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热点微练21 微生物的培养与应用（尖子生特训）
（
：
时间
10 分
）
钟
1.（2022·广
湛江
研）
东
调
研究发现土壤中的一种极毛杆菌，能够以3，4二甲苯酚为
碳源，对土壤残留农药中的该成分有较好的降解作用。请回答：
（1）某兴趣小组欲从土壤中筛选出能高效降解3，4二甲苯酚的极毛杆菌菌株，分
离极毛杆菌的土样应来自 土壤，在配制筛选极毛杆菌的培养基
时对其碳源的选择应 ，在实验室一般采用 法对配制的
培养基进行灭菌。
（2）分离纯化极毛杆菌时，首先需要用 对土壤浸出液进行梯度稀释的理
由是_____________________________________________，
该分离纯化方法为 。若采用平板划线法分离土样中的极毛杆菌，在第二
次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是
_______________________________________________________________。
（3）为了统计土壤浸出液中极毛杆菌的总数，他们选用104、105、106稀释倍数的稀
释液进行涂布，每种稀释液都设置了3 个培养皿。为了保证实验的准确性，还应设
置的一组对照实验是
。
答案 （1）3，4二甲苯酚含量高的 以3，4二甲苯酚为唯一碳源 高压蒸汽灭菌
（2）无菌水 土壤浸出液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落，同时用无
菌水可以防止杂菌污染 稀释涂布平板法 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个
菌落 （3）不接种的空白培养基
解析 （1）
目的菌
，从含
菌丰富的土壤中采集土
，极毛杆菌
土壤残
筛选
时应
该
样
对
留
中的
农药
3，4二甲苯酚有
好的降解作用，因此
从
物
含量高的土
较
应
该
质
壤取
。
样
某种微生物的
培养基
有利于
种微生物生存，而不利于其他微生物生
筛选
选择
应
该
存，极毛杆菌能
以
够
3，4二甲苯酚
碳源，因此配制
极毛杆菌的培养基
以
为
筛选
时应
3，4二甲苯酚
唯一碳源，
室
培养基
行
菌常用的方法是高
蒸汽
菌
为
实验
对
进
灭
压
灭
法。（2）分离
化极毛杆菌
，首先需要用无菌水
土壤浸出液
行梯度稀
，
纯
时
对
进
释这
既可避免
菌
染，又可将极毛杆菌分散，以便在培养基表面形成
个菌落。利
样
杂
污
单
用系列梯度稀
的方法
微生物
行分离
化属于稀
涂布平板法。利用平板划
释
对
进
纯
释
法分离
菌
，在做第二次及以后的划
，
是从上一次划
的末端开
线
该
时
线时
总
线
始划
，
可以将聚集的菌体逐步稀
以便得到
个菌落。
线
这样
释
单
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1
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（3）通
稀
涂布平板法
数
菌
，需要
置一
空白
照
，即不接种的空白
过
释
计
该
时
设
组
对
组
培养基。
2.（2022·河北衡水二中
研）
调
阅读下列材料，回答下列问题。
甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，其风味受发酵过程中微生物产生的代谢产物的影响。
其生产工艺如图所示。
――→――→――→
（1）从蚕豆瓣到甜瓣子，蚕豆中的成分会发生一定的变化，其中的蛋白质转变为
，该发酵过程需要控制的发酵条件有 （答出两点即可）
（2）甜瓣子制作过程中，加盐水的作用是___________________________。
（3）如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌是
。
（4）如果在制作过程中，发现20 h 内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上
升趋势，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是
__________________________________________________________。
答案 （1）氨基酸和小分子肽 发酵的温度、pH、O2浓度及发酵时间 （2）调味，
同时也可杀菌防腐 （3）好氧菌 （4）延长发酵时间，观测发酵效果，最好的发酵
效果所对应的时间即为最佳发酵时间
解析 （1）从蚕豆瓣到甜瓣子，蚕豆中的成分会
生一定的
化，其中的蛋白
发
变
质转
小分子
和氨基酸，
酵
程需要控制的
酵条件有
酵的温度、
变为
肽
该发
过
发
发
pH、O2
度及
酵
等。（
浓
发
时间
2）在甜瓣子制作
程中，加
水既可起
味作用，同
也有
过
盐
调
时
菌防腐作用。
（
杀
3）如果
酵容器内上（含氧多）大豆的
酵效果比底（含
发现发
层
发
层
氧少）的好，
明
酵菌是好氧菌。（
说
该发
4）如果在制作
程中，
过
发现
20 h 内的
酵效果越来越好，且随
酵
呈直
上升关系，
无法确定
酵的
发
发
时间
线
则
发
最佳
；若要确
时间
定最佳
酵
，
延
酵
，
酵效果，最好的
发
时间应继续
长发
时间观测发
酵效果所
的
即
最佳
酵
。
发
对应
时间
为
发
时间
3.（2021·1 月
考广
卷，
联
东
21）几丁质广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的外骨
骼和真菌的细胞壁中。某些微生物能合成几丁质酶（胞外酶），使几丁质降解为N
乙酰氨基葡萄糖，然后进一步转化利用。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降
解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。回答下列问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体选
择性培养基上筛选目标菌株。
（2）培养所筛选出的目标菌株，计算各单菌落周围的“水解圈直径/菌落直径”的
比值，比值大小反映了_____________________________________________。
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（3）科研人员筛选出了产几丁质酶的菌株A。将菌株A 发酵产生的几丁质酶粗提
液加入到盛有马铃薯培养基的培养皿中，涂布均匀后分别接种4 种病原真菌，以
代替几丁质酶粗提液作为对照，结果见下图，几丁质酶粗提液对 的抑
菌效果最强（填入病原菌编号）。推测几丁质酶的抑菌机理是
____________________________________________。
INCLUDEPICTURE "E:\\丁苗苗\\课件\\一轮\\2023 版 创新设计 高考总复习
生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\21S6+.TIF" \* MERGEFORMATINET
答案 （1）几丁质 （2）目标菌株对几丁质的降解能力
（3）等量的无菌水 d 几丁质酶通过水解真菌细胞壁，抑制真菌的繁殖
解析 （1）科研人
从土壤中
出能高效降解几丁
的菌株，
将土壤
员试图
筛选
质
应
样
品稀
液接种于以几丁
唯一碳源的
培养基上，在
培养基上只有可以利
释
质为
选择
该
用几丁
的微生物可以大量繁殖，其他不能利用几丁
的微生物的生
繁殖被抑
质
质
长
制。（2）水解圈直径/菌落直径可以反映目
菌株
几丁
的降解能力，水解圈直
标
对
质
径/菌落直径越大，明
菌降解几丁
能力越
，反之越弱。（
说
该
质
强
3）对照组实验应满
足
一
量原
，
添加几丁
粗提液，照
加入等量的无菌水，
单
变
则实验组
质酶
对
组
对4 组
行
察比
，
实验进
观
较d
水解圈直径
组
/菌落直径最大，即抑菌效果最
。几丁
是真
强
质
菌
胞壁的
成成分，几丁
水解几丁
可破坏真菌的
胞壁，抑制真菌的繁
细
组
质酶
质
细
殖。
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