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专题14 细胞工程、胚胎工程
（基础题+提升题+创新题 三位一体）
1．（2024·广东·一模）萨福克羊生长发育快、产肉性能好。某农牧科技公司将萨福克羊的胚胎移植到产奶
能力强的东弗里生母羊的子宫中，达到快速生产优良种羊的目的。需对东弗里生母羊进行的操作是（ ）
A．超数排卵
B．细胞核移植
C．人工授精
D．同期发情
【答案】D
【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、
生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
【详解】A、超数排卵是指用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，A 错误；
B、细胞核移植是将供体细胞核移植到去核的卵母细胞中，B 错误；
C、人工授精是指通过非性交方式将取出的精液进行实验室处理后，放入雌性生殖道内，以达到受孕目的
一种技术，C 错误；
D、胚胎移植时，需要对供体和受体进行同期发情处理，D 正确。
故选D。
2．（2024·辽宁葫芦岛·一模）为检测某药物X 的抗癌活性， 在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝
癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入溶于二甲基亚矾的药物X，培养 72 小时后进行计数，比较实验组和
对照组每个孔中细胞数目。下列有关叙述错误的是（ ）
A．细胞培养液中通常需要加入血清等天然成分
B．对照组中应加入等体积的无菌水， 其他条件一致
C．可用胰蛋白酶处理使贴壁的肝癌细胞脱落下来并进行计数
D．若实验组细胞数远低于对照组， 可初步判断此药物有抗癌效果
【答案】B
【分析】1、分析题干可知：自变量是药物X，因变量是检测癌细胞数量。2、动物细胞培养的条件：（1）
无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素，防止培养过程中的污染；③定期更换培养液，
以便清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长
因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空
气和5%的CO2(CO2 的作用是维持培养液的pH)。
【详解】A、培养动物细胞时，细胞培养液中通常需要加入血清，A 正确；
B、实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X，故对照组中应加入等体积的二甲基
亚矾（溶剂），B 错误；
C、对于已经贴壁生长的动物细胞，可用胰蛋白酶处理，使肝癌细胞脱落下来并进行计数，C 正确；
D、分析实验结果可知，添加药物X 的实验组肝癌细胞数目远低于对照组，可以初步判断药物X 的抗癌效
果较好，D 正确。
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故选B。
3．下列实例与所利用的技术或原理不相符合的是（ ）
A．转基因抗虫棉和单倍体的培育都需要利用植物组织培养技术
B．植物体细胞杂交和动物细胞培养依据的原理都是细胞具有全能性
C．植物原生质体融合和动物细胞融合都利用了细胞膜具有一定的流动性
D．植物愈伤组织的形成和杂交瘤细胞的培养都离不开细胞的有丝分裂
【答案】B
【详解】A、转基因抗虫棉的培育过程：①在棉花的植株上提取叶肉细胞②在苏云金杆菌上提取相应基因
③将提取基因导入植物叶肉细胞的DNA（利用基因重组技术）④通过培养既培养出愈伤组织，进行再分化
⑤最后通过组织培养技术，得到含抗虫基因的棉花植株，单倍体的培育要用花粉离体培养成单倍体幼苗
（借助于植物组织培养），然后再秋水仙素处理幼苗，形成正常纯合体，A 正确；
B、植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性，动物细胞培养依据的原理是细胞的增殖，B 错
误；
C、原生质体融合和动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C 正确；
D、植物愈伤组织的形成是经过脱分化产生，与细胞有丝分裂有关，杂交瘤细胞的培养是细胞本身增多的
过程，也与细胞有丝分裂有关，D 正确。
故选B。
4．地钱具有重要的药用价值，若要利用叶片快速人工繁育，可用的技术是（ ）
A．单倍体育种技术
B．干细胞技术
C．细胞核移植技术
D．植物组织培养技术
【答案】D
【分析】植物组织培养技术：（1）过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体
→植株（新植体）；（2）原理：植物细胞的全能性；（3）条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜
温度、适时的光照、pH 和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分
裂素）；（4）植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、
作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】用叶片快速人工繁育，可用的技术是植物组织培养，该技术的原理是植物细胞的全能性，D 正确，
故选D。
57．（2023·河北·高考真题）植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。下列叙
述错误的是（ ）
A．植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理
B．经纤维素酶和果胶酶充分处理后，植物细胞团分散为单个完整的悬浮细胞
C．为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH 和渗透压
D．利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗
【答案】B
【分析】植物细胞培养需要在无菌条件下进行人工操作：保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含
氮有机物）、生长因子（维生素）等营养物质的供应；需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和
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细胞分裂素；愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体，能进行光合作用，故需光照。
【详解】A、为了避免杂菌污染，植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理，A 正确；
B、纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得的是原生质体，不能获得单个完整的悬浮细胞，B 错误；
C、细胞的正常生长需要适宜的条件，因此，为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH 和渗
透压，C 正确；
D、利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗，同样也不受季节和天气得限制，D 正确。
故选B。
5．（2024·辽宁·一模）2018 年3 月，最后一头雄性北方白犀牛去世，至此世界上仅剩两头雌性个体。如今，
科研团队拟采用提前保存的北方白犀牛冷冻精子借助核移植、体外受精等技术，以南方白犀牛作为代孕母
畜人工繁育北方白犀牛。下列叙述合理的是（ ）
A．须注射免疫抑制剂以减弱代孕母畜对植入胚胎的免疫排斥反应
B．冷冻保存的精子需再经获能处理才可用于体外受精
C．若取雌性白犀牛的体细胞进行核移植，获得的克隆后代可繁衍为一个种群
D．理论上可取早期胚胎用酶处理成单个细胞分别培养，以提高胚胎的利用率
【答案】BD
【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2 等份、4 等份或者8 等份等，经移植获得同卵双
胎或者多胎的技术。
【详解】A、代孕母畜对植入胚胎基本上不会产生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，A 错误；
B、冷冻保存的精子已经成熟，不需要再培养 ，但需要获能处理才可用于体外受精，B 正确；
C、用雌性白犀牛体细胞进行核移植克隆出多头子代，获得的克隆后代均为雌性，不能繁殖后代，故不是
一个种群，C 错误；
D、理论上可取早期胚胎用酶处理成单个细胞分别培养，以提高胚胎的利用率，D 正确。
故选BD。
6．（2024·河北·一模）犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，致死率也高。利用小鼠制备抗
CPV 单克隆抗体的基本流程如图所示。下列有关说法正确的是（ ）
