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专题24 细胞工程与胚胎工程
1．（2023·江苏·统考高考真题）研究者通过体细胞杂交技术，探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种紫菜。
下列相关叙述正确的是（ ）
A．从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，用于去除细胞壁
B．原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
C．检测原生质体活力时可用苯酚品红或甲紫溶液处理，活的原生质体被染色
D．聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞
2．（2023·北京·统考高考真题）甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备
单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述不正确的是（ ）
A．需要使用动物细胞培养技术
B．需要制备用PTH 免疫的小鼠
C．利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D．筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
3．（2023·海南·高考真题）某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y 染色体去除，获得XO 胚胎
干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（ ）
A．营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制
B．获得XO 胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异
C．XO 胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化
D．若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育
4．（2023·山东·高考真题）利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，
可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ）
A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物
B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产
C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养
D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量
5．（2023·湖北·统考高考真题）栽培稻甲产量高、品质好，但每年只能收获一次。野生稻乙种植一次可连
续收获多年，但产量低。中国科学家利用栽培稻甲和野生稻乙杂交，培育出兼具两者优点的品系丙，为全
球作物育种提供了中国智慧。下列叙述错误的是（ ）
A．该成果体现了生物多样性的间接价值
B．利用体细胞杂交技术也可培育出品系丙
C．该育种技术为全球农业发展提供了新思路
D．品系丙的成功培育提示我们要注重野生种质资源的保护
6．（2023·浙江·统考高考真题）植物组织培养过程中，培养基中常添加蔗糖，植物细胞利用蔗糖的方式如
图所示。
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下列叙述正确的是（ ）
A．转运蔗糖时，共转运体的构型不发生变化
B．使用ATP 合成抑制剂，会使蔗糖运输速率下降
C．植物组培过程中蔗糖是植物细胞吸收的唯一碳源
D．培养基的pH 值高于细胞内，有利于蔗糖的吸收
7．（2023·广东·统考高考真题）人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产
生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ）
A．细胞融合前应去除细胞壁
B．高Ca2+—高pH 溶液可促进细胞融合
C．融合的细胞即为杂交细胞
D．杂交细胞可能具有生长快速的优势
8．（2023·天津·统考高考真题）根据下图，正确的是（ ）
A．子代动物遗传性状和受体动物完全一致
B．过程1 需要MII 期去核卵母细胞
C．过程2 可以大幅改良动物性状
D．过程2 为过程3 提供了量产方式，过程3 为过程1、2 提供了改良性状的方式
9．（2023·广东·统考高考真题）科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，
使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ）
A．超数排卵
B．精子获能处理
C．细胞核移植
D．胚胎培养
10．（2023·浙江·统考高考真题）在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误
2
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的是（ ）
A．经获能处理的精子才能用于体外受精B．受精卵经体外培养可获得早期胚胎
C．胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
D．胚胎移植前需对受体进行选择和处理
11．（2023·江苏·统考高考真题·多选）我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流
程如图所示。下列相关叙述正确的有（ ）
A．猴的成纤维细胞和胚胎干细胞功能不同，但具有相同的基因组
B．囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的基因都不同
C．移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满CO₂ 的培养箱中进行
D．移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌
12．（2023·浙江·统考高考真题）赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含量
很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。回答下列问题：
(1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在
一定浓度水平，这种调节方式属于
。根据这种调节方式，在培养基中添
加
，用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可
得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。
(2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展，2011 年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育
了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为：
①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通过
检索
获取其编码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的目
的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。
②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF）。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与BEF 膜发生
