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一、植物组织培养的原理
二、植物组织培养的基本过程
三、植物组织培养的条件
四、影响因素
植物组织培养技术(一)
一、植物组织培养的原理
一、植物组织培养的原理
1、植物组织培养:
科学研究表明,当植物脱离了原来所在植物体的器官或组织
而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和其它条件的作用
下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株,这就是植物组织
培养。
一、植物组织培养的原理
2、原理:
细胞的全能性
①定义:已经分化的细胞,依然具有发育成完整个体的潜能。
②基础:细胞中必须含有此种生物生长发育所需的全部基因。
③如何判断一个过程是否体现了全能性?
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一、植物组织培养的原理
2、原理:
④细胞的全能性高低比较
a.受精卵>生殖细胞>体细胞
b.植物体细胞>动物体细胞
c.一般,细胞分化程度越高,全能性越低
⑤全能性表达的条件
二、植物组织培养的基本过程
二、植物组织培养的基本过程
二、植物组织培养的基本过程
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二、植物组织培养的基本过程
二、植物组织培养的基本过程
1、外植体
由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫
外植体。一般取植物的幼嫩部位,如茎尖或者花药等。
一团排列疏松、无规则、高度液泡化的呈无定形状态、具
有分裂能力的薄壁细胞,愈伤组织形成过程中,没有叶绿
素和叶绿体的形成,所以愈伤组织形成过程不需要充足的
光照。
2、愈伤组织
二、植物组织培养的基本过程
2、愈伤组织
二、植物组织培养的基本过程
3、胚状体
是在离体植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一
些体细胞,经过胚的发生和发育过程,形成与合子胚类似
的结构。一般专指在组织培养条件下产生的非合子胚。
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二、植物组织培养的基本过程
3、胚状体
三、植物组织培养的条件
1、离体
2、无菌
3、一定的营养物质:
水、无机盐、
蔗糖(提供营养和调节渗透压)、维生素等。
三、植物组织培养的条件
5、适宜的理化条件:如温度、光照等
4、植物激素
四、影响因素
1、外植体的选择:
①不同植物组织或同一植物的不同部分,培养的难易程度差别很
大。例如,烟草和胡萝卜的组织培养比较容易,而枸杞愈伤组织的
芽诱导就比较难。因此,植物材料的选择直接关系到实验的成败。
②对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影
响实验结果。
③组织培养时,注意选择全能性较高的外植体。菊花的组织培养
,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
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2、培养基:
常用的培养基是MS 培养基,其主要成分包括:大量元素、
微量元素、水、有机物等。
大量元素
N、P、S、K、Ca、Mg等
微量元素
B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、
Co等
有机物
蔗糖、氨基酸、维生素等
四、影响因素
2、培养基:
在配制好的MS 培养基中,常常需要添加植物激素。植
物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和
再分化的关键性激素。
由于菊花茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物
激素。
四、影响因素
使用顺序
实验结果
先使用生长素,后使用细
胞分裂素。
有利于细胞分裂,但细胞不
分化。
先使用细胞分裂素,后使
用生长素。
细胞既分裂也分化。
同时使用。
分化频率提高。
2、培养基:
四、影响因素
生长素用量和细胞分裂素
用量的比例
植物细胞发育的方向
比值高
利于根的分化,抑制芽的形
成
比值低
利于芽的分化,抑制根的形
成
比值适中
促进愈伤组织的生长
2、培养基:
四、影响因素
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3、其他因素:
除上述因素外,pH、温度、光照等条件也十分重要。
不同的植物对各种条件的要求往往不同:
①进行菊花组织培养,一般将pH 控制在5.8 左右,温度控制在18
~22℃,并且每日用日光灯照射12h。
②月季花药培养温度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成
后才需要光照。如果花药开裂释放胚状体,必须在花药开裂后尽快
将幼小植株分开。
四、影响因素
【例1】★★
(2011 上海)下列关于植物组织培养的表述,错误的是(
)
A.外植体可以来自于植物的任何细胞
B.培养应在无菌条件下进行
C.以花粉作为外植体可得到单倍体植株
D.不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
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【例2】★★
(2013 江苏)某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。
为尽快推广种植,可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能
选用的是(
)
A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗
B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗
