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学年度（上）七校协作体期初⾼三联考⽣物试题
2025—2026
考试时间：75 分钟 满分100分
⼀、选择题：本题共 15 ⼩题，每⼩题 2 分，共 30 分。每⼩题给出的四个选项中，只有⼀
个选项是最符合题⽬要求的。
1. 肺炎⽀原体是⼀种能在宿主细胞内寄⽣并增殖的单细胞⽣物，其⼤型 DNA 散布在细胞内各区域，常⽤
DNA染⾊法检测肺炎⽀原体。下列叙述正确的是（ ）
A. 肺炎⽀原体既不属于原核⽣物也不属于真核⽣物
B. 肺炎⽀原体细胞壁和植物细胞壁成分不同，但都能起到⽀持和保护作⽤
C. 肺炎⽀原体在宿主细胞内利⽤⾃身的核糖体合成蛋⽩质
D. ⽤ DNA 染⾊法检测肺炎⽀原体， 分裂期可⻅染⾊体
2. 维⽣素D 可从⽜奶、⻥肝油等⻝物中获取，也可在阳光下由⽪肤中的7—脱氢胆固醇转化⽽来，活化维
3
⽣素D 可促进⼩肠和肾⼩管等部位对钙的吸收。研究发现，肾脏合成和释放的羟化酶可以促进维⽣素D
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的活化。下列叙述错误的是（ ）
A. 维⽣素D 、磷脂、性激素和脂肪等都是脂质
3
B. 肾脏细胞释放羟化酶时需要利⽤载体蛋⽩
C. ⼈体⾎液中钙含量过低会出现抽搐的现象
D. ⼈体缺钙时，在补钙的同时还需要补充维⽣素D
3
3. 细胞⾊素c是⼀类电⼦传递蛋⽩，由⼀条肽链包裹⼀个⾎红素组成。⾎红素在⼈体红细胞中是⾎红蛋⽩
分⼦的重要组成部分，⾎红素可以与氧⽓、⼀氧化碳等结合，且结合⽅式相同。下列相关叙述正确的是（
）
A. 组成细胞⾊素c的⼤量元素有C、H、O、N、S、Fe
B. 氨基酸和⾎红素通过肽键连接形成细胞⾊素c
C. 半透膜两侧分别是⽔和细胞⾊素c的⽔溶液可探究浓度差是渗透作⽤发⽣的条件
D. ⾎红素分⼦与氧⽓ 结合是不可逆的
4.SNARE 假说认为：⾼尔基体产⽣的囊泡，在细胞内由驱动蛋⽩沿着细胞⻣架运输⾄细胞膜附近，囊泡膜
上的 Rab-GTP(GTP 为⻦苷三磷酸，⼀种⾼能磷酸化合物)复合物与细胞膜上的锚定蛋⽩识别并结合后转变
为 Rab-GDP(GDP 为⻦苷⼆磷酸)，囊泡膜上的蛋⽩质v-SNARE与位于细胞膜上的t-SNARE 结合，囊泡膜
与细胞膜融合将内容物释放到细胞外。下列说法错误是（ ）
A. 运输囊泡的细胞⻣架由蛋⽩质纤维组成
第1⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司B. 囊泡膜与细胞膜融合过程体现了细胞膜具有⼀定的流动性
C.GTP可以 上述过程提供能量
D.SNARE蛋⽩基因缺陷型⼩⿏出现雄性激素分泌障碍
5. 细胞核是细胞代谢和遗传的控制中⼼。下列描述不能体现这⼀观点的是（ ）
A. 失去细胞核的变形⾍对外界刺激不发⽣反应
B. ⽆核⽩⾊美⻄螈卵细胞移⼊⿊⾊美⻄螈的细胞核后发育成⿊⾊美⻄螈
C. 在代谢旺盛的细胞中，核孔的数⽬较多，实现DNA、RNA、蛋⽩质等频繁进出细胞核
D. ⺟⽜甲的去核卵细胞移⼊⺟⽜⼄的体细胞核后发育成与⺟⽜⼄性状⼀样的⼩⽜
6. 同⼀个⽔槽中放置甲、⼄、丙三个渗透装置如图，三个漏⽃颈的内径相等，漏⽃⼝均封以半透膜（单糖
能⽽⼆糖不能透过）。漏⽃内装有不同浓度的蔗糖溶液，开始时漏⽃内液⾯⾼度相同，蔗糖溶液浓度和半透
膜的⾯积⻅下表。下列相关说法错误的是（ ）
装置编号 甲 ⼄ 丙
半透膜⾯积（cm2） 2S S S
蔗糖溶液浓度（mol/L） 0．3 0．3 0．5
A. 三个渗透装置达到渗透平衡时，丙漏⽃的液⾯上升的最⾼
B. 甲漏⽃的液⾯上升到最⼤⾼度所需的时间⼩于⼄所需时间
C. ⼄、丙装置均达到渗透平衡时，漏⽃内蔗糖溶液的浓度相等
D. 若漏⽃中加⼊等量蔗糖酶，⼄、丙漏⽃内的液⾯都是先升后降最后⾼度相同
7. ⼤多数酶是球蛋⽩，表⾯有⼀个或多个袋状或缝状凹陷，这⼀部位称为酶的活性部位，底物与活性部位
结合，形成酶—底物复合物，底物分⼦只有与活性部位精确结合，催化反应才能进⾏。下列相关叙述错误
第2⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司的是（ ）
A. 若某物质也可与酶的活性部位结合，则加⼊该物质后可使酶的催化效率下降
B. ⾼温和低温均能使酶失活从⽽使反应不能进⾏
C. 底物与酶的活性部位结合后可降低底物反应时所需能量
D. 酶的活性部位通常具有特定的空间结构，便于酶—底物复合物的形成
8. 转运蛋⽩是协助物质跨膜运输的重要膜组分，分为载体蛋⽩和通道蛋⽩两种类型。通道蛋⽩包括⽔通道
蛋⽩和离⼦通道蛋⽩，其中离⼦通道转运速度是载体蛋⽩的100～1000倍。下列说法错误的是（ ）
A. 载体蛋⽩可协助物质进⾏顺浓度梯度或逆浓度梯度跨膜运输
B. 肾⼩管主要通过⽔分⼦与⽔通道蛋⽩结合实现对⽔的重吸收
C. 通道蛋⽩只容许与⾃身孔径⼤⼩和电荷适宜的分⼦或离⼦通过
D. 载体蛋⽩转运物质时⾃身构象会发⽣改变
9. ⾖豉是⼀种古⽼的传统发酵⾖制品，发酵原理与腐乳类似。北魏贾思勰的《⻬⺠要术》中也有相关记录。
⾖豉制作的流程如图所示。装坛后放在室外⽇晒，每天搅拌两次。下列说法错误的是（ ）
A. 发酵过程中多种酶系将原料中的蛋⽩质等⼤分⼦分解为⼩分⼦
B. 发酵的⽬的主要是让酵⺟菌产⽣酶，搅拌能增加发酵液的溶氧量
C. 代谢产物积累和酿造环境的变化导致后期窖池微⽣物数量下降
D. 添加的盐、⽩酒和⻛味料具有抑制杂菌⽣⻓和调节⼝味的作⽤
10. 我国卫⽣部⻔规定饮⽤⽔标准：1mL ⾃来⽔检出的菌落总数不可以超过100个( 培养48h)，不
得检出总⼤肠菌群。某⽣物兴趣⼩组对某⾃来⽔⼚新产的⾃来⽔进⾏微⽣物菌落含量检测与鉴定，下列说
法错误的是（ ）
A. 检测时不需要对饮⽤⽔进⾏梯度稀释
B. 若使⽤的伊红—亚甲蓝琼脂培养基上未出现深紫⾊菌落，说明饮⽤⽔符合标准
C. ⽤涂布平板法进⾏接种，需要设置不进⾏涂布或者⽤⽆菌⽔涂布的对照组
D. 饮⽤煮沸后的⾃来⽔可以降低微⽣物对⼈体造成危害
11. 计数噬菌体时常进⾏如下操作：先向培养⽫中倒⼊琼脂含量为1.5%的培养基凝固成底 层平板，将琼脂
含量为0.6%的培养基融化并冷却⾄50℃左右，然后加⼊宿主细菌和待测 噬菌体混合液，充分混匀后⽴即
倒⼊底层平板上形成双层平板。培养⼀段时间，在上层平 板可⻅因噬菌体侵染裂解细菌⽽形成的噬菌斑，
可根据噬菌斑的数⽬计算噬菌体的数量。 下列叙述正确的是（ ）
第3⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司A. 两层培养基均可采⽤⼲热灭菌箱进⾏灭菌后使⽤
B. 加⼊混合液后，使⽤灭菌后的涂布器蘸取混合液均匀地涂布在培养基表⾯
C. 上层培养基中琼脂浓度较低，因此形成 噬菌斑较⼤，更有利于计数
D. 通过此操作计算出的噬菌体数量通常⽐实际值偏⼤
12. 单克隆抗体在多种疾病的诊断和治疗中发挥重要的作⽤，下图为利⽤⼩⿏制备单克隆抗体的过程，相关
叙述正确的是（ ）
A. 从免疫⼩⿏脾脏中可获取⼤量能产⽣⽬标抗体的B淋巴细胞
B. 细胞融合可以⽤灭活的病毒进⾏诱导，不需要⽆菌环境
C. 图中细胞筛选是利⽤梯度离⼼的办法获得杂交瘤细胞
D. 单抗检测时取培养液滴加相应抗原出现反应说明含有⽬标细胞
13. 下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA⽚段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述不正确的是（ ）
A. 利⽤蛋⽩质不溶于酒精，但DNA溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋⽩质
B. 利⽤在沸⽔浴下DNA遇⼆苯胺试剂会呈现蓝⾊的原理对粗提取的DNA进⾏鉴定
C.PCR技术利⽤了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA氢键解聚与结合
D. 电泳鉴定DNA利⽤了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
14. 蛛丝蛋⽩有着超强的抗张强度，可制成防弹背⼼、降落伞绳等。下图是培育转基因蜘蛛⽺⽣产蛛丝蛋⽩
的⽅案。以下叙述错误的是（ ）
A. 通过逆转录得到蛛丝蛋⽩基因不含有启动⼦和内含⼦
B. 构建含蛛丝蛋⽩基因的重组质粒是培育转基因蜘蛛⽺的核⼼⼯作
C. 过程②通常选⽤基因枪法将重组质粒导⼊⼭⽺的受精卵中
第4⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司D. 可利⽤ PCR 检测⼭⽺的染⾊体DNA 是否插⼊了蛛丝蛋⽩基因
