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茁彩生物|ELISA竞争法数据处理软件之ELISA Calc及使用方法
ELISA竞争法数据处理软件
之ELISA Calc及使用方法
ELISACalc是一款回归和拟合数据的计算程序，能够用来计算直线回归、二次曲线回归、四参数曲线回归等。一般直线回归曲线及多项式拟合在EXCEL表格中即可完成，建议四参数回归曲线拟合的时候使用ELISACalc软件更便捷。ELISACalc软件与CurveExpert相比较，能选取的拟合模型种类较少，优点是操作简单，可以结合excel表格处理数据方便复制粘贴，计算大批量数据时有明显优势。
绘制方法如下：
1
在EXCEL表格中整理一组包括标曲和样本数据。
|
标准品 |
样本OD值 |
|||
|
浓度pg/ml |
OD值 |
|||
|
80 |
0.0951 |
0.0502（空白） |
0.4859 |
0.6188 |
|
40 |
0.1953 |
0.3586 |
0.5185 |
0.804 |
|
20 |
0.3859 |
0.4256 |
0.7829 |
0.4271 |
|
10 |
0.6588 |
1.1528 |
0.5088 |
0.9084 |
|
5 |
1.0057 |
0.5529 |
0.7518 |
1.0526 |
|
0 |
1.8926 |
0.4845 |
0.9952 |
0.8748 |
2
打开软件ELISACalc，选择（四参数)，如有空白值或者背景值，可勾选扣除本底，然后复制表格中底色填充为白色的数据，点击软件中的“粘贴”按钮，得到如下图：
3
点击“回归/拟合”模型，得到如下曲线图：
4
曲线应呈现下降趋势，r2值越接近 1 拟合度越好，依次点击“回归方程”得到如下方程：
5
点击“由Y计算X”，复制表格中的样本吸光值即底色为黄色的数据，在软件中点击“粘贴”“计算”。即可得到对应的样本蛋白浓度值。
6
点击“复制”，即可把得到的浓度值粘贴到EXCEL表格中。整理数据，再乘以稀释倍数，得到对应样本蛋白最终浓度值。
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