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第33 讲 微生物的培养技术及应用
内容要求——明考向
近年考情——知规律
（1）阐明无菌技术在微生物培养中的应
用；（2）概述微生物分离和纯化及测定
微生物数量的常用方法；（3）测定微生
物数量；（4）通过配制培养基、灭菌、接
种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌
菌落（活动）；（5）分离土壤中分解尿素
的细菌，并进行计数（活动）。
2021·天津卷（1）、2021·北京卷（12）、
2021·湖南卷（21）、2021·广东卷（21）、
2020·全国卷Ⅰ（37）、2019·全国卷Ⅰ
（37）、2019·全国卷Ⅱ（37）、2019·全国
卷Ⅲ（37）
考点一 微生物的基本培养技术
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1.培养基的配制
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基
质。
（2）营养组成
①一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等。
②需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2 的需求。
微生物
对培养基的需求
乳酸杆菌
添加维生素
霉菌
将培养基调至酸性
细菌
将培养基调至中性或弱碱性
厌氧微生物
提供无氧的条件
（3）种类：①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。②按功能可分为选择培
养基和鉴别培养基。
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1
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提醒 （1）常见选择培养基举例
①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物。
②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出真菌。
③无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物。
（2）几种微生物的营养和能量来源
微生物
碳源
氮源
能源
蓝细菌
CO2
NH、NO 等
光能
硝化细菌
CO2
NH3
NH3的氧化
根瘤菌
糖类等有机物
N2
有机物
酵母菌
糖类、蛋白质等有机
物
蛋白质等
有机物
2.无菌技术
（1）含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
（2）常用方法
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（3）常见物品的消毒或灭菌方法
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2
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①消毒方法及适用对象
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②灭菌方法及适用对象
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3.纯化酵母菌的方法和操作过程
（1）方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
（2）酵母菌纯培养的操作步骤：
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（1）培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质
（√）
（2）由于物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型（×）
（3）消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害（√）
（4）无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料（如培养基、接种环等）都可采用
高压蒸汽灭菌法进行灭菌（×）
（5）配制培养基时应先灭菌再调pH（×）
（6）平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧（√）
（7）倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上（×）
（8）为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落（×）
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性必修
选择
3 P10“旁
思考
栏
题”
1.为什么培养基需要氮源？
提示 微生物
胞内有蛋白
、核酸
细
质
、磷脂等多种含氮的
养物
或代
物，培
营
质
谢产
养基中的氮源可以作
合成
些
养物
及代
物的原料。
为
这
营
质
谢产
性必修
选择
3 P10“旁
思考
栏
题”
2.无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？
提示 无菌技
能有效避免操作者自身被微生物感染。
术还
3.平板划线时最后一次划线为何不能与第一次划线相连？
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4
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提示 最后一次划
已
将
菌稀
成
个的
胞，如果与第一次划
相
，
线
经
细
释
单
细
线
连
则
增加了
菌的数目，得不到
化的效果。
细
纯
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1.倒平板的操作步骤
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注意事项
（1）培养基要冷却到50 ℃左右
开始倒平板。温度
高会
手，低培养基又会
时
过
烫
过
凝固。
（2）要使
形瓶的瓶口通
酒精灯火焰。通
灼
菌，防止瓶口的微生物
染培
锥
过
过
烧灭
污
养基。
（3）倒平板
，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的
隙，不要
时
缝
完全打开，以免
菌
染培养基。
杂
污
（4）平板冷凝后，要将平板倒置。因
平板冷凝后，皿盖上会凝
水珠，平板倒置后
为
结
，
既可避免培养基表面的水分
快地
，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造
过
挥发
成
染。
污
（5）在倒平板的
程中，如果不小心将培养基
在皿盖与皿底之
的部位，那么
过
溅
间
这
个平板不能用来培养微生物。因
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之
的培养
为
间
基上滋生。
（6）整个操作
程要在酒精灯火焰旁
行，避免
菌
染。
过
进
杂
污
2.平板划线法操作步骤
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（1）实验成功关键点
