文档文本内容
树德中学高 2024 级高二下学期半期考试生物学试题 C．甲组细胞检测出绿色荧光，乙组细胞检测出红色荧光
D．甲组细胞检测出红色及绿色荧光，乙组细胞检测出红色荧光
命题人：肖洋 罗欣 审题人：易露 黄雪 毛莉
5．“庄庄”是2025年在河北出生的世界首批胚胎干细胞基因编辑克隆牛的一员。这是世界上首次将胚
本试卷满分100分，考试用时75分钟
胎干细胞基因编辑技术系统应用于奶牛育种，实现了特定遗传性状的定向、高效改良，大幅缩短
一、单项选择题（每题3分，共45分）
了育种周期，是我国动物生物育种领域的重大突破。以下叙述正确的是（ ）
1．环氧联苯是一类难降解的有机污染物，菌种A、B、C中只有1种菌可降解环氧联苯，另外2种菌
可利用降解的中间产物生长，且这2种菌对环氧联苯降解菌的生长有不同的影响。为研究菌种A、
B、C间的代谢关系，将等量菌种A、B、C接种在以环氧联苯为唯一碳源的培养基的相应位置，
适宜条件下培养一段时间，结果如图（黑色区域表示细菌数量多少）。下列说法错误的是（ ）
A．菌A、B、C均能在该培养基中生长，但该培养基依旧具有选择性
B．菌A可降解环氧联苯，菌B和菌C均可利用菌A降解生成的中间产物
生长
C．混合培养菌A和菌C比单一培养菌A降解环氧联苯的速率慢
D．用混合菌A和B处理环氧联苯污染时既能有效降解污染物又能避免菌A
过度增殖
A．④操作为胚胎移植技术，需要用促性腺激素预先对受体奶牛进行同期发情处理
2．下列有关发酵及发酵工程的叙述，正确的是（ ）
B．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
A．酵母菌酿酒过程中产生的气泡和醋酸菌以酒精为底物的醋酸发酵中产生的气泡一样多
C．为提高早期胚胎利用率，可对获取的囊胚进行胚胎分割，要特别注意均等分割②处细胞
B．啤酒制作过程中，主发酵过程主要是为了促进酵母菌的大量繁殖，而后发酵主要是为了使酵母
D．向导DNA与目标DNA通过碱基互补配对方式实现特定识别，Cas9蛋白借此进行精确定位
菌进行无氧呼吸产生酒精
6．酵母人工染色体pYAC2是以酵母菌为受体细胞构建基因文库时的常用载体。下图为pYAC2的结
C．发酵工程中可用诱变育种或基因工程育种等方法选育出性状优良的菌种并进行扩大培养
构示意图，导入受体细胞前用限制酶BamHⅠ切割可使其成为线性的染色体。pYAC2适配的受体
D．传统发酵以混合菌种的固体发酵及液体发酵为主
菌菌落呈红色，sup4基因表达能够抑制其性状表现，使菌落呈白色。相关叙述错误的是（ ）
3．紫花苜蓿是利用广泛的牧草，但青饲易造成家畜臌胀病。百脉根富含缩合单宁（一种次生代谢产
物），能防止反刍动物臌胀病的发生。为了改良苜蓿饲用品质，研究人员采用植物体细胞杂交技
术培育抗臌胀病型苜蓿，过程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A．与传统杂交育种相比，该育种方式能产生新的基因和新的性状
B．过程①利用细胞膜的流动性原理，通过灭活病毒诱导原生质体融合
C．缩合单宁不是百脉根生长所必需的，一般在特定的组织或器官中产生
A．导入pYAC2的受体菌能够在不含色氨酸的培养基中生存
D．该技术获得的杂种植株能产生可育后代，说明两者之间不存在生殖隔离
B．用BamHⅠ切割pYAC2后，TEL端粒序列位于染色体的两端
4．NG2是癌细胞膜上的糖蛋白，研究人员为筛选能产生NG2单克隆抗体的杂交瘤细胞进行了分组实
C．着丝粒序列CEN4的存在可防止pYAC2在细胞分裂中丢失
验，甲组取绿色荧光标记的高表达NG2的癌细胞，乙组取未标记绿色荧光的不表达NG2的同品系
D．将带有目的基因的重组pYAC2导入受体菌后应挑选白色菌落
癌细胞，将杂交瘤细胞培养液作为待测液，检测步骤如下图所示（红色荧光物质可与所有杂交瘤
