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第35 讲 微生物的培养技术和应用
目录
01 课标达标练
【题型一】微生物的基本培养技术
【题型二】微生物的选择培养与技术
02 能力突破练（新考法+新情境+新角度+新思维）
03 高考溯源练（含2025 年高考真题）
【题型一】微生物的基本培养技术
1．某品牌推出了一款“气泡酸奶”，其独特之处在于酸奶中含有大量气泡，口感类似碳酸饮料。该产品
是通过在传统酸奶发酵过程中额外添加酵母菌（如酿酒酵母）进行二次发酵制成的。下列说法错误的是（
）
A．乳酸菌是厌氧细菌，只分布在无氧环境中
B．酸奶中的气泡主要是酵母菌无氧呼吸产生的CO2，与乳酸菌无关
C．二次发酵前需调节环境条件以确保酵母菌活性
D．若要进行乳酸杆菌的纯培养，需要在培养基中添加维生素
2．为探究青霉素对某种细菌的选择作用，将菌液涂布在培养基平板上，①放置不含青霉素的滤纸片，
②③④放置含等量青霉素的滤纸片，培养结果如图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．培养基中应含有细菌生长所需的碳源、氮源等营养物质
B．盖上皿盖后，应将培养皿倒置并放在适宜温度下培养
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C．培养过程中青霉素会诱导该细菌产生多种方向的变异
D．若从a 处附近挑取细菌，重复上述操作，抑菌圈直径变小
3．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在
完全培养基上生长。某大肠杆菌氨基酸营养缺陷型突变株纯化的部分流程如图所示，其中①、②、③、④
代表培养基，A、B、C 表示操作步骤，甲、乙为菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．图中①②③是完全培养基
B．运用涂布平板法对菌液中的活菌进行计数统计结果可能比实际活菌数多
C．可使用紫外线处理野生型细菌使其发生染色体变异获得亮氨酸缺陷型突变株
D．为获得目的菌株，可从甲处挑选菌株进行进一步纯化培养
4．消毒和灭菌是两个不同的概念。灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物（含芽孢和
孢子）；消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。下列适用
于消毒处理的是（ ）
①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨酱油⑩手术刀
A．①②③⑧⑨
B．④⑤⑥⑦⑩
C．①②③④⑤⑥⑧
D．以上全部
5．防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，下列关于微生物的基本培养技
术的叙述，正确的是（ ）
A．培养微生物时获得纯微生物培养物的关键是防止杂菌污染
B．倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水及特殊营养物质
D．接种时，为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
6．微生物的实验室培养有较高的技术要求，下列操作不符合规范的是（ ）
A．倒平板操作时，待平板凝固后，需要将其倒过来放置
B．配制培养基时，应先调节pH，再进行灭菌处理
C．浸泡在酒精中的玻璃涂布器无需再灼烧灭菌
D．用平板划线法分离大肠杆菌时，需要多次灼烧接种环
7．某同学为验证转化因子的本质进行了系列实验，部分如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①中，利用了酶的专一性和自变量控制的“减法原理”
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B．步骤②中，加入甲或乙的量属于无关变量，应保持相等
C．步骤③中，用液体培养基可能比固体培养基更利于细菌转化
D．步骤④中，可在显微镜下观察菌落或细胞形态来检测实验结果
【题型二】微生物的选择培养与技术
8．关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验操作，错误的是（ ）
A．配制的选择培养基要以尿素为唯一氮源
B．高压蒸汽灭菌后的培养基在接种前和接种后均要倒置保存
C．可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种
D．同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数
9．幽门螺杆菌是导致胃炎、胃溃疡的常见病原体。临床上常用尿素呼气试验进行无创诊断，其原理是让
受试者口服含
13C 标记的尿素胶囊，随后检测呼出气体中是否含
13CO2（反应式见下图）。下列有关说法正
确的是（ ）
A．
13CO2是幽门螺杆菌通过细胞呼吸产生的
B．脲酶可为
13C
尿素分解提供活化能，提高反应速率
C．毕希纳利用丙酮从刀豆种子中分离出脲酶并证明其是蛋白质
D．若受试者胃内存在其他可分解尿素的细菌，则检测结果不准确
10．下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A 组）和计数操作（B 组）过程示意图。下列有关叙述
错误的是（ ）
A．⑨计数得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较多
B．④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂
C．④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求
D．可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌
11．科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程如图，
经步骤③最后一次稀释之后若在 3 个平板上分别接入 0.1 mL 稀释液，经适当培养后，得到的结果是
39、38、37。下列叙述正确的是（ ）
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A．步骤②振荡 20 min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中
B．步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径与菌落直径比值较小的菌落培养
C．步骤⑤中的接种方法为平板划线法，3 次划线时需要对接种环灼烧 3 次
D．每克土样中的活菌数为 3.8×104个，该法统计的结果往往比实际值偏低
12．饮用被细菌污染的水后，细菌在消化道内会繁殖并产生毒素，引起急性肠胃炎。某同学利用图1 所示
方法，检测饮用水的细菌含量，图2 为不同稀释度下得到的平板。下列相关叙述不正确的是（ ）
A．配制图1 所示固体培养基时，需要先调整到适宜的pH，再灭菌