15.2018年3⽉，最后⼀头雄性北⽅⽩犀⽜去世，⾄此世界上仅剩两头雌性个体。科研团队拟采⽤提前保存
的北⽅⽩犀⽜冷冻精⼦借助核移植、体外受精等技术，以南⽅⽩犀⽜作为代孕⺟畜⼈⼯繁育北⽅⽩犀⽜。
下列叙述合理的是（ ）
A. 需注射免疫抑制剂以减弱代孕⺟畜对植⼊胚胎的免疫排斥反应
B. 冷冻保存的精⼦⽆需经获能处理即可⽤于体外受精
C. 若取雌性⽩犀⽜的体细胞进⾏核移植，获得的克隆后代可繁衍为⼀个种群
D. 理论上可取早期胚胎⽤酶处理成单个细胞分别培养，以提⾼胚胎的利⽤率
⼆、不定项选择题：本题共5⼩题，每⼩题3分，共15分。每⼩题给出的四个选项中，有⼀
个或多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 矮牵⽜花瓣颜⾊与其液泡pH密切相关，液泡pH≤2 时多呈红⾊，随着pH升⾼颜⾊不断改变，当pH
＞5时，出现稀有 蓝⾊。研究表明，液泡pH主要由H+泵甲、⼄和转运蛋⽩NHX1共同调控，如图所示。
下列叙述错误的是（ ）
A.H+ 通过甲、⼄进⼊液泡利于植物细胞保持坚挺
B.K+ 进⼊液泡的过程需要与转运蛋⽩结合
C. 图中H+的主动运输过程所需能量均由ATP⽔解提供
D. 红花矮牵⽜某突变体NHX1表达量显著减少，可导致花瓣呈现蓝⾊
17. 某科研⼈员从某种微⽣物体中分离得到了⼀种酶Q，为探究该酶的最适温度，进⾏了相关实验，各组反
应相同时间后的实验结果如图1所示；图2为酶Q在60℃催化⼀定量的底物时，⽣成物的量随时间变化的
曲线。下列叙述正确的是（ ）
第5⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司A. 由图1可知，该种微⽣物适合在较⾼的温度环境中⽣存
B. 图1实验结果并不能准确得出该酶的最适温度，需要增加每个温度条件下实验的次数
C. 图2实验中若升⾼温度，⽣成物的量会增加
D. 图2实验中，若在t 时增加底物的量，酶Q的活性不变
2
18. 液体深层培养是指以获得⼤量发酵产物为⽬的的发酵罐⼤容量液体培养，可通过调节培养液的pH和温
度、营养条件以及⽓体环境促使微⽣物迅速⽣⻓，产⽣⼤量代谢产物，是发酵⼯业⽣产的基本培养⽅法。
下列叙述正确的是（ ）
A. 传统发酵技术不需要防⽌杂菌污染，液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进⾏严格灭菌
B. 单细胞蛋⽩是从微⽣物细胞中提取的蛋⽩质，可作为⻝品添加剂、微⽣物饲料等
C. 可通过过滤、沉淀等⽅法获得微⽣物代谢产物
D. 利⽤液体深层培养进⾏⾕氨酸发酵⽣产应在中性或弱碱性条件下进⾏
19. 与常规栽培技术相⽐，利⽤植物细胞培养进⾏药⽤次⽣代谢产物的⽣产具有显著的优越性，根据不同的
需求可以采⽤不同的技术流程（如图）。相关叙述正确的是（ ）
A. 培养体系1中的外源基因导⼊前需⽤Ca2+处理受体细胞
B. 培养体系2中获得的愈伤组织细胞应具有全能性，其细胞形态和结构与外植体细胞不同
C. 在将经消毒处理后的外植体诱导形成愈伤组织期间，⼀般不需要光照
D. 在由外植体诱导形成愈伤组织的过程中，细胞发⽣了分裂及基因的选择性表达
20. 基因污染是指在天然物种的DNA中嵌⼊了⼈⼯重组基因，这些外来基因可伴随被污染的⽣物的繁殖、
传播⽽扩散。下列有关“基因污染”的叙述中，正确的是（ ）
A.“基因污染”有可能会从⼀种⽣物扩散到其他⽣物
第6⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司B. 转基因⽣物有可能成为“外来物种”，影响⽣态系统的稳定性
C. 抗除草剂基因有可能通过花粉传播进⼊杂草，从⽽产⽣“超级杂草”
D. 为避免基因污染，应保证⽬的基因整合到受体细胞的染⾊体DNA上
三、⾮选择题：本题共5⼩题，55分。
21. 动物细胞中部分结构的功能如图所示。CLC-7蛋⽩可维持溶酶体膜电位，从⽽有助于溶酶体内H+浓度
升⾼。溶酶体膜上转运蛋⽩异常会导致阿尔茨海默病（AD）等神经退⾏性疾病的发⽣。
（1）⾼尔基体经过⼀系列过程最终形成溶酶体，其中组成运输⼩泡膜的基本⽀架是_______。与溶酶体酶
形成相关的具膜细胞器除⾼尔基体外还有________。
（2）进⼊⾼尔基体的蛋⽩质经加⼯后有的进⼊溶酶体，有的被分泌到细胞外，据图分析，原因是________
。
（3）M6P受体数量减少会________（填“抑制”或“促进”）衰⽼细胞器的分解，原因是________。
（4）溶酶体pH升⾼会导致β淀粉样蛋⽩（Aβ）在溶酶体中降解受阻是AD的病因之⼀。据图分析可知，溶
酶体pH升⾼，使得________活性降低，Aβ在溶酶体中降解受阻，导致Aβ聚集。溶酶体pH升⾼的原因可
能是_______（填序号）。
①H+转运蛋⽩数量过少 ②H+转运蛋⽩基因过表达 ③CLC-7活性升⾼ ④CLC-7数量过少
22. ⽩叶枯病是⽔稻严重的病害之⼀，疣粒野⽣稻对其具有⾼度抗性。研究⼈员利⽤植物体细胞杂交技术，
试图将疣粒野⽣稻的抗⽩叶枯病特性转移到栽培稻中，部分流程如图所示。回答下列问题：
（1）科研⼈员⾸先制备了疣粒野⽣稻和栽培稻的悬浮细胞，⽤________酶处理，获得有活⼒的原⽣质体。
植物原⽣质体融合过程常利⽤化学试剂________诱导，形成的融合细胞经过________（填结构）再⽣，成
第7⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司为完整杂种细胞。
（2）杂种细胞分裂和________形成愈伤组织，经过________形成完整的杂种植株；诱导愈伤组织期间⼀般
不需要光照，原因是________。植物体细胞杂交技术依据的⽣物学原理有_______（写2个）。所⽤培养基
常采⽤________法灭菌处理。培养基中常添加的植物激素是________（写2个）。
（3）若疣粒野⽣稻细胞内有m条染⾊体，栽培稻细胞内有n条染⾊体，若仅考虑原⽣质体两两融合，则理
论上通过过程③形成的杂种细胞在有丝分裂后期含________条染⾊体；若杂种细胞培育成的杂种植株为四
倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
23. 下图为应⽤基因编辑去除CFTR 基因(控制CFTR 蛋⽩的合成)，获得患囊性纤维化的基因编辑⼩⿏4
的培育流程。请回答下列问题：
（1）对1号⼩⿏使⽤________进⾏超数排卵处理，培养收集处在________期的卵⺟细胞⽤于核移植。对卵
⺟细胞进⾏去核操作的原因是________。
（2）采集2号⼩⿏的组织细胞，⽤________处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO₂培养箱中培养，
其中CO₂的作⽤是________。在细胞培养过程中，需要定期更换培养液的⽬的是________。
（3）图中显微注射将供体细胞注⼊去核的卵⺟细胞后，要通过_________法使两细胞融合，形成重构胚。
重构胚⼀般需要培养⾄________阶段进⾏胚胎移植。
（4）胚胎移植作为胚胎⼯程最终技术环节，优势是________，为了获得更多的遗传背景⼀致的基因编辑⼩
⿏4，可以采⽤________技术。
24. ⾃⽣固氮菌是⼟壤中能独⽴固定空⽓中氮⽓的细菌，将⽟⽶种⼦⽤⾃⽣固氮菌拌种后播种，可显著提⾼
产量并降低化肥的使⽤量。科研⼈员进⾏了⼟壤中⾃⽣固氮菌的分离和固氮能⼒测定的研究，部分实验流
程如下图。回答下列问题：
第8⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司（1）步骤③中需⽤⼿指轻压移液管上的橡⽪头，吹吸3次的作⽤是__________。
（2）下表为两种培养基的配⽅，步骤④应选其中的培养基__________，原因是__________。
培养基类型 培养基组分
培养基甲 ⽢露醇、KH PO 、MgSO ·7H O、NaCl、K SO 、CaCO 、蒸馏⽔
2 4 4 2 2 4 3
培养基⼄ ⽢露醇、KH PO 、MgSO ·7H O、NaCl、K SO 、CaCO 、蒸馏⽔、琼脂
2 4 4 2 2 4 3
（3）该实验⽤于纯化培养的⽅法是__________，若在④的各组平板上统计的菌落的数量为108、120、138
个，则每克⼟壤中含有的固氮菌为__________个。
（4）另⼀组实验中发现，当培养时间过⻓时，在固氮菌⼤菌落四周出现了少量杂菌⼩菌落，进⼀步研究表
明这些杂菌不能利⽤空⽓中的氮⽓，则其氮源来⾃于__________。