①第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种
环。
②灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
③在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样
才能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而
来的菌落。
④划线时最后一区域不要与第一区域相连。
⑤划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
（2）平板划线操作中几次灼烧接种环的目的
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考向1 结合培养基的配制和无菌技术，考查科学思维能力
1.（2022·湖北襄阳四校
考）
联
微生物培养过程中，要重视无菌操作，现代生物学实
验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，正确的是（
）
A.煮沸消毒法中100 ℃煮沸5～6 min 可以杀死全部微生物的细胞和芽孢、孢子
B.将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌
C.加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
D.家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌
答案 B
解析 煮沸消毒可以
死微生物的
养
胞和部分芽
，而
菌能
境中一
杀
营
细
孢
灭
杀灭环
切微生物，包括
子和芽
，
孢
孢A
；指示
和染料可能混有微生物，因此加入培
错误
剂
养基中的指示
和染料也需要
菌，
剂
灭
C
；家庭制作葡萄酒
，要将容器
行
错误
时
进
灭
菌或消毒，但是葡萄不能
菌，因
酵
灭
为发
用的酵母菌来自葡萄，D
。
错误
2.（2022·山西太原
研）
调
自然界里有多种微生物，将其进行合理的筛选、培养和应
用，能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题：
（1）对培养基进行灭菌时，多采取 法，而对接种环或涂布器灭菌时则用
法，若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，在固体培养基表面连续进行了5
次划线，则需要对接种环灼烧 次。平板划线在做第二次及其后的划线操
作时，要从上次划线的 开始划线，最后一次划的线不能与第一次划的线
。
（2）将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中 培
养，以减少培养基中水分的挥发。其中，培养未接种的固体培养基是为了
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。
（3）甲、乙两组同学用稀释涂布平板法测定某种微生物的数量，在同一稀释倍数下
每隔一段时间记录数据（统计时间内微生物总数小于环境容纳量），得到如表结果：
培养时间/小时
24
48
72
96
甲组菌落均值/个
18
25
36
32
乙组菌落均值/个
20
28
38
32
据表可知，计数时最好取培养 小时记录的菌落数作为实验结果，一方面
是由于培养时间较短，会遗漏菌落数目，另一方面是由于
_______________________________。
答案 （1）高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌 6 末端 相连 （2）倒置 作为对照组，
排除培养基被杂菌污染的可能 （3）72 培养时间过长，两个或多个菌落连成一
个菌落
解析 （1）培养基
行
菌
，多采取高
蒸汽
菌法，而
接种
或涂布器
对
进
灭
时
压
灭
对
环
灭
菌
用灼
菌法。接种
在每次接种前都要灼
菌，最后一次接种完也要
时则
烧灭
环
烧灭
菌，所以在固体培养基表面
行了
灭
连续进
5 次划
，需要
接种
灼
线
对
环
烧6 次。平板
划
在做第二次及其后
线
的划
操作
，要从上次划
的末端开始划
，使菌体的
线
时
线
线
数目随着划
次数的增加而逐
减少，最
得由
个菌体形成的
个菌落。最
线
渐
终获
单
单
后一次划的
不能与第一次划的
相
。（
线
线
连
2）将接种后的固体培养基和一个未接
种的固体培养基放入恒温培养箱中倒置培养，以减少培养基中水分的
。培养
挥发
未接种的固体培养基是
了作
照
，排除培养基被
菌
染的可能。
为
为对
组
杂
污
（3）根据表中数据可知，甲
和乙
中的菌落数都在
组
组
72 小
达到最大，由此推知
时
最好取72 小
的菌落数作
果，原因：
时记录
为实验结
①培养
不足会
漏菌落数
时间
遗
目；②培养
会
致两个或多个
时间过长
导
菌落
成一个菌落，使
数不准确。
连
计
考向2 结合微生物的纯培养，考查科学探究能力
3.（2022·江
常州模
）
苏
拟下图表示培养和纯化X 细菌的部分操作步骤，下列相关叙
述正确的是（ ）
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A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理
B.步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
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C.步骤②应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D.步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注
答案 C
解析
中
图
①是倒平板，②是
行平板划
，
进
线③是培养。
操作的空
、操作
对实验
间
者的衣着和手需要
行消毒
理，
进
处
A
；倒完平板后立即盖上培养皿盖，待培养
错误
基冷却凝固后将平板倒
来放置，
过
B
；步
错误
骤②
多个方向划
，使接种物逐
应
线
渐
稀
，培养后出
个菌落，
释
现单
C 正确；中操作
束后需在培养皿底
注菌种及接
图
结
标
种日期等信息，而不是在培养皿盖上做
注，
标
D
。
错误
4.（2019·全国卷Ⅲ，37）回答下列与细菌培养相关的问题。
（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是 （填“蛋白
胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来
调节培养基的pH，其原因是__________________________________。
硝化细菌在没有碳源的培养基上 （填“能够”或“不能”）生长，原因是
_______________________________________________________________。
（2）用平板培养细菌时一般需要将平板 （填“倒置”或“正置”）。
（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色
等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________________________。
