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专题08 生物技术与工程
（2024 年1 月黑龙江省、吉林省普通高等学校招生考试适应性测试）7. 《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、
止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品
种，满足人们食用和药用需要。下列叙述错误的是（ ）
A. 应用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗
B. 可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体
C. 富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素
D. 应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种
的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、应用微型繁殖技术采用茎尖作为外植体可获得大量樱桃脱毒苗，A 正确；
B、由于芽原基和叶原基分裂能力旺盛，因而可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体，B 正确；
C、生长素是由色氨酸经过一系列转变产生的，因此，用富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生
长素，C 正确；
D、应用樱桃细胞培养可工厂化生产次生代谢产物槲皮素，D 错误。
故选D。
（2024 年1 月黑龙江省、吉林省普通高等学校招生考试适应性测试）8. 鸡蛋表面污染的细菌会逐渐侵入蛋
内，缩短鸡蛋保质期。对某地不同季节及不同养殖模式下生产的鸡蛋取样，按每克鸡蛋用1mL 无菌生理盐
水清洗鸡蛋表面，收集清洗液，培养计数结果如下表。下列叙述错误的是（ ）
季节
菌落数（个·g-1）
半封闭式养殖模
式
全封闭式养殖模式
夏季
3.92×104
7.24×103
冬季
7.60×104
1.24×104
A. 表中数据是对清洗液稀释1×10² 倍后涂板获得的
B. 稀释涂布平板法得到的鸡蛋表面菌落数比实际数略少
C. 比较两种养殖模式可知鸡蛋表面的细菌主要来自环境
D. 冬季鸡舍更需要消毒以减少鸡蛋表面的细菌污染
1
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【答案】A
【解析】
【分析】测定微生物数量的方法：①直接计数法：常用显微镜直接技术法，一般适用于纯培养悬浮液中各
种单细胞菌体的计数。②间接计数法：常用稀释平板计数法，平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样
品中一个微生物个体。
【详解】A、按每克鸡蛋用1mL 无菌生理盐水清洗鸡蛋表面，收集清洗液，因此表中数据不是对清洗液稀
释1×10² 倍后涂板获得的，A 错误；
B、由于两个或更多的细胞可能聚集在一起形成一个菌落，因此稀释涂布平板法得到的鸡蛋表面菌落数比
实际数略少，B 正确；
C、半封闭式养殖模式下的鸡蛋表面菌落数明显高于全封闭式养殖模式，这说明环境中的细菌更容易污染
鸡蛋表面，C 正确；
D、从表中数据可以看出，冬季鸡蛋表面的菌落数明显高于夏季，这可能是因为冬季气温低，细菌更容易
在鸡蛋表面生存和繁殖，因此需要加强消毒措施，D 正确。
故选A。
（2024 年1 月黑龙江省、吉林省普通高等学校招生考试适应性测试）9. 为探究H 基因对肿瘤细胞M 增殖
能力的影响，分别将H 基因和突变h 基因过量表达的细胞M 在含琼脂的半固体培养基中培养，检测细胞克
隆（由单个细胞分裂形成的肉眼可见的细胞群）数量如下表，作为判断肿瘤细胞恶性程度的指标之一。下
列叙述错误的是（ ）
①
②
③
④
10%血清
-
+
+
+
H 基因
-
-
+
-
突变h 基因
-
-
-
+
细胞克隆数量（个）
5
9
15
27
注：“+”表示加入或过量表达；“-”表示未加入或无表达
A. 血清为细胞M 的生长增殖提供了营养物质等天然成分
B. 克隆间相互离散，能有效避免克隆内细胞的接触抑制
C. H 基因的过量表达导致克隆数增加，说明其不是抑癌基因
D. 突变h 基因过量表达，容易引起细胞M 在体内分散和转移
【答案】B
2
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【解析】
【分析】癌细胞的特征：
（1）具有无限增殖的能力；
（2）细胞形态结构发生显著变化；
（3）细胞表面发生改变，细胞膜上的糖蛋白等物质降低，导致细胞彼此间的黏着性减小，易于扩散转移；
（4）失去接触抑制。
【详解】A、在进行动物细胞培养时，培养液中通常需加入血清、血浆等一些天然成分，主要目的是为细
胞提供促生长因子，以补充细胞生长和增殖过程中所需的营养物质，A 正确；
B、形成的肉眼可见的细胞群过程中发生了基因突变，则可能不会出现接触抑制现象，B 错误；
C、原癌基因负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的过程，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增殖，
原癌基因突变使相应的基因产物过量表达可引起细胞癌变，因此H 基因的过量表达导致克隆数增加，说明
其不是抑癌基因，C 正确；
D、突变h 基因过量表达，导致细胞克隆数量增多，容易引起细胞M 在体内分散和转移，D 正确。
故选B。
（2024 年1 月黑龙江省、吉林省普通高等学校招生考试适应性测试）10. 胚胎工程等生物技术促进了具有
优良性状和经济价值的动物快速繁育与应用。下列叙述错误的是（ ）
A. 克隆珍稀野生动物，可使用体细胞核移植结合胚胎工程技术
B. 胚胎分割技术可增加移植胚胎数目，还可产生遗传性状相同的后代
C. 为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精
D. 动物胚胎移植前，控制胚胎性别比例可降低后代的伴性遗传病发病率
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
【详解】A、克隆珍稀野生动物，可使用体细胞核移植结合胚胎工程技术，该过程实现了濒危动物的保护，
A 正确；
B、胚胎分割技术属于无性繁殖技术，因而可产生遗传性状相同的后代，B 正确；
C、为提高体外受精成功率，新采集的精子应需要经过获能培养才能受精，C 错误；
D、伴性遗传往往表现与性别有关，因此可根据患病动物的特征，在动物胚胎移植前，控制胚胎性别比例
可降低后代的伴性遗传病发病率，D 正确。
故选C。
（2024 年1 月黑龙江省、吉林省普通高等学校招生考试适应性测试）18. 为保障粮食安全，我国科研人员
3
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以富含纤维素的农业残渣（秸秆）为原料，利用基因工程改造面包酵母使其表面携带相关酶，可同时高效
生产人工淀粉和单细胞蛋白。部分生产工艺如下图，下列叙述正确的是（ ）
注：酵母增殖的适宜温度为28~32℃，适宜pH 为4.0~5.0；酵母发酵的适宜温度为24~35℃，适宜pH 为
5.0~5.8
A. 面包酵母的增殖能促进纤维二糖水解及淀粉合成
B. 生产单细胞蛋白时选择26℃、pH5.5 的条件为宜
C. 本生产过程最宜在不加通气和搅拌的啤酒发酵罐中进行
D. 生产前培养基高压蒸汽灭菌的条件可为121℃、20min
【答案】AD
【解析】
【分析】分析图中过程，可知改造的面包酵母表面携带帮助纤维二糖水解和淀粉合成的酶，通过其繁殖可
以协助利用纤维素合成人工淀粉。
【详解】A、面包酵母表面携带促进纤维二糖水解的酶和促进淀粉合成的酶，因此其增殖能促进纤维二糖
