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专题13 发酵工程（选择题60 道）
一、单选题
1．在一些传统食品的制作过程中，灭菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列说法正确的
是（ ）
A．葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后需用70%的酒精消毒
B．金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖
C．制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是避免外界杂菌的污染
D．泡菜腌制过程中，通常用加入抗生素的方法来抑制杂菌
【答案】B
【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁
殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧
呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬
酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
3、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行
旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋
酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、发酵瓶需要用70%的酒精消毒，葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后沥干即可，A 错误；
B、金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖，这是因为食盐的主要成分是NaCl，外界
环境盐浓度过高导致微生物细胞失水，B 正确；
C、制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是提供无氧环境，使得乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，C 错误；
D、制作泡菜时，泡菜水中含有乳酸菌、硝酸盐还原菌和其他杂菌。 乳酸菌可使蔬菜发酵，能有效控制发
酵过程，抑制其他菌类和微生物生长，它保存有大量维生素C、L-乳酸菌，使泡好的蔬菜中的营养易被人
体吸收利用。 盐浓度高以及酒精可抵制杂菌生长，防止泡菜发霉、变质，所以我们在泡菜水中要加盐和
白酒来抑制杂菌而非添加抗生素，D 错误。
故选B。
2．成都水井坊是我国最古老的酿酒遗址。其特色之一是在小麦、高粱中先后拌入糖曲和酒曲，发酵后进
行“量质摘酒”——以如图所示的生铁“天锅”把酒头摘出后，边摘边尝，优中选优。下列有关说法错误
的是（ ）
1
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A．小麦、高粱中含有的淀粉多糖为高分子化合物
B．“天锅”材料中只含金属元素
C．如图中“摘酒”操作是指通过蒸馏分离出乙醇溶液
D．通过“量质摘酒”可得到不同酒精度的酒
【答案】B
【分析】培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的
营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
【详解】A、淀粉是植物细胞内的主要储能物质，属于大分子，因此小麦、高粱中含有的淀粉多糖为高分
子化合物，A 正确；
B、生铁是含碳量大于2%的铁碳合金，工业生铁含碳量一般在2.11%--4.3%，并含C、Si、Mn、S、P 等元
素，因此生铁“天锅”不只含有金属元素，B 错误；
C、据图可知，含酒精的热气遇到盛冷水的天锅可冷凝形成酒精通过出酒口流入酒壶，因此图示中“摘
酒”操作是指通过蒸馏分离出乙醇溶液，C 正确；
D、所谓量质摘酒，是指从全部白酒的馏分中摘取其特优馏分的方法。不同的馏分，其微量成分的种类和
含量是不同的，酒的质量也不同。通过“量质摘酒”可得到不同酒精度的酒，D 正确。
故选B。
3．镇江香醋是一种通过固态发酵工艺制作的小曲醋，酿造的工业流程示意如下图所示。下列相关叙述正
确的是（ ）
A．冷却的目的是为酒精发酵提供适宜的温度环境
B．制醅过程中需添加琼脂等凝固剂形成固态发酵醅基
C．碳源不足且氧气充足时，醋酸菌可利用酒精进行发酵
D．醋酸发酵中经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况
【答案】C
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：
2
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（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2
6CO2+12H2O+能量；
（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6
2CO2+2C2H5OH+能量。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都
充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、根据图示，将糯米蒸熟后冷却是为了降低温度，防止杀死酒曲中的酵母菌，A 错误；
B、根据图示，制醅过程中需添加麸皮和糠以形成固态发酵醅基，B 错误；
C、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙
醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C 正确；
D、醋酸菌为好氧菌，固态分层醋酸发酵阶段需要对原料进行翻动，使其充分接触氧气，D 错误。
故选C。
4．豆豉是一种古老的传统发酵豆制品，北魏贾思勰的《齐民要术》中也有相关记录。豆豉制作的流程如
图所示。装坛后放在室外日晒，每天搅拌两次。下列说法错误的是（ ）
A．发酵过程中多种酶系将原料中的蛋白质、脂肪等分解为小分子
B．发酵的目的主要是让酵母菌产生酶，搅拌能增加发酵液的溶氧量
C．代谢产物积累和酿造环境的变化导致后期窖池微生物数量下降
D．添加的盐、白酒和风味料具有抑制杂菌生长和调节口味的作用
【答案】B
【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微
生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、发酵过程中多种酶系将原料中的蛋白质、脂肪等分解为小分子，如可将蛋白质分解为小分子
的肽和氨基酸，A 正确；
B、前期发酵的目的是让霉菌产生相应的酶，如蛋白酶可以将蛋白质分解为氨基酸，使豆豉营养更丰富，B
错误；
C、代谢产物积累和酿造环境的变化（pH 等变化）导致后期窖池微生物数量下降，C 正确；
D、调味过程中添加盐、白酒和调味料均可起到抑制杂菌生长的目的，如盐分可通过使微生物渗透失水死
亡而达到抑菌作用，D 正确。
故选B。
5．泡菜是一类历史悠久、深受大众喜爱的发酵蔬菜制品，大肠杆菌、酵母菌和乳酸菌参与泡菜的发酵过
程。发酵过程中，上述微生物此消彼长，发酵液的乳酸浓度升高，在乳酸浓度达到0.6%时泡菜口感达到最
佳。下表是泡菜发酵的三个阶段，下列叙述错误的是（ ）
发酵阶
现象
乳酸含量
3
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段
发酵前
期
大泡
<0.3%
发酵中
期
无泡
0.3%～0.9%
发酵后
期
无泡
大于0.9%、小于1.1%
A．盐水能促进植物细胞内容物的溶出，为微生物繁殖提供营养
B．发酵初期，大肠杆菌和酵母菌大量繁殖
C．发酵中期，乳酸菌替代大肠杆菌和酵母菌成为优势菌
D．发酵后期，乳酸菌产生大量乳酸，泡菜质量最佳
【答案】D
【分析】泡菜制作的菌种是乳酸菌，属于厌氧型细菌，在无氧条件下，将葡萄糖分解成乳酸；在泡菜制作
期间，由于乳酸菌的发酵作用，发酵产物——乳酸不断积累，因此可以根据微生物的活动情况和乳酸积累
量，将泡菜发酵过程分为三个阶段：发酵初期、发酵中期、发酵后期。
【详解】A、盐水能够提供高渗环境，能促进植物细胞内容物的溶出，同时可作为无机盐为微生物繁殖提
供营养，A 正确；
B、发酵初期，蔬菜刚入坛时，其表面带入的微生物中大肠杆菌和酵母菌等较为活跃，B 正确；
C、发酵中期，由于发酵初期乳酸菌的发酵作用，乳酸不断积累，pH 下降，大肠杆菌、酵母菌等的活动受
到抑制，乳酸菌替代大肠杆菌和酵母菌成为优势菌，C 正确；
D、发酵后期继续进行乳酸发酵，乳酸含量继续增加，此阶段泡菜酸度过高，风味已不协调，D 错误。
故选D。
6．用“麦汁酸化”法酿造的酸啤酒既有麦芽清香，又酸甜适口。它是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖
和其他糖类转化为醋酸和乳酸，再结合酒精发酵制作而成。下列说法错误的是（ ）
A．前期利用醋酸菌和乳酸菌在同一容器中同时进行醋酸和乳酸发酵
B．达到一定酸度的麦汁需经熬煮、冷却后才可接种抗酸性高的酵母菌
C．后期发酵产生酒精时，应将发酵温度控制在18～30℃范围内
D．酒精发酵时发酵罐内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕
【答案】A
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌
无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃。培养乳酸菌时，所用培养基还需要额
外添加维生素。
【详解】A、醋酸菌是好氧菌，在无氧条件下不能存活，而乳酸菌是厌氧菌，在有氧条件下不能存活，所
以醋酸菌与乳酸菌在同一容器中发酵时，不能同时产生醋酸和乳酸，A 错误；
4
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B、抗酸性高的酵母菌适应于酸性环境，所以达到一定酸度的麦汁需经熬煮、冷却后才可接种，B 正确；
C、酒精发酵需要酵母菌，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，所以后期发酵产生酒精时，应
将发酵温度控制在18～30℃范围内，C 正确；
D、发酵一定时间后，观察到发酵罐内液面不再有气泡产生，说明酒精发酵停止，即发酵基本完毕，D 正
确。
故选A。
7．酸笋是螺蛳粉的灵魂，腌酸笋季节在春季。当竹子出笋后，长出约30cm 高时便可砍下，剥去笋壳，切
成块或是切成笋丝、笋片，放于陶罐中，清水过面，撒上适量食盐，置于阴凉处一个月左右，酸味即出，
便可随食随取。下列相关叙述错误的是（ ）
A．制作酸笋所需菌种的代谢类型为异养需氧型
B．为保证发酵成功，不能将鲜笋和陶罐用沸水泡烫
C．“清水过面”是为了创造无氧环境，减少杂菌污染
D．在制作酸笋时若加入“陈酸笋水”可加速发酵进程
【答案】A
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、腌制过程中产酸的细菌主要是乳酸菌，利用的是乳酸菌的无氧呼吸，需要厌氧环境，其代谢
类型为异养厌氧型，A 错误；
B、鲜笋不能用沸水泡烫，因为制作酸笋的乳酸菌来自于鲜笋表面，将鲜笋用沸水泡烫会杀死乳酸菌，B
正确；
C、“清水过面”可以创造无氧环境，利于乳酸菌生存繁殖，同时减少杂菌污染，C 正确；
D、“陈酸笋水”含有乳酸菌，在制作酸笋时若加入“陈酸笋水”可加速发酵进程，D 正确。
故选A。
8．小曲白酒以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧
微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条
件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的
是（ ）
A．若发酵坛密封不严可能会导致酒变酸
B．蒸熟的原料立即加入糟醅后密封可高效进行酒精发酵
C．糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖
D．酿造白酒的过程也是微生物生长繁殖的过程
【答案】B
5
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【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，
大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母
菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸
