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成都外国语学校 2025—2026 年度下学期高二期中考试
生物试题
（满分：100 分；考试时间：75 分钟）
一、选择题：共 25 题，每题 2 分，共 50 分。每题给出的四个选项中只有一个是符合要求的。
1. 下列有关传统发酵技术的描述错误的是
A. 传统发酵中的微生物常常来自原材料中天然存在的微生物
B. 用于制作泡菜的乳酸菌是厌氧型细菌
C. 毛霉分泌的蛋白酶可以把豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
D. 用果酒进行果醋发酵时，应密封发酵装置以防止杂菌污染
【答案】D
【解析】
【详解】A、传统发酵一般不进行人工接种纯化菌种，发酵所用的微生物通常来自原材料中天然存在的微生
物，A 正确；
B、制作泡菜的核心菌种是乳酸菌，乳酸菌属于厌氧型细菌，无氧条件下可将葡萄糖分解为乳酸，B 正确；
C、腐乳制作过程中，毛霉分泌的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，提升腐乳的风味
和营养价值，C 正确；
D、果醋发酵的菌种是醋酸菌，醋酸菌为好氧细菌，利用果酒制作果醋时需要持续通入无菌空气，D 错误。
2. 烟栖火叶菌是一种栖息在深海热液喷口附近的微生物，能耐受 113℃的高温，其最低生长温度为 90℃，
最适生长温度约为 105℃，可利用硫化物等无机物氧化释放的能量合成有机物。下列关于培养烟栖火叶菌的
方法和应用，错误的是（ ）
A. 烟栖火叶菌可能是化能自养菌
B. 在液体培养基中培养时，温度应控制在 105℃左右
C. 培养基中只需加入氮源和碳源两类营养物质
D. 烟栖火叶菌含有的耐高温酶可应用于需要高温反应条件的工业生产中
【答案】C
【解析】
【详解】A、化能自养菌的特征是利用无机物氧化释放的化学能，将无机物合成有机物，题干明确该菌可利
用硫化物等无机物氧化的能量合成有机物，符合化能自养菌特点，A 正确；
B、微生物培养时，最适生长温度下微生物增殖速率最高，题干给出其最适生长温度约为 105℃，因此培养
第 1页/共 22页时温度控制在 105℃左右是合理的，B 正确；
C、微生物培养基的基本营养成分至少包含碳源、氮源、水、无机盐四类，部分特殊微生物还需要额外添加
生长因子，不可能只加入氮源和碳源两类物质，C 错误；
D、该菌可在 105℃左右正常生长，其细胞内的酶可耐受高温，可作为耐高温酶的来源，应用于需要高温反
应条件的工业生产，D 正确。
3. 某生物兴趣小组计划以新鲜牛奶为原料利用传统发酵技术制作酸奶，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 发酵前对牛奶进行巴氏消毒处理，可以杀死牛奶中的绝大多数微生物
B. 发酵过程中持续搅拌牛奶并通入无菌空气，以保证乳酸菌充分发酵
C. 发酵时可以加入抗生素抑制杂菌，以保证乳酸菌成为优势菌群
D. 酸奶制作过程中，后期低温处理可产生大量乳酸杆菌
【答案】A
【解析】
【详解】A、巴氏消毒法能在尽可能保留牛奶营养成分的前提下，杀死牛奶中的绝大多数微生物，避免杂菌
干扰发酵过程，A 正确；
B、乳酸菌是厌氧型微生物，发酵需要无氧环境，持续搅拌并通入无菌空气会抑制乳酸菌的无氧呼吸，使其
无法产生乳酸，B 错误；
C、抗生素可抑制细菌的生长繁殖，乳酸菌属于细菌，加入抗生素会同时抑制乳酸菌的活性，导致发酵失败，
C 错误；
D、酸奶制作后期低温处理的作用是抑制乳酸菌的生长繁殖，延长酸奶保质期，不会产生大量乳酸杆菌，D
错误。
4. 在传统家庭制作米酒（甜酒酿）的过程中，通常会将蒸熟的糯米冷却后，与“酒曲”（含根霉、酵母菌等）
混合，中间挖一个“酒窝”，并在 28-30℃下密封保温 1-2 天。下列有关该过程的分析错误的是（ ）
A. 蒸熟糯米的主要目的包括杀菌、使淀粉糊化便于微生物利用
B. 挖“酒窝”可增加糯米与氧气的接触面积，同时便于观察出酒情况
C. “冷却”是为了防止高温杀死酒曲中的微生物，保证发酵的正常进行
D. 若密封时间过长，米酒可能会逐渐变酸，主要是因醋酸菌利用乙醇生成醋酸
【答案】D
【解析】
【详解】A、蒸熟糯米时高温可杀灭糯米表面的杂菌，同时使淀粉糊化、结构更松散，便于微生物分泌的酶
分解利用，A 正确；
第 2页/共 22页B、挖“酒窝”可增大糯米与氧气的接触面积，初期有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，增加菌种数量，同
时酒窝位置可直接观察出酒情况，B 正确，；
C、酒曲中的根霉、酵母菌均为活微生物，高温会导致其蛋白质变性失活，“冷却”可避免高温杀死菌种，保
证发酵正常进行，C 正确；
D、醋酸菌是异养需氧型微生物，密封环境下缺乏氧气，醋酸菌无法生存和代谢，不能利用乙醇生成醋酸。
米酒变酸多是密封不严混入醋酸菌导致，而非密封时间过长本身的结果，D 错误。
故选 D。
5. 为实现甲烷的资源化利用，某研究小组致力于筛选能将其转化为单细胞蛋白的甲烷氧化菌。该研究计划
从土壤中筛选和纯化高效菌株，其核心步骤在于通过精确控制培养箱的气体环境来进行定向培养。下列叙
述错误的是（ ）
