | ≤100 | ||||||
3 | 枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501 | ≤100 | ||||||
4 | 大肠埃希菌CMCC(B)44102 | ≤100 | ||||||
5 | 白色念珠菌CMCC(F)98001 | ≤100 | ||||||
6 | 黑曲霉CMCC(F)98003 | ≤100 | ||||||
7 | 巴西曲霉（非必选）ATCC 16404 | ≤100 | ||||||
8 | 环境分离株（名称/编号： ） | |||||||
试验菌株批次/传代： 菌悬液制备依据： 参比培养基（TSA-RM）批号： （TSA-RM配制时间：）检验人/日期： 复核人/日期： 校验人/日期： | ||||||||
5.5 环境监测用TSA平皿附加验收项目（如适用）
用于洁净区环境监测（沉降菌、浮游菌、表面微生物）的TSA平皿，还应完成下列确认并在SOP中写明培养方案及其盲点，逐项填写表5：
5.5.1 培养方案：按通则9205指导原则采用双温分段培养（如20～25℃培养3~5天后转30～35℃培养2~3天，或反向进行），SOP中应写明所选方案及监测盲点（先低温有利于真菌检出，先高温有利于革兰氏阳性球菌检出并避免真菌过度生长遮挡小菌落）。
5.5.2 暴露时长与持水性：沉降菌培养皿暴露时间一般不大于4小时；应在本企业洁净区风速最大的位置，按1h/2h/3h/3.5h/4h梯度实测不同暴露时长后的回收率（促生长能力不低于判定线），确定本企业合格的暴露时长及换皿时长；长时暴露须证明失水后回收率仍可接受。
5.5.3 中和效力：含中和剂平皿应针对本区域使用消毒剂谱系完成中和效力验证（以目标菌验证，不能仅凭配方声称）。
5.5.4 阴性对照：每批次采样须设同批培养基阴性对照，培养后应无菌生长，否则测试无效。
表5 环境监测用附加验收/确认记录
确认项目 | 要求 | 确认结果 | 判定 |
培养方案确认 | 双温分段（20~25℃/30~35℃）：先低温□ / 先高温□培养时间： | □符合 | |
暴露时长实测 | 洁净区最大风速位置梯度实测1/2/3/3.5/4h回收率，确定合格暴露时长：h | □符合 | |
装量确认 | 常规15~20mL / 4小时暴露25~30mL（换算成g）实测装量：mL（换算成g） | □符合 | |
中和效力验证 | 验证报告编号： | □符合 | |
批次阴性对照 | 培养后应无菌生长 | 结果： | □符合 |
确认人/日期： QA审核/日期：
6. 验收结论与放行
上述各项检查全部符合标准规定，判定验收合格，由QA审核后批准放行并发放“放行”状态标识；任何一项不符合规定，按《偏差与异常情况处理规程》（文件编号： ）执行，判定不合格并作退货/销毁处理，填写表6。供应商配方或辐照剂量发生变更时应重新评估并验收。
表6 验收结论及放行审批记录
验收批号汇总 | |||
综合判定 | □ 合格，准予放行 □ 不合格，按偏差处理 | ||
QC检验员 | 签名/日期： | QC复核人 | 签名/日期： |
QA审核人 | 签名/日期： | QA批准人 | 签名/日期： |
偏差/异常情况（如有） | □无 □有，偏差/变更/纠正措施记录编号： |
7. 记录与保存
7.1 本记录随验收批次的COA、质控报告、有效期确定资料、运输温度记录等一并归档，保存期限不少于产品有效期后一年，且不少于五年。
7.2 记录填写要求：使用黑色签字笔及时、真实、完整填写，字迹清晰，不得随意涂改；如需更改采用杠改法，划改后签注姓名和日期，保持原数据可辨认。
8. 相关文件与记录
8.1 《预制培养基（平皿）质量标准》（文件编号： ）
8.2 《pH计操作规程》（文件编号： ）；《菌悬液制备操作规程》（文件编号： ）；《培养基适用性检查操作规程》（文件编号： ）
8.3 《洁净区环境监测操作规程》（文件编号： ）；《偏差与异常情况处理规程》（文件编号： ）；《物料放行管理规程》（文件编号： ）