性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行
旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋
酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、酿造过程中应在无氧条件下进行，若密封不严，会导致醋酸菌在有氧条件下发酵产生醋酸而
使酒变酸，A 正确；
B、蒸熟并摊晾的原料需要冷却后才可加入糟醅，不能马上密封，需要提供氧气先让糟醅中的好氧型霉菌
将原料中的淀粉糖化，以及让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，B 错误；
C、糖化过程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶将淀粉分解为葡萄糖，C 正确；
D、酿造白酒的过程也是酵母菌等微生物利用粮食中的物质进行生长繁殖的过程，D 正确。
故选B。
9．福建红曲酒闻名于世，红曲酒是用红曲霉菌发酵制成，生产流程如图。有关说法错误的是（ ）
A．糖化是指淀粉水解，为红曲霉菌提供发酵的底物
B．开耙有助于控制发酵温度和及时通气
C．煎酒会使酶失活，终止发酵活动，不利于红曲酒的储存
D．工业化生产红酒过程中要随时监测发酵液中的微生物数量和产物浓度
【答案】C
【分析】1、发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的
产物的过程。
2、直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一 次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物
进行发酵、制作食品的技术一般称为传统发酵技术。
【详解】A、米的主要成分是淀粉，糖化发酵过程是红曲霉菌分泌淀粉酶，使淀粉水解成葡萄糖的过程。
糖化过程产生的葡萄糖为红曲霉菌提供发酵的底物，A 正确；
B、据图可知，开耙是指米饭搅拌，搅拌时可以散热，可使米饭充分接触气体，也可以使菌种与米饭充分
接触，有助于控制发酵温度和及时通气，使发酵充分进行，B 正确 ；
C、煎酒所使用的温度为85℃，该温度下酶会失活，发酵活动终止，有利于红曲酒的储存，C 错误；
D、工业化生产红酒过程中要随时监测发酵液中的微生物数量和产物浓度，以判断发酵进程，D 正确。
6
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故选C。
10．王村醋属于“山东省非物质文化遗产”，它以小米为主要原料， 经酵母菌、醋酸菌等微生物发酵而
成。明嘉靖二十五年王村就有“春分酿酒拌醋”之说，有经验的酿醋师可通过附耳听瓮判断发酵的程度。
王村醋传统酿造工艺如下表，下列说法错误的是（ ）
步骤
操作过程
①糊茬
将浸泡好的小米放入锅内， 温火煮米， 米煮到开花， 成黏糊状即可。
②大曲酒酵
将煮好的米摊开散热， 待温凉至38℃时加曲抖匀放入缸内发酵。
③汾醋
将发酵好的醪液拌谷糠倒入瓮内自然发酵，进入七天的发酵阶段。
④抄缸
用手抄醅， 有利于醋醅的空气流通， 该发酵过程需要两个月。
⑤拨缸
从一个缸内倒入另一个缸内，使发酵彻底。
⑥存醅
为保证小米醋的口感，用油布盖住并用泥密封， 存醅三个月。
A．“春分酿酒拌醋”说明温度影响醋酸发酵B．“听瓮”是通过醋酸菌产生CO₂ 的状况推测发酵程
度
C．拌曲时温度过高可导致曲中的微生物死亡D．若不“手抄醅”，则醋酸菌的呼吸强度下降
【答案】B
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，
大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母
菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~25℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸
性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行
旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋
酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
【详解】A、“春分酿酒拌醋”说明温度影响醋酸发酵，A 正确；
B、“听瓮”是通过缸内细微的气泡声， 判断酒曲发酵的程度，B 错误；
C、拌曲时将煮好的米摊开散热， 待温凉至38℃时加曲抖匀，是因为温度过高可导致曲中的微生物死亡，
C 正确；
D、醋酸菌是好氧菌，用手抄醅， 有利于醋醅的空气流通，若不“手抄醅”，则醋酸菌的呼吸强度下降，
D 正确。
故选B。
11．某同学制作果酒果醋的步骤如下：①将发酵瓶等清洗干净后用酒精消毒；②清洗葡萄并榨汁装入发酵
瓶；③将温度控制在18~30℃发酵12d；④打开瓶盖，盖上一层纱布再发酵8d。下列说法错误的是（ ）
A．①可杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
B．②葡萄需先用清水冲洗后去枝梗，避免杂菌污染
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C．③每隔一段时间拧松瓶盖一次，及时放气
D．④需要调高温度至30~35℃，该过程几乎不产生气体
【答案】A
【分析】1、果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：
（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。
（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。
（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约13 的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温
度严格控制在18°C～30°C，时间控制在10～12d 左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。③
制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30°C～35°C，时间控制在前7～8d 左右，并注意适时通过充气口充
气。
【详解】A、①过程将发酵瓶等清洗干净后用酒精消毒，防止污染，但不能杀死物体内外所有的微生物，A
错误；
B、材料处理时选用新鲜葡萄先用清水冲洗1-2 次，再除去枝梗和腐烂的籽粒，避免杂菌污染，B 正确；
C、将温度控制在18°C～25°C 进行果酒发酵，并需适时拧松瓶盖放气，C 正确；
D、果醋发酵菌种是醋酸菌，为好氧型细菌，最适温度为30~35℃，④需要调高温度至30~35℃，该过程几
乎不产生气体，D 正确。
故选A。
12．米酒旧时称酒酿，其现代工艺流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．蒸米有利于根霉分解糯米中的有机物，淋冷防止杀死根霉
B．加酵母曲后应先通入一段时间无菌空气，再进行无氧发酵
C．发酵结束后对发酵液进行灭菌可延长米酒的保存期
D．若酿制的米酒有酸味，应与长期封闭酿酒容器有关
【答案】D
【分析】发酵技术是指利用微生物的发酵作用，运用一些技术手段控制发酵过程，大规模的生产发酵产品
的技术。微生物的发酵技术在食品、药品的制作中具有重要意义，制酒要用到酵母菌。
【详解】A、将米煮熟可以杀死米中绝大多数杂菌，淋冷防止杀死根霉，有利于后续根霉曲的繁殖，促进
其分解糯米中的有机物，A 正确；
B、加酵母曲后应先通入一段时间无菌空气，促进酵母菌有氧呼吸，进行大量繁殖，再进行无氧发酵，B
8
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正确；
C、发酵结束后保存米酒，米酒过程中可能还保留部分杂菌，需要对发酵液进行灭菌可延长米酒的保存期，
C 正确；
D、若酿制的米酒有酸味，可能是酿酒容器漏气有氧气进入，促使醋酸杆菌进行醋酸发酵，D 错误。
故选D。
13．酒的酿造在我国有悠久的历史，早在唐朝就有“踏浆发酵酿酒法”，即碾碎葡萄用葡萄汁发酵。下列
叙述错误的是（ ）
A．果酒发酵瓶可用体积分数为70%的酒精消毒
B．酿酒酵母的最适生长温度约为20℃，发酵过程可保持该温度
C．“踏浆”可以使葡萄皮表面的天然酵母菌进行葡萄汁发酵
D．可用酸性重铬酸钾溶液来检测发酵过程中是否生成了酒精
【答案】B
【分析】1、果酒制作过程中的相关实验操作：(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄
进行冲洗，除去枝梗；(2)灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干；②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精
消毒；(3)榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁；(4)发酵：将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约
1/3 的空间，并封闭充气口；
2、制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃~25℃，时间控制在10~12d 左右，可通过出料口对发酵的
情况进行及时的监测。
【详解】A、发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒，A 正确；
B、酿酒酵母生长最适温度约为28℃，发酵过程可保持该温度，B 错误；
C、“踏浆”发酵即碾碎葡萄，有利于酵母菌与葡萄汁液充分混合，充分发酵，C 正确；
D、可用酸性重铬酸钾来检验是否有酒精产生，若溶液颜色由橙色变成灰绿色，则可证明有酒精产生，D
正确。
故选B。
14．某兴趣小组利用石榴为原料制备石榴酒和石榴醋，其简要流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．操作中对石榴破碎、榨汁的主要目的是增加原料与酵母菌的接触面积，提高发酵效率
B．调整成分中需加入一定量的蔗糖，其主要作用是为酵母菌提供充足糖源，增加酒精含量
C．石榴酒发酵中需始终打开实验装置充气口并将温度控制在18～30℃
D．用制备的石榴酒发酵制取石榴醋，需加入醋酸菌并适当提高发酵温度和充入足量O2。
【答案】C
9
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【分析】1、果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是异养兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～
30℃、前期需氧，后期不需氧；
2、果醋制作菌种是醋酸菌，属于原核细胞，适宜温度为30～35℃，需要持续通入氧气。
【详解】A、操作中对石榴破碎、榨汁的主要目的是增加原料与酵母菌的接触面积，提高原料的利用率，
因而可提高发酵效率，A 正确；
B、调整成分中需加入一定量的蔗糖，其主要作用是为酵母菌提供充足糖源，有利于酵母菌的生长，同时
也能增加酒精含量，B 正确；
C、石榴酒发酵中需关闭实验装置充气口，制造无氧环境，并将温度控制在18~30℃，C 错误；
D、利用制备的石榴酒发酵制取石榴醋，利用的微生物为醋酸菌，相对于石榴酒发酵，因为醋酸菌是需氧
型且生长需要较高的温度，因此，需要改变的发酵条件为适当提高发酵温度和充入足量О2，D 正确。
故选C。
15．下图为传统白酒酿造工艺流程，相关叙述正确的是（ ）
A．制成的酒曲中的多种微生物参与了糖化和发酵过程
B．糖化时采用的温度越高，淀粉水解的速度越快
C．密坛发酵温度控制在30~35℃，每隔12 小时需将坛盖拧松排气
D．制成的白酒需经湿热灭菌后并窖藏一段时间后才可饮用
【答案】A
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理是酵
母菌利用葡萄糖在无氧条件下产生酒精。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都
充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、糖化主要是利用酒曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖，参与酒制作的微生物有多种但起
主要作用的是酵母菌，A 正确；
B、温度高，蛋白质会发生变性，会使酶失去催化作用，所以温度太高，淀粉水解速度会变慢，B 错误；
C、液态酒精发酵阶段的温度应控制在18~30℃，由于酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，故每隔12 小
