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铁人中学2023级高二下学期期中考试 生物 试题 考试时间： 2025 年 5月
5.为避免免疫排斥反应、科研人员取供体动物胚胎干细胞，利用基因编辑技术获得重构胚胎干细
铁人中学 2023 级高二下学期期中考试
胞，再经过培养、检测和筛选后，移入受体动物的子宫内进行培养，培养出能提供异体移植器官
的供体动物。下列相关说法正确的是（ ）
生物试题 A.进行动物细胞培养时，需置于含有95%空气和5%氧气混合气体的培养箱中培养
B.重构胚胎干细胞体外培养时，需要在培养液中加入血清等物质
C.重构胚胎移入受体之后，对受体进行同期发情处理
试题说明：1、本试题满分 1 0 0 分，答题时间 7 5 分钟。
D.经过基因编辑技术改造后的供体器官移植到人体后，一定不会发生免疫排斥反应
2、请将答案填写在答题卡上，考试结束后只交答题卡。
6.目前，体外受精、胚胎移植和胚胎分割等胚胎工程技术在医学和生产上得到广泛应用。下面对
第Ⅰ卷 选择题部分 胚胎工程技术的理解，正确的是（ ）
A.试管动物胚胎的整个发育过程都是在体外完成的
一、单项选择题：本题共15小题，每小题2分，共 30分。每小题给出的四个选项中，只有一个选
项是最符合题目要求的。 B.为降低免疫排斥反应，胚胎移植前应对受体注射免疫抑制剂
1.以宣木瓜为材料制作果醋时，首先要对果实进行软化；然后在溶液中加入质量分数为12%的白砂 C.鉴定动物性别、做DNA分析时要在内细胞团处进行取样
糖；再接入酵母菌，敞口培养一天后进行密闭发酵；最后接入醋酸菌，进行醋酸发酵。下列叙述 D.通过胚胎分割形成的后代胚胎具有相同的遗传物质，该方法可以看作是无性生殖。
正确的是（ ） 7.某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白 A为抗原来制备单克隆抗体，
A.敞口培养的目的是使酵母菌的数量大幅增加 以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列相关说法正确的是（ ）
B.加入白砂糖的目的是提高溶液的渗透压，特异性抑制杂菌的生长
C.酵母菌密闭发酵时温度应控制在30℃-35℃之间
D.接入醋酸菌后要保持体系的密闭性，并定时放气排走 CO
2
2.随着微生物纯培养技术的建立，人们可以从自然界中选择所需微生物通过发酵工程应用于生产
生活中。下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（ ）
A.微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
B.平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数
C.利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料
D.在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物
3.某些商家为了延长保质期，在泡菜和酱油制作中均会添加一定量的防腐剂。下列有关泡菜和酱
油的叙述正确的是（ ） A.诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要是利用细胞膜的功能特点
A.泡菜发酵初期，发酵产物只有乳酸 B.与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的B细胞不需要通过原代培养扩大细胞数量
B.泡菜发酵后期，乳酸菌的生长繁殖也会受到抑制 C.在杂交瘤细胞筛选过程中，发生融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖
C.防腐剂属于食品添加剂，在泡菜和酱油制作中大量使用不会危害人体健康 D.将待筛选抗体与该病毒基因A进行杂交，呈阳性的就是所需的抗体
D.泡菜能通过传统发酵技术获得，而酱油不能通过传统发酵技术获得 8.单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂分化能力的细胞群。利
4.产黄青霉菌生产青霉素的能力强，但容易产生大量的黄色素，且分离时不易除去，将此菌进行 用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如图所示。下列叙述正确的是（ ）
诱变处理，得到生产能力较高的菌种，再进一步诱变，使其产生黄色素的能力丧失后，就成为优
良的生产菌种。下列说法正确的是（ ）
A.通过青霉菌发酵制得的柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂
B.从土壤中分离青霉菌时可采用平板划线法，用无菌水进行等比例稀释
