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培养生产甘草黄酮的过程。下列叙述正确的是( )
武安一中 2024——2025 学年第二学期 4 月期中考试
高二 生物
一、单项选择题（本题共有18小题，每题只有一个选项正确，每小题2分，共36分）
A.可用次氯酸钠和酒精对种子进行灭菌
1.制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。 关于食用醋的发酵的叙述错误的是( ) B.图中添加果胶酶的主要目的是获得原生质体
A．菌种主要利用的是乳酸菌 B．需要在氧气充足条件下进行发酵
C.对细胞悬液进行人工诱变，其变异率常高于对器官或个体进行诱变
C．醋酸的合成发生在细胞质基质 D．糖源充足时，制醋的过程有气体产生
D.图示过程能体现植物细胞的全能性
2.无菌操作是生物实验中的一项重要的基本操作。下列过程不需要严格无菌操作的是（ ）
8.人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等都离不开动物细胞培养。下列关于动物细胞培养的
A.传统泡菜的制作 B.酵母菌的纯培养
叙述，正确的是（ ）
C.动物细胞的传代培养 D.花药离体培养
A.动物细胞培养所需的气体条件是95%氧气加5%二氧化碳
3.稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一。土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质
酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的
B.动物细胞培养基中加入血清的主要目的是补充细胞所需的未知成分
菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列说法错误的是( ) C.动物细胞培养的原理和植物组织培养的原理相同
A.筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基
D.为保证培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行消毒处理
B.纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种
9.PHA是一种重要的可降解材料，中国科学家构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜或餐厨垃圾为原料在实
C.在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶
验室发酵生产PHA，工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（
D.可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株
4.某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为 3盘，一盘取样冷藏， ）
一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如图。下列相关操作或叙述正确的是( ) A.菌种扩大培养是发酵工程的中心环节
B.为避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度
C.发酵罐内发酵要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件
D.发酵结束之后，采取适当的过滤、沉淀措施获得PHA
10.黄桃精酿啤酒的制作工艺与普通啤酒有所不同，生产工艺流程为：
麦芽→粉碎→糖化→过滤→煮沸→主发酵→后发酵(添加黄桃汁)→低温冷藏→成品→罐装。下列说法正
A.将细菌接种在固体培养基X上可采用平板划线法 确的是( )
B.根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类 A.利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的直接碳源
C.配制的培养基需经湿热灭菌后调整pH，冷却后倒平板 B.啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在后发酵阶段完成
D.固体培养基X对菜品中的细菌没有选择性 C.糖化是让麦芽糖分解形成糖浆，煮沸能够使酶失活及对糖浆灭菌
5.聚苯乙烯是制造碗装泡面盒、发泡快餐盒的材料。某兴趣小组试图从土壤中分离能分解聚苯乙烯的 D.“精酿”啤酒发酵完成后，通常不需要进行过滤和消毒处理
细菌，相关流程如图所示。下列叙述正确的是( ) 11.我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基
化酶，TSA为组蛋白去乙酰化酶抑制剂。下列说法正确的是( )
A.若稀释倍数都为10，则x应为8
B.接种时应在酒精灯火焰旁进行，可将培养皿皿盖完全打开
A.组蛋白去乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
C.将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布
D.应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值 B.用电刺激、Ca2＋载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
6.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（ ） C.过程③中诱导细胞融合体现了细胞膜的选择透过性
A.植物通过光合作用自养，因此，在植物组织培养的培养基中不需要添加有机物 D.图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术
B.植物组织培养和动物细胞培养分别是植物细胞工程和动物细胞工程的基础 12.水牛养殖是中国重要的农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以挖掘动物的繁
C.植物组织培养必须在无光条件下进行，动物细胞培养对光照无要求 殖潜力，提升家畜种质资源质量。下列叙述正确的是( )
D.植物组织培养和动物细胞培养均可用于检测有毒物质 A.培养动物细胞时，培养基中除加入细胞所需各种营养物质外，还需加入琼脂