时需将坛盖拧松进行排气，C 错误；
D、传统酿造的白酒不需经湿热灭菌，D 错误。
故选A。
16．在酒的酿造过程中，除酿酒酵母外还有非酿酒酵母的参与，其中非酿酒酵母发酵能力弱，乙醇耐受力
差，难以充当酒精发酵的主要菌株，但其代谢产物及分泌的酶类能促进酿酒酵母降解葡萄糖等发酵底物，
产生醛、酯、酸等芳香化合物，对最终酒产品的风味产生积极影响。关于传统发酵制作果酒的过程中，下
列说法正确的是（ ）
A．制作果酒时，发酵温度应控制在30-35℃之间
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B．发酵瓶中只含有酿酒酵母和非酿酒酵母两种微生物
C．制作葡萄酒时，酿酒酵母和非酿酒酵母都主要来源于葡萄的果皮
D．发酵一段时间后，非酿酒酵母的数量逐渐下降，酿酒酵母的数量不断上升
【答案】C
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发
酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生
酵母菌。
【详解】A、果酒发酵时温度宜控制在18-25℃，A 错误；
B、果酒发酵的微生物是附着在葡萄皮上的野生酵母菌，故发酵瓶中除了含有酿酒酵母和非酿酒酵母两种
微生物，还有其他的微生物，B 错误；
C、制作葡萄酒时，酿酒酵母和非酿酒酵母都主要来源于葡萄的果皮，C 正确；
D、发酵一段时间后，由于非酿酒酵母乙醇耐受力差，故其数量逐渐下降，酿酒酵母的数量先上升，最后
因为营养物质不足和有害产物的积累，数量也会下降，D 错误。
故选C。
17．河南特色小吃“甜酒浮子”的主要制作流程：用温开水把甜酒曲化开→加入白米饭中拌匀压实，在中
间挖个坑，盖上盖子→置于温度适宜的地方1～2 天。下列有关叙述错误的是（ ）
A．制作“甜酒浮子”所用的酵母菌来自空气中
B．白米饭可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养
C．“中间挖个坑”的操作有利于酵母菌快速生长繁殖
D．将温度维持在18~30℃有利于“甜酒浮子”的制作
【答案】A
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、制作“甜酒浮子”所用的酵母菌来甜酒曲中的菌种，A 错误；
B、白米饭营养丰富，可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养，B 正确；
C、“中间挖个坑”可多存储一些空气，有利于酵母菌先进行有氧呼吸并增殖，C 正确；
D、发酵需要适宜的温度在25℃左右，则将温度维持在18~30℃有利于“甜酒浮子”的制作，D 正确。
故选A。
18．培养基是按照微生物、植物和动物组织对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下
列叙述正确的是（ ）
A．配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁
B．基本培养基中可能不含有氮源，但一定含有碳源
C．脱分化培养基中含有蔗糖、无机盐和植物激素等营养物质
D．传代培养杂交瘤细胞时，培养基中需加胶原蛋白酶以分散细胞
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【答案】C
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性
质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养
物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
【详解】A、为了防止杂菌污染，在配制配制马铃薯琼脂培养基时，要在酒精灯火焰旁操作，A 错误；
B、基本培养基可能不含有氮源，如培养固氮菌的培养基，也可能不含有碳源，如培养自养微生物的培养
基，B 错误；
C、脱分化是指失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞的过程，脱分化培养基中含有蔗糖、无机
盐和植物激素等营养物质，C 正确；
D、因为杂交瘤细胞没有接触抑制现象，所以传代培养杂交瘤细胞时，培养基中不需加胶原蛋白酶以分散
细胞，D 错误。
故选C。
19．从自然界筛选嗜盐菌（好氧型）的一般步骤：采集菌样→富集培养→纯种分离→计数及性能测定。图
1 示上述步骤中的一个环节，图2 示该筛选过程中一个培养基上菌落的分布情况，其中白色部分为透明圈，
黑点代表大小不同的菌落。下列相关叙述正确的是（ ）
A．富集培养必须在固体培养基中进行
B．图1 所示的接种方法也适合用于对细菌进行计数
C．图2 中嗜盐菌的耐盐性能最强的是乙
D．图1 和图2 所示的培养基分别为选择培养基和鉴别培养基
【答案】C
【分析】筛选目的菌株一般是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。常用的接种方法
是稀释涂布平板法和平板划线法。培养基在配制时，各种成分在溶化后分装前必须进行pH 调整，接种前
要进行灭菌，保证无菌操作，培养微生物时，应将培养皿倒置。
【详解】A、富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增
加，从而分离出所需微生物的培养方法，一般在液体培养基中进行，A 错误；
B、图1 所示的接种方法是平板划线法，该方法不适合对细菌进行计数，B 错误；
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C、图2 中的乙菌落中的透明圈最大，说明该菌落嗜盐菌的耐盐性能最强，C 正确；
D、图1 和图2 所示的培养基都是选择培养基，D 错误。
故选C。
20．某种物质A（一种含有C、H、N 的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A．
研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A 的细菌菌株。图中③将M 中的菌液稀释一定倍
数后，取0．1mL 涂布到平板上，初步估测摇瓶M 中1mL 菌液中细菌数为2．4x108个。相关叙述正确的
是（ ）
A．实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B．乙中需要加琼脂和物质A 等，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照
C．③接种方法为稀释涂布平板法，涂布时用涂布器蘸取菌液均匀涂布于平板上
D．若乙平板上菌落数平均为240 个，则接种的菌液的稀释倍数为105
【答案】D
【分析】分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以A 为
唯一碳源和氮源的选择培养基上，④为挑取单菌落接种，⑤在以A 为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一
步筛选出高效降解A 的菌株。
【详解】A、实验时，要从淤泥中分离得到能高效降解A 的细菌菌株，则图①为淤泥取样进行稀释，可以
取淤泥加无菌水制成菌悬液，淤泥中有菌种，因此不能进行灭菌处理；盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸
汽灭菌法进行灭菌，A 错误；
B、识图分析可知，③是稀释涂布平板法接种到以A 为唯一碳源和氮源的选择培养基上，因此乙为固体培
养基，需要加琼脂和物质A 等，为了提高准确度，实验需设平行重复实验，且需要另外设置空白对照，检
测培养基配制是否合格，B 错误；
C、③接种方法为稀释涂布平板法，接种工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，应该将菌液用微量
移液管加入到培养基中，用涂布器进行均匀涂抹，C 错误；
D、若乙平板上长出的菌落数平均为240 个，假设稀释倍数为a，根据摇瓶M 中1mL 菌液中细菌数为
2.4×108 个，在每个平板上涂布0.1mL 稀释后的菌液，则有240×a÷0.1=2.4×108，则稀释倍数a=105，D 正
确。
故选D。
21．某研究小组设计了一个利用秸秆中的纤维素生产乙醇的实验，实验流程如图所示。下列叙述错误的是
（ ）
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A．菌A 属于腐生生物，能分泌纤维素酶分解秸秆中的纤维素
B．淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供碳源和能源等
C．在发酵阶段不能打开瓶盖以保持厌氧环境完成酒精的生成
D．发酵结束后可通过过滤、沉淀等方法获得乙醇
【答案】D
【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖类分解成二氧
化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，产生酒精和CO2。发酵结束后，如果发酵产品是微生
物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法获得产品；如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、
分离和纯化措施来获得产品。
【详解】A、从已死的，腐烂的生物体中获得营养的生物为腐生生物，秸秆中有大量的纤维素，接种菌
A，能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，培养一段时间后发现菌A 能够将桔杆中
的纤维素大量分解，菌A 属于腐生生物，A 正确；
B、采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供
碳源、能源等，B 正确；
C、在酒精发酵过程中要保持无氧环境，不能打开瓶盖，C 正确；
D、发酵结束后，乙醇属于代谢产物，可以采用适当的提取、分离和纯化措施来获得乙醇，不能采取过滤、
沉淀的方法，D 错误。
故选D。
22．若棒状杆菌中缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，则称之为精
氨酸依赖型菌。野生型棒状杆菌经诱变、筛选获得精氨酸依赖型菌的过程如图所示，过程①将紫外线照射
处理过的菌液接种在甲培养基上，待培养至菌落不再增加时，将甲培养基中的菌落转移到乙培养基中继续
培养得到如图所示的结果。下列相关叙述正确的是（ ）
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A．与甲培养基成分相比，乙培养基成分中可能缺少了鸟氨酸
B．若乙培养基中未出现菌株，则说明紫外线照射未引起基因突变
C．从甲培养基中选出的B 菌株，可直接利用精氨酸进行发酵
D．紫外线照射还可以导致谷氨酸棒状杆菌发生染色体结构变异
【答案】C
【分析】题图分析，图中①表示将紫外线照射处理的菌液接种在含精氨酸的培养基上，②表示继续培养在
缺乏精氨酸的培养基上，图甲中有A、B 两种菌落，图乙中只有A 菌落，因此甲中A 表示野生型谷氨酸棒
状杆菌，B 为精氨酸依赖型菌株。
【详解】A、根据题意可知，A 为野生型谷氨酸棒状杆菌，B 为精氨酸依赖型菌株，而乙培养基上没有B
菌落，据此推测乙培养基与甲相比缺少了精氨酸，A 错误；
B、若乙培养基中未出现菌株，则说明紫外线照射引起基因突变，导致依赖型突变无法生长，B 错误；
C、从甲培养基中选出的B 菌株，在乙培养基上无法生长，说明B 菌株为精氨酸依赖型，因而可直接利用
精氨酸进行发酵，C 正确；
D、紫外线照射不会导致谷氨酸棒状杆菌发生染色体结构变异，因为谷氨酸棒状杆菌没有染色体，D 错误。
故选C。
23．工业污水中含有的多环芳烃类化合物（仅含C、H 元素）会造成农田土壤污染。研究人员按照如图所
示的流程从受污染的农田土壤中分离得到能高效降解多环芳烃类化合物的细菌菌株。下列叙述错误的是（
）
A．甲、乙培养基中应以多环芳烃类化合物为唯一碳源
B．步骤①接种操作需要在酒精灯火焰附近进行
C．步骤②中应用涂布器从甲中蘸取菌液均匀涂布于培养基乙表面
D．步骤③中应从降解圈直径与菌落直径比值最大的菌落进行挑选
【答案】C
【分析】图示表示科研人员从被多环芳烃类化合物污染的土壤中分离出高效降解多环芳烃类化合物的菌株
的主要步骤。培养基甲和乙中加入多环芳烃类化合物作为唯一碳源，其目的是筛选出高效降解多环芳烃类
化合物的菌株。
【详解】A、该研究的目的是从被多环芳烃类化合物污染的土壤中分离出高效降解多环芳烃类化合物的菌
株，所以甲、乙培养基中应以多环芳烃类化合物为唯一碳源，A 正确；
B、为了能筛选出高效降解多环芳烃类化合物的菌株、防止杂菌污染，在进行步骤①培养的接种操作时，
需要在酒精灯火焰附近进行，B 正确；
C、步骤②是采用稀释涂布平板法接种并分离高效降解多环芳烃类化合物的菌株（目的菌），应先用微量
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移液器从甲中取0.1mL 菌液滴加到培养基乙的表面，再用涂布器将菌液均匀涂布于培养基乙的表面，C 错