A．步骤①中，可用灭活的CPV 对小鼠多次进行免疫
B．经过步骤②，会存在多种融合细胞及未融合的细胞
C．对获得的杂交瘤细胞克隆化培养和抗体检测可获得目的细胞
D．用抗CPV 抗体对疑似感染CPV 幼犬进行检测依据DNA 复制的原理
【答案】ABC
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免
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疫的B 淋巴细胞；诱导B 细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛
选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培
养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、步骤①中，可用灭活的CPV 对小鼠多次进行免疫，刺激机体产生更多B 淋巴细胞，A 正确；
B、步骤②是指在促融合剂的作用下，使细胞融合，但是不会使所有的细胞都发生融合，所以会存在多种
融合细胞及未融合的细胞，B 正确；
C、对获得的杂交瘤细胞克隆化培养（对产生的杂交瘤细胞进行进行细胞培养，增加细胞数目，并产生更
多的抗体）和抗体检测可获得目的细胞，C 正确；
D、用抗CPV 抗体对疑似感染CPV 幼犬进行检测依据抗原与抗体的特异性结合的原理，D 错误。
故选ABC。
7．（2024·江苏泰州·一模）下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ）
A．用自然生长的茎进行组织培养须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠混合液消毒
B．培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换
C．为防止杂菌污染，从接种外植体到生成试管苗尽量在同一个锥形瓶内完成
D．组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质，蛭石能提供生长支撑和促进植物生长
【答案】D
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、
芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒，先用70%乙醇，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消
毒处理，最后再用无菌水清洗，A 错误；
B、培养瓶用专用封口膜封口的目的是防止杂菌污染，并不影响气体交换，B 错误；
C、接种外植体到生成试管苗不能在同一个锥形瓶中完成，因为脱分化和再分化的条件以及培养基都不一
样，C 错误；
D、组培苗生存能力较弱，需要进行锻炼，采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石保水透气，因此组培苗锻
炼时采用蛭石作为栽培基质，蛭石能提供生长支撑和促进植物生长，D 正确。
故选D。
8．（2024·黑龙江·一模）植物形态可随环境条件的改变而发生改变，具有可塑性，使植物更加适应环境的
变化。现有四种不同环境条件：a.土壤施肥；b.顶端损伤；c.遮荫；d.踩踏。下列①～④所对应的植物形态
变化简图与四种环境匹配正确的是（ ）
A．①—a,
—d,
—c,
—b
②
③
④
B．①—a,
—c,
—d,
—b
②
③
④
C．①—b,
—a,
—c,
—d
②
③
④
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D．①—b,
—d,
—c,
—a
②
③
④
【答案】C
【分析】植物的顶端优势：指植物顶芽产生的生长素向下运输到侧芽的部位积累，使顶芽的生长素浓度相
对较低，促进生长，侧芽生长素浓度相对较高，抑制生长，体现了既促进又抑制的特点。植物的避阴反应
是指当植物受到周围环境遮阴时，会表现出茎秆细高、分枝减少、节间伸长、开花加快等特征，这种反应
是植物应对环境胁迫、针对光信号做出的可塑性反应。
【详解】土壤施肥会使植物茎秆粗壮叶片更加茂盛对应②；b 顶端损伤会使植物丧失顶端优势，侧枝更长
对应①；c 遮荫会使植物茎秆细高、分枝减少对应③；d 踩踏会使植物茎秆折断，植株矮小对应④，因此
ABD 错误，C 正确。
故选C。
9．（2024·黑龙江·一模）紫杉醇是红豆杉属植物体内的一种天然物质，能有效抑制DNA 的解旋，现已广
泛用于乳腺癌的治疗。传统生产紫杉醇的方法是从红豆杉的树皮和种子中提取，不利于对红豆杉的保护。
我国科学家经过多年研究，筛选出了高产紫杉醇的细胞。下列有关叙述，错误的是（ ）
A．紫杉醇是红豆杉植物的一种次生代谢物，在细胞中含量很低
B．紫杉醇只能通过影响DNA 的复制来抑制癌细胞增殖
C．可通过诱变的方法获得高产紫杉醇细胞
D．将高产紫杉醇的细胞进行植物细胞培养，可以工厂化生产紫杉醇
【答案】B
【分析】初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，因此在整个生命过程中它一直进行着。初生代谢
物有糖类、脂质、蛋白质和核酸等。次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中，并在
一定的环境和时间条件下才进行。
【详解】A、紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，次生代谢物不是生长必需的，在细胞
中含量很低，A 正确；
B、DNA 解旋后成为单链可作为复制和转录的模板，分析题意，紫杉醇能有效抑制DNA 的解旋，故紫杉
醇能通过影响DNA 的复制或转录来抑制癌细胞增殖，B 错误；
C、诱变可引发突变，故可通过诱变的方法获得高产紫杉醇细胞，C 正确；
D、植物的次生代谢物通常含量很低，从植物组织中提取会大量消耗植物资源，将高产紫杉醇的细胞进行
植物细胞培养，可以工厂化生产紫杉醇，D 正确。
故选B。
10．（2024·贵州贵阳·一模）SOD 是一种广泛分布于各种细胞中的抗氧化酶，它能催化超氧阴离子自由基
形成H2O2，增强植物的抗逆性。如图流程为培育能够产生SOD 农作物新品种的一种方式，下列有关叙述
正确的是（ ）
A．①过程中可用选择培养基筛选出含SOD 基因的新细胞
B．②过程通常需要提供光照条件
C．与②过程对比，③过程培养基中激素的比例应保持不变
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D．利用该过程产生的新植株属于有性繁殖
【答案】A
【分析】由图分析可知该过程是植物细胞工程和基因工程的结合，其中①为基因工程中导入目的基因，②
为脱分化，③为再分化。
【详解】A、在基因工程中将目的基因导入受体细胞后，可以通过相应的选择培养基或其他方式进行初步
的筛选出含SOD 基因的新细胞， A 正确；
B、②过程形成愈伤组织，因此表示脱分化，脱分化需要避光培养，B 错误；
C、③过程是再分化，所用激素的比例与脱分化时所用的比例不一样，C 错误；
D、利用该过程产生的新植株未经两性细胞的结合，属于无性繁殖，D 错误。
故选A。
11．（2024·贵州贵阳·一模）科学家经过长期的探索，实现了用不同种动物的体细胞进行杂交。图为动物
细胞融合的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A．通过动物细胞融合技术、早期胚胎培养等生物技术能获得鼠首兔身的新物种
B．诱导动物细胞融合常用的方法有PEG 融合法、电融合法和灭活病毒诱导法
C．当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞，标志着动物细胞融合的完成
D．只考虑两两融合，动物细胞与人细胞之间诱导融合，产生的融合细胞有3 种
【答案】A
【分析】动物细胞融合的方法：聚乙二醇诱导、电融合法、灭活的仙台病毒诱导等。
【详解】A、动物体细胞不表现全能性，两动物细胞融合成的杂交细胞无法发育成个体，A 错误；
B、诱导动物细胞融合的方法有PEG 融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，B 正确；
C、两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞，标志着动物细胞融合的完成，C 正确；
D、只考虑两两融合，动物细胞与人细胞之间诱导融合，产生的融合细胞有3 种，有人细胞与人细胞融合，
动物细胞与动物细胞融合，人细胞与动物细胞融合三种，D 正确。
故选A。
12．（2024·江苏泰州·一模）ThTC 指的是经基因编辑技术改造后失去成瘤能力，但能自主分泌干扰素β
（IFNβ）的一种新型治疗性肿瘤活疫苗，它能发挥阻断肿瘤生长且引起机体免疫反应等效用，其制备过程
及作用机理如下图。相关叙述正确的有（ ）
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A．为避免ThTC 被自身分泌的干扰素β 攻击，需去除ThTC 的干扰素β 受体
B．ThTC 分泌的干扰素β 等细胞因子使肿瘤细胞坏死，从而阻断肿瘤生长
C．死亡的肿瘤细胞暴露抗原，可能被APC 呈递给T 细胞进而促进抗肿瘤免疫应答
