文档文本内容
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
第十单元 生物技术与工程
时间：75 分钟 分值：100 分
一、单项选择题（本题共12 个小题，每小题2 分，共24 分。每小题只有一个选项符合题目要求。）
1．下列有关传统发酵的叙述，正确的是（ ）
A．腐乳制作时，毛霉等多种微生物参与了发酵过程
B．泡菜制作时，形成的白色菌膜是乳酸菌聚集的结果
C．果酒发酸时，需要对原材料进行灭菌，以防杂菌污染导致发酵失败
D．果醋发酵时，缺氧和缺少糖源条件下，乙醇可作为发酵的底物
【答案】A
【详解】A、腐乳制作中，毛霉分泌的蛋白酶和脂肪酶分解豆腐中的大分子物质，同时其他微生物（如酵
母菌、霉菌等）也参与发酵，共同形成腐乳风味，A 正确；
B、泡菜制作时，乳酸菌为厌氧菌，主要在坛内液体中繁殖，表面白色菌膜可能由需氧的酵母菌形成，B
错误；
C、果酒发酸是因醋酸菌在有氧条件下将乙醇转化为醋酸，灭菌会杀死酵母菌，破坏发酵体系，且传统发
酵为混菌发酵，无需灭菌，C 错误；
D、果醋发酵需醋酸菌（好氧菌）在氧气充足条件下进行，若缺氧则无法利用乙醇；只有在氧气充足且糖
源不足时，乙醇才被转化为醋酸，D 错误。
故选A。
2．下列关于微生物的选择培养和计数方法，叙述错误的是（ ）
A．用营养齐全的培养基在80℃条件下培养栖热菌属于选择培养
B．不含氮源或碳源的培养基也能用于某些微生物的培养
C．加入抗生素且置于无氧环境下的培养基上生长的一定是厌氧微生物
D．菌液的稀释倍数会影响活菌计数法计数结果的准确度
【答案】C
【详解】A、用营养齐全的培养基在80℃下培养栖热菌属于选择培养，因为只有耐热的细菌才能在80℃下
存活，A 正确；
B、不含氮源的培养基可用于固氮微生物的培养，不含碳源的培养基可以用于自养型微生物的培养，B 正
确；
C、加入抗生素、无氧环境下的培养基筛选出的也可能是酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧真菌，C 错误；
D、含菌溶液的稀释倍数如果太低，多个菌落重叠，会导致无法计数，稀释倍数如果太高，则可能无法得
到菌落，所以菌液的稀释倍数会影响活菌计数法计数结果的准确度，D 正确。
故选C。
3．兰花是多年生草本植物，与梅、竹、菊并称“四君子”。下图为兰花的植物组织培养流程，①～④表
示相应过程。下列叙述正确的是（ ）
1
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
A．过程①是获取离体幼嫩枝条，用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液消毒
B．过程②发生了细胞的脱分化、有丝分裂和减数分裂
C．过程③诱导生芽培养基与诱导生根培养基相比，前者中细胞分裂素所占的比例更高
D．过程④是将培育形成的试管苗直接移栽入土
【答案】C
【详解】A、过程①是获取离体的未开花的幼嫩枝条，先用体积分数为70%的酒精消毒，无菌水冲洗2～3
次后，再用质量分数为 5% 左右的次氯酸钠溶液处理，再用无菌水清洗2～3 次，A 错误；
B、过程②形成的愈伤组织是一种固定形态的薄壁组织团，是脱分化过程，该过程发生的分裂方式主要是
有丝分裂，不存在减数分裂，B 错误；
C、过程③是诱导生芽培养基，与诱导生根培养基相比，前者中细胞分裂素所占的比例和用量更高，C 正
确；
D、过程④培育形成的试管苗要移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D 错
误。
故选C。
4．发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域都得到了广泛的应用，下列关于发酵工程的叙述
正确的是（ ）
A．啤酒发酵过程中糖的分解和代谢物的生成主要在后发酵阶段完成
B．谷氨酸的发酵生产过程中，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸
C．利用发酵工程生产酵母菌时，通过吸附发酵的方式将产物从培养液中分离
D．发酵工程的中心环节是分离、提纯产物来获得微生物细胞本身或其代谢产物
【答案】B
【详解】A、啤酒发酵过程中糖的分解和代谢物的生成主要在主发酵阶段完成，A 错误；
B、谷氨酸的发酵生产在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸；在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰
谷氨酰胺，B 正确；