（5）将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩⼤培养48⼩时，经离⼼后收集下层细胞并转移⾄特定培养基中
进⾏固氮能⼒的测定，筛选出固氮能⼒最强的菌种CM12，为进⼀步鉴定其固氮能⼒，科研⼈员选⽤发芽⼀
致的⽟⽶种⼦进⾏3组盆栽实验，30天后测定⼟壤微⽣物有机氮含量，结果如下图。
注：CK：对照处理组；
N：尿素处理组（每盆⼟壤浇50mL有氮全营养液：成分为在1000mL⽆氮植物营养液中加⼊0.12g尿素）；
CM12：⾃⽣固氮菌CM12处理组（每盆⼟壤浇50mL接种⾃⽣固氮菌的⽆氮植物营养液）。
①实验结果表明：施⽤尿素处理和接种CM12处理均能增加⼟壤有机氮含量。与CK组相⽐，CM12处理组
第9⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司⼟壤微⽣物有机氮含量增加了约__________%。
②研究表明，⼟壤中碳氮⽐低于40:1时，固氮菌的固氮作⽤迅速停⽌。因此优良菌肥最好与__________（填
“ 有机肥” “ 氮肥” “ 磷肥” 或“ 钾肥” ）配合施⽤。
25. 雌激素类物质污染会通过⻝物链影响⼈体健康和⽣态安全。科研⼈员欲将斑⻢⻥的vtg基因（图1）插
⼊Luc基因载体（图2），形成vtg-Luc融合基因重组载体并培育转基因斑⻢⻥。Luc表示萤⽕⾍荧光素酶基
因。（注：Luc基因缺乏启动⼦序列，vtg基因内部⽆图2中的任何限制酶识别序列。TetR为四环素抗性基因，
Ampr为氨苄⻘霉素抗性基因，Sau3AI、EcoRⅠ、HindⅢ、BsrGⅠ、BclI为限制酶，→表示转录⽅向）
（1）基因⼯程的核⼼步骤是________。为使vtg基因与Luc基因载体正向连接且降低“空载”概率，可选⽤
限制酶_________进⾏双酶切Luc基因载体。
（2）通过PCR获取vtg基因时，需设计合适的引物。依据图1、图2信息，推测引物1包含的碱基序列
为_________。
A.5’-GAATTCAACTAT-3’ B.5’-GAATTCTTGATA-3’
C.5’-GATCTTGATA-3’ D.5’-AAGCTTAACTAT-3’
（3）筛选导⼊vtg-Luc基因重组载体的⼤肠杆菌，可将⼤肠杆菌依次放在含有氨苄⻘霉素、四环素的培养
基中培养，筛选________（选填“能”或“不能”）在含有氨苄⻘霉素的培养基中⽣⻓但_______（选填“能”或“不
能”）在含有四环素的培养基中⽣⻓的⼤肠杆菌即为⽬的菌。
（4）⽔体中的雌激素能使斑⻢⻥细胞产⽣E蛋⽩，E蛋⽩可以激活vtg基因上游的启动⼦，E蛋⽩与启动
⼦结合后，启动转录过程还需要的酶是______。Luc基因的表达产物萤⽕⾍荧光素酶，可以催化荧光素氧化
产⽣荧光。斑⻢⻥的vtg基因在正常情况下不表达，当⽔体中有雌激素存在时，斑⻢⻥vtg基因的启动⼦被
激活，表达Vtg-Luc融合蛋⽩。在⽔样中添加荧光素后，Luc催化其产⽣荧光，荧光越______，说明⽔体
中______污染越严重。
第10⻚/共10⻚
学科⽹（北京）股份有限公司学年度（上）七校协作体期初⾼三联考⽣物试题
2025—2026
考试时间：75 分钟 满分100分
⼀、选择题：本题共 15 ⼩题，每⼩题 2 分，共 30 分。每⼩题给出的四个选项中，只有⼀
个选项是最符合题⽬要求的。
1. 肺炎⽀原体是⼀种能在宿主细胞内寄⽣并增殖的单细胞⽣物，其⼤型 DNA 散布在细胞内各区域，常⽤
DNA染⾊法检测肺炎⽀原体。下列叙述正确的是（ ）
A. 肺炎⽀原体既不属于原核⽣物也不属于真核⽣物
B. 肺炎⽀原体细胞壁和植物细胞壁成分不同，但都能起到⽀持和保护作⽤
C. 肺炎⽀原体在宿主细胞内利⽤⾃身的核糖体合成蛋⽩质
D. ⽤ DNA 染⾊法检测肺炎⽀原体，在分裂期可⻅染⾊体
【答案】C
【解析】
【分析】根据细胞内有⽆以核膜为界限的细胞核，把细胞分为真核细胞和原核细胞两⼤类，原核细胞是组
成原核⽣物的细胞，这类细胞主要特征是没有以核膜为界限的细胞核, 同时也没有核膜和核仁, 只有拟核。
常⻅的原核⽣物有蓝细菌、细菌、⽀原体、放线菌等。
【详解】AB、肺炎⽀原体中⼤型的DNA散布在细胞内各区域，没有拟核区，是⽬前已知的最⼩的原核⽣
物，没有细胞壁，AB错误；
C、肺炎⽀原体属于原核⽣物，只含有核糖体⼀种细胞器，可利⽤⾃身的核糖体合成蛋⽩质，C正确；
D、观察染⾊体的最佳时期是有丝分裂中期，⽽肺炎⽀原体分裂⽅式⼆分裂，且⽆染⾊体，D错误。
故选C。
2. 维⽣素D 可从⽜奶、⻥肝油等⻝物中获取，也可在阳光下由⽪肤中的7—脱氢胆固醇转化⽽来，活化维
3
⽣素D 可促进⼩肠和肾⼩管等部位对钙的吸收。研究发现，肾脏合成和释放的羟化酶可以促进维⽣素D
3 3
的活化。下列叙述错误的是（ ）
A. 维⽣素D 、磷脂、性激素和脂肪等都是脂质
3
B. 肾脏细胞释放羟化酶时需要利⽤载体蛋⽩
C. ⼈体⾎液中钙含量过低会出现抽搐的现象
D. ⼈体缺钙时，在补钙的同时还需要补充维⽣素D
3
【答案】B
【解析】
第1⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司【分析】脂质的种类和作⽤：（1）脂肪：⽣物体内良好的储能物质，还有保温、缓冲和减压减少摩擦的作
⽤；（2）磷脂：构成细胞膜和细胞器膜的重要成分；（3）固醇：①胆固醇：构成细胞膜的重要成分，参与
⾎液中脂质的运输；②性激素：促进⼈和动物⽣殖器官的发育和⽣殖细胞的形成；③维⽣素D：促进⼈和
动物肠道对钙和磷的吸收。
【详解】A、脂质包括脂肪、磷脂和固醇（包括维⽣素D、性激素和胆固醇），即维⽣素D 、磷脂、性激素
3
和脂肪等都是脂质，A正确；
B、羟化酶属于⼤分⼦物质，肾脏细胞释放羟化酶的⽅式是胞吐，胞吐需要能量和膜上的蛋⽩质，但不需要
载体，B错误；
C、⼈体⾎液中钙含量过低会出现抽搐的现象，⾎钙含量过⾼会引发肌⽆⼒，C正确；
D、维⽣素D能够促进肠道对钙和磷的吸收，⼈体缺钙时，在补钙的同时还需要补充维⽣素D
3，
以促进对钙
的吸收，D正确。
故选B。
3. 细胞⾊素c是⼀类电⼦传递蛋⽩，由⼀条肽链包裹⼀个⾎红素组成。⾎红素在⼈体红细胞中是⾎红蛋⽩
分⼦的重要组成部分，⾎红素可以与氧⽓、⼀氧化碳等结合，且结合⽅式相同。下列相关叙述正确的是（
）
A. 组成细胞⾊素c的⼤量元素有C、H、O、N、S、Fe
B. 氨基酸和⾎红素通过肽键连接形成细胞⾊素c
C. 半透膜两侧分别是⽔和细胞⾊素c的⽔溶液可探究浓度差是渗透作⽤发⽣的条件
D. ⾎红素分⼦与氧⽓的结合是不可逆的
【答案】C
【解析】
【分析】蛋⽩质的元素组成是C、H、O、N等，由氨基酸脱⽔缩合⽽成的，能构成蛋⽩质的氨基酸⼀般有
氨基和羧基连接在同⼀个碳原⼦上。
【详解】A、细胞⾊素c是⼀类电⼦传递蛋⽩，元素组成中C、H、O、N、S是⼤量元素，Fe属于微量元素，
A错误；
B、细胞⾊素c是⼀类电⼦传递蛋⽩，氨基酸之间通过肽键连接，但氨基酸与⾎红素之间连接的化学键不是
肽键，B错误；
C、渗透作⽤发⽣的条件是半透膜和浓度差，故半透膜两侧分别是⽔和细胞⾊素c的⽔溶液可探究浓度差是
渗透作⽤发⽣的条件，C正确；
D、⾎红素分⼦与氧⽓的结合是可逆的，D错误。
第2⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司故选C。
4.SNARE 假说认为：⾼尔基体产⽣的囊泡，在细胞内由驱动蛋⽩沿着细胞⻣架运输⾄细胞膜附近，囊泡膜
上的 Rab-GTP(GTP 为⻦苷三磷酸，⼀种⾼能磷酸化合物)复合物与细胞膜上的锚定蛋⽩识别并结合后转变
为 Rab-GDP(GDP 为⻦苷⼆磷酸)，囊泡膜上的蛋⽩质v-SNARE与位于细胞膜上的t-SNARE 结合，囊泡膜
与细胞膜融合将内容物释放到细胞外。下列说法错误是（ ）
A. 运输囊泡的细胞⻣架由蛋⽩质纤维组成
B. 囊泡膜与细胞膜融合过程体现了细胞膜具有⼀定的流动性
C.GTP可以为上述过程提供能量
D.SNARE蛋⽩基因缺陷型⼩⿏出现雄性激素分泌障碍
【答案】D
【解析】
【分析】分泌蛋⽩是在细胞内合成后，分泌到细胞外起作⽤的蛋⽩质，分泌蛋⽩的合成、加⼯和运输过程：
最初是在内质⽹上的核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进⼊内质⽹进⾏加⼯，形成有⼀定空间结构的蛋⽩
质由囊泡包裹着到达⾼尔基体，⾼尔基体对其进⾏进⼀步加⼯，然后形成囊泡经细胞膜分泌到细胞外，该
过程消耗的能量由线粒体提供。
【详解】A、细胞⻣架是由蛋⽩质纤维组成的，与细胞的运动、分裂，物质运输等有关，A正确；
B、细胞膜具有⼀定的流动性才能与囊泡膜融合，B正确；