水解及淀粉合成，A 正确；
B、生产单细胞蛋白需要令酵母菌增殖，适宜温度为28~32℃，适宜pH 为4.0~5.0，B 错误；
C、本生产过程要使面包酵母增殖，应当在有氧环境下进行，C 错误；
D、在121℃、100kPa 条件下处理15~30min，将培养基彻底灭菌，以避免培养基上的微生物影响实验结果，
D 正确。
故选AD
（2024 年1 月黑龙江省、吉林省普通高等学校招生考试适应性测试）25. 植物在高于胞内Na⁺浓度的环境
下，SOS3 和SOS2 激活位于质膜上的转运蛋白SOS1，SOS1 通过SOS 信号通路与胞质内Na⁺结合并将其排
出细胞外，维持其正常生命活动。回答下列问题：
（1）植物利用SOS 信号通路将Na⁺排出细胞外，这种运输方式的特点是___________。
4
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（2）通过基因工程在水稻中过量表达SOS1 蛋白，以期增强水稻抗盐能力。
①为获得编码SOS1 蛋白的基因，可提取野生型水稻总RNA，通过___________获得模板DNA，再经PCR
获得SOS1 基因片段。
②测序表明，SOSI 基因编码序列含有3444 个核苷酸，其中A+T 含量占53%，模板链中C 含量为26%，那
么SOSl 基因双链序列中G+C 的含量为___________%。
③构建表达载体时，在下图所示载体含有的限制酶识别位点插入SOSI 基因。序列分析发现SOSI 基因内部
有XbaI 的识别序列，为使载体中SOSI 基因和绿色荧光蛋白基因正确表达，应在SOSl 基因两端分别添加
___________两种限制酶的识别序列，将SOSI 基因插入载体前，应选用___________两种限制酶对载体酶
切。
（3）重组质粒转化水稻后，选取可发绿色荧光的植株，鉴定其抗盐能力是否增强，采取的操作是
___________。
（4）若发现水稻中过量表达SOSI 基因并不能明显提高其抗盐能力，从信号通路角度分析，可能的原因是
5
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___________。
【答案】（1）需要能量、需要载体
（2） ①. 逆转录 ②. 47 ③. Spe Ⅰ、EcoR Ⅰ ④. Xba Ⅰ、EcoR Ⅰ
（3）将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内Na⁺浓度的环境下，观察两种水稻的生长状况。
（4）过量表达SOSⅠ基因使转运蛋白SOS1 含量增多，SOS1 通过SOS 信号通路将胞质内的Na⁺过多地排出
细胞外，影响细胞本身对Na+的利用
【解析】
【分析】转运蛋白可以分为载体蛋白和通道蛋白两种类型：
（1）载体蛋白只容许与自身结合部位相适应的分子或离子通过而且每次转运时都会发生自身构象的改变；
（2）通道蛋白只容许与自身通道的直径和形状相适配、大小和电荷相适宜的分子或离子通过。分子或离
子通过通道蛋白时，不需要与通道蛋白结合。
【小问1 详解】
由题干信息“在高于胞内Na⁺浓度的环境下，SOS1 通过SOS 信号通路与胞质内Na⁺结合并将其排出细胞
外”可知，植物利用SOS 信号通路将Na⁺排出细胞外是逆浓度梯度的运输，因此运输方式为主动运输，特
点是需要转运蛋白，需要能量。
【小问2 详解】
①为获得编码SOS1 蛋白的基因，可提取野生型水稻总RNA，通过逆转录获得模板DNA，再经PCR 获得
SOSI 基因片段。
②SOSI 基因编码序列中A+T 含量占53%，则G+C 含量为47%。
③由图可知，荧光蛋白基因内部存在Spe Ⅰ和BamH Ⅰ两种限制酶切序列，因此对载体酶切时不能选择这两
种酶，并且不能选择限制酶SmaⅠ，否者会导致载体中SOS1 基因和绿色荧光蛋白基因不能正确表达，故选
择Xba Ⅰ和EcoR Ⅰ两种限制酶对载体酶切，由于SOS1 基因内部有Xba I 的识别序列，故不能选择限制酶
Xba I 对目的基因酶切，但需要目的基因有与载体相同的黏性末端，故可在SOSⅠ基因两端分别添加Spe Ⅰ
和EcoR Ⅰ两种限制酶两种限制酶的识别序列。
【小问3 详解】
鉴定水稻抗盐能力是否增强，采取的操作是将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内Na⁺浓度的环境下，
观察两种水稻的生长状况。
【小问4 详解】
过量表达SOSⅠ基因使转运蛋白SOS1 含量增多，SOS1 通过SOS 信号通路与胞质内
Na⁺过多地排出细胞
外，影响细胞本身对Na+的利用。
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（2024 年1 月江西省普通高等学校招生考试适应性测试）10. 我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量
美味食品，如酱油、腐乳、豆豉等，传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工
程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，错误的是（ ）
A. 工业化生产啤酒时，酵母菌
繁殖主要在主发酵阶段完成
B. 腐乳和果醋都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品
C. 水封泡菜坛的目的是隔绝空气，确保坛内乳酸菌发酵处于无氧环境
D. 泡菜“咸而不酸”是因为盐水浓度过高，抑制乳酸菌发酵所致
【答案】B
【解析】
【分析】与果酒、果醋的生产有关的微生物分别是酵母菌、醋杆菌，泡菜腌制过程中起作用的主要是乳酸
菌。
【详解】A、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，A 正确；
B、腐乳和果醋都是在有氧条件下发酵产生的传统食品，B 错误；
C、乳酸菌是厌氧菌，水封泡菜坛的目的是隔绝空气，确保坛内乳酸菌发酵处于无氧环境，C 正确；
D、制作泡菜时，如果盐水浓度过高，乳酸菌会通过渗透作用失水，抑制乳酸菌生长，制作的泡菜会“咸
而不酸”，D 正确。
故选B。
（2024 年1 月江西省普通高等学校招生考试适应性测试）11. 脂质体可作为运载工具，将药物分子运送到
特定的细胞内发挥作用。为了提高药物运送的特异性，可在脂质体表面连接识别特定细胞的单克隆抗体，
形成药物—脂质体—单克隆抗体复合物（见图）。下列叙述错误的是（ ）
A. 脂质体的作用是帮助复合物通过主动运输进入特定细胞内
B. 可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来获取大量的单克隆抗体
C. 复合物中的药物借助单克隆抗体和细胞表面抗原的相互作用来实现运送的特异性
D. 单克隆抗体的制备需使用特定的选择培养基来筛选杂交瘤细胞
【答案】A
【解析】
7
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【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B 细胞，将效应B 细
胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培
养），最后获取单克隆抗体。
【详解】A、脂质体的作用是帮助复合物通过胞吞进入特定细胞内，A 错误；
B、可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来获取大量的单克隆抗体，也可在体外培养，B 正确；
C、单克隆抗体和细胞表面抗原可以特异性结合，运送药物到特定的细胞，药物起到杀伤作用，C 正确；
D、根据细胞DNA 复制的特点，可以利用特定的培养基选择出杂交瘤细胞，D 正确。
故选A。
（2024 年1 月江西省普通高等学校招生考试适应性测试）12. 萤火虫的荧光素酶能催化ATP 激活的荧光素
