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专题10 生物技术与工程
常考题+核心素养题+真题，三效合一
1．（2023·湖南·校联考模拟预测）生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。
下列有关说法错误的是（ ）
A．消毒和灭菌的主要目的是防止杂菌污染以获取纯净微生物培养物
B．有的微生物能够寄生于多种细菌体内使细菌裂解，因此可以使用这些微生物进行生物消毒
C．和煮沸消毒等其他消毒方法不同，生物消毒只能杀死物体表面或内部的一部分微生物
D．做好消毒工作后，后续的操作也要注意避免周围环境中的微生物造成再次污染
2．（2023·江苏·统考二模）下列关于发酵的叙述，正确的是（ ）
A．制作葡萄酒过程中，可利用重铬酸钾检测发酵罐中是否有酒精产生
B．泡菜制作过程中，玻璃泡菜坛水封后应置于阴凉处并经常补水以维持水封
C．青霉素具有杀菌作用，其培养基和发酵罐无需严格灭菌
D．在酸性条件下利用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸
3．（2022 下·山东临沂·高二统考期中）唐代苏敬的《新修本草》云：凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、
蜜等酒独不用曲。下列叙述错误的是（ ）
A．装置密闭发酵过程中，酒精度的变化是先增加后趋于稳定
B．“蒲桃、蜜等酒独不用曲”说明葡萄酒的酿制不需要微生物
C．酿酒中期起泡现象是微生物无氧呼吸产生的CO2释放形成的
D．工业发酵中为降低杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌
4．（2023·云南·模拟预测）下列有关细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．在植物体细胞杂交技术中，纤维素酶和果胶酶可去除细胞壁，而不损伤细胞的其他结构
B．细胞产物的工厂化生产，可提高单个细胞中次生代谢物的含量
C．利用细胞膜的流动性，可诱导原生质体融合
D．通过动物体细胞核移植技术获得克隆动物，体现了动物细胞核具有全能性
5．（2021·北京海淀·统考一模）我国科学家利用基因编辑技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1 敲除
的猕猴。取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，获得5 只克隆猴，
用于研究节律机制。以下叙述不正确的是（ ）
A．克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性
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B．克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究
C．可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合
D．受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴
6．（2023·河北·模拟预测）破伤风是一种急性感染性、中毒性疾病，由感染破伤风梭菌引起。破伤风梭菌
是严格厌氧菌，在人体内增殖代谢会产生毒素，引起人体肌肉抽搐，最终导致人死亡。我国新出生婴儿都
会接种破伤风疫苗，但若被生锈铁器等造成深度伤口，就医时仍需注射破伤风疫苗，必要时注射抗毒素
（主要成分为抗体，与破伤风梭菌产生的毒素结合）。下列叙述错误的是（ ）
A．治疗深度创伤时应保持伤口处清洁、通风，防止形成厌氧微环境
B．婴儿时注射疫苗属于主动免疫，受伤时注射抗毒素属于被动免疫
C．抗毒素可通过杂交瘤细胞生产，也可以从动物血清中提取
D．注射抗毒素后可以抑制破伤风梭菌的增殖
7．（2022 上·辽宁本溪·高三本溪高中校考期中）一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表型正
常）想生育一个健康的孩子。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管
婴儿技术辅 助生育后代，技术流程示意图如下。下列叙述正确的是（ ）
A．初级卵母细胞中含有两个致病基因，位于同源染色体上
B．通常若极体1 含有致病基因，则卵细胞可用于试管婴儿
C．若致病基因位于X 染色体上，则这对夫妻应选择生女儿
D．试管婴儿技术辅助生育时，精子与卵细胞受精时期是③
8．（2023·山东青岛·统考二模）SDS 常用于提取生物组织中的DNA，作为一种阴离子去污剂，它可以溶
解细胞膜和核膜蛋白，使染色体离析、蛋白质变性，释放出核酸，获取的核酸可溶于由Tris 和EDTA 配制
的缓冲溶液中保存备用。下列说法正确的是（ ）
A．配制研磨液时，需要加入2mol/L 的HCl 溶液调节pH 至8.0
B．提取DNA 时加入酒精，目的是使不溶于酒精的蛋白质等物质析出
C．SDS 可加速解聚核膜蛋白，有利于提取叶绿体DNA 和质粒DNA
D．将提取到的DNA 与二苯胺溶液充分混匀后，溶液即变为蓝色
9．（2023·山东济南·统考三模）转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的
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过程。下列有关说法错误的是（ ）
A．大肠杆菌转化实验中可使用Ca2+处理以提高转化效率
B．目的基因导入受体细胞前必须构建基因表达载体以便稳定存在
C．将DNA 溶液滴加在授粉后的花柱切面上，可以使目的基因进入胚囊