误；
D、透明圈直径与菌落直径比值越大，说明目的菌降解多环芳烃类化合物的效果越好，因此步骤③应从降
解圈直径与菌落直径比值最大的菌落进行挑选菌株并培养，D 正确。
故选C。
24．儿茶素（C）具弱抗菌性，研究人员用药物M 与儿茶素形成配合物M—C，以增强其抗菌效果。为确
定配合物M—C 的最佳组分配比，用不同组分配比的配合物M—C 处理滤纸片，置于布满菌落的培养基中，
结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
编号
M-C 的组分配比
1
1：1
2
1：2
3
1：3
4
1：4
5
1：5
A．该实验可利用涂布平板法将菌种接种到培养基上
B．该实验自变量是M—C 的组分配比，因变量为抑菌圈的大小
C．该实验中应将配制好的培养基倒入平板后高压蒸汽灭菌
D．该实验结果表明不同M—C 组分配比的配合物抑菌效果不同
【答案】C
【分析】稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单
个菌落。
【详解】A、利用涂布平板法将菌种接种到培养基上，菌落均匀分布，利于后续实验，A 正确；
B、据表可知，本实验的自变量是M-C 的组分配比，因变量为抑菌圈的大小，B 正确；
C、应将配制好的培养基高压蒸汽灭菌后再倒平板，C 错误；
D、不同M-C 组分配比的抑菌圈大小不一样，表明配合物中不同M-C 组分配比抑菌效果不同，D 正确。
故选C。
25．研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A 与B 的培养基中（“+”代表含抗生素，“+”的
多少代表抗生素浓度，“-”代表不含抗生素），对两种抗生素的药性进行分析。在37℃环境下培养24 小时
后，细菌生长情况如图。下列叙述正确的是（ ）
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A．科学家利用厌氧发酵技术使抗生素中青霉素的生产实现了产业化
B．与单独使用抗生素A 相比，联合使用抗生素B 的抑菌作用更强
C．为排除杂菌的影响，倒平板前可对培养基采用煮沸灭菌或者高压蒸汽灭菌
D．该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培养
【答案】D
【分析】微生物培养需要用到培养基，根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物的
培养的关键是无菌操作，需要对操作环境和操作者进行消毒，同时如果培养基、接种工具、培养器具不能
彻底灭菌，培养过程中被杂菌污染都会导致微生物的培养失败。
【详解】A、由于青霉素产生菌是需氧型的，科学家在厌氧发酵技术的基础上，建立了深层通气液体发酵
技术，使青霉素的生产实现了产业化，A 错误；
B、根据图中平板上菌落的分布可知，与单独使用抗生素A 相比，联合使用抗生素B 不能增强对结核杆菌
的抑制作用，B 错误。
C、为排除杂菌的影响，应该用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，然后冷却到50℃左右倒平板，C 错误；
D、如图，菌落分布均匀，是利用了稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培养，D 正
确。
故选D。
26．一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。为探究某种抗生素对细
菌的选择作用，实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗
生素的圆形滤纸片，一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径。从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌富集培养，
然后重复上述步骤培养三代，结果如下表所示。下列有关叙述错误的是（ ）
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培养代数
平板各区域滤纸片周围抑菌圈的直径/cm
①号区域
②号区域
③号区域
④号区域
第一代
0
2.27
2.13
2.27
第二代
0
1.95
2.02
1.87
第三代
0
1.80
1.87
1.78
A．一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异
B．需要用特定的方法将金黄色葡萄球菌接种到固体培养基上
C．平板中①号区域的滤纸片不含抗生素，起空白对照的作用
D．随培养代数增多，抑菌圈的直径越小，说明细菌的耐药性越强
【答案】A
【分析】1、抗生素是指由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具
有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。抗生素的抑菌或
杀菌作用，主要是针对“细菌有而人（或其他动植物）没有”的机制进行杀伤，包含四大作用机理，即：
抑制细菌细胞壁合成、增强细菌细胞膜通透性、干扰细菌蛋白质合成、抑制细菌核酸复制转录。
2、实验原理：若病原菌对各种抗生素敏感，在该抗生素纸片周围会出现透明圈，透明圈越大，说明病原
菌对抗生素越敏感，若病原菌对各种抗生素不敏感，则不会出现透明圈。根据题干信息实验人员在接种了
金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，故抑菌圈直径
越大说明耐药性弱，抑菌圈直径越小，细菌耐药性越强。
【详解】A、细菌耐药性的变异是在使用抗生素之前就已存在，一定浓度的抗生素起选择作用，能够筛选
出具有耐药性的细菌，A 错误；
B、稀释涂布平板法可以获得的单个菌落且便于计数，故需要用特定的方法将金黄色葡萄球菌接种到固体
培养基上，B 正确；
C、为排除滤纸片对实验结果的影响，应增设空白对照组，即增加不含抗生素的滤纸片或含无菌水的滤纸
片作为对照组；平板①号区域的滤纸片不含抗生素，起空白对照的作用，C 正确；
D、根据题干信息实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含
抗生素的圆形滤纸片，故抑菌圈直径越小，说明细菌的耐药性越强，题表可知随培养代数增多，抑菌圈的
直径越小，说明细菌的耐药性越强，D 正确。
故选A。
27．清酒乳杆菌是臭鳜鱼中的优势乳酸菌，科研人员尝试从臭鳜鱼中分离优质的清酒乳杆菌，实验流程如
图①～⑤所示。图中MRS 培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙
（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH 显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂。
下列叙述错误的是（ ）
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A．制作上述平板时培养基中要加入血清，细胞才能正常生长
B．步骤③将菌悬液稀释了1000 倍，④应进行厌氧培养
C．为清酒乳杆菌提供氮源的主要是胰蛋白胨和牛肉膏
D．步骤④应挑取平板上呈黄色、有溶钙圈的菌落进行重复划线培养
【答案】A
【分析】平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作
多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。
【详解】A、图中实验的目的是分离清酒乳杆菌，是原核生物，无需加入血清，血清是动物细胞培养时需
要加入的物质，A 错误；
B、步骤③将1mL 菌悬液加入9mL 无菌生理盐水，稀释10 倍，又取1mL 菌液加入9mL 无菌生理盐水，稀
释100 倍，再取1mL 加入第3 支试管，稀释了1000 倍，乳杆菌进行严格的厌氧呼吸，因此④应进行厌氧
培养，B 正确；
C、氮源是为生物生长提供氮元素的物质，为清酒乳杆菌提供氮源的主要是胰蛋白胨和牛肉膏，C 正确；
D、乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈，乳酸呈酸性，使菌落呈黄色，步骤④应挑取平板上呈黄色、有溶钙
圈的菌落进行重复划线培养，D 正确。
故选A。
28．丙草胺（C17H26ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小
组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如下图所示），以期为修复污染土
壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（ ）
A．该实验中土样稀释了10 倍
B．利用该方法计数结果往往比活菌的实际数目偏小
C．配制以丙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可以分离出降解菌
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D．5 号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1．7×109个
【答案】A
【分析】1、微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，
接种，划线，在恒温箱里培养，在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐
减少，最后可能形成单个菌落。 （2） 稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在
培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或
阳止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
【详解】A、由图可知共稀释了106 倍，A 错误；
B、图示采用的计数方法是稀释涂布平板法，由于两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到一个菌落，
因此用该方法计数结果往往比活菌的实际数目偏小，B 正确；
C、乙草胺可提供碳源、氮源，配制以乙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可提高降解菌的浓度，C
正确；
D、由图可知共稀释了106 倍，则5 号试管的结果表明每ml 土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3
0.1×109=1.7×109 个，D 正确。
故选A。
29．木质纤维素可被酶水解为葡萄糖和木糖。汉逊酵母是一种耐高温的微生物，可利用木糖合成乙醇等物
质，但葡萄糖会抑制野生型汉逊酵母利用木糖，进而限制了该酵母利用木质纤维素水解液的能力。下列说
法正确的是（ ）
A．纤维素水解液可作为汉逊酵母培养基中的碳源和氮源
B．汉逊酵母耐高温的特性使其发酵过程的温控成本增加
C．由于乙醇可杀菌，故利用汉逊酵母生产乙醇时无需严格灭菌
D．改造汉逊酵母使之能利用葡萄糖，可提高纤维素水解液的利用率
【答案】D
【分析】木质纤维素可被酶水解为葡萄糖和木糖，含有碳、氢、氧元素，可作为碳源。
【详解】A、纤维素水解液中含有葡萄糖和木糖，可作为汉逊酵母培养基中的碳源，但不能作为氮源，A
错误；
B、汉逊酵母耐高温的特性使其发酵过程的温控成本降低，B 错误；
C、利用汉逊酵母生产乙醇时需严格灭菌，C 错误；
D、改造汉逊酵母使之能利用葡萄糖，可提高纤维素水解液的利用，D 正确。
故选D。
30．一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除
草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌。下列说法错误的（ ）
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A．分离目的菌所用的培养基应该是添加该除草剂的无氮固体培养基
B．步骤C 第1 次划线前、第5 次划线后都要对接种环进行灼烧灭菌
C．将未接种的平板在相同条件下培养，可以判断培养基是否灭菌合格
D．步骤D 的两种菌落氮源相同，应该选择透明圈大的菌落进行扩大培养
【答案】D
【分析】题图分析：该实验是从土壤中筛选分离能降解除草剂的微生物的过程。这样的实验要将土壤稀释
处理，以除草剂为唯一的氮源进行处理筛选土壤微生物，以菌落计数法进行统计计数。
【详解】A、由图可知，该过程用的是固体选择培养基，所用培养基应以该除草剂为唯一氮源，A 正确；
B、平板划线法第一次划线前和最后一次划线后都要对接种环进行灼烧灭菌，B 正确；
C、将未接种的平板在相同条件下培养，可以判断培养基是否灭菌合格，C 正确；