（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过 处理，这种处理可以杀死丢
弃物中所有的微生物。
答案 （1）蛋白胨 不同细菌生长繁殖所需的最适pH 不同 能够 硝化细菌可
以利用空气中的CO2作为碳源 （2）倒置 （3）在一定的培养条件下，不同种微生
物表现出各自稳定的菌落特征 （4）灭菌
解析 （1）菌培养
常用牛肉膏蛋白
培养基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸
细
时
胨
、生素，蛋白
能提供碳源、氮源、生素，而葡萄糖不能提供氮源，
盐维
胨
维
NaNO3不
能
微生物提供碳源。不同
菌生
繁殖所需要的最适
为
细
长
pH 是不同的，
根据培
应该
养
菌的不同来
培养基的
细
调节
pH。硝化
菌是化能自养型
菌，可以利用空气中
细
细
的CO2
碳源，因此在没有碳源的培养基上能
生
。（
为
够
长
2）在平板培养基上培养细
菌
，一般需将平板倒置，
可以防止皿
时
这样
盖上的水珠落入培养基造成
染。（
污
3）
不同种
的
菌所形成的菌落，在大小、形状、光
度、色、硬度、透明度等方面
类
细
泽
颜
具有一定的特征，不同种
菌在一定培养条件下表
出各自
定的菌落特征，可
细
现
稳
以作
菌种
定的重要依据。（
为
鉴
4）使用后的培养基在
弃前需
行
菌
理，以免
丢
进
灭
处
染
境。
污
环
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考点二 微生物的选择培养和计数
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1.选择培养基
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2.稀释涂布平板法
将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养
基表面，进行培养
（1）系列稀释操作
取1 mL 上清液加入盛有9 mL 无菌水的试管中，依次等比稀释。
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（2）涂布平板操作
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3.微生物数量的测定
（1）利用稀释涂布平板法计数——间接计数法 活菌计数法
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀
释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少
活菌。
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②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30
～
300
、适于计数的平板计数，并且在
同一稀释度下，应至少对3 个平板进行重复计数，并求平均值。 增强实验的说服
力与准确性
③用此种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少。 这是因为当两个或多
个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数
而不是用活菌数来表示。
（2）显微镜直接计数法
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4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作
（1）实验原理
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（2）操作步骤
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（3）实验结果分析与评价
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5.分解纤维素的微生物的分离
（1）分离方法与原理
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（2）纤维素分解菌的培养基成分及鉴定原理
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（1）选择培养基可以鉴定某种微生物的种类（×）
（2）对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法（×）
（3）筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源（√）
（4）分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降
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低（×）
（5）尿素在脲酶的催化作用下分解成无机物（√）
（6）稀释涂布平板法计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少（√）
（7）稀释涂布平板法计数时，平板上的一个菌落就是一个细菌（×）
（8）刚果红可以与纤维素形成透明复合物，所以可以通过是否产生透明圈来筛选
纤维素分解菌（×）
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1.平板划线法和稀释涂布平板法的比较
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2.选择培养基四种常见制备方法或实例
（1）加入某些特定的物质（前提是培养基具备全部营养成分）
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（2）改变培养基的营养成分
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（3）利用培养基“特定化学成分”分离
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（4）通过某些“特殊环境”分离
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考向1 结合选择培养基成分及配制方法，考查科学探究能力
1.（2021·山
卷，
东
14）解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成脂肪酸和甘油并吸
收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两
种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌
落周围不变色。下列说法错误的是（ ）
A.甲菌属于解脂菌
B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
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答案 B
解析 根据
意，甲、乙两种菌分
接种在醇溶青
脂平板上，二者都能生存，甲
题
别
琼
周
呈
深
色，
明培养基的脂肪被分解
脂肪酸和甘油，脂肪酸使平板呈
围
现
蓝
说
为
现
深
色，脂肪的分解需要脂肪
的催化，
明甲能
分泌脂肪
，属于解脂菌，
蓝
酶
说
够
酶
A
正确；乙周
不
围
色，明乙不能分泌脂肪