A. 为了筛选出甲烷氧化菌，培养时应选择以甲烷为唯一碳源
B. 配制培养基后，需用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌
C. 待培养基冷却到 50℃左右时倒平板，再将土样稀释涂布在培养基上
D. 通过发酵工程可以从甲烷氧化菌细胞中提取单细胞蛋白
【答案】D
【解析】
【详解】A、依题意，甲烷氧化菌在有氧条件下能够氧化甲烷，因此为了筛选出甲烷氧化菌，可选择以甲烷
为唯一碳源，A 正确；
B、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，配制培养基后，通常需要对培养基进行灭菌处理，对
培养基进行灭菌时，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，B 正确；
C、对灭菌后的培养基进行倒平板操作时，培养基通常要冷却至 50°C 左右，在这个温度下操作，培养基不
会凝固，也不至于烫手，C 正确；
D、根据单细胞蛋白的概念，通过发酵获得的大量的微生物菌体就是单细胞蛋白，而不是从微生物细胞中提
取单细胞蛋白，D 错误。
故选 D。
6. 科研人员欲对土壤微生物进行计数并分离出高效分解纤维素的微生物，部分流程如图甲所示。A 组经多
次实验后获得了 4 种优良菌种，接种到含刚果红的鉴别培养基中培养一段时间，形成单菌落，结果如图乙
所示。B 组⑦过程稀释了 104 倍，相应平板上接种稀释液的体积为 0．1mL。下列说法正确的是（ ）
第 3页/共 22页A. A 组和 B 组培养基均以纤维素为唯一碳源
B. 图乙平板中应选择 C 菌种作为发酵工程的优良菌种
C. 该实验中也可采用平板划线法计数并分离微生物
D. 若⑧过程用到的 3 个平板菌落数分别为 45、46、47，则每克土样中微生物数量为 4.6×107 个
【答案】D
【解析】
【详解】A、A 组是为了筛选高效分解纤维素的微生物，以纤维素为唯一碳源，B 组是对土壤微生物计数，
不用以纤维素为唯一碳源，A 错误；
B、B 菌种的透明圈直径与菌落直径比值最大，该比值越大，分解纤维素的能力越强，应选择 B 菌种作为发
酵工程的优良菌种，B 错误；
C、图中 B 组的目的是对土壤微生物进行计数，所以该过程采用的接种方法为稀释涂布平板法，C 错误；
D、过程用到了 3 个平板，待菌落数稳定时，统计菌落数分别为 45、46、47，则该每克土样中微生物数量
为（45+46+47）÷3×105÷0.1=4.6×107 个，D 正确。
7. LB 培养基是微生物学实验室中最常用的基础培养基之一，广泛用于大肠杆菌等细菌的培养，其配方如表
所示。下列叙述错误的是（ ）
成分 胰蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 琼脂
含量/（g·L-1） 10.0 5.0 10.0 15.0
A. LB 培养基属于固体培养基
B. 该培养基还需要加水
C. 培养基通常先进行灭菌处理再调节 pH
D. LB 培养基可用湿热灭菌法进行灭菌
【答案】C
第 4页/共 22页【解析】
【详解】A、培养基中添加了琼脂作为凝固剂，因此 LB 培养基属于固体培养基，A 正确；
B、表格仅列出了每升培养基中各固体成分的含量，配制培养基时还需要加入水作为溶剂并定容，B 正确；
C、制备培养基的正确流程是先调节 pH，再进行灭菌处理，若先灭菌再调 pH，调节 pH 的操作会引入杂菌
造成培养基污染，C 错误；
D、LB 培养基属于通用细菌培养基，可采用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌法的一种）进行灭菌，D 正确。
8. 下列关于发酵工程的相关叙述，不正确的是（ ）
A. 发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵
B. 发酵产品若是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法分离菌体获得产品
C. 发酵生产的废弃液必须进行二次清洁或灭菌处理
D. 利用发酵工程生产抗菌物质青霉素时，发酵罐不需要严格灭菌
【答案】D
【解析】
【详解】A、发酵工程的流程包括菌种选育、扩大培养、培养基配制与灭菌、接种、发酵罐内发酵、产物分
离提纯，其中发酵罐内的发酵是微生物代谢合成目标产物的核心阶段，是发酵工程的中心环节，A 正确；
B、若发酵产品为微生物细胞本身（如单细胞蛋白），可通过过滤、沉淀等物理方法将菌体从发酵液中分离
得到产品，B 正确；
C、发酵生产的废弃液中可能残留有害微生物、代谢废物等，直接排放会污染环境，因此必须进行二次清洁
或灭菌处理后再排放，C 正确；
D、利用发酵工程生产青霉素时，若发酵罐灭菌不严格混入杂菌，杂菌会与生产菌种青霉竞争营养，部分杂
菌还可分泌青霉素酶分解青霉素，导致产量大幅下降，因此发酵罐需要严格灭菌，D 错误。
9. 下列与细胞工程技术相关的表述中，不正确的是（ ）
A. 植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性
B. 植物体细胞杂交技术可以打破生殖隔离实现远缘杂交育种
C. 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同
