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一、选择题
1．(2023·江苏无锡高三模拟)培养微生物需要提供适宜的培养基。下列关于培养微生物的培
养基的叙述，错误的是( )
A．培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
B．培养基的成分需根据微生物的代谢特点而定
C．培养基需满足各种微生物生长繁殖的需求
D．培养基通常需包含水、无机盐、碳源、氮源等营养物质
2．下列有关传统发酵技术和微生物培养技术中的操作，错误的是( )
A．制作果酒时，挑选新鲜葡萄，去除枝梗后用清水反复冲洗再榨汁
B．平板划线时，每次划线前后都需将接种环放在酒精灯火焰上灼烧
C．制作泡菜时，加入蔬菜后注入煮沸冷却的盐水，使盐水没过全部菜料
D．为判断选择培养基是否起到了选择作用，设置接种普通培养基作对照
3．(2023·江苏泰州高三期末)稀释涂布平板是常用的微生物培养方法，下列相关叙述正确的
是( )
A．灭菌锅中取出的培养基应趁烫时倒平板，如此可对培养皿灭菌
B．稀释涂布平板法不可用于微生物的分离，可用于微生物的计数
C．用此法估测的数值往往偏小，应以菌落数最多的平板计数为准
D．稀释涂布平板法分离到的单菌落需进一步纯化，可用平板划线法
4．下列有关微生物培养的叙述，错误的是( )
A．涂布接种时，需将涂布器蘸酒精后用酒精灯外焰灼烧，冷却后再使用
B．纯化培养酵母菌时，培养皿应倒置放入28 ℃左右的培养箱内中培养24～48 h
C．计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行计数
D．观察菌落时，应将培养皿皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征
5．(2023·湖北襄阳高三模拟)为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行
了相关药敏实验，图1为部分实验器材。将含有相同浓度的抗生素Ⅰ～Ⅳ四个大小相同的纸
片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如图2。下列相关叙述正确的是( )
A．为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中器材①②③
B．图2中 Ⅱ 形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感C．图2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下产生了突变株
D．不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果
6．下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是( )
A．①步骤使用的培养基是已经灭菌的培养基
B．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
C．③到④的过程中，接种环共灼烧了5次
D．④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连
7．某同学将1 mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL
稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是( )
A．可得出土壤样液中活菌数大约为5.7×107个/L
B．此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低
C．一般选择菌落数在30～300的平板进行计数
D．显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数
8．下图为分离以尿素为氮源的微生物的实验结果，下列叙述正确的是( )
A．图中采用平板划线法接种
B．图中①和②表示尿素培养基长出的菌落
C．图中③④培养基中菌落生长代谢时，会释放CO
2
D．实验结果表明，自然界中能合成脲酶的微生物比例较高
9．聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理
化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中
寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列说法正确的是( )
A．步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B．扩大培养时，需要将接种后的培养基放入恒温箱中倒置培养，以防杂菌污染
C．步骤④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株
D．挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量10．产脂肪酶细菌可用于含油废水的处理。科研人员采用射线照射从土壤中分离的菌株，反
复筛选后获得产脂肪酶能力较高的菌株，具体流程如图。下列相关叙述正确的是( )
A．步骤①取土壤样品灭菌后溶于无菌水中制成菌悬液
B．步骤②的固体平板是以脂肪作为唯一碳源的培养基
C．步骤②射线照射可引起细菌基因突变或染色体变异
D．步骤③透明圈越大的菌落，其脂肪酶活性一定越高
11．(2023·江苏海门中学高三期末)野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养
缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺
陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，a、b、c表示操作步骤，d、e为菌落。下
列叙述不正确的是( )
A．图中①②④为基本培养基，③为完全培养基
B．a操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量
C．b的正确操作是用涂布器把菌液均匀地涂布在②表面
D．经c过程原位影印及培养后，可从④中挑取d菌落进行纯化培养
12．某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程
如图所示。下列相关叙述不正确的是( )
A．在酒精灯火焰附近称取土壤并将其倒入锥形瓶中
B．等比稀释时可用移液管或微量移液器进行操作
C．振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度
D．由图示菌落计数结果可知，10克土样中的菌株数约为1.6×107个二、非选择题
13．(2022·全国乙，37)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，
S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体
生长和S产量的影响，结果见表。
碳源 细胞干重(g/L) S产量(g/L)
葡萄糖 3.12 0.15
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
回答下列问题：
(1)通常在实验室培养微生物时，需要对所用的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有
________________________________________________________________________( 答 出 2
点即可)。
(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是______________；用菌株C生产S的最适碳
源是______________。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______________________(答出
2点即可)等营养物质。
(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是________________________。
(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产 S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。
请简要写出实验思路：___________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
。
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是_________________________________。
14．菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，
以便对送检样品进行卫生学评估提供证据。下图是某样品培养简化流程图，请分析回答下列
问题：
(1)该营养琼脂培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、
调节pH、____________________法灭菌等。然后将培养基放入47 ℃水浴锅保温，选择此
温 度 的 理 由 是
_____________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
。
(2)实验过程中须将样品剪碎并使用均质器 10 000 r·min－1 处理 1 min，其目的是____________。从水浴锅取出营养琼脂培养基倒平板适量，稍冷却后移液 0.2 mL样品于培
养皿进行涂布，涂布时可______________，使涂布更均匀。
(3)本实验用菌落计数的原理是基于__________________________________，运用这种方法
统计的结果往往较实际值偏________。具体培养结果如下表。选取菌落数30～300的培养皿
作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释浓度的平均菌落数符合此范围，以该培养皿菌落
数×稀释倍数报告。当有两个浓度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值决定，
若比值不大于2，则取平均数，且菌落数大于100取两位有效数字，两位之后的数值四舍五
入；若比值大于2，则报告稀释度较低(稀释次数越多，稀释度越高)的培养皿菌落数。请填
写例次3中“？”处的菌落总数为________。
不同稀释度平均菌落数
例次 两稀释度菌落数之比 菌落总数/ [CFU/mL(g)]
10－1 10－2 10－3
1 1 365 164 20 — 16 400
2 2 760 295 46 1.6 38 000
3 2 890 271 60 2.2 ？
(4)利用鲜奶进行工业生产酸奶时，不能使用________污染的鲜奶为原料，否则会使乳酸菌
生长受到限制；利用________法可以除去鲜奶中的白细胞、杂菌和其他肉眼可见的异物，取
其上清液用于发酵制酸奶。
(5)密封良好的泡菜坛内有时会长一层白膜，这些白膜是____________(填“乳酸菌”或“酵
母菌”)繁殖产生的。在泡菜腌制过程中坛、蔬菜等均未进行严格灭菌，而在发酵过程中一
般不会出现其他杂菌大量繁殖，其原因是____________(填序号)。
①发酵的原料中缺乏杂菌生长需要的各种营养物质
②发酵过程的温度不适合杂菌的生长
③乳酸菌产生较多乳酸，许多好氧菌被杀死
④在自然界中乳酸菌占优势