D．农杆菌转化法中需要进行两次体外拼接和两次导入
10．（2023·北京·模拟预测）用限制酶Spe Ⅰ和Hind Ⅲ切割质粒，用限制酶Hind Ⅲ和Xba Ⅰ切割目的基因，
之后连接，构建基因表达载体。下列叙述不正确的是（ ）
A．青霉素抗性基因可作为筛选标记
B．限制酶可使磷酸二酯键发生断裂
C．表中限制酶切割之后均会产生黏性末端
D．连接后的基因表达载体可被Spe I 切开
11．（2022·浙江·模拟预测）蛋白质工程是当前的新兴分子生物学技术，通过改造或合成基因，来改造现
有的蛋白质或制造新的蛋白质，以满足人类生产、生活的需求。下列关于蛋白质工程的说法错误的是（
）
A．蛋白质工程技术会改变组成蛋白质的氨基酸的种类、数目和排列顺序
B．蛋白质工程获得的蛋白质都是自然界已存在的蛋白质（天然蛋白质）
C．蛋白质工程不直接改造蛋白质的原因是改造基因易于操作且改造后可遗传
D．蛋白质工程生产出来的蛋白质的活性与天然蛋白质相似，而且稳定性更高
12．（2023·四川南充·统考模拟预测）传统的农耕时代，自给自足呈现出来的美食文化，足以征服天下人
的味蕾，就如三伏天做的豆瓣酱。传统豆瓣酱的制作流程如下：
①制作霉豆瓣： 把带壳干蚕豆在水中浸泡几个小时后去壳，待其晾干，加面粉搅匀平铺在簸箕里，用南
瓜叶盖上，自然发酵七天左右，见蚕豆上长满一层霉状物即可。
②辣椒胚制作：选料去把，辣椒轧碎，加盐、加酒发酵。
③混合装坛：将霉豆瓣、辣椒胚、香辛料混合均匀，加菜籽油装坛，“翻、晒、露”。
请回答相关问题：
(1)霉豆瓣制作过程中，起主要作用的真菌是
（至少写两个），面粉主要为其
生长提供：
；霉豆瓣发酵过程中，产生了大量的酶类，其中
能把
3
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豆瓣中的蛋白质分解成易吸收的
，使其风味更独特。
(2)辣椒胚制作时，加入白酒的目的是
。
(3)豆瓣酱制作过程中，硝酸盐会在硝酸盐还原菌的作用下转变成亚硝酸盐。有人认为过量食用豆瓣酱会影
响身体健康，是因为亚硝酸盐会转变成
，可能对人体有致癌、致畸作用。而油封装
坛后，亚硝酸盐含量会降低，可能原因是
。
13．（2023·四川内江·四川省内江市第六中学校考一模）白鳍豚为我国特有的珍稀水生哺乳类生物，它们
大约在长江生活了 2500 万年，有“活 化石”的美称。由于数量奇少， 被列为中国一级保护野生动物。
2007 年 8 月 8 日，《皇家协 会生物信笺》期刊内发表报告，正式公布白鳍豚功能性灭绝(物种灭绝的先
兆)。为了避免 白鳍豚的灭绝，有人提出可以采用胚胎工程来繁殖白鳍豚。回答下列问题。
(1)进行胚胎工程首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养。哺乳动物的体外受精主要包 括
、 和 等几个主要步骤。为了促进更多 卵子的产生，可以用
(激素)处理。
(2)胚胎移植是否能够成，与供体和受体的生理状况有关，比如， 哺乳动物早期胚胎形成 后，
，这就为胚胎的收集提供了可能； ， 这就为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(3)将胚胎放在相关培养液中进行早期培养，目的是 。培养液中除 含有有机盐、无
机盐、血清外，还需要加入的四种主要物质是 。
14．（2023·安徽六安·六安一中校考模拟预测）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密
切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图所示。
回答下列问题：
(1)获取重组表达载体用到的工具酶是 。通常用2 种不同的限制酶切割目的基因和载体，目的
是 。
(2)在过程②中，用 酶处理将羊胎儿皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养细胞的整个过
程中，应将培养瓶置于 中。
(3)科研团队从成纤维细胞中提取出细胞核，并将其植入移除细胞核后的卵细胞中，该卵细胞需在体外培养
到 ，进行胚胎移植前要对代孕母羊进行 处理。
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(4)下列有关转基因绒山羊培育过程的叙述，错误的是____________（填选项前的字母）。
A．图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞
B．重组细胞分裂开始后同时开始DNA 复制和基因的转录
C．早期胚胎（如早期囊胚）需植入代孕母羊的输卵管或子宫角部位
D．若KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用聚合酶链式反应扩增该基因
15．（2023·江西南昌·统考三模）流感病毒的抗原变异成为每年流感疫情发生和不定期流行的主要原因。A
型流感病毒根据其表面的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）糖蛋白进一步划分亚型。HA 蛋白是人类对
流感病毒适应性免疫反应的主要靶点，也是流感病毒疫苗的关键成分。下图为流感病毒mRNA 疫苗制备流
程简图，请回答下列问题。
(1)近年来，应用基因芯片可以同时检测多种病毒，尤其适用于流感多亚型、易变异的特点。利用基因芯片
对流感病毒进行检测和分型的原理是
。
(2)在过程②进行重组质粒构建时，HA 基因上必须要有启动子序列的原因是
。在
重组质粒大量制备时，常用大肠杆菌作为受体细胞。一般用
处理大肠杆菌，使其处于能
吸收周围环境中DNA 分子的生理状态。
(3)过程④中重组质粒线性化，就是用
酶处理质粒，使其成为线性状态。基因体外转录的过程
是以DNA 为模板，在一系列转录因子的作用下，经
酶的作用合成RNA 的过程。过程⑤