C、GTP 为⻦苷三磷酸，⼀种⾼能磷酸化合物，可以为该过程提供能量，C正确；
D、SNARE蛋⽩基因缺陷型⼩⿏的分泌蛋⽩分泌过程会出现障碍，雄性激素是脂质类物质，分泌⽅式是⾃
由扩散，SNARE蛋⽩基因缺陷型⼩⿏与雄性激素分泌⽆关，D错误。
故选D。
5. 细胞核是细胞代谢和遗传的控制中⼼。下列描述不能体现这⼀观点的是（ ）
A. 失去细胞核的变形⾍对外界刺激不发⽣反应
B. ⽆核⽩⾊美⻄螈卵细胞移⼊⿊⾊美⻄螈的细胞核后发育成⿊⾊美⻄螈
C. 在代谢旺盛的细胞中，核孔的数⽬较多，实现DNA、RNA、蛋⽩质等频繁进出细胞核
D. ⺟⽜甲的去核卵细胞移⼊⺟⽜⼄的体细胞核后发育成与⺟⽜⼄性状⼀样的⼩⽜
【答案】C
【解析】
【详解】A、失去细胞核的变形⾍对外界刺激不发⽣反应，说明细胞核控制着变形⾍对外界刺激作出反应的
⽣命活动，体现了细胞核是细胞代谢和遗传的控制中⼼，A正确；
第3⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司B、⽆核⽩⾊美⻄螈卵细胞移⼊⿊⾊美⻄螈的细胞核后发育成⿊⾊美⻄螈，表明美⻄螈的发育等遗传性状由
细胞核控制，体现了细胞核是细胞代谢和遗传的控制中⼼，B正确；
C、核孔实现核质之间频繁的物质交换和信息交流，但DNA不能进出细胞核，且也未体现细胞核是细胞代
谢和遗传的控制中⼼，C错误；
D、⺟⽜甲的去核卵细胞移⼊⺟⽜⼄的体细胞核后发育成与⺟⽜⼄性状⼀样的⼩⽜，说明⼩⽜的性状由⺟⽜
⼄的细胞核决定，体现了细胞核是细胞代谢和遗传的控制中⼼，D正确。
故选C。
6. 同⼀个⽔槽中放置甲、⼄、丙三个渗透装置如图，三个漏⽃颈的内径相等，漏⽃⼝均封以半透膜（单糖
能⽽⼆糖不能透过）。漏⽃内装有不同浓度的蔗糖溶液，开始时漏⽃内液⾯⾼度相同，蔗糖溶液浓度和半透
膜的⾯积⻅下表。下列相关说法错误的是（ ）
装置编号 甲 ⼄ 丙
半透膜⾯积（cm2） 2S S S
蔗糖溶液浓度（mol/L） 0．3 0．3 0．5
A. 三个渗透装置达到渗透平衡时，丙漏⽃的液⾯上升的最⾼
B. 甲漏⽃的液⾯上升到最⼤⾼度所需的时间⼩于⼄所需时间
C. ⼄、丙装置均达到渗透平衡时，漏⽃内蔗糖溶液的浓度相等
D. 若漏⽃中加⼊等量蔗糖酶，⼄、丙漏⽃内的液⾯都是先升后降最后⾼度相同
【答案】C
【解析】
【分析】漏⽃内液⾯⾼度变化快慢与⽔分的渗透速率有关，但⾼度⼤⼩最终取决于⽔分渗透总量，⽽⽔分
第4⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司渗透总量和蔗糖溶液的量正相关；据题表分析可知：丙的蔗糖浓度最⾼，导致⽔分的渗透总量最⼤，因此
最终漏⽃液⾯⾼度最⾼；⽽甲和⼄蔗糖溶液的浓度相等，最终⽔分渗透总量⼀样，所以漏⽃液⾯⾼度最终
⼀样，但甲的半透膜⾯积为2S，是⼄的2倍，因此刚开始⼀段时间⽔分渗透速率较快，液⾯⾼度上升较⼄
快，达到平衡时速率是⼀样的。
【详解】A、漏⽃内液⾯⾼度⼤⼩最终取决于⽔分渗透总量，⽽⽔分渗透总量和蔗糖溶液的量正相关；据题
表分析可知：丙的蔗糖浓度最⾼，导致⽔分的渗透总量最⼤，因此最终漏⽃液⾯⾼度最⾼；A正确；
B、甲和⼄蔗糖溶液的浓度相等，最终⽔分渗透总量⼀样，所以漏⽃液⾯⾼度最终⼀样，但甲的半透膜⾯积
为2S，是⼄的2倍，因此刚开始⼀段时间⽔分渗透速率较快，液⾯⾼度上升较⼄快，因此甲漏⽃的液⾯上
升到最⼤⾼度所需的时间⼩于⼄所需时间，B正确；
C、由于蔗糖浓度丙⼤于⼄，因此⼄、丙装置均达到渗透平衡时，漏⽃内蔗糖溶液的浓度丙⼤于⼄，C错误；
D、由于蔗糖不能透过半透膜，导致漏⽃液⾯上升；加⼊蔗糖酶后，发⽣⽔解反应，⽣成很多葡萄糖和果糖，
由于单糖可以透过半透膜，达到平衡后漏⽃内外液⾯相同，所以⼄、丙漏⽃内的液⾯都是先升后降最后⾼
度相同，D正确。
故选C。
7. ⼤多数酶是球蛋⽩，表⾯有⼀个或多个袋状或缝状凹陷，这⼀部位称为酶的活性部位，底物与活性部位
结合，形成酶—底物复合物，底物分⼦只有与活性部位精确结合，催化反应才能进⾏。下列相关叙述错误
的是（ ）
A. 若某物质也可与酶的活性部位结合，则加⼊该物质后可使酶的催化效率下降
B. ⾼温和低温均能使酶失活从⽽使反应不能进⾏
C. 底物与酶的活性部位结合后可降低底物反应时所需能量
D. 酶的活性部位通常具有特定的空间结构，便于酶—底物复合物的形成
【答案】B
【解析】
【分析】酶的特性：①⾼效性：酶能显著降低反应活化能，加快反应速率；②专⼀性：每种酶只能催化⼀
种或⼀类化学反应；③酶的作⽤条件温和。
【详解】A、若某物质的结合位置也是酶的活性部位，就会和底物竞争结合位点，导致酶的催化效率下降，
A正确；
B、⾼温会破坏酶的空间结构，导致活性部位结构的改变，底物不能与活性部位结合，导致反应不能进⾏，
但是低温不会导致酶的结构改变，B错误；
C、底物和酶结合后可催化底物的分解，其作⽤机理是降低化学反应的活化能，C正确；
第5⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司D、根据题⼲信息，底物与活性部位精确结合后才能催化反应进⾏，可推断酶的活性部位具有特定的空间结
构，D正确。
故选B。
8. 转运蛋⽩是协助物质跨膜运输的重要膜组分，分为载体蛋⽩和通道蛋⽩两种类型。通道蛋⽩包括⽔通道
蛋⽩和离⼦通道蛋⽩，其中离⼦通道转运速度是载体蛋⽩的100～1000倍。下列说法错误的是（ ）
A. 载体蛋⽩可协助物质进⾏顺浓度梯度或逆浓度梯度跨膜运输
B. 肾⼩管主要通过⽔分⼦与⽔通道蛋⽩结合实现对⽔的重吸收
C. 通道蛋⽩只容许与⾃身孔径⼤⼩和电荷适宜的分⼦或离⼦通过
D. 载体蛋⽩转运物质时⾃身构象会发⽣改变
【答案】B
【解析】
【分析】⾃由扩散、协助扩散和主动运输的⽐较
被动运输
物质转运⽅式 主动运输
⾃由扩散 协助扩散
顺浓度梯度（⾼浓度→低 顺浓度梯度（⾼浓度→低 逆浓度梯度（低浓度→⾼
运输⽅向
浓度） 浓度） 浓度）
是否需要转运蛋⽩ 不需要 需要 需要
否消耗能量 不消耗 不消耗 消耗
【详解】A、载体蛋⽩协助物质进⾏顺浓度梯度的跨膜运输⽅式为协助扩散，载体蛋⽩协助物质进⾏逆浓度
梯度的跨膜运输⽅式为主动运输，A正确；B、⽔分⼦通过⽔通道蛋⽩时，不需要与⽔通道蛋⽩结合，B错
误；
C、通道蛋⽩只容许与⾃身通道的直径和形状相适配、⼤⼩和电荷相适宜的分⼦或离⼦通过，C正确；
D、载体蛋⽩只容许与⾃身结合部位相适应的分⼦或离⼦通过，⽽且每次转运时都会发⽣⾃身构象的改变，
D正确。
故选B。
9. ⾖豉是⼀种古⽼的传统发酵⾖制品，发酵原理与腐乳类似。北魏贾思勰的《⻬⺠要术》中也有相关记录。
⾖豉制作的流程如图所示。装坛后放在室外⽇晒，每天搅拌两次。下列说法错误的是（ ）
第6⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司A. 发酵过程中多种酶系将原料中的蛋⽩质等⼤分⼦分解为⼩分⼦
B. 发酵的⽬的主要是让酵⺟菌产⽣酶，搅拌能增加发酵液的溶氧量
C. 代谢产物积累和酿造环境的变化导致后期窖池微⽣物数量下降
D. 添加的盐、⽩酒和⻛味料具有抑制杂菌⽣⻓和调节⼝味的作⽤
【答案】B
【解析】
【分析】参与腐乳发酵的微⽣物主要是⽑霉，⽑霉属于异养需氧型微⽣物。⽑霉产⽣的蛋⽩酶能将蛋⽩质
⽔解为氨基酸和⼩分⼦肽，脂肪酶能将脂肪⽔解为⽢油和脂肪酸。
【详解】A、发酵过程中多种酶系将原料中的蛋⽩质、脂肪等分解为⼩分⼦，如可将蛋⽩质分解为⼩分⼦的
肽和氨基酸，A正确；
B、前期发酵 ⽬的是让霉菌产⽣相应的酶如蛋⽩酶可以将蛋⽩质分解为氨基酸，使⾖豉营养更丰富，B错
误；
C、代谢产物积累和酿造环境的变化（pH等变化）导致后期窖池微⽣物数量下降，C正确；
D、调味过程中添加盐、⽩酒和调味料均可起到抑制杂菌⽣⻓的⽬的，如盐分可通过使微⽣物渗透失⽔死亡
⽽达到抑菌作⽤，D正确。
故选B。
10. 我国卫⽣部⻔规定饮⽤⽔标准：1mL ⾃来⽔检出的菌落总数不可以超过100个( 培养48h)，不
得检出总⼤肠菌群。某⽣物兴趣⼩组对某⾃来⽔⼚新产的⾃来⽔进⾏微⽣物菌落含量检测与鉴定，下列说
法错误的是（ ）
A. 检测时不需要对饮⽤⽔进⾏梯度稀释
B. 若使⽤的伊红—亚甲蓝琼脂培养基上未出现深紫⾊菌落，说明饮⽤⽔符合标准
C. ⽤涂布平板法进⾏接种，需要设置不进⾏涂布或者⽤⽆菌⽔涂布的对照组
D. 饮⽤煮沸后的⾃来⽔可以降低微⽣物对⼈体造成危害
【答案】B
【解析】
【分析】1、微⽣物常⻅的接种⽅法：平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法可⽤于微⽣物计数。
2、稀释涂布平板法统计菌落数的原理：当样品的稀释倍数⾜够⾼时，培养基表⾯⽣⻓的⼀个菌落来⾃于样