分解脂肪，没有脂肪酸的
生，不能
变
说
酶
产
利用脂肪，但由于乙能在
培养基上生存，明
培养基中除了脂肪作
碳源外，
该
说
该
为
存在
的碳源，否
乙不能在
培养基上生存，
还
别
则
该
B
；了便于比
果，可
错误为
较结
以将两种菌接种到同一平板的不同区域，C 正确；菌落周
深
色的直径越大，
围
蓝
说
明解脂菌分泌脂肪
的能力越
，
酶
强
D 正确。
2.（2020·全国卷Ⅰ，37）某种物质S（一种含有C、H、N 的有机物）难以降解，会对
环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离
得到能高效降解S 的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无
机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S 和Y。
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回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用 的方法进行灭菌。乙培养基
中的Y 物质是 。甲、乙培养基均属于 培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M 中细菌细胞数为2×107 个/mL，若要在每个平板上涂
布100 μL 稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200 个，则至少
应将摇瓶M 中的菌液稀释 倍。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S 超过某一浓度时，某菌株对S 的
降解量反而下降，其原因可能是 （答出1 点
即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解S 的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：
_____________________________________________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长
提供4 类营养物质，即______________________________________________。
答案 （1）高压蒸汽灭菌 琼脂 选择 （2）104 （3）S 的浓度超过某一值时会
抑制菌株的生长 （4）取淤泥加入无菌水中，涂布（或稀释涂布）到乙培养基上，培
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养后计数 （5）水、碳源、氮源和无机盐
解析 （1）
程中，盛有水或培养基的
瓶
行
菌
，常采用高
蒸汽
实验过
对
摇
进
灭
时
压
灭
菌法。据
分析可知，乙培养基
固体培养基，与甲培养基相比，其特有的
分
题图
为
组
Y 物
是凝固
脂。甲、乙培养基均只允
能利用物
质应
剂琼
许
质S 作
氮源和碳源的
为
微生物生
，因此均
培养基。（
长
为选择
2）据
意，假
至少将
题
设
摇瓶M 中的菌液稀释
X 倍，才能保
稀
后的
证
释
100 μL 菌液中
菌
胞数不超
细
细
过200 个，初步估
瓶
测摇
M 中
菌
胞数
细
细
为2×107个/mL，
稀
之前
则
释
100 μL 菌液中有2×106个
菌，可
细
得2×106×（1/X）＝200，则X＝104，因此至少
将
瓶
应
摇
M 中的菌液稀释104倍。
（3）在
程中，若培养基中
筛选过
S
度
高，可能会
致
胞失水，而抑制菌株
浓
过
导
细
进
的生
。（
长
4）将含有能降解S 的
菌的淤泥加入无菌水中，行适当稀
后，利用
细
进
释
稀
涂布平板法，取适量的菌液涂布到乙培养基上
释
，在适宜条件下
行培养，一段
进
后，
菌落数，即可估算出淤泥中能降解
时间
统计
S 的
菌
胞数。
（
细
细
5）本
中，甲
实验
乙两种培养基所含有的
分
然不同，但都能
菌的生
提供的
养物
是水
组
虽
为细
长
营
质
、
碳源、氮源和无机
。
盐
考向2 围绕土壤中分解尿素细菌的分离，考查科学探究能力
3.（2022·山
淄博
考）
东
联
下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述，正
确的是（ ）
A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
B.统计样品中的活菌数目一般用平板划线法
C.筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选
到了分解尿素的细菌
答案 A
解析
品中的活菌数目
一般用稀
涂布平板法，
统计样
时
释
B
；
分解尿素
错误
筛选
的
菌
以尿素作
培养基中的唯一氮源，培养基中
含有水、无机
、碳源
细
时应
为
还应
盐
等
养物
，
营
质C
；在以尿素
唯一氮源的培养基中加入酚
错误
为
指示
，若指示
红
剂
剂
，
表明
到了分解尿素的
菌，
变红
则
筛选
细
D
。
错误
4.（2017·全国卷Ⅰ，37）某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和
利用。回答下列问题：
（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生 。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2 作为碳源，原因是
________________________________________________，
但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是
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_____________________________________________________________（答出两
点即可）。
（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择 （填“尿素”
“ NH4NO3”或“ 尿素＋NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是
__________________________________________________。
（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4 和Na2HPO4，其作用有
______________________________________________________________（答出两
点即可）。
答案 （1）脲酶 分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物 为
细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 （2）尿素 其他两组都
含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能
起到筛选作用 （3）为细菌生长提供无机盐离子，作为缓冲剂保持细菌生长过程
中pH 的稳定
解析 （1）只有能合成
的微生物才能分解尿素。能分解尿素的
菌是一种分
脲酶
细
解者，属于异养型生物，不能以尿素的分解
物
产
CO2作