中，需要在反应体系中加ATP、CTP、GTP、UTP 的目的是
。
(4)已知RNA 需进入细胞才能发挥疫苗效应，人体血液中有RNA 酶，直接注射RNA 往往不能发挥作用。
据此分析制备RNA 疫苗时，将RNA 包裹在纳米脂质体颗粒中的理由是：
（答出一点即可）。
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1．（2024·湖南株洲·统考一模）L-天冬酰胺酶由细菌和真菌合成，可分解天冬酰胺释放出氨，然后与奈斯
勒试剂反应呈棕色。为筛选获得L-天冬酰胺酶高产菌株，设计了如下固体培养基。固体培养基：主要成分
有牛肉膏、蛋白胨、水、NaCl、琼脂、奈斯勒试剂。实验结果如下图。下列叙述错误的是（ ）
A．根据实验结果可知，接种时采用的是稀释涂布平板法
B．应选择菌落C 作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养
C．该培养基从功能来看属于选择培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏
D．无菌技术还可以避免操作者被有害微生物感染，实验结束后的培养基不能直接丢弃
2．（2023·河北·统考三模）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：
先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗
秸秆堆（清水淋洗时菌T 不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实
验流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．菌T 能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖
B．灭菌的目的是杀死淋洗液中的微生物，以免干扰实验
C．接种酵母菌后，发酵罐温度要控制在30~35℃
D．生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验
3．（2023·浙江杭州·学军中学校考模拟预测）科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂
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交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。有关分析正确的是（ ）
A．过程①应将叶片上表皮向下，置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中
B．过程②中的原生质体由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成
C．过程④常选择不同大小或颜色的双亲原生质体，以便显微镜下直接识别杂合细胞
D．过程⑤进行脱分化和再分化过程，杂种植株一定具有马铃薯和西红柿的全部遗传物质
4．（2023·海南省直辖县级单位·校考模拟预测）早孕检测试纸可通过检测尿液中人绒毛膜促性腺激素
（HCG）的含量，来诊断育龄期女性是否受孕，其有效成分是科学家利用HCG 免疫健康小鼠而制备的抗
HCG 单克隆抗体。下列有关单克隆抗体制备的叙述，正确的是（ ）
A．用 HCG 对小鼠进行免疫后得到的B 淋巴细胞都能产生抗 HCG 抗体
B．进行多次克隆化培养和抗体检测的主要目的是筛选获得杂交瘤细胞
C．杂交瘤细胞在体外进行大规模培养时，常会出现接触抑制现象
D．该早孕诊断方法利用了单克隆抗体能准确识别抗原细微差异的特点
5．（2023·浙江·校联考模拟预测）2023 年9 月，我国科学家在猪体内培养胚胎人源肾脏达28 天，这是科
学家第一次能够在另一物种体内培养出实体人源器官，具体过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．细胞甲常选择受精卵，因其具有发育为个体的能力
B．该过程利用的现代生物技术只有胚胎培养和胚胎移植
C．胚胎培养过程应在CO2培养箱中进行，CO2的主要作用是维持pH
D．进行胚胎移植前，代孕母猪需进行同期发情处理
6．（2023·河北廊坊·廊坊市八中校考模拟预测）生物学实验常用颜色反应来鉴定细胞中的一些化合物或结
构，下列说法错误的是（ ）
A．将DNA 溶于一定浓度的NaCl 溶液中，加二苯胺试剂水浴加热呈蓝色
B．用黑藻进行质壁分离实验时，需要染色才能观察到相关实验现象
C．向2mL 马铃薯匀浆中加入两滴碘液，震荡摇匀后组织样液呈蓝色
D．鉴定还原性糖实验，所用的苹果、梨等匀浆必须现制现用
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7．（2024·河南·统考二模）如图是将人的生长激素基因导入细菌B 内制备“工程菌”的过程。下列说法正
确的是（ ）
A．将人的生长激素基因导入细菌B 常用的方法是农杆菌转化法
B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只有导人了普通质粒的细菌
C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只有导入了重组质粒的细菌
D．目的基因成功表达的标志是受体细胞中含有人的生长激素基因
8．（2023·湖北武汉·统考模拟预测）常见的启动子可分为三类：组成型启动子，驱动基因在所有细胞、组
织和器官中持续表达；组织特异性启动子，调控基因只在某些特定的部位中表达；诱导型启动子，通常在
光、盐等信号作用下，使目的基因的转录水平有所提高。下列叙述错误的是（ ）
A．启动子是一段有特殊序列结构的DNA 片段，位于基因的上游