氧化发光，这一现象在生物检测和成像方面有重要的应用价值。为了解决天然荧光素酶不能高效催化人工
合成的荧光素DTZ 发光的问题，研究人员采用蛋白质工程（又称为第二代基因工程）对它进行了改造。下
列关于蛋白质工程改造天然荧光素酶的叙述，正确的是（ ）
A. 通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列
B. 改造天然荧光素酶所用的基因表达载体不需要启动子和终止子
C. 可用PCR 方法检测突变的荧光素酶基因是否翻译成蛋白质
D. 改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ 发光是将化学能转化为光能
【答案】D
【解析】
【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基
因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求（基因工程在
原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，
找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），以上是蛋白质工程特有的途径；后续按照基因工程的一般步骤进
行。
【详解】A、通过化学诱变剂可以让天然荧光素酶的基因序列进行随机突变，但化学诱变通常是不定向的，
A 错误；
B、改造天然荧光素酶所用的基因表达载体必须包含启动子和终止子，启动子是驱动基因转录的元件，而
终止子是指示转录终止的位置，B 错误；
C、PCR 方法主要用于检测 DNA 的存在或者染色体 DNA 上是否插入目的基因，检测目的基因是否翻
译为蛋白质的方法为抗原﹣抗体杂交，C 错误；
D、改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ 发光是将化学能转化为光能，D 正确。
8
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故选D。
（2024 年1 月江西省普通高等学校招生考试适应性测试）18. 蒽是石油化工领域常见的一种多环芳烃化合
物，对生物有毒且难以降解，会带来严重的环境问题。研究人员成功地从环境样品中分高得到能降解蒽的
菌株A 和B．回答下列问题：
（1）用于分离菌株A 和B 的固体培养基含有（NH4）3SO4、MgSO4、CaCl2、NaH2PO4、K2HPO4、NaCl、
FeSO4、H2O、琼脂、蒽等成分。其中为细菌生长提供碳源的成分是_____；该碳源在菌株A 和B 内的代谢
产物可以参与合成_____（答出2 种即可）等生物大分子。
（2）为鉴定菌株A 和B，研究人员提取了菌株A 和B 的基因组DNA，并用PCR 扩增16S rRNA 基因。为
了验证提取基因组DNA 是否成功，采用二苯胺试剂鉴定，其原理是_____。在PCR 扩增16SrRNA 基因过
程中，反应体系中引物的作用是_____。在PCR 播环的3 个步骤中，温度设置最高的是_____。
（3）菌株A 和B 降解蒽的过程相同，均由按严格顺序排列的一系列静催化反应组成。为探究菌株A 和B
对蒽的降解能力，研究人员采用单独、混合接种（菌株AB 接种量之比为1：1）方式开展实验（所有实验
组接种总量一致）结果如表，由表可以看出菌株A 和B 混合接种比单独接种对蒽的降解效果更好，其原因
可能是_____。
接种方式
单独接种
混合接
种
菌株
A
菌株
B
降
解
率
（%）
41.7
20.9
65.2
【答案】18. ①. 蒽 ②. 蛋白质、核酸
19. ①. 在一定温度下，DNA 遇二苯胺试剂呈蓝色 ②. 界定目的基因，为DNA 聚合酶提供结合位
点并使DNA 聚合酶能够从引物的3'端连接脱氧核苷酸 ③. 变性
20. 菌株B 整合了菌株A 对蒽高降解
基因，发生了转化
【解析】
【分析】选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养
基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。
【小问1 详解】
研究人员成功地从环境样品中分高得到能降解蒽的菌株A 和B，所以蒽为细菌生长提供碳源，碳源在菌株
A 和B 内的代谢产物可以参与合成蛋白质、核酸等生物大分子。
9
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【小问2 详解】
在一定温度下，DNA 遇二苯胺试剂呈蓝色，所以二苯胺试剂可以作为鉴定DNA 的试剂。
在PCR 获取目的基因时，引物的作用是界定目的基因，为DNA 聚合酶提供结合位点并使DNA 聚合酶能够
从引物的3'端连接脱氧核苷酸。
PCR 的每次循环一般包括变性、复性、延伸三步，其中变性过程是利用高温将双链解开，所需温度最高。
小问3 详解】
分析表格可知：混合接种相对于单独接种对蒽的降解率更高，有可能是因为菌株B 整合了菌株A 对蒽高降
解的基因，发生了转化。
（2024 年1 月河南省普通高等学校招生考试适应性测试）6. 黄豆酱是人们喜爱的传统美食，早在春秋时期
就有制作方法的相关记载。它以黄豆为主要原料，经米曲霉（好氧菌）、酵母菌、乳酸菌等微生物发酵而
成。劳动人民在制作过程中不断改进发酵技术，总结出以下经验。下列叙述错误的是（ ）
①选用具有高蛋白酶活性的米曲霉
②用蒸煮后的大豆与米曲霉混合堆积
③将初步发酵后含米曲霉等微生物的曲料摊薄，并适当通风
④在装坛时，添加适量食盐
⑤发酵过程中，需保持发酵坛密封
⑥发酵过程中，需定期搅拌
A. ①和④对黄豆酱风味
形成起重要作用，利于提升品质
B. ②和⑥可以促使微生物和物料充分混合，提高发酵效率
C. ③有利于米曲霉和酵母菌进行有氧呼吸并快速大量增殖
D. ⑤中乳酸菌主要集中于发酵坛上部而米曲霉集中于下部
【答案】D
【解析】
【分析】米曲霉是真菌的一种，米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油
过程所需的酶类，这些酶（如蛋白酶和脂肪酶）中能将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独
特的成分。
【详解】A、米曲霉能够分泌蛋白酶能够将黄豆酱中的蛋白质分解，而食盐一方面可以抑制杂菌生长，一
方面可以调味，故①和④对黄豆酱风味的形成起重要作用，利于提升品质，A 正确；
B、米曲霉是好氧菌，且能够分泌蛋白酶将黄豆酱中的蛋白质分解，故②和⑥可以促使微生物和物料充分
混合，提高发酵效率，B 正确；
10
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C、米曲霉是好氧菌，而酵母菌也可以进行有氧呼吸，故③有利于米曲霉和酵母菌进行有氧呼吸并快速大
量增殖，C 正确；
D、乳酸菌属于厌氧菌，米曲霉是好氧菌，故⑤中米曲霉主要集中于发酵坛上部而乳酸菌集中于下部，D
错误。
故选D。
（2024 年1 月河南省普通高等学校招生考试适应性测试）11. 水稻胚乳可作为生物反应器用于开发功能性
产品。从猪瘟病毒抗原蛋白的预期功能出发，研究小组设计其预期的结构，推测应有的氨基酸序列，合成
新的基因X。利用PCR 技术对其进行扩增并连接启动子1，形成Z 片段。把Z 片段插入Ti 质粒的T-DNA
中，将构建好的基因表达载体导入水稻细胞完成转化，在胚乳中获得相应蛋白，最终将蛋白进一步加工为
植物源猪瘟疫苗。相关信息如图所示。
回答下列问题。
（1）研究小组通过PCR 扩增Z 片段，延伸过程中，4 种脱氧核苷酸在______催化作用下合成新的DNA 链。
酶切时，限制酶识别序列的重叠会降低切割效率。为构建基因表达载体，选择限制酶Hind Ⅲ和______进
行切割，可使Z 片段插入T-DNA 的效率最高。为使基因能够正常表达，质粒上的N 和J 应都为______。
（2）为获得含蛋白X 的水稻材料，首先诱导水稻种子脱分化形成______，然后通过______的侵染，使目