C.青霉素能抑制细菌和酵母菌等杂菌的生长
D.发酵时温度、PH、溶解氧都可能发生变化，要及时进行调整或补充
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因进行修改，预期婴儿出生后能天然抵抗人类免疫缺陷病毒，关于该技术的安全性问题，下列说
法错误的是（ ）
A.基因编辑时，引导序列可能发生变异，导致剪切错误，造成不可预知的后果
B.经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生
C.将基因编辑技术应用于治疗性克隆，符合人类伦理道德
D.只要加强监管、完善法律法规、完善技术手段，不需担心基因编辑技术的安全性
14.基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技
A.体外受精前应将卵母细胞培养至减数分裂I中期 术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（ ）
B.建立的单倍体胚胎干细胞中只含一条性染色体X或Y
C.上述过程涉及动物细胞培养、体外受精等操作
D.理论上可用物质激活卵母细胞完成MI实现由①直接转变为④
9.“细胞培养肉”是一种人造动物蛋白，其培养过程是获取哺乳动物的肌肉干细胞，将其培养成
肌肉细胞。这意味着人类有望摆脱对传统养殖业的依赖。下列叙述正确的是（ ）
A.获取肌肉干细胞时，用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
B.组织块可以用胰蛋白酶或胃蛋白酶处理一段时间
C.贴壁细胞在生长繁殖时，会发生接触抑制现象
D.肌肉干细胞具有与胚胎干细胞相同的全能性
10.研究人员利用植物体细胞杂交技术，将培育的野生猕猴桃的单倍体的细胞与栽培的二倍体猕猴
桃细胞的原生质体融合，获得了三倍体植株，为其种植改良开辟了新途径。下列说法错误的是（
） A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列
A.原生质体获得后需要在等渗培养液中进行培养 B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3ˊ端进行子链合成
B.原生质体融合时可采用高Ca2+ —高pH融合法进行诱导 C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是受精卵
C三倍体植株的形成需经过脱分化和再分化等培养过程 D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA
D.利用植物组织培养技术培育三倍体植物过程中，先转接到生根培养基，再转接到生芽培养基 15.为探究AtGA2ox8基因在拟南芥中的生物学功能，研究者采用PCR技术从拟南芥基因组中扩增得
11.植物细胞培养是在植物组织培养技术的基础上发展起来的，下列有关植物细胞培养的叙述，不 到了该基因，并采用农杆菌转化法将该基因导入拟南芥细胞中，得到了AtGA2ox8基因高表达的纯
正确的是（ ） 合转基因拟南芥植株，该植株表现为发育迟缓。下列相关叙述错误的是（ ）
A.植物细胞培养技术的目的是为了获得大量有生理活性的次生代谢物 A.利用PCR扩增AtGA2ox8基因时，延伸温度应为72℃左右
B.植物细胞培养技术快速、高效，而且不受季节、天气等的限制 B.将AtGA2ox8基因导入受体细胞前需要先构建基因表达载体
C.利用生物反应器悬浮培养人参细胞，提取人参皂苷，用于生产保健药品和美容护肤用品 C.利用农杆菌转化法培育转基因拟南芥的过程中至少要进行一次筛选
D.植物细胞培养需要在一定的温度、pH等条件下进行，但不需要进行无菌操作 D.若AtGA2ox8基因的序列已知，还可通过人工合成的方法获取该基因
12.“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关筛选的叙述错误的是（ ） 二、不定项选择题：本题共 5小题，每小题 3 分，共 15分。每小题给出的四个选项中，有一个
A.用选择培养基对微生物进行筛选时，实验组接种微生物，对照组不接种微生物 或多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得 1分，有选错的得0分。
B.基因工程中通过标记基因筛选出的细胞不一定有重组质粒 16.下图是利用体细胞核移植来克隆高产奶牛的大致流程示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
C.植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选
D.单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞
13.世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿用到了能够精确定位并修饰基因的基因编辑技术，即基因
编辑时用约为头发二十分之一细的针把Cas9蛋白和特定的RNA引导序列注入受精卵中，对CCR5基
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A.图中过程①常用显微操作法去除纺锤体和染色体的复合物
B.进行过程②前可用机械方法将动物组织分散成单个细胞
C.犊牛遗传物质与供体奶牛完全相同 A.图甲所示的质粒中还应含有复制原点和终止子等结构
D.非人灵长类动物的体细胞核移植困难的原因之一是供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完 B.将经转化处理后的大肠杆菌菌液接种至培养基乙使用的是稀释涂布平板法
全恢复其分化前的功能状态 C.配制培养基乙时应加入青霉素
17.荧光定量PCR技术是在常规PCR的基础上，加入与模板DNA某条链互补的荧光探针（一类两端 D.培养基丙中生长的菌落即为导入重组质粒的大肠杆菌
经过特殊基团修饰的单链DNA片段），当子链延伸至探针处时DNA聚合酶会水解掉探针一端并生成 19.若要利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA（图丙），限制性内切核
荧光分子，使荧光监测系统接收到荧光信号，即DNA每扩增一次，就有一个荧光分子生成，原理 酸酶的酶切位点分别是Bgl II（A↓GATCT）、EcoR I（G↓AATTC）和Sau3A I（↓GATC）。 下列分析
如图所示。下列有关叙述不正确的是 （ ）
合理的是（ ）
A.该项技术可用来直接检测样本中新冠病毒核酸的含量
B.1个双链DNA分子经过3轮循环一共会生成8个荧光分子
C.1个双链DNA分子经过5轮循环一共需要消耗15对引物
A.用EcoR I切割目的基因和P1噬菌体载体
D.该 PCR技术中DNA聚合酶既催化形成磷酸二酯键，又催化断裂磷酸二酯键
B.用Bgl II和EcoR I切割目的基因和P1噬菌体载体
18.某一质粒载体如图甲所示，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。有人将
C.用Bgl II和Sau3A I切割目的基因和P1噬菌体载体
此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，
D.用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和P1噬菌体载体
用得到的混合物直接转化后得到多种大肠杆菌，并利用培养基乙和丙筛选出导入重组质粒的大肠
20.工业上生产青霉素的流程如图所示。有关叙述正确的有（ ）
杆菌。下列叙述正确的是（ ）
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(4)为了获得足够数量的大肠杆菌菌落进行科学研究，某公司更新了一种培养大肠杆菌菌群的培养
基配方，如下图。该培养基中能提供 N 源的成分的是 。若要用该培养基来筛选
出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？ ，并用
作为指示剂。分解尿素的微生物可以合成 ，将尿素分解为氨和二氧化碳。
A．制备该培养基除了添加必要的营养成分外，还需要将 pH 调至酸性
B．过程①、②都属于扩大培养，发酵过程的中心环节是接种 22.（ 13分）骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆
C．过程③需要严格的灭菌，否则可能会导致青霉素产量下降 驼曾经分布于阿拉伯 半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件
D．过程④可采用过滤、沉淀方法将菌体分离干燥 下即认为该分类单元属于 野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的
第II卷 非选择题部分 戈壁无人区，科学家又发现了 小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单
峰骆驼，进行了如图所示的研究。 请根据所学知识回答下列问题：
三、非选择题：本题共4小题，共55分。
21.（ 14分）为测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如下
图所示，滤膜法的大致流程为：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上 →将滤膜转移到
伊红-亚甲蓝琼脂培养基（EMB 培养基）上培养→统计菌落数目。据图回答问题：