C、发酵工程生产酵母菌的目的是获得酵母菌细胞本身，通过过滤、沉淀等方式将菌体分离和干燥，即可
得到产品，C 错误；
D、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，D 错误。
故选B。
5．下列关于生物技术实验操作的叙述，正确的是（ ）
A．平板划线法中通过连续划线使聚集的菌种稀释分散
B．动物细胞和囊胚的培养都要放在充满 CO2 的培养箱中进行
C．诱导形成愈伤组织的过程必须光照培养，以进行光合作用合成有机物
D．将扩增得到的 PCR 产物进行凝胶电泳时，加样前应先接通电源
2
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
【答案】A
【详解】A、平板划线法通过多次在不同区域划线，每次灼烧接种环以稀释菌种，最终得到单菌落，A 正
确；
B、动物细胞培养需5% CO₂ 维持pH，而囊胚培养（如胚胎工程）同样需要5% CO₂ 环境，B 错误；
C、愈伤组织诱导需避光条件（避免分化），且其不含叶绿体无法进行光合作用，C 错误；
D、凝胶电泳应先加样至点样孔，再接通电源。若先通电，加样时DNA 会扩散，D 错误。
故选A。
6．生物学中的“转化”可以有多种特定含义。下列叙述正确的是（ ）
A．基因工程中的转化是指目的基因进入受体细胞内的过程
B．iPS 细胞可以由已分化的 T 细胞、B 细胞转化而来
C．艾弗里利用肺炎链球菌进行转化实验，证明 DNA 是主要的遗传物质
D．在 ATP 与 ADP 相互转化过程中，物质和能量均是可逆的
【答案】B
【详解】A、基因工程中的转化是指目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，
不只是进入受体细胞内，A 错误；
B 、iPS 细胞（诱导多能干细胞）可以由已分化的 T 细胞、B 细胞等体细胞经过诱导重编程转化而来，
B 正确；
C、艾弗里利用肺炎链球菌进行转化实验，证明 DNA 是遗传物质，而 “DNA 是主要的遗传物质” 是综
合了多个实验及研究得出的结论，不是艾弗里这一个实验证明的，C 错误；
D、在 ATP 与 ADP 相互转化过程中，物质是可逆的，但能量是不可逆的，因为 ATP 水解释放的能量用
于各项生命活动，合成 ATP 的能量来自呼吸作用或光合作用等，D 错误。
故选B。
7．如图是利用基因工程技术培育抗除草剂作物的部分过程，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I 为四种限制
酶，且切割DNA 分子后形成的末端均不同。下列说法正确的是（ ）
A．图示质粒分子在Sma I 切割前后分别含有0 或1 个游离的磷酸基团
B．培育抗除草剂作物的核心是将含bar 基因的表达载体导入受体细胞
C．可选用Pst I 和EcoR I 切割质粒和bar 基因，确保目的基因正确插入
D．利用PCR 技术可从分子水平检测bar 基因是否翻译出抗除草剂蛋白
3
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
【答案】C
【详解】A、质粒为环状DNA，Sma I 切割后形成线性DNA，含2 个游离磷酸基团，A 错误；
B、基因工程核心是构建基因表达载体，B 错误；
C、Pst I 和EcoR I 切割可避免质粒自身环化和目的基因反向连接，C 正确；
D、PCR 检测目的基因是否导入，抗原-抗体杂交检测是否翻译，D 错误。
故选C。
8．与哺乳动物睡眠节律调控有关的基因PER2 发生突变会导致睡眠紊乱，利用PCR 技术可扩增PER2 基
因。下列叙述错误的是（ ）
A．为了激活耐高温DNA 聚合酶的活性，PCR 反应缓冲液中一般要添加Mg2+
B．变性过程中双链DNA 的解开不需要解旋酶
C．子链的延伸方向是3'端→5'端，新形成的子链与模板链之间将形成氢键
D．若扩增PER2 基因的过程中出现较多非目的基因片段，可能是引物过短造成
【答案】C
【详解】A、Mg2+可作为激活剂，PCR 反应的缓冲液中需添加Mg2+，用于激活耐高温的DNA 聚合酶，A
正确；
B、变性过程中，双链DNA 的解开不需要解旋酶，该过程通过高温使DNA 双链间的氢键断裂而解旋，B
正确；
C、子链的延伸方向是5'端→3'端，C 错误；
D、引物过短，引物的特异性差，可能会和非目的基因片段结合，导致PCR 结果出现较多非目的基因片
段，D 正确。
故选C。
9．科学家利用双杂交瘤细胞法制备出了双特异性抗体，通过将两种分泌不同抗体的杂交瘤细胞融合，得
到能同时表达两种抗体的双杂交瘤细胞，进而制备识别两种抗原的双特异性抗体。由骨髓瘤细胞和 B 淋