品稀释液中的⼀个活菌，可通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数。
【详解】A、⾃来⽔中的活菌本来可能数量就较少，浓度较低，检测时不需要对饮⽤⽔进⾏梯度稀释，A正
第7⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司确；
B、若使⽤的伊红—亚甲蓝琼脂培养基上未出现深紫⾊菌落，只能说明没有⼤肠杆菌污染，但其他杂菌数可
能超标，并不能说明饮⽤⽔符合标准，B错误；
C、为检验平板灭菌合格以及⽆菌操作正确，需要设置不进⾏涂布或者⽤⽆菌⽔涂布的对照组，C正确；
D、煮沸消毒法能⼀定程度杀死⾃来⽔中的部分微⽣物，故饮⽤煮沸后的⾃来⽔可以降低微⽣物对⼈体造成
危害，D正确。
故选B。
11. 计数噬菌体时常进⾏如下操作：先向培养⽫中倒⼊琼脂含量为1.5%的培养基凝固成底 层平板，将琼脂
含量为0.6%的培养基融化并冷却⾄50℃左右，然后加⼊宿主细菌和待测 噬菌体混合液，充分混匀后⽴即
倒⼊底层平板上形成双层平板。培养⼀段时间，在上层平 板可⻅因噬菌体侵染裂解细菌⽽形成的噬菌斑，
可根据噬菌斑的数⽬计算噬菌体的数量。 下列叙述正确的是（ ）
A. 两层培养基均可采⽤⼲热灭菌箱进⾏灭菌后使⽤
B. 加⼊混合液后，使⽤灭菌后的涂布器蘸取混合液均匀地涂布在培养基表⾯
C. 上层培养基中琼脂浓度较低，因此形成的噬菌斑较⼤，更有利于计数
D. 通过此操作计算出的噬菌体数量通常⽐实际值偏⼤
【答案】C
【解析】
【分析】双层平板法，先在培养⽫中倒⼊底层固体培养基，凝固后再倒⼊含有宿主细菌和⼀定稀释度噬菌
体的半固体培养基。培养⼀段时间后，计算噬菌斑的数量。双层平板法的优点：①加了底层培养基后，可
使原来底⾯不平的玻璃⽫的缺陷得到了弥补；②所形成全部噬菌体斑都接近处于同⼀平⾯上，因此不仅每
⼀噬菌斑的⼤⼩接近、边缘清晰，⽽且不致发⽣上下噬菌斑的重叠现象；③因上层培养基中琼脂较稀，故
形成的噬菌斑较⼤，更有利于计数。
【详解】A、培养基采⽤湿热灭菌的⽅法灭菌，A错误；
B、据题意可知，将琼脂含量是1%的培养基融化并冷却⾄45～48℃，然后加⼊宿主细菌和待测噬菌体稀释
悬液的混合液，充分混匀后⽴即倒⼊底层平板上形成双层平板，是培养基和混合液⼀起倒平板，不是混合
液涂布在培养基表⾯，B错误；
C、根据题意可知，双层平板法因上层培养基中琼脂较稀，故形成的噬菌斑较⼤，更有利于计数，C正确；
D、1个或多个噬菌体裂解同⼀个细菌时只形成⼀个噬菌斑，故通过此操作计算出的噬菌体数量通常⽐实际
值偏⼩，D错误。
故选C。
第8⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司12. 单克隆抗体在多种疾病的诊断和治疗中发挥重要的作⽤，下图为利⽤⼩⿏制备单克隆抗体的过程，相关
叙述正确的是（ ）
A. 从免疫⼩⿏脾脏中可获取⼤量能产⽣⽬标抗体的B淋巴细胞
B. 细胞融合可以⽤灭活的病毒进⾏诱导，不需要⽆菌环境
C. 图中细胞筛选是利⽤梯度离⼼的办法获得杂交瘤细胞
D. 单抗检测时取培养液滴加相应抗原出现反应说明含有⽬标细胞
【答案】D
【解析】
【详解】A、免疫⼩⿏脾脏中能产⽣⽬标抗体的B淋巴细胞数量有限，不能获取⼤量，A错误；
B、细胞融合过程需要在⽆菌环境中进⾏，以防⽌杂菌污染影响细胞融合和培养，B错误；
C、图中细胞筛选是利⽤特定的选择培养基来获得杂交瘤细胞，⽽不是梯度离⼼的办法，C错误；
D、单抗检测时，依据抗原-抗体特异性结合的原理，取培养液滴加相应抗原，若出现反应，说明培养液中
含有能产⽣与该抗原特异性结合抗体的⽬标细胞，D正确。
故选D。
13. 下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA⽚段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述不正确的是（ ）
A. 利⽤蛋⽩质不溶于酒精，但DNA溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋⽩质
B. 利⽤在沸⽔浴下DNA遇⼆苯胺试剂会呈现蓝⾊的原理对粗提取的DNA进⾏鉴定
C.PCR技术利⽤了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA氢键解聚与结合
D. 电泳鉴定DNA利⽤了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
【答案】A
【解析】
【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋⽩质等其他成分在不同浓度NaCl溶液
中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋⽩质溶于酒精；DNA对酶、⾼温和洗涤剂的耐受
性。（2）DNA的鉴定：在沸⽔浴的条件下，DNA遇⼆苯胺会被染成蓝⾊。
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学科⽹（北京）股份有限公司【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋⽩质则溶于酒精。利⽤这⼀原理，可以将DNA与
蛋⽩质进⼀步的分离，A错误；
B、在⼀定温度下，DNA遇⼆苯胺试剂会呈现蓝⾊，因此可利⽤沸⽔浴下DNA遇⼆苯胺试剂会呈现蓝⾊的
原理对粗提取的DNA进⾏鉴定，B正确；
C、PCR技术利⽤了DNA的热变性原理，当温度超过90℃DNA分⼦解旋打开双链，当温度降⾄到 50℃
左右时碱基互补配对形成氢键，引物与模板链特异性结合，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合，
C正确；
D、电泳是指带电粒⼦在电场的作⽤下发⽣迁移的过程，由于同性相斥、异性相吸，带电分⼦会向着与其所
带电荷相反的电极移动，D正确。
故选A。
14. 蛛丝蛋⽩有着超强的抗张强度，可制成防弹背⼼、降落伞绳等。下图是培育转基因蜘蛛⽺⽣产蛛丝蛋⽩
的⽅案。以下叙述错误的是（ ）
A. 通过逆转录得到蛛丝蛋⽩基因不含有启动⼦和内含⼦
B. 构建含蛛丝蛋⽩基因的重组质粒是培育转基因蜘蛛⽺的核⼼⼯作
C. 过程②通常选⽤基因枪法将重组质粒导⼊⼭⽺的受精卵中
D. 可利⽤ PCR 检测⼭⽺ 染⾊体DNA 是否插⼊了蛛丝蛋⽩基因
【答案】C
【解析】
【分析】基因⼯程是指按照⼈们的愿望，进⾏严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予⽣物以
新的遗传特性，创造出更符合⼈们需要的新的⽣物类型和⽣物产品．基因⼯程是在DNA分⼦⽔平上进⾏设
计和施⼯的，⼜叫做DNA重组技术
【详解】A、启动⼦和终⽌⼦不会转录形成mRNA，所以提取mRNA再经过逆转录形成的蛛丝蛋⽩基因不
含有启动⼦和内含⼦，A正确；
B、基因⼯程的核⼼⼯作是构建基因表达载体，所以构建含蛛丝蛋⽩基因的重组质粒是培育转基因蜘蛛⽺的
核⼼⼯作，B正确；
C、将重组质粒导⼊动物细胞受精卵常⽤显微注射技术，C错误；
第10⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司D、在分⼦⽔平的检测，可以使⽤PCR等技术检测⼭⽺的染⾊体DNA是否插⼊了丝蛋⽩基因，D正确。
故选C。
15.2018年3⽉，最后⼀头雄性北⽅⽩犀⽜去世，⾄此世界上仅剩两头雌性个体。科研团队拟采⽤提前保存
的北⽅⽩犀⽜冷冻精⼦借助核移植、体外受精等技术，以南⽅⽩犀⽜作为代孕⺟畜⼈⼯繁育北⽅⽩犀⽜。
下列叙述合理的是（ ）
A. 需注射免疫抑制剂以减弱代孕⺟畜对植⼊胚胎的免疫排斥反应
B. 冷冻保存的精⼦⽆需经获能处理即可⽤于体外受精
C. 若取雌性⽩犀⽜的体细胞进⾏核移植，获得的克隆后代可繁衍为⼀个种群
D. 理论上可取早期胚胎⽤酶处理成单个细胞分别培养，以提⾼胚胎的利⽤率
【答案】D
【解析】
【详解】A、代孕⺟畜对植⼊胚胎基本上不会产⽣免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，A错误；
B、冷冻保存的精⼦已经成熟，不需要再培养 ，但需要获能处理才可⽤于体外受精，B错误；
C、⽤雌性⽩犀⽜体细胞进⾏核移植克隆出多头⼦代，获得的克隆后代均为雌性，不能繁殖后代，故不是⼀
个种群，C错误；
D、理论上可取早期胚胎⽤酶处理成单个细胞分别培养，以提⾼胚胎的利⽤率，D正确。
故选D。
⼆、不定项选择题：本题共5⼩题，每⼩题3分，共15分。每⼩题给出的四个选项中，有⼀