7．科研人员从耐旱植物拟南芥中分离出耐旱基因DREB1A，并利用基因工程技术将其导入水稻，培
细胞产生的抗体结合）。下列现象能说明待测液中含NG2抗体但不含其他膜蛋白抗体的是（ ）
育抗旱水稻。大致流程为：利用PCR技术扩增DREB1A基因后，将其与含有花椰菜花叶病毒35S
启动子、终止子和潮霉素抗性基因的Ti质粒连接，构建成基因表达载体；随后通过农杆菌转化法
导入水稻细胞，经过筛选、培养和鉴定获得转基因水稻植株。下列叙述错误的是（ ）
A．PCR扩增DREB1A基因时，需根据DREB1A基因两端的碱基序列设计两种引物
B．构建基因表达载体时，35S启动子应位于DREB1A基因的上游，终止子位于其下游
C．农杆菌转化法中，水稻细胞作为受体细胞时，需先用酶去除其细胞壁制备成原生质体
A．甲组细胞检测出绿色荧光，乙组细胞无荧光
D．用潮霉素对导入质粒的农杆菌进行筛选，能存活的不一定成功导入了DREB1A基因
B．甲组细胞检测出红色及绿色荧光，乙组细胞无荧光
2026-5 高二生半 第1页共4页8．研究人员将PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S（箭头表示转录方向）插入图中载体P区，构建
表达载体，转入大肠杆菌，获得能够检测水中毒物的大肠杆菌。下列叙述不正确的是（ ）
A．检测技术中抗体1和抗体2的作用不同
B． 中进行PCR时还需要加入TaqDNA聚合酶、原料、模板DNA、引物等
C．在对PCR产物进行电泳鉴定时，通常需要在琼脂糖凝胶中加入核酸染料
③
D．免疫PCR可以将少量抗原“信号”放大为大量DNA“信号”，以提高检测的灵敏度
12．螺原体是一种兼性厌氧支原体类微生物，营寄生生活，其典型菌落呈“油煎蛋”状。某些螺原体能
感染动植物并引发相应疾病。下列叙述正确的是（ ）
A．PCR扩增启动子S时，图中引物I、Ⅱ分别加入BamHI、XhoI识别序列
A．螺原体属于原核生物，因没有染色体，能通过无丝分裂快速繁殖
B．用Ca2+处理大肠杆菌以便于转入构建好的表达载体
B．螺原体DNA分子中不含游离的磷酸基团，其嘌呤和嘧啶数量相等
C．使用添加氨苄青霉素的培养基筛选转入载体的菌株
C．螺原体合成蛋白质时，需要宿主细胞提供模板、核糖体以及某些成分
D．可通过转基因大肠杆菌的荧光情况判断水中是否含毒物
D．螺原体细胞壁的主要成分是肽聚糖，青霉素可通过影响其合成而杀死螺原体
9．水蛭素是从水蛭的唾液腺中提取分离出来的多肽，具有显著的抗凝和抗血小板聚集等作用，可用
13．常见农作物的种子分为淀粉种子、油料种子和蛋白质种子等。下列说法不正确的是（ ）
于预防和治疗血栓。研究发现，通过将水蛭素的第47位天冬酰胺替换为赖氨酸，可以显著提高其
A．与淀粉种子相比，在播种油料种子时需浅播
抗凝血活性。下列关于该改造过程的叙述，正确的是（ ）
B．种子萌发形成幼苗后吸收的氮元素可用于合成蛋白质、ATP和核酸
A．改造水蛭素时，可直接对水蛭素的氨基酸进行替换，无需改造其编码基因
C．油料种子萌发初期，干重会先增加，导致种子干重增加的主要元素是O
B．改造的核心步骤是根据水蛭素的预期功能，设计结构，再推测氨基酸序列
D．向萌发期的三类种子制备的研磨液中加入斐林试剂后水浴加热，只有淀粉种子会出现砖红色
C．改造后的水蛭素与天然水蛭素相比，基因中嘌呤和嘧啶碱基比例发生改变
沉淀
D．改造后的水蛭素氨基酸序列改变，但其蛋白质的空间结构不会发生改变
14．植物细胞及其部分结构如图所示。下列叙述正确的是
10．目前，针对K-ras基因的反义DNA治疗已在小细胞肺癌模型中取得显著效果。转染反义K-ras质
（ ）
粒后，K-ras基因表达被特异性抑制，致使P21蛋白合成减少，裸鼠（免疫缺陷型小鼠）体内的
A．植物细胞中主要由DNA和蛋白质组成的①只存在
致瘤效应明显降低。如图表示构建K-ras反义基因表达载体的流程。下列相关叙述正确的是（ ）