的基因进入水稻细胞并完成转化，再将其转接到含特定激素的培养基上，诱导其______形成具有根、茎、
叶的完整植株。
（3）为验证水稻中目的基因X 是否表达（转录和翻译），分子水平上的检测方法有______（答出2 点即
可）。
（4）从猪瘟病毒抗原蛋白的预期功能出发，合成基因X，进而得到猪瘟疫苗的过程属于______工程的范畴。
相较于大肠杆菌，水稻胚乳作为生物反应器制备疫苗的优势及理由有_____（答出1 点即可）。
11
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【答案】11. ①. 耐高温的DNA 聚合酶 ②. EcoR Ⅰ ③. 终止子
12. ①. 愈伤组织 ②. 农杆菌 ③. 再分化
13. 通过PCR 技术检测水稻细胞中目的基因X 是否转录出了mRNA；从转基因水稻中提取蛋白质，用相应
的抗体进行抗原—抗体杂交检测是否翻译出了蛋白质
14. ①. 蛋白质 ②. 水稻胚乳细胞比大肠杆菌多了复杂的生物膜系统，可对基因X 的表达产物进行
正确地加工与折叠，产生具有生物活性的重组蛋白质
【解析】
【分析】1、基因工程是一种DNA 操作技术，需要借助限制酶、 DNA 连接酶和载体等工具才能进行。它
的基本操作程序包括： 目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的
基因的检测与鉴定。
2、PCR 是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA 半保留复制的原理，在体外提供参与DNA 复制的
各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术 。
3、蛋白质工程是基因工程的延伸，是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过
改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。
【小问1 详解】
PCR 是根据DNA 半保留复制的原理在体外进行DNA 复制的技术，体外DNA 复制过程中用超过90 ℃的温
度处理DNA 使其解旋，因此，在子链延伸过程中，4 种脱氧核苷酸要在耐高温的DNA 聚合酶催化合成新
的DNA 链。依题意，酶切时，限制酶识别序列的重叠会降低切割效率。Xba Ⅰ与Hind Ⅲ识别序列有重叠，
不符合题目要求。EcoR Ⅴ所切末端为平末端，连接效率低，不符合题目要求。EcoR Ⅰ识别序列与Hind Ⅲ
识别序列无重叠，产生的切口是黏性末端，连接效率相对平末端高。为使基因能够正常表达，基因结构的
上游和下游各有启动子和终止子，因此，N 和J 应都为终止子。
【小问2 详解】
为获得含蛋白X 的水稻材料，首先诱导水稻种子脱分化形成愈伤组织，然后通过农杆菌的侵染，使目的基
因进入水稻细胞并完成转化，再将其转接到含特定激素的培养基上，诱导其再分化形成具有根、茎、叶的
完整植株。
【小问3 详解】
为验证水稻中目的基因X 是否表达（转录和翻译），可通过PCR 技术检测水稻细胞中目的基因X 是否转
录出了mRNA；可从转基因水稻中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交检测是否翻译出了蛋白
质。
【小问4 详解】
蛋白质工程是基因工程的延伸，是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造
12
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或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。因此，从猪瘟
病毒抗原蛋白的预期功能出发，合成基因X，进而得到猪瘟疫苗的过程属于蛋白质工程的范畴。相较于大
肠杆菌细胞，水稻胚乳细胞多了复杂的生物膜系统，可对基因X 的表达产物进行正确地加工与折叠，产生
具有生物活性的重组蛋白质。
（2024 年1 月贵州省普通高等学校招生考试适应性测试）15. 植物体细胞杂交技术可克服种间生殖隔离。
应用该技术获得“番茄-马铃薯”杂种植株，拓展了植物的种质资源。下列叙述正确的是（ ）
A. 植物细胞壁的水解需要纤维素酶和几丁质酶
B. 愈伤组织是由已分化的细胞所构成的细胞团
C. 杂种细胞的染色体数一定是原细胞染色体数的2 倍
D. “番茄-马铃薯”杂种植株未表现出亲本的所有性状
【答案】D
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育
成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇
等）。
【详解】A、植物细胞有细胞壁，细胞壁阻碍细胞的杂交，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，
根据酶的专一性，在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原
生质体，A 错误；
B、愈伤组织是由已分化的细胞经过初分化而形成的具有分生能力的薄壁细胞，B 错误；
C、杂种细胞的染色体数不一定是原细胞染色体数的2 倍，C 错误；
D、生物体中基因的作用是相互的，且基因控制相关性状，“番茄一马铃薯”杂种植株没达预期目标与基
因无法有序表达有关，D 正确。
故选D。
（2024 年1 月贵州省普通高等学校招生考试适应性测试）16. 利用动物体细胞核移植技术可培育高产奶牛，
流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 犊牛W 有母牛X 细胞中的线粒体DNA
B. 犊牛W 的遗传性状与母牛X 相似度更高
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C. 重构胚的形成可采用电融合的方法
D. 细胞培养时需添加氨基酸等营养物质
【答案】B
【解析】
【分析】核移植技术：将供体细胞核注入去核卵母细胞，通过电激等使细胞融合，得到重组细胞，激活得
到重组胚胎，将胚胎移植到受体雌性动物体内。
【详解】A、母牛X 提供细胞质，因此犊牛W 有母牛X 细胞中的线粒体DNA，A 正确；
B、母牛Y 提供细胞核，细胞核是遗传信息库，因此犊牛W 的遗传性状与母牛Y 相似度更高，B 错误；
C、可以采用电融合法促使两个细胞融合形成重构胚，C 正确；
D、细胞培养时需添加氨基酸、糖等营养物质供给细胞正常生命活动需要，D 正确。
故选B。
（2024 年1 月贵州省普通高等学校招生考试适应性测试）21. 风肉一般是以鲜肉为原料，用食盐腌制后，
经风干和微生物后发酵而成。在后发酵期，风肉含有耐盐的微生物。某实验小组为研究耐盐微生物的耐盐
基因，设计实验如下。回答下列问题。
（1）实验小组为获得耐盐纯培养物A，使用的培养基应是__________（选填“普通培养基”或“选择培养
基”），使用的接种方法是__________。
（2）为获得纯培养物A 的耐盐基因X，实验小组应用纯培养物提取了DNA。在一定温度下，用二苯胺试
剂对DNA 进行检测，二苯胺检测DNA 的原理是__________。获得PCR 产物后，用琼脂糖凝胶电泳对
PCR 产物进行鉴定，影响DNA 分子迁移速率的主要因素有__________（答出两点即可）。
（3）构建成功的表达载体将运用农杆菌介导技术转入某农作物，可获得耐盐转基因植株。与同种非转基
因植株的染色体DNA 序列相比，转基因植株的染色体DNA 含有__________。
（4）为验证已获得的耐盐转基因植株具有耐盐性，需设计实验。写出实验思路_____。
【答案】21. ①. 选择培养基 ②. 稀释涂布平板法
22. ①. 在酸性条件下DNA 分子发生化学反应，与二苯胺试剂会产生蓝色的化合物 ②. 琼脂糖溶
液的浓度、DNA 分子的大小和构像 23. 耐盐基因