巴细胞制备能产生特异性抗体的杂交瘤细胞需先后用到 HAT 培养基（筛选出杂交瘤细胞）、96 孔板等，
以获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。据图分析，不考虑特殊情况，下列叙述正确的是（ ）
A．①过程需要先后用到 HAT 培养基、96 孔板等
B．人体内的浆细胞不能产生识别 2 种抗原的抗体
C．传代培养杂交瘤细胞 AB 时，必须用到胰蛋白酶
D．②过程分泌的 3 种抗体都是在核糖体上直接形成的
【答案】B
4
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
【详解】A、HAT 培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞，而①过程目的是促进亲本杂交瘤细胞融合，A 错
误；
B、人体内的每一个浆细胞只能产生一种抗体，且每种抗体只能识别 1 种抗原，故人体内的浆细胞不能产
生识别 2 种抗原的抗体，B 正确；
C、杂交瘤细胞通常具有悬浮生长的特点，若利用悬浮培养法培养杂交瘤细胞 AB，传代培养时，无需用
到胰蛋白酶，且普通细胞传代培养时，也可以使用胶原蛋白酶，胰蛋白酶并非必须使用，C 错误；
D、核糖体是蛋白质的合成车间，抗体属于分泌蛋白，形成需先后经过核糖体、内质网和高尔基体三种细
胞器，D 错误。
故选B。
10．（2025·江西·高考真题）诱导多能干细胞(ips 细胞)在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利用
多种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得ips 细胞。下列叙述错误的是（ ）
A．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B．小鼠胎儿成纤维细胞形成ips 细胞的过程属于细胞分化
C．利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D．培养小鼠胎儿成纤维细胞和ips 细胞时需提供一定浓度的CO2
【答案】B
【详解】A、小分子化合物通过调控基因表达使成纤维细胞重编程为ips 细胞，改变了原有基因表达模式，
A 正确；
B、成纤维细胞形成ips 细胞的过程是逆分化（去分化），而非细胞分化，B 错误；
C、胰蛋白酶可分解细胞间质蛋白，使组织分散为单个细胞，符合动物细胞培养操作，C 正确；
D、动物细胞培养通常需要5% CO2 以维持培养液pH，成纤维细胞和ips 细胞培养均需此条件，D 正确。
故选B。
11．（2025·江西·高考真题）为了获得抗白叶枯病的水稻品种，研究人员构建了含有抗病基因D 的重组Ti
质粒(如图)，通过农杆菌转化法将D 基因导入水稻种子诱导的愈伤组织，最终获得抗病植株。下列叙述正
确的是
A．水稻愈伤组织细胞中RNA 聚合酶无法识别U6 启动子
B．在含重组Ti 质粒的农杆菌中U6 启动子不能驱动卡那霉素抗性基因表达
C．农杆菌侵染愈伤组织后所用的筛选培养基中需加入卡那霉素
D．愈伤组织再分化获得的含有D 基因的幼苗属于抗病植株
【答案】B
5
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
【详解】A、将T - DNA 整合到水稻愈伤组织的染色体DNA 后，若要使D 基因表达并使水稻植株表现出抗
病性状。那么D 基因上游的U6 启动子需被水稻愈伤组织细胞中RNA 聚合酶识别， A 错误；
B、启动子是一段有特殊序列结构的DNA 片段，位于基因的上游，它是RNA 聚合识别和结合的部位，并
能够驱动基因转录出mRNA，最终表达出蛋白质。由图得出，上述重组Ti 质粒中的U6 启动子并非位于卡
那霉素抗性基因的上游，因而不能驱动卡那霉素抗性基因的表达， B 正确；
C、愈伤组织多指将植物体的某一组织、器官置于特定培养基中培养，诱导产生的无定形的组织团块，当
农杆菌侵染愈伤组织后，T - DNA 整合到水稻细胞染色体的DNA 中 ，通常情况下，若D 基因能表达，那
么T - DNA 上的潮霉素抗性基因也能表达，从而使得导入T - DNA 的水稻愈伤组织具有潮霉素抗性基因；
卡那霉素抗性基因不位于T - DNA 上，不会发生上述生理过程。因此，在农杆菌侵染愈伤组织后所用的筛
选培养基中需加入潮霉素， C 错误；
D、 检测是否成功获得转基因品种一般需要经历两个阶段，首先是分子水平的检测，包括检测目的基因是
否导入宿主细胞、检测在宿主细胞中目的基因是否转录出mRNA 或最终表达出蛋白质，其次，还需要进行
个体生物学水平的鉴定。因此愈伤组织再分化获得的含有D 基因的幼苗不一定是抗病植株， D 错误。
