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热点微练 21 微生物的培养与应用（尖子生特训）
（时间：10分钟）
1（. 2022·广东湛江调研）研究发现土壤中的一种极毛杆菌，能够以3，4二甲苯酚为
碳源，对土壤残留农药中的该成分有较好的降解作用。请回答：
（1）某兴趣小组欲从土壤中筛选出能高效降解3，4二甲苯酚的极毛杆菌菌株，分
离极毛杆菌的土样应来自 土壤，在配制筛选极毛杆菌的培养基
时对其碳源的选择应 ，在实验室一般采用 法对配制的
培养基进行灭菌。
（2）分离纯化极毛杆菌时，首先需要用 对土壤浸出液进行梯度稀释的理
由是_____________________________________________，
该分离纯化方法为 。若采用平板划线法分离土样中的极毛杆菌，在第二
次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是
_______________________________________________________________。
（3）为了统计土壤浸出液中极毛杆菌的总数，他们选用104、105、106稀释倍数的稀
释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。为了保证实验的准确性，还应设
置的一组对照实验是 。
答案 （1）3，4二甲苯酚含量高的 以3，4二甲苯酚为唯一碳源 高压蒸汽灭菌
（2）无菌水 土壤浸出液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落，同时用无
菌水可以防止杂菌污染 稀释涂布平板法 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个
菌落 （3）不接种的空白培养基
解析 （1）筛选目的菌时，应从含该菌丰富的土壤中采集土样，极毛杆菌对土壤残
留农药中的3，4二甲苯酚有较好的降解作用，因此应从该物质含量高的土壤取样。
筛选某种微生物的选择培养基应有利于该种微生物生存，而不利于其他微生物生
存，极毛杆菌能够以3，4二甲苯酚为碳源，因此配制筛选极毛杆菌的培养基时应以
3，4二甲苯酚为唯一碳源，实验室对培养基进行灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌
法。（2）分离纯化极毛杆菌时，首先需要用无菌水对土壤浸出液进行梯度稀释，这
样既可避免杂菌污染，又可将极毛杆菌分散，以便在培养基表面形成单个菌落。利
用系列梯度稀释的方法对微生物进行分离纯化属于稀释涂布平板法。利用平板划
线法分离该菌时，在做第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划
线，这样可以将聚集的菌体逐步稀释以便得到单个菌落。（3）通过稀释涂布平板法计数该菌时，需要设置一组空白对照组，即不接种的空白
培养基。
2.（2022·河北衡水二中调研）阅读下列材料，回答下列问题。
甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，其风味受发酵过程中微生物产生的代谢产物的影响。
其生产工艺如图所示。
――→――→――→
（1）从蚕豆瓣到甜瓣子，蚕豆中的成分会发生一定的变化，其中的蛋白质转变为
，该发酵过程需要控制的发酵条件有 （答出两点即可）
（2）甜瓣子制作过程中，加盐水的作用是___________________________。
（3）如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌是
。
（4）如果在制作过程中，发现20 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上
升趋势，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是
__________________________________________________________。
答案 （1）氨基酸和小分子肽 发酵的温度、pH、O 浓度及发酵时间 （2）调味，
2
同时也可杀菌防腐 （3）好氧菌 （4）延长发酵时间，观测发酵效果，最好的发酵
效果所对应的时间即为最佳发酵时间
解析 （1）从蚕豆瓣到甜瓣子，蚕豆中的成分会发生一定的变化，其中的蛋白质转
变为小分子肽和氨基酸，该发酵过程需要控制的发酵条件有发酵的温度、pH、O
2
浓度及发酵时间等。（2）在甜瓣子制作过程中，加盐水既可起调味作用，同时也有
杀菌防腐作用。（3）如果发现发酵容器内上层（含氧多）大豆的发酵效果比底层（含
氧少）的好，说明该发酵菌是好氧菌。（4）如果在制作过程中，发现
20 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的
最佳时间；若要确定最佳发酵时间，应继续延长发酵时间，观测发酵效果，最好的
发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间。
3.（2021·1月联考广东卷，21）几丁质广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的外骨
骼和真菌的细胞壁中。某些微生物能合成几丁质酶（胞外酶），使几丁质降解为N-
乙酰氨基葡萄糖，然后进一步转化利用。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降
解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。回答下列问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体选
择性培养基上筛选目标菌株。
（2）培养所筛选出的目标菌株，计算各单菌落周围的“水解圈直径/菌落直径”的
比值，比值大小反映了_____________________________________________。（3）科研人员筛选出了产几丁质酶的菌株A。将菌株A发酵产生的几丁质酶粗提
液加入到盛有马铃薯培养基的培养皿中，涂布均匀后分别接种 4种病原真菌，以
代替几丁质酶粗提液作为对照，结果见下图，几丁质酶粗提液对 的抑
菌 效 果 最 强 （ 填 入 病 原 菌 编 号 ） 。 推 测 几 丁 质 酶 的 抑 菌 机 理 是
____________________________________________。
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生物学（配人教版）Q 新教材（琼津京…）\\21S6+.TIF" \* MERGEFORMATINET
答案 （1）几丁质 （2）目标菌株对几丁质的降解能力
（3）等量的无菌水 d 几丁质酶通过水解真菌细胞壁，抑制真菌的繁殖
解析 （1）科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，应将土壤样
品稀释液接种于以几丁质为唯一碳源的选择培养基上，在该培养基上只有可以利
用几丁质的微生物可以大量繁殖，其他不能利用几丁质的微生物的生长繁殖被抑
制。（2）水解圈直径/菌落直径可以反映目标菌株对几丁质的降解能力，水解圈直
径/菌落直径越大，说明该菌降解几丁质能力越强，反之越弱。（3）对照组实验应满
足单一变量原则，实验组添加几丁质酶粗提液，对照组加入等量的无菌水，对4组
实验进行观察比较，d组水解圈直径/菌落直径最大，即抑菌效果最强。几丁质是真
菌细胞壁的组成成分，几丁质酶水解几丁质可破坏真菌的细胞壁，抑制真菌的繁
殖。