个或多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 矮牵⽜花瓣颜⾊与其液泡pH密切相关，液泡pH≤2 时多呈红⾊，随着pH升⾼颜⾊不断改变，当pH
＞5时，出现稀有的蓝⾊。研究表明，液泡pH主要由H+泵甲、⼄和转运蛋⽩NHX1共同调控，如图所示。
下列叙述错误的是（ ）
A.H+ 通过甲、⼄进⼊液泡利于植物细胞保持坚挺
B.K+ 进⼊液泡的过程需要与转运蛋⽩结合
第11⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司C. 图中H+的主动运输过程所需能量均由ATP⽔解提供
D. 红花矮牵⽜某突变体NHX1表达量显著减少，可导致花瓣呈现蓝⾊
【答案】CD
【解析】
【详解】A、H⁺通过甲、⼄进⼊液泡，使液泡内的细胞液浓度增⼤、渗透压升⾼，液泡吸⽔，利于植物细胞
保持坚挺，A正确；
B、据图可知，K+ 进⼊液泡是在转运蛋⽩NHX1的协助下进⾏的主动运输，该过程需要与转运蛋⽩结合，
B正确；
C、在图中H+的主动运输过程中，通过H+泵甲过程进⼊液泡所需能量是由PPi⽔解提供，C错误；
D、红花矮牵⽜某突变体NHX1表达量显著减少，H+从液泡向细胞质基质运输减少，使液泡中H+增多，pH
下降，可导致花瓣呈现红⾊，D错误。
故选CD。
17. 某科研⼈员从某种微⽣物体中分离得到了⼀种酶Q，为探究该酶的最适温度，进⾏了相关实验，各组反
应相同时间后的实验结果如图1所示；图2为酶Q在60℃催化⼀定量的底物时，⽣成物的量随时间变化的
曲线。下列叙述正确的是（ ）
A. 由图1可知，该种微⽣物适合在较⾼的温度环境中⽣存
B. 图1实验结果并不能准确得出该酶的最适温度，需要增加每个温度条件下实验的次数
C. 图2实验中若升⾼温度，⽣成物的量会增加
D. 图2实验中，若在t 时增加底物的量，酶Q的活性不变
2
【答案】AD
【解析】
【详解】A、由图1可知，在实验条件下，该微⽣物体内的酶在60℃时反应速率最⾼（底物剩余量最低），
说明这种微⽣物适合在较⾼的温度环境中⽣存，A正确；
B、由于缺乏温度⾼于60℃的实验数据，所以图1实验结果并不能准确得出该酶的最适温度，增加每个温
第12⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司度条件下实验的次数进⾏重复实验，可减少实验误差，增加实验数据的准确性，也不能准确得出酶Q的最
适温度，B错误；
C、图2为酶Q在60℃催化⼀定量的底物时，⽣成物的量随时间变化的曲线，由图1可知，若升⾼温度，
酶Q的活性不⼀定升⾼，因此⽣成物的量不⼀定会增加，C错误；
D、增加底物的量并不能改变酶的活性，图2实验中，若在t 时增加底物的量，酶Q的活性不变，D正确。
2
选AD。
18. 液体深层培养是指以获得⼤量发酵产物为⽬的的发酵罐⼤容量液体培养，可通过调节培养液的pH和温
度、营养条件以及⽓体环境促使微⽣物迅速⽣⻓，产⽣⼤量代谢产物，是发酵⼯业⽣产的基本培养⽅法。
下列叙述正确的是（ ）
A. 传统发酵技术不需要防⽌杂菌污染，液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进⾏严格灭菌
B. 单细胞蛋⽩是从微⽣物细胞中提取的蛋⽩质，可作为⻝品添加剂、微⽣物饲料等
C. 可通过过滤、沉淀等⽅法获得微⽣物代谢产物
D. 利⽤液体深层培养进⾏⾕氨酸发酵⽣产应在中性或弱碱性条件下进⾏
【答案】D
【解析】
【分析】发酵⼯程的基本环节：发酵⼯程⼀般包括菌种的选育，扩⼤培养，培养基的配制、灭菌，接种，
发酵，产品的分离、提纯等⽅⾯。
【详解】A、传统发酵技术利⽤混合菌种发酵，没有进⾏严格灭菌，但是也需要采取⼀些措施防⽌杂菌污染，
液体深层培养属于发酵⼯程，发酵⼯程中所⽤的菌种⼤多是单⼀菌种，为了防⽌微⽣物的污染，需要对发
酵罐中的培养基进⾏严格灭菌，A错误；
B、单细胞蛋⽩是发酵获得的⼤量的微⽣物菌体，B错误；
C、如果发酵产品是微⽣物细胞本身，可在发酵结束之后，采⽤过滤、沉淀等⽅法将菌体分离和⼲燥，即可
得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，C错误；
D、环境条件不仅会影响微⽣物的⽣⻓繁殖，⽽且会影响微⽣物代谢物的形成。利⽤液体深层培养进⾏⾕氨
酸发酵⽣产应在中性或弱碱性条件下进⾏，在酸性条件下则容易形成⾕氨酰胺和N-⼄酰⾕氨酰胺，D正确。
故选D。
19. 与常规栽培技术相⽐，利⽤植物细胞培养进⾏药⽤次⽣代谢产物的⽣产具有显著的优越性，根据不同的
需求可以采⽤不同的技术流程（如图）。相关叙述正确的是（ ）
第13⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司A. 培养体系1中的外源基因导⼊前需⽤Ca2+处理受体细胞
B. 培养体系2中获得的愈伤组织细胞应具有全能性，其细胞形态和结构与外植体细胞不同
C. 在将经消毒处理后的外植体诱导形成愈伤组织期间，⼀般不需要光照
D. 在由外植体诱导形成愈伤组织的过程中，细胞发⽣了分裂及基因的选择性表达
【答案】BCD
【解析】
【详解】A、将基因导⼊植物细胞常⽤农杆菌转化法，导⼊微⽣物中常⽤Ca2+处理法，培养体系1中 外源
基因导⼊的是植物细胞，不需要⽤Ca2+处理受体细胞，A错误；
B、愈伤组织是⼀群具有分⽣能⼒的薄壁细胞，其细胞形态和结构与外植体细胞（已分化的细胞，有特定形
态和功能）不同，并且愈伤组织细胞具有全能性，在适宜的条件下可以再分化形成完整的植株，B正确；
C、在植物组织培养中，外植体经消毒处理后诱导形成愈伤组织的过程属于脱分化，脱分化过程⼀般不需要
光照，因为此阶段主要是让已分化的细胞恢复分裂能⼒，形成愈伤组织，光照可能会影响细胞的脱分化进
程，C正确；
D、在愈伤组织诱导过程中，外植体细胞经历了分裂增殖与基因选择性表达（关闭分化基因、激活脱分化相
关基因），从⽽实现从分化状态向未分化状态的转变，D正确。
故选BCD。
20. 基因污染是指在天然物种的DNA中嵌⼊了⼈⼯重组基因，这些外来基因可伴随被污染的⽣物的繁殖、
传播⽽扩散。下列有关“基因污染”的叙述中，正确的是（ ）
A.“基因污染”有可能会从⼀种⽣物扩散到其他⽣物
B. 转基因⽣物有可能成为“外来物种”，影响⽣态系统的稳定性
C. 抗除草剂基因有可能通过花粉传播进⼊杂草，从⽽产⽣“超级杂草”
D. 为避免基因污染，应保证⽬的基因整合到受体细胞的染⾊体DNA上
【答案】ABC
【解析】
【详解】A、“基因污染”指的是转基因⽣物的外来基因可能会通过花粉等扩散到其他物种的现象，A正确；
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学科⽹（北京）股份有限公司B、转基因⽣物竞争能⼒强，可能成为“⼊侵的外来物种”，影响⽣态系统的稳定性，B正确；
C、抗除草剂基因有可能通过花粉传播进⼊杂草，使杂草成为⽤除草剂除不掉的“超级杂草”，C正确；
D、要避免基因污染，⼀般需将⽬的基因导⼊细胞的细胞质（线粒体、叶绿体），不会随着花粉进⾏基因污
染，D错误。
故选ABC。
三、⾮选择题：本题共5⼩题，55分。
21. 动物细胞中部分结构的功能如图所示。CLC-7蛋⽩可维持溶酶体膜电位，从⽽有助于溶酶体内H+浓度
升⾼。溶酶体膜上转运蛋⽩异常会导致阿尔茨海默病（AD）等神经退⾏性疾病的发⽣。
（1）⾼尔基体经过⼀系列过程最终形成溶酶体，其中组成运输⼩泡膜的基本⽀架是_______。与溶酶体酶
形成相关的具膜细胞器除⾼尔基体外还有________。
（2）进⼊⾼尔基体的蛋⽩质经加⼯后有的进⼊溶酶体，有的被分泌到细胞外，据图分析，原因是________
。
（3）M6P受体数量减少会________（填“抑制”或“促进”）衰⽼细胞器的分解，原因是________。
（4）溶酶体pH升⾼会导致β淀粉样蛋⽩（Aβ）在溶酶体中降解受阻是AD的病因之⼀。据图分析可知，溶
酶体pH升⾼，使得________活性降低，Aβ在溶酶体中降解受阻，导致Aβ聚集。溶酶体pH升⾼的原因可
能是_______（填序号）。
①H+转运蛋⽩数量过少 ②H+转运蛋⽩基因过表达 ③CLC-7活性升⾼ ④CLC-7数量过少
【答案】（1） ①. 磷脂双分⼦层 ②. 内质⽹、线粒体
（2）该蛋⽩质能否与⾼尔基体上的M6P受体识别并结合（蛋⽩质是否有M6P）
（3） ①. 抑制 ②.M6P受体减少会抑制溶酶体的形成，进⽽影响溶酶体参与的衰⽼细胞器分解
（4） ①. 溶酶体酶 ②.①④
【解析】
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学科⽹（北京）股份有限公司【分析】1、溶酶体内含多种⽔解酶，具有对⼏乎所有⽣物分⼦的强⼤消化分解能⼒，能够分解胞内的外来
