文档内容
2.2 动物细胞工程
知识梳理
教学目标
课程标准 目标解读
动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和 1. 阐明动物细胞培养的条件和过程。
干细胞的应用等技术。 2. 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价
1. 阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分 值。
散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长 3. 阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过
和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基 程，认同单克隆抗体在临床上有重要的应用价值。
础。 4. 阐明利用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程
2. 阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个 和该技术的应用前景。
去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，
继而发育成动物个体的过程。
3. 阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学
等手段，使两个或多个动物细胞结合成一个细胞的
过程。
4. 概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技
术。
5. 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价
值。
教学重点
1.动物细胞培养的条件和过程。
2.干细胞在生物医学工程中的应用。
3.单克隆抗体的制备和应用。
4.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
教学难点
1. 单克隆抗体的制备过程。
2. 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
一、动物细胞培养与干细胞培养及其应用
I.动物细胞工程：
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂动物细胞工程是应用细胞学的方法，按照我们人类的需要和预定的设计，有目的、有计划地保存、改变动
物细胞和创造新的动物细胞，进而培育成新的物种或者品种的一门科学技术。
II.动物细胞培养：
概念：从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长
和增殖的技术。
原理：细胞增殖
基本条件：
过程：
几个有关概念：
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细
胞培养。（将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养，称为原代培养。）
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂称为传代培养。
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这
种传代细胞为细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养
条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
应用：
1.蛋白质生物制品的生产：酶、生长因子、疫苗、单克隆抗体等
2.应用于基因工程：主要用于受体细胞
3.检测有毒物质，判断某种物质的毒性
4.细胞的生理、药理、病理研究
III.干细胞培养及其应用：
（一）干细胞：
概念：是来自于胚胎、胎儿或成人体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细胞，能
够产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞，也能产生组成机体组织、器官的已特化的细胞，同时还
能分化为祖细胞。
存在：存在于早期胚胎、骨髓和脐带等多种组织和器官中。
分类：
干细胞特征：通过有丝分裂，完成自我更新；在特定的生理条件下或实验条件下，可以分化成其他类型的
细胞。
干细胞主要用途：
（1）通过造血干细胞的移植可以治疗白血病、遗传性血液病（如地中海贫血、血液再生障碍性贫血、镰
刀状细胞贫血）等疾病。
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂（2）自体器官移植
科学家正在研究用胚胎干细胞治疗神经退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）、糖尿病、心肌
坏死等疾病。
（3）神经干细胞可治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）。
（4）揭示细胞分化和细胞凋亡的机理。
（5）用于对哺乳动物个体发生和发育规律的研究。
（二）胚胎干细胞：
特点：(1)形态上：体积小、细胞核大、核仁明显。
(2)功能上：具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。
(3)在体外培养的条件下，可以只增殖，而不分化。可以冷冻保存，也可以进行遗传改造。
来源：由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，简称ES或EK细胞。
用于研究的胚胎干细胞的来源：一是从自然胚胎中获取；二是从通过细胞核移植技术克隆得到的胚胎中获
取（主要途径）。
主要用途：
（1）治疗人类的某些顽症。
（2）培育出人造组织器官，用于器官移植。