碳源。能分解尿素的
菌
为
细
可以以葡萄糖作
碳源，
入
菌体内的葡萄糖的主要作用是一方面可氧化分解
为
进
细
胞生命活
提供能量，另一方面其代
中
物可
多种有机物的合成提供
为细
动
谢
间产
为
原料。
（2）了
可分解尿素的
菌，在配制培养基
，
以尿素作
唯一氮源的
为
筛选
细
时应选择
为
培养基，而其他两
都含有含氮物
选择
组
质NH4NO3，能分解尿素的
菌和不能分解
细
尿素的
菌都能利用
细
NH4NO3，不能起到
作用。
筛选
（3）用来
分解尿素
菌的培养基含有
筛选
细
KH2PO4和Na2HPO4，既可
持培养基
维
pH 的相
定，又能
微生物生
对稳
为
长提供无机
离子。
盐
重温真题 经典再现
1.（2021·北京卷，12）人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄
球菌。下述操作不正确的是（ ）
A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌
B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样
C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布
D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
答案 C
解析
避免
菌
染，需
配制的培养基
行高
蒸汽
菌，
为
杂
污
对
进
压
灭
A 正确；葡萄球菌
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需从人体皮肤的微生物中分离，
避免
菌
染，故需要使用无菌棉拭子从皮肤
为
杂
污
表面取
，
样B 正确；棉拭子上的微生物需要先用无菌水制成菌液，再使用涂布器在
固体培养基上涂布分离，C
；根据微生物在固体培养基表面形成的菌落的形
错误
状、大小、隆起程度和
色等特征可
菌落
行初步判断，
颜
对
进
D 正确。
2.（2021·山
卷，
东
20）含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水
发臭，硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是
否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法分别将两种菌接种在含有
硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错
误的是（ ）
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A.乙菌的运动能力比甲菌强
B.为不影响菌的运动需选用液体培养基
C.该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量
D.穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
答案 B
解析 由
可知，在
菌繁殖速度相等的情况下，乙菌在
管内培养基中
散
题图
细
试
扩
范
更广，明乙菌的运
能力比甲菌
，
围
说
动
强A 正确；本
需探究两种菌的运
能
实验
动
力，液体培养基中
以保留两者的运
迹，故
用固体培养基，
难
动轨
应选
B
；由
错误
图
可知，甲
管中黑色沉淀
色深但分布范
窄，乙
管中黑色沉淀
色浅但分布
试
颜
围
试
颜
范
广，因此无法比
两种菌
生硫化
的量，
围
较
产
氢
C 正确；接种操作的核心是无菌操
作，避免
菌
染，
杂
污
D 正确。
3.（2019·北京卷，3）筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养
后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈
（如图），实验结果见下表。
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20
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菌种
菌落直径：C/mm
透明圈直径：H/mm
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6
有关本实验的叙述，错误的是（ ）
A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B.筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布
C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D.H/C 值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
答案 C
解析 微生物培养基含有四
养物
：水、无机
、碳源、氮源，
类营
质
盐
A 正确；常用稀
涂布平板法
淀粉分解菌，涂布前需将菌液稀
，
释
筛选
释B 正确；由
可知，菌
题图
细
Ⅰ和Ⅱ形成的菌落周
都出
了透明圈，
围
现
明两种
菌都能将淀粉
分泌至
胞
说
细
酶
细
外，C
；淀粉分解菌可分解淀粉，致菌落周
的淀粉被分解，不能与碘液反
错误
导
围
生成
色，故而出
透明圈，透明圈直径与菌落直径的比
越大，明
菌分解
应
蓝
现
值
说
细
淀粉能力越
，
强
D 正确。
4.（2021·广
卷，
东
21）中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，
以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA 等新
型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。
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回答下列问题：
（1）为提高菌株H 对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为
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，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新
配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用
的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有
_______________________________________________等（答出两种方法即可）。
（2）基于菌株H 嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的
发酵系统，其培养基盐浓度设为60 g/L，pH 为10，菌株H 可正常持续发酵60 d 以
上。该系统不需要灭菌的原因是_______________________________
____________________________________（答出两点即可）。
（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH 条件下发酵，
结果发现发酵液中菌株H 细胞增殖和PHA 产量均未达到预期，并产生了少量乙
