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第1章 发酵工程
能力提升卷
一、选择题:本题包括15小题,每小题2分,共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1.“格瓦斯”是由酵母菌和乳酸菌双菌发酵的传统谷物发酵饮料。传统做法是采用俄式大面包为基质,
加入菌种发酵生成微量乙醇、一定量的CO 以及丰富的有机酸等物质。下列相关叙述正确的是(
2
)
A.发酵过程需要密闭条件 B.两菌种的代谢类型相同
C.CO 由两菌种共同产生 D.两菌种间为互利共生关系
2
2.我国的酿酒技术历史悠久,古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载:将蒸熟的米
和酒曲混合前需“浸曲发,如鱼眼汤,净淘米八斗,炊作饭,舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化
冒出鱼眼大小的气泡,把八斗米淘净,蒸熟,摊开冷透。下列说法错误的是( )
A.“浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快
B.“鱼眼汤”现象是微生物呼吸作用产生的CO 释放形成的
2
C.“净淘米”是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施
D.“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡
3.甲、乙、丙为三种微生物,下表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能
在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲
丙都不能。下列说法正确的是( )
CaC
(NH )S HO MgSO
粉状硫 KH PO FeSO 蔗糖 4 2 2 l
培养 2 4 4 O 2
基 10 g 4 g 0.5 g 10 g 4 100 4 0.5
0.4g mL 9.25 g
g
Ⅰ + + + + - + + +
Ⅱ + + + - + + + +
Ⅲ + + + + + + + +
注 “+”表示培养基中加入了这种物质,“-”表示培养基中没有加入这种物质。
A.甲、乙、丙都是异养微生物
B.甲、乙都是自养微生物,丙是异养微生物
C.甲是异养微生物,乙是固氮微生物,丙是自养微生物
D.甲是固氮微生物,乙是自养微生物,丙是异养微生物
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂4.将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上,加盖后,以不同的方式处理,并放置在不同的温度环境
中,培养24小时后,所得结果如表:
编号 a b c d e f
接种大肠 接种大肠
接种 杆菌,并 杆菌,并 接种大肠
处理 覆盖一吸 覆盖一吸 杆菌,表 接种大肠 无接
大肠
方法 有抗生素 有抗生素 面全被醋 杆菌 种菌
杆菌 X的圆纸 Y的圆纸 覆盖
片 片
温度 40 ℃ 40 ℃ 40 ℃ 40 ℃ 0 ℃ 40 ℃
纸片周围
全表 全表 全表
观察 呈现一片 全表面 全表面
面呈 清晰区, 面清 面清
结果 其余表面 呈浑浊 清晰
浑浊 晰 晰
呈浑浊
根据上述实验结果所作出的判断,错误的是( )
A.编号a和f比较可知,有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊
B.根据编号b和c的观察结果,可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强
C.将编号e和a的结果比较可知,0 ℃的环境不适合大肠杆菌生长
D.若揭开编号f的盖子,24小时后培养基表面会出现浑浊
5.禾草灵(FE)是一种现代农业常用除草剂,大量使用后造成的环境污染日益严重,为获得能高效降
解FE的菌株,科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果(FE特
征吸收峰在239 nm处),以下说法不正确的是( )
A.应从大量使用FE的土壤中获取菌株
B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上
C.应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选
D.据吸收光谱可知,W1菌株对FE有明显降解能力
6.筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后,若细菌能分解淀粉,培养平板
经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈(如图),实验结果见下表。
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂菌种 菌落直径:C(mm) 透明圈直径:H(mm) H/C
细菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2
细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6
有关本实验的叙述,错误的是( )
A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B.筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布
C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
7.某实验室用两种方法进行酵母菌发酵葡萄糖生产酒精。甲发酵罐中保留一定量的氧气,乙发酵罐
中没有氧气,其余条件相同且适宜。实验过程中,每小时测定两发酵罐中氧气和酒精的量,记录数
据并绘成坐标曲线图。下列有关叙述正确的是( )
A.实验结束时,消耗葡萄糖较多的是甲发酵罐
B.甲、乙两发酵罐分别在第4 h和第0 h开始进行无氧呼吸
C.甲、乙两发酵罐实验结果表明,酵母菌为异养厌氧型生物
D.该实验证明向发酵罐中连续通入大量的氧气可以提高酒精的产量
8.在分离、纯化大肠杆菌实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图。下列叙述错误的是( )
A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
D.甲中a区域为划线的起始位置
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂9.果酒和果醋制作过程中,发酵条件的控制至关重要,下列相关措施正确的是( )
A.葡萄汁要装满发酵瓶,营造无氧环境,以利于发酵
B.在葡萄酒发酵过程中,每隔12 h左右打开瓶盖一次,放出CO
2
C.果酒发酵过程中温度控制在30 ℃,果醋发酵过程中温度控制在20 ℃
D.在果醋发酵过程中,要适时通过充气口充气,以利于醋酸菌的代谢
10.下列有关微生物培养和平板划线法的叙述,正确的是( )
A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度时,需在酒精灯火焰上灼烧接种环后直接进行划线
C.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
D.划线时要将最后一次的划线与第一次的划线相连
11.人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。下列关于果酒、果醋制作原理的叙述正
确的是( )
A. 在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是野生型酵母菌
B. 变酸的酒表面的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的