D．可设置ThTC 自毁机制，使其在完成抗肿瘤使命后于特定激活条件下被清除
【答案】ACD
【分析】已知ThTC 指的是经基因编辑技术改造后失去成瘤能力，但能自主分泌干扰素β（IFNβ）的一种
新型治疗性肿瘤活疫苗，它能发挥阻断肿瘤生长且引起机体免疫反应等效用，可用来预防癌症发生。
【详解】A、干扰素需与受体结合才能发挥作用，因此为避免ThTC 被自身分泌的干扰素β 攻击，需去除
ThTC 的干扰素β 受体，A 正确；
B、据图可知，ThTC 分泌的干扰素β 等细胞因子使肿瘤细胞形成了凋亡小体，因此其死亡属于细胞凋亡，
B 错误；
C、死亡的肿瘤细胞暴露抗原，可能被APC 呈递给T 细胞进而促进抗肿瘤免疫应答，产生免疫记忆，C 正
确；
D、由于ThTC 细胞本身是肿瘤细胞，有可能在体内无限增殖，引发不良反应，因此可设置ThTC 自毁机制，
使其在完成抗肿瘤使命后于特定激活条件下被清除，D 正确。
故选ACD。
13．（2024·江苏泰州·一模）医学和农业生产上经常应用胚胎工程技术，相关叙述错误的是（ ）
A．为使雌性动物超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素
B．可以使用雄性动物获能的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用
C．早期胚胎中初次发生分化的细胞一部分形成内细胞团，将来发育成胎盘和胎膜
D．为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割等无性繁殖技术
【答案】AC
【分析】囊胚期细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层
的细胞将来发育成胎盘和胎膜。促性腺激素的化学本质是蛋白质，不能口服。进行胚胎分割时，应选择发
育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会
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影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、促性腺激素属于蛋白质类激素，在饲料中添加的促性腺激素，因在动物的消化道中被分解而
失去促进超数排卵的作用，A 错误；
B、雄性动物新鲜的精子获能后才具备受精能力，因此，可以使用雄性动物获能的精子与处于M Ⅱ期卵母
细胞完成受精作用，B 正确；
C、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，C 错误；
D、为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割、移植等无性繁殖技术实现，通过胚胎分割获得的胚胎遗传特性
相同，D 正确。
故选AC。
14．（2023·北京平谷·一模）三七具有重要的药用价值，可用植物组织培养技术快速繁育并提取代谢产物
人参皂苷，下列有关说法错误的是（ ）
A．培养基中添加蔗糖为细胞提供营养、调节渗透压
B．在植物组织培养过程中要用纤维素酶和果胶酶处理
C．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
D．在脱分化过程中组织细胞的全能性不断增强
【答案】B
【分析】植物组织培养过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再
分化形成芽、根等，进一步发育成植株，植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、蔗糖可以缓慢被植物细胞吸收，培养基中添加蔗糖可以提供营养和调节渗透压， A 正确；
B、如果在植物组织培养过程中用纤维素酶和果胶酶处理，就会破坏植物细胞的细胞壁，会影响细胞的生
命活动，B 错误；
C、植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞生命活动的关键性激素，两者的用量比例会影响细胞的发
育方向，生长素与细胞分裂素用量比值适中时，促进愈伤组织；生长素与细胞分裂素用量比值低时，有利
于芽的分化；生长素比例明显高于细胞分裂素时，有利于根的分化，C 正确；
D、脱分化是让分化的细胞失去分化的特征而成为未分化的细胞，因此细胞的全能性不断增强，D 正确。
故选B。
15．（2024·安徽合肥·一模）海鞘未受精的卵经过活体染色后，可被人工分离为四种不同颜色的卵片（具
有细胞膜），如图所示。研究发现只有红卵片含有细胞核，不同卵片所含物质不完全相同，其中一些物质
与细胞的发育命运有关。下列选项中，对“只有黄卵片具有决定分化为肌肉细胞的能力”的推断，最有力
的实验证据组合是（ ）
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①只有红卵片受精后才能形成胚胎，并且只能分化成表皮细胞；
②当红卵片和黄卵片融合并受精后，产生含有表皮细胞和肌肉细胞的胚胎；
③当红卵片与棕卵片或白卵片融合，受精后所得胚胎仅含有表皮细胞；
④当黄卵片与棕卵片或白卵片融合，受精后都不会产生含有肌肉细胞的胚胎。
A．①②③
B．①②
C．②③④
D．①③④
【答案】A
【分析】1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能
上发生稳定性差异的过程。
2、细胞分化的特点：普遍性、稳定性、不可逆性。
3、细胞分化的实质：基因的选择性表达。
4、细胞分化的意义：使多细胞生物体中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。
【详解】①题干提出只有红卵片含有细胞核，实验结果为只有红卵片受精后才能形成胚胎，并且只能分化
成表皮细胞，说明红卵片具有决定分化为表皮细胞的能力，①符合题意；
②当红卵片和黄卵片融合并受精后，产生含有表皮细胞和肌肉细胞的胚胎，题干信息“不同卵片所含物质
不完全相同，”结合①实验证据，可以说明“黄卵片具有决定分化为肌肉细胞的能力”，②符合题意；
③当红卵片与棕卵片或白卵片融合，受精后所得胚胎仅含有表皮细胞，结合①②的实验证据，说明棕卵片
和白卵片不具有决定分化为肌肉细胞的能力，①②③组合可以说明“只有黄卵片具有决定分化为肌肉细胞
的能力”，③符合题意；
④当黄卵片与棕卵片或白卵片融合，受精后都不会产生含有肌肉细胞的胚胎，说明都不能决定分化成肌肉，
④不符合题意；
综上所述，①②③组合可以说明“只有黄卵片具有决定分化为肌肉细胞的能力”，A 正确，BCD 错误。
故选A。
16．（2024·安徽合肥·一模）我国科学家突破重重困难，重复多次下图操作过程，获得了两只克隆猴——
“中中”和“华华”，率先将体细胞核移植技术成功地应用于非人灵长类动物的克隆。下列有关说法正确
的是（ ）
A．灭活病毒处理是为了促进体细胞核膜与卵母细胞的细胞膜融合
B．重构胚的培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH 等条件
C．用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著低于成年猴的体细胞
D．克隆猴“中中”和“华华”的遗传物质和性状表现完全相同
【答案】B
【分析】克隆是用体细作为供体细胞进行的细胞核移植，它利用了胚胎细胞进行核移植的传统方式，没有
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经过雌雄交配，不需要精子和卵子的结合，只需要从动物身上提取一个细胞（供体细胞），从屠宰场的母
畜的卵巢内采集卵母细胞，培养至减数第二次分裂的中期，然后显微操作去除卵母细胞的细胞核，将供体
细胞核移入除去核的卵母细胞中，使其重组构建一个重组细胞，并体外培养发育成一个新的胚胎，再将胚
胎移植到雌性动物子宫内，就可以孕育出新的个体，“中中”和“华华”的获得就是利用了克隆技术。
【详解】A、灭活病毒处理是为了促进体细胞的细胞膜与卵母细胞的细胞膜融合，A 错误；
B、 动物组织培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH 等条件，B 正确；
C、用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著高于成年猴的体细胞，C 错误；
D、遗传物质相同的个体形状表现不一定完全相同，还受环境因素的影响，D 错误。
故选B。
17．（2024·山东滨州·一模）非对称细胞融合技术是指利用射线照射某原生质体，破坏其细胞核；用蕊香
红6G 处理另一原生质体，使其细胞质失活，然后诱导两原生质体融合。研究者利用该技术获得了抗三嗪
类除草剂（芸苔叶绿体基因控制） 的萝卜新品种。下列说法错误的是（ ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理两种植物的组织细胞获得原生质体
B．用射线照射芸苔原生质体，用蕊香红6G 处理萝卜原生质体
C．可用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等方法诱导原生质体融合
D．融合后的原生质体必须经过筛选才可获得杂种细胞的原生质体
【答案】C
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培