醇等物质，说明发酵条件中 可能是高密度培养的限制因素。
（4）菌株H 还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说
明其能分泌_____________________________________________________。
答案 （1）唯一碳源 稀释涂布平板法（血细胞计数法） 诱变育种、基因工程育
种 （2）培养基是高盐浓度的液体环境，杂菌会由于渗透失水而死亡；培养基的液
体环境是碱性的，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制 （3）氧气
（4）蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和PHA 合成相关的酶
解析 （1）提高菌株
为
H
蔗糖的耐受能力和利用效率，在液体培养基中，可将蔗
对
糖作
唯一碳源。培养
程中可定期取
并采用稀
涂布平板法（血
胞
数法）
为
过
样
释
细
计
行菌落
数，
估菌株增殖状况。除了上述方法
育能耐受高
度蔗糖的菌株
进
计
评
选
浓
H 外，可通
育种、基因工程育种来
育
良菌株。（
还
过诱变
选
优
2）由
意可知，菌株
题
H
具有嗜
、酸碱耐受能力
的特性，在
系
中，其他
菌会因
度
高或
盐
强
该
统
杂
盐浓
过
pH
不适宜而死亡，故不用
菌。（
灭
3）由于
物中
生了少量乙醇，明
酵液缺氧
产
产
说
发
导
致菌株H
行了无氧呼吸，最
菌株
进
终
H 由于能量供
不足而使得其
胞增殖和
应
细
PHA 的
量均未达到
期，所以
酵条件中氧气可能是高密度培养的限制因素。
产
预
发
（4）餐厨垃圾主要含有蛋白
、淀粉、油脂等，菌株
质
H 能利用餐厨垃圾来生产
PHA，
明其能分泌蛋白
、淀粉
、脂肪
，
有与
说
酶
酶
酶
还
PHA 合成相关的
。
酶
课后·分层训练
（
：
时间
35 分
）
钟
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考点一 微生物的培养技术及应用
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1.（2022·北京
区期末）
顺义
有关培养基配制原则的表述正确的是（ ）
A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水以及无机盐
B.碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素
C.有的培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求
D.营养物质的浓度越高越好
答案 C
解析 培养基一般都含有碳源、氮源、无机
和水等
养物
，而分离自生固氮菌
盐
营
质
的培养基中，不需要加入氮源，A
；碳源和氮源必
具有一定比例，但碳元素
错误
须
的含量不一定最多，自养型微生物的培养基不需要加入碳源，B
；养物
的
错误营
质
度
高可能会造成微生物渗透失水死亡，
浓
过
D
。
错误
2.（2020·江
卷，
苏
19）为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养
结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
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A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整
B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落
C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色
答案 B
解析 倒平板后无需
歇晃
，
间
动A
；中
错误图
Ⅰ区、Ⅱ区的
菌数量均太多，
细
Ⅲ区
的
菌数量
少
细
较
，可从Ⅲ区挑取
菌落，
单
B 正确；Ⅲ区中存在
菌落，
果
单
该实验结
能达到菌种
化的目的，
纯
C
；果
能与
素形成
色复合物，但不能和
错误刚
红
纤维
红
纤
素水解后的
二糖和葡萄糖形成
色复合物，因此菌落周
的
素被降解
维
纤维
红
围
纤维
后，不能被
果
染成
色，
刚
红
红
D
。
错误
3.（2022·广
珠海
研）
东
调
下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，
下列说法不正确的是（ ）
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A.①步骤使用的培养基是已经调节过pH 并灭菌的培养基
B.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
C.③到④的过程中，接种环共灼烧了5 次
D.④步骤操作时，不能将第1 区和第5 区的划线相连
答案 C
解析 ①步
表示倒平板，在倒平板之前培养基已
骤
经调节过pH 并
菌，
灭过
A 正确；
①②③步
操作
需要在酒精灯火焰旁
行，防止
菌
染，
骤
时
进
杂
污
B 正确；接种
在每
环
次划
前和接种
束后都要通
灼
来
菌，所以
线
结
过
烧
灭
③到④的
程中
过
5 次划
操作
线
前都要灼
菌，接种
束后
需灼
菌
烧灭
结
还
烧灭
1 次，防止造成
染，由此可
，
污
见③到
④的
程中共需灼
接种
过
烧
环6 次，C
；
错误
④步
操作
，不能将第
骤
时
1 区和第5 区
的划
相
，否
就达不到稀
的目的，不能得到由
个活菌繁殖而来的菌落，
线
连
则
释
单
D
正确。
4.（2022·河北唐山期中）马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛选，其配制过程如下：
将马铃薯去皮切块，加水煮沸至其软烂，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液
中加入一定量琼脂，用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的是（ ）
A.应在培养基中加入链霉素，以抑制细菌的生长
B.除碳源外，马铃薯浸出液还提供氮源和无机盐
C.氮源进入细胞后，可参与合成核苷酸等物质
D.加入碘液后，周围为蓝色的菌落一般能产生淀粉酶
答案 D
解析
霉素能抑制
菌的生
，因此在培养基中加入
霉素后可以
真菌，
链
细
长
链
筛选
A
正确；各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机
，培养基中的
薯浸出液除
盐
马铃
了
微生物生
提供碳源外，可提供的
养物
有氮源和无机
，
为
长
还
营
质
盐B 正确；核苷
酸含有氮元素，因此氮源
入
胞后，可参与合成核苷酸等物
，
进
细
质C 正确；淀粉遇
碘液显蓝色，
淀粉
的菌落周
淀粉被水解，会形成透明圈，
产
酶
围
D
。
错误
考点二 微生物的选择培养和计数
5.（2021·1 月
考江
卷，
联
苏
14）平板涂布是分离菌种常用的方法，下列相关叙述不
恰当的是（ ）
A.固体培养基灭菌后，应冷却至50 ℃左右时倒平板
B.倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影响菌的生长
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C.平板涂布分离到的单菌落需进一步划线纯化