B．图1 中①～③三个培养皿菌落数的平均值乘稀释倍数即为样品中细菌数
C．图2 是稀释涂布平板法的结果，统计的菌落数比活菌的实际数目要少
D．图2 所示的平板中，a 和c 的计数结果不适合用于计算样品中的细菌数
13．某兴趣小组在“探究培养液中酵母菌种群数量变化”的实验中，将酵母菌培养液稀释1000 倍后，用血
细胞计数板（规格为lmm×1mm×0.1mm，由400 个小格组成）进行计数，观察到一个中格的菌体数如图所
示。下列叙述正确的是（ ）
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A．对酵母菌逐个计数很困难，常采用取样器取样的方法计数
B．据图估算培养液酵母菌的种群密度约为1.92×107个/ml
C．将培养液滴入血细胞计数板的计数室，待酵母菌全部沉降后盖上盖玻片
D．用该方法测得的结果往往比实际值偏大，可用台盼蓝染色法区分活菌和死菌
14．为探究不同类型的口罩的防传染效果，某兴趣小组进行了如下实验：让某同学分别佩戴不同类型的口
罩并在距离培养基20cm 处讲话，然后将培养基进行培养。下列叙述错误的是（ ）
A．该实验应设置空白培养基和不佩戴口罩讲话组用于对照
B．应将接种后的培养基置于30℃的恒温箱中进行培养
C．接种培养基上的菌落数越少，说明口罩的防传染效果越好
D．应对实验后的培养基进行灭菌处理
1．脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误
的是（ ）
A．镍是组成脲酶的重要元素
B．镍能提高尿素水解反应的活化能
C．产脲酶细菌可在以NH4Cl 为唯一氮源的培养基生长繁殖
D．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌
2．垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述
错误的是（ ）
A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品
B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源
C．X 中需要添加合适的菌种，才能产生沼气
D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动
3．细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密
集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m³）。下列叙述错误的是（ ）
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A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C．同一稀释度下至少对3 个平板计数并取平均值
D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
4．下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是（ ）
A．通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B．通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大
C．通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌
D．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定
5．根瘤菌是最早用于生物肥料研发的微生物，其菌肥生产需经菌种选育、种子液制备、发酵罐
发酵、质量检测等流程。下列说法正确的是（ ）
A．菌种选育时，需用含碳源、氮源等营养的培养基进行筛选
B．在质量检测中的活菌计数时，可采用涂布平板法进行接种
C．发酵罐发酵条件不同，仅影响代谢产物含量不影响其种类
D．田间应用时，根瘤菌主要通过产生有机酸来增加土壤肥力
6．关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，下列说法错误的是（ ）
A．取样时要选择表层土，取土样的铁铲和取样纸袋要进行灭菌处理
B．本实验中使用的平板较多，需要在各培养皿底上做好标记避免混淆
C．利用显微镜直接计数结果通常较稀释涂布平板法进行计数的结果偏高
D．若涂布0.2mL 稀释103倍的培养液，获得菌落平均值为58，则每克土样中尿素分解菌数为2.9×105个
7．下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A 组）和计数操作（B 组）过程示意图。下列有关叙述错
误的是（ ）
A．⑨计数得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较多
B．④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂
C．④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求
D．可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌
8．随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大
意义。科研人员开展筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如下图。下列说法正确的是（
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）
A．诱变选育高产菌株时，通过向培养基加入刚果红染液，选择透明圈大的即为目的菌株
B．可使用紫外线进行诱变，无需筛选即可得到产纤维素酶高的菌种
C．能在以纤维素为唯一碳源培养基中生长的菌株一定是纤维素分解菌
D．富集培养应使用液体培养基，目的是能得到更多能产纤维素酶的菌株
9．为探究某种细菌A 抑制真菌B 生长的原理，实验组将细菌A 接种在A1平板上，B1平板中央
接种直径为0.5cm 的真菌B 菌落，把两个培养皿对扣，两平板上菌株无接触，放在适宜环境中培养5d，菌
体生长情况如图中甲组所示。下列叙述正确的是（ ）
A．接种前需对培养基和培养皿通过干热法进行灭菌
B．需将含有细菌A 的菌液进行稀释后涂布在A1平板上
C．乙组为对照组，且A2平板上接种的是无菌水
D．细菌A 通过与真菌B 竞争营养物质抑制其生长
10．发酵技术广泛应用于食品、医药、农业等领域。下列叙述正确的是（ ）
A．菌落的大小、颜色、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据
B．显微直接计数法具有直观、快速和操作简便等优点，但测得结果往往偏小
C．防止杂菌污染是获得纯培养物的关键，对血清等生物制品常采用过滤除菌法
D．玻璃制品涂布器在使用前后都必须进行严格的消毒，避免杂菌污染培养基
11．聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废
弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA 的菌种，流程
图如下。下列叙述正确的是（ ）
A．步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B．步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长越有利
C．扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株
D．挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定各菌落中嗜盐细菌的PHA 产量
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12．在生活饮用水中如果大肠杆菌含量超标，会造成细菌性痢疾，严重时会造成脱水，甚至会危及生命。
可利用表中的培养基对生活饮用水中的大肠杆菌进行分离和计数，下列叙述正确的是（ ）
成分
蛋白胨
蔗糖
乳糖
K2HPO4
显色剂（伊红美蓝）
琼脂
含量
10.0g
5.0g
5.0g
2.0g
0.2g
12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
A．根据用途划分该培养基属于选择培养基
B．在配制培养基时应先调节pH 值，再灭菌后倒平板
C．使用后的培养基在丢弃前一定要经过消毒处理，以免污染环境
D．为防止杂菌污染，还可以向培养基中添加适量抗生素
13．（不定项）泡菜汁中乳酸菌的分离与计数可采用稀释涂布平板法。下列叙述错误的是（ ）
A．培养基要维持正常的pH，一般应在灭菌前调pH
B．完成接种后，培养乳酸菌的平板需要放置在有氧环境下培养
C．稀释涂布平板法计数时，需将泡菜汁中的乳酸菌稀释至30~300 个/mL
D．用稀释涂布平板法统计活菌数目可能会比用细菌计数板统计的数目多
14．（不定项）某兴趣小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了相关实验。下列叙述错
误的有（ ）
A．以尿素为唯一氮源的培养基上生长的微生物不一定都能合成脲酶
B．土壤样液先在锥形瓶内进行富集培养，再等比稀释后涂布计数
C．甲组中a 培养基上的菌落连成一片，是稀释度不够造成的
D．以乙组计数，5g 土壤中尿素分解菌的估算数目是2.8×107个
15．（不定项）研究人员对布氏田鼠盲肠中的纤维素分解菌进行分离、鉴定，过程如图。下列说法正确的
是（ ）
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A．①②③应在95%空气和5%氧气的气体环境中倒置培养
B．①②③中的培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基
C．通过比较透明圈大小可知，甲分解纤维素的能力强于乙
D．若①②③菌落数分别为20、37、39，则内容物中纤维素分解菌密度为1.6×107个/mL
16．合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3 款消毒液A、B、C 杀灭细菌的效果，结果
如图所示。回答下列问题。
(1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大
于后者，其原因是 。
(2)该同学从100 mL 细菌原液中取1 mL 加入无菌水中得到10 mL 稀释菌液，再从稀释菌液中取200 μL 涂
布平板，菌落计数的结果为100，据此推算细菌原液中细菌浓度为 个/mL。
(3)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是 ，冷却的目的是
。
(4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是 ，判断依据是 。（答出两点即可）
(5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈
色。
17．自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构
使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供
和维生素等。
(2)A 菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A 菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成
薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明 。
(3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样 后，
依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A 菌的菌落周围会出现 。采用
这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P 菌。
(4)为探究P 菌溶解破坏A 菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验材
料和设备：P 菌、A 菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱） 。
18．根瘤菌与豆科植物之间是互利共生关系，根瘤菌侵入豆科植物根内可引起根瘤的形成，根瘤中的根瘤
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菌具有固氮能力。为了寻找抗逆性强的根瘤菌，某研究小组做了如下实验：从盐碱地生长的野生草本豆科
植物中分离根瘤菌；选取该植物的茎尖为材料，通过组织培养获得试管苗（生根试管苗）；在实验室中探
究试管苗根瘤中所含根瘤菌的固氮能力。回答下列问题。
(1)从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是 。
(2)取豆科植物的茎尖作为外植体，通过植物组织培养可以获得豆科植物的试管苗。外植体经诱导形成试管
苗的流程是：外植体
愈伤组织
试管苗。其中①表示的过程是 ，②表示的过程是
。由外植体最终获得完整的植株，这一过程说明植物细胞具有全能性。细胞的全能性是指 。
(3)研究小组用上述获得的纯培养物和试管苗为材料，研究接种到试管苗上的根瘤菌是否具有固氮能力，其
做法是将生长在培养液中的试管苗分成甲、乙两组，甲组中滴加根瘤菌菌液，让试管苗长出根瘤。然后将
甲、乙两组的试管苗分别转入 的培养液中培养，观察两组试管苗的生长状况，若甲组的生长状
况好于乙组，则说明 。
(4)若实验获得一种具有良好固氮能力的根瘤菌，可通过发酵工程获得大量根瘤菌，用于生产根瘤菌肥。根
瘤菌肥是一种微生物肥料，在农业生产中使用微生物肥料的作用是 （答出2 点即可）。
19．某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆
堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时
菌T 不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。
回答下列问题。
(1)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T 能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是
。
(2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分，
氮源的主要作用是 （答出1 点即可）。通常，可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该
方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有 （答出2 点即可）。
(3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是
。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是 。发酵液中的乙醇可用 溶液检测。
(4)本实验收集的淋洗液中的 可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，
本实验中乙醇生产方式的优点是 。
20．某研究小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡萄皮
上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。请回答下列问题：
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(1)该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3 个盛有等量液体培养基的锥形瓶中,
并分别置于转速为150 r/min、200 r/min、250 r/min 的摇床上培养，检测结果如图1 所示，摇床转速为250
r/min 的酵母菌种群密度大的原因是 。
(2)图2 是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结
果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线 ，下列判断依据中正确的有 （填序号）。
①稀释涂布平板法只计数活的酵母细胞，死细胞无法形成菌落
②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与活细胞一起计数
③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起时，只能观察到一个菌落
④采用稀释涂布平板法计数时，可能因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
(3)通过如图3 所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1mL 滴在培养基表面，然后
将沾有少量酒精的涂布器 后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的3 个平板上
菌落数分别为69 个、52 个、44 个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为 个。计数一般要选取
进行计数。
1．（2025·四川·高考真题）微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人
分离到X 和Y 两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X+Y（X:Y=1:1）分别接种于含有等量微塑料
的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加量×100%），结果如
下图。下列叙述正确的是（ ）
A．用平板划线法能测定X 菌组中的活菌数
B．Y 菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高
C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种
D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料
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2．（2025·云南·高考真题）黄酒是我国古老的发酵酒之一，传统酿制中，先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料，
对之前发酵留存的少量酒曲（曲种）进行扩大制曲；再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后，
添加足量酒母（含酵母菌）完成发酵，压榨成品。下列说法错误的是（ ）
A．小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质
B．为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌
C．糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率
D．将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖
3．（2025·湖南·高考真题）采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确的是（ ）
A．稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数
B．完成平板划线后，培养时需增加一个未接种的平板作为对照
C．土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分离成乙酸
D．用于筛选尿素分解菌的培养基含有蛋白胨、尿素和无机盐等营养物质
4．（2025·江苏·高考真题）从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、
鉴定。下列相关叙述正确的是（ ）
A．制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌
B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布
C．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线
D．鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存