养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细
胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据
植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，根据酶的专一性，用纤维素酶和果胶酶处理两种植
物的组织细胞获得原生质体，A 正确；
B、结合题干“非对称细胞融合技术是指利用射线照射某原生质体，破坏其细胞核；用蕊香红6G 处理另一
原生质体，使其细胞质失活”、“芸苔叶绿体基因控制”以及叶绿体位于细胞质中可知，用射线照射芸苔
原生质体（保证细胞质中叶绿体的活性），用蕊香红6G 处理萝卜原生质体，B 正确；
C、可用聚乙二醇、电激等方法诱导原生质体融合，灭活的病毒用于诱导动物细胞的融合，C 错误；
D、植物原生质体的融合是随机的，融合后的原生质体必须经过筛选才可获得杂种细胞的原生质体，D 正
确。
故选C。
18．（2024·贵州·一模）我国科学家通过对动物体细胞进行基因编辑，得到含有修饰后的目的基因的细胞
作为供体，利用体细胞核移植技术获得基因修饰克隆动物。下列叙述错误的是（ ）
A．使用的受体卵母细胞需处于MⅡ期且去除核膜包被的细胞核
B．需要用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育
C．为同时获得多个遗传背景相同的动物，移植前可对早期胚胎进行分割
D．体细胞核移植技术日趋成熟，但许多克隆动物仍表现出遗传和生理缺陷
【答案】A
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【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞
发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；
克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因；克隆特定疾病模型的动物，还
能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。
【详解】A、卵母细胞需处于M Ⅱ期中的核其实是纺锤体—染色体复合物，此时没有核膜，A 错误；
B、使用电刺激、Ca2+载体等方法可以激活重构胚, 使其完成细胞分裂和发育过程，B 正确；
C、为同时获得多个遗传背景相同的动物，移植前可对早期胚胎（桑葚胚或囊胚）进行分割，属于无性繁
殖，C 正确；
D、体细胞核移植技术日趋成熟，但许多克隆动物仍表现出遗传和生理缺陷，需进一步探索和完善，D 正
确。
故选A。
19．（2024·江苏泰州·一模）下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质
B．胚胎移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满CO2的培养箱中进行
C．移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌
D．胚胎干细胞和成纤维细胞功能不同，是因为表达的基因都不同
【答案】AC
【分析】1、动物细胞在体外培养时，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。将细胞所需的营养物
质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研
究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。培养动物细胞一般使用液体培养
基，也称为培养液。
2、动物细胞培养所需气体主要有O2 和CO2。O2 是细胞代谢所必需的，CO2 的主要作用是维持培养液的
pH。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2 的混合气
体的CO2 培养箱中进行培养。
【详解】A、由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在细胞培养和早期胚胎培养的培养
液中通常添加血清等物质，A 正确；
B、动物细胞培养所需气体主要有O2 和CO2，其中CO2 的主要作用是维持培养液的pH，所以细胞培养和
早期胚胎培养都需在CO2 培养箱中进行培养，但不是充满，B 错误；
C、移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌，即母体的生理状态影响着胚胎的发育，胚
胎的发育也影响母体激素的合成，C 正确；
D、胚胎干细胞和成纤维细胞功能不同，是因为表达的基因具有选择性，表达的基因不完全相同，D 错误。
故选AC。
20．（2024·江苏泰州·一模）胆固醇O 酰基转移酶1(SOAT1)与肝癌的发生密切相关，可作为潜在的肝癌生
物标志物。科研人员从肝癌细胞Huh7 中获取SOAT1 基因，经原核表达、蛋白质纯化后免疫小鼠制备单克
隆抗体。请回答下列相关问题：
(1)从肝癌细胞Huh7 中提取 ，通过 获得SOAT1 的cDNA。
(2)根据SOAT 1 的编码序列设计的两个引物如下图1。引物F 加入的EcoR Ⅰ酶切位点位于 端，引
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物R 上添加的XhoⅠ酶识别的回文序列的6 个碱基是 。
(3)利用上述引物对SOAT1 基因进行PCR 扩增，该实验设计的扩增程序中热循环次数为30 次，一般PCR
反应中设计的热循环次数不超过40 次，原因是 。PCR 反应结束后，将产物经1%琼脂糖凝
胶 后，对PCR 产物进行胶回收。
(4)将胶回收后的PCR 产物和载体pET32a 分别用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切，加入DNA 连接酶后在冰面上过夜。
在冰面上操作的目的是 。在将重组质粒转化至大肠杆菌前用CaCl2处理大肠杆菌，使其处
于 的生理状态，以提高转化效率。
(5)将测序正确的重组载体诱导表达并进行电泳，实验部分结果见下图2，SOAT 1 重组蛋白的相对分子质量
为50 kD 左右，下图中基本符合要求的条带包括 。
(6)用纯化的SOAT1 重组蛋白免疫小鼠，利用 技术获得SOAT1 单克隆抗体细胞株以制备单克隆抗
体。
【答案】(1) 总RNA 逆转录
(2) 5′ CTCGAG(或5′—CTCGAG—3′)
(3) 40 次循环后可能出现大量非特异性产物(或40 次循环是PCR 反应的有效极限) 电泳
(4) 降低连接反应的速率，减少多联体(非目标重组DNA)的形成(或低温使氢键稳定，减少错配等)
感受态(或易吸收外源DNA 状态)
(5)2、3、5
(6)杂交瘤(动物细胞培养和动物细胞融合)
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR 技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标
记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的
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方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；
将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA 是否插入目的基因
——DNA 分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否
翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）为获得SOAT1 的cDNA，需要从肝癌细胞中获得总RNA，通过逆转录过程获得。
（2）EcoR Ⅰ酶特异性识别GAATTC 序列，并在GC 之间切割，从F 引物看出，EcoR Ⅰ酶切位点位于
5′，引物R 上添加的Xho Ⅰ酶识别的回文序列的6 个碱基是CTCGAG(或5′—CTCGAG—3′)。
（3）由于40 次循环后可能出现大量非特异性产物(或40 次循环是PCR 反应的有效极限)，所以一般PCR
反应中设计的热循环次数不超过40 次，产物1%琼脂糖凝胶电泳后，对PCR 产物进行胶回收。。
（4）双酶切，加入DNA 连接酶后在冰面上过夜，冰面温度低，使酶的活性降低，所以操作的目的是降低
连接反应的速率，减少多联体(非目标重组DNA)的形成。将重组质粒转化至大肠杆菌前用CaCl2 处理大肠
杆菌，使其处于感受态，以提高转化效率。
（5）观察电泳图，在条带2、3、5 中含有50KD 的蛋白质分子，而SOAT 1 重组蛋白的相对分子质量为50
kD 左右，所以符合要求的条带包括2、3、5。
（6）获得SOAT1 单克隆抗体细胞株可以利用杂交瘤(动物细胞培养和动物细胞融合)技术，特点是可以无
限增殖，并产生特异性抗体。
21．（2024·山东烟台·一模）科学家用紫外线照射板蓝根原生质体，使其部分染色体丢失，将处理后的板