7.甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。如图表示利用悬浮 B.胚胎分割技术可以增加同卵多胚的数量，同时也提高了移植胚胎的成活率C.收集胚胎在早期胚胎和子宫建立联系之前完成，这样可提高胚胎的成活率
D.克隆牛的培育过程中常采用注射性激素的方法对良种母牛做超数排卵处理
13.犬疱疹病毒病是一种由犬疱疹病毒引起的急性、全身出血性坏死的犬类传染病。gD蛋白是犬疱疹病
A.图中两条子链合成一定都是从5′端向3′端延伸
B.图示表示复性阶段，该过程的温度与引物的长短有关
毒囊膜的重要组成部分，可诱导机体产生免疫应答。研究人员首先利用转基因技术制备了gD蛋白，又
C.用图示引物扩增5次后，可以产生22个目标产物
以gD蛋白为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列叙述错误
D.PCR每次循环都消耗引物和原料，在实验过程中需要及时补充
的是（ ）
18.关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验，下列相关叙述错误的是( )
A.根据待分离DNA片段的大小，用电泳缓冲液配制琼脂糖溶液，加热到熔化，稍冷却后加入核酸染
料混匀
B.电泳鉴定PCR产物时加样缓冲液中的指示剂可提示终止时刻
A.与小鼠骨髓瘤细胞融合前，细胞甲需要通过原代和传代培养扩大细胞数量 C.PCR技术中，提高复性的温度能有效减少反应非特异条带的产生
B.与诱导原生质体融合相比，①过程特有的方法是灭活病毒诱导法 D.用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近
C.仅有杂交瘤细胞能在第1次筛选使用的培养基上生长 二、多项选择题（本题共有6小题，每题有两个或多个选项正确，每小题3分，漏答1分，错答0分，
共18分）
D.体外培养经抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞是获得大量单克隆抗体的方法之一
19.柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬
14.目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载
酸的简要流程图。下列说法错误的是( )
体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法
错误的是（ ）
A.黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同
B.将菌种接种至a培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧
A.将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传
C.将菌种转接至b培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量
D.若发酵罐c中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油
B.①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理
20.如图为经过体外受精和胚胎分割、移植培育优质奶牛的过程，A、B表示结构。下列叙述错误的是（
C.②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核的融合
）
D.精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小
15.如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述错误的是（ ）
A.A为次级卵母细胞，B为内细胞团
B.囊胚的滋养层可用于性别鉴定
A.①→②过程可用不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA
C.进行胚胎分割时，应选择发育良好的囊胚或原肠胚
B.②→③过程可用Ca2+处理农杆菌细胞
D.胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
C.③→④过程是将重组Ti质粒整合到受体植物细胞的染色体DNA上
D.④→⑤过程体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的培养条件不同
21.甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，
16.关于基因表达载体构建及其组件相关说法正确的是（ ）
欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。下列相关叙述正确的是( )
A.启动子是与DNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录
B.构建基因表达载体时，一般要用同种限制酶切割含有目的基因的片段和载体
C.构建基因表达载体时，目的基因的转录模板链的5＇端应与启动子连接
D.基因上的终止密码子能够使转录在相应的位置停止
17.PCR引物的3′端有结合模板DNA的关键碱基，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下
列相关叙述错误的是( )B．第一轮PCR需进行3次循环才能得到目标产物
C．第一轮PCR的产物的两条DNA链作为第二轮PCR所用的引物
D．将某蛋白质的第21位组氨酸(CAC)改造成酪氨酸(UAC)，属于蛋白质工程
三、简答题（本题共有5个大题 。共46分）
25.（10分）研究发现，从活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株，它
们通过降解具有生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN－1的筛选流程，图2
表示GN－1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。回答下列问题：
A.操作过程中生物材料、培养基、培养环境都要严格灭菌
B.过程a中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗
C.过程b中可以用物理法或化学法诱导原生质体融合
