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专练 102 生物技术实践综合练
1．已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组
用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。
Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5 g/L）。
Ⅱ号培养基：氯化钠（5 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量），X（15
g/L）。
Ⅲ号培养基：氯化钠（5 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量），X（45
g/L）。
回答下列问题。
（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是 。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生
物提供碳源的有机物是 。
（2）若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细
菌 比 例 会 ， 其 原 因 是
__________________________________________________。
（3）Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并
对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是_______________________________
________________________________________________________________________。
（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，
则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供 和 。
2．物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现
为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。
（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是 。
（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成
菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择 菌落进一步纯化，选择的
依据是 。
（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定
甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即
______
________________________________________________________________________。
（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶
（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相
关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相
同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加 ，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若 C 处没有出现透明圈，说明
；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明 。3．请回答下列与实验室提取芳香油有关问题：
（1）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、 和 。
（2）芳香油溶解性的特点是不溶于 ，易溶于 ，因此可用
作为提取剂来提取芳香油。
（3）橘子果实含有芳香油，通常可用 作为材料提取芳香油，而且提取时往
往选用新鲜的材料，理由是___________________
________________________________________________________________________。
（4）对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（5）得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的 层，
原 因 是 ， 加 入 氯 化 钠 的 作 用 是
________________________________________________________________________。
（6）从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，此剂的作用是___________
________________________________________________________________________。
4．某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有
某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解 S的细菌菌
株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、
水、S和Y。
回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用 的方法进行灭菌。乙培养基中的
Y物质是 。甲、乙培养基均属于 培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布
100 μL 稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M
中的菌液稀释 倍。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降
解量反而下降，其原因可能是 （答出1点即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解 S 的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：
_________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提
供4类营养物质，即________________________________
________________________________________________________________________。
5．柠檬油是植物芳香油中的一种，它是一种广谱性的杀虫剂，可杀死蚊子、苍蝇、蟑
螂和臭虫等传染疾病的害虫，以及危害粮食、蔬菜的常见害虫，包括幼虫、蛹等，被称为
一种绿色杀虫剂。回答下列问题：
（1）柠檬油的挥发性 ，易溶于 ，比重较 。
（2）提取柠檬油常见的原料是柠檬花与柠檬果皮，嫩的花朵在蒸馏过程中，精油易被
水蒸气分子破坏，所以可采用 法。柠檬果皮精油的提取适宜采用
法，此种方法是通过 将柠檬油从混合物中分离出来，必经步骤为（如图）：据实验流程图回答下列问题：
①A是 ，目的是_________________________________
________________________________________________________________________。
②B过程一般加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠，其目的是 。
③C过程为 ，目的是__________________________________________。
④实验过程中浸泡柠檬果皮后，需用清水洗涤，其目的是_______________。
（3）采用柠檬油作为杀虫剂，可以解决其他杀虫剂给人类带来的隐患，其突出的优点
是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（4）从生产绿色食品的要求出发，写出防治害虫的三种方法：____________________。
6．[2022·湖南卷][选修1：生物技术实践]黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三
大发酵酒。发酵酒的酿造过程中除了产生乙醇外，也产生不利于人体健康的氨基甲酸乙酯
（EC）。EC主要由尿素与乙醇反应形成，各国对酒中的EC含量有严格的限量标准。回答
下列问题：
（1）某黄酒酿制工艺流程如图所示，图中加入的菌种 a是 ，工艺b是
（填“消毒”或“灭菌”），采用工艺b的目的是_________________________
________________________________________________________________________。
（2）以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴
定分解尿素的细菌。尿素分解菌产生的脲酶可用于降解黄酒中的尿素，脲酶固定化后稳定
性和利用效率提高，固定化方法有 （答出两种即可）。
（3）研究人员利用脲酶基因构建基因工程菌L，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结
果如图所示。推测 是决定工程菌 L 高脲酶活力的关键因素，理由是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（4）某公司开发了一种新的黄酒产品，发现EC含量超标。简要写出利用微生物降低
该黄酒中EC含量的思路______________________________________________。
