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情境试题分析 高考热点聚焦 第12期
第12期
走进高考
2026黑吉辽蒙卷25题
平沙绿僵菌是一种昆虫病原真菌，通过分生孢子侵染蚊子，对蚊子致死率高，但引诱能力弱。利用松树长叶烯合酶基因（Tps）改造平沙绿僵菌，增强其引诱能力，据此研发“诱杀一体”的灭蚊剂。回答下列问题。
注：质粒中限制酶切割位点间碱基对长度可忽略不计；kb：千碱基对。(1)为提高Tps基因在平沙绿僵菌中的表达效率，重新设计了长叶烯合酶编码序列，该序列与天然基因序列存在较大差异，但编码的氨基酸序列不变，获取该目的基因的方法是________。实验如上图，用限制酶EcoRV切割pPK2质粒，然后与Tps基因连接，用________（填“E．coli”或“T4”）DNA连接酶可获得更高的连接效率。经卡那霉素筛选得到的农杆菌中，除含有目的基因的重组质粒外，还可能存在________。为鉴定重组质粒是否正确连接，利用限制酶切割并电泳检测，下列限制酶组合和片段大小，属于正确连接的是________和________。
农杆菌转化后，重组质粒上的T-DNA会转移并整合到平沙绿僵菌_____上。
为筛选工程化平沙绿僵菌，用PCR技术进行鉴定。Tps基因的转录模板链部分序列为：5′-ATGTCGTTCC…AATTGGCTCC-3′，下列引物对可用于扩增该片段的是________。
(2)研究人员比较了等量平沙绿僵菌和工程菌培养物对蚊子的诱杀效果，如下表。
注：感染率：感染孢子的蚊子比例；LT50（半数致死时间）；导致50%蚊子死亡所需的平均时间。
已知孢子附着量决定蚊子死亡速度，结合表中数据解释工程菌培养物使蚊子的LT50显著缩短且第7天死亡率更高的原因是________。
(3)该工程菌制剂在推广前，需经过严格的________评价，符合标准后方可推广。
参考答案
(1) 人工合成法（化学合成法）；T4；
未插入目的基因的pPK2空质粒； A；D；染色体DNA B
(2)工程菌的引诱能力更强，蚊子访问次数更多、停留时间更长，附着的孢子量更多，孢子附着量决定蚊子死亡速度，因此致死速度更快，半数致死时间LT50缩短，第7天死亡率更高
(3)安全性
试题总体分析
1、本题为新高考选择性必修 3 综合大题，以基因工程改造平沙绿僵菌构建诱杀一体灭蚊工程菌为科研情境。试题梯度分明，基础考点、逻辑推理、长句表达分层设置；立足必备知识，重点考查信息获取、逻辑推理能力，落实生命观念、科学思维与社会责任核心素养，是典型的工程应用类高考题型。
2、难度层次梯度清晰。
· 基础层：DNA 连接酶类型、农杆菌 T-DNA 特点、转基因生物安全评价；
· 推理层：酶切电泳片段判断、PCR 引物选择；
· 高阶层：表格实验结果的机理阐释，需要结合题干给定信息构建完整因果链，对语言表达要求高。
3、素养考查：重点落实生命观念、科学思维、社会责任。生命观念体现在基因表达、基因与蛋白质的关系；科学思维体现在酶切推断、数据分析、逻辑论证；社会责任体现在生物防治、转基因微生物环境释放的安全评估，联系公共卫生、绿色防控的现实问题。
试题背景与情境价值
【背景】传统化学灭蚊剂易产生抗药性、污染环境。利用昆虫病原真菌开展生物防治是绿色防控方向。科研通过导入长叶烯合酶基因改造平沙绿僵菌，赋予其引诱蚊子的能力，实现诱杀一体化，属于合成生物学与病媒生物防控前沿研究。
【情境价值】将零散基因工程知识点串联成完整科研链条，打通课本知识与真实科研；紧扣公共卫生与生态保护，体现生物技术解决现实问题的价值；依托题干限定信息，训练学生就地取材、证据推理的能力。
试题具体分析
1、基因工程分子操作。考查目的基因获取方法、DNA 连接酶、连接产物类型、酶切鉴定、农杆菌转化法、PCR引物。侧重细节辨析与图谱推理，区分易混概念，不是简单记忆。
2、实验数据分析。要求对比野生菌与工程菌实验指标，结合题干关键信息构建因果链，解释工程菌诱杀效果提升机制，难点是生物学长句逻辑表达中最难的原因表述。
3、转基因生物安全。考查转基因微生物释放前需进行生物安全评价，体现社会责任。
对高中生物教学的深刻启示
1、摒弃碎片化背诵，把基因工程作为完整科研流程教学，多用质粒图、电泳图、数据表格训练读图能力。
2、强化证据推理训练，引导学生优先利用题干信息作答，加强因果逻辑类长句表达训练。
3、重视教材细节，辨析易混概念。
4、教学联系生产、公共卫生、生态热点，落实核心素养。
5、习题分层设计，兼顾基础巩固、图表解读、机理阐述不同能力训练。
文字：臧 鑫
制作：侯 冰
校对：佟丽薪
项目总策划：宋 杨