5．（2025·山东·高考真题）深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维
素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法
正确的是（ ）
组
别
压强
纤维
素
淀粉
菌落
①
常压
-
+
-
②
常压
+
-
-
③
高压
-
+
-
④
高压
+
-
+
注： “+”表示有；“一”表示无
A．可用平板划线法对该菌计数
B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长
D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
6．（2025·黑吉辽蒙卷·高考真题）科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素
（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（
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）
A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C．配制选择培养基时，需确保pH 满足实验要求
D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
7．（2024·海南·高考真题）某小组为检测1 株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和时
间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（ ）
组别
培养条件
实验结果
①
基础培养基
无法生长
②
基础培养基+甲、乙、丙3 种氨基酸
正常生长
③
基础培养基+甲、乙2 种氨基酸
无法生长
④
基础培养基+甲、丙2 种氨基酸
正常生长
⑤
基础培养基+乙、丙2 种氨基酸
正常生长
A．组别①是②③④⑤的对照组
B．培养温度和时间属于无关变量
C．①②结果表明，甲、乙、丙3 种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸
D．①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型
8．（2024·江苏·高考真题）酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（ ）
A．酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌
B．酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养
C．可用稀释涂布平板法对酵母菌计数
D．该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰
9．（2024·江苏·高考真题）某同学进行下列实验时，相关操作合理的是（ ）
A．从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌
B．观察黑藻的细胞质流动时，在高倍镜下先调粗准焦螺旋，再调细准焦螺旋
C．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理
D．鉴定脂肪时，子叶临时切片先用体积分数为50%的乙醇浸泡，再用苏丹Ⅲ染液染色
10．（2024·重庆·高考真题）养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿
素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按
图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ）
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A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落
B．②挑取在2 种培养基上均能生长的用于后续的实验
C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙
D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少
11．（不定项）（2025·江西·高考真题）为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧
光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培
养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，正确的是（ ）
A．需要设置一个对照组保证检测结果的准确性
B．实验过程中所用的培养基是一种选择培养基
C．在重组菌Q 胞内的荧光素酶可催化荧光素水解
D．培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据
12．（2025·北京·高考真题）链霉菌A 能产生一种抗生素M，可用于防治植物病害，但产量很低。为提高
M 的产量，科研人员用紫外线和亚硝酸对野生型链霉菌A 的孢子悬液进行诱变处理，筛选M 产量提高的
突变体（M+株），以应用于农业生产。
(1)紫外线和亚硝酸均通过改变DNA 的 ，诱发基因突变。
(2)因基因突变频率低，孢子悬液中突变体占比很低；又因基因突变的 性，M+株在全部突变体中的
占比低。要获得M+株，需进行筛选。
(3)链霉菌A 主要进行孢子繁殖。研究者对链霉菌A 发酵液进行了粗提浓缩，得到粗提液，测定粗提液对野
生型链霉菌A 孢子萌发的影响，结果如图。
由图可知，粗提液对野生型孢子萌发有 作用。
(4)随后研究者进行筛选实验。诱变处理后，将适量孢子悬液涂布在含有不同浓度粗提液的筛选平板上，每
个浓度的筛选平板设若干个重复，28℃培养7 天。从每个浓度的筛选平板上挑取100 个单菌落，再次分别
培养后逐一测定M 产量，统计结果如下表。
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组别
I
II
III
IV
V
VI
筛选平板中粗提液浓度（mL/100mL）
2
5
8
10
12
15
所取菌落中M+株占比（%）
0
13
25
65
20
3
①用图中信息，解释表中IV 组M+株占比明显高于Ⅲ组的原因 。
②表中Ⅲ组和V 组中M+株占比接近，但在筛选平板上形成的菌落有差异。下列叙述正确的有 （多
选）。
A．Ⅲ组中有野生型菌落，而V 组中没有野生型菌落
B．V 组中有M 产量未提高的突变体菌落，而III 组中没有
C．与Ⅲ组相比，诱变处理后的孢子悬液中更多的突变体在V 组中被抑制
D．与Ⅲ组相比，诱变处理后的孢子悬液中更多的M+株在V 组中被抑制
综上所述，用 粗提液筛选是获得M+株的有效方法。
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