D、无透明圈的菌落以空气中的氮气作为氮源，有透明圈的菌落以该除草剂作为氮源，两者氮源不同，应
该选择透明圈半径与菌落半径比值大的菌落进行扩大培养，D 错误。
故选D。
31．瘤胃是牛、羊等反刍动物具有的特殊的器官，其中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡。已知刚
果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员对
瘤胃中的纤维素分解菌进行了分离、鉴定，过程如下图所示。下列有关说法正确的是（ ）
A．实验时，盛有水或者培养基的摇瓶通常采用巴氏消毒法进行除菌处理
B．为分离出纤维素分解菌，甲、乙、丙培养基应以纤维素为唯一营养成分
C．通过向乙和丁培养基中加入刚果红，可对纤维素分解菌进行鉴定和计数
D．在甲、乙、丙、丁的培养基表面加入一层无菌石蜡能有效获得目标菌落
【答案】D
【分析】牛、羊等反刍动物具有特殊的瘤胃，在瘤胃中生活着多种厌氧微生物，其中许多微生物能分解纤
维素。在筛选和分离降解纤维素的微生物时，确保能够分离得到目的微生物，一般先将样液进行选择培养，
以增大样液中目的微生物的数量。然后用固体培养基培养，分离得到单个菌落。刚果红是一种染色剂，可
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与纤维素等多糖形成红色复合物。如果培养基中唯一的碳源纤维素被降解了，那么菌落周边就会出现没有
红色的透明圈。且透明圈越大，说明微生物降解纤维素的能力越强。
【详解】A、实验时，盛有水或者培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行除菌处理，A 错误 ；
B、为分离出纤维素分解菌，甲、乙、丙培养基应以纤维素为唯一碳源，还需要添加氮源等营养成分，B
错误；
C、由图可知，将菌液接种到乙上所用的方法是平板划线法，不能用于计数，C 错误；
D、牛、羊等反刍动物具有特殊的瘤胃，在瘤胃中生活着多种厌氧微生物，在甲、乙、丙、丁的培养基表
面加入一层无菌石蜡能有效获得目标菌落，D 正确。
故选D。
32．以纤维素为唯一碳源并加入刚果红的固体培养基经接种后，若微生物能分解纤维素，则会出现以菌落
为中心的透明圈（如图）。下列叙述正确的是（ ）
A．在制备固体培养基时需要先进行高压蒸汽灭菌，再对pH 进行调节
B．接种后的培养基应置于无菌培养箱中，无须进行倒置培养
C．透明圈直径/菌落直径的比值越大，表明微生物的分解能力越强
D．图中所示方法进行微生物计数，结果往往偏大
【答案】C
【分析】在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合
物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。
【详解】A、配制培养基时，需要先调节pH，后进行高压蒸汽灭菌处理，A 错误；
B、为防止冷凝水落入培养基造成污染，接种后的培养基乙需要倒置于无菌培养箱中进行培养，B 错误；
C、在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不
能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，透明圈直径/菌落直径的比值越大，表明微生物
的分解能力越强，C 正确；
D、由于图中菌落可能是由2 个或多个细胞发育而来的，进行微生物计数时，常以一个菌落认为是1 个细
胞发育而来的，所以结果往往偏小，D 错误。
故选C。
33．聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废
弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA 的菌种，流程
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图如下。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤②可用稀释涂布平板法或平板划线法接种
B．步骤③培养时为防止皿盖上的冷凝水滴落一般需要倒置培养皿
C．步骤④扩大培养时需要用液体培养基并振荡培养
D．步骤⑤用细菌计数板计数结果一般小于稀释涂布平板法计数结果
【答案】D
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划
线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后
可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培
养后可形成单个菌落。
【详解】A、采用平板划线法或稀释涂布平板法，能将单个微生物分散在固体培养基上。之后经培养得到
的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，所以步骤②可用稀释涂布平板法或平板划线法接种，
A 正确；
B、步骤③培养时为防止皿盖上的冷凝水滴落一般需要倒置培养皿，B 正确；
C、步骤④扩大培养时需要用液体培养基，振荡培养有利于增加培养基中的溶解氧，并使菌体与培养基充
分接触利用培养基，C 正确；
D、稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平
板上观察到的只是一个菌落。用细菌计数板计数时，计数结果一般是死菌数和活菌数的总和，因此会比实
际值偏大，D 错误。
故选D。
34．橙汁生产过程中感染脂环酸芽孢杆菌，品质会受到影响。为优化橙汁生产的质量监控工艺，技术人员
设计了如下流程，开展脂环酸芽孢杆菌的筛选和鉴定。下列相关说法正确的是（ ）
A．步骤①应取自果园的深层土壤来制备土壤稀释液
B．步骤②制备土壤稀释液振荡20min 的目的是让培养液与微生物充分接触
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C．步骤③最终将土壤悬浮液稀释了1000 倍
D．步骤④所示菌落数作为平均数可知果园土壤的目的菌数约为6×103个/mL
【答案】C
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划
线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后
可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培
养后可形成单个菌落。
【详解】A、由于土壤表层富含有机质，适宜于微生物生长，故步骤①土壤取样应取自表层土壤，A 错误；
B、为使土壤中的微生物能够充分释放到无菌水中，步骤②制备土壤稀释液需充分振荡20min，B 错误；
C、由图观察可知，步骤③中的稀释梯度分别为10、100、1000 倍，即最终将土壤悬浮液稀释了1000 倍，
C 正确；
D、微生物统计应在菌落数30-300 之间的，统计数据图可知，图中④菌落数不在此范围，无法计算，D 错
误。
故选C。
35．如图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱
油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法正确的是（ ）
A．大豆、小麦都要蒸煮的目的是为了杀死种子胚
B．发酵罐发酵需要将罐内的pH 控制在中性或弱碱性条件下
C．发酵罐发酵类型为有氧发酵，而发酵池发酵为无氧发酵
D．发酵过程中的反应均发生在胞内
【答案】C
【分析】在提供主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2 的需
求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；
在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
【详解】A、大豆、小麦和麦麸等原料中含有蛋白质、糖类和脂肪等营养物质，相当于培养基，在制作酱
油时需要经蒸煮和适当配比处理，其目的是灭菌和调整营养配比从而满足微生物对营养物质的需求，A 错
误；
B、发酵罐发酵需要黄曲霉菌，培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性，B 错误；
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C、发酵罐发酵主要是米曲霉起作用，类型为有氧发酵，而发酵池发酵是乳酸菌和酵母菌起作用，为无氧
发酵，C 正确；
D、发酵罐内发酵的过程中大分子降解的反应发生在胞外，D 错误。
故选C。
36．产油脂酶酵母可用于处理含油废水。为筛选产油脂酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究，流程如下
图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．①过程为富集培养，可增加产油脂酶酵母菌株的数量
B．②过程要用无菌水，Ⅱ号培养基采用的接种方法是平板划线法
C．培养后，Ⅰ号培养基上出现的菌落是均匀分布的
D．制备Ⅰ号培养基时，将培养基分装于锥形瓶后进行高压蒸汽灭菌，灭菌后适时进行倒平板操作
【答案】C
【分析】分析图可知，图中①过程为富集培养，②过程进行的是梯度稀释，需要使用无菌水进行稀释，③
过程采用的接种方法是涂布平板法。
【详解】A、分析图可知，图中①过程为富集培养，目的是增加产油脂酶酵母菌株的数量，以便筛选获得
产油脂酶酵母菌株，A 正确；
B、②过程进行的是梯度稀释，需要使用无菌水进行稀释，Ⅱ号培养基采用的接种方法是平板划线法，B
正确；
C、Ⅰ号培养基需要配制以油脂为唯一碳源的选择培养基，只有能产油脂酶的酵母菌能生存，因此出现的
菌落不是均匀分布的，C 错误；
D、培养基要进行高压蒸汽灭菌，制备Ⅰ号培养基时，将培养基分装于锥形瓶后进行高压蒸汽灭菌，灭菌
后适时进行倒平板操作，D 正确。
故选C。
37．为筛选高效降解淀粉的微生物，提高“生化"处理的效率，研究人员将厨余垃圾机械化处理后加入装有
无菌水的锥形瓶中制备厨余垃圾浸出液，然后进行如图所示操作。下列叙述错误的是（ ）
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A．厨余垃圾浸出液接种在X 培养基上，采用的是稀释涂布平板法
B．X 培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能是自养型的杂菌
C．获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种到Y 培养基
D．微生物在Y 培养基中与营养物质接触更充分，更容易形成菌落
【答案】D
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部
分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、分析题图可知，X 培养基上接种细菌采用稀释涂布平板法，A 正确；
B、X 培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能该微生物可以利用空气中的二氧化碳作为碳源，是自养
型的杂菌，B 正确；
C、⑤处透明圈最大，说明降解淀粉的能力最强，故为获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种
到Y 培养基，C 正确；
D、Y 培养基是液体培养基，不能形成菌落，D 错误。
故选D。
38．L-天冬酰胺酶由细菌和真菌合成，可分解天冬酰胺释放出氨，然后与奈斯勒试剂反应呈棕色。为筛选
获得L-天冬酰胺酶高产菌株，设计了如下培养基。培养基主要成分有：牛肉膏、蛋白胨、水、NaCl、琼脂、
奈斯勒试剂。实验结果如下图。下列叙述正确的是（ ）
A．要获得高产L-天冬酰胺酶纯培养物的关键是在富含天冬酰胺的环境中取样
B．该培养基从功能来看属于选择培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏
C．应选择菌落C 作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养
D．从实验结果可知，接种时采用的是平板划线法
【答案】C
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法，将已经灭菌的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划
线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最
后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法，将待分离的菌液经过适合的稀释后，均匀涂布在培养皿表面，
经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、要获得高产L-天冬酰胺酶纯培养物的关键是防止杂菌污染，A 错误；