（3）ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料。
（三）诱导多功能干细胞（iPS细胞）
概念：是由一些多功能遗传基因导入皮肤等受体细胞中通过基因重新编排方法，“诱导”普通细胞回到最
原始的胚胎发育状态，能够像胚胎干细胞一样进行分化。
应用前景：
1.用于器官移植。
2.建立疾病模型，了解发病机理。
3.治疗某些遗传病。
如：患有镰刀型贫血症的小鼠皮肤成纤维细胞建立了IPSc，并将其移植到小鼠体内，小鼠的症状得以缓解。
二、动物细胞融合技术及单克隆抗体的制备
I.动物细胞融合技术
概念：指用自然或人工方法使两个或多个不同的动物细胞融合成一个细胞的过程的技术。
诱导动物细胞融合的方法：化学法：PEG（聚乙二醇）融合法
物理法：电融合法、离心
生物法：灭活病毒诱导法
意义：
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂1.突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，在种间、属间、科间，甚至动物与植物间的细胞融合
已获成功。如：鼠-鸡、鼠-兔、鼠-猴、人-鼠、人-兔、人-鸡、人-蛙、酵母菌-鸡、人-胡萝卜等。
2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
3.利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟新途径。
II.单克隆抗体的制备
概念：由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性
质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
单克隆抗体制备过程：
单克隆抗体的应用：
1.用作体外诊断试剂。
2.运载药物。
3.用于治疗疾病。
三、动物细胞核移植技术
概念：是将动物一个细胞的细胞核移入到去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而
发育成动物个体的技术。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。
原理：动物细胞核具有全能性
动物细胞核移植分类：
体细胞核移植的过程：
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂核移植的意义：
①为遗传疾病的治疗提供了重要途径。
②优化物种、保存濒危动物、克服杂交障碍、创造新物种和以及基因动物的扩群也有重要意义。
③可以降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率。
④对研究胚胎发育过程中的细胞分化、基因调控、核质关系等生物学基础理论问题也有重要价值。
⑤解决器官移植中存在的器官来源紧缺和免疫排斥的问题。
应用前景：
（1）加速家畜遗传改良进程、促进优育畜群繁育。
（2）转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白。
（3）转基因克隆动物的细胞、组织和器官可以作为异种移植。
（4）以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官，将它
们移植给患者时可以避免免疫排斥反应。
（5）研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。
（6）克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因。
（7）克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。
（8）克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。
存在的问题：
(1)成功率非常低。
(2)克隆动物存在健康问题。
许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等。
(3)克隆动物食品的安全性存在争议等。
(4)克隆动物的各个环节有待改进。
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练
培优第一阶——基础过关练
一、单选题
1.下列关于动物细胞工程的说法错误的是（ ）
A. 动物细胞培养瓶内表面要光滑、无毒、易于贴附
B. 胚胎细胞核的移植成功率远高于体细胞核移植
C. 动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
D. 单克隆抗体的最主要优点是特异性强，灵敏度高，能够大量制备
2.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是
A. 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B. 用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C. 用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
3. 治疗性克隆有望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应。下图表示治疗性克隆的过程，
下列有关叙述错误的是 （）
A. 上述过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术
B. 上述过程充分说明动物细胞具有全能性
C. 由图可以看出胚胎干细胞可诱导成多种体细胞
D. ①、②过程都发生DNA复制，转录和翻译
4.如图表示抗胃癌单克隆抗体的制备过程。下列相关叙述错误的是( )
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂A. 抗胃癌单克隆抗体可以和甲特异性结合
B. 图中细胞融合过程常用聚乙二醇处理