蓝根原生质体与油菜原生质体融合，培育出了只含一条板蓝根染色体和油菜全部染色体的非对称杂种植株，
该过程运用了非对称细胞融合技术。下列说法正确的是（ ）
A．原生质体由细胞膜、液泡膜及两者之间的细胞质组成
B．融合原生质体需放在无菌水中培养，以防杂菌污染
C．非对称细胞融合技术降低了不同物种间基因表达的干扰程度
D．非对称细胞融合技术提高了植物细胞的全能性，属于细胞工程
【答案】C
【分析】1、植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细
胞培育成新植物体的技术。在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得
原生质体；人工诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类—物理法和化学法：物理法包括电融合法、
离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法等。
2、非对称细胞融合技术常指利用某种外界因素（如射线）辐照某一细胞原生质体，选择性地破坏其细胞
核，使其染色体片段化并丧失再生能力，再进行与另一原生质体融合，紫外线作用于根细胞原生质体，使
染色体片段化，发生了染色体变异，说明非对称细胞融合技术的原理之一是染色体变异（染色体数目变异
和染色体结构变异）。
【详解】A、原生质体是用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁后的植物细胞，而由细胞膜、液泡膜及两者之间
的细胞质组成的结构称为原生质层，A 错误；
B、原生质体放在无菌水中会吸水涨破，应放到等渗的溶液中，保持原生质体的完整性，B 错误；
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C、非对称融合过程中部分染色体丢失，从而降低了不同物种间基因表达的干扰程度，C 正确；
D、非对称融合过程中部分染色体丢失（断裂），所以会降低植物细胞的全能性，D 错误。
故选C。
22．（2024·山东泰安·一模）目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以
精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基
本流程。下列说法错误的是（ ）
A．①过程需将成熟的精子放入ATP 溶液中进行获能处理
B．将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传
C．②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合
D．精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小
【答案】A
【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，
②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。
【详解】A、①过程需将成熟的精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体溶液中，用化学药物诱导精子获能，
A 错误；
B、受精卵中几乎不含精子的细胞质，将外源基因整合到精子的染色体上，是保证外源基因稳定遗传的关
键，B 正确；
C、②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合，C 正确；
D、与显微注射法相比，精子载体法对受精卵中核的影响会更小，理由是不需要穿过核膜，雌雄原核自动
融合（通过受精作用完成整合），D 正确。
故选A。
23．（2024·河北唐山·一模）植物细胞壁中存在大量不能被动物消化的多聚糖类物质，研究人员通过生物
工程技术培育出含多聚糖水解酶基因猪，主要流程如下图，①～⑤表示操作过程。下列有关说法错误的是
（ ）
A．在基因表达载体中构建诱导型启动子，可以利用诱导物激活多聚糖水解酶基因表达
B．从卵巢中采集的卵母细胞需培养到MⅡ期后用显微操作技术去除核膜包裹的细胞核
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C．用蛋白酶合成抑制剂激活③过程形成的重构胚使其完成分裂和发育进程
D．④过程的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移
【答案】B
【分析】分析题图：①为目的基因导入细胞，②为核移植，③为早期胚胎的发育，④为胚胎移植，⑤为产
生子代转基因猪。
【详解】A、启动子（RNA 聚合酶与之结合启动转录的片段）具有特异性，在基因表达载体中构建诱导型
启动子，可以利用诱导物激活多聚糖水解酶基因表达，A 正确；
B、常用显微操作法去除由卵母细胞纺锤体—染色体复合物，而非去除核膜包裹的细胞核，B 错误；
C、用蛋白酶合成抑制剂（电刺激、Ca2＋载体等）激活③过程形成的重构胚使其完成分裂和发育进程，C
正确；
D、④为胚胎移植，④过程的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移，D 正确。
故选B。
24．（2024·河北唐山·一模）紫杉醇具有良好抗癌作用。科研人员用植物外植体获得愈伤组织，然后在液
体培养基中进行细胞悬浮培养，以获得更多紫杉醇。下列叙述错误的是（ ）
A．诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等
B．由愈伤组织得到悬浮细胞可以使用纤维素酶和果胶酶进行处理
C．使用液体培养基并振荡有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长
D．利用植物细胞培养技术获得初生代谢产物紫杉醇能避免大量破坏野生红豆杉种群
【答案】D
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）
脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。
【详解】A、诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等，A 正确；
B、由愈伤组织得到悬浮细胞可以使用纤维素酶和果胶酶进行处理，去除细胞壁，B 正确；
C、使用液体培养基并振荡可增大培养基溶氧量，使细胞与培养基充分接触，有利于细胞获取氧气和营养
物质，促进细胞生长，C 正确；
D、紫杉醇属于次生代谢产物，D 错误。
故选D。
25．（2024·山东聊城·一模）DHA（二十二碳六烯酸）俗称脑黄金，是神经系统细胞生长及维持的一种主
要成分，是构成大脑和视网膜的重要脂肪酸。某科研团队以富含DHA 的自养微藻绿色巴夫藻和生长迅速
的异养微藻四鞭藻两种二倍体单细胞藻类为材料，通过体细胞杂交技术成功培育出了生长迅速且DHA 含
量高的单细胞藻（X 藻）。下列说法正确的是（ ）
A．植物体细胞杂交成功的标志是细胞核的融合
B．X 藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的二倍体藻
C．培育X 过程中还可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻
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D．培育X 藻的技术和生产单克隆抗体的技术所采用的原理相同
【答案】C
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培
育成新植物体的技术。在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得原生
质体。杂交过程中的一个关键环节，是原生质体间的融合，这必须要借助一定的技术手段才能实现。人工
诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类——物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化
学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH 融合法等。融合后得到的杂种细胞再经过诱导可形成
愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。
【详解】A、植物体细胞杂交成功的标志是杂种细胞再生去细胞壁，A 错误；
B、由于绿色巴夫藻和四鞭藻藻都是二倍体，因此X 藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的四倍
体藻，B 错误；
C、由于原生质体融合的过程具有随机性，因此培育X 过程中还可能出现绿色巴夫藻两两融合，四鞭藻两
两融合的现象，所以可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻，C 正确；
D、培育X 藻的技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，而生产单克隆抗体的技术所采用的原