B．细胞分化与组织特异性启动子的调控有关，与组成型启动子无关
C．乳腺生物反应器的构建需要将组织特异性启动子与目的基因连接
D．盐诱导型启动子在高盐环境中被激活，可增加农作物的抗逆性
9．（2023·北京朝阳·统考二模）利用蛋白质工程改造源于溶珊瑚弧菌的几丁质酶：保留该酶N 端，在C 端
增加陆生真菌几丁质结合保守域，从而增加酶与底物的结合能力。改造后的酶活性显著高于市售几丁质酶。
相关叙述错误的是（ ）
A．几丁质是海洋中含量丰富的多糖之一
B．溶珊瑚弧菌通过分泌几丁质酶获取氮源
C．直接操作对象是溶珊瑚弧菌的几丁质酶基因
D．表达改造后的几丁质酶需要借助于受体细胞
10．（2023·浙江温州·瑞安中学校考三模）2022 年12 月16 日，《禁止生物武器公约》第九次审议大会在
日内瓦闭幕。此次审议大会及其成果标志着全球生物安全治理取得重要进展。下列关于生物武器的叙述错
误的是（ ）
A．相对于常规武器、核武器和化学武器等，生物武器最大的特点是携带和投放简单，这也是它最令
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人恐怖的一点
B．生物武器对人的危害不仅有身体上的，还有心理上的
C．中国坚决支持禁止生物武器的主张，奉行不发展、不生产、不储存生物武器的政策，并反对生物
武器的扩散
D．现代生物武器的防护，主要包括预警体系、防控体系和疫苗库
11．（2024·四川南充·统考一模）支原体肺炎是由支原体感染引起，患者症状主要表现为咳嗽、厌食、发
热、畏寒以及胸骨下疼痛。该病属于进展性疾病，随着病情进展会出现心血管系统损伤及皮肤黏膜损伤等
并发症，因此早期诊断尤为重要。目前常采用微生物快速培养检测和血清抗体检测加以诊断。微生物快速
培养时用咽拭子采集疑似患者咽部分泌物，接种到培养基上进行培养，培养基中部分成分如下表，请回答
下列问题：
蛋白
胨
酵母提取物
葡萄糖
KH2PO4
K2HPO4
MgSO4·7H2O
CuSO4
10g
0.4g
5g
0.2g
0.1g
0.01g
0.001g
(1)支原体所需的氮源主要来自于表中的 ，氮源被支原体吸收后，可以转化形成
（填两种）等有机物用于构建细胞膜。
(2)为使支原体快速繁殖，将采集到的咽部分泌物接种到 （填“固体”或“液体”）培养基
中，培养基颜色明显变化的确诊为阳性感染者。
(3)若想进一步了解支原体数量以判断病程，需取咽部分泌物接种培养，培养过程中每隔一段时间统计一次
菌落的数目，选取 时的记录作为实验结果，并根据菌落 等方面的特征识别
培养基中支原体菌落。若培养时间过长会导致计数结果不准确，原因可能是 。
(4)机体感染支原体后，免疫系统会产生特异性抗体，通过检测疑似患者血清中对应抗体情况，可以更快判
断疑似患者是否感染及病程，但与前面微生物快速培养相比，该方法容易漏诊延误治疗，原因是患病初期
。
12．（2023·山西太原·太原五中校考二模）科学家计划将发光基因导入夹竹桃，将发光的夹竹桃种植到高
速公路的两旁，到那时，每当夜幕降临，公路两旁的夹竹桃荧光闪闪，树树相连，公路将变成美丽的荧光
世界。下图是转基因发光夹竹桃的培育过程，含发光基因的DNA 片段和Ti 质粒上的箭头表示相关限制酶
的酶切位点。请分析并回答下列问题：
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(1)若发光基因是从萤火虫细胞内提取的mRNA 逆转录形成的，则发光基因中 （填“含有”或
“不含”）启动子。利用PCR 技术扩增发光基因时，需依据 合成引物，扩增发光基因的过程中，
DNA 解旋为单链后要适当 （填“升高”或“降低”）反应体系温度，以便引物与模板结合。
(2)发光基因应导入Ti 质粒的 上，用图中的Ti 质粒和发光基因构建重组质粒时，不宜仅使用
BamHⅠ酶切割，原因是 ，应选用 酶对外源DNA 片段、Ti 质粒进行切割。
(3)Ti 质粒上的四环素抗性基因的作用是 ，将转基因发光夹竹桃细胞培养成幼苗，要经
过⑤⑥ 两个过程。
13．（2024·陕西安康·校联考模拟预测）花花柴是一种对盐碱环境具有极强抗性的荒漠植物。研究发现，
该抗性与花花柴细胞中的KcVPl 基因有关，KcVPl 基因表达的质子泵能将过多的Na+和Cl-运进液泡中，以
减少盐碱环境对其细胞造成的伤害。研究人员将KcVPl 基因转入不同的受体细胞，使受体细胞表达相应的
蛋白质，分析受体细胞的抗盐碱能力变化情况。回答下列问题：
(1)获取KcVPl 基因后，对其进行PCR 扩增，PCR 的原理是 ，扩增过程中需要的酶是
。
(2)构建原核表达载体：利用双酶切法切割pET-28a 质粒和目的基因片段，所用的两种限制酶切出的末端应
；将酶切后的目的基因片段与pET-28a 质粒进行重组连接后，转入大肠杆菌体内。转入时，一般用
处理大肠杆菌，使其成为 细胞，以利于吸收周围环境中的DNA 分子。
(3)构建酵母表达载体：用同样的方法将KcVPl 基因与pGBKT7 质粒连接后，转移到酵母菌内完成转化，转
化是指 ；若要检测目的基因是否成功转录，需要从受体细胞中提取 ，利用
技术进行检测。
(4)对重组大肠杆菌和重组酵母菌进行耐盐实验，结果发现 （填“重组大肠杆菌”或“重组
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酵母菌”）具有更强的耐盐性。
14．（2023·四川内江·四川省内江市第六中学校考一模）成都蓝莓博览园， 占地千亩， 是中国西部最大
的蓝莓种植基地。作为“浆果之王”的蓝 莓， 富含花青素等营养成分， 具有保护视力、延缓衰老、增
强机体免疫等功能。下图是获取 蓝莓花青素、蓝莓酒和蓝莓醋的流程。结合所学知识，回答下列问题：
(1)已知花青素在 pH 小于 3、温度 60℃以下时比较稳定。从蓝莓中提取花青素能否用萃 取法提取， 需
考虑的因素有 等；若采用萃取法提取花 青素， 应选择 (低