24. 为验证已获得的耐盐转基因植株具有耐盐性，可用一定浓度的盐水浇灌鉴定植株的耐盐性
【解析】
【分析】基因工程的基本操作顺序：①基因表达载体的构建，②基因表达载体的构建，③将含有目的基因
导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定
【小问1 详解】
实验小组为获得耐盐纯培养物A，需要使用选择培养基进行筛选，使用的接种方法是稀释涂布平板法。
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【小问2 详解】
为获得纯培养物A 的耐盐基因X，实验小组应用纯培养物提取了DNA。在一定温度下，用二苯胺试剂对
DNA 进行检测，二苯胺检测DNA 的原理是在酸性条件下DNA 分子发生化学反应，与二苯胺试剂会产生
蓝色的化合物。获得PCR 产物后，用琼脂糖凝胶电泳对PCR 产物进行鉴定，影响DNA 分子迁移速率的主
要因素有琼脂糖溶液的浓度、DNA 分子的大小和构像等。
【小问3 详解】
与同种非转基因植株的染色体DNA 序列相比，转基因植株的染色体DNA 含有转基因植株的染色体DNA
含有耐盐纯培养物中的耐盐基因。
【小问4 详解】
为验证已获得的耐盐转基因植株具有耐盐性，在个体水平上进行检测，可用一定浓度的盐水浇灌鉴定植株
的耐盐性。
（2024 年1 月广西普通高等学校招生考试适应性测试）4. 以木薯淀粉水解糖为原料，利用酿酒酵母生产燃
料乙醇的过程，叙述错误的是（ ）
A. 发酵全过程中酿酒酵母菌数量持续增加
B. 发酵过程中乙醇浓度会影响酿酒酵母的活性
C. 生产过程中酿酒酵母既有有氧呼吸，也有无氧呼吸
D. 需要考虑发酵体系中渗透压对酿酒酵母生长的影响
【答案】A
【解析】
【分析】酵母菌是兼性厌氧型真菌，既能进行有氧呼吸，又能进行无氧呼吸。
【详解】A、发酵全过程中酿酒酵母菌数量先增加后减少，A 错误；
B、发酵过程中乙醇浓度过高会抑制酿酒酵母的活性，B 正确；
C、生产过程中酿酒酵母早期进行有氧呼吸大量繁殖，后期进行无氧呼吸产生酒精，C 正确；
D、渗透压也会影响酵母细胞的活性，故需要考虑发酵体系中渗透压对酿酒酵母生长的影响，D 正确。
故选A。
（2024 年1 月广西普通高等学校招生考试适应性测试）5. 巴马香猪不仅内质醇美，口感极佳，还可作为医
用模型，是广西地方特色品种。科技工作者从屠宰场收集到的卵巢中采集卵子，通过体外受精技术加快巴
马香猪的繁殖。体外受精技术不涉及的操作是（ ）
A. 精子获能处理
B. 卵子成熟培养
C. 胚胎分割
D. 胚胎培养
【答案】C
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【解析】
【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、
胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足
人类的各种需求。体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
【详解】体外受精主要包括：卵母细胞的采集并培养到减数分裂Ⅱ中期、精子的采集和获能、受精，在体
外完成早期胚胎培养，再移植到代孕个体子宫内，C 错误，ABD 正确。
故选C。
（2024 年1 月广西普通高等学校招生考试适应性测试）9. 我国劳动人民很早就利用生物资源为生产和生活
服务，如①公元前《书经》记载“若作酒醴，尔为曲蘖”；②晋朝《南方草木状》记载，利用蚂蚁扑灭柑
橘害虫；③北魏《齐民要术》记载“凡谷田，绿豆、小豆底为上”：④宋真宗时期，种人痘以防天花。上
述应用与微生物有关的是（ ）
A. ①②③
B. ②③④
C. ①②④
D. ①③④
【答案】D
【解析】
【分析】1、酿酒时必须要用酒曲，加入酒曲的目的是：接种酵母菌，酵母菌首先将糯米中的淀粉分解成
葡萄糖，然后让酵母菌在无氧的条件下，将葡萄糖分解生成酒精和二氧化碳。
2、酵母菌的生活需要适宜的温度，防止温度太高将酵母菌杀死，过低又会降低酵母菌的活性，因此一般
需将煮熟的糯米冷却到常温后再接种酵母菌。
【详解】①“若作酒醴，尔惟曲蘖”提到酿酒必须要用酒曲。酒曲是以谷物为原料，破碎加水压制而成的。
酒曲富含酵母菌和霉菌等多种微生物，经水浸泡活化后投入蒸熟的米即可用于酿酒，①正确；
②蚂蚁扑灭柑橘害虫，利用了捕食关系，无微生物，②错误；
③由于豆科植物有固氮菌与之共生，所以种植豆科植物能够肥田，③正确；
④种人痘以防天花，天花是天花病毒，④正确；
①③④正确，D 正确；
故选D
（2024 年1 月广西普通高等学校招生考试适应性测试）10. 渥堆是六堡茶生产的关键工艺，渥堆期间微生
物分泌的多酚氧化酶可催化茶叶中的儿茶素（C15H14O6）形成黄红色的氧化聚合物。要从渥堆茶叶样品中
筛选产多酚氧化酶的细菌，下表中培养基配方设计最合理的是（注：“-”表示不添加：“+”表示添加。）
（ ）
组分（g/L）
儿茶素
牛肉膏
葡萄糖
蛋白胨
KNO3
NaCl
琼脂
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名称
2
5
20
1
10
5
18
A
甲
-
-
+
+
+
+
+
B
乙
+
+
-
-
+
+
+
C
丙
+
-
+
-
-
+
+
D
丁
+
+
+
+
+
-
-
A. A
B. B
C. C
D. D
【答案】B
【解析】
【分析】1、酵母菌属于兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌通过细胞呼吸产生CO2 和H2O；在无氧
条件下，酵母菌通过细胞呼吸产生C2H5OH 和CO2。
2、真核生物的DNA 主要位于细胞核中，线粒体和叶绿体也含有少量的DNA。
3、纤维素是植物细胞壁的主要成分。
4、多酚氧化酶可催化茶叶中的儿茶素（C15H14O6）形成黄红色的氧化聚合物。
详解】A、甲培养基没有儿茶素，无法筛选，A 错误；
B、乙培养基为固体培养基，且含有碳源、氮源、无机盐、水、儿茶素，B 正确；
C、丙培养基没有氮源，产多酚氧化酶的细菌无法生存，C 错误；
D、丁未加入琼脂，液体培养基无法筛选，D 错误。
故选B。
（2024 年1 月广西普通高等学校招生考试适应性测试）11. 某研究围以利用基因工程技术制备乳腺生物反
应器，周以生产X 药用蛋白，基本过程如图所示，下列相关描述错误的是（ ）
A. ①为载体构建
B. ②为显微注射
C. ③为受精作用
D. ④为胚胎移植
【答案】C
【解析】
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【分析】动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳
腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基
因动物的总称。
【详解】A、①过程为基因表达载体构建，表达载体组成：启动子+目的基因+终止子+标记基因，A 正确；
B、②表示目的基因导入受体细胞（受精卵），动物细胞（受体）采用显微注射技术导入，B 正确；
C、③为受精卵培养成早期胚胎的过程，不是进行受精作用的过程，C 错误；
D、④为早期胚胎移植到代孕母体的子宫中，D 正确。
故选C。
（2024 年1 月广西普通高等学校招生考试适应性测试）12. 我国学者以新型冠状病毒
刺突蛋白（S 蛋
白）为抗原制备单克隆抗体，用以阻断该病毒对人体的感染，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 产生抗体的杂交瘤细胞保留着T 淋巴细胞的部分特性
B. 制备杂交瘤细胞时产生特定抗体的淋巴细胞不需要传代培养
C. 杂交瘤细胞的制备利用了细胞膜的选择透过性特性
D. 筛选前杂交瘤细胞产生单一的新型冠状病毒抗体
【答案】B
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备过程的二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细