故选B。
12．随着生物技术的飞速发展，生物技术的安全性与伦理问题日益受到关注。下列相关叙述正确的是（
）
①基因编辑技术可能会引发“设计完美婴儿”等伦理争议，破坏人类遗传多样性
②转基因作物的种植可能会导致基因污染，对生态环境造成潜在威胁
③生殖性克隆人涉及伦理问题，而治疗性克隆不涉及伦理问题
④生物武器具有传染性强、危害大等特点，被国际社会严格禁止
A．①②④
B．①②③
C．②③④
D．①③④
【答案】A
【详解】①基因编辑技术若用于人类生殖细胞，可能通过人为选择特定基因改变后代遗传信息，导致基因
库单一化，破坏遗传多样性，并引发伦理争议，①正确；
②转基因作物的外源基因可能通过杂交扩散到野生植物中，造成基因污染，威胁生态系统的稳定性，②正
确；
③治疗性克隆虽以医疗为目的，但涉及胚胎的利用和销毁，仍存在伦理争议（如胚胎是否具有生命权），
③错误；
④生物武器具有强传染性和高危害性，国际社会通过《禁止生物武器公约》严格禁止其研发和使用，④正
确。
综上①②④正确，BCD 错误，A 正确。
故选A。
二、不定项选择题（本题共4 个小题，每小题4 分，共16 分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项
符合题目要求。全部选对的得4 分，选对但不全的得2 分，有选错的得0 分。）
13．精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生
长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛
6
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，培养至菌落不再增加时，平板上
的菌落如图所示。过程②向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关叙述错误的是（ ）
A．实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌
B．从培养基乙中挑选菌落，用平板划线法接种在培养基上可分离出单菌落
C．培养基甲是一种选择培养基，过程②向培养基甲中添加精氨酸
D．菌落A 是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，为鸟氨酸发酵的优良菌种
【答案】AD
【详解】A、培养皿可以采用干热灭菌，A 错误；
B、从培养基乙中挑选菌落，用平板划线法接种在固体培养基上可分离出单菌落，B 正确；
C、精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生
长，结合图分析可知，图甲平板上只有A 菌落，过程②向培养基甲中添加精氨酸后出现B 菌落，这说明培
养基甲中缺少精氨酸是一种选择培养基，C 正确；
D、菌落A 是野生型菌种，菌落B 为精氨酸依赖型菌株，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D 错误。
故选AD。
14．利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述错误的是（
）
A．细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成
B．培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌
C．芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体
D．紫杉醇属于次生代谢物，可通过细胞产物的工厂化生产来获取
【答案】BC
【详解】A、在植物组织培养中，细胞分裂素和生长素的比例会影响植物细胞的发育方向。当二者比例适
中时，有利于愈伤组织的形成，A 正确；
B、培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，而不是干热灭菌法。干热灭菌法常用于耐高温且需要保持干燥
的物品，如玻璃器皿、金属用具等，B 错误；
C、芽原基细胞虽然发生了基因的选择性表达，但仍含有该生物全套的遗传物质，具有全能性，可以用作
外植体，C 错误；
D、紫杉醇是红豆杉细胞产生的次生代谢物，可通过植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产来获取，D
正确。
故选BC。
15．蜘蛛丝具有较强的韧性，科学家推测，若将从蜘蛛中获取的蜘蛛丝蛋白基因植入山羊体内，使山羊奶