，表达载体最终进入细胞核，发生转化。
③核移植。将转基因的BEF 作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去核后作为
。将两种细胞进行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合，同时起到了
3
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重组细胞发育的作用。
④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至
，植入代孕母牛子宫角，
直至小牛出生。
⑤检测。DNA 水平检测：利用PCR 技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以
为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA 水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细
胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA，对总RNA 进行
处
理，以去除DNA 污染，再经逆转录形成cDNA，并以此为
，利用特定引物扩增
目的基因片段。结果显示目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞内表达，原
因是什么？
。
13．（2023·湖北·统考高考真题）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A 为
抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。
回答下列问题：
(1) 与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）
（填“需要”或“不需要”）
通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG 可促进细胞融合，该过程中PEG 对细胞膜的作用是
。
(2) 在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT 培养基），该培养基对
和
生长具有抑制作用。
(3) 单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是
。
(4)构建重组质粒需要使用DNA 连接酶。下列属于DNA 连接酶底物的是 。
14．（2023·浙江·统考高考真题）甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。
某研究小组用甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体
融合、筛选融合细胞、杂种植株再生和鉴定，最终获得高产耐盐碱再生植株。回答下列问题：
(1)根据研究目标，在甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交前，应检验两种植物的原生质体是否具备
的能力。为了便于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融合，若甲植物原生质体采用幼
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苗的根为外植体，则乙植物可用幼苗的 为外植体。
(2)植物细胞壁的主要成分为
和果胶，在获取原生质体时，常采用相应的酶进行去壁处理。
在原生质体融合前，需对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的
失活。对处理后的原生质体在显微镜下用
计数，确定原生质体密度。两种原
生质体1∶1 混合后，通过添加适宜浓度的PEG 进行融合；一定时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀
释的目的是
。
(3)将融合原生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合，在凝固前倒入培养皿，融合原生质体分散固定在平板中，
并独立生长、分裂形成愈伤组织。同一块愈伤组织所有细胞源于
。
下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自于杂种细胞的理由是哪几项？
A ．甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂
B．同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂
C．培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂
D．杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂
(4)愈伤组织经
可形成胚状体或芽。胚状体能长出
，直接发育形成再生植
株。
(5)用PCR 技术鉴定再生植株。已知甲植物细胞核具有特异性DNA 序列a，乙植物细胞质具有特异性DNA
序列b；M1、M2为序列a 的特异性引物，N1、N2为序列b 的特异性引物。完善实验思路：
Ⅰ．提取纯化再生植株的总DNA，作为PCR 扩增的 。
Ⅱ．将DNA 提取物加入PCR 反应体系，
为特异性引物，扩增序列a；用同样的方法扩增序列
b。
Ⅲ．得到的2 个PCR 扩增产物经
后，若每个PCR 扩增产物在凝胶中均出现了预
期的 个条带，则可初步确定再生植株来自于杂种细胞。
15．（2023·湖南·统考高考真题）某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回
答下列问题：
(1)若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括水和
。
(2)现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽孢杆菌H，其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽
对
的抑制效果较好，若要确定其
有抑菌效果的最低浓度，需在
μg·mL-1浓度区间进一步实验。
测试菌
抗菌肽浓度/（µg•mL-1）
55.20
27.60
13.80
6.90
3.45
1.73
0.86
金黄色葡萄球
菌
-
-
-
-
-
+
+
枯草芽孢杆菌
-
-
-
-
-
+
+
禾谷镰孢菌
-
+
+
+
+
+
+
5
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假丝酵母
-
+
+
+
+
+
+
注：“+”表示长菌，“-”表示未长菌。
(4) 研究人员利用解淀粉芽孢杆菌H 的淀粉酶编码基因M 构建高效表达质粒载体，转入大肠杆菌成功构建
基因工程菌A。在利用A 菌株发酵生产淀粉酶M 过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再
产生淀粉酶M。分析可能的原因是
（答出两点即可）。
(5) 研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。
肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH 以及
（答出两点）等基本条件。肺类装配体形成过程
中是否运用了动物细胞融合技术
（填“是”或“否”）。
(5)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是一种耐药菌，严重危害人类健康。科研人员拟用MRSA 感染肺
类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽孢杆菌H 抗菌肽是否对MRSA 引起的肺炎有治疗潜力。以下实验
材料中必备的是
。
①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体 ②MRSA 感染的肺类装配体 ③解淀粉芽孢杆菌H 抗菌肽 ④生理