D. 动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分相同
【答案】D
【解析】
【详解】A、植物组织培养是将离体的植物器官、组织或细胞培育为完整植株的技术，理论基础是植物细胞
的全能性，A 正确；
第 5页/共 22页B、植物体细胞杂交技术可将不同物种的植物体细胞融合后培育为杂种植株，克服了远缘杂交不亲和的障碍，
打破生殖隔离实现远缘杂交育种，B 正确；
C、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理均为细胞膜的流动性，二者基本原理相同，C 正确；
D、动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分不完全相同，动物细胞培养的培养基中含有葡萄糖及动
物血清，植物组织培养的培养基中含有蔗糖及植物激素，D 错误。
10. 下列应用中不涉及植物细胞全能性的是（ ）
A. 单倍体玉米的培育 B. 紫草宁的工厂化生产
C. 香蕉脱毒苗的培育 D. 名贵兰花的微型繁殖
【答案】B
【解析】
【详解】A、单倍体玉米通过花药离体培养获得，由已分化的花粉细胞发育为完整玉米植株，体现了植物生
殖细胞的全能性，A 不符合题意；
B、紫草宁工厂化生产仅需将紫草细胞培养到愈伤组织阶段，提取其代谢产物即可，未发育为完整植株，不
涉及植物细胞全能性，B 符合题意；
C、香蕉脱毒苗是利用茎尖分生区细胞经植物组织培养发育为完整香蕉植株，体现了植物体细胞的全能性，
C 不符合题意；
D、名贵兰花的微型繁殖是利用植物组织培养技术，将兰花离体组织/细胞培育为完整兰花植株，体现了植
物细胞的全能性，D 不符合题意。
11. 甘蔗是我国重要的糖料作物，脱毒苗技术是甘蔗良种繁育的关键技术之一。如图为培育脱毒甘蔗的流程
图。下列叙述正确的是（ ）
A. 甘蔗茎尖含病毒少，在实验过程中可以不用消毒
B. 过程②形成愈伤组织时必须给予一定时间的光照
C. 生长素与细胞分裂素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向
D. 过程③一般先诱导愈伤组织生根，再诱导其生芽
【答案】C
【解析】
第 6页/共 22页【详解】A、甘蔗茎尖虽病毒含量极低，但其表面仍附着有杂菌，若不消毒会造成培养基污染，导致培养失
败，因此外植体必须进行消毒处理，A 错误；
B、过程②是脱分化形成愈伤组织的过程，该阶段无需光照，光照会抑制愈伤组织的形成，B 错误；
C、植物组织培养中，生长素与细胞分裂素的浓度、比例都会调控细胞的发育方向：当细胞分裂素和生长素
的比值较高时，有利于芽的分化；当该比值较低时，有利于根的分化，C 正确；
D、过程③是愈伤组织的再分化过程，一般先诱导愈伤组织生芽，待芽发育后再诱导生根，若先生根会大幅
降低生芽的成功率，D 错误。
12. 某研究团队将 OCT4、SOX2、KLF4、cMYC 基因转入外周血单核细胞，诱导其转化为 iPSC 细胞；进
而诱导分化出相应免疫细胞，以下说法错误的是（ ）
A. 可利用病毒将 OCT4、SOX2、KLF4、cMYC 基因转入外周血单核细胞
B. 上述动物细胞培养应提供的气体条件是 95%O 和 5%CO，CO 用于维持培养液的 pH
2 2 2
C. iPSC 细胞具有分化成为动物体内任何一种类型细胞的潜能
D. 用健康捐献者的细胞批量制备 iPSC 细胞，进行异体免疫治疗时需要考虑免疫排斥反应
【答案】B
【解析】
【详解】A、将目的基因导入动物细胞时，可利用经过改造的病毒作为运载体，携带目的基因 OCT4、SOX2
、KLF4、cMYC 进入外周血单核细胞，A 正确；
B、动物细胞培养的气体环境为 95%空气和 5%CO₂，其中 5%CO₂的作用是维持培养液的 pH，B 错误；
C、iPSC 是诱导多能干细胞，具有分化为动物体内任何一种类型细胞的潜能，C 正确；
D、健康捐献者的 iPSC 细胞表面的抗原与受体存在差异，异体免疫治疗时会引发免疫排斥反应，因此需要
考虑免疫排斥，D 正确。
13. 组织工程应用种子细胞、生长因子和支架（框架材料）对受损的组织或器官进行修复（如图），下列叙
述错误的是（ ）
A. 自体干细胞或体细胞均可作为种子细胞
B. 器官的形成过程中发生了基因的选择性表达
第 7页/共 22页C. 支架为种子细胞提供增殖和分化的附着空间
D. 可用胃蛋白酶处理生物组织分散种子细胞
【答案】D
【解析】
【详解】A、自体干细胞或体细胞和自身遗传物质匹配，作为种子细胞一把不会引发免疫排斥反应，均可作
为种子细胞，A 正确；
B、器官形成过程中存在细胞分化，细胞分化的实质就是基因的选择性表达，B 正确；
C、支架可以模拟细胞生长的体内微环境，为种子细胞提供增殖、分化的附着空间，C 正确；
D、分散动物组织细胞通常使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，胃蛋白酶的最适 pH 为强酸性，而动物细胞生存的
适宜 pH 为 7.2~7.4，该环境下胃蛋白酶失活无法发挥作用，不能用胃蛋白酶处理生物组织分散种子细胞，D
错误。