C. 用特定的选择培养基培养对乙筛选后获得的细胞均能增殖
D. 需对丙进行抗体检测，经过筛选后才可获得丁
5.下列关于细胞工程的叙述，正确的有几项( )
①电刺激只能诱导植物原生质体融合，不能诱导动物细胞融合
②去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞并不都需要酶处理
③小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的T淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
④某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目不同
A. 一项 B. 二项 C. 三项 D. 四项
6.M基因编码的M蛋白在哺乳动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验,将外源DNA片段F插入M
基因的特定位置, 再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流
程如图所示,下列说法错误的是( )
A. 成纤维细胞取核前要进行营养限制性培养
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂B. 采集卵母细胞前应进行超数排卵处理,采集到的卵母细胞均需培养成熟后才能去核
C. 转基因、核移植或体外受精等获得的胚胎, 都必须经胚胎移植才能获得动物A的后代
D. 该技术获得的动物A可用于器官移植
7.如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中 B、D两点表示经处理或筛
选后继续培养），相关说法不正确的是（ ）
A. OA段的培养称为原代培养，C点细胞大约增殖60代指该细胞
已传代培养60代
B. AB段可能发生了接触抑制现象，需要用胰蛋白酶等处理
C. CD段细胞增殖缓慢，以至于完全停止，此时部分细胞的核型
可能会发生改变
D. 制备单克隆抗体时，可选取图中D点的细胞与B淋巴细胞融合形成杂交细胞
8.图中Ⅰ、Ⅱ表示获得胚胎干细胞的两条途径，下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 胚胎干细胞在体外培养的条件下，只增殖不发生分化
B. 图中早期胚胎一般是指发育到囊胚时期的胚胎
C. 过程Ⅰ、Ⅱ获取早期胚胎的过程均属于有性生殖范畴
D. 过程Ⅱ获得的早期胚胎在培养液中添加分化诱导因子后可进行分化
二、填空题
9.新型冠状病毒是引起新冠肺炎的元凶，用电子显微镜观察，新型冠状病毒包膜上有形状类似日冕的
棘突，如图1所示。这些棘突其实是一些蛋白质，能被淋巴细胞识别。新冠病毒单克隆抗体有望成为
治疗新冠肺炎的特效药，其制备过程如图2所示。请据图回答下列问题。
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂（1）图2的①过程需要将通过一定方法获得的图1中的棘突注射到小鼠体内，这些棘突是充当
________，以刺激小鼠产生经免疫的B淋巴细胞。
（2）图2的②过程常加的药品是________，该过程体现了细胞膜具有________________。与诱导植物
原生质体融合不同的是图2中还可用________________诱导融合。
（3）图2的③过程筛选的所需细胞群应具备的特点是________________。
（4）选择获得的杂交瘤细胞可以进行体外培养，在进行体外培养时，一般需要在合成培养基的基础
上添加________等天然成分，需要提供的气体环境是________。选择获得的杂交瘤细胞也能通过④过
程进行培养，该过程是把杂交瘤细胞注射到小鼠的________进行培养。
10.如图表示培育转基因克隆羊和胚胎工程的部分操作流程，其中字母代表有关结构或个体，数字代表
过程、方法。请据图回答下列问题：
(1)图中过程①～⑦所涉及的全部生物技术有_________________________(两种即可)。
(2)通过①、⑤过程获取分散的细胞时，用到的酶是_________，培养的细胞在充满培养皿底时停止分
裂，这种现象称为_______________。
(3)动物细胞培养过程中应将细胞置于 5% CO 和 95%空气的气体环境中，CO 的作用是
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_______________。此培养过程中为防止杂菌感染，需要添加一定量的_________。
(4)早期胚胎可通过___________(写明数字及名称)技术移入代孕母体子宫内继续发育，该技术在生产实
践中的意义在于______________________。
(5)通常用去核的卵母细胞作为受体细胞，此时的卵母细胞应该培养到________________(细胞分裂方
式及时期)，f细胞在形态上的特点是____。
11.下图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图，图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图。
图一 图二
(1)图一所示，制备细胞悬液时，常用__________酶来消化剪碎的组织块。配制培养液时，通常需要在
合成培养基的基础上添加__________等一些天然成分。当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时
就停止分裂，这种现象称为细胞的__________。
(2)ES细胞是由______中分离出来的一类细胞，ES细胞在功能上具有发育的_______。
(3)MEF细胞能够分泌某些蛋白质，其合成到分泌至细胞外的过程是：核糖体→_____→囊泡→_____→
囊泡，再通过_____方式分泌到细胞外。在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合
图二可推知MEF细胞的作用是____________________.