沸点/高沸点) 萃取剂， 原因是 。 萃取的效率主要取决于
。
(2)获得蓝莓果汁时加入果胶酶，其将果胶分解成可溶性的 ，使浑浊的果 汁变得澄清。
(3)利用果汁制作蓝莓酒的过程中， 常采用固定化细胞技术而不用固定化酶技术进行发酵， 原因是
。
(4)在利用果酒进一步制作果醋时，工作人员向发酵装置中又添加一定量的果汁(不影响 菌种的活性) 后，
检测发现乙醇的利用速率迅速下降，原因是 。
15．（2023·四川攀枝花·统考一模）2018 年1 月25 日报道，两只克隆猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，
突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光
明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题：
(1)动物细胞培养一般分为 和传代培养两个阶段过程。在前一阶段，贴壁的细胞会出现
象，所以要进行传代培养。
(2)①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至 时期再进行，目前使用的去核方法是
。②表示 。
(3)回答下列关于利用单克隆抗体技术制备抗蛇毒素的相关问题：
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①B 淋巴细胞不能直接用于抗体的大规模生产，原因是 ，将B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合；
通过 （答三种）等方式诱导细胞融合，可以获得杂交瘤细胞。
②体外培养杂交瘤细胞时，除了无菌、营养条件、适宜的温度和pH，还需要保证气体环境，其中需要的气
体主要有O2和CO2，O2是 所必需的，CO2的作用是 。
1．（2023·河北·统考高考真题）为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，下列相关实验设计错误的
是（ ）
A．从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌
B．平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境
C．对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定
D．检测目的菌株对消化道环境的耐受力
2．（2023·重庆·统考高考真题）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化
处理的流程设计。下列叙述错误的是（ ）
A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品
B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源
C．X 中需要添加合适的菌种，才能产生沼气
D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动
3．（2023·江苏·统考高考真题）下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是（ ）
A．通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B．通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大
C．通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌
D．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定
4．（2023·河北·统考高考真题）植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。下列
叙述错误的是（ ）
A．植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理
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B．经纤维素酶和果胶酶充分处理后，植物细胞团分散为单个完整的悬浮细胞
C．为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH 和渗透压
D．利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗
5．（2023·辽宁·统考高考真题）用含有不同植物生长调节剂配比的培养基诱导草莓茎尖形成不定芽，研究
结果如下表。下列叙述错误的是（ ）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
6-BA（mg·L-1）
1
NAA（mg·L-1）
0．
05
0．1
0．2
0．
3
0．5
-
-
-
-
-
2，4-D（mg·L-1）
-
-
-
-
-
0．05
0．
1
0．2
0．3
0．5
不定芽诱导率（%）
68
75
77
69
59
81
92
83
70
61
注：诱导率=出不定芽的外植体数/接种的外植体数×100%
A．培养基中NAA/6-BA 比例过高，不利于不定芽的诱导
B．推断6-BA 应为细胞分裂素类植物生长调节剂
C．该研究的结果可指导草莓脱毒苗的生产
D．相同条件下，NAA 诱导草莓茎尖形成不定芽的效果优于2，4-D
6.（2023·重庆·统考高考真题）某小组通过PCR（假设引物长度为8 个碱基短于实际长度）获得了含有目的
基因的DNA 片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错