盐水 ⑤青霉素（抗金黄色葡萄球菌的药物） ⑥万古霉素（抗MRSA 的药物）
1．（2022·福建·统考高考真题）我国科研人员在航天器微重力环境下对多能干细胞的分化进行了研究，发
现与正常重力相比，多能干细胞在微重力环境下加速分化为功能健全的心肌细胞。下列叙述错误的是（
）
A．微重力环境下多能干细胞和心肌细胞具有相同的细胞周期
B．微重力环境下进行人体细胞的体外培养需定期更换培养液
C．多能干细胞在分化过程中蛋白质种类和数量发生了改变
D．该研究有助于了解微重力对细胞生命活动的影响
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2．（2022·重庆·统考高考真题）植物体细胞通常被诱导为愈伤组织后才能表现全能性。研究发现，愈伤组
织的中层细胞是根或芽再生的源头干细胞，其在不同条件下，通过基因的特异性表达调控生长素、细胞分
裂素的作用，表现出不同的效应（见如表）。已知生长素的生理作用大于细胞分裂素时有利于根的再生；
反之，有利于芽的再生。下列推论不合理的是（ ）
条
件
基因表达产物和相互作用
效应
①
WOX5
维持未分化状态
②
WOX5+PLT
诱导出根
③
WOX5+ARR2，抑制
ARR5
诱导出芽
A．WOX5 失活后，中层细胞会丧失干细胞特性
B．WOX5+PLT 可能有利于愈伤组织中生长素的积累
C．ARR5 促进细胞分裂素积累或提高细胞对细胞分裂素的敏感性
D．体细胞中生长素和细胞分裂素的作用可能相互抑制
3．（2022·辽宁·统考高考真题）蓝莓细胞富含花青素等多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中，外植体切
口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞
甚至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是（ ）
A．花青素通常存在于蓝莓细胞的液泡中
B．适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率以减少褐变
C．在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变
D．宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体
4．（2022·江苏·统考高考真题）航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。
下列相关叙述正确的是（ ）
A．培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌
B．培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳
C．心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖
D．心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动
5．（2022·江苏·统考高考真题）下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（ ）
A．通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
B．哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质
C．克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
D．将小鼠桑葚胚分割成2 等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
6．（2022·湖北·统考高考真题）某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经
元生长缓慢，其原因不可能的是（ ）
A．实验材料取自小鼠胚胎的脑组织
B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封
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C．血清经过高温处理后加入培养基
D．所使用的培养基呈弱酸性
7．（2022·山东·高考真题）如图所示，将由2 种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后
重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A．双抗可同时与2 种抗原结合
B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2 种抗原
D．同时注射2 种抗原可刺激B 细胞分化为产双抗的浆细胞
8．（2022·浙江·高考真题）下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ）
A．用自然生长的茎进行组培须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
B．培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换
C．组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富
D．不带叶片的菊花幼茎切段可以通过器官发生的途径形成完整的菊花植株
9．（2022·浙江·统考高考真题）农作物秸秆的回收利用方式很多，其中之一是将秸秆碎化后作为食用菌的
栽培基质。碎化秸秆中纤维所起的作用，相当于植物组织培养中固体培养基的（ ）
A．琼脂+蔗糖
B．蔗糖+激素
C．激素+无机盐
D．无机盐+琼脂
10．（2022·北京·统考高考真题）将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注
射的囊胚发育为黑白相间的小鼠（Mc）。据此分析，下列叙述错误的是（ ）
A．获得Mc 的生物技术属于核移植
B．Mc 表皮中有两种基因型的细胞
C．注射入的细胞会分化成Mc 的多种组织
D．将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠
11．（2022·江苏·统考高考真题·多选）下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞
中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4 种酶
活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、
Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有（ ）
8
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A．加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合
B．细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞
C．芳烃羟化酶基因位于2 号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11 号染色上
D．胸苷激酶基因位于17 号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X 染色体上
12．（2022·重庆·统考高考真题）改良水稻的株高和产量性状是实现袁隆平先生“禾下乘凉梦”的一种可
能途径。研究人员克隆了可显著增高和增产的eui 基因，并开展了相关探索。
步骤I：
步骤II：
(1) 花药培养能缩短育种年限，原因是
。在步骤I 的花药培养过程中，
可产生单倍体愈伤组织，将其培养于含
的培养基上，可促进产生二倍
体愈伤组织。I 中能用于制造人工种子的材料是
。
(2) 步骤II 中，eui 基因克隆于cDNA 文库而不是基因组文库，原因是
；
在构建重组Ti 质粒时使用的工具酶有
。为筛选含重组Ti 质粒的菌株，需