B、培养基中加入有奈斯勒试剂，若微生物能产生L﹣天冬酰胺酶则菌落周围会出现棕色圈，因此该培养
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基从功能来看属于鉴别培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏和蛋白胨，B 错误；
C、菌落B 和菌落C 周围棕色圈的直径相同，但C 的菌落直径更小，因此菌落C 的单个细胞产生的L-天冬
酰胺酶更多，应选择菌落C 作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养，C 正确；
D、从接种结果来看，菌落分布较为均匀，应该采用的是稀释涂布平板法，D 错误。
故选C。
39．中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌 H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗
糖）为原料，在实验室发酵生产 PHA（嗜盐单胞菌 H 的代谢产物）等新型高附加值可降解材料，期望提
高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。下列叙述正确的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是嗜盐单胞菌 H 菌种的选育
B．发酵罐内发酵要严格控制温度、pH 和溶解氧等条件
C．使用平板划线法定期取样进行菌落计数评估菌株增殖状况
D．发酵结束之后，采取适当的过滤、沉淀等方法直接获得产品 PHA
【答案】B
【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，
或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭
菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A 错误；
B、在发酵过程中，需随时监测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必
需的营养组分，严格控制温度、pH 和溶解氧等条件，B 正确；
C、培养过程中定期取样使用稀释涂布平板法进行菌落计数评估菌株增殖状况，C 错误；
D、发酵结束之后，对于菌体可采取适当的过滤、沉淀措施来分离；而对于菌体的代谢物，可根据产物的
性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，D 错误。
故选B。
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40．开展深海微生物研究对于开发海洋资源具有重要意义。我国科考船采集了深海冷泉附近的沉积物样品，
从中分离微生物，并进一步研究了其生物学特性，具体过程如图所示，图中I～V 是操作步骤。下列相关
叙述错误的是（ ）
A．培养基②与培养基①相比，需要添加琼脂
B．若操作过程中以平板划线法纯化菌种，接种环的灼烧次数与划线次数相同
C．若培养基①在培养过程中通入充满N2，则此时的培养基是选择培养基
D．V 过程可用稀释涂布平板法对微生物进行分离和计数
【答案】B
【分析】微生物常见的接种的方法： (1)平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，
划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最
后可能形成单个菌落。(2) 稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，
经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、培养基②是固体培养基，培养基①是液体培养基，培养基②与培养基①相比，需要添加琼脂，
A 正确；
B、每次划线前后均需要对接种环灼烧，接种环的灼烧次数比划线次数多一次，B 错误；
C、若培养基①在培养过程中通入充满N2，以N2 为氮源，则此时的培养基是选择培养基，C 正确；
D、V 过程测定种群密度，可用稀释涂布平板法对微生物进行分离和计数，D 正确。
故选B。
二、多选题
41．山西老陈醋含有多种营养成分，具有调节血脂、保护肝脏等功效，其制作工艺如下图。下列叙述正确
的是（ ）
高粱→蒸煮→拌大曲→酒精发酵→醋酸发酵→熏醅→淋醋→陈酿
注：以大麦、豌豆等原料制成的大曲，含有多种与发酵有关的微生物。
A．蒸煮可杀死高粱中的微生物，再通过拌大曲加入发酵所需菌种
B．酒精发酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通气后期密封发酵
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C．醋酸发酵起主要作用的是醋酸菌，较前一阶段需适当降低温度
D．醋酸发酵过程发生的主要反应为乙醇先转化为乙醛再生成乙酸
【答案】ABD
【分析】酒精发酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通气使酵母菌进行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密
封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，醋酸发酵起主要作用的菌种是醋酸菌，在有氧的条件下发酵形成醋酸。
【详解】A、蒸煮可杀死高粱中原有的微生物，拌大曲可提供发酵所需菌种，A 正确；
B、酒精发酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通气使酵母菌进行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使
酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，B 正确；
C、醋酸发酵起主要作用的是醋酸菌，醋酸菌生长的最适温度较酵母菌高，因此需适当升高培养温度，C
错误；
D、先进行酒精发酵，糖类被转化为乙醇，再进行醋酸发酵，主要反应为乙醇先转化为乙醛再生成乙酸，D
正确。
故选ABD。
42．啤酒是世界上消耗量第三的饮品。啤酒的制作过程如图1 所示。研究人员探究氯化钙对啤酒发酵的影
响，结果如图2 所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．糖化是让麦芽糖分解形成糖浆，煮沸是使酶失活及对糖浆灭菌
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B．发酵温度应控制在30℃，发酵原理为
C．由图2 可知，随着氯化钙浓度的增加，发酵液中酒精体积分数基本不受影响
D．在15~20d 期间，各种氯化钙浓度下的酒精体积分数均不再增加的原因基本相同
【答案】CD
【分析】题图分析：图1 为啤酒的制作过程，图2 反映氯化钙对啤酒发酵的影响。据图2 可知，实验的自
变量为发酵时间和氯化钙的浓度，各氯化钙浓度下酒精产生曲线几乎重合，说明氯化钙浓度对发酵液中酒
精体积基本没有影响。
【详解】A、糖化是让淀粉分解为麦芽糖形成糖浆，煮沸的作用是产生风味组分，终止酶的进一步作用，
并对糖浆灭菌，A 错误；
B、酵母菌最适生长温度为28℃，发酵温度应控制在28℃左右，发酵原理为
，B 错误；
C、据图可知，各氯化钙浓度下酒精产生曲线几乎重合，说明氯化钙浓度对发酵液中酒精体积基本没有影
响，C 正确；
D、在15～20d 期间，各种氯化钙浓度下的酒精体积都不再增加的原因为发酵底物已消耗殆尽，D 正确。
故选CD。
43．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸
的简要流程图。下列说法错误的是（ ）
A．黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同
B．将菌种接种至A 培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧
C．将菌种转接至B 培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量
D．若发酵罐C 中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油
【答案】BD
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或
直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、
扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
【详解】A、由培养时需要通气振荡可知，黑曲霉的异化作用类型为需氧型，因此其代谢类型为异养需氧
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型，制作果醋利用的是醋酸菌，制作腐乳利用的是毛霉，它们的代谢类型均为异养需氧型，A 正确；
B、将涂布器先放入酒精中消毒，将沾有酒精的涂布器在使用前放在酒精灯火焰上引燃而不是灼烧，B 错
误；
C、将菌种转接至B 培养基是将菌种转接至新的培养基，目的是为了进行扩大培养，从而增加菌种的数量，
C 正确；
D、以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉)，将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，
然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，D 错误。
故选BD。
44．鱼茶味酸而微咸，富含多种必需氨基酸。鱼茶的发酵菌群主要是乳酸菌，如图是某同学绘制的鱼茶发
酵过程中各菌种数量及发酵液pH 的变化曲线。下列有关叙述错误的有（ ）
A．与制作传统泡菜类似，鱼茶发酵也无需严格灭菌
B．乳酸菌发酵时会积累NADH 导致发酵液pH 变小
C．利用显微镜直接计数可快速直观检测微生物数量
D．醋酸菌和酵母菌消失的原因都是因为氧气已耗尽
【答案】BD
【分析】酵母菌新陈代谢类型为异养兼性厌氧型，醋酸菌新陈代谢类型是异养需氧型。
【详解】A、传统泡菜制作和鱼茶发酵过程都是传统发酵过程，一般利用的是自然条件下的微生物，不需
要严格灭菌，A 正确；
B、乳酸菌发酵不会积累NADH，会积累乳酸导致pH 变小，B 错误；
C、显微镜直接计数可利用血细胞计数板等快速观察并统计微生物的数量，C 正确；
D、酵母菌可进行无氧呼吸，消失的原因是养料耗尽、代谢废物积累等，D 错误。
故选BD。
45．啤酒生产的简要流程如图所示，制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子，糖化主要是将麦芽中的淀粉等有
机物水解为小分子。下列说法正确的是（ ）
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A．用赤霉素溶液浸泡大麦种子，使种子无需发芽就能产生淀粉酶
B．糖化前破碎有利于淀粉与a—淀粉酶充分接触，使糖化过程缩短
C．在接种酵母菌前进行冷却处理，是为了避免高温杀死酵母菌种
D．发酵过程中要适时往外排气，发酵后期在低温、通气环境进行
【答案】ABC
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大
量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌
无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，生产中是否有酒精的产生，可用酸性
重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【详解】A、大麦种子萌发的过程中，赤霉素可诱导胚乳的糊粉层大量合成 α-淀粉酶，故过程①制麦时可
用赤霉素溶液浸泡大麦种子，使种子无需发芽就能产生α-淀粉酶，促进淀粉的水解，A 正确；
B、糖化前破碎有利于淀粉与a—淀粉酶充分接触，加快淀粉水解成麦芽糖并进一步水解成小分子的过程，
使糖化过程缩短，B 正确；
C、在接种酵母菌前进行冷却处理，是为了避免高温杀死酵母菌种，C 正确；
D、酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，故发酵过程中要适时往外排气，发酵后期也应在密
闭条件下进行，D 错误。
故选ABC。
46．红酸汤颜色鲜红、气味清香、味道酸爽，利于人体肠道益生菌生长。制作时选用西红柿洗净晒干搅成
茸泥，加入剁碎的仔姜、大蒜和辣椒，一定量的食盐、糯米和白酒，混合拌匀装坛后密封发酵。下列相关
叙述正确的有（ ）
A．食盐、大蒜和辣椒等既可调味又可抑制杂菌生长
B．发酵时常加入成品红酸汤，可增加醋酸菌含量，缩短制作时间
C．装坛时必须装满并在盖上坛盖后水封，以实现密封发酵