于细胞核中
B．核膜及各种细胞器膜都与②相似，为单层膜
C．③的主要成分是肽聚糖，也含有多种蛋白质
D．植物细胞必须具备①、②和③才能存活
15．下列关于细胞结构和功能的叙述，正确的有几项（ ）
①细胞核内储存着细胞内全部DNA，故有控制细胞代谢和遗传的功能
②细胞膜的流动性仅依靠磷脂分子实现
③蛋白质和DNA等大分子物质通过核孔进出细胞核需要消耗能量
④细胞膜上附着有ATP水解酶有利于细胞主动吸收某些营养物质
注：K-ras反义基因的模板链与K-ras基因的编码链相同。 ⑤真核细胞中，核仁与核糖体的形成有关
A．构建该基因表达载体所用的限制酶是HindⅢ和BamHⅠ ⑥染色体与染色质是同一种物质在细胞不同时期的两种形态
B．K-ras基因是一种抑癌基因，其表达的产物是P21蛋白 A．一项 B．两项
C．转染反义K-ras质粒时，受体细胞是具有全能性的受精卵 C．三项 D．四项
D．体外扩增K-ras基因时，反应体系中无需添加二价阳离子
11．如图为免疫PCR技术的主要原理。利用该技术检测血样中微量淀粉样蛋白（Aβ）的核心流程包
括： 用固定化的抗体1捕获Aβ并洗涤； 加入DNA标记的抗体2与Aβ结合并洗涤； 进行
PCR扩增并对产物进行鉴定。下列叙述错误的是（ ）
① ② ③
2026-5 高二生半 第2页共4页二、非选择题（共55分） 18.(10分)猴痘是由猴痘病毒(MPXV)引发的传染性疾病。E8L蛋白是MPXV 的核心结构蛋白，获
16.(10分)近年来，水环境中发现的不同程度的抗生素残留，不仅威胁水生生物的生存，还会损害 得针对E8L蛋白的抗体对于猴痘的诊断和治疗十分重要。为快速获得抗E8L蛋白的单克隆抗体，研
微生物的生态平衡。氧氟沙星（OFL）（C H FN O ）是一种人工合成的广谱抗菌的氟喹诺酮类药物， 究人员利用下图创新技术路线进行制备。
18 2O 3 4
某实验小组成功地从废水环境样品中分离得到能降解OFL的菌株。筛选分离的操作过程如图所示。回
答下列问题：
回答下列问题：
(1)被脂质体包裹的E8LmRNA疫苗注入小鼠体内后，与小鼠细胞融合，该融合细胞表达出的是
________________(填“E8L蛋白”或“抗E8L蛋白的抗体”)。
(1)利用细菌处理去除废水中的抗生素，这种方法的不足之处是____________________________，
(2)经②检测小鼠血清抗体水平后，从小鼠脾脏获取B细胞，用APC/FITC 荧光分选技术对目标
因此需要筛选抗生素优势降解菌株,在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是___________。
细胞进行筛选。该技术用偶联 APC荧光的抗体(IgG)去识别分泌抗体的浆细胞，并呈现出APC⁺ 信号；
(2)筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入________作为唯一碳源或氮源。
用生物素先标记E8L蛋白，使其与活化B细胞表面的受体(BCR)特异性结合，同时用生物素与 FITC 标
(3)过程Ⅲ所利用的接种方法是____________。工业生产中为大量获得该菌种，常采用___________
记的链霉亲和素结合，使其呈现FITC⁺ 信号。下图是用流式细胞仪的检测结果，则________(填图中
（填“固体”“半固体”或“液体”）培养基进行培养。若过程I、Ⅱ中的总稀释次数为8次，在过程Ⅱ中，
的字母)区域的细胞为目标细胞，依据是______________________________________________________。
可以每隔24h统计一次菌落的数目，选取某一时刻的记录作为结果，三个培养基中长出的菌落数量分
别是145、163、154，故推测A中细菌的数量为________个·mL-1.