误的是（ ）
A．其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇
B．步骤①所用的酶是SpeI 和CfoI
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C．用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2 个片段
D．酶切片段和载体连接时，可使用E．coli 连接酶或T4连接酶
7．（2023·辽宁·统考高考真题）CD163 蛋白是PRRSV 病毒感染家畜的受体。为实时监控CD163 蛋白的表
达和转运过程，将红色荧光蛋白RFP 基因与CD163 基因拼接在一起（如下图），使其表达成一条多肽。
该拼接过程的关键步骤是除去（ ）
A．CD163 基因中编码起始密码子的序列
B．CD163 基因中编码终止密码子的序列
C．RFP 基因中编码起始密码子的序列
D．RFP 基因中编码终止密码子的序列
8．（2023·湖北·统考高考真题）用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因
构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA 片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体
（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ）
A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同
B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因
C．若用SphⅠ酶切，可通过DNA 凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
D．若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet 的培养基中能形成菌落
9．（2023·广东·统考高考真题）“DNA 粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。
下列叙述错误的是（ ）
A．裂解：使细胞破裂释放出DNA 等物质
B．分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
C．沉淀：可反复多次以提高DNA 的纯度
D．鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
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10．（2022·山东·高考真题）如图所示，将由2 种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联
后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A．双抗可同时与2 种抗原结合
B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2 种抗原
D．同时注射2 种抗原可刺激B 细胞分化为产双抗的浆细胞
11.（2023·山西·统考高考真题）某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3 和酶4）、DNA 连接酶为工具，将目
的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制
酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ）
A．质粒和目的基因都用酶3 切割，用E. coli DNA 连接酶连接
B．质粒用酶3 切割、目的基因用酶1 切割，用T4 DNA 连接酶连接
C．质粒和目的基因都用酶1 和酶2 切割，用T4 DNA 连接酶连接
D．质粒和目的基因都用酶2 和酶4 切割，用E. coli DNA 连接酶连接
12.（2023·湖北·统考高考真题）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A 为抗
原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。
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回答下列问题：
(1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）
（填“需要”或“不需要”）通
过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG 可促进细胞融合，该过程中PEG 对细胞膜的作用是
。
(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT 培养基），该培养基对
和
生长具有抑制作用。
(3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是
。
(4)构建重组质粒需要使用DNA 连接酶。下列属于DNA 连接酶底物的是
。
13.（2023·北京·统考高考真题）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，
能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供
和维生素等。