胞)；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
【详解】A、杂交瘤细胞由B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，因此保留着B 淋巴细胞的部分特性，A 错误；
B、产生特定抗体的B 淋巴细胞即浆细胞不能分裂，因此不需要传代培养，B 正确；
C、杂交瘤细胞的制备需要进行细胞融合，利用了细胞膜的流动性特性，C 错误；
D、筛选前的杂交瘤细胞不都能产生单一的新型冠状病毒抗体，D 错误。
故选D。
（2024 年1 月广西普通高等学校招生考试适应性测试）21. PCR 可用于扩增并检测DNA，但存在交叉污染
或偏差等问题，而新研发的基于CRISPR/Cas12a 系统的检测方法，可在低浓度样本中更灵敏，快速识别靶
标DNA。该系统利用gRNA 介导Cas12a 蛋白能准确切割靶标DNA。同时切割荧光底物使其发出荧光，通
过检测荧光强度确定靶标DNA 含量，利用Cas12a 检测靶标DNA 的过程如下图所示。回答：
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（1）根据图中信息可推测Cas12a 作用于靶标DNA 时，具有类似_______酶和______________酶的功能；
gRNA 识别靶标DNA，遵循的是_______原则。
（2）在构建表达Cas12a 蛋白的载体时，通常是将Cas12a 基因插入到lacZ 基因内，使lacZ 基因失活，从
而失去催化无色底物显色的能力，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。理论上通过含氨苄青霉素且不含无色底物
的对应培养基培养，不能筛选到含有Cas12a 基因表达载体的工程菌，判断的依据是______________。
（3）荧光检测时，60 分钟后三组荧光信号强度达到一致，原因是______________。
（4）实验研究时，增加NTC 组作对照的作用是_______；g-3+g-7 组可更快检测出靶标DNA，原因是
_______。
【答案】（1） ①. 限制 ②. 解旋 ③. 碱基互补配对
（2）使用的培养基中不含无色底物，所以在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养上长出的菌
落，无论Cas12a 基因是否成功导入都不会出现显色反应
（3）Cas12a 蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物质含量相同
（4） ①. 排除其他物质介导Cas12a 蛋白切割荧光底物使其发出荧光 ②. g-3+g-7 组在介导Cas12a
蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面具有协同作用
【解析】
【分析】1、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基
因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定；
2、基因工程的三种工具：限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA 连接酶、运载体；
3、标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
【小问1 详解】
根据图中信息可推测Cas12a 作用于靶标DNA 时，可以切割靶标DNA，并能解开靶标DNA，使其与g-3 和
g-7 结合，所以Cas12a 具有类似限制酶和解旋酶的功能；gRNA 识别靶标DNA，遵循的是碱基互补配对原
则。
【小问2 详解】
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在构建表达Cas12a 蛋白的载体时，通常是将Cas12a 基因插入到lacZ 基因内，使lacZ 基因失活，从而失去
催化无色底物显色的能力，而使用的培养基中不含无色底物，所以在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应
培养基培养上长出的菌落，无论Cas12a 基因是否成功导入都不会出现显色反应。
【小问3 详解】
荧光检测时，60 分钟后三组荧光信号强度达到一致，原因是Cas12a 蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物
质含量相同。
【小问4 详解】
实验研究时，增加NTC 组作对照的作用是排除其他物质介导Cas12a 蛋白切割荧光底物使其发出荧光；
g-3+g-7 组可更快检测出靶标DNA，原因是g-3+g-7 组在介导Cas12a 蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面
具有协同作用。
（2024 年1 月甘肃省普通高等学校招生考试适应性测试）15. 胰岛素可用于治疗糖尿病，我国科学家打破
国外技术垄断，研发了拥有自主知识产权的重组人胰岛素药物，下列叙述错误的是（ ）
A. 用PCR 技术扩增人胰岛素基因时，每次循环包括变性、复性、延伸三步
B. 构建人胰岛素基因表达载体时，需使用限制性内切核酸酶和DNA 连接酶
C. 大肠杆菌细胞经Ca2+处理后，更容易吸收重组的人胰岛素基因表达载体
D. 抗原-抗体杂交法不能检测人胰岛素基因表达载体是否导入大肠杆菌细胞
【答案】D
【解析】
【分析】1、基因工程的三个工具是：限制性内切核酸酶（限制酶）、DNA 连接酶、基因进入受体细胞的
载体。基因工程的四个步骤是：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、
目的基因的检测与鉴定。
2、PCR 是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA 半保留复制的原理，在体外提供参与DNA 复制的
各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
【详解】A、用PCR 技术扩增人胰岛素基因时，扩增的过程是：目的基因DNA 受热变性后解为单链，引
物与单链相应互补序列结合；然后以单链DNA 为模板，在DNA 聚合酶作用下进行延伸，即将4 种脱氧核
苷酸加到引物的3'端，如此重复循环多次。每次循环一般可以分为变性、复性和延伸三步，A 正确；
B、在构建人胰岛素基因表达载体时，首先用一定的限制性内切核酸酶切割含有目的基因的DNA 片段和载
体，再利用DNA 连接酶将目的基因片段拼接到载体的切口处， 这样就形成了一个重组DNA 分子，B 正
确；
C、大肠杆菌细胞经Ca2+处理后，细胞处于一种能吸收周围环境中DNA 分子的生理状态，更容易吸收重
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组的人胰岛素基因表达载体，C 正确；
D、抗原-抗体杂交法可以检测人胰岛素基因是否在大肠杆菌中翻译成胰岛素，若抗原-抗体杂交结果为阳性，
说明人胰岛素基因在大肠杆菌中表达，则可以说明人胰岛素基因表达载体导入了大肠杆菌细胞中，D 错误。
故选D。
（2024 年1 月甘肃省普通高等学校招生考试适应性测试）16. 胚胎工程技术的迅速发展实现了优良家畜品
种的大量繁殖，能显著提高畜产品质量改善人民生活，还可以解决濒危动物繁育的问题。下列有关哺乳动
物胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A. 刚采集到的卵母细胞即可与获能处理后的精子在体外受精
B. 在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，标志着卵子受精