14. 水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓慢，长期的掠夺
性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果
如表所示。下列叙述正确的是（ ）
转速（r/min） 55 65 75 85
相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25
细胞干重（g/L） 7.5 9.7 11.4 9.5
黄酮产量（g/L） 0.2 0.27 0.32 0.25
A. 悬浮培养目的是提高单个水母雪莲细胞中黄酮含量
B. 黄酮是水母雪莲细胞生长增殖和生存所必需的物质
C. 氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必要的
D. 转速为 85r/min 时不利于细胞生长，有利于黄酮的积累
【答案】C
【解析】
【详解】A、悬浮培养的目的是促进水母雪莲细胞大量增殖，进而提高黄酮的总产量，并非提高单个细胞的
黄酮含量，A 错误；
B、黄酮属于次生代谢产物，不是水母雪莲细胞生长增殖和生存所必需的物质，B 错误；
第 8页/共 22页C、转速可通过影响培养液的溶氧量改变氧气供给，表格中随转速升高（溶氧增加），细胞相对生长速率、
干重和黄酮产量先上升后下降，说明氧气供给对水母雪莲细胞的生长、分裂和代谢是必要的，C 正确；
D、转速为 85r/min 时，细胞干重和黄酮产量均低于 75r/min 时的数值，既不利于细胞生长，也不利于黄酮
积累，D 错误。
15. 中国克隆牛“康康”的培育流程如下：将良种肉牛的体细胞直接注入去核卵母细胞中，经诱导融合形成
重构胚；对重构胚人工激活与体外培养后，筛选合格胚胎移植至代孕母牛子宫内，使其完成胚胎发育。下
列说法错误的是（ ）
A. “康康”的培育流程属于有性生殖范畴
B. 利用梯度离心法可不穿透透明带去除纺锤体—染色体复合物
C. 可用电刺激或 Ca2+载体激活重构胚，使其完成发育进程
D. “康康”的细胞质基因来源于受体细胞和供体细胞
【答案】A
【解析】
【详解】A、有性生殖需要经过两性生殖细胞融合形成受精卵，再发育为新个体，“康康”通过体细胞核移植
技术培育，未经过两性生殖细胞的结合过程，属于无性生殖范畴，A 错误；
B、去除卵母细胞染色体的方法包含梯度离心法、紫外光短时间照射法等，该类方法无需穿透透明带即可去
除纺锤体—染色体复合物，B 正确；
C、人工激活重构胚的常用方法有电刺激、Ca2+载体处理、乙醇处理等，可诱导重构胚完成细胞分裂和发育
进程，C 正确；
D、“康康”的核基因来自供体良种肉牛的体细胞，培育时供体细胞被直接注入去核卵母细胞，供体细胞的少
量细胞质也会进入卵母细胞，因此其细胞质基因来源于去核卵母细胞（受体细胞）和供体细胞，D 正确。
16. 若下图表示细胞工程操作中的某些过程，下列推理错误的是（ ）
第 9页/共 22页A. 若 A、B 分别是白菜和甘蓝的原生质体，则 C 细胞再生出细胞壁后需要通过植物组织培养才能发育成杂
种植株“白菜—甘蓝”
B. 若 A、B 分别是白菜和甘蓝的原生质体，则 C 细胞的存在说明若让白菜和甘蓝进行有性杂交，其子代可
育
C. 若 A、B 分别是小鼠骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞，则 C 细胞不一定能无限增殖且产生特异性抗体
D. 若 A、B 分别是取自优良奶牛的卵母细胞和精子，在进行体外受精时，一般要把 A 细胞培养到减数分裂
Ⅱ中期
【答案】B
【解析】
【详解】A、植物体细胞杂交包括原生质体融合和植物组织培养两个阶段，如果 A、B 分别是白菜和甘蓝的
原生质体，则 C 细胞为杂种细胞，杂种细胞再生出细胞壁后，需要通过植物组织培养技术才能发育成杂种
植株白菜—甘蓝，A 正确；
B、白菜和甘蓝是不同物种，存在生殖隔离，二者自然有性杂交产生的子代，因为没有同源染色体，减数分
裂时联会紊乱，因此子代不可育；植物体细胞杂交能获得可育的杂种植株，不能推出二者有性杂交子代可
育，B 错误；
C、动物细胞融合过程中，会产生多种融合细胞：只有骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞融合的杂交瘤细胞，才同时
具备无限增殖、产生特异性抗体的特点；骨髓瘤-骨髓瘤融合、B-B 融合的细胞不满足该特点，因此 C 细胞
不一定符合要求，C 正确；
D、若 A、B 分别是优良奶牛的精子和卵细胞，在进行体外受精时，一般要把 A 卵细胞培养到减数分裂Ⅱ中
期，因为刚排出的卵子尚未完全成熟，一般仅完成减数第一次分裂，直到减数第二次分裂中期，卵细胞才
具备与精子受精的能力，D 正确。
17. 接受体外受精——胚胎移植的母体往往表现出焦虑、抑郁等心理，这会影响胚胎的免疫稳态、囊胚的孵
化，进而影响胚胎滋养层的增殖等，降低胚胎移植的成功率。下列叙述正确的是（ ）
A. 胚胎工程中一般采用注射性激素的方法，使母体超数排卵
B. 欲获得更多的胚胎可对囊胚的滋养层细胞进行均等分割
C. 同种生物的早期胚胎移植之前无需检测是否存在免疫排斥
D. 为提高胚胎移植的成功率，胚胎应尽可能在体外培养至原肠胚期
【答案】C
【解析】