理是细胞膜的流动性，所以两者的原理不完全相同，D 错误。
故选C。
26．（2024·广东江门·一模）条斑紫菜（日常零吃的海苔）原生质体呈紫绿色:拟线紫菜的原生质体呈紫红
色。研究者通过体细胞杂交技术，将上述两种紫菜培育成杂种紫菜。下列叙述正确的是（ ）
A．为了提取两种紫菜的原生质体，可使用蛋白酶以去除细胞壁
B．原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
C．可用台盼蓝染液检测原生质体活力，活的原生质体被染成蓝色
D．利用PEG 诱导融合，可据原生质体颜色差异判断融合是否成功
【答案】D
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种新培育
成新植物体的技术。
【详解】A、为了提取两种紫菜的原生质体，可使用纤维素酶和果胶酶以去除细胞壁，A 错误；
B、原生质体无细胞壁，在低渗溶液中会过度吸水破裂而死亡，故原生质体需在等渗溶液中长期保存，B
错误；
C、细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞中，用台盼蓝染液检测原生质体活力，活的原生质体
为无色，而死的原生质体会被染成蓝色，C 错误；
D、利用PEG 诱导融合，呈紫绿色和紫红色的均为不符合要求的原生质体，可据原生质体颜色差异判断融
合是否成功，D 正确。
故选D。
27．（2024·山东青岛·一模）研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免
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疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2 抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2 单克隆抗
体的制备流程图，下列说法正确的是（ ）
A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2 蛋白和分泌TREM2 抗体的杂交瘤细胞
B．经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2 抗体又可无限增殖
C．步骤③和④的培养孔中均含有TREM2 蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交
D．步骤⑥和植物组织培养均需使用二氧化碳培养箱进行大规模培养
【答案】A
【分析】单克隆抗体的制备过程：
（1）制备产生抗体的B 淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B 淋巴
细胞；
（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B 淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细
胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；
（3）克隆化培养和抗体检测；
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】A、步骤①向小鼠注射TREM2 蛋白，让小鼠发生免疫反应，获得能产生抗体的B 淋巴细胞；步
骤⑤向小 鼠腹腔注射杂交瘤细胞，目的是获得单克隆抗体，A 正确；
B、经步骤②诱导后融合的细胞只有杂交瘤细胞才能既能分泌TREM2 抗体又可无限增殖，B 错误；
C、步骤三是特定培养基筛选杂交瘤细胞，步骤4 是抗原抗体杂交，C 错误；
D、动物细胞培养过程中二氧化碳用于调节培养液的pH 值，而植物组织培养的过程中不需要二氧化碳培养
箱，D 错误。
故选A。
28．（2024·河北·一模）三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者
欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成
分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成
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B．②过程通常在低渗溶液中采用PEG 融合法诱导原生质体融合
C．杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变
D．图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性
【答案】D
【分析】图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形
成愈伤组织，④提取代谢产物。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①三白草和鱼腥草体细胞杂交过程中要利
用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁获得原生质体，盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液会杀死细胞，A
错误；
B、过程②通常在等渗或略高渗溶液中，不能用低渗溶液，不然原生质体会吸水涨破；可以采用化学法
（PEG 融合法）或物理法诱导原生质体融合，B 错误；
C、植物细胞的脱分化就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能，而转变为未分化的
细胞——愈伤组织的过程，因此杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，结构也发生改变，C
错误；
D、图中过程②原生质体融合体现了细胞膜的流动性；将杂种细胞培育成一个完整的新的植物体的过程才
体现了植物细胞的全能性，故图中所示的生产流程没有体现植物细胞的全能性，D 正确。
故选D。
29．（2024·广东江门·一模）动物器官移植到人体内（异种移植）或是解决全球器官紧缺的办法之一。研
究团队对猪肾内皮细胞进行基因编辑、改造后，得到了3 种工程细胞和可提供异种移植肾源的供体猪。具
体流程及部分测量数据如图示。
(1)研究证实供体猪的3 个聚糖抗原基因（3KO）会引致人类、猴等受体的组织不相容。若以未经改造的猪
肾作为异体肾源进行器官移植，受体动物的 细胞和抗体都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，
导致出现 现象。利用CRISPR-Cas9 编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO,该技术需人工设计一种“向
导”RNA，其部分序列与3KO 遵循 原则结合，并引导Cas9 蛋白断裂DNA 双链，从而敲除3KO。
(2)研究表明7 个人类基因（7TG）可增加不同物种之间的兼容性。获取7TG 的方法有 （答出一种即
可）。
(3)为验证敲除3KO、插入7TG 对异体细胞的保护作用，研究者将三组细胞与受体猴血清共孵育，置于CO2
培养箱中培养，CO2的主要作用是 。测量裂解细胞数如图示。据此得出结论:
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(4)供体猪器官常携带多种病毒,其中部分病毒潜在人畜传播风险。例如已有实验证明PERV（猪内源性逆转
录病毒）可以整合到体外培养的人类细胞基因组中。试分析若给人进行异种移植，PERV 的基因可能通过
供体猪器官整合到人类基因组的途径 。因此，为确保安全，对已构建好的3KO.7TG.细胞
需要进行灭活PERV 处理，且在临床试行前须在动物模型中测试。
(5)从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪所利用的现代生物学技术有 （至少答出一种）
【答案】(1) 细胞毒性T 免疫排斥 （碱基）互补配对
(2)从基因文库中获取、PCR 技术扩增目的基因、化学方法直接人工合成
(3) 维持培养液的pH 敲除3KO 并插入7IG 会对异体细胞有更强的保护作用
(4)供体猪器官携带猪内源性逆转录病毒(PERV)，PERV 接触并侵染人类细胞，在人体细胞内逆转录形成
DNA，整合到人类基因组中。
(5)动物体细胞核移植、动物细胞培养(或早期胚胎培养、胚胎移植)
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR 技术扩
增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动
子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】（1）免疫排斥反应主要与细胞免疫中的细胞毒性T 细胞有关，故若以未经改造的猪肾作为异体
肾源进行器官移植，受体动物的细胞毒性T 细胞和抗体 都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，导致
出现免疫排斥反应；利用CRISPR-Cas9 编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO,该技术需人工设计一种“向