中含有蜘蛛丝蛋白，再利用特殊的纺丝程序，将山羊奶中的蜘蛛丝蛋白纺成人造基因蜘蛛丝，可用于制造
轻薄防弹衣。下列叙述正确的是（ ）
7
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
A．将蜘蛛丝蛋白基因的mRNA 逆转录，再进行PCR 可获得蜘蛛丝蛋白基因
B．蜘蛛丝蛋白基因需与山羊乳腺蛋白基因的启动子进行重组
C．用该过程培育出的转基因山羊受山羊年龄和性别的限制
D．若成功导入目的基因的转基因山羊并没有产生相应的蜘蛛丝蛋白，说明目的基因没有翻译
【答案】ABC
【详解】A、将蜘蛛丝蛋白基因的mRNA 逆转录成cDNA，再进行PCR 可获得蜘蛛丝蛋白基因，A 正确；
B、将蜘蛛丝蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建成表达载体，这样可以保证目的基因只
在乳腺组织中表达，B 正确；
C、该过程培育出的转基因山羊需为雌性且生长到一定年龄才能产乳，受年龄和性别的限制，C 正确；
D、若成功导入目的基因的转基因山羊并没有产生相应的蜘蛛丝蛋白，可能是因为目的基因没有转录，也
可能是目的基因转录形成的mRNA 没有翻译，D 错误。
故选ABC。
16．X 基因编码的X 蛋白在某动物的成纤维细胞中特异性表达。现设计实验使成纤维细胞中的X 基因被靶
向破坏，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得X 基因失活的克隆动物，操作过程如下图所示。
下列叙述错误的是（ ）
A．选择成纤维细胞作为核供体是因为其他体细胞中不存在X 基因
B．代孕母亲对移入子宫的外来胚胎会发生一定的免疫排斥反应
C．经核移植形成的重构胚用乙醇处理后可能会完成细胞分裂和发育进程
D．克隆动物除成纤维细胞不能合成X 蛋白外，其他性状与供核个体均相同
【答案】ABD
【详解】A、选择成纤维细胞作为核供体是因为其他体细胞中存在X 基因，而选择成纤维细胞中的X 基因
被破坏，且成纤维细胞分化程度较低，A 错误；
B、代孕母亲对移入子宫的外来胚胎不会发生免疫排斥反应，这是胚胎移植的理论基础，B 错误；
C、核移植完成后可用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构
胚，使其完成细胞分裂和发育进程，即经核移植形成的重构胚可用乙醇处理促进其完成细胞分裂和发育进
程，C 正确；
8
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
D、克隆动物的细胞核来自X 基因被破坏的成纤维细胞，因此，克隆动物的细胞中均不含X 基因，因而均
不能合成X 蛋白，D 错误。
故选ABD。
三、非选择题（共5 小题，共60 分）
17．（12 分，除标明外，每空2 分）合成塑料是一种非天然的石油基塑料，由于分子量过大而难以通过生
物膜被微生物降解。研究发现，某些昆虫的肠道内存在PE（一种合成塑料）降解细菌。现欲从昆虫的肠道
中筛选能够降解PE 的菌株，过程如下图所示。回答下列问题：
(1) 培养过程中，所使用的培养基中应加入 （1 分）作为唯一碳源，从功能上看，这种培养基属
于
（1 分）培养基。
(2)划线纯化过程中，接种环在每次划线前都要进行 （1 分）灭菌，且第二次及以后的划线总是从
上一次划线的末端开始的原因是 。
(3)若要研究筛选出的PE 降解细菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用 方法进行
计数，该估算方法的结果与实际值相比会 （1 分）（填“偏大”、“偏小”或“不变”），原因
是 。推测PE 降解细菌的种群数量变化是 。
【答案】(1) PE 选择
(2) 灼烧 使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终得到单个菌落
(3) 稀释涂布平板法 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
PE 降解细菌在一定范围内会增加，到一定限度后会下降
【详解】（1）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培
养基，称作选择培养基，本实验要筛选出PE（一种合成塑料）降解细菌，因此所使用的培养基中应加入
PE 作为唯一碳源。
（2）划线纯化过程中，接种环在每次划线前都要进行灼烧灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一