【详解】A、胚胎工程中超数排卵需注射促性腺激素，注射性激素会通过负反馈调节抑制垂体分泌促性腺激
第 10页/共 22页素，反而抑制卵巢排卵，A 错误；
B、对囊胚进行分割时，需要将内细胞团均等分割，以保障分割后胚胎的恢复和发育，滋养层细胞发育为胎
膜和胎盘，不需要均等分割，B 错误；
C、受体子宫对移入的同种早期胚胎基本不发生免疫排斥，是胚胎移植的生理学基础之一，因此移植前无需
检测免疫排斥，C 正确；
D、胚胎移植的适宜时期为桑椹胚或囊胚期，原肠胚细胞分化程度高，移植成功率很低，不适宜进行移植，
D 错误。
18. 我国自主研发的全球首款“异体通用型”药品，含人异体诱导多能干细胞（iPS）再生的脊髓神经祖细
胞注射液，可改善脊髓损伤患者的运动功能。该药研发过程不涉及（ ）
A. 胚胎干细胞的伦理争议
B. 细胞的原代和传代培养
C. 给药后免疫排斥的监测
D. 调控基因的选择性表达
【答案】A
【解析】
【详解】A、iPS 细胞是通过对成熟体细胞诱导重编程得到的多能干细胞，无需破坏胚胎获取，因此研发过
程不涉及胚胎干细胞相关的伦理争议，A 符合题意；
B、获取足量的 iPS 细胞及诱导其分化为脊髓神经祖细胞的过程，需要通过原代培养、传代培养完成细胞扩
增，涉及该操作，B 不符合题意；
C、该药品为异体来源的细胞制剂，研发阶段需要监测给药后的免疫排斥反应，以验证其安全性，涉及该操
作，C 不符合题意；
D、iPS 细胞分化为脊髓神经祖细胞的实质是基因的选择性表达，研发过程需要定向调控相关基因的表达才
能获得目标细胞，涉及该操作，D 不符合题意。
故选 A。
19. 如图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞的获得过程，相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①中，精子需要获能，卵母细胞应进行成熟培养
第 11页/共 22页B. 过程②、③经历了有丝分裂和细胞分化，不同阶段基因存在差异
C. 卵母细胞通常在受精后才能完成减数分裂，因此不能直接用卵母细胞培养
D. 图中的“早期胚胎”相当于囊胚期，其中的内细胞团细胞具有发育全能性
【答案】B
【解析】
【详解】A、过程①为体外受精，体外受精操作中，精子需要经过获能处理才具备受精能力，卵母细胞需要
培养至减数第二次分裂中期（成熟状态）才能完成受精作用，A 正确；
B、过程②是早期胚胎培养，存在有丝分裂和细胞分化，但过程③是分离培养胚胎干细胞，胚胎干细胞在体
外培养时仅进行有丝分裂、不发生细胞分化；且同一来源的不同阶段细胞的遗传物质（基因）完全相同，
细胞的差异是基因选择性表达的结果，并非基因存在差异，B 错误；
C、哺乳动物卵母细胞的减数第二次分裂是在受精过程中完成的，所以需要用精子刺激卵母细胞，然后移除
雄原核再进行培养，而不是直接培养卵母细 胞 ，C 正确；
D、图中的早期胚胎出现了内细胞团和滋养层的分化，相当于囊胚期，内细胞团细胞具有发育全能性，可分
化为个体的各种组织，D 正确。
20. 不对称 PCR 是一种通过控制引物浓度比例选择性扩增单链 DNA 的技术，其核心原理是使用限制性引物
与非限制性引物按 1∶50 的比例进行 PCR 扩增，初期生成双链 DNA，当限制性引物耗尽后转为单链扩增，
该方法可用于制备 DNA 探针，部分过程如图所示，下列叙述错误的是（ ）
A. 该方法所用引物为一小段脱氧核糖核酸
B. 第一阶段的扩增以 DNA 的两条链为模板
C. 限制性引物的作用是为单链扩增提供所需模板
D. 制备的单链 DNA 探针与目标 DNA 的β链相同
【答案】D
【解析】
【详解】A、PCR 的引物本质是一小段能与模板链互补配对的单链脱氧核糖核酸，A 正确；
B、第一阶段限制性引物和非限制性引物均充足，和普通 PCR 过程一致，以目标 DNA 的两条链为模板扩增
双链 DNA，B 正确；
第 12页/共 22页C、限制性引物参与合成的互补链是后续单链扩增的模板，因此限制性引物的作用是为单链扩增提供所需模
板，C 正确；
D、单链扩增时仅存在非限制性引物，以限制性引物扩增得到的与β链序列相同的链为模板，合成的单链探
针序列与目标 DNA 的α链相同，并非与β链相同，D 错误。
21. 某科研团队通过转基因获得了一种大肠杆菌（工程菌），可作为监测残留在生物组织或环境中的四环素
水平的“报警器”，其监测原理如下图所示，天然大肠杆菌不含有图中所示基因。（GFP 基因是绿色荧光蛋
白基因）。下列有关说法正确的是（ ）
A. 启动子 1、2 是 DNA 聚合酶识别和结合的位点，启动基因的转录过程
B. 转基因工程菌中 TetR 基因的表达是 GFP 基因表达的前提条件
C. 转基因工程菌中的 GFP 基因表达产物还需要内质网等细胞器的加工
D. 当环境中存在四环素时，大肠杆菌可在一定条件下发出绿色荧光
【答案】D
【解析】
【详解】A、启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的位点，启动基因的转录过程，A 错误；
B、由图可知，TetR 基因表达产生的 TetR 蛋白会抑制 GFP 基因的表达，所以 TetR 基因的表达不是 GFP 基
因表达的前提条件，B 错误；
C、大肠杆菌是原核生物，原核生物没有内质网等复杂的细胞器，C 错误；