D.平板涂布法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数
答案 B
解析 培养基
菌后需要冷却至
灭
50°C 左右
才能用来倒平板，温度
高易
手，
时
过
烫
温度
低易凝固，
过
A 正确；倒好的平板需要放置一段
，用以
察培养基是否被
时间
观
菌
染，
杂
污
B
；平板涂布法分离的
菌落需要用划
法
行
化培养，
错误
单
线
进
纯
C 正确；
平板涂布法可以
数，也可
察菌落特征
行菌种分离，
计
观
进
D 正确。
6.（2022·湖北仙桃期末改
）
编
如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实
验中样品稀释示意图。请据图分析，下列说法错误的是（ ）
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\F252.TIF" \* MERGEFORMATINET
A.③号试管的稀释倍数为103
B.④号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为⑤号试管的10 倍
C.⑤号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109
D.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧冷却后，再进行涂布
答案 A
解析 ③号
管的稀
倍数是
试
释
104，A
；
错误
④号
管中稀
液
行平板培养，稀
试
释
进
倍数是
释
⑤号
管
试
的1/10，如果稀
倍数适当，得到的菌落平均数可能是
释
⑤号试
管的10 倍，B 正确；⑤号
管利用稀
涂布平板法
数的
果表明每克土壤中的
试
释
计
结
菌株数（
为168＋175＋167）÷3÷0.1×105×100÷10＝1.7×109，C 正确；将涂布器在
酒精灯火焰上灼
冷却后再
行涂布，以免温度
高
死
菌，
烧
进
过
杀
细
D 正确。
7.（2022·
北育才学校
考）
东
联
下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌
的过程示意图，有关叙述错误的是 （ ）
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\F253.TIF" \* MERGEFORMATINET
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A.在配制步骤②③的培养基时，应先调pH 再进行高压蒸汽灭菌
B.步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
C.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
答案 C
解析 配制培养基
，
先
时
应
调pH 再
行高
蒸汽
菌，
进
压
灭
A 正确；步骤③
化分解
纯
尿素的
菌的原理是将聚集的
菌通
稀
涂布平板法分散
细
细
过
释
，得
胞菌落，
获
单细
B
正确；步骤③
分解尿素的
菌，培养基中
以尿素
唯一氮源，
筛选
细
应
为
C
；步
错误
骤
④挑取③中不同种的菌落分
接种，比
菌分解尿素的能力，
别
较细
D 正确。
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\提升练.TIF" \* MERGEFORMATINET
8.（2022·江
南通期中）
苏
牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要
用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，
进行了如图所示操作。请回答下列问题。
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\F254.TIF" \* MERGEFORMATINET
图1
（1）牛奶用巴氏消毒法消毒的好处是_____________________________________。
（2）图1 所用培养基在灭菌过程中，需用到高压蒸汽灭菌锅。下面是关于高压蒸汽
灭菌锅使用过程中的操作，正确的先后顺序是①② ④⑧⑨。（有的步骤可
重复操作）
①装入待灭菌物品 ②加盖 ③加热灭菌锅 ④打开排气阀 ⑤关闭排气阀 ⑥
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切断电源 ⑦压力表的压力降到零 ⑧打开盖子 ⑨取出灭菌物品
（3）取最终的牛奶稀释液0.1 mL 在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2 中的
。
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\F255.TIF" \* MERGEFORMATINET
图2
（4）图1 所示方法为稀释涂布平板法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表
面形成菌落。若用该方法培养设置了5 个培养皿，菌落数分别为12、65、63、64、
196，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为 个，运用这种方法统计的结
果往往较实际值
（填“大”或“小”），如果培养基上出现 的菌
落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌，应采用图3 中
（填字母）所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧
次。
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\F256.TIF" \* MERGEFORMATINET
图3
答案 （1）不破坏牛奶的营养成分 （2）③④⑤⑥⑦ （3）B （4）6.4×107 小
（形状、大小、颜色）不同 （5）B 5
解析 （1）巴氏消毒法是指62～65 ℃消毒30 min 或80～90 ℃
理
处
30 s～1 min，
使用
种方法
牛奶
行消毒的好
是不破坏牛奶的
养成分。（
这
对
进
处
营
2）高
蒸汽
压
灭
菌操作步
：
骤①装入待
菌物品，
灭
②加盖，③加
菌
，
热灭
锅④打开排气
，
阀⑤关
排
闭
气
，
阀⑥切断
源，
电
⑦
力表的
力降到零，
压
压
④打开排气
，
阀⑧打开盖子，⑨取出灭
菌物品。（3）图2 中A
接种
，
为
环B
涂布器，
为
C
滴管，
为
D
接种
。将牛奶稀
为
针
释
液在培养基上
行涂布的方法是稀
涂布平板法，所用的接种工具是涂布器，即
进
释
图2 中的B。（4）5 个培养皿中有2 个的菌落数（12、196）相差太大，可舍弃。据图
分析，中
图
10 mL 酸奶稀
了
释
105倍，最后取了10 mL 稀
液中的
释
0.1 mL，因此每
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毫升酸奶中所含
菌数（
细
为65＋63＋64）÷3÷0.1×104×100÷10＝6.4×107个。由于
此方法接种培养
，当两个或多个菌落重叠在一起
按一个菌落
算，所以运
经
时
时
计
用
种方法
的
果往往
这
统计
结
小。如果培养基上出（形状、大小、色）不
较实际值
现
颜
同的菌落，明自制酸奶已被
菌
染。（
说
杂
污
5）要
一步分离
化乳酸菌，采用平
进
纯
应
板划
法
行操作，
线
进
图3 中操作正确的是B；接种