在培养基中添加
。获得的农杆菌菌株经鉴定后，应侵染I 中的
，以获得转基因再生植株。再生植株是否含有eui 基因的鉴定方法是
，移栽后若发育为更高且丰产的稻株，则可望“禾下乘凉”。
13．（2022·海南·统考高考真题）以我国科学家为主的科研团队将OSNL（即4 个基因Oct4／Sox2／Nanog
／Lin28A 的缩写）导入黑羽鸡胚成纤维细胞（CEFs），诱导其重编程为诱导多能干细胞（iPS），再诱导
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iPS 分化为诱导原始生殖细胞（iPGCs），然后将iPGCs 注射到孵化2.5 天的白羽鸡胚血管中，最终获得具
有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回答下列问题。
(1) CEFs 是从孵化9 天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用
处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加
等天然成分，
以满足细胞对某些细胞因子的需求。
(2) 体外获取OSNL 的方法有
（答出1 种即可）。若要
在CEFs 中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启
动子和
等。启动子是
识别和结合的部位，有了它才能驱动
。
(3)iPS 细胞和iPGCs 细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是
。
(4)诱导iPS 细胞的技术与体细胞核移植技术的主要区别是
。
(5)该实验流程中用到的生物技术有
（答出2 点即
可）。
14．（2022·全国·高考真题）某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊，为了在短时间内获得具有该公羊
优良性状的大量后代，该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。回答下列问题，
(1)为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液，精液保存的方法是
。
在体外受精前要对精子进行获能处理，其原因是
；精子体外获能可采用
化学诱导法，诱导精子获能的药物是
（答出1 点即可）。
利用该公羊的精子进行体外受精需要发育到一定时期的卵母细胞，因为卵母细胞达到
时才具备与精子受精的能力。
(2)体外受精获得的受精卵发育成囊胚需要在特定的培养液中进行，该培养液的成分除无机盐、激素、血清
外，还含的营养成分有
（答出3 点即可）等。将培养好的良种囊胚保存备用。
(3)请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料进行操作，以获得具有该公羊优良性状的后代。
主要的操作步骤是
。
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15．（2022·辽宁·统考高考真题）某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N 蛋白胞外段，制备
相应的单克隆抗体，增加其对N 蛋白胞外段特异性结合的能力。
Ⅰ．N 蛋白胞外段抗原制备，流程如图1
(1) 构建重组慢病毒质粒时，选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是
。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导
入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体
（填“双分子层中”或“两层磷脂分子
之间”）。
(2)质粒在包装细胞内组装出由
组成的慢
病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N 蛋白胞外段。
Ⅱ．N 蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2
(3)用N 蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用
酶处理，
制成细胞悬液，置于含有混合气体的
中培养，离心收集小鼠的B 淋巴细胞，与骨
髓瘤细胞进行融合。
(4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96 孔板，进行
培养。用
技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N 蛋白胞外段抗体，又
能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集
，提取单克隆抗
体。
(5)利用N 蛋白胞外段抗体与药物结合，形成
，实现特异性治疗。
16．（2022·浙江·统考高考真题·节选）回答下列（一）小题：
（一）我国在新冠疫情方面取得了显著的成效，但全球疫情形势仍然非常严峻、尤其是病毒出现了新变异
株——德尔塔、奥密克戎，更是威胁着全人类的生命健康。
(1)新冠病毒核酸定性检测原理是：以新冠病毒的单链RNA 为模板，利用
酶合成DNA，
经PCR 扩增，然后在扩增产物中加入特异的
，如果检测到特异的杂交分子则核酸检测为阳
性。
(2)接种疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制备技术要点是：将腺病毒的复制基因敲除；
以新冠病毒的
基因为模板合成的DNA 插入腺病毒基因组，构建重组腺病毒。重组腺病毒在人
体细胞内表达产生新冠病毒抗原，从而引发特异性免疫反应。在此过程中，腺病毒的作用是作为基因工程
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中目的基因的
。将腺病毒复制基因敲除的目的是
。
(3)单克隆抗体有望用于治疗新冠肺炎。单克隆抗体的制备原理是：取免疫阳性小鼠的 细胞与
骨髓瘤细胞混合培养，使其融合，最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。与植物组织培养相比，杂交
瘤细胞扩大培养需要特殊的成分，如胰岛素和
。
1．（2021·江苏·高考真题）下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质
B．早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体
C．猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴
D．将骨髓瘤细胞和B 淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
2．（2021·江苏·高考真题）植物组织培养技术常用于商业化生产：其过程一般为:无菌培养物的建立→培养
物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是（ ）
A．为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养
B．组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构
C．提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根
D．用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
3．（2021·福建·统考高考真题）科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如
下。
下列叙述正确的是（ ）
A．愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的
B．获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状
C．可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生
