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课时规范练 56 微生物的培养技术及其应用
(选择题每小题3分)
必备知识基础练
考点一 微生物的基本培养技术
1.(2025·湖南长沙开学模拟)下表是一种培养基的配方,关于此培养基,下列叙述错误的是( )
牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
1 g 2 g 1 g 2 g 200 mL
A.该培养基是固体培养基
B.NaCl既能提供无机盐,又能调节渗透压
C.该培养基只能提供4类营养物质
D.该培养基能够培养多种微生物
2.消毒、灭菌是生物学实验中常见的操作。下列有关说法正确的是( )
A.用接种环接种时,取菌种前和接种后都需将接种环进行干热灭菌处理
B.植物组织培养时,外植体分别用酒精和次氯酸钠溶液处理30 min即可
C.培养微生物时获得纯微生物培养物的关键是防止杂菌污染
D.培养乳酸菌时,需在培养基中添加维生素,配制好的培养基需先灭菌后调节pH
3.(2025·山东德州开学模拟)中国科学家采集了某海域1 146 m深海冷泉附近沉积物样品,经过28
℃厌氧培养一段时间后,研究人员成功分离出含有拟杆菌的混合物,并进一步研究其生物学特性。
下列说法错误的是( )
A.此环境下生存的拟杆菌所分泌的酶可能具有耐低温的特性
B.有些微生物可能只有利用深海冷泉附近特有物质才能生存
C.平板划线法和稀释涂布平板法都能对拟杆菌进行分离和计数
D.筛选拟杆菌的气体条件同样适合制作传统泡菜
考点二 微生物的选择培养和计数
4.(2025·河北邢台开学模拟)物质M是一种难以降解的含氮有机物,其在培养基中表现为不透明。
某研究小组欲从土壤中分离出能降解M的微生物,取土样并进行一系列稀释后,取稀释液滴加到
平板A上开始涂布,然后置于恒温箱中培养24 h,发现平板上的部分菌落周围出现透明圈,部分菌
落周围未出现透明圈。下列有关分析错误的是 ( )
A.平板A应以物质M为唯一有机氮源,属于选择培养基
B.平板A上的菌落数过多可能是取样前未将稀释液摇匀所致
C.平板A上出现了无透明圈的菌落是因为培养基被污染了
D.透明圈最大的菌落,其分解M的能力未必最强
5.(2025·安徽开学模拟)为保障公共饮用水的安全,工作人员常用如图所示“滤膜法”对饮用水进
行检测。大肠杆菌作为指示菌之一,国家标准为每升饮用水中大肠杆菌数量不能超过3个。下
列相关叙述错误的是( )
1A.图中所示培养基上长出的所有大肠杆菌属于一个种群
B.滤膜法检测1 L饮用水中的大肠杆菌数量要进行多次抽样检测
C.用滤膜法检测被动物粪便严重污染的水体结果可能比实际值偏小
D.滤膜转移到培养基之后,滤膜上的大肠杆菌数量呈“J”形增长
6.(2025·湖南永州一模)野生型大肠杆菌能够在基本培养基上生长,研究人员经诱变获得了两种营
养缺陷型的突变体M、N,且单独培养时均不能在基本培养基上生长。若将两种突变体在完全
培养基(液体)中混合培养一段时间后,再采用稀释涂布平板法接种在基本培养基平板上,培养后
长出了大肠杆菌菌落。下列有关叙述正确的是( )
A.野生型大肠杆菌诱变时发生了基因突变或染色体变异
B.突变体M和N能相互为对方提供所缺的营养物质
C.在混合培养期间突变体M和N发生了遗传物质的交流
D.混合培养获得的大肠杆菌都能在基本培养基中生长
关键能力提升练
7.(2025·安徽开学模拟)合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液
A、B、C杀灭大肠杆菌的效果,结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.大肠杆菌在伊红—亚甲蓝培养基上生长的菌落呈蓝色
B.据该实验结果可知,杀菌效果最好的消毒液是A
C.可采用显微镜直接计数法或菌落计数法测定样品的大肠杆菌数量
D.实验中用到的吸管、培养皿和金属用具可采用干热灭菌法
8.(不定项)(2024·黑吉辽卷)某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病,其筛选流程及
抗性检测如下图所示。下列操作正确的是( )