D、从图中可以看出，当环境中存在四环素时，四环素与 TetR 蛋白结合，使得 TetR 蛋白对 GFP 基因的抑
制作用被解除，从而 GFP 基因能够表达，大肠杆菌可在一定条件下发出绿色荧光，D 正确。
故选 D。
22. 关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（ ）
A. 过滤液沉淀过程在 4℃冰箱中进行是为了防止 DNA 降解
B. 酒精可使 DNA 溶解蛋白质析出
C. 在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺试剂呈现蓝色
D. 粗提取的 DNA 中可能含有蛋白质等杂质
第 13页/共 22页【答案】B
【解析】
【详解】A、低温可以抑制 DNA 酶的活性，避免 DNA 被酶分解，因此过滤液沉淀过程在 4℃冰箱中进行能
够防止 DNA 降解，A 正确；
B、DNA 难溶于酒精，而蛋白质等杂质可溶解在酒精中，因此加入酒精的作用是让 DNA 析出、蛋白质留在
溶液中，B 错误；
C、DNA 的鉴定原理为：在沸水浴条件下，DNA 与二苯胺试剂反应呈现蓝色，C 正确；
D、粗提取仅能初步分离 DNA 和大部分杂质，得到的 DNA 纯度较低，可能含有蛋白质、多糖等杂质，D
正确。
23. 下列有关质粒的叙述错误的是（ ）
A. 质粒可从原核细胞或真核细胞中分离，其上含有控制生物性状的基因
B. 质粒上的限制酶切割位点可供外源 DNA 片段插入其中
C. 质粒结构简单，由 DNA 和蛋白质构成，是可自我复制的小型细胞器
D. 质粒上的复制原点可使外源基因在受体细胞中能稳定复制并遗传
【答案】C
【解析】
【详解】A、质粒可从原核细胞（如大肠杆菌）和部分真核细胞（如酵母菌）中分离获得，其上的基因可控
制对应性状（如抗性基因控制抗药性），A 正确；
B、作为运载体的质粒需具备一个或多个限制酶切割位点，供外源 DNA 片段插入以构建重组质粒，B 正确；
C、质粒是独立于拟核或细胞核外的小型环状双链 DNA 分子，不含蛋白质，也不属于细胞器，C 错误；
D、质粒上的复制原点是 DNA 复制的起始位点，可使质粒及插入的外源基因在受体细胞中稳定复制并遗传
给子代，D 正确。
24. 基因工程在育种方面得到广泛应用。研究人员将油体蛋白基因 SIOLE1 与红色荧光蛋白基因 TagRFP 连
接形成融合基因 SIOLE1-TagRFP，并将此融合基因转入番茄细胞中获得高产油体蛋白的转基因番茄，培育
过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
第 14页/共 22页A. 将基因 SIOLE1 与基因 TagRFP 连接形成融合基因需要使用 DNA 连接酶，催化磷酸二酯键的形成
B. 根据融合基因的 3′端碱基序列设计引物，引物能引导耐高温的 DNA 聚合酶从自身的 3′端开始合成 DNA
子链
C. PCR 过程中引物与模板 DNA 单链结合的步骤为复性，所需温度是 PCR 各步骤中温度最低的
D. 可选择限制酶 XbaⅠ、EcoRⅠ对质粒进行切割
【答案】D
【解析】
【详解】A、DNA 连接酶可催化两个 DNA 片段之间形成磷酸二酯键，因此将 SIOLE1 基因和 TagRFP 基因
连接形成融合基因需要 DNA 连接酶参与，A 正确；
B、PCR 扩增时需要根据目的基因 3'端的碱基序列设计引物，耐高温的 DNA 聚合酶只能从引物的 3'端开始
延伸，合成 DNA 子链，DNA 合成方向为 5'→3'，B 正确；
C、PCR 过程包括变性（90~95℃）、复性（55~60℃）、延伸（70~75℃）三个步骤，其中引物与模板 DNA
单链结合的复性步骤温度最低，C 正确；
D、由图可知，EcoR Ⅰ在 Ti 质粒上存在两个酶切位点，其中一个位于标记基因（氨苄青霉素抗性基因）内
部，若用 Xba Ⅰ、EcoR Ⅰ切割质粒，会破坏标记基因，还会将质粒切割为多个片段，无法得到合格的运载
体，D 错误。
25. 将某外源基因与质粒结合形成重组质粒的过程如图。下列说法错误的是（ ）
第 15页/共 22页A. 氨苄青霉素抗性基因可作为筛选重组 DNA 的标记基因
B. 用不同限制酶分别切割含目的基因的 DNA 和质粒也能产生相同黏性末端
C. 构建重组质粒时，除了需 BamHI 酶外，还需 DNA 连接酶
D. 图中方法可保证目的基因定向与质粒相连形成重组质粒
【答案】D
【解析】
【详解】A、氨苄青霉素抗性基因是质粒上的标记基因，可用于筛选含有重组 DNA 的受体细胞，A 正确；
B、不同的限制酶识别不同的核苷酸序列，但可能由于识别序列部分相同，切割后可能会产生相同的黏性末
端，B 正确；
C、构建重组质粒时，首先要用 BamHI 酶切割质粒和含目的基因的 DNA，产生相同的黏性末端，然后再用
DNA 连接酶将目的基因和质粒连接起来，C 正确；
D、仅用 BamHI 一种限制酶切割，目的基因和质粒都可能会发生自身环化，或者目的基因与质粒反向连接，
不能保证目的基因定向与质粒相连形成重组质粒，D 错误。
故选 D。
二、非选择题：共 4 题，共 50 分。
26. 某同学在研究“酶的特性”过程中，设计了以新制的体积分数为 3%的 HO 溶液为反应底物的 4 组实验，
2 2