D．用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体
4．（2021·湖北·统考高考真题）月季在我国享有“花中皇后”的美誉。为了建立月季某新品种的快速繁殖
体系，以芽体为外植体，在MS 培养基中添加不同浓度的6-BA 和IBA 进行芽体增殖实验，芽分化率（%）
结果如表。
6-
BA/（mg·L-1）
IBA/（mg·L-1）
0． 1
0．2
0．3
0．4
0．5
12
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1．0
31
63
58
49
41
2．0
40
95
76
69
50
3．0
37
75
64
54
41
4．0
25
35
31
30
25
5．0
8
21
12
8
4
关于上述实验，下列叙述错误的是（ ）
A．6-BA 浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低
B．6-BA 与IBA 的比例为10：1 时芽分化率均高于其他比例
C．在培养基中同时添加适量的6-BA 和IBA，可促进芽分化
D．2．0mg·L-16-BA 和0．2mg·L-1IBA 是实验处理中芽分化的最佳组合
5．（2021·湖北·统考高考真题）自青霉素被发现以来，抗生素对疾病治疗起了重要作用。目前抗生素的不
合理使用已经引起人们的关注。下列关于抗生素使用的叙述，正确的是（ ）
A．作用机制不同的抗生素同时使用，可提高对疾病的治疗效果
B．青霉素能直接杀死细菌，从而达到治疗疾病的目的
C．畜牧业中为了防止牲畜生病可大量使用抗生素
D．定期服用抗生素可预防病菌引起的肠道疾病
6．（2021·辽宁·统考高考真题）下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确
的是（ ）
A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
7．（2021·山东·统考高考真题）一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产
生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内，
可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确
的是（ ）
A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大
B．单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合
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C．利用该小鼠只能制备出一种抗 p72 的单抗
D．p72 部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
8．（2021·浙江·统考高考真题）将蝌蚪肠细胞的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些
“合子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养肠细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是（ ）
A．肠细胞不能表达全能性是受某些物质的限制
B．“合子”第一次分裂后形成的细胞已失去全能性
C．“合子”发育成正常蝌蚪的过程中伴随着细胞分化
D．细胞核具有全能性是由于其含有该物种的全套基因
9．（2021·浙江·统考高考真题）下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行
B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C．步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理
D．步骤④培养过程中不会发生细胞转化
10．（2021·浙江·统考高考真题）采用CRISPR/Cas9 基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基
因定点插入到受精卵的Y 染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观
察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是（ ）
A．基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液
B．基因编辑处理的受精卵经体外培养至2 细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子宫，才可获得表达
EGFP 的小鼠
C．分离能表达EGFP 的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠
D．通过观察早期胚胎的荧光，能表达 EGFP 的即为雄性小鼠胚胎
11．（2021·重庆·高考真题）为了研究PDCD4 基因对小鼠子宫内膜基质细胞凋亡的影响，进行了相关实验。
(1)取小鼠子宫时，为避免细菌污染，手术器具应进行
处理；子宫取出剪碎后，用
处理一定时间，可获得分散的子宫内膜组织细胞，再分离获得基质细胞用于培
养。
(2)培养基中营养物质应有
（填写两种）；培养箱中CO2浓
度为5%，其主要作用是
。
(3)在含PDCD4 基因的表达载体中，启动子的作用是
。为了证明PDCD4 基因对基质细胞凋亡的作用，以含
PDCD4 基因的表达载体和基质细胞的混合培养为实验组，还应设立两个对照组，分别为
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。经检测，实验组中PDCD4 表达水平和细胞凋亡率显著高于对照组，说明
该基因对基质细胞凋亡具有
（填“抑制”或“促进”）作用。
12．（2021·湖南·统考高考真题）M 基因编码的M 蛋白在动物A 的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将
外源DNA 片段F 插入M 基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M 基因失活
的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
（1）在构建含有片段F 的重组质粒过程中，切割质粒DNA 的工具酶是
，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的
断开。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A 成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目
的是
。
（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是
。从早期胚胎中
分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为
（答出两点即
可），功能上具有
。
（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制
备M 蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A 中M 基因是否失活的实验思路
。
一、单选题
1．草木樨状黄芪（2n=32）是一种优良牧草，木本霸王（2n=22）（）是一种沙漠植物。研究者用UV 照
射木本霸王的原生质体，使其染色体片段化，并将处理后的木本霸王原生质体与草木樨状黄芪原生质体进
行融合，获得染色体数为48 条的杂种植株。下列说法错误的是（ ）
A．需要用灭活病毒处理原生质体以获得杂种细胞
B．杂种植株的获得需经历脱分化和再分化的过程
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C．杂种植株减数分裂时部分染色体可能无法联会
D．本研究可用于培育抗旱能力强的草木樨状黄芪