C. 卵裂在透明带内进行，此时胚胎细胞数量和总体积不断增加
D. 为了获得大量同卵多胚，可对囊胚或桑葚胚进行无限次分割
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎工程技术是指对生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞进行多种显微操作和处理，然后将获得的
胚胎移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等。
【详解】A、刚采集到的卵母细胞需培养到减数分裂Ⅱ中期才能与获能处理后的精子在体外受精，A 错误；
B、判断卵子是否受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以看到两个极体，B 正确；
C、受精卵在卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加，甚至略微缩小，C 错误；
D、采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，D
错误。
故选B。
（2024 年1 月甘肃省普通高等学校招生考试适应性测试）21. 我国十分重视对环境污染的治理，随着生物
技术的发展，利用微生物降解污染物成为环境治理的重要方法之一。工业污水中含有的多环芳烃类化合物
会造成农田土壤污染。请围绕污染土壤修复的微生物筛选，回答下列问题。
（1）为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中_____________是唯一碳源；培养基配制好
后须立即灭菌，目的是_____________；在目标菌株分离纯化过程中必须使用固体培养基，原因是
_____________。
（2）在分离纯化过程中，土壤样品经梯度稀释后再涂布平板，原因是_____________。如果分离纯化菌株
不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用_____________法进一步分离纯化。
（3）为进一步提高菌株降解多环芳烃的效率，可采用物理化学（如紫外线、亚硝酸钠等）等诱变方法进
行微生物育种，其原理是_____________；也可采用_____________等技术定向改造菌株。
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【答案】21. ①. 多环芳烃化合物 ②. 防止杂菌污染 ③. 只有在固体培养基上才能形成单菌落，
而液体培养基不能
22. ①. 防止浓度过高，不便于分离菌落 ②. 平板划线
23. ①. 基因突变 ②. 基因工程
【解析】
【分析】选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在
这种培养基上是不能生存的。筛选分离能够利用原油中的多环芳烃为碳源的细菌需要以原油（多环芳烃）
为唯一碳源的选择培养基，用稀释涂布平板法或平板划线法接种分离。
【小问1 详解】
为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中多环芳烃化合物是唯一碳源，培养基配制好后须
立即灭菌，目的是防止杂菌污染，在目标菌株分离纯化过程中必须使用固体培养基，原因是只有在固体培
养基上才能形成单菌落，而液体培养基不能。
【小问2 详解】
在分离纯化过程中，土壤样品经梯度稀释后再涂布平板，原因是防止浓度过高，不便于分离菌落。如果分
离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用平板划线法进一步分离纯化。
【小问3 详解】
为进一步提高菌株降解多环芳烃的效率，可采用物理化学（如紫外线、亚硝酸钠等）等诱变方法进行微生
物育种，其原理是基因突变，也可采用 基因工程等技术定向改造菌株。
（2024 年1 月安徽省普通高等学校招生考试适应性测试）14. 依据《中华人民共和国生物安全法》，生物
安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁，生物技术能够稳定健康发展，人民生命健康
和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态，生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。下列叙
述错误的是（ ）
A. 高致病性微生物须在高等级生物安全实验室中开展实验活动
B. 生物技术可广泛应用
人类自身基因组改造和新物种创造中
C. 外来入侵物种可能增加本土食物来源却给自然生态造成破坏
D. 动物饲料中的抗生素会通过食物链使人体微生物耐药性增强
【答案】B
【解析】
【分析】《中华人民共和国生物安全法》是为维护国家安全，防范和应对生物 安全风险，保障人民生命
健康，保护生物资源和生态环境，促进生物技术健康发展，推动构建人类命运共同体，实现人与自然和谐
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共生，制定的法律。
【详解】A、高致病性微生物须在高等级生物安全实验室中开展实验活动，防止造成致病性微生物外泄，
造成污染，危害生物健康，A 正确；
B、生物技术可应用在新物种创造中，但对人类自身基因组改造到目前还存在相应的问题，难以实现，B
错误；
C、外来入侵物种可能增加本土食物来源，但如果缺乏天敌会造成自然生态破坏，C 正确；
D、长期使用抗生素，必然产生残留，而其残留在动物饲料中的抗生素，会随着食物链进入人体引发微生
物的耐药性，D 正确。
故选B。
（2024 年1 月安徽省普通高等学校招生考试适应性测试）15. 单克隆抗体在疾病诊断治疗和病原体鉴定中
发挥重要作用。下列叙述正确的是（ ）
A. 将B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后就获得了产生单克隆抗体的杂交瘤细胞系
B. 单克隆抗体是由杂交瘤细胞系所产生的不同于天然抗体的人工合成生物分子
C. 将细胞毒素与单克隆抗体结合可以实现特异性识别肿瘤抗原并杀伤肿瘤细胞
D. 将一种灭活病原体作为疫苗接种人体后会产生针对抗原的特异性单克隆抗体
【答案】C
【解析】
【分析】1、单克隆抗体是指由单个B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞，进行进行有丝分裂增
殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
2、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。
3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点；②用
于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。
【详解】A、将B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后就获得了产生抗体的杂交瘤细胞系，但不是一种抗体，A
错误；
B、单克隆抗体是由杂交瘤细胞系所产生的与天然抗体相同生物分子，B 错误；
C、将细胞毒素与单克隆抗体结合可以实现特异性识别肿瘤抗原并杀伤肿瘤细胞，C 正确；
D、将一种灭活病原体作为疫苗接种人体后会产生针对抗原的特异性的抗体，但不是单克隆抗体，单克隆
抗体是由杂交瘤细胞产生的，D 错误。
故选C。
（2024 年1 月安徽省普通高等学校招生考试适应性测试）19. 萝卜是百姓喜爱的一种蔬菜，筛选优良性状，
开展种质创新，对落实国家“种业振兴行动”计划，丰富“菜篮子工程”有重大应用价值。
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（1）采用常规杂交育种，可培育出不同根形的品种。萝卜的根形由A、a 和R、r 两对等位基因控制，且