次划线的末端开始划线。这样做的目的是使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分离得到单个
菌落。
（3）若要研究筛选出的PE 降解细菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板法
进行计数，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比
活菌的实际数目少。由于培养基空间和营养物质是有限的，推测PE 降解细菌在一定范围内会增加，到一
定限度后会下降。
18．（10 分，每空2 分）两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色
9
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片
段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃
麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图1 所示。请回答下列问题：
(1)图1 在培育耐盐小麦过程中用到的生物学原理有 。过程③要用到的方法有
(物理法和化学法各举一例)。
(2)过程②紫外线的作用是 。
(3)以普通小麦、中间偃麦草及再生植株1~4 的基因组 DNA 为模板扩增出差异性条带，可用于杂种植株的
鉴定，结果如图2 所示。据图判断，再生植株1~4 中一定是杂种植株的有 ，判断依
据是 。
【答案】(1) 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 物理法：离心（或振动、电融合法），化学
法：聚乙二醇（PEG）融合法
(2)诱导中间偃草染色体断裂，便于片段整合到普通小麦染色体上
(3) 1、2、4 再生植株1、2、4 同时含有普通小麦和中间偃麦草的差异性条带，再生植株3 仅含
普通小麦条带
【详解】（1）图1 在培育耐盐小麦过程中③细胞融合用到了细胞膜的流动性原理，④过程将杂种细胞培育
成杂种植物，用到了植物细胞的全能性原理。③促进原生质体融合的手段有物理法和化学法，包括离心
法、电融合法、PEG 融合法、高Ca2+-高pH 融合法等。
（2）不同剂量的紫外线可导致细胞中染色体发生不同程度的变异，过程②紫外线的作用是使中间偃麦草
的染色体断裂，以便于断裂的片段整合到普通小麦染色体上。
（3）在电泳结果图中，1、2、4 号都同时含有普通小麦和中间偃麦草的DNA 片段，所以再生植株1~4 中
一定是杂种植株的是1、2、4；再生植株3 仅含普通小麦条带，其为普通小麦植株。
19．（14 分，每空2 分）科学家利用基因工程和胚胎工程等技术培养转人血清白蛋白（HAS）基因牛，该
10
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
种牛能生产含HAS 的牛乳。培育流程如下图所示，请据图回答下列问题：
(1)图中①过程需要的酶为 。若使转基因牛的乳汁中能提取到HAS，在②过程中所需做的重要操作是
。
(2)过程③导入的受体细胞一般是 ，导入的方法常用 。
(3)早期胚胎培养与动物细胞培养均需用到培养液，请分析这两种培养液成分上的不同之处： 。
(4)早期胚胎培养到 时期时移植到代孕母牛体内，移植前要取早期胚胎细胞进行性别鉴定，此时应
取 细胞进行检测，以减少对胚胎的不良影响。
【答案】(1) 逆转录酶 将人血清白蛋白（HAS）基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件组装在
一起
(2) 受精卵 显微注射法
(3)早期胚胎培养液中含分化抑制因子，动物细胞培养液含血清
(4) 囊胚或桑葚胚 滋养层
【详解】（1）①过程是RNA 逆转录为DNA 的过程，因此需要逆转录酶。②过程是基因表达载体的构
建，要想目的基因在转基因牛的乳腺细胞中表达出HAS，则需要将人血清白蛋白（HAS）基因与乳腺蛋白
基因的启动子等调控组件组装在一起。
（2）③过程是将目的基因导入受体细胞，动物一般选择受精卵，因为受精卵更容易表达全能性，从而培
育出转基因动物。动物细胞的导入用显微注射的方法进行。
（3）一般动物细胞的培养液是基础培养液加血清，而早期胚胎培养液除了维持胚胎干细胞的全能性，不
能加血清，而要加入一些分化抑制因子。故早期胚胎培养液中含分化抑制因子，动物细胞培养液含血清。
（4）胚胎移植需要培养到桑葚胚或者囊胚，移植前取滋养层细胞进行性别鉴定，因为滋养层将发育成胚
胎的附属结构，以减少对胚胎的不良影响。
20．（12 分，每空2 分）乳糖不耐受症是机体乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的
乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛，给乳糖不耐受症患者带
来了福音。如图为转基因低乳糖奶牛的培育流程。据图分析回答下列问题：
(1)科学家在构建重组质粒T 时，首先采用PCR 技术对LCT 基因进行扩增，PCR 扩增的原理是 ，
若一个该DNA 分子在PCR 仪中经过4 次循环，需要 个引物。
11
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
(2)构建基因表达载体时不能用限制酶 切割LCT 基因和质粒S，原因是 。
(3)卵母细胞去核常用的方法是 。
(4)从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT 基因是否表达的方法是 。
【答案】(1) DNA 的半保留复制 30
(2) EcoR Ⅰ 该限制酶会破坏目的基因
(3)显微操作法
(4)抗原—抗体杂交法
【详解】（1）PCR 是体外复制DNA，原理是DNA 的半保留复制；由于PCR 扩增DNA 片段经过n 次扩增
后形成的DNA 分子数是2n 个，单链数2×2n 条，其中只有2 条单链不含有引物，所以循环4 次，理论上至
少需要2×24-2=30 个引物。
（2）根据图示信息可知，LCT 基因上存在EcoR Ⅰ的识别序列，若使用限制酶EcoR Ⅰ，会破坏目的基
因，故构建基因表达载体时不能用EcoR Ⅰ切割LCT 基因和质粒S。
（3）卵母细胞去核常用的方法是显微操作去核法。
（4）乳糖酶（LCT）是蛋白质，检测转基因牛细胞中LCT 基因是否表达出蛋白质，一般采用抗原—抗体
杂交法。
21．（12 分，除标明外，每空2 分）微藻适应性强、生长快，是生产生物柴油的理想原料，但油脂产量低
制约了对其的应用。苹果酸酶（ME）是调控微藻脂质合成的关键酶。研究表明，在ME 基因下游插入
DNA 片段N（转录后会被剪切）可显著提升ME 的表达量，进而提高产油量。研究者构建了ME 超表达载
体（流程如图），将其转入微藻细胞以培育高产油藻株。回答下列问题：
(1)为了扩增DNA 片段，可选择的一对PCR 引物是 。PCR 扩增过程中，当温度下降到50℃时，
PCR 反应体系中发生的反应是 。
(2)为了使DNA 片段N 正确插入Ti-ME 的表达载体上，需要在两种引物的5'端加上限制酶的识别序列，即
。
(3)筛选时需要将构建好的重组质粒导入微藻细胞，并将微藻细胞置于含有 （1 分）的培养基上进
行培养，其中能在该培养基上生长的微藻细胞类型有 。
12
关注公众号：陆陆高分冲刺 ~领取：最新版“中考高考-总复习”~~~
(4)提取转基因微藻的ME 基因的mRNA，逆转录得到cDNA，以该cDNA 为模板，选择引物S-F 和E-R 进
行PCR，能否得到含ME-N 的双链DNA 片段？ （1 分），理由是 。
【答案】(1) E-F 和E-R 复性（或引物结合到互补DNA 链上）
(2)5'-GAATTC-3'、5'-AAGCTT-3'
(3) 卡那霉素 导入了普通Ti-ME 载体的微藻细胞，导入了重组Ti-ME-N 载体的微藻细胞
(4) 不能 以ME 基因的mRNA 逆转录得到的cDNA 不含有引物E-R 的结合序列（或以ME 基因的
mRNA 逆转录得到的cDNA 不含有N 的序列）
【详解】（1）根据图示信息可知，扩增DNA 片段N 需要选择N 片段两端的引物，即E-F 和E-R。PCR 技
术中，复性就是当温度下降到50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA 结合，即复性。
（2）为了将DNA 片段N 正确插入Ti-ME 的表达载体上，需要在两种引物的5'端加上限制酶的识别序列，
根据载体上的酶切位点，选择位于ME 基因下游的EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ。因此需要在两种引物的5'端加上限
制酶的识别序列是5'-GAATTC-3'、5'-AAGCTT-3'。
（3）由于质粒中含有卡那霉素抗性基因，选择含有卡那霉素的培养基进行培养以进行筛选，其中能在该
培养基上生长的微藻细胞类型有导入普通Ti-ME 载体的微藻细胞和导入了重组Ti-ME-N 载体的微藻细胞。
（4）提取转基因微藻的ME 基因的mRNA，逆转录得到cDNA，以该cDNA 为模板，选择引物S-F 和E-R
进行PCR，不能得到含ME-N 的双链DNA 片段。因为N 基因转录后会被剪切，逆转录获得的cDNA 不含
N 基因序列。
13