培优第二阶——拓展培优练
一、单选题
1.抗PD-L1单克隆抗体可与癌细胞表面的PD-L1特异性结合。如图是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意
图，相关说法错误的是（）
A. 过程①可加入灭活的病毒诱导两种细胞融合
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂B. 过程②加入多孔板的培养液中含有血清
C. 过程③培养后的细胞均能产生抗PD-L1单克隆抗体
D. 过程④利用抗原一抗体杂交技术进行检测和筛选
2.下列关于细胞工程的叙述，错误的是（）
A. 动物细胞培养体现了动物细胞的全能性
B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
3.在现代生物工程技术中，下列研究方案能实现其目的是（ ）
选项 方案 目的
A 诱导人胰岛B细胞和奶牛卵细胞融合 培育转基因克隆奶牛
B 将外源基因导入受体植物叶绿体中 防止外源基因扩散
C 通过体外培养或体内培养骨髓瘤细胞 制备单克隆抗体
D 用胃蛋白酶处理剪碎的动物组织块 制备动物细胞悬浮液
A. A B. B C. C D. D
4.用胚胎干细胞（ES细胞）定向诱导分化出人造组织器官进行自体移植，可以解决临床上存在的供体
器官不足和移植后免疫排斥的问题，下图表示胚胎干细胞分离和定向诱导分化的流程图，其中①～④
为 细 胞 或 细 胞 结 构 ， Ⅰ ～ Ⅳ 为 操 作 过 程 ， 下 列 叙 述 与 图 中 相 符 的 是 （ ）
A. 图中ES细胞是由③分离来的，此外还可以从原始性腺中分离
B. ES细胞在饲养层细胞上会向不同类型的组织细胞分化
C. 过程Ⅴ的结果多种多样体现了ES细胞具有发育的全能性
D. 图中所涉及的现代生物技术有体细胞核移植、动物细胞培养、早期胚胎培养等技术
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂5.CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作
用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6-5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞
的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照
如下流程进行了实验。下列叙述正确的是（ ）
A. 过程②中可用的诱导因素有灭活的病毒、聚乙二醇（PEG）、紫外线照射
B. 在乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后均可获得大量的抗CD47的单克隆抗体
C. 对照组应在巨噬细胞＋正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体
D. 过程①中给实验小鼠注射的CD47是能与抗CD47的单克隆抗体特异性结合的抗原
6.下表细胞工程技术应用中各组所选择的实验材料及材料特点与实验目的匹配错误的是( )
组别 实验目的 实验材料 材料特点
传代 10 代以内的细
1 克隆高产奶牛 能保持细胞正常的二倍体核型
胞
2 培育脱毒草莓 茎尖 分裂能力强，易诱发突变
培育番茄 - 马铃薯超级杂
3 花粉粒 易于获取，易于组织培养
种
分裂能力强，且不会引起免疫排
4 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞
斥
A. 1和2 B. 2和3 C. 3和4 D. 1和4
7.医学上常用器官移植来治疗人类的某些疾病，而利用人类胚胎干细胞可以解决器官移植中的很多问
题。下列关于材料的分析，不合理的是（ ）
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂A. 上述各种器官能够通过培养胚胎干细胞而获得的根本原因是基因选择性表达
B. 过程X通过显微操作的方法，将病人体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中
C. ③处细胞来自于早期胚胎①处的内细胞团细胞，具有发育的全能性
D. 滋养层细胞在囊胚期已发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定
8.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B. 细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同
C. 用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞
D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO 培养箱中进行培养
2
9.如图为细胞融合过程，以下叙述正确的是（ ）
①若A、B细胞为植物细胞，则它们都是已经用酶解法脱掉了细胞壁
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂②若A、B细胞的细胞膜蛋白质分别用红、绿荧光染料标记，到D细胞阶段，两种颜色的荧光可能均
匀分布
③若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为已免疫的B淋巴细胞，则D细胞称为杂交瘤细胞，D细胞经培养
产生的抗体为单克隆抗体
④若A、B细胞为动物细胞，则D细胞培养的原理是细胞全能性的表达
⑤与传统的有性杂交相比，细胞融合技术优越性在于定向地改造生物的性状
⑥人工诱导动物细胞融合可用灭活的病毒作为诱导剂，而植物细胞融合不能
A. ①②③⑥ B. ②③④⑤ C. ①②⑤⑥ D. ①②③④
二、填空题
10.人乳头状瘤病毒( HPV)与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从
而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答下列
问题：
（1）上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_____________________________________。
（2）形成的杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是_______________________，
在HAT培养基上存活的细胞可能包括下列哪些细胞？________________(填序号)。
①无抗体分泌的细胞②抗 HPV抗体的分泌细胞③其他无关抗体的分泌细胞
（3）对于抗体检测呈_____________性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化培养，克隆化的方法最常用的