C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上
D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养
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【例3】★★
(2013 四川)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中,下列生命活动
不会同时发生的是(
)
A. 细胞的增殖与分化
B.光能的吸收与转化
C. ATP 的合成与分解
D.基因的突变与重组
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【例4】★★
下列关于植物组织培养的叙述中,错误的是(
)
A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相
同
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【例5】★★
下列有关MS 培养基与微生物培养基的说法错误的是
(
)
A.MS培养基中常常添加植物激素,微生物培养基中不需要
A.MS 培养基中的碳源和能源是蔗糖,微生物培养基中碳源和能源主要
是葡萄糖
C.MS培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素
D.MS 培养基中不需加维生素,微生物培养基中要加维生素等微生物必
需的营养物质
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【例6】★★
水稻的花药通过无菌操作,接入试管,经过如图所示过程培育成试管
苗.据图分析下列叙述正确的是(
)
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【例6】★★
A.a、b、c、d 中的植物细胞都具有全能性,且全能性的表达程度
相同
B.a、b、c 的培养基中都有琼脂、有机物、水、植物生长调节剂等
物质
C.水稻花药经a~d 发育成试管苗的过程涉及有丝分裂、减数分裂等
细胞分裂方式
D.只要调节培养基中各种营养物质的比例就能诱导b 中的愈伤组织
分化成试管苗
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【例7】★★
如图为植物组织培养的流程图.据图分析,下列说法正确的是(
)
A.将配制好的培养基在灭菌后要及时分装避免冷却凝固
B.图中三种培养基在植物激素含量方面完全一致
C.整个培养过程中需要适宜的温度和不间断的人工光照
D.长出丛芽和生根的过程中细胞的遗传物质的发生改变
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【例8】★★
如图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养成植株的过程.下列相关
叙述,正确的是(
)
四倍体兰花叶片﹣①→愈伤组织﹣②→胚状体﹣③→植株
A.②和③阶段发生减数分裂
B.四倍体兰花叶片与植株中的染色体组数相同
C.此兰花的花药离体培养所得的植株体细胞中有两个染色体组,为二
倍体
D.①阶段不仅有细胞增殖且细胞分化速率很快
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【例9】★★
(2012 北京)高中生物学实验中,在接种时不进行严格无菌操作对实
验结果影响最大的一项是(
)
A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上
D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
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【例10】★★★
如图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径,请据图回答有关
问题.
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【例10】★★★
如图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径,请据图回答有关
问题.
(1)离体的组织和细胞,对营养、环境等条件的要求相对特殊,需要
配置适宜的培养基.常用的一种培养基是,其主要成分包括:、微
量元素、有机物,
还常常需要添加
;对培养基要采用方法灭菌.组织培养需要的环境
条件有
.
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【例10】★★★
(2)选用的材料合适与否是能否成功诱导出花粉植株的重要因素,一
般来说选用期的花粉,
的花蕾可提高成功率.选择花粉时,一般要
通过来确定花粉是否处于合适的发育期,这时需要对花粉的细胞核进
行染色,常用的染色剂是
。
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【例10】★★★
(3)通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径:一种是花粉通过
发育成植株;另一种是花粉在诱导培养基上先形成
,再将其诱导分
化成植株.两条途
径主要取决于培养基中
.接种花药前还要对其进行
处理.如果外植体选取的材料为茎段,插入培养基时应注意
.
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【例10】★★★
(4)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的特点.
胚状体与
发育形成的胚有类似的结构,即具有胚芽、胚轴和胚根.
(5)花药培养在育种上有特殊意义.采用花药培养的方法,可使花药
粒发育成倍体植株,在经过人工诱导
,使其能够正常生殖.该育种
技术的最大优点是
.
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