独立遗传。现将两种稳定遗传的圆形萝卜进行杂交，F1全为扁形；F1自交，F2有扁形、圆形和长形三种表
型，比例为9：6：1。由题意可知，F2中，长形萝卜的基因型为_________________,扁形萝卜中杂合子比例
为__________________。
（2）利用返回式航天器搭载萝卜种子可使细胞产生基因突变。假设突变发生在某基因的内部，若编码区
缺失一个核苷酸，则会引起编码的肽链__________________改变；若突变是一个核苷酸的替换，但没有引
起编码的蛋白质功能改变，其原因可能是_________________（答出2 点即可）。
（3）萝卜硫素具有抗炎、抗癌等生理功能，由黑芥子酶（Myr）水解前体物质形成。研究人员提取总
RNA、逆转录形成cDNA,然后设计Myr 基因特异引物，采用PCR 方法扩增目的基因，经凝胶电泳后，发
现有多条扩增带（其中也包含目的基因片段）。在不改变引物、PCR 扩增体系和模板量的情况下、可采用
_________________的方法，特异扩增目的片段。研究人员对扩增出的DNA 片段进行了序列测定，序列信
息见下图，推测其最多可以编码_________个氨基酸的多肽（终止密码子为UAA/UAG/UGA）。在多肽合
成过程中，tRNA“搬运”氨基酸到核糖体上，氨基酸结合部位在tRNA 的__________________端。
（4）研究人员希望采用Ti 质粒上的T-DNA 转移Myr 基因，以便获得萝卜新品种。图中A、B、C、D、E
为5 种限制酶及其酶切位点，选用__________________（填字母）进行酶切，以使插入T-DNA 中的目的基
因正确表达；将转入目的基因的体细胞培养形成_________________，分化成植株，用于生产。
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【答案】19. ①. aarr ②. 8/9
20. ①. 氨基酸种类、数目、排列顺序 ②. 密码子的兼并性或者突变的位置位于非编码区
21. ①. 减少循环次数或者提高退火温度 ②. 89 ③. 3’
22. ①. C 和D ②. 愈伤组织
【解析】
【分析】基因工程的核心工作是基因表达载体的构建，基因表达载体所含的结构有启动子、目的基因、终
止子、复制原点、标记基因，启动子是RNA 聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA，最终表
达出蛋白质，终止子位于基因的下游，也是一段特殊的DNA 片段，功能：终止mRNA 的转录。
【小问1 详解】
萝卜的根形由A、a 和R、r 两对等位基因控制，且独立遗传。现将两种稳定遗传的圆形萝卜进行杂交，F1
全为扁形，则扁形基因型为AaRr，F1 自交，F2 有扁形、圆形和长形三种表型，比例为9：6：1。由题意
可知，F2 中，长形萝卜的基因型为aarr，扁形萝卜（基因型为A-R-）中纯合子基因型为AARR，占1/9，
则扁形萝卜中杂合子比例为8/9。
【小问2 详解】
若编码区缺失一个核苷酸，则会引起编码的肽链氨基酸种类、数目、排列顺序发生改变；突变是一个核苷
酸的替换，但没有引起编码的蛋白质功能改变，其原因可能是密码子的兼并性或者突变的位置位于非编码
区。
【小问3 详解】
提取总RNA、逆转录形成cDNA,然后设计Myr 基因特异引物，采用PCR 方法扩增目的基因，经凝胶电泳
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后，发现有多条扩增带（其中也包含目的基因片段）。在不改变引物、PCR 扩增体系和模板量的情况下、
可改变扩增条件，比如采用减少循环次数或者提高退火温度的方法，提高扩增目的片段的特异性。序列信
息见下图，起始密码子有AUG、GUG 或UUG，其对应的DNA 序列分别为ATG、GTG 和TTG。终止密码
子是UAA、UAG、UGA，对应的DNA 上的序列为TAA、TAG、TGA。终止密码子出不编码氨基酸，根
据其模板连序列可知，最多有（9+246+12=267）个碱基，最多编码267÷3=89 个氨基酸。在多肽合成过程
中，tRNA“搬运”氨基酸到核糖体上，氨基酸结合部位在tRNA 的3’端。
【小问4 详解】
分析图示题意可知，采用Ti 质粒上的T-DNA 转移目的基因，应选用C 和D 限制酶进行酶切，将含有目的
基因的重组质粒转入土壤农杆菌中，利用农杆菌将目的基因导入萝卜体细胞，培养形成愈伤组织，分化成
植株。
（2024 年1 月安徽省普通高等学校招生考试适应性测试）20. 2023 年诺贝尔生理学或医学奖获得者主要贡
献为mRNA 疫苗技术及其在抗击COVID-19 疫情中发挥的有效作用。疫苗是通过抗原诱导免疫系统获得保
护性的生物制品，疫苗研发技术路线还有灭活疫苗、弱毒疫苗、重组蛋白疫苗等。回答下列问题。
（1）病毒是一种严格寄宿在细胞中生存的生命形式，实验室增殖病毒首先要培养细胞。在体外培养动物
细胞时，使用合成培养基通常需要加入_________________,培养所需气体主要有_________________为防止
细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，需要定期更换_________________。通过噬斑计算法可测定病毒滴
度，假设在铺满贴壁细胞的细胞培养孔板中，接种1：10 稀释度的病毒液10L,固定染色后计算噬斑数（噬
斑形成单位，PFU）为60，则该孔病毒的滴度测量值为_________________PFU/mL
（2）我国通过实施计划免疫成功消灭脊髓灰质炎，“人民科学家”顾方舟率领团队研制的脊髓灰质炎活
病毒疫苗“糖丸”，从技术路线上属于_________________。
（3）在病毒感染细胞时两者表面相互接触，为了更好地被免疫细胞所识别，在设计mRNA 疫苗时，病毒
抗原优先选取_________________。
【答案】20. ①. 血清 ②. 含95%空气加5%CO₂ 的混合气体 ③. 培养液 ④. 0.6 21. 弱
毒疫苗
22. 包膜蛋白或者衣壳蛋白
【解析】
【分析】动物细胞培养条件（1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，添加一定
量的抗生素，以防培养过程中的污染，定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细
胞自身造成危害。（2）营养：除正常的有机和无机营养外，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。
（3）适宜的温度和pH：温度为36.5±0.5℃(哺乳动物)，多数细胞生存的适宜pH 为7.2～7.4。（4）气体环
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境：含95%空气加5%CO₂ 的混合气体，其中CO₂ 的主要作用是维持培养液的pH。
【小问1 详解】
在体外培养动物细胞时，使用合成培养基通常需要加入血清，培养所需气体主要有含95%空气加5%CO₂
的混合气体，为防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，需要定期更换培养液；接种1：10 稀释度的病
毒液10L,固定染色后计算噬斑数（噬斑形成单位，PFU）为60，则该孔病毒的滴度测量值为60×10（稀释
倍数）×10（孔径体积）÷10000=0.6PFU/mL
【小问2 详解】
“人民科学家”顾方舟率领团队研制的脊髓灰质炎活病毒疫苗“糖丸”，从技术路线上属于弱毒活疫苗。
【小问3 详解】
在病毒感染细胞时两者表面相互接触，为了更好地被免疫细胞所识别，在设计mRNA 疫苗时，病毒抗原优
先选取病毒的包膜蛋白、衣壳蛋白等。
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