C. 在缺氧、呈酸性的发酵液中,醋酸菌能大量生长繁殖
D. 在酸性条件下,溴麝香草酚蓝水溶液与酒精反应呈现灰绿色
12.图为酿制葡萄酒的两个简易装置。相关说法错误的是( )
A. 自然发酵酿制时菌种来源是附着在葡萄皮表面的野生酵母菌
B. 装置中留有约1/3的空间,可以防止发酵旺盛时汁液溢出
C. 甲装置需要防止杂菌污染,而乙装置不需要
D. 甲装置中气压可以保持相对稳定,而乙装置不能
13.研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量,每一个浓度涂布四个平板,并
且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是( )
A. 涂布前,将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,燃尽后还要冷却8~10s
B. 涂布完成后,在培养皿的皿盖上做标记,以避免混淆,并将培养皿倒置培养
C. 计算平板上的菌落数时,四个培养皿上的菌落数无论多少,都要全部平均
D. 若空白对照组上有7个菌落,则在实验组数据基础上减去7,以获得最准确数据
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂14.某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因,先将原始菌种接种在1号培
养基上,培养出菌落后,将灭菌绒布在1号上印模,绒布沾上菌落并进行转印,使绒布上的菌落按
照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后,在2号上找到对应的菌落,然后接种到
不含链霉素的4号培养液中,培养后再接种到5号培养基上,并重复以上步骤。实验过程如右图所
示。下列相关叙述正确的是( )
A. 大肠杆菌抗链霉素的性状是由链霉素的选择作用引起的
B. 1号和5号采用平板划线法将菌种接种在相应选择培养基上
C. 4号与8号培养液中,大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大
D. 该实验缺乏对照实验,无法确定抗链霉素性状属于可遗传的变异
15.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛
的应用。有关无菌技术的叙述错误的是( )
A. 饮用前的鲜牛奶或使用后的液体培养基均可用高温瞬时消毒法进行处理
B. 用干热灭菌箱对带棉塞的试管灭菌时,可用报纸包裹严密后再进行灭菌处理
C. 用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,开始阶段需打开排气阀排尽锅内冷空气
D. 用紫外线对空气进行灭菌时,适量喷洒石碳酸等化学抑菌剂以加强灭菌效果
二、选择题:本题包括5小题,每小题3分,共15分,每小题有一个或多个选项符合题目要求,全
部选对得3分,选对但不全的得1分,有选错的得0分。
16.红酸汤是苗族人民的传统食品,它颜色鲜红、气味清香、味道酸爽。以番茄和辣椒为原料的红
酸汤制作流程如下。下列相关叙述中正确的是( )
→→→→
A.红酸汤制作过程中用到的微生物主要是乳酸菌
B.装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量
C.装坛时不装满的原因是为了促进微生物繁殖
D.红酸汤的制作中发酵时间越长,口味越纯正
17.利用卷心菜发酵制作泡菜过程中,乳酸菌、酵母菌细胞数量(相对值)和pH的变化如图所示,下
列叙述错误的是( )
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂A.酵母菌和乳酸菌均有以核膜为界限的细胞核
B.发酵初期乳酸菌具有明显的菌种优势
C.发酵初期pH下降主要由乳酸菌代谢引起
D.发酵中期酵母菌通过有氧呼吸进行增殖
18.研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素的条件进行了研究。
据图分析正确的是( )
A.筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养
B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右
C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35 ℃
D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境
19.野生型大肠杆菌能够在基本培养基中生长,突变菌株 A和突变菌株B由于不能自己合成某些营
养素,而不能在基本培养基上生长。科学工作者利用菌株A和菌株B进行了如下两个实验。实验一:
将菌株A和菌株B混合后,涂布于基本培养基上,结果如图1;实验二:将菌株A和菌株B分别置
于U型管的两端,中间由过滤器隔开。加压力或吸力后,培养液可以自由流通,但细菌细胞不能通
过。经几小时培养后,将菌液A、B分别涂布于基本培养基上,结果如图2。下列推测错误的是(
)
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂A.菌株之间可能发生类似有性杂交的现象
B.不同菌株间接触后才可能交换遗传物质
C.菌株A和菌株B含有相同的突变基因
D.混合培养的菌株不一定都能在基本培养基上生长
20.大平板计数异常是指在对自然样品(如土壤)中微生物细胞数进行评估时,显微直接计数法得
到的菌体数远远大于平板计数法得出的菌体数。出现大平板计数异常的原因有( )
A. 一种培养基和培养条件不能符合全部微生物的生长需求
B. 培养时间较短时,平板上的菌落数目没有达到最大值
C. 平板上两个或多个相邻的菌落形成一个菌落
D. 显微直接计数能逐一对细胞进行统计,比平板计数精确
三、非选择题:本题包括5小题,共55分。
21.(10分)谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸,从而制取谷氨酸钠(味精)。下图为
谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径,通过发酵工程可以大量生产谷氨酸。回答下列问题:
(1)与酵母菌相比,谷氨酸棒状杆菌在结构上的主要特点是__________________
___________________________;谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢
二钾、硫酸镁、生物素等,从物理状态看,该培养基属于________培养基。
(2)测定谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法有显微镜直接计数法和____________________,前者
计数的结果比后者计数的结果值更________(填“大”或“小”),原因是
_____________________________________________________________________。
(3)由图可知,谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸,则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性,微生物
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂这种对自身代谢速率的调节方式是____________________。
(4)谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要严格控制发酵液的pH。在中性和弱碱性条件下会积累________;
在酸性条件下则容易形成________和________。