导”RNA，其部分序列与3KO 遵循碱基互补配对原则。
（2）7TG 属于目的基因，获取目的基因的方法有：从基因文库中获取、PCR 技术扩增目的基因、化学方
法直接人工合成等方法。
（3）动物细胞培养时二氧化碳的作用是维持培养液的pH；结合图示可知，与猪肾内皮处理组相比，敲除
3KO 并插入7IG 最少，说明敲除3KO 并插入7IG 会对异体细胞有更强的保护作用。
（4）分析题意，PERV 的基因可能通过供体猪器官整合到人类基因组的途径是：供体猪器官携带猪内源性
逆转录病毒(PERV)，PERV 接触并侵染人类细胞，在人体细胞内逆转录形成DNA，整合到人类基因组中。
（5）从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪需要对培养动物细胞到早期胚胎阶段，还涉及体细胞核移
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植的过程，故所利用的现代生物学技术有：动物体细胞核移植、动物细胞培养(或早期胚胎培养、胚胎移
植)。
30．（2024·广东·一模）我国是全球第三大盐碱地分布国家，可用于种植耐盐碱水稻的盐碱地约1000 万
hm2，培育耐盐碱水稻对确保我国的粮食安全具有重要的战略意义。我国科学家利用东农427 水稻品种，
应用CRISPR/Cas9 基因编辑技术，将水稻的两对耐盐负调控基因OsEILl 和OsEIL2 敲除而培育耐盐改良水
稻新品种。图示意两对基因在染色体上的位置关系（不考虑其他基因突变与染色体互换），图示意培育耐
盐水稻的过程。
回答下列问题：
(1)愈伤组织培育成完整植株T1的过程称为 ，在该过程中所用到的关键植物激素有 。
(2)经初步筛选、培育，得到双等位基因突变体T1（3 号和7 号染色体各有1 个耐盐负调控基因被敲除）。
用T1自交，T2代中两对等位基因均有被敲除的突变体（简称“候选品种N”）的比例约为 ；在候选
品种N 中，两对等位基因全部被敲除的双基因纯合突变体的比例约为 。
(3)检测双基因纯合突变体的OsEIL1 基因和OsEIL2 基因，发现均在转录起始位点之后的某个位置增加了1
个碱基，进一步检测发现，两个基因所表达蛋白质的相对分子质量较正常相对分子质量小。据此可推测该
CRISPR/Cas9 基因编辑技术敲除这两个基因的原理是 。
(4)要在个体生物学水平上鉴定是否成功培育出耐盐水稻新品种，其思路是 。
【答案】(1) 再分化 生长素和细胞分裂素
(2) 9/16 1/9
(3)插入1 个碱基后诱导基因突变，使翻译提前终止
(4)在盐碱地种植耐盐水稻新品种，检测生长状况及与东农427 水稻比较产量
【分析】
分析题文描述和题图可知：水稻的两对耐盐负调控基因OsEILl 和OsEIL2 分别位于两对同源染色体上，它
们的遗传遵循基因的自由组合定律。双等位基因突变体T1（3 号和7 号染色体各有1 个耐盐负调控基因被
敲除）相当于双杂合子，耐盐水稻新品种（双基因纯合突变体）相当于双隐性纯合子。
【详解】（1）愈伤组织经过再分化会发育成完整植株，在此过程中生长素和细胞分裂素起到了关键的调
控作用。
（2）由题意和题图可知，水稻的两对耐盐负调控基因的遗传遵循基因的自由组合定律，双等位基因突变
体T1 相当于双杂合子。假设OsEILl 基因及其敲除后分别用A 和a 表示，OsEIL2 基因及其敲除后分别用B
和b 表示，则T1 可以表示为AaBb。T1 自交，T2 代中两对等位基因均有被敲除的突变体（简称“候选品
种N”）包括AaBb、aaBb、Aabb、aabb，它们在T2 代中所占的比例约为9/16；在候选品种N 中，两对等
位基因全部被敲除的双基因纯合突变体（aabb）的比例约为1/9。
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（3）双基因纯合突变体的OsEIL1 基因和OsEIL2 基因均在转录起始位点之后的某个位置增加了1 个碱基，
两个基因所表达的蛋白质的相对分子质量较正常相对分子质量小，说明敲除后的OsEIL1 基因和OsEIL2 基
因在转录形成的mRNA 分子上提前出现了终止密码子，导致翻译提前终止。据此可推测该CRISPR/Cas9 基
因编辑技术敲除这两个基因的原理是：插入1 个碱基后诱导基因突变，使翻译提前终止。
（4）要在个体生物学水平上鉴定是否成功培育出耐盐水稻新品种，可以在盐碱地种植耐盐水稻新品种，
检测生长状况及与东农427 水稻比较产量。
31．（2024·辽宁辽阳·一模）中华猕猴桃原产于我国长江中下游，抗寒能力弱；狗枣猕猴桃原产于俄罗斯，
耐低温，但果实小。某实验小组欲得到果大且抗寒的杂种植株，其过程如图所示。下列分析正确的是（
）
A．过程①的组织细胞经过湿热灭菌后可避免细菌污染
B．过程②常使用灭活的病毒作为诱导剂诱导原生质体融合
C．过程③杂种细胞再生出细胞壁标志着细胞融合成功
D．过程⑤不需要进行光照处理，过程⑥需要进行光照处理
【答案】C
【分析】植物体细胞杂交技术就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂
种细胞培育成完整植物体的技术。
【详解】A、过程①为去壁获得原生质体，组织细胞不能进行湿热灭菌以避免细胞死亡，A 错误；
B、过程②属于原生质体融合，常使用灭活的病毒作为诱导剂诱导动物细胞融合，B 错误；
C、过程③杂种细胞经培养后再生出细胞壁，标志着细胞融合成功，C 正确；
D、过程④为脱分化，不需要进行光照处理，过程⑤为再分化，过程⑥为幼苗生长发育过程，过程⑤和⑥
都需要进行光照处理，便于叶绿素的合成，进行光合作用制造有机物，D 错误。
故选C。
32．（2024·山东聊城·一模）DHA（二十二碳六烯酸）俗称脑黄金，是神经系统细胞生长及维持的一种主
要成分，是构成大脑和视网膜的重要脂肪酸。某科研团队以富含DHA 的自养微藻绿色巴夫藻和生长迅速
的异养微藻四鞭藻两种二倍体单细胞藻类为材料，通过体细胞杂交技术成功培育出了生长迅速且DHA 含
量高的单细胞藻（X 藻）。下列说法正确的是（ ）
A．植物体细胞杂交成功的标志是细胞核的融合
B．X 藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的二倍体藻
C．培育X 过程中还可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻
D．培育X 藻的技术和生产单克隆抗体的技术所采用的原理相同
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【答案】C
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培
育成新植物体的技术。在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得原生
质体。杂交过程中的一个关键环节，是原生质体间的融合，这必须要借助一定的技术手段才能实现。人工
诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类——物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化
学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH 融合法等。融合后得到的杂种细胞再经过诱导可形成
愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。
【详解】A、植物体细胞杂交成功的标志是杂种细胞再生去细胞壁，A 错误；
B、由于绿色巴夫藻和四鞭藻藻都是二倍体，因此X 藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的四倍
体藻，B 错误；
C、由于原生质体融合的过程具有随机性，因此培育X 过程中还可能出现绿色巴夫藻两两融合，四鞭藻两
两融合的现象，所以可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻，C 正确；
D、培育X 藻的技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，而生产单克隆抗体的技术所采用的原
理是细胞膜的流动性，所以两者的原理不完全相同，D 错误。
故选C。
33．（2024·辽宁辽阳·一模）6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PD）有F 和S 两种类型，分别由一对等位基因XF和
XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X 染色体会有一个随机失活，且这个细胞的后代细胞相应
的X 染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用酶X 处理后先进行细胞的原代培养，
再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G6PD 蛋白电泳检测，
结果如图所示。下列有关分析正确的是（ ）
A．酶X 可能是胰蛋白酶、胶原蛋白酶或纤维素酶
B．单克隆培养细胞中的细胞2 与细胞3 的基因型不同