D．出坛后的酸汤若不及时食用，会因酵母菌繁殖长出一层白膜
【答案】AD
【分析】利用乳酸菌发酵形成红酸汤的过程，乳酸菌是厌氧菌，只能进行无氧呼吸，产物是乳酸。
【详解】A、食盐、大蒜和辣椒等既可调味又可抑制杂菌生长，制作红酸汤时可适当加入上述物质，可以
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起到抑菌和改善风味的效果，A 正确；
B、红酸汤中的酸味物质主要是乳酸菌产生的乳酸，发酵时常加入成品红酸汤，可增加乳酸菌含量，缩短
制作时间，B 错误；
C、装坛时坛口要留有一点空间，而不能装满，目的是防止番茄发酵后液体膨胀外溢，C 错误；
D、出坛后的酸汤，若不及时食用，一段时间后会在其表面出现一层白膜，这是产膜酵母菌大量繁殖形成
的，D 正确。
故选AD。
47．大曲白酒浓香纯正，是以豌豆、大麦、小麦等为原料，用富含多菌种的大曲糖化后酿造而成。图示为
大曲酒传统酿造工艺流程。下列说法正确的是（ ）
A．糖化主要是利用大曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖
B．密坛发酵温度控制在18~30。C，每隔12 小时需将坛盖打开进行排气
C．若酿造过程中酒变酸，可能是由醋酸菌大量繁殖导致
D．高温蒸粮并摊晾的原料立即密封发酵可提高酒精产量
【答案】AC
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理是酵
母菌利用葡萄糖在无氧条件下产生酒精。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都
充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、糖化主要是利用大曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖，A 正确；
B、液态酒精发酵阶段的温度应控制在18~30℃，由于酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，故每隔12 小
时需将坛盖拧松进行排气，B 错误；
C、酿造过程中酒变酸，可能是醋酸菌大量繁殖，利用酒精产生醋酸导致的，C 正确；
D、高温蒸粮并摊晾的原料应现在有氧条件下让酵母菌增殖一段时间，再密封可提高产量，D 错误。
故选AC。
48．某生物兴趣小组在探究温度对酵母菌呼吸速率的影响时，设计的实验装置及实验结果如下图所示，下
列分析正确的是（ ）
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A．三组气球的大小差异主要取决于酵母菌无氧呼吸速率的大小
B．检测酒精时应将酵母菌的培养时间适当延长以耗尽溶液中的葡萄糖
C．要检测酒精的产生，应取部分发酵液加入酸性的重铬酸钾溶液
D．酵母菌无氧呼吸时葡萄糖中的能量大部分以热能的形式散失
【答案】AB
【分析】1、酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下进行无氧呼吸，产生二氧化碳和酒精，有氧条件下
进行有氧呼吸，产生二氧化碳和水。
2、检测二氧化碳的产生：可使澄清石灰水变浑油，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。检测酒精
的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。
【详解】A、三组气球中酵母菌主要进行无氧呼吸，会产生二氧化碳，使得球体积变大，温度会影响酶的
活性从而影响呼吸速率，故三组气球的大小差异主要取决于酵母菌无氧呼吸速率的大小，A 正确；
B、由于葡糖糖也可以与重铬酸钾溶液进行反应产生灰绿色，检测酒精时应将酵母菌的培养时间适当延长
以耗尽溶液中的葡萄糖，B 正确；
C、由于酸性的重铬酸钾溶液是使用浓硫酸配制，因此要检测酒精的产生，应将部分发酵液倒入到酸性的
重铬酸钾溶液中去，C 错误；
D、酵母菌进行无氧呼吸时，葡萄糖中的能量有三个去路，散失的热能。ATP 中储存的化学能和酒精中的
能量，其中酒精中存留的能量最多，D 错误。
故选AB。
49．某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌；醋醅含有醋酸菌；糖化即淀
粉水解过程。下列相关叙述正确的有（ ）
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A．糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和灭菌
B．发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸
C．醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度和改善通气状况
D．啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间
【答案】ACD
【分析】1.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，
大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精
发酵时，一般将温度控制在18~30℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野
生酵母菌。
2.醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，
当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸
菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最
适生长温度为30~35℃。
【详解】A、糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的均有利于灭菌和糖化过程，A 正确；
B、图中制酒用到了酒曲，酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，霉菌属于真菌，其为需氧型，该过程霉菌产
生的淀粉酶有利于将糯米中的淀粉分解，其中的乳酸菌进行的是无氧呼吸，酵母菌主要进行无氧呼吸过程
完成酿酒的过程，醋酸发酵过程中主要利用了醋酸杆菌的有氧呼吸进行醋酸发酵，B 错误；
C、醋酸发酵过程中利用了醋酸菌的有氧呼吸，在发酵过程中经常翻动发酵物，有利于散热，可控制发酵
温度和改善通气状况，C 正确；
D、啤酒酿造流程中利用的原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，若适当增加溶解氧有利于酵母菌有
氧呼吸产生更多的能量满足酵母菌自身增殖的需要，因而可缩短发酵时间，D 正确。
故选ACD。
50．啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调
节、分装。下列说法正确的是（ ）
A．大麦种子发芽主要是为了释放淀粉酶
B．碾磨产生麦芽粉之后，是加入酵母菌的最佳时机
C．发酵环节的主发酵结束后，发酵液不适合饮用
D．不同啤酒在工艺化生产中发酵的温度和发酵的时间有所差异
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【答案】ACD
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提
纯等方面，发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵。在发酵过程中，要随时检测培养液中微生物的数量、
产物浓度等，以了解发酵进程。
【详解】A、发芽作用就是让大麦种子产生更多的淀粉酶，将淀粉分解成麦芽糖、葡萄糖，供酵母菌利用，
A 正确；
B、碾磨产生麦芽粉之后，下一步就是糖化，淀粉酶充分分解淀粉变成葡萄糖，不是加入酵母菌的最佳时
间，B 错误；
C、发酵环节的主发酵结束后，发酵液不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，
这样才能形成澄清、成熟的啤酒，C 正确。
D、发酵的温度影响酵母菌细胞酶的活性，影响细胞呼吸产生的代谢产物，发酵的时间影响呼吸产物的量
等等，不同啤酒在工艺化生产中发酵的温度和发酵的时间有所差异，D 正确。
故选ACD。
51．黄曲霉毒素是由黄曲霉产生的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性。科研人员用黄曲霉毒素B
（AFB1）的结构类似物——豆香素（C9H6O2）筛选出能高效降解AFB1 的菌株，实验过程如下图中的①—
④。已知菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。对降解菌的培养液进行离心，
发现上清液中AFB1 的残留率明显低于菌悬液中的残留率。检测发现上清液中含有蛋白质K，为验证蛋白
质K 是降解AFB1 的有效成分，进行了实验⑤：在A 中加入水解蛋白质K 的酶、B 中加等量的蒸馏水，充
分反应后在两试管中均加入等量的豆香素（C9H6O2）。下列说法错误的是（ ）
A．1 号培养基属于选择性培养基，通常需要提前在121℃下进行湿热灭菌
B．步骤③使用稀释涂布平板法，目的是筛选出能降解黄曲霉毒素的单菌落
C．实验⑤的结果是A 试管中豆香素含量基本不变，B 试管中豆香素含量减少
D．蛋白质K 属于降解菌产生的胞外分泌物，可以分解培养液中的蛋白质
【答案】BC
【分析】1、实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层
灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰
燃烧来灭菌。
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用
这种方法灭菌。
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③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压
力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。
2、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部
分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、1 号培养基属于选择性培养基，培养基需要提前在121℃下进行湿热灭菌，A 正确；
B、结合题图信息分析可知，步骤③接种的培养基中菌落均匀分布，使用的接种方法是稀释涂布平板法，
目的是筛选出能降解豆香素的单菌落，B 错误；
C、由题干信息可知，A 中加人水解蛋白质K 的酶、B 中加等量的蒸馏水，故实验⑤的结果是A 试管中豆
香素含量减少，B 试管中豆香素含量基本不变，C 错误；
D、由题干信息可知，上清液中含有蛋白质K，且上清液中AFB1 的残留率明显低于菌悬液中的残留率，
据此推测蛋白质K 属于降解菌产生的胞外分泌物，可以分解培养液中的蛋白质，D 正确。
故选BC。
52．纤维素是地球上储量丰富的可再生资源，经纤维素酶催化水解后，可被微生物发酵利用。筛选高产纤
维素酶菌株的流程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．步骤I-Ⅲ均需在超净台上进行，I 和Ⅲ均为稀释涂布平板法接种
B．培养基②的每一个菌落均是由一个细菌细胞繁殖而来的子细胞群
C．步骤Ⅱ是根据菌落特征初步鉴定并扩增高产纤维素酶菌株的过程
D．④从功能来看应为选择培养基，以便选出透明圈大的菌落作目的菌种
【答案】BD
【分析】1、 选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物
生长的培养基，称为选择培养基。
2、筛选产纤维素酶的菌株应以纤维素为唯一碳源，可以保证平板上长出的菌株均能分解利用纤维素。
3、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，
在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能
形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培
养后可形成单个菌落。
【详解】A、分析题图可知，I 和Ⅲ均属于接种，Ⅱ是挑取单菌落转接，为了防止杂菌污染，获得目标菌株，
均需要在超净台上进行；稀释涂布平板法是将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经
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培养后可形成单个菌落；题图可知，I 和Ⅲ均为稀释涂布平板法接种，A 正确；