物质及清除衰⽼、残损的细胞器；
2、分泌蛋⽩是指在细胞内合成后，分泌到细胞外起作⽤的蛋⽩质。例如：唾液淀粉酶，胃蛋⽩酶，消化酶，
抗体和⼀部分激素。在核糖体上合成的分泌蛋⽩，要经过内质⽹和⾼尔基体，⽽不是直接运输到细胞膜。
【⼩问1详解】
⽣物膜的基本⽀架是磷脂双分⼦层，所以组成运输⼩泡膜的基本⽀架是磷脂双分⼦层。溶酶体酶是蛋⽩质，
其合成场所是核糖体，加⼯和运输需要内质⽹和⾼尔基体，整个过程还需要线粒体提供能量，所以与溶酶
体酶形成相关的具膜细胞器除⾼尔基体还有内质⽹和线粒体。
【⼩问2详解】
由图可知，⾼尔基体内存在M6P受体，进⼊⾼尔基体的蛋⽩质经加⼯后能被M6P受体识别，逐渐转化为溶
酶体，这些有M6P标志的蛋⽩质转化为溶酶体酶，不能发⽣此识别过程的蛋⽩质经囊泡运往细胞膜分泌到
细胞外，所以该蛋⽩质加⼯后是进⼊溶酶体还是分泌到细胞外，与该蛋⽩质能否与⾼尔基体上的M6P受体
识别并结合（蛋⽩质是否有M6P）有关。
【⼩问3详解】
由图可知，M6P受体可以结合来⾃⾼尔基体的蛋⽩质，使其转化为溶酶体酶，帮助溶酶体消化分解衰⽼细
胞器，M6P受体数量减少会抑制溶酶体的形成，进⽽影响溶酶体参与的衰⽼细胞器分解。
【⼩问4详解】
溶酶体pH升⾼，使溶酶体酶的活性降低，β淀粉样蛋⽩（Aβ）在溶酶体中降解受阻，导致Aβ在溶酶体内
聚集。溶酶体pH升⾼的原因可能是H+吸收量减少，即H+转运蛋⽩数量过少或CLC-7数量过少，①④正确，
②③错误。
故选①④。
22. ⽩叶枯病是⽔稻严重的病害之⼀，疣粒野⽣稻对其具有⾼度抗性。研究⼈员利⽤植物体细胞杂交技术，
试图将疣粒野⽣稻的抗⽩叶枯病特性转移到栽培稻中，部分流程如图所示。回答下列问题：
（1）科研⼈员⾸先制备了疣粒野⽣稻和栽培稻的悬浮细胞，⽤________酶处理，获得有活⼒的原⽣质体。
植物原⽣质体融合过程常利⽤化学试剂________诱导，形成的融合细胞经过________（填结构）再⽣，成
为完整杂种细胞。
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学科⽹（北京）股份有限公司（2）杂种细胞分裂和________形成愈伤组织，经过________形成完整的杂种植株；诱导愈伤组织期间⼀般
不需要光照，原因是________。植物体细胞杂交技术依据的⽣物学原理有_______（写2个）。所⽤培养基
常采⽤________法灭菌处理。培养基中常添加的植物激素是________（写2个）。
（3）若疣粒野⽣稻细胞内有m条染⾊体，栽培稻细胞内有n条染⾊体，若仅考虑原⽣质体两两融合，则理
论上通过过程③形成的杂种细胞在有丝分裂后期含________条染⾊体；若杂种细胞培育成的杂种植株为四
倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶 ②. 聚⼄⼆醇（PEG） ③. 细胞壁
（2） ①. 脱分化 ②. 再分化 ③. 细胞尚未分化出叶绿体，细胞需要的营养物质可直接从培养基
中获得（合理即可） ④. 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 ⑤. ⾼压蒸汽灭菌（湿热灭菌） ⑥.
⽣⻓素和细胞分裂素
（3） ①.2（m+n） ②. 单
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在⼀定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培
育成新植株的技术。植物体细胞杂交技术在打破⽣殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等⽅⾯展
现出独特的优势。原理：细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【⼩问1详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，⽤纤维素酶和果胶酶处理悬浮细胞，可以去除细胞壁，获得有活
⼒的原⽣质体。 植物原⽣质体融合过程常利⽤化学试剂聚⼄⼆醇（PEG）诱导。 形成的融合细胞经过细胞
壁再⽣，才能成为完整杂种细胞。
【⼩问2详解】
杂种细胞分裂和脱分化形成愈伤组织，经过再分化形成完整的杂种植株。 诱导愈伤组织期间⼀般不需要光
照，是因为光照会诱导细胞分化，不利于愈伤组织的形成。 植物体细胞杂交技术依据的⽣物学原理有细胞
膜的流动性（原⽣质体融合过程体现）和植物细胞的全能性（杂种细胞培育成杂种植株体现）。 所⽤培养
基常采⽤⾼压蒸汽灭菌法灭菌处理， 培养基中常添加的植物激素是⽣⻓素和细胞分裂素，⽤于调节细胞的
分裂和分化。
【⼩问3详解】
若疣粒野⽣稻细胞内有m条染⾊体，栽培稻细胞内有n条染⾊体，仅考虑原⽣质体两两融合，杂种细胞含
有m+n条染⾊体，在有丝分裂后期，着丝点分裂，染⾊体数⽬加倍，所以含2(m+n)条染⾊体。若杂种细胞
培育成的杂种植株为四倍体，其花粉经离体培育得到的植株属于单倍体植株，因为由配⼦（花粉）发育⽽
来的个体⽆论含有⼏个染⾊体组都是单倍体。
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学科⽹（北京）股份有限公司23. 下图为应⽤基因编辑去除CFTR 基因(控制CFTR 蛋⽩的合成)，获得患囊性纤维化的基因编辑⼩⿏4
的培育流程。请回答下列问题：
（1）对1号⼩⿏使⽤________进⾏超数排卵处理，培养收集处在________期的卵⺟细胞⽤于核移植。对卵
⺟细胞进⾏去核操作的原因是________。
（2）采集2号⼩⿏的组织细胞，⽤________处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO₂培养箱中培养，
其中CO₂的作⽤是________。在细胞培养过程中，需要定期更换培养液的⽬的是________。
（3）图中显微注射将供体细胞注⼊去核的卵⺟细胞后，要通过_________法使两细胞融合，形成重构胚。
重构胚⼀般需要培养⾄________阶段进⾏胚胎移植。
（4）胚胎移植作为胚胎⼯程最终技术环节，优势是________，为了获得更多的遗传背景⼀致的基因编辑⼩
⿏4，可以采⽤________技术。
【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②.MⅡ（减数分裂Ⅱ中） ③. 使核基因全部来源于2号⼩⿏基因
编辑后的供体细胞
（2） ①. 胶原蛋⽩酶或胰蛋⽩酶 ②. 维持培养液的pH ③. 防⽌细胞代谢物积累对细胞⾃身造
成伤害
（3） ①. 电融合法 ②. 桑葚胚或囊胚
（4） ①. 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能 ②. 胚胎分割
【解析】
【分析】1、根据图示分析，可得之本题中获得患囊性纤维化的基因编辑⼩⿏采⽤了动物细胞培养，动物体
细胞核移植技术、胚胎移植等技术。
2、动物细胞培养的条件
（1）营养条件。
（2）⽆菌、⽆毒的环境：培养液和培养⽤具灭菌处理、⽆菌环境下操作、定期更换培养液。
（3）适宜的温度、pH和渗透压。
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学科⽹（北京）股份有限公司（4）⽓体环境：95%空⽓和5%CO 。
2
【⼩问1详解】
超数排卵指的是应⽤外源促性腺激素，诱发卵巢排出⽐⾃然情况下更多的成熟卵⼦，采集的卵⺟细胞需要
在体外培养⾄MⅡ期才能使⽤。
供体细胞的细胞核拥有完整的遗传信息，对后代的性状表达起主要作⽤，对卵⺟细胞进⾏去核操作，使核
基因全部来源于2号⼩⿏基因编辑后的供体细胞。
【⼩问2详解】
常⽤胰蛋⽩酶或胶原蛋⽩酶处理动物组织块，使其分散成单个细胞。动物细胞培养所需⽓体主要有O ，和
2
CO ，O 是细胞代谢所必需的，CO 的作⽤是维持培养液的pH。
2 2 2
动物细胞培养过程中，需要为细胞创造⽆菌⽆毒的环境，定期更换培养液可防⽌细胞代谢物积累对细胞⾃
身造成伤害。
【⼩问3详解】
动物体细胞核移植技术中，通过电融合法使两细胞融合，形成重构胚。通过体外受精及其他技术获得的胚
胎需要发育到桑葚胚或囊胚时期才能进⾏胚胎移植。桑葚胚有利于筛选出发育潜能好的胚胎，⽽和桑葚胚
相⽐，囊胚培育的时间⽐较⻓，分裂的细胞数多，移植时更易着床成功，但是对外界培养条件要求⽐较⾼。
【⼩问4详解】
胚胎移植的优势：能充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能、保存品种资源和濒危物种。若要获得更多基因编