D.过程c中只有活性部位互补的融合细胞才可以正常生长
22.研究表明，髓系细胞触发受体2(TREM2)是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因
此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说
(1) 图 中 将 菌 液 接 种 到 含 分 散 蓝 2BLN 的 LB 固 体 培 养 基 上 所 用 的 接 种 方 法 是
法错误的是( )
，该接种方法要求对菌液做充分的稀释，目的是 。
(2)图1中菌种①和③的周围出现透明圈，透明圈形成的原理是 。
菌种①～④中，最符合要求的是 。
(3)据图2可知，GN－1菌株接种量对脱色效果的影响是 。
A.步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞
26.（7分）Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞，科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag₂
基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
B.经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖
C.步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原—抗体杂交
D.步骤⑥的细胞在体外分瓶培养时需要先用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞
23.多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。如图列举了几项技术成果。下列叙述不
正确的是( )
A.无需考虑受体与供体是否是同一物种 (1)培养Rag₂基因缺失小鼠上皮细胞时需满足以下条件：一定的营养、无菌无毒的环境、
B.①技术需获得M Ⅱ期的去核卵母细胞 、 。
C.②技术不能对动物100%的复制 (2)步骤①中，在核移植前需将采集到的卵母细胞培养至 期去“核”，该“核”实际是指
D.③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良
。
24.基因定点突变的目的是通过定向改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。
(3))过程②通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大易操作、营养物质丰富外，还因为它的
大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮
PCR反应即可获得，第一轮加诱变引物和侧翼引物，第一轮产物作为第二轮PCR扩增的大引物，过程如 细胞质中可能含有 。
图所示。下列叙述正确的是( )
(4)ES必须从 中获取，这涉及伦理问题，限制了它在医学上的应用。干细胞用于临床治
疗还面临一些问题，如存在导致 发生的风险。
27.（8分）为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一
药物偶联物（ADC），过程如图1所示。
A．第一轮PCR过程中复性所用的温度应低于第二轮PCR复性的温度(2)引物是一小段能与 碱基互补配对的单链DNA。图中合成引物时，在引物5′端
添加限制酶识别序列的原因是 。
(3)PCR扩增目的基因需在一定的缓冲溶液中进行，每一次循环过程包括94℃变性、50℃复性、
三个步骤。PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2＋，作用是 。
PCR反应完成后，常采用 技术来鉴定PCR的产物。
(4)构建基因表达载体时，选用双酶切切割质粒载体和目的基因的目的有
(1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自 。 （ 写出两点)，
(2)步骤①常用方法包括 融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱 图中的T4 DNA连接酶能使目的基因片段和质粒载体片段之间形成_ 键。
导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与 发生作用，使细胞互相凝 29.（12分）金属硫蛋白(MT)是一类具有金属结合能力的多肽，金属离子如Ag⁺、Hg²⁺,Cd²⁺等能够与
聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 MT的半胱氨酸上的巯基共价结合而形成络合物，从而降低金属离子对细胞的毒害。研究人员获取了柽
(3)步骤②的细胞必须经过步骤③ 才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞， 柳和星星草MT基因的 mRNA，并最终构建了具有两种植物的MT基因载体，导入烟草，研究转基因烟草
符合要求的杂交瘤细胞的特点是 。 对Cd²⁺的耐受力，回答下列问题：
(4)研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 (1)由于 PCR 技术不能直接扩增mRNA,因此实验室常用“RT-PCR 技术”来实现目的基因的获取和扩增，
据此可知在进行“RT-PCR 技术”时应当在仪器中添加 酶、 酶、 引物、
dNTP、缓冲体系。
(2)下图是pROKII质粒、柽柳MT 基因(MTcI)和星星草 MT 基因(MTx) 的相关序列示意图。
①单克隆抗体除可以运载药物外，还有 、 等作用。
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致
。
28.（9分）如图是构建基因表达载体的示意图，回答下列问题：
将柽柳 MT 基因连接到 pROKⅡ质粒中，应选用的限制酶是 。 若甲和乙连接
到同一个pROKII中，为了使重组质粒能够同时独立表达柽柳和星星草的MT，则 MTx还需要连接
序列进行优化。
(3)重组质粒进行转化后，提取烟草总DNA，用特异性引物进行扩增得到 序列，可
检测目的基因是否已整合到烟草的基因组中。为研究转基因烟草对不同浓度 Cd²⁺的耐受力，实验思
路为：将转基因烟草幼苗分别移入 的MS 生根培养基中，观察烟草的生
长状态。
(1)基因工程操作中的核心步骤是 。重组质粒载体的核心部
件有目的基因、启动子、 。