A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内,从感病植株上采集样品
2B.将采集的样品充分消毒后,用蒸馏水冲洗,收集冲洗液进行无菌检测
C.将无菌检测合格的样品研磨,经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落
D.判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小
9.(9分)(2025·八省联考云南卷)普洱茶的主要活性成分——茶褐素,具有降脂减肥、抗氧化和提
高免疫力等功能,在功能食品领域具有广阔的应用前景。研究人员在制作普洱熟茶的固体发酵
过程中分离得到优势菌塔宾曲霉,其可在绿茶浸提液(富含茶多酚、可溶性糖、氨基酸、蛋白质
和咖啡碱等)中生长繁殖,之后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。不同发酵温度下塔宾曲
霉生成茶褐素的浓度如图。
回答下列问题。
(1)绿茶浸提液中的氨基酸和蛋白质可为塔宾曲霉生长提供的营养物质为 。
(2)塔宾曲霉为好氧微生物,用绿茶浸提液进行液体培养时应采用 (填“静置”或“摇
床”)培养。培养过程中茶褐素在发酵前两天均无显著增加的原因是
。
(3)为检测发酵1 d时塔宾曲霉的数量,将发酵液稀释1×103倍后,分别取0.1 mL稀释液均匀涂布
于3个培养基平板上,培养后菌落数量分别为48个、45个和42个,则每毫升发酵液中活菌数量
为 个。
(4)从实际生产角度出发,由图可知,在第 天结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素。为探索
生产茶褐素的最适温度,需设计下一步实验,请写出实验思路:
。
3参考答案
课时规范练 56 微生物的培养技术及其应用
必备知识基础练
1.C 解析 培养基中含有琼脂,为固体培养基,A项正确;NaCl为无机盐,也能参与调节培养基的
渗透压,B项正确;培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质,该培养基中牛肉膏提
供的主要营养物质有碳源、磷酸盐和维生素等特殊营养物质,蛋白胨提供的主要营养物质有氮
源和维生素等,NaCl为无机盐,因此该培养基提供的主要营养物质有水、无机盐、氮源、碳源和
维生素5类特殊营养物质,C项错误;该培养基含有水、碳源、氮源和无机盐四种基本营养物质,
能够培养多种微生物,D项正确。
2.C 解析 每次使用接种环前、后都要进行灼烧灭菌处理,并要注意待接种环冷却后才能使
用,A项错误;植物组织培养时需将流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30 s,后立即用无菌水清
洗2~3次,再用次氯酸钠溶液处理30 min后,立即用无菌水清洗2~3次,B项错误;培养微生物时获
得纯微生物培养物的关键是防止杂菌污染,C项正确;培养乳酸菌时,需要在培养基中添加维生素,
配制好的培养基需先调节pH后灭菌,D项错误。
3.C 解析 选取的样品是取自某海域1 146 m深海冷泉附近沉积物样品,故此环境下生存的拟杆
菌所分泌的酶可能具有耐低温的特性,A项正确;这些微生物取自深海冷泉附近,故有些微生物可
能只有利用深海冷泉附近特有物质才能生存,B项正确;平板划线法不能对拟杆菌进行计数,C项
错误;泡菜的制作利用的是厌氧微生物,和拟杆菌的气体条件相同,D项正确。
4.C 解析 欲从土壤中分离出能降解M的微生物,平板A应以物质M为唯一有机氮源,属于选
择培养基,A项正确;根据题干信息可知,实验采用稀释涂布平板法进行接种,平板A上的菌落数
过多可能是取样前未将稀释液摇匀所致,B项正确;平板A上出现了无透明圈的菌落不是因为培
养基被污染了,而是细菌分解M的能力弱,C项错误;透明圈与菌落的直径大小能反映该细菌对物
质M的分解能力,透明圈最大的菌落,其分解M的能力未必最强,D项正确。
5.D 解析 在一定的自然区域内,同种生物的所有个体是一个种群,图中所示培养基上长出的所
有大肠杆菌属于一个种群,A项正确;滤膜法检测1 L饮用水中的大肠杆菌数量要进行多次抽样