2．科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，
并红色荧光和绿色荧光标记番茄和马铃薯的原生质体质膜上的蛋白质，其培育过程如下图所示。下列说法
错误的是（ ）
A．过程①常用的酶主要有纤维素酶和果胶酶
B．过程③为脱分化，过程④为再分化
C．可用灭活病毒诱导原生质体融合
D．仅考虑细胞两两融合的情况鉴定融合的原生质体，若原生质体表面既有红色荧光又有绿色荧光，可
判断该原生质体由番茄和马铃薯的原生质体融合而成
3．科研人员利用青菜（2n=20）幼嫩花粉与甘蓝型油菜（2n=38）下胚轴细胞为材料，试验了两种原生质
体密度及比率对原生质体融合效果的影响，结果如下表。下列叙述正确的是（ ）
下胚轴原生质体密度
（104/mL）
花粉原生质体密度
（104/mL）
比
率
异源融合
下胚轴同源融
合（%）
一对一融合
（%）
一对二及以上融
合（%）
15
15
1∶
1
18.5
8.3
24.7
10
30
1∶
3
24.6
16.2
20.5
7
42
1∶
6
34.5
18.2
12.5
5
45
1∶
9
33.0
17.1
7.0
A．该实验的自变量是两种原生质的密度
B．可通过加入过量的培养液终止原生质体融合
C．实验表明花粉原生质体占比越高，异源融合效率越高
D．某融合细胞的染色体数为58，说明该细胞是一对一异源融合细胞
4．普通烟草（2n=48）是二倍体，我国科学家早在1974 年就成功培育出世界上第一个单倍体作物新品种
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——单倍体1 号烟草。下列说法错误的是（ ）
A．培育单倍体1 号烟草原理主要是染色体数目变异
B．对花粉进行组织培养经过脱分化和再分化过程
C．对普通烟草顶端的分生组织进行培养也能获得单倍体
D．生长素和细胞分裂素的浓度和比例影响植物细胞发育方向
5．研究发现，紫杉醇对多种癌症都有一定的疗效。利用植物组织培养技术生产紫杉醇的基本方法如下图
所示。下列叙述正确的是（ ）
A．①过程中不需要光，但需控制好培养基中植物激素的比例
B．②过程需用一定浓度的胰蛋白酶处理愈伤组织，有利于细胞分散
C．③过程可将悬浮培养的细胞置于低渗溶液中涨破以提取紫杉醇
D．图示培育过程体现了植物细胞的全能性
6．在花椰菜种植过程中发现，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，而野生的黑芥则具有抗黑腐病的
特性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种，培育过程如图所示，培育过
程中通过紫外线照射使黑芥部分染色体结构被破坏。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①将两种植物细胞置于含水解酶的低渗溶液中，获得完整的原生质体
B．过程②常用高Ca²+—高pH 融合法和灭活病毒诱导法
C．过程③获得的愈伤组织细胞在显微镜下无法观察到来自黑芥苗的叶绿体
D．最终获得的抗病植株具有完整的黑芥和花椰的遗传信息
7．一对夫妇都是O 型血，通过“试管婴儿”技术却生下一个A 型血的孩子。经检测，作为独生子的丈夫
被确诊为“异源嵌合体”(指身体中存在来自不同受精卵的细胞群)，该孩子的血型与“异源嵌合体”有关。
下列叙述正确的是（ ）
A．“试管婴儿”的培育过程涉及细胞核移植、体外受精等技术
B．“试管婴儿”与“克隆动物”的原理相同，不会面临伦理问题
C．该丈夫可能是在胚胎期“吸收”了异卵双生兄弟的早期胚胎
D．可将2 个囊胚的内细胞团与滋养层交换重组，构建“异源嵌合体”
8．CO2是调节机体呼吸运动的重要体液因子，体液中CO2浓度变化会刺激相关感受器，从而通过神经系统
对呼吸运动进行调节。如果血液中CO2浓度适当升高，可刺激机体的化学感受器，引起呼吸加深加快。相
反如果血液中CO2浓度降低到一定水平会引起“呼吸性碱中毒”，甚至造成呼吸暂停。下列说法正确的是
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（ ）
A．调节机体呼吸运动的方式是神经—体液调节，调节呼吸的神经中枢位于脑干
B．出现“呼吸性碱中毒”时，患者血浆由正常时的弱酸性变为弱碱性
C．人体细胞缺氧导致细胞质基质产生的CO2增多，呼吸频率加快
D．临床上给病人输入O2时和动物细胞培养时都需要加入5%的CO2两者目的相同
9．我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪（如
下图所示）。下列相关叙述错误的是（ ）
A．细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂，需用胰蛋白酶处理后继续传代培养
B．采集的卵母细胞需培养至MII 中期才能与获能的精子受精，进而获得猪胚胎
C．从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能
D．培育出的“仔猪”细胞遗传物质是猴细胞与猪细胞之和，具有猴和猪的融合性状
10．CD47 是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。
肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47 含量比正常细胞高1.6~5 倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除
效果减弱。科学家推测，抗CD47 的单克隆抗体可以解除CD47 对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如
下流程进行了实验。下列说法不正确的是（ ）
A．多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47 抗体的淋巴细胞
B．步骤②后可筛选出既能产生抗CD47 抗体又能大量增殖的细胞
C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱
D．对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测
11．动物体细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性。下列说法正确的是（ ）
A．为提高成功率，将卵母细胞培养到MⅡ期，在尽可能短的时间内去除纺锤体一染色体复合物并注
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入体细胞
B．需用电刺激、Ca2+载体和聚乙二醇等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C．胚胎发育到桑葚胚阶段，胚胎内部开始出现含有液体的腔
D．早期胚胎培养需要无菌的O2和CO2，O2是细胞代谢所必需，CO2的主要作用是调节培养液的pH
12．一对健康的夫妇生育了一位唇腭裂综合征患儿。为帮助该夫妇生育健康的孩子，医生通过试管婴儿技
术得到4 枚发育正常的胚胎，并检测相应细胞的基因，结果如下表。下列叙述错误的是（ ）
胚胎编号
1 号
2 号
3 号
4 号
极体类型
第一极
体
第二极
体
第一极
体
第二极
体
第一极
体
第二极
体
第一极
体
第二极
体
突变基因检测结
果
突变型
野生型
野生型
突变型
野生型
突变型
突变型
突变型
A．为一次获得更多卵子，需对妻子注射促性腺激素以促进排卵
B．进行上述基因检测的细胞不是滋养层细胞
C．体外培养卵母细胞时，将培养皿置于二氧化碳培养箱中进行培养只为防止污染
D．移植1 号胚胎得到健康孩子的可能性最高
13．绿斑驳花叶病毒常导致西瓜发病或减产，下图示科研人员制备抗绿斑驳花叶病毒单克隆抗体的部分过
程，有关叙述错误的是（ ）
A．以提纯的绿斑驳花叶病毒作为抗原对小鼠甲进行免疫
B．单细胞悬液可由小鼠甲的脾脏用盐酸解离分散制得
C．制备过程中筛选1 和筛选2 的原理和目的均不相同
D．制成的单克隆抗体可用于检测西瓜是否感染绿斑驳花叶病毒
14．李劲松研究团队培养出了小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞，并且能让这一细胞替代精细胞使雌鼠产生的卵
细胞“受精”，生产出半克隆小鼠。孤雄单倍体胚胎干细胞系构建方式如下：精卵细胞结合排出第二极体