(1)胚胎工程中一般注射 处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精
入卵所发生的生理反应有 ，受精
的标志是 。
(1)为避免杂菌干扰，实验仪器如镊子、培养皿等需要采用 法进行灭菌。统计培
(2)过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至 阶段进行
养基上菌落种类和数目时要每隔 24h 观察统计一次，直到 时作为记录的结果。
胚胎移植，胚胎移植主要括 选择和处理， 人工
授精 ， 、检查、培养或保存，胚胎的移植，以及移植后的检查等步骤。
(2)某同学在无菌操作下将 500mL 待测水样通过滤膜法测得 EMB 培养基上菌落数平均为
(3)胚胎移植的优势是可以充分 ，若要胚胎移植前对E进行
135个，利用该方法统计的结果往往比实际活菌数偏 （填“高”或 “低”），大肠杆菌进行
性别鉴定应选 细胞，避免对胚胎造成影响。
扩大培养时，用摇床振荡培养的目的是 。
23.（12分）高粱等植物的秸秆中含有丰富的半纤维素(主要水解产物是木糖)。木糖在 XYR 酶、
(3)该同学进一步思考，利用滤膜法也可以测定待测水样中其他微生物的数目。他取了一份来自湖
XDH 酶的催化下转化成为木酮糖，木酮糖在 XK 酶作用下进一步代谢成为乙醇。野生型酿酒酵母
泊的水样，若要通过测量蓝藻的数目来研究“水华”，则培养基配方中必需添加的营养物质有
是乙醇发酵的重要菌种，但因其缺乏 XYR 基因和 XDH 基因而无法直接利用木糖。研究人员通过
。
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基因工程将 XYR 基因和 XDH 基因导入野生型的酿酒酵母中，在酵母细胞内建立了完整的木糖代
谢的通路。请回答下列问题：
(1)按照实验流程如图所示，从紫苏组织细胞中提取总RNA时，需要加入RNA酶抑制剂，目的是
注：增强子是一种可促进基因转录的一小段特殊 DNA 序列；LEU2基因是亮氨酸合成基因，URA3 。过程①需要 酶的催化，过程②通过 PCR技术实现，进行PCR 时，需要在两种引物的5
基因是尿嘧啶合成基因；ori为质粒的复制原点。 ´端添加限制酶 的识别序列。
（1）基因工程中会用到限制酶，它们能够识别双链DNA分子的 ，并且使每一条链 （2）启动子往往具有物种特异性，在载体pCAMBIA质粒中插入紫苏DGATI1基因，其上游启动子应
中特定部位的 。 选择 （填“紫苏DGAT1基因”、“大肠杆菌”或“四尾栅藻”）启动子。
（2）为提高乙醇的产量，研究人员采用 PCR融合技术，将增强子序列拼接到 XK 基因上游，需要 （3）将DGAT1与pCAMBIA分别用限制酶切割后进行连接可形成重组质粒，目的基因和质粒能连接
在引物 2、3 的_____________ (3´/5´)端引入与另一个基因相应末端互补的序列，形成重叠区域。 成重组质粒的原因是 。若只考虑DNA片段的
虚线框中的过程不需要加入引物，原因是 。 两两连接，构建重组质粒时可得到 种大小不同的连接产物。将重组质粒导入大肠杆菌后，可
（3）载体质粒中LEU2基因和URA3基因可作为__________筛选目的菌。由此研究人员将重组质粒 向培养基中加入 筛选出导入质粒的大肠杆菌。
a 和b导入到_______________________型酿酒酵母中，并在 ____________________培养基上进 （4）为进一步筛选出符合要求的重组质粒，选用限制酶 对不
行培养，以获得工程菌a。 同的重组质粒进行酶切处理，得到的电泳结果如图所示，在电场的作用下，这些带电分子会向着
（4）在同等适宜条件下分别将工程菌a和工程菌 b 进行发酵实验，发现工程菌 a 的乙 醇产量 与它所带电荷相反的 ，这个过程就是电泳，PCR的产物
是工程菌b的1.5 倍，试分析工程菌 a 提高了乙醇产量的原因 。 一般通过 来鉴定。其中 组重组质粒是所需质粒（已知质
24.（16分）利用基因工程技术培育出油脂高产的四尾栅藻，是获取生物柴油的新途径。科学家欲 粒 pCAMBIA 中EcoRⅠ的酶切位点与BamHⅠ的酶切位点间的最短距离为600bp）。
从紫苏中提取DGAT1基因（催化油脂合成的关键酶基因），导入四尾栅藻细胞，获得转基因油脂
高产的四尾栅藻，流程如图。质粒 pCAMBIA与PCR扩增出的DGAT1酶切位点如图所示。现有
BamHI、BglⅡ、EcoRI三种限制酶，它们识别并切割的碱基序列如表，请回答下列问题：
（5）转DGATI基因四尾栅藻成功的标志是 。
（6）与基因工程相比，蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程，是通过
，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。
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