C．原代培养细胞有2 个条带是不同细胞同时检测的结果
D．单克隆培养细胞中的细胞6 与细胞7 中XS所在的X 染色体失活
【答案】CD
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液
→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细
胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞之间的蛋白质，被胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解，分散成单个细胞，故酶X 可能是胰
蛋白酶、胶原蛋白酶，但不可能是纤维素酶，A 错误；
B、单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂得到的增殖的细胞，故单克隆培养的细胞2 与细胞3 所含基因相
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同，即基因型相同，只是表达的基因不一定相同，B 错误；
C、结合题干，基因型为XFXS 的女性体细胞中的两个X 染色体会有一个随机失活，故一个细胞中6-磷酸
葡萄糖脱氢酶电泳后只显示一个条带，而原代培养的细胞电泳有2 个条带，是因为同时检测了多个不同细
胞，C 正确；
D、由题图可知，细胞6 与细胞7 均只含有F 型蛋白，说明细胞6 和细胞7 的XS 所在的X 染色体失活，D
正确。
故选CD。
34．（2024·广东·一模）我国是全球第三大盐碱地分布国家，可用于种植耐盐碱水稻的盐碱地约1000 万
hm2，培育耐盐碱水稻对确保我国的粮食安全具有重要的战略意义。我国科学家利用东农427 水稻品种，
应用CRISPR/Cas9 基因编辑技术，将水稻的两对耐盐负调控基因OsEILl 和OsEIL2 敲除而培育耐盐改良水
稻新品种。图示意两对基因在染色体上的位置关系（不考虑其他基因突变与染色体互换），图示意培育耐
盐水稻的过程。
回答下列问题：
(1)愈伤组织培育成完整植株T1的过程称为 ，在该过程中所用到的关键植物激素有 。
(2)经初步筛选、培育，得到双等位基因突变体T1（3 号和7 号染色体各有1 个耐盐负调控基因被敲除）。
用T1自交，T2代中两对等位基因均有被敲除的突变体（简称“候选品种N”）的比例约为 ；在候选
品种N 中，两对等位基因全部被敲除的双基因纯合突变体的比例约为 。
(3)检测双基因纯合突变体的OsEIL1 基因和OsEIL2 基因，发现均在转录起始位点之后的某个位置增加了1
个碱基，进一步检测发现，两个基因所表达蛋白质的相对分子质量较正常相对分子质量小。据此可推测该
CRISPR/Cas9 基因编辑技术敲除这两个基因的原理是 。
(4)要在个体生物学水平上鉴定是否成功培育出耐盐水稻新品种，其思路是 。
【答案】(1) 再分化 生长素和细胞分裂素
(2) 9/16 1/9
(3)插入1 个碱基后诱导基因突变，使翻译提前终止
(4)在盐碱地种植耐盐水稻新品种，检测生长状况及与东农427 水稻比较产量
【分析】
分析题文描述和题图可知：水稻的两对耐盐负调控基因OsEILl 和OsEIL2 分别位于两对同源染色体上，它
们的遗传遵循基因的自由组合定律。双等位基因突变体T1（3 号和7 号染色体各有1 个耐盐负调控基因被
敲除）相当于双杂合子，耐盐水稻新品种（双基因纯合突变体）相当于双隐性纯合子。
【详解】（1）愈伤组织经过再分化会发育成完整植株，在此过程中生长素和细胞分裂素起到了关键的调
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控作用。
（2）由题意和题图可知，水稻的两对耐盐负调控基因的遗传遵循基因的自由组合定律，双等位基因突变
体T1 相当于双杂合子。假设OsEILl 基因及其敲除后分别用A 和a 表示，OsEIL2 基因及其敲除后分别用B
和b 表示，则T1 可以表示为AaBb。T1 自交，T2 代中两对等位基因均有被敲除的突变体（简称“候选品
种N”）包括AaBb、aaBb、Aabb、aabb，它们在T2 代中所占的比例约为9/16；在候选品种N 中，两对等
位基因全部被敲除的双基因纯合突变体（aabb）的比例约为1/9。
（3）双基因纯合突变体的OsEIL1 基因和OsEIL2 基因均在转录起始位点之后的某个位置增加了1 个碱基，
两个基因所表达的蛋白质的相对分子质量较正常相对分子质量小，说明敲除后的OsEIL1 基因和OsEIL2 基
因在转录形成的mRNA 分子上提前出现了终止密码子，导致翻译提前终止。据此可推测该CRISPR/Cas9 基
因编辑技术敲除这两个基因的原理是：插入1 个碱基后诱导基因突变，使翻译提前终止。
（4）要在个体生物学水平上鉴定是否成功培育出耐盐水稻新品种，可以在盐碱地种植耐盐水稻新品种，
检测生长状况及与东农427 水稻比较产量。
35．（2024·广东惠州·一模）辣椒疫病是由辣椒疫霉菌侵染引起的一种毁灭性土传病害。实验小组从疫病
发病严重田块的辣椒植株根际土壤中分离筛选出两株具有广谱抗性并可在贫瘠营养条件下生长良好的高效
拮抗辣椒疫霉菌的菌株HL-3，回答下列问题：
(1)采集能拮抗辣椒疫霉菌的HL-3 菌株时，应采集疫病发病严重田块的 （填“健康”或“患病”）辣
椒植株根际的土壤，原因是 。
(2)采集的土壤样本先置于培养基中摇床培养的目的是 。摇床培养基从物理性质上来分叫做 培养基，
并且含有适量的碳源、氮源、水及 等营养成分。
(3)测定筛选到的不同菌株的拮抗作用效果时，应先在平板的中央位置接种 ，培养1d 后再在距离原菌
落2cm 处接种拮抗菌，并置于 中培养，一段时间后通过比较 （选用“抑菌圈的直径/菌落直径/抑
菌圈的直径与菌落直径的比值”作答），从而判断菌株的拮抗能力。
【答案】(1) 健康 健康植株的根际土壤中含有较为丰富的拮抗辣椒疫霉菌的菌株
(2) 增加培养液中氧气浓度、利于培养基与菌体充分接触，快速增加拮抗菌的浓度 液体 无
机盐
(3) 辣椒疫霉菌 恒温培养箱 抑菌圈的直径与菌落直径的比值
【分析】辣椒疫病是由辣椒疫霉菌侵染引起的一种毁灭性土传病害。拮抗菌能抑制辣椒疫霉菌的生长，因
此能拮抗辣椒疫霉菌的菌株可使辣椒不患病。
【详解】（1）由于能拮抗辣椒疫霉菌的菌株可使辣椒不患病，因此健康植株的根际土壤中含有较为丰富
的拮抗辣椒疫霉菌的菌株，故采集能拮抗辣椒疫霉菌的菌株时，应采集疫病发病严重田块的健康辣椒植株
根际的土壤。
（2）采集的土壤样本先置于培养基中摇床培养可以增加培养液中氧气浓度，且液体培养基有利于培养基
与菌体充分接触，快速增加拮抗菌的浓度，因此摇床培养基从物理性质上来分叫做液体培养基，能快速扩
增目的菌株，培养基中一般含有适量的碳源、氮源、水及无机盐等营养成分，
（3）测定筛选到的不同菌株的拮抗作用效果时，需要通过观察辣椒疫霉菌的生长情况，因此应先在平板
的中央位置接种辣椒疫霉菌，培养1d 后再在距离原菌落2cm 处接种拮抗菌，并置于恒温培养箱中培养，
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拮抗菌能抑制辣椒疫霉菌的生长，因此一段时间后通过比较抑菌圈的直径与菌落直径的比值，从而判断菌
株的拮抗能力。
36．（2024·河北邯郸·一模）由单一B 细胞克隆产生的针对某一特定抗原的抗体，称为单克隆抗体；由多
种抗原刺激机体，相应地就产生多种抗体混杂在一起，称为多克隆抗体。如图表示单克隆抗体和多克隆抗
体的制备过程，下列相关叙述错误的是（ ）
A．两种技术均依赖于细胞膜的流动性，②③④⑤的差异是由细胞内基因不同造成的
B．两种技术均需要对小鼠进行特定抗原的免疫和特定细胞的筛选、鉴定和培养
C．两种技术均需要从小鼠的血清中收集抗体，但单克隆抗体具有更高的特异性
D．①含有的多种抗体，源于不同的浆细胞，可与同种病原体的不同抗原结合
【答案】ABC
【分析】单克隆抗体的制备：
（1）制备产生特异性抗体的B 淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B
淋巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B 淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基
筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测。
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】A、两种技术中只有单克隆抗体的制备涉及细胞的融合，依赖细胞膜的流动性，B 淋巴细胞的基
因相同，②③④⑤的差异与细胞内基因的选择性表达有关，A 错误；
B、两种技术均需要对小鼠进行特定抗原的免疫，但只有单克隆抗体的制备需要特定细胞的筛选、鉴定和
培养，B 错误；
C、多克隆抗体需要从小鼠的血清中收集抗体，单克隆抗体从细胞培养液或小鼠的腹水中获得，单克隆抗
体具有更高的特异性，C 错误；
D、①含有的多种抗体，源于不同的浆细胞，多种抗体的获得是因为病原体表面的不同抗原导致不同浆细
胞的形成，不同浆细胞产生的抗体可与同种病原体的不同抗原结合，D 正确。
故选ABC。
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