检测,求平均值,B项正确;用滤膜法检测被动物粪便严重污染的水体,由于大肠杆菌的数量过多,
从而使一个或多个细菌长到一起,进而导致大肠杆菌数量可能比实际值偏小,C项正确;受空间、
营养物质等的限制,滤膜转移到培养基之后,滤膜上的大肠杆菌数量呈“S”形增长,D项错误。
6.B 解析 野生型大肠杆菌是原核生物,其遗传物质主要位于拟核的DNA上,没有染色体结构,
因此,野生型大肠杆菌在诱变时不可能发生染色体变异,只能发生基因突变,A项错误;根据题干可
知,突变体M和N都是营养缺陷型,且单独培养时均不能在基本培养基上生长,然而,当它们在完
全培养基中混合培养一段时间后,再接种到基本培养基上却长出了大肠杆菌菌落,这说明在混合
培养期间,突变体M和N能够相互为对方提供所缺失的营养物质,从而使得双方都能在基本培养
基上生长,B项正确;根据题干可知,突变体M和N都是营养缺陷型,且单独培养时均不能在基本
培养基上生长,所以在混合培养期间,突变体M和N能够相互为对方提供所缺失的营养物质,不
一定是发生了遗传物质的交流,C项错误;虽然突变体M和N混合培养后接种到基本培养基上长
出了大肠杆菌菌落,但这并不意味着混合培养获得的所有大肠杆菌都能在基本培养基中生长,只
4有那些通过相互提供缺失营养物质而恢复了生长能力的突变体或重组体才能在基本培养基上生
长,D项错误。
关键能力提升练
7.A 解析 大肠杆菌在伊红—亚甲蓝培养基上生长的菌落呈深紫色,并有金属光泽,A项错误;A
消毒液活菌数减少量最多,且杀菌效率最高,故A消毒液杀菌效果最好,B项正确;微生物计数的方
法多种多样,包括显微镜直接计数法和平板菌落计数法等,C项正确;干热灭菌是一种利用高温进
行灭菌的方法,适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏的物品,这种方法主
要适用于需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等,D项正确。
8.CD 解析 需要筛选出能防治香蕉枯萎病的内生菌,因此应在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植
园内,从正常植株上筛选样品,A项错误;消毒后,为了防止杂菌污染应用无菌水冲洗,而不是用蒸
馏水,B项错误;无菌检测合格指的是植物细胞外没有微生物,研磨后经稀释涂布平板法分离得到
的就是目标菌落,C项正确;由题图可知,判断内生菌的抗性效果需设置对照组和实验组,对照组不
接种内生菌,实验组接种内生菌,通过比较病原菌菌斑大小,来判断抗性效果,病原菌的菌斑越小,
抗性效果越好,D项正确。
9.答案 (1)碳源和氮源
(2)摇床 塔宾曲霉先进行生长繁殖,然后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素
(3)4.5×105
(4)6 在30~42 ℃之间设置一系列温度梯度,用同样的方式培养塔宾曲霉,并检测不同发酵温度
下塔宾曲霉生成茶褐素的浓度,生成茶褐素浓度最高的温度即为生产茶褐素的最适温度
解析 (1)氨基酸和蛋白质可以为塔宾曲霉生长提供碳源和氮源。
(2)塔宾曲霉为好氧微生物,用绿茶浸提液进行液体培养时应采用摇床培养,可以增加培养液中的
溶氧量,有利于塔宾曲霉的繁殖。培养过程中前两天塔宾曲霉进行生长繁殖,然后分泌胞外氧化
酶催化茶多酚生成茶褐素。
(3)培养后菌落数量分别为48个、45个和42个,平均值为(48+45+42)÷3=45(个),发酵液稀释
1×103倍后,取0.1 mL,因此每毫升发酵液中活菌数量为45÷0.1×103=4.5×105(个)。
(4)分析题图可知,温度为37 ℃和42 ℃时发酵效率较高,发酵至第6天,结束发酵即可获得较高浓
度的茶褐素。生产茶褐素的最适温度在30~42 ℃范围内,进一步探究的思路为在30~42 ℃之间
设置一系列温度梯度,用同样的方式培养塔宾曲霉,并检测不同发酵温度下塔宾曲霉生成茶褐素
的浓度,生成茶褐素浓度最高的温度即为生产茶褐素的最适温度。
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