(2)A 菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A 菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成
薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明
。
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(3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样
后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A 菌的菌落周围会出现
。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P 菌。
(4)为探究P 菌溶解破坏A 菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验材
料和设备：P 菌、A 菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱）
。
14.（2023·重庆·统考高考真题）妊娠与子宫内膜基质细胞的功能密切相关。某研究小组通过如图所示的实
验流程获得了子宫内膜基质细胞，以期用于妊娠相关疾病的研究。
(1)手术获得的皮肤组织需在低温下运至实验室，低温对细胞中各种蛋白质的作用为
。
(2)过程①中，诱导形成PS 细胞时，需提高成纤维细胞中4 个基因的表达量，可采用
技术将这些
基因导入该细胞。这4 个基因的主要作用为：M 基因促进增殖，S 基因和C 基因控制干细胞特性，K 基因
抑制凋亡和衰老。若成纤维细胞形成肿瘤细胞，最有可能的原因是
基因过量表达。
(3)培养iPS 细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染风险。可用紫外线进行消毒的是_ ____（多
选）。
A．培养基
B．培养瓶
C．细胞培养室
D．CO2培养箱
(4)过程②中，iPS 细胞经历的生命历程为 。PCR 技术可用于检测子宫内膜基质细胞关键基因的mRNA
水平，mRNA 需经过
才能作为PCR 扩增的模板。
15.（2023·浙江·统考高考真题）赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含量很
低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。回答下列问题：
(1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在
一定浓度水平，这种调节方式属于
。根据这种调节方式，在培养基中添加
，用于筛
选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。
(2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展，2011 年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育
了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为：
①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通过
检索
获取其编码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的目的基因与含有乳腺特异性启
动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。
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②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF）。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与BEF 膜发生
，表达载体最终进入细胞核，发生转化。
③核移植。将转基因的BEF 作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去核后作为
。将两种细胞进行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合，同时起到了
重组细胞发育
的作用。
④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至
，植入代孕母牛子宫角，直至
小牛出生。
⑤检测。DNA 水平检测：利用PCR 技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以 为阳性
对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA 水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转
基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA，对总RNA 进行 处理，以去
除DNA 污染，再经逆转录形成cDNA，并以此为 ，利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示
目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞内表达，原因是什么？
。
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