在每次接种前和接种
束后都
环
结
要通
灼
来
菌，即
过
烧
灭
图3 B 中的4 次划
操作前都要灼
菌，接种
束后
需
线
烧灭
结
还
灼
菌
烧灭
1 次，避免
菌
染
境和感染操作者，因此完成划
共需灼
接种
细
污
环
线
烧
环5
次。
9.（2022·广
中山
研）
东
调
鲸死亡后会沉入海底，俗称“鲸落”。“鲸落”后期会形成
一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为
食，同时产生一些硫化氢等硫化物，硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中
释放的能量合成有机物。请回答相关问题：
（1）培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源，培养“鲸落”
群落中厌氧菌的碳源必须是 。要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊
配制，主要体现在 ，这种培养基可以用来专一性培养
硫细菌，所以称为 培养基。
（2）在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基，在倒平板操作后，将平板倒
置，这样做的目的是_____________________________________________
_________________________________________________________。
（3）为了研究“鲸落”中含有微生物的情况，需将“鲸落”提取物加水稀释，然后
将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为
。下面所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是 。
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
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（4）若想得到“鲸落”中某目标菌种，可用平板划线法进行纯化。若下图甲是接种
培养后的菌落分布图，对应的平板划线操作示意图为 。图甲中的③更易
获得单菌落，判断依据是___________________________________
________________________。
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答案 （1）含碳有机物（或脂肪） 碳源必须是含碳无机物（或碳酸盐），同时加入
硫化物 选择 （2）防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染；防止培养
基中水分过快挥发 （3）稀释涂布平板法 D （4）丙 每次划线的菌种都来自
上一次划线的末端，最后一次划线结束时更容易获得单菌落
解析 （1）
氧菌以
厌
“
落
鲸
”肌肉中的脂肪
食，属于异养微生物，故培养
为
“鲸
落”群落中
氧菌的碳源必
是含碳有机物（或脂肪）。硫
菌将硫化物氧化成硫
厌
须
细
酸
，并以
程中
放的能量合成有机物
盐
该过
释
.即硫
菌
自养生物，所以要培养硫
细
为
菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体
在碳源必
是含碳无机物（或碳酸
细
现
须
），同
加入硫化物。种人
提供有利于目的菌株生
的条件（包括
养、温度
盐
时
这
为
长
营
pH 等），同
抑制或阻止其他微生物生
的培养基称
培养基
时
长
为选择
。（3）使用涂布
器涂布接种微生物的方法
稀
涂布平板法。稀
涂布平板法接种的微生物会在
为
释
释
培养基上形成均匀分布的菌落，而平板划
法接种的微生物在划
的起始部分菌
线
线
落
在一起生
，由
可知，
连
长
图
A、B、C 均形成了均匀分布的
个菌落，属于稀
涂
单
释
布平板法接种的，而D 中菌落是
在一起生
的，是通
平板划
法接种的。
连
长
过
线
10.（2022·重
一中
研）
庆
调
大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物
能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：
成分
蛋白胨
乳糖
磷酸二氢钾
琼脂
含量
10 g
10 g
2 g
20～30 g
成分
蒸馏水
2%的伊
红水溶液
0.5%的美
蓝水溶液
含量
1 000 mL
20 mL
13 mL
回答下列问题：
（1）该培养基中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有 和维生素等。
（2）在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，
观察是否有菌落生成，其目的是 。
（3）为了检测严重污染的水体中大肠杆菌的数量，将水样适当稀释后，取样涂布在
上述平板培养基中，应选择颜色为 的菌落进行计数。该方法是
通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是
______________________________________________________。
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（4）将1 mL 水样稀释1 000 倍，在3 个平板上用涂布法分别接入0.1 mL 稀释液；
经适当培养后，3 个平板上的菌落数分别为39、38 和37。据此可得出每升水样中
的活菌数为________________________________________________。
（5）除利用特定培养基选择鉴定某种细菌外，还可以依据 对细
菌进行初步的鉴定和分类。
答案 （1）氮源 （2）检测培养基制备是否合格（或灭菌是否彻底） （3）黑色
当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一
个活菌 （4）3.8×108 （5）菌落的形状、大小等菌落特征
解析 （1）蛋白
主要
大
杆菌提供氮源和
生素等。
（
胨
为
肠
维
2）了
培养基制
为
检测
备
是否合格（或
菌是否
底），在接种大
杆菌前，需先将
菌后的空白培养基放
灭
彻
肠
灭
在恒温箱中培养一段
，察是否有菌落生成。（
时间观
3）大
杆菌的代
物能与培
肠
谢产
养基中的染料伊
美
反
红
蓝
，使菌落呈黑色，因此，了
重
染水体中大
应
为
检测严
污
肠
杆菌的数量，将水
适当稀
后，取
涂布在上述平板培养基中，
色
黑
样
释
样
应选择颜
为
色的菌落
行
数。当
品的稀
度足
高
，培养基表面生
的一个菌落来源
进
计
样
释
够
时
长
于
品稀
液中的一个活菌，因此可通
平板上的菌落数来推
品中的活
样
释
过统计
测样
菌数。（4）将1 mL 水
稀
样
释1 000 倍，在3 个平板上用涂布法分
接入
别
0.1 mL 稀
液；适当培养后，
释
经
3 个平板上的菌落数分别为39、38 和37，据此可得出每升水
中的活菌数
样
为[（39＋38＋37）÷3]÷0.1×1 000×1 000＝3.8×108。（5）一般来
，
说
在一定的培养条件下，同种微生物表
出
定的菌落特征，因此可以依据菌落的
现
稳
形状、大小等菌落特征
菌
行初步的
定和分
。
对细
进
鉴
类
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