后，在核融合之前，剔除卵母细胞的雌原核，诱导、培养。下列说法正确的是（ ）
A．选择卵母细胞进行操作是因为其具有体积大、易操作、物质运输效率高等优点
B．受精作用中防止多精入卵的两道屏障是透明带的生理反应和卵细胞膜的生理反应
C．单倍体胚胎干细胞体外培养时需要提供CO2刺激细胞呼吸
D．孤雄单倍体胚胎干细胞包含两套完整且相同的染色体组
15．用生物工程技术可培育克隆牛、试管牛和转基因牛，培育过程的部分操作如图所示，D 为相应个体。
下列叙述正确的是（ ）
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A．若D 为克隆牛，A 为体细胞核．则B 为初级卵母细胞
B．若D 为试管牛，则子代一定能保持与母牛相同的遗传性状
C．若D 为转基因牛，A 为目的基因，则B 一定为质粒
D．三种牛培育过程的最后一道工序都用到了胚胎移植技术
16．我国科学家利用基因编辑技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1“敲除”的猕猴，取其成纤维细胞
与去核的卵母细胞融合形成重构胚，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，最终获得5 只克隆猕猴，用于研
究节律机制。下列叙述错误的是（ ）
A．采集卵母细胞前可用促性腺激素处理雌猴促其排卵
B．早期胚胎植入代孕雌猴前要对其进行同期发情处理
C．采集的卵母细胞要经过获能处理后才能接受移入的细胞核
D．5 只克隆猕猴的遗传特性与供体基本一致且性别完全相同
17．新冠病毒自测试剂盒中，一种抗PD-L1 的单克隆抗体能与新冠病毒表面的PD-L1 特异性结合，发挥诊
断作用，利用小鼠制备抗PD-L1 的单克隆抗体的流程如图，下列叙述错误的是（ ）
A．为保证获得足量相应的B 淋巴细胞，应给小鼠注射大量的新冠病毒
B．图中的B 淋巴细胞应取自注射过PD-L1 的小鼠脾脏
C．a 孔洞内的每个细胞理论上都可以作为扩大培养的对象
D．此过程需置于含95%的空气和5%CO2的CO2培养箱中
18．SRY-PCR 胚胎的性别鉴定技术可用于哺乳动物的性别控制，对畜牧繁育有重要意义。先从胚胎中取若
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干细胞提取DNA 进行PCR 扩增，用Y 染色体上的性别决定基因（SRY 基因）制备的特异性探针对扩增产
物进行检测，若结果为阳性，则表明胚胎细胞中含SRY 基因。下列叙述错误的是（ ）
A．①处理的作用是使受体母牛和良种母牛的子宫生理状态相同
B．若②为体内受精，则受精在良种母牛的输卵管中完成
C．若③为体外培养，则需培养到原肠胚期才能分割
D．图中采集到的甲细胞可用于SRY-PCR 胚胎性别鉴定
19．杜泊羊生长速度快，肉质好。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示。下列叙述正
确的是（ ）
A．采集到的杜泊羊的精子和卵子可以直接完成受精
B．将受精卵用胰蛋白酶处理后置于适当的培养液中培养成早期胚胎
C．用分割针将早期胚胎分割后再进行移植可以提高胚胎的利用率
D．进行操作时要用激素对当地普通羊进行同期发情和超数排卵处理
20．基因组印记（通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳
动物孤雌生殖的实验。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的
“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创
造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
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A．体外培养卵母细胞时，需将培养皿置于只含CO2的培养箱中进行培养
B．需对代孕母鼠进行同期发情处理后，再进行胚胎移植
C．“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
D．移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
二、多选题
21．研究者拟通过有性杂交的方法将簇毛麦（2n＝14）的优良性状导入普通小麦（6n＝42）中。用簇毛麦
花粉给数以千计的小麦小花授粉，10 天后只发现两个杂种幼胚，将其离体培养，产生愈伤组织，进而获得
含28 条染色体的大量杂种植株。以下表述正确的是（ ）
A．簇毛麦与小麦之间存在生殖隔离
B．培养过程中幼胚细胞经过脱分化和再分化
C．杂种植株减数分裂时染色体能正常联会
D．杂种植株的染色体加倍后能产生可育植株
22．下图是研究2，4－D 对红色金钱柳悬浮细胞生长与花青素合成影响的实验结果。相关叙述正确的是（
）
A．细胞悬浮培养的主要原理是愈伤组织细胞分裂旺盛
B．培养基应用葡萄糖、无机盐、激素等配制
C．本实验中2，4－D 具有抑制细胞生长的作用
D．结果表明一定浓度的2，4－D 会促进花青素的合成
23．CD47 是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。
肺癌肿瘤细胞表面的 CD47 含量比正常细胞高 1.6～5 倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为
证明抗 CD47 的单克隆抗体可以解除 CD47 对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，
下列叙述错误的是（ ）
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A．对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体
B．肺癌肿瘤细胞有发达的内质网和高尔基体，参与细胞膜上糖蛋白的形成
C．过程②和过程③筛选得到的杂交瘤细胞都能够产生抗CD47 的单克隆抗体
D．若实验组的吞噬指数高于对照组，则单克隆抗体有解除 CD47 对巨噬细胞的抑制作用
24．二抗是抗体（一抗）的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。人绒毛膜促性腺激素
（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断。
下图是抗HCG 单克隆抗体制备流程示意图，下列有关说法错误的是（ ）
A．①过程常用灭活的病毒，④过程后要进行胚胎移植
B．②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG 抗体
C．③过程以抗HCG 单克隆抗体为抗原进行检测
D．④过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染
25．研究人员欲采用“异源囊胚补全法”将人源iPS 细胞培育出的肾元祖细胞导入囊胚，然后移植到去除
生肾区既存的肾元祖细胞的仔猪体内，培育出100%人源iPS 细胞来源的肾单位并实际应用于移植医疗（如
图所示）。下列说法错误的是（ ）
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A．培育人源肾元祖细胞需向iPS 细胞培养液中加入定向诱导分化剂
B．过程②需要将荧光蛋白标记的人源肾元祖细胞植入囊胚的内细胞团
C．过程③操作之前不需要对代孕母猪进行超数排卵和同期发情处理
D．该技术培育的人源肾脏不必考虑肾移植个体之间的遗传差异
三、综合题
26．花生是我国重要的经济作物之一，根系在生长过程中，会分泌苯甲酸、苯乙酮、丙三醇、苯甲醛等物
质，这些物质会抑制青枯病原菌和其他植物的生长。由于土地限制等原因，同一土地多年连续种植现象十
分普遍，这些物质产生的自毒作用越来越明显，造成花生产量下降。扬州大学已采用“采集根际土壤→选
择培养→分离、纯化培养→菌种鉴定”途径筛选出将苯甲酸降解为无毒小分子（CO₂ 和H₂O 等）的根际菌。
回答下列相关问题：
(1)花生根系分泌的苯甲酸等物质属于其 （填“初生”或“次生”）代谢物，合成该类物质的
代谢的进行特点是 。
(2)为什么要从连作花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌？