(4)该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对该菌株降解OFL能力的影响，请帮助其设计实验并
写出实验思路：_________________________________________________________________________。
17.(10分)紫杉醇是目前最好的抗肿瘤药物之一，在临床上已经广泛用于乳腺癌等的治疗，但其药
源植物红豆杉十分稀缺。植物细胞工程是生产紫杉醇的重要技术手段，是解决紫杉醇药源紧缺问题的
有效途径之一。图1表示两条技术路线，其中①②③表示过程。请回答下列问题：
技术路线1：红豆杉外植体①愈伤组织②根、芽等完整小植株
技术路线2：红豆杉外植体愈伤组织③单个细胞细胞悬浮振荡培养提取、检测紫杉醇
图1
(3)步骤⑥用抗体检测牛痘病毒、水痘病毒、甲流病毒等病毒。结果除牛痘病毒的D8蛋白，抗体
(1)过程②是___________,启动①②的关键激素是_________________。
无法与其他病毒蛋白结合，请推测出现该现象的原因是_______________________________________。
(2)欲利用植物细胞培养获得大量的紫杉醇，应将红豆杉的外植体培育到愈伤组织阶段，原因是
(4)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（E8L蛋白）逐步截短，分别与纯化的单克
__________________________________________________________________________。利用植物细胞
隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。
培养生产紫杉醇的过程______（填“体现”或“未体现”）细胞的全能性。
(3)为了探明紫杉醇抗癌原理，研究人员用小鼠乳腺癌细胞进行了四组实验，并得出图2所示结果。
多极纺锤体不利于细胞分裂，请根据图中信息推测紫杉醇抗癌机制_____________________________。
结果证明该单克隆抗体识别抗原（E8L蛋白）的区域大概为______（填“40～50”、“40～55”或“40～
60”）位氨基酸。
2026-5 高二生半 第3页共4页19．（12分）为培育耐盐碱大豆新品种，科研人员把耐盐碱基因OsJRL40和荧光素酶基因构建 20. （13分）肾脏移植是针对终末期肾病的首选治疗手段，但供体肾源严重短缺。我国科学家通
成融合基因，荧光素酶可催化荧光素产生荧光以检测融合基因表达产生融合蛋白的情况，部分操作流 过将患者自体来源细胞诱导为多能干细胞（hPSCs），再转入促增殖基因和抗凋亡基因，然后将转基
程及可能用到的限制酶如图所示，其中DEX启动子在DEX诱导下才可发挥作用，回答下列问题。 因的hPSCs导入肾脏缺陷型猪早期胚胎（敲除了与肾脏发育密切相关的两个基因导致肾脏部分缺失）
中，借助猪胚胎构建出了人-猪嵌合肾脏，为解决供体器官短缺问题打开了新思路。回答下列问题：
(1)选用患者本人的细胞诱导hPSCs的原因是________________________________。
(1)图中构建基因表达载体时，切割载体用到的限制酶有_________________。与单酶切相比，双 (2)图1中目标片段是由右图的限制酶处理后得到的，为了保证酶切后的目标片段与质粒正确连接，
酶切的优点是______________________（答出1点）。
可以选图1中的________________限制酶对质粒进行切割。若要扩增酶切前的目标片段，请设计一对
(2)在培养大豆细胞的基本培养液中添加______________，若检测结果为_______________说明转
引物________________________________（每个引物写出6个碱基即可，标明方向）。