实验结果如下表所示。
组别 处理 1 处理 2 处理 3 实验现象
A 组 HO 溶液 2mL 蒸馏水 2 滴 常温 无明显现象
2 2
B 组 HO 溶液 2mL FeCl 溶液 2 滴 常温 气泡稍多而小
2 2 3
C 组 HO 溶液 2mL 新鲜肝脏研磨液 2 滴 常温 气泡极多而大
2 2
第 16页/共 22页煮沸冷却的肝脏研磨
D 组 HO 溶液 2mL 常温 ①
2 2
液 2 滴
注：FeCl 的质量分数为 3.5%，肝脏研磨液的质量分数为 20%，已知此浓度下每滴 FeCl 中的 Fe3+数大约是
3 3
每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的 25 万倍。根据所学知识回答下列问题：
（1）酶是由________产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶的化学本质是________。
（2）表中①处所填内容为________________。
（3）C 组和 B 组对比，可得出的实验结论是________。C、D 组形成对照实验，其因变量是________，D
组出现结果②的原因是________。
（4）人的骨骼肌细胞中，ATP 含量仅够剧烈运动时 3s 以内的能量供给。运动员参加短跑比赛过程中，肌
细胞中 ATP 的相对含量随时间的变化如下图所示。
图中 A→B 的变化过程，说明 ATP 被水解，释放的能量用于______________；B→C 过程中，ATP 含量增加，
说明细胞呼吸加强，释放更多______________，供 ADP 形成 ATP，以补充细胞中 ATP 含量的不足。从整个
曲线来看，肌细胞中 ATP 的含量不会降为零，说明________________。
【答案】（1） ①. 活细胞 ②. 蛋白质
（2）无明显现象 （3） ①. 过氧化氢酶比 Fe3+的催化效率高得多（答到与无机催化剂相比，酶具有
高效性/酶具有高效性也可） ②. 过氧化氢的分解速率（或产生气泡的多少） ③. 高温使肝脏研磨液
中过氧化氢酶失去活性
（4） ①. 肌肉收缩等生命活动 ②. 能量 ③. ATP 的生成和分解是同时进行的
【解析】
【小问 1 详解】
酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶的化学本质是蛋白质，少数为 RNA。
【小问 2 详解】
煮沸会使肝脏研磨液中的过氧化氢酶空间结构被破坏，永久变性失活，无法催化过氧化氢分解，因此实验
现象为无明显现象。
第 17页/共 22页【小问 3 详解】
B 组是无机催化剂 FeCl ，C 组是过氧化氢酶，即使 Fe3+数量远多于酶，C 组反应仍更快，可得出结论：酶
3
具有高效性，催化效率远高于无机催化剂。C、D 对照的自变量是酶是否有活性，因变量是过氧化氢的分解
速率（可以用单位时间内气泡产生的多少表示）；D 组无明显现象的原因是高温使酶变性失活，丧失催化功
能。
【小问 4 详解】
图中 A→B 的变化过程，说明 ATP 水解释放的能量直接供给肌肉收缩等生命活动，满足短跑运动的能量需
求；B→C 过程中，ATP 含量增加，说明细胞呼吸加强，释放更多能量，可用于 ADP 合成 ATP；ATP 不会
降为零，说明细胞内 ATP 和 ADP 的相互转化时刻不停地进行，且始终维持动态平衡。
27. 微生物驯化是指通过人为控制环境条件（如温度、pH、底物浓度、毒性物质等），逐步提高微生物对特
定环境或污染物的适应能力，使其代谢活性、耐受性或降解效率显著提升的过程。研究人员试采用微生物
驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解苯的红球菌属，回答下列问题：
（1）用于筛选的样品应来自________的土壤。该实验所用驯化培养基含有蛋白胨、水、磷酸二氢钾等，其
中蛋白胨可提供________（答出 2 点）等营养要素。驯化时，培养液中应逐步加大浓度的物质为________。
（2）若将驯化后的微生物通过平板划线法进行纯种分离，则不需要对菌液进行梯度稀释也能获得单菌落，
原因是通过接种环在________表面连续划线的操作，可将聚集的菌种________分散到培养基的表面，在数
次划线后培养，可以分离到单个菌落。划线完成后，培养接种后的平板时，需同时培养一个未接种的平板，
目的是________（答出 2 点）。
（3）若使用稀释涂布平板法得到能高效降解苯的红球菌属纯培养物，则统计的菌落数往往比活菌的实际数
目少，原因是________________。在稀释倍数为 106 时涂布了 3 个平板，菌落数目需要每隔一段时间统计一
次，选取________时的记录作为结果。统计的菌落数分别为 260、264、256，计算得出样品中的活菌数为
1.3×109 个/mL，则涂布的菌液量为________。
【答案】（1） ①. 被苯污染 ②. 碳源、氮源、（维生素） ③. 苯
（2） ①. 固体培养基 ②. 逐步稀释（答到稀释即可给分） ③. 作为对照，检测培养基是否被污
染
（3） ①. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 ②. 菌落数目稳定时 ③.