(3)为确保能够分离得到苯甲酸分解微生物，常将土壤稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为
，进行该步操作的目的是 。
(4)分离、纯化培养时，可采用 方法接种，从物理形态角度考虑，该培养基属于
培养基。
(5)获得的菌种可通过 工程大量增殖，并作为微生物肥料施用于土壤。采用微生物降解、修复
土壤技术的优点有
(6)筛选得到的降解苯甲酸的根际菌并不能直接推广应用，还需考虑的原因有哪些？（答出1 点即可）
27．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最
常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤
作用。下图1 是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B 淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能
同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2 是某双特异性抗体作用图。请分析回
答下列问题：
24
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(1)与植物体细胞杂交相比，图2 中过程②特有的诱导融合的方法是 ，过程②选用的骨髓瘤细胞
（选填“能”或“不能”）在HAT 培养基上生长。
(2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特
异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是 （答出三点）。
(3)图2 中①步骤注射癌胚抗原的目的是 。图2 方框内需要经过筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤
细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为 、有害代谢物的积累和培养液中营
养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
(4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是
，体现的是双特异性单克隆抗体在运载药物方面的用途。
28．平菇具有味道鲜美，抗杂菌污染的优势，杏鲍菇具有菌丝强壮，生长旺盛的优势。为获得具有优良性
状的平菇形菌株，研究者利用原生质体融合技术，进行了如下研究。回答下列问题：
(1)以原生质体融合技术培育杂种新菌株的典型优势是 。
(2)用酶解法处理平菇和杏鲍菇获取原生质体时，要严格控制酶的 （至少答出两点），以获得
存活质量较高的原生质体，培养原生质体时，需要向培养液中加入适宜浓度的甘露醇来维持 ，
以维持细胞正常的形态和功能。
(3)采用不同浓度PEG 诱导原生质体融合，实验结果如表1 所示。
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表1
PEG 质
量分数
25%
30%
35%
40%
原生质
体状态
有破碎现象，哑铃
型细胞比例<0.01%
表现正常，哑铃
型细胞比例
0.03%
原生质体出现缩小现象，
哑铃型细胞比例0.01～
0.02%
原生质体出现缩小现象，
哑铃型细胞比例0.01～
0.02%
两个原生质体融合效果较好时会呈现哑铃型细胞，融合的原理是 。实验结果显示：
。
(4)鉴定菌株间遗传关系时，常将待测菌株的菌丝体接种于同一培养基内，若两菌丝体间长出“拮抗线”，
说明二者的遗传关系较远（见图1）。借助此原理，快速筛选出一株与两亲本菌株遗传关系较远的融合菌
株X，请按照图1 模式图在图2 中绘制模式图，标注接种菌丝体位置，注明菌株类型，并预测拮抗线的位
置。
(5)对上述融合菌株接种培养，筛选出外形为平菇形的5 株新菌株，结果如表2 所示。
表2
菌株编号
长满营养基质的时间/d
平均产量/（kg·sack-1）
1
27
0.55
2
27.6
0.54
3
26.4
0.51
4
26.2
0.68
5
25.8
0.58
根据上述结果，科研人员最终选择 作为目的菌种。理由是 。
29．抗PD-L1 单克隆抗体能与肿瘤细胞膜表面的PD-L1 特异性结合，因而具有治疗某些癌症的作用。下图
表示利用小鼠制备抗PD-L1 单克隆抗体的流程。回答下列问题：
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(1)步骤①中，用PD-L1 免疫小鼠，其目的是获得 。
(2)经过步骤②后获得的细胞需要在 上进行筛选，在该培养基上， 的细胞都会死亡，
只有融合的杂交瘤细胞才能生长，然后对获得的杂交瘤细胞进行 ，经多次筛选，就可获得足
够数量分泌抗PD-L1 单克隆抗体的细胞。
(3)单克隆抗体的优点有 。
(4)利用小鼠制备的抗体是鼠源抗体，鼠源抗体具有外源性，会被人体免疫系统当作抗原而清除(称为人抗
鼠抗体反应即HAMA 反应)。抗体结构示意图如下，引起HAMA 反应的主要是“C 区”，通过制备人鼠嵌
合抗体可以解决HAMA 反应。现利用重组DNA 技术可以制备人鼠嵌合抗体，制备人鼠嵌合抗体基因时，
应先将人抗体的 区基因与鼠抗体的 区基因进行拼接；然后再将拼接好的人鼠嵌合
抗体基因与适宜的载体结合，构建表达载体。将表达载体利用 技术导入哺乳动物细胞，表达
出嵌合抗体。
(5)为了进一步减少免疫排斥反应，科学家利用噬菌体展示库技术生产出全人源化单抗(单抗成分全部由人
的基因编码)。具体操作如下，用PCR 技术从生物体内扩增出整套编码人抗体的基因序列，克隆到噬菌体
载体上，并以融合蛋白的形式在细菌内表达到噬菌体表面，从而可以方便地对抗体进行筛选、扩增。但是
利用这种方法制备的抗体结构准确程度下降，原因是 。
30．近年来，由于世界人口的迅速增长、生物资源的过度开发和环境污染的日渐增重等诸多问题，导致野
生动物郊狼的物种数量不断减少、濒临灭绝，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，甚至无法完成。
科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。具体流程
如下：
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(1)一般来说，郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH 和渗透压、 、
。
(2)待郊狼数量增多以后，还可以采用体外受精技术或动物细胞核移植技术获得郊狼胚胎，并进行胚胎移植，
进一步恢复濒危郊狼的种群数量。下列叙述正确的是
①动物细胞核移植属于动物细胞工程技术
②体外受精前需要对郊狼的精子进行获能处理
③体外受精前常需要对雌性郊狼进行超数排卵处理
④胚胎早期发育时，桑葚胚内部开始出现含液体的腔
⑤胚胎移植时，受体常会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT 技术难度更 ，原因是 。
(4)采用机械方法将郊狼早期胚胎切割后移植，可以获得同卵双胎或多胎，下列说法正确的是____
A．胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚
B．不考虑基因突变，利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
C．胚胎分割时，需将囊胚的滋养层进行均等分割
D．胚胎移植充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能
(5)从生态的角度分析，iSCNT 技术的优点是 。
(6)生物技术在造福人类的同时也可能带来安全与伦理问题，下列有关生物技术安全性等问题的观点错误的
是____
A．生殖性克隆人理论上增加了人类基因的多样性
B．生殖性克隆需要核移植技术，而治疗性克隆不需要
C．鉴于转基因食品安全的不确定性，应该禁止转基因食品上市
D．我国禁止克隆人的实验，对治疗性克隆实验也进行严格审查
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