是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个细胞/mL，每孔加入细胞稀释液_______________(填“0．1”“1”
或“10”)mL，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。
（4）制备的单克隆抗体可用于___________________________（说出两个应用）。
（5）科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细
胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外，请再
简要写出一种制备单克隆抗体的思路：__________________________________________。
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂11.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图,请回答
下列问题：
(1)图中卵母细胞应在体外培养到_________期，步骤①应先对卵母细胞进行_______处理。
(2)由图可知,步骤②要分离出ES细胞,需将重组胚胎培养到____________期，也可从_____________中
分离获取。如果将ES细胞置于饲养层细胞上，维持细胞的____________状态。
(3)步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞__________________，在细胞培
养的过程中，应在5%CO 的恒温培养箱中进行，CO 的作用是_________________________________ 。
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(4)步骤④的诱导，应在培养液中加入________________。
(5)为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用___________________技术。
(6)通过ES细胞发展的“治疗性克隆”，能够在一定程度上解决供体器官来源不足，并且可避免器官
移植过程中存在的_______________问题。
12.细胞融合又称体细胞杂交，是指两个或更多个相同或不同细胞融合形成单个细胞的过程。下图为细
胞融合的一般过程，请据图回答：
(1)若A、B为植物细胞，在细胞融合之前已用__________处理，除去了细胞壁；A、B到C的过程中，
常用的物理方法是_________(至少写两个)。形成的D细胞还要应用植物组织培养技术把D培养成植株。
(2) 若A、B是动物细胞，一般取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，原因是_________，然后用胰
蛋白酶处理使其分散开来；从A、B到C的过程中，常用的诱导剂是____。
(3)若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了________；
由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为克隆，这种细胞的特点是_______________。
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一、单选题
1.下列关于细胞工程的叙述，正确的是( )
A. 灭活病毒可诱导植物原生质体融合
B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需纤维素酶处理
C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D. 某种植物甲乙品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同
2.如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是（ ）
A. ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞
B. ②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C. ③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性
D. ④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
3.如图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体—药物偶联物（ADC）的示意图，它由抗体、
接头和小分子药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如用于治疗乳腺癌的 Kadcyla是
由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。下列叙述正确的是（ ）
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂A. Kadcyla的制备过程需要使用Taq酶
B. 单克隆抗体由免疫过的B淋巴细胞以胞吐方式释放
C. 药物美坦新识别并杀伤乳腺癌细胞体现了抗原—抗体的特异性结合
D. ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子容易脱落对正常细胞造成损伤
4.已知M基因在动物A的肝细胞中特异性表达出M蛋白。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基
因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流
程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂A. 对成纤维细胞进行营养限制性培养的目的是促进细胞增殖
B. 可以制备M蛋白的单克隆抗体来确定克隆动物A中M基因是否失活
C. 从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为细胞体积小，细胞核大，核仁明显
D. 在进行成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液
5.下列有关动物细胞工程操作的叙述，正确的是（ ）
A. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中除了加入细胞所需的各种营养
物质外，还需要加入琼脂