0.2mL
【解析】
【小问 1 详解】
筛选降解苯的微生物，需从目标菌富集的环境取样，因此选择被苯污染的土壤；蛋白胨可提供碳源、氮源、
第 18页/共 22页生长因子等营养；驯化目的是筛选耐苯、降解苯的菌株，因此要逐步提高苯的浓度，定向选择目标菌株。
【小问 2 详解】
平板划线法通过在固体培养基表面连续划线，使接种环上聚集的菌种随划线次数增加逐步稀释分散，最终
得到单菌落，无需预先梯度稀释；未接种的空白平板作为对照：若空白平板长菌，说明要么培养基灭菌不
彻底，要么培养过程有杂菌污染，可判断实验结果是否有效。
【小问 3 详解】
稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计值低于
实际活菌数；需等菌落数稳定后记录，避免因培养时间不足导致部分菌落未长出，计数偏小；计算过程：3
个平板平均菌落数= (260+264+256)÷3=260，稀释倍数 = 106，每 mL 活菌数 = 1.3×109 代入公式：1.3×
109=260÷V×106，V=0.2 mL。
28. 抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结
合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示。回答下列问题：
（1）在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射____（填“相同”或“不同”）特定抗原，注射后小鼠体内发
生相应的____（填“细胞”或“体液”）免疫反应，生成能产生抗体的细胞。
（2）与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用____（填具体方法）诱导动物细胞融合。
（3）过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是____。过程④对细胞丙进行____
培养和____检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是____。
（4）与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有____（答出 2 点）。紫杉醇能阻止肿瘤细胞
有丝分裂，促进其凋亡，用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，
这利用的是单克隆抗体的____（填“导向”或“治疗”）功能。
【答案】（1） ①. 相同 ②. 体液
（2）灭活病毒诱导法 （3） ①. 既能无限增殖，又能产生抗体 ②. 克隆化 ③. 抗体 ④. 抗
原和抗体特异性结合
（4） ①. 特异性强，可大量制备 ②. 导向
【解析】
【分析】由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同
第 19页/共 22页位素、药物等相结合，制成“生物导弹”。借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀
死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。
【小问 1 详解】
在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射相同的特定抗原，使小鼠产生更多的已被免疫的 B 淋巴细胞，注射
后的小鼠体内发生相应的体液免疫反应，生成能产生抗体的细胞。
【小问 2 详解】
过程②表示 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合过程，与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用
灭活病毒诱导法诱导动物细胞的融合。
【小问 3 详解】
过程③表示用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是既能无限增殖，又能产生抗体。
过程④对细胞丙进行克隆化培养和抗体检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是抗
原和抗体的特异性结合。
【小问 4 详解】
与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有特异性强，可大量制备，纯度高。用单克隆抗体
与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，利用的是单克隆抗体的导向功能。
29. 接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一，新冠病毒疫苗有多种，我国科学家团队研发的腺病毒载体重
组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗。图是构建含新冠病毒 S 蛋白（抗原）基因的重组腺病
毒表达载体的过程，箭头表示 NcoI、SphI、NheI、BamHI 的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表），请回
答下列问题：
限制酶 NcoI SphI NheI BamHI
识别序列和切割位点 C↓CATGG CCATG↓C G↓GATCC G↓CTAGC
第 20页/共 22页（1）新冠病毒是 RNA 病毒，一般先通过逆转录得到________，再经 PCR 技术获得大量的 S 蛋白基因，PCR
技术扩增 S 蛋白基因依据的原理是________。
（2）为保证 PCR 技术扩增 S 蛋白基因正常进行，该反应体系的主要成分除了有缓冲液、耐高温的 DNA 聚
合酶、模板 DNA，还包含________（要求答 2 点）。通过 PCR 扩增获取 S 蛋白基因时，组成一轮 PCR 循环
包括变性、复性、_______三个步骤，其中复性的作用________。
（3）构建基因表达载体除目的基因、标记基因、复制原点外，还必须含有________等。根据图表可知，重
组质粒时，需要选择的限制酶是________________________，理由是__________________。
（4）构建重组质粒需要使用 DNA 连接酶。下列属于 DNA 连接酶底物的是（单选）______。
【答案】（1） ①. cDNA ②. DNA 半保留复制（DNA 热变性）
（2） ①. 脱氧核苷酸（dNTP）、引物 ②. 延伸 ③. 使引物与模板链结合
（3） ①. 启动子和终止子（一个或多个限制酶切位点） ②. NcoⅠ和 NheⅠ ③. 这两种酶切割
后产生的末端分别与目的基因两端的黏性末端相同
（4）④
【解析】
【小问 1 详解】
新冠病毒的遗传物质是 RNA，由 RNA 得到 cDNA 的过程是逆转录过程；PCR 技术是根据体内 DNA 半保留
复制原理进行体外 DNA 复制的多聚酶链式反应，可用于扩增目的基因。
【小问 2 详解】
PCR 过程中，其反应体系的主要成分有模板 DNA、脱氧核苷酸、引物、耐高温的 DNA 聚合酶。一轮 PCR
三步：变性→复性→延伸，复性的作用：降温，使引物结合到单链 DNA 的互补序列上
【小问 3 详解】
完整的基因表达载体除目的基因、标记基因、复制原点外，还必须含有启动子（启动转录）和终止子（终
第 21页/共 22页止转录）。据图可知，S 蛋白基因分子的两端的碱基序列及黏性末端(GATC—、—GTAC)可知，NcoI 识别序
列和切割位点为 C↓CATGG，产生的黏性末端为 CATG—、—GTAC，SphI 识别序列和切割位点为 CCATG
↓C，产生的是—CATG，NheI 识别序列和切割位点为 G↓GATCC，产生的黏性末端为 GATC—、—CTAG，
BamHI 识别序列和切割位点为 G↓CTAGC，产生的黏性末端为 CTAG—、—GTAC，为使重组质粒构建过
程顺利进行，质粒切割后的末端应该分别与目的基因两端的黏性末端相同，即质粒应该产生—CTAG 和
CATG—黏性末端，因此需先使用限制酶 NcoⅠ和 NheⅠ。
【小问 4 详解】
）DNA 链中，5'端携带磷酸基团（P），3'端携带羟基（OH），DNA 双链反向平行，酶切断开后，切口的结
构为：上方 5'→3'链的断点处左为 3'OH、右为 5'P；下方 3'→5'链的断点处左为 5'P、右为 3'OH，符合该结
构的是④，DNA 连接酶催化连接 3'-OH 和 5'-P 形成磷酸二酯键，因此底物为④。