B、培养基②的菌落可能存在由两个或多个细菌细胞繁殖而来的子细胞群，B 错误；
C、步骤Ⅱ挑取直接最大的菌落转接到液体培养基，该过程是根据菌落特征初步鉴定并扩增高产纤维素酶
菌株的过程，C 正确；
D、题干为了筛选高产纤维素酶菌株，培养基需要以纤维素为唯一碳源，培养基④富含纤维素且含有能与
纤维素形成红色复合物的刚果红，从功能上来看其应为选择+鉴别培养基（以鉴别为主），选出透明圈大
的菌落作目的菌种，D 错误。
故选BD。
53．稀释涂布平板法是微生物培养与计数中常用的方法，下列叙述正确的是（ ）
A．由于土壤中细菌的数量庞大，需将土壤稀释后再涂布在选择培养基上培养计数
B．稀释涂布平板法使用时可用无菌水或生理盐水进行稀释
C．涂布器使用前和使用后均需要灼烧灭菌
D．在同一稀释度下至少对3 个平板计数，菌落数目往往比活菌数目多
【答案】AC
【分析】微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体
培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的
梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
【详解】A、在统计土壤中细菌的数目实验时，由于土壤中细菌的数量庞大，需将土壤稀释后再涂布在选
择培养基上培养计数，A 正确；
B、稀释涂布平板法使用时需用无菌水进行稀释，B 错误；
C、涂布器使用前和使用后均需要灼烧灭菌，防止杂菌污染，C 正确；
D、在同一稀释度下至少对3 个平板进行计数，当两个或多个细胞在一起时，平板上只能观察到一个菌落，
因此观察到的菌落数目往往比活菌的数目少， D 错误。
故选AC。
54．某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平
板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法正确的是（ ）
A．图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶
B．若每支试管稀释10 倍，则图中a 的数值应为2.7，5 号试管共稀释了106倍
C．图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的
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D．若仅以4 号试管接种培养基计数，5g 该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
【答案】BC
【分析】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3 个平板，
选择菌落数在30~300 的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。
【详解】A、本实验是探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，因此图中接种的培养基是以尿素为唯
一氮源的固体培养基，但在此培养基上能生长的微生物不一定都能合成脲酶，如固氮菌也能生存，A 错误；
B、若每支试管稀释10 倍，则将0.3mL 与amL 无菌水混合稀释10 倍，需要a 的数值为2.7，5g 土壤溶于定
溶剂形成50mL 溶液被稀释了10 倍，故5 号试管共稀释了106 倍，B 正确；
C、图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的，C 正确；
D、若仅以4 号试管接种培养基计数，5g 该土壤中含分解尿素菌的估算数目是（275+285+280）
÷3÷0.2×105×5=7×108 个，D 错误。
故选BC。
55．反刍动物的瘤胃中含有分解尿素的微生物，科研小组利用图示过程从瘤胃中分离、培养分解尿素的微
生物。下列叙述正确的是（ ）
A．图中所用培养基均以尿素为唯一氮源
B．图示试管加瓶塞的目的是为了创设无氧环境
C．图示试管Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ中的培养基为固体培养基，其余为液体培养基
D．鉴定菌种除了观察菌落的特征外，还需要借助生物化学的方法
【答案】ABD
【分析】筛选尿素分解菌需要以尿素为唯一碳源的固体选择培养基,鉴定分离纯化的菌种为尿素分解菌，尿
素分解菌产生的脲酶会将尿素分解产生的氨与酚红指示剂显红色，所以可在培养基中加入酚红指示剂，培
养后，若出现红色环就可以说明培养基中含有能够分解尿素的细菌，同时红色环越大，说明该菌株分解尿
素的能力越强。
【详解】A、该实验的目的是获得尿素分解菌，所以培养基均以尿素为唯一氮源，A 正确；
B、该实验培养的微生物为厌氧微生物，故试管加瓶塞的目的是为了创设无氧环境，B 正确；
C、图示试管Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ中培养基的作用是扩大培养，属于液体培养基，试管Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ的目的是纯
化，为固体培养基，C 错误；
D、鉴定菌种除了观察菌落的特征（如形状、大小和颜色等）外，还需要借助生物化学的方法，D 正确。
故选ABD。
56．水胺硫磷（C11H16NO4PS）是一种广谱性杀虫、杀螨剂，但水胺硫磷的残效期长、毒性大。某地区近十
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年来一直受水胺硫磷污染，下图为从土壤中分离能高效分解水胺硫磷的细菌的过程。下列叙述错误的是（
）
A．图中接种细菌的方法为稀释涂布平板法，1g 土壤被稀释了10³ 倍
B．若培养基A 中培养细菌的时间过长，则导致菌落计数结果较实际大
C．培养基B 中单菌落周围的分解圈越小，说明该菌株的降解能力越强
D．培养基A 中的唯一碳源为水胺硫磷，从功能上划分属于选择培养基
【答案】ABC
【分析】在培养基中加入某种化学成分抑制部分菌落的生长，但允许特定菌落生长的培养基为选择培养基。
【详解】A、图中接种细菌的方法为稀释涂布平板法，1g 土壤被稀释了105 倍，A 错误；
B、若培养基A 中培养细菌的时间过长，导致菌落之间连接，计数时误以为是一个菌落，导致菌落计数结
果较实际小，B 错误；
C、培养基B 中单菌落周围的分解圈越小，说明该菌株的降解能力越弱，C 错误；
D、培养基A 中的唯一碳源为水胺硫磷，从而起到选择目的菌株的作用，从功能上划分属于选择培养基，
D 正确。
故选ABC。
57．某种除草剂（一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）在土壤中不易
降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按下图过程选育能降解该除草剂的细菌。下
列叙述正确的是（ ）
A．图中培养基在各种成分都溶化后且分装前进行灭菌
B．图中接种方法为平板划线法，该方法可以于细菌计数
C．实验过程中需要将培养皿中培养基调至中性或弱碱性
D．培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同
【答案】CD
【分析】微生物常用的接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法。
【详解】A、培养基在各种成分都溶化后，在分装到锥形瓶后进行灭菌，A 错误；
B、平板划线法不能记数，B 错误；
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C、一般培养细菌时需要培养基调至中性或弱碱性，C 正确；
D、培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同，有透明圈的，是能够利用除草剂中的氮源，没
有透明圈的，不能利用除草剂中的氮源，D 正确。
故选CD。
58．变色圈法是一种对于一些不易产生透明圈产物的菌株的鉴别方法,可在底物平板中加入指示剂或显色剂，
使所需微生物能被快速鉴别出来。如在筛选果胶酶产生菌时，用固体培养基对含微生物的样品进行分离，
待菌落长成后，加入0.2%刚果红溶液染色4h，具有分解果胶能力的菌落周围便会出现绛红色水解圈，如
图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．该培养基是以果胶为唯一碳源的选择培养基
B．该培养基上的接种方法为稀释涂布平板法
C．变色圈的直径大,该种菌分解果胶的能力一定强
D．实验所用培养基一般要进行高压蒸汽灭菌
【答案】BD
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，
划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最
后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，
经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、据题意可知，具有分解果胶能力的菌落周围便会出现绛红色水解圈，该培养基上菌落周围没
有变色圈，说明该培养基不是以果胶为唯一碳源的选择培养基，A 错误；
B、结合图示可知，平板上并未出现划线，该培养基上的接种方法为稀释涂布平板法，B 正确；
C、变色圈的直径与菌落的直径比值大，该种菌分解果胶的能力强，C 错误；
D、为实现无菌操作，实验所用培养基一般要进行高压蒸汽灭菌，D 正确。
故选BD。
59．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。食品工业生产柠檬酸时，可以红薯粉为原料经发酵获得，
简要流程如图所示，甲、乙代表相应培养基。下列叙述错误的是（ ）
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A．图中将黑曲霉菌接种至甲的方法为稀释涂布平板法
B．在乙中振荡培养28h 的目的是增加黑曲霉菌的数量
C．蒸煮后的红薯需冷却，是为了防止高温杀死黑曲霉菌
D．α-淀粉酶可水解淀粉以提供碳源，蛋白胨可提供氮源
【答案】AC
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或
直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体
本身。
【详解】A、图中将黑曲霉菌接种至甲的方法为平板划线法，A 错误；
B、振荡培养可以增加溶氧量，促进黑曲霉菌的需氧呼吸，还能增大霉菌与营养物质的接触面积，有利于
黑曲霉菌的生长繁殖，会增加黑曲霉菌的数量，B 正确；
C、高温蒸煮可以达到杀菌的目的，蒸煮需冷却，是为了防止高温破坏α-淀粉酶的结构，影响其活性，C
错误；
D、α-淀粉酶可水解淀粉产生葡萄糖，为霉菌生长提供碳源，蛋白胨可以提供氮源和维生素等，D 正确。
故选AC。
60．某兴趣小组的同学们按如图所示的过程对某人喝剩的5mL 酸奶进行细菌检测，若3 个计数的培养基中
的菌落数目分别为210 个、160 个、230 个。下列说法正确的是（ ）
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A．为了使1 号试管稀释倍数为100 倍，锥形瓶中应加入45mL 无菌水
B．除了培养涂布的3 个培养皿外，还需要培养未涂布菌落的培养基作为对照
C．为了计数准确需要用接种环连续划线，并且每次划线前需要灼烧灭菌
D．利用该方法可估算酸奶中细菌含量为2.0×107个/mL，此值比实际活菌数少
【答案】AB
【分析】1、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。通常采用各种无菌技术防止杂菌污染，无
菌技术主要包括消毒和灭菌。 消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一
部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
2、培养纯净物时通常接种单一菌种，常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。
【详解】A、锥形瓶5mL 酸奶加入45mL 无菌水中，稀释倍数为：
，酸奶被稀释10 倍。再从锥
形瓶中取1mL 菌液至9mL 无菌水中，稀释倍数为：
，又稀释了10 倍，共稀释100 倍，A 正确；
B、在进行微生物培养时，通常要同时培养未涂布菌落的培养基作为对照，以便监测培养过程中是否出现
污染，B 正确；
C、如果要对培养的微生物进行计数，接种方法要用稀释涂布平板法，不能用平板划线法，C 错误；
D、1 号试管稀释了100 倍，后面的试管再稀释了103 倍，共稀释了105 倍。3 个计数的培养基中的菌落数
目分别为210 个、160 个、230 个，则酸奶中细菌含量为
，D 错误。
故选AB。
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