B. 单克隆抗体制备过程中，第一次筛选的目的是获得足够数量的能产生所需抗体的杂交瘤细胞
C. 干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等
D. 用动物体细胞核移植方法生产的克隆动物是对核供体进行了100%的复制
6.科研人员利用如图所示的流程，将小鼠多能干细胞（PSC）诱导成为精子，并使其成功与卵细胞受
精，得到正常后代，这项研究给男性无精症导致的不孕不育带来了福音。下列分析不合理的是
（ ）
A. PSC诱导形成精子的过程中，会发生细胞染色体数目的变化
B. 步骤④只能加入一个分化出的精子，以避免多个精子和卵细胞融合
C. 步骤⑤受精卵在体外培养时需提供95%空气和5%CO 的混合气体环境
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D. 上述流程利用了动物细胞培养、体外受精和胚胎移植等生物技术
7.如图表示体外培养胚胎干细胞使其形成不同类型细胞的过程。下列相关叙述正确的是（ ）
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂A. 该过程发生了基因重组 B. 细胞①与细胞②的遗传物质相同
C. 细胞③与胚胎干细胞的分化能力相同 D. 细胞①②③中的蛋白质完全不同
8.下列与细胞工程有关的叙述中，正确的是（ ）
A. 应用胚状体进行细胞产物的工厂化生产 B. 应用特定的杂交瘤细胞生产单克隆抗体
C. 应用灭活的病毒促进植物原生质体融合 D. 应用胃蛋白酶使动物组织分散成单个细胞
9.下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（ ）
A. 步骤①的操作不需要在无菌环境中进行
B. 步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C. 步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理
D. 步骤④培养过程中不会发生细胞转化
二、填空题
10.新型冠状病毒至2019年末爆发以来，一直持续到现在新冠疫情还未结束，对人类的生活造成一定
的影响，若为研制抗新型冠状病毒的单克隆抗体，某同学以小鼠为实验材料设计了如图的实验流程。
回答下列问题：
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂（1）实验注射灭活的新冠病毒目的是 ______。
（2）实验过程中需要进行两次筛选，图中筛选1的目的 ______，筛选2目的是 ______。
（3）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，能形成 ______种融合细胞，原因是 ______。
（4）在单克隆抗体纸杯过程中，需要用到动物细胞融合技术，动物细胞融合指 ______。
（5）若要使能产生抗新型冠状病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有 ______
（答出2点即可）。
11.科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可以同时
结合两种抗原。
（1）科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内，引起机体的______免疫，______分泌相应抗体。
（2）科研人员获得上述小鼠的脾脏细胞，制备两种杂交瘤细胞。每种杂交瘤细胞产生的抗体结构、
与抗原结合的情况如图1所示。
①制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织，用______处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细
更多资料添加微信号：hiknow_007 淘宝搜索店铺：乐知课堂胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞。将两种杂交瘤细胞用______试剂处理促进其融合，在培养基中加
入______（天然成分）培养。如果两种细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、
b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。
②抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进
行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区 A2、a或B2、b（a与b相同）。因此，
双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原α、β结合称为双特异性抗体，如图
2。请将A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中。
1 2 3 4 5 6
A2 ______ ______ ______ α ______
③为使双杂交瘤细胞只产生图 2所示双特异性抗体，降低纯化分离成本，科研人员对重链、轻链的结
构进行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定区通过改变______，进而改变蛋白质的空间结构，实
现“榫卯”式互补组装的唯一性，这种改造属于现代生物技术中的______工程。
（3）结合双特异性抗体特点，请分析其在肿瘤治疗方面的应用前景：______。
12.如图是有关细胞融合实验的示意图，请根据不同的实验操作回答问题：
（1）如甲细胞为人的细胞，乙细胞为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料
标记细胞膜上的蛋白质．在这两种细胞开始融合时，细胞膜上的蛋白质
“泾渭分明”，到融合过程完成时，两种颜色的荧光就均匀分布在丙细胞
的表面了，这一实验可以清楚地说明______．
（2）如果甲、乙细胞是叶肉细胞，那么在融合之前，你认为应选用______酶，将细胞壁去掉．在融
合过程中，常用的促融剂是______．
（3）如果甲代表动物的B淋巴细胞（可产生抗体），乙代表骨髓瘤细胞（不能产生抗体，可在培养
液中培养），融合成的丙细胞经免疫分析，就可筛选出具识别功能的杂交瘤细胞．这种细胞不仅可通
过______生殖方式无限繁殖，而且能够产生______，从而在医学诊断中，得到广泛重视和应用．
（4）如甲、乙两个细胞分别代表某种动物的雌雄配子，则两个细胞的融合过程为______．丙细胞核
中基因的来源是______．
（5）如甲细胞为甲牛的供核细胞，乙细胞为乙牛的去核卵细胞，两种细胞融合成丙细胞后，再培育
出一头小牛，则该小牛的大多数性状与______牛相似．
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