22.(10分)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细
菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中
需要甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。
回答下列问题:
(1)实验时,盛有水或培养基的摇瓶通常采用________的方法进行灭菌。乙培养基中的 Y物质是
________。甲、乙培养基均属于________培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107 个/mL,若要在每个平板上涂布100 μL稀释后的
菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中,发现当培养基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,
其原因可能是________________________________(答出1点即可)。
(4) 若 要 测 定 淤 泥 中 能 降 解 S 的 细 菌 细 胞 数 , 请 写 出 主 要 实 验 步 骤 :
____________________________________________________________________。
(5)上述实验中,甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长提供 4类营养物质,
即____________________________________________________________________。
23.(11分)酸奶是牛奶经过乳酸菌(主要是保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌)发酵制成的。乳酸菌可将
牛奶中的乳糖转化为乳酸,从而减轻某些人群的乳糖不耐受症状。请回答问题:
(1)为鉴别市售酸奶中的菌种,应该采用平板划线法或____________法,在____________培养基上进
行接种,观察所获单菌落的特征。还要对菌落中的菌种进行涂片,并用____________进行进一步的
观察和鉴定。
(2)实验前需要进行灭菌的是____________。
a.培养基 b.培养皿 c.恒温培养箱 d.实验者的双手
e.酸奶
(3)某同学在配制平板时加入CaCO ,从而成功筛选出高效产生乳酸的菌株,其筛选依据的原理是
3
____________________________________________________________________。
(4)抗生素在现代畜牧业中的广泛应用,不可避免地造成牛奶中抗生素残留。若长期饮用含有抗生素
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂的牛奶,会对人体健康造成危害。利用嗜热链球菌对抗生素的高敏感性,该生进行了如下实验:
将灭菌的滤纸圆片(直径8 mm),分别浸润在不同处理的牛奶中一段时间后,放置在涂布了嗜热链球
菌的平板上(如图),在37 ℃下培养24 h,测量结果如下表:
组别 牛奶处理方法 抑菌圈宽度(mm)
1 含抗生素消毒鲜牛奶 4.5
2 不含抗生素消毒鲜牛奶 0
3 含抗生素鲜牛奶 4.6
4 不含抗生素鲜牛奶 0
5 待测奶样 5.8
注:消毒方法为80 ℃水浴加热5 min,然后冷却至37 ℃。
通过3、4组实验可得出的结论为____________________;通过1、3组实验可得出的结论为:
____________________;第 5 组的实验结果表明,此待测奶样是否适合用于制作酸奶?
__________________________________________________。
24.(12分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中
加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。
回答下列问题:
(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制________的生长,加入了链霉素
的培养基属于________培养基。
(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有
____________(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有____________(答出两
点即可)。
(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂
筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是________,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是
_____________________________________________________________________。
(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以
下结果:
甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个
更多资料添加微信号:hiknow_007 淘宝搜索店铺:乐知课堂平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同
学 的 结 果 可 信 度 低 , 其 原 因 是
_____________________________________________________________。
25.(12分)如图1表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题:
(1)图1中接种工具的名称是________,制备培养微生物的培养基时,灭菌与调 pH的先后顺序是
________________________________。
(2)步骤②中,将接种工具冷却的原因是____________________________________________。
(3)图1所示接种方法的目的是_________________________________________________________。
(4)分别取三个平板用稀释涂布平板法培养三种细菌(E.coli、S.albus、B.subtilis),然后在培养基上打
出直径为3 mm的孔,并在孔中加入一定浓度的甲抗生素,经过一定时间培养后,可以在孔的周围
观察到一圈清晰区,这是甲抗生素抑制细菌生长所致的。测量清晰区的直径(如图2所示),数据如
表所示。
不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径(mm)
细菌
5μg/mL 7.5μg/mL 10μg/mL 15μg/mL 20μg/mL
E.coli 7 10 14 16 16
S.albus - 5 8 13 17
B.subtilis 5 7 9 14 19
①比较10 μg/mL甲抗生素和20 μg/mL甲抗生素分别在控制E.coli和S.albus方面的作用效果:
____________________________________________________________。
②三种细菌中对低浓度甲抗生素最不敏感的是______。
③有人因感染了B.subtilis而患病,医生使用甲抗生素给予治疗,试用生物进化理论解释为什么用
25 μg/mL的甲抗生素治疗该病人是不明智的做法:__________________________________________。
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