辑猪，可采⽤胚胎分割技术对移植前的胚胎进⾏分割。
24. ⾃⽣固氮菌是⼟壤中能独⽴固定空⽓中氮⽓的细菌，将⽟⽶种⼦⽤⾃⽣固氮菌拌种后播种，可显著提⾼
产量并降低化肥的使⽤量。科研⼈员进⾏了⼟壤中⾃⽣固氮菌的分离和固氮能⼒测定的研究，部分实验流
程如下图。回答下列问题：
（1）步骤③中需⽤⼿指轻压移液管上的橡⽪头，吹吸3次的作⽤是__________。
（2）下表为两种培养基的配⽅，步骤④应选其中的培养基__________，原因是__________。
培养基类型 培养基组分
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学科⽹（北京）股份有限公司培养基甲 ⽢露醇、KH PO 、MgSO ·7H O、NaCl、K SO 、CaCO 、蒸馏⽔
2 4 4 2 2 4 3
培养基⼄ ⽢露醇、KH PO 、MgSO ·7H O、NaCl、K SO 、CaCO 、蒸馏⽔、琼脂
2 4 4 2 2 4 3
（3）该实验⽤于纯化培养的⽅法是__________，若在④的各组平板上统计的菌落的数量为108、120、138
个，则每克⼟壤中含有的固氮菌为__________个。
（4）另⼀组实验中发现，当培养时间过⻓时，在固氮菌⼤菌落四周出现了少量杂菌⼩菌落，进⼀步研究表
明这些杂菌不能利⽤空⽓中的氮⽓，则其氮源来⾃于__________。
（5）将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩⼤培养48⼩时，经离⼼后收集下层细胞并转移⾄特定培养基中
进⾏固氮能⼒的测定，筛选出固氮能⼒最强的菌种CM12，为进⼀步鉴定其固氮能⼒，科研⼈员选⽤发芽⼀
致的⽟⽶种⼦进⾏3组盆栽实验，30天后测定⼟壤微⽣物有机氮含量，结果如下图。
注：CK：对照处理组；
N：尿素处理组（每盆⼟壤浇50mL有氮全营养液：成分为在1000mL⽆氮植物营养液中加⼊0.12g尿素）；
CM12：⾃⽣固氮菌CM12处理组（每盆⼟壤浇50mL接种⾃⽣固氮菌的⽆氮植物营养液）。
①实验结果表明：施⽤尿素处理和接种CM12处理均能增加⼟壤有机氮含量。与CK组相⽐，CM12处理组
⼟壤微⽣物有机氮含量增加了约__________%。
②研究表明，⼟壤中碳氮⽐低于40:1时，固氮菌的固氮作⽤迅速停⽌。因此优良菌肥最好与__________（填
“ 有机肥” “ 氮肥” “ 磷肥” 或“ 钾肥” ）配合施⽤。
【答案】（1）使菌液与⽔混合均匀
（2） ①. ⼄ ②. 培养基甲为液体培养基，不能⽤于涂布平板
（3） ①. 稀释涂布平板法 ②.1.22x107
（4）⾃⽣固氮菌产⽣的含氮化合物（或⾃⽣固氮菌向培养基上分泌的含氮化合物）
（5） ①.120 ②. 有机肥
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学科⽹（北京）股份有限公司【解析】
【分析】培养基是⼈们按照微⽣物对营养物质的不同需求，配制出供其⽣⻓繁殖的营养基质；分为固体培
养基和液体培养基，培养基中⼀般含有⽔、碳源、氮源和⽆机盐，其中碳源和氮源常采⽤蛋⽩胨和⽜⾁膏，
因为它们来源于动物原料，含有糖、维⽣素和有机氮等营养物质。在提供上述⼏种主要营养物质的基础上，
培养基还需要满⾜微⽣物⽣⻓对pH、特殊营养物质和氧⽓的要求。
【⼩问1详解】
⽤⼿指轻压移液管上的橡⽪头，吹吸3次的作⽤是使菌液与⽔混合均匀，以便计数更准确。
【⼩问2详解】
表格为两种培养基的配⽅，步骤④应选其中的⼄培养基，原因是该培养基甲为液体培养基，不能⽤于涂布
平板。
【⼩问3详解】
实验采⽤的是稀释涂布平板法。若在④的平板上统计的菌落的平均数量为122个，则每克⼟壤中含有的固
氮菌为122÷0.1×104=1.22×107个。
【⼩问4详解】
杂菌不能利⽤空⽓中的氮⽓，但可利⽤⾃⽣固氮菌产⽣的含氮化合物（或⾃⽣固氮菌向培养基上分泌的含
氮化合物）。
【⼩问5详解】
CM12处理组⼟壤微⽣物有机氮含量为22，CK组为10，增加了22-10=12，计算被分数为12/10×100%
=120%。⼟壤中碳氮⽐低于40:1时，固氮菌的固氮作⽤迅速停⽌，有机肥中含有碳，故施⽤有机肥。
25. 雌激素类物质污染会通过⻝物链影响⼈体健康和⽣态安全。科研⼈员欲将斑⻢⻥的vtg基因（图1）插
⼊Luc基因载体（图2），形成vtg-Luc融合基因重组载体并培育转基因斑⻢⻥。Luc表示萤⽕⾍荧光素酶基
因。（注：Luc基因缺乏启动⼦序列，vtg基因内部⽆图2中的任何限制酶识别序列。TetR为四环素抗性基因，
Ampr为氨苄⻘霉素抗性基因，Sau3AI、EcoRⅠ、HindⅢ、BsrGⅠ、BclI为限制酶，→表示转录⽅向）
（1）基因⼯程的核⼼步骤是________。为使vtg基因与Luc基因载体正向连接且降低“空载”概率，可选⽤
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学科⽹（北京）股份有限公司限制酶_________进⾏双酶切Luc基因载体。
（2）通过PCR获取vtg基因时，需设计合适的引物。依据图1、图2信息，推测引物1包含的碱基序列
为_________。
A.5’-GAATTCAACTAT-3’ B.5’-GAATTCTTGATA-3’
C.5’-GATCTTGATA-3’ D.5’-AAGCTTAACTAT-3’
（3）筛选导⼊vtg-Luc基因重组载体的⼤肠杆菌，可将⼤肠杆菌依次放在含有氨苄⻘霉素、四环素的培养
基中培养，筛选________（选填“能”或“不能”）在含有氨苄⻘霉素的培养基中⽣⻓但_______（选填“能”或“不
能”）在含有四环素的培养基中⽣⻓的⼤肠杆菌即为⽬的菌。
（4）⽔体中 雌激素能使斑⻢⻥细胞产⽣E蛋⽩，E蛋⽩可以激活vtg基因上游的启动⼦，E蛋⽩与启动
⼦结合后，启动转录过程还需要的酶是______。Luc基因的表达产物萤⽕⾍荧光素酶，可以催化荧光素氧化
产⽣荧光。斑⻢⻥的vtg基因在正常情况下不表达，当⽔体中有雌激素存在时，斑⻢⻥vtg基因的启动⼦被
激活，表达Vtg-Luc融合蛋⽩。在⽔样中添加荧光素后，Luc催化其产⽣荧光，荧光越______，说明⽔体
中______污染越严重。
【答案】（1） ①. 构建基因表达载体 ②.EcoRI、HindⅢ （2）A
（3） ①. 能 ②. 不能
（4） ①.RNA聚合酶 ②. 强 ③. 雌激素（类物质）
【解析】
【分析】基因⼯程技术的基本步骤：
1、⽬的基因的获取：⽅法有从基因⽂库中获取、利⽤PCR技术扩增和⼈⼯合成；
2、基因表达载体的构建：是基因⼯程的核⼼步骤，基因表达载体包括⽬的基因、启动⼦、终⽌⼦和标记基
因等；
3、将⽬的基因导⼊受体细胞：根据受体细胞不同，导⼊的⽅法也不⼀样；
4、⽬的基因的检测与鉴定：分⼦⽔平上的检测和个体⽔平上的鉴定。
【⼩问1详解】
基因⼯程的核⼼步骤是构建基因表达载体。要使vtg基因与Luc基因载体形成重组载体并降低“空载”概率，
应选⽤两种不同的限制酶进⾏双酶切，已知“Luc基因缺乏启动⼦序列，⽽vtg基因内部含有启动⼦序列”，
故应将vtg插⼊Luc的上游，观察图2，EcoRI和HindⅢ的酶切位点分别位于Luc基因载体的不同位置，
⽤这两种酶双酶切可以满⾜要求。
【⼩问2详解】
通过PCR获取vtg基因时，引物需要与模板链互补配对，从图1和图2分析，引物1要与vtg基因的特定
第22⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司区域结合，且要引⼊与载体酶切位点互补的序列，EcoRⅠ的识别序列是5'-GAATTC-3'，观察图中vtg基因
的⽅向和序列，引物1应包含5'-GAATTCAACTAT-3'，这样既能与vtg基因结合，⼜能在后续与⽤EcoRⅠ
酶切后的载体连接，A正确，BCD错误。
故选A。
【⼩问3详解】
重组载体中含有氨苄⻘霉素抗性基因，⽽四环素抗性基因因酶切被破坏，所以导⼊vtg-Luc基因重组载体的
⼤肠杆菌能在含有氨苄⻘霉素的培养基中⽣⻓，不能在含有四环素的培养基中⽣⻓，筛选能在氨苄⻘霉素
培养基中⽣⻓，不能在四环素培养基中⽣⻓的⼤肠杆菌即为⽬的菌。
【⼩问4详解】
E蛋⽩与启动⼦结合后，启动转录过程还需要的酶是RNA聚合酶，它能催化核糖核苷酸聚合形成RNA。当
⽔体中有雌激素存在时，斑⻢⻥vtg基因的启动⼦被激活，表达Vtg-Luc融合蛋⽩，Luc催化荧光素产⽣荧
光，荧光越强，说明表达的Vtg-Luc融合蛋⽩越多，即⽔体中雌激素（类物质）污染越严重。
第23⻚/共23⻚
学科⽹（北京）股份有限公司