(3)根据图2可知构建转基因hPSCs的流程：将重组表达载体和病毒包装载体导入受体细胞后组装
化成功。成功后需要去除荧光素酶基因，已知Cre酶可以将DNA上两个相同loxP序列位点之间的片
出重组病毒（包括病毒蛋白质外壳，目的基因的RNA和_____________等）；再用重组病毒侵染hPSCs，
段切除，因此在设计引物3和引物4时需要在限制酶识别序列的_____________（填“5'端”或“3'端”）
病毒进入hPSCs后，通过______________________从而保证目的基因能稳定遗传。为了筛选出转基因
添加loxP序列。
的hPSCs，可以向转染后的细胞培养基中添加_________________________________。
(3)为检测荧光素酶基因是否被成功敲除，可用PCR技术进行鉴定。
实验组：首先提取在有DEX环境下培养的转基因大豆细胞质中的总RNA，进行逆转录获得cDNA，
然后加入上图中的一对引物_______________进行PCR扩增后用BglⅡ完全切割，再进行琼脂糖凝胶
电泳，观察有无OsJRL40基因和荧光素酶基因的条带。
对照组：用未经DEX环境下培养的转基因大豆细胞，其余同实验组。
若实验组敲除成功，则实验组和对照组的电泳结果分别为______________________________。
(4)将转基因的hPSCs注入肾脏缺陷型猪早期胚胎获得嵌合体胚胎，嵌合体胚胎发育第25天终止
妊娠，获取含有人源细胞的嵌合肾脏。经检测，用四环素诱导后，转基因的hPSCs中促增殖基因、抗
凋亡基因均呈现高表达量，嵌合肾脏内人源细胞占比高达70%。结合图文信息推测，人源细胞占比高
的原因是____________________________________________________________。
2026-5 高二生半 第4页共4页树德中学高 2024 级高二下学期半期考试生物学试题参考答案
1-5DCCBD 6-10DCABA 11-15BBDAC
16．（10分）
(1)抗生素会抑制细菌的生长繁殖（2分） 防止杂菌污染（1分）
(2)OFL（氧氟沙星）（1分）
(3)稀释涂布平板法（1分） 液体（1分） 1.54×1011（2分）
(4)配制等量的含一系列浓度梯度的OFL的液体培养基，将培养基灭菌后，在培养基中接种等量的纯
化菌液（菌株A），每隔一段时间取样，测定培养基中OFL的残余含量，计算出OFL去除率（2分）
17.（10分）
(1)再分化（2分） 生长素和细胞分裂素（2分）
(2)愈伤组织的细胞分裂能力强、代谢旺盛，能够大量合成紫杉醇（2分） 未体现（2分）
(3)紫杉醇能够促进癌细胞形成多极纺锤体，使细胞不能正常分裂，进而导致癌细胞死亡（2分）
18.（10分）
(1)E8L蛋白（2分）
(2)B（2分） B 区域的细胞同时呈现 APC+信号和 FITC+信号（2分）
(3)牛痘病毒的 D8 蛋白与猴痘病毒的 E8L 蛋白结构相似，存在相同或相似的抗原结构，而水痘病毒、
甲流病毒的蛋白与 E8L蛋白结构差异大，无相应抗原结构（2分）
(4)40～55（2分）
19.（12分）
(1)SacⅠ和XhoⅠ（2分） 避免目的基因、载体自身环化或反向连接（保证目的基因与载体正确
连接）（2分）
(2)荧光素（1分） 有荧光出现（1分） 3′端（2分）
(3)1和4（2分） 实验组没有条带，对照组两种基因的条带都有（2分）
20.(13分)
(1)避免器官移植后发生免疫排斥反应（2分）
(2)XmaⅠ、XhoⅠ（2分） 5′−CCCGGG−3′、5′−ACTAGT−3′（2分）
(3)逆转录酶（2分） 逆转录合成DNA后整合到hPSCs的染色体DNA上（2分） 嘌呤霉素（1分）
(4)猪胚胎敲除了肾脏发育关键基因，自身肾脏细胞发育受阻；转基因hPSCs中促增殖基因、抗凋亡基
因诱导后高表达，促进人源细胞增殖、抑制其凋亡（2分，每点1分）
2026-5 